CN110973593A - 一种改性低酯果胶乳液及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种改性低酯果胶乳液及制备方法,属于食品加工领域。具体操作步骤如下:(1)通过超声辅助胰蛋白酶酶解并联合膜分离技术制备低聚肽;(2)通过功率超声波对低酯果胶进行预处理;(3)通过干热法利用低聚肽对低酯果胶进行修饰改性;(4)通过高速剪切乳化作用制备改性低酯果胶乳液。本发明制备的乳液含有多肽和低酯果胶的有益功能,为功能性乳液;亦可作为油溶性物质的运输载体,提高油溶性物质的稳定性和生物利用度。本发明提供的乳液制备方法不涉及化学乳化剂,工艺操作可控,便于大规模工业化生产,经济效益明显。
Description
技术领域
本发明属于食品加工技术领域,涉及一种功能乳液及制备方法。
背景技术
乳(状)液是由水、油、表面活性剂和助剂(乳化剂)在适当比例下自发形成的外观透明或半透明的热力学相对稳定的体系,液滴的粒径分布在几纳米到几十微米,它具有高稳定性、高分散性、低粘度、透明性好等特性,因而在食品、药品、洗涤剂、化妆品等领域中广泛用于物质结构的改善,功能因子、药物等的传递,等等。乳(状)液根据水相与油相相对位置的不同,乳(状)液一般包含两种简单的类型或形貌,即油包水(W/O)型和水包油(O/W)型,前者水相分散于油相中,后者反之。牛奶、冰激凌等属于O/W型乳液,奶油、人造黄油等属于W/O型乳液。制作乳液的乳化剂通常分为2类:一类是小分子表面活化剂,主要包括聚山梨醇酯、甘油酯、蔗糖酯等;另外一类是具有表面活性的大分子物质,如各种蛋白质、多糖等,此外,多糖也经常与蛋白配合使用以提高乳液的稳定性。这些乳化剂的乳化能力及其制备的乳液性质因乳化剂种类不同而差异巨大。表面活性剂及其代谢产物对人体可能造成包括急性毒性、亚急性毒性、慢性毒性、对生育繁殖的影响等毒副作用,因而在食品与药品领域严格受限。蛋白类乳化剂因其高度安全性,以及用它们制备的乳液粒径较小稳定性较好,因而备受青睐。但是,由于蛋白分子对酸碱变化、盐的加减、冷热处理等外界环境非常敏感,蛋白类乳化剂制作的乳液容易发生凝聚、沉淀现象。果胶是酸性阴离子多糖,具有一定的疏水性和乳化性;但是,果胶水溶性较好,用其制作的乳液不稳定,难以直接应用于乳液体系中,限制了它在生物活性物质的输送、药物控制和日用化工等领域的广泛应用。因此,对果胶进行改性或修饰,以拓展其应用范围的研究从没有停止过。
果胶的修饰方法多种多样,主要包括:酰胺化、烷基化、季胺化反应、硫醇化、硫酸化和氧化等取代作用,交联和接枝等延长链反应,以及化学、物理以及酶法降解等解聚反应。修饰果胶的功能性质可以得到改进,如溶解性、疏水性、乳化性能等以及生化特性,甚至可以形成一些新的功能性质,从而大大扩大了果胶及其衍生物的应用领域。
超声波是指频率为20 kHz~500 MHz的声波,超声波的引入可引起介质发生交替压缩和伸张的机械震动,当液体分子间的距离超过保持液体作用的临界分子间距时会形成空穴气泡,在超声波的连续作用下,部分空穴气泡会瞬间绝热收缩至爆破,产生局部高温、高压(5 000~500 000 kPa)、强烈的剪切力等超声波特有的声化学效应,同时引起质点线性和非线性的交变震动,并伴随机械剪切力以及自由基的产生。空穴气泡的大小与超声频率的高低呈负相关,因此低频超声波(20 kHz~100kHz,也叫功率超声波)能产生较大的空穴气泡,气泡崩塌时比高频超声波(100 kHz~1 MHz)更为剧烈,具有更高的超声能量,有利于促进声化学效应的产生。超声波产生的活性自由基多聚物产生降解改性作用,而物质的超声波降解不同于化学降解或热分解作用,超声波处理对物质的裂解条件相对温和,裂解作用通常发生在分子的中心,且当相对分子质量低于一定值时,物质无法通过超声波降解,超声波降解的这一特性可以用来获得相对分子质量处于一定范围的物质,比如多肽、寡糖等。另外,超声波所产生的大量活性自由基可以与易氧化的食品成分反应,在一定程度上可增强某些食品成分的功能特性。例如一些酚类化合物,可以通过超声波的化学效应被羟基化而发生功能特性的改变。矢车菊素-3-葡萄糖苷在经过超声波处理之后,其抗氧化活性有所下降。而红树莓酱经过超声波处理后,树莓酱的总酚含量、总抗氧化活性和总单体花色苷含量均发生了变化。但是超声波产生的活性自由基究竟能增强哪一类组分的抗氧化性或者其他功能特性,仍需要针对性探索。
发明内容
为了解决低酯果胶亲水亲油平衡值低,难以直接用于制作稳定的乳液,限制了其应用的现状,本发明通过超声波处理联合分子修饰方法提供一种改性果胶乳液及制备方法。
一种改性低酯果胶乳液为水包油(O/W)型乳液,液滴平均粒径为10.21±3.03 μm、乳化活性指数为45.8~55.6 m2/g、25±1 ℃静置24 h无浮油分层现象发生、25±1 ℃放置7d的乳层析指数<10%;
制备改性低酯果胶乳液的操作步骤如下:
(1)制备低聚肽
按每升pH值7.0~7.5的蛋白粉溶液加入150~200 U的胰蛋白酶进行超声波辅助酶解处理,膜二级分离,制得低聚肽;所述低聚肽由8~10个氨基酸组成,其中赖氨酸不少于2个;
(2)预处理低酯果胶
将含有0.4~1.0 g低聚肽的100 ml浓度2%的低酯果胶混合水溶液,超声处理,真空干燥,粉碎、研磨,得到过100目的低酯果胶预处理粉;
(3)制备改性低酯果胶
修饰低酯果胶预处理粉,研磨,得到过80目的改性低酯果胶;
(4)制备改性低酯果胶乳液
将2.0~2.5 g改性低酯果胶分散于100 mlpH值 3.0~4.0的缓冲液中,超声处理,缓慢加入食用油,剪切处理,得到改性低酯果胶乳液。
一种改性低酯果胶乳液的具体制备操作步骤如下:
(1)制备低聚肽
用浓度0.1 mol/L的氢氧化钠(NaOH)或浓度0.1 mol/L的盐酸(HCl)溶液调节浓度5~6g/L的蛋白粉溶液的pH值至7.0~7.5,预热至40~45 ℃,按每升蛋白粉溶液加入150~200U的胰蛋白酶,在温度45±1 ℃、转速150~180 r/min、超声功率 200~250 W条件下酶解2.0~2.5 h,得酶解液;将酶解液通过截留分子量为10000 kDa的一级超滤膜系统,一级截留液返回酶解罐,一级透过液再通过截留分子量为2000 kDa的二级超滤膜系统,二级截留液返回酶解罐,二级透过液再通过纳滤膜系统,收集经纳滤膜系统处理的截留液,于65~70℃真空干燥机中干燥至水分含量低于8%,即得到低聚肽;
(2)低酯果胶的预处理
将0.4~1.0 g低聚肽缓慢加入100 ml浓度2%的低酯果胶水溶液中,边加边搅拌;在温度20~25 ℃、超声功率800~1000 W条件下超声处理5~10 min,得到低酯果胶-低聚肽混合液;在65~70 ℃真空干燥机中干燥至水分含量低于10%,得到低酯果胶-低聚肽混合干粉;用粉碎机研磨成粉,过100目筛,得到低酯果胶预处理粉;
(3)制备改性低酯果胶
将低酯果胶预处理粉置于温度60~65 ℃、相对湿度75±2 %的环境中,低聚肽对低酯果胶修饰24~30 h,研磨成粉,收集过80目筛子的修饰产物,得到改性低酯果胶;
(4)制备改性低酯果胶乳液
将2.0~2.5 g改性低酯果胶缓慢加入100 ml pH值 3.0~4.0的缓冲液中,在温度20~25 ℃、超声功率200~250 W的条件下超声处理20~30 min,得到改性低酯果胶分散体系;再向改性低酯果胶分散体系中缓慢加入食用油,改性低酯果胶分散体系与食用油的体积比为7:3~9:1,在转速15000~18000 r/min条件下剪切处理3~4 min,得到改性低酯果胶乳液。
进一步限定制备方法的技术方案如下:
步骤(1)中,所述蛋白粉溶液中的蛋白粉为大豆蛋白粉或鹰嘴豆蛋白粉或豌豆蛋白粉。
步骤(2)中,所述低酯果胶水溶液中的低酯果胶为柑橘果胶,酯化度26~30 %、半乳糖醛酸含量75~78%、分子量95-105 kDa。
步骤(4)中,所述缓冲液为磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液或者磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液。
步骤(4)中,所述食用油为大豆油、玉米油、山茶油、菜籽油或花生油中的一种。
与现有技术相比,本发明的有益技术效果体现在以下方面:
(1)本发明在对乳化剂种类及超声波处理条件预实验筛选基础上,选择将蛋白质通过功率超声波的定向降解作用和胰蛋白酶的专一水解作用,同时结合超滤和纳滤系统,能够可控地获取由8~10个氨基酸组成、末端含赖氨酸的低聚肽。同时,与氨基酸相比,低聚肽的分子量更大,与果胶相互作用的官能团更多,水溶性更差,乳化性更强;与蛋白质相比,低聚肽分子量更小,与果胶相互作用的官能团更少,水溶性更好,乳化性更多,不易受酸碱变化、盐的加减等外界环境的影响;可见,本发明能高效地获取目的低聚肽,同时通过目的低聚肽有效地提高低酯果胶的亲水亲油平衡值和乳化性能,从而制做稳定的低酯果胶乳液。
(2)本发明在高压剪切作用下通过改性功率超声波预处理的低酯果胶的自聚集和自乳化作用制作乳液的方法,不涉及化学乳化剂,工艺操作可控,便于大规模工业化生产,安全且经济效益明显。
(3)本发明方法制作的乳液含有多肽和低酯果胶的有益功能,为功能性O/W型乳液,亦可作为油溶性物质的运输载体。
附图说明
图1 为柑橘低酯果胶乳液和本发明制备的乳液的外观图。
图2 为柑橘低酯果胶乳液和本发明制备的乳液的光学显微镜图。
具体实施方式
下面结合实施例,对本发明作进一步地描述。
本发明实施例所用物质来源说明如下:
胰蛋白酶购于索莱宝生物科技有限公司;
柑橘果胶由安徽宇宁果胶股份有限公司惠赠,柑橘果胶,酯化度26~30 %、半乳糖醛酸含量75~78%、分子量95-105 kDa;柑橘果胶外观图与微观图分别见图1中A和图2中A,
大豆分离蛋白粉和豌豆蛋白粉购于河南瑞伦特生物科技有限公司,鹰嘴豆蛋白粉参考Zhang等报道的方法自制(Zhang T, Jiang B, Miao M, et al. Combined effects ofhigh pressure and enzymatic treatments on the hydrolysis of chickpea proteinisolates and antioxidant activity of the hydrolysates[J]. Food Chemistry,2012, 135(3): 904 - 912);
乳化活性指数和乳层析指数参考李秋慧等(李秋慧,王中江,李佳妮,等. 大豆蛋白-溶血磷脂O/W型复合乳液的乳化特性. 食品科学,2017, 38(3):20-25)提出的方法测定;
膜分离系统由安徽沃腾膜分离设备有限公司提供。
实施例1
一种改性低酯果胶乳液的制备操作步骤如下:
步骤1:制备低聚肽
准备5 g/L的大豆分离蛋白粉溶液置于酶解罐中,用0.1 mol/L NaOH溶液调pH值至7.0,预热至40 ℃,按每升大豆分离蛋白粉溶液加入150 U的胰蛋白酶,在温度45±1 ℃、转速150 r/min、超声功率 200 W条件下酶解2.5 h,得酶解液;将酶解液通过截留分子量为10000 kDa的一级超滤膜系统,一级截留液返回酶解罐,一级透过液再通过截留分子量为2000 kDa的二级超滤膜系统,二级截留液返回酶解罐,二级透过液再通过纳滤膜系统,收集经纳滤膜系统处理的截留液置于65 ℃真空干燥机中干燥至水分含量低于7.6%,得到低聚肽;所述低聚肽由8~10个氨基酸组成,其中含3个赖氨酸;
步骤2:预处理低酯果胶
将低酯果胶缓慢加入20 ℃的蒸馏水中,边加边搅拌使其充分溶解,配制质量体积分数为2%的低酯果胶水溶液;再按0.4 g低聚肽溶于100 ml低酯果胶水溶液的比例缓慢加入低聚肽,边加边搅拌,接着在温度20 ℃、超声功率800 W条件下超声处理10 min,得到低酯果胶-低聚肽混合液;将低酯果胶-低聚肽混合液置于65 ℃真空干燥机中干燥至水分含量9.6%,得到低酯果胶-低聚肽混合干粉;将低酯果胶-低聚肽混合干粉用粉碎机研磨成粉,收集过100目筛子的粉末,得到低酯果胶预处理粉;
步骤3:制备改性低酯果胶
将低酯果胶预处理粉置于温度60 ℃、相对湿度75±2 %的环境中修饰30 h,然后用研钵研磨成粉,收集过80目筛子的修饰产物,得到改性低酯果胶;
步骤4:制备改性低酯果胶乳液
按照2.0 g改性低酯果胶分散于100 ml缓冲液的比例,将改性低酯果胶缓慢加入pH3.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液中,在温度20 ℃,超声功率200 W的条件下超声处理30min,得到改性低酯果胶分散体系;再向改性低酯果胶分散体系中缓慢加入山茶油,改性低酯果胶分散体系与山茶油的体积比为7:3,接着在转速15000 r/min条件下剪切处理4 min,得到改性低酯果胶乳液。
所述乳液外观图与微观图分别见图1中B和图2中B,平均粒径为12.71 μm,乳化活性指数45.9 m2/g,4℃储藏1个月平均粒径变为15.42 μm,乳层析指数为8.7 %;与未改性的低酯果胶乳液相比,平均粒径缩小25,6%,具有更好的乳化性和稳定性。
实施例2
一种改性低酯果胶乳液的制备操作步骤如下:
步骤1:制备低聚肽
准备6 g/L的鹰嘴豆蛋白粉溶液置于酶解罐中,用0.1 mol/L NaOH调pH值至7.5,预热至45 ℃,按每升鹰嘴豆蛋白粉溶液加入200 U的胰蛋白酶,在温度45±1 ℃、转速180 r/min、超声功率 250 W条件下酶解2.0 h,得酶解液;将酶解液通过截留分子量为10000 kDa的一级超滤膜系统,一级截留液返回酶解罐,一级透过液再通过截留分子量为2000 kDa的二级超滤膜系统,二级截留液返回酶解罐,二级透过液再通过纳滤膜系统,收集经纳滤膜系统处理的截留液置于70 ℃真空干燥机中干燥至水分含量低于7.8%,即得到低聚肽;所述低聚肽由9~10个氨基酸组成,其中含2个赖氨酸;
步骤2:预处理低酯果胶
将低酯果胶缓慢加入25 ℃的蒸馏水中,边加边搅拌使其充分溶解,配制质量体积分数为2%的低酯果胶水溶液;再按1.0 g低聚肽溶于100 ml低酯果胶水溶液的比例缓慢加入低聚肽,边加边搅拌,接着在温度25 ℃、超声功率1000 W条件下超声处理5 min,得到低酯果胶-低聚肽混合液;将低酯果胶-低聚肽混合液置于70 ℃真空干燥机中干燥至水分含量低于8.9%,得到低酯果胶-低聚肽混合干粉;将低酯果胶-低聚肽混合干粉用粉碎机研磨成粉,收集过100目筛子的粉末,得到低酯果胶预处理粉;
步骤3:制备改性低酯果胶
将低酯果胶预处理粉置于温度65 ℃、相对湿度75±2 %的环境中修饰24 h,然后用研钵研磨成粉,收集过80目筛子的修饰产物,得到改性低酯果胶;
步骤4:制备改性低酯果胶乳液
按照2.5 g改性低酯果胶分散于100 ml缓冲液的比例,将改性低酯果胶缓慢加入pH4.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液中,在温度25 ℃,超声功率250 W条件下超声处理20min,得到改性低酯果胶分散体系;再向改性低酯果胶分散体系中缓慢加入玉米油,改性低酯果胶分散体系与玉米油的体积比为8:2,接着在转速18000 r/min条件下剪切处理3 min,得到改性低酯果胶乳液。
所述乳液外观图与微观图分别见图1中C和图2中C,平均粒径为10.03 μm,乳化活性指数50.9 m2/g,4℃储藏1个月平均粒径变为13.41 μm,乳层析指数为7.5 %;与未改性的低酯果胶乳液相比,平均粒径缩小27,3%,具有更好的乳化性和稳定性。
实施例3
一种改性低酯果胶乳液的制备操作步骤如下:
步骤1:制备低聚肽
准备5.5 g/L的豌豆蛋白粉溶液置于酶解罐中,用0.1 mol/L NaOH溶液调pH值至7.2,预热至42 ℃,按每升豌豆蛋白粉溶液加入180 U的胰蛋白酶,在温度45±1 ℃、转速160 r/min、超声功率 220 W条件下酶解2.2 h,得酶解液;将酶解液通过截留分子量为10000 kDa的一级超滤膜系统,一级截留液返回酶解罐,一级透过液再通过截留分子量为2000 kDa的二级超滤膜系统,二级截留液返回酶解罐,二级透过液再通过纳滤膜系统,收集经纳滤膜系统处理的截留液置于70 ℃真空干燥机中干燥至水分含量低于7.8%,即得到低聚肽;所述低聚肽由8~9个氨基酸组成,其中含3个赖氨酸;
步骤2:预处理低酯果胶
将低酯果胶缓慢加入23 ℃的蒸馏水中,边加边搅拌使其充分溶解,配制质量体积分数为2%的低酯果胶水溶液;再按0.8 g低聚肽溶于100 ml低酯果胶水溶液的比例缓慢加入低聚肽,边加边搅拌,接着在温度23 ℃、超声功率900W条件下超声处理8 min,得到低酯果胶-低聚肽混合液;将低酯果胶-低聚肽混合液置于70 ℃真空干燥机中干燥至水分含量低于9.1%,得到低酯果胶-低聚肽混合干粉;将低酯果胶-低聚肽混合干粉用粉碎机研磨成粉,收集过100目筛子的粉末,得到低酯果胶预处理粉;
步骤3:制备改性低酯果胶
将低酯果胶预处理粉置于温度62 ℃、相对湿度75±2 %的环境中修饰28 h,然后用研钵研磨成粉,收集过80目筛子的修饰产物,得到改性低酯果胶;
步骤4:制备改性低酯果胶乳液
按照2.2 g改性低酯果胶分散于100 ml缓冲液的比例,将改性低酯果胶缓慢加入pH3.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液中,在温度23 ℃,超声功率230 W条件下超声处理25 min,得到改性低酯果胶分散体系;再向改性低酯果胶分散体系中缓慢加入大豆油,改性低酯果胶分散体系与大豆油的体积比为8:1,接着在转速16000 r/min条件下剪切处理3.5 min,得到改性低酯果胶乳液。
所述乳液外观图与微观图分别见图1中D和图2中D,平均粒径为11.24 μm,乳化活性指数53.4 m2/g,4℃储藏1个月平均粒径变为17.22 μm,乳层析指数为8.9 %;与未改性的低酯果胶乳液相比,平均粒径缩小22,8%,具有更好的乳化性和稳定性。
Claims (6)
1.一种改性低酯果胶乳液,其特征在于:所述改性低酯果胶乳液为水包油型乳液,液滴平均粒径为10.21±3.03 μm、乳化活性指数为45.8~55.6 m2/g、25±1 ℃静置24 h无浮油分层现象发生、25±1 ℃放置7d的乳层析指数<10%;
制备改性低酯果胶乳液的操作步骤如下:
(1)制备低聚肽
按每升pH值7.0~7.5的蛋白粉溶液加入150~200 U的胰蛋白酶进行超声波辅助酶解处理,膜二级分离,制得低聚肽;所述低聚肽由8~10个氨基酸组成,其中赖氨酸不少于2个;
(2)预处理低酯果胶
将含有0.4~1.0 g低聚肽的100 ml浓度2%的低酯果胶混合水溶液,超声处理,真空干燥,粉碎、研磨,得到过100目的低酯果胶预处理粉;
(3)制备改性低酯果胶
修饰低酯果胶预处理粉,研磨,得到过80目的改性低酯果胶;
(4)制备改性低酯果胶乳液
将2.0~2.5 g改性低酯果胶分散于100 ml pH值 3.0~4.0的缓冲液中,超声处理,缓慢加入食用油,剪切处理,得到改性低酯果胶乳液。
2.根据权利要求1所述的一种改性低酯果胶乳液的制备方法,其特征在于具体制备操作步骤如下:
(1)制备低聚肽
用浓度0.1 mol/L的氢氧化钠或浓度0.1 mol/L的盐酸溶液调节浓度5~6 g/L的蛋白粉溶液的pH值至7.0~7.5,预热至40~45 ℃,按每升蛋白粉溶液加入150~200 U的胰蛋白酶,在温度45±1 ℃、转速150~180 r/min、超声功率 200~250 W条件下酶解2.0~2.5 h,得酶解液;将酶解液通过截留分子量为10000 kDa的一级超滤膜系统,一级截留液返回酶解罐,一级透过液再通过截留分子量为2000 kDa的二级超滤膜系统,二级截留液返回酶解罐,二级透过液再通过纳滤膜系统,收集经纳滤膜系统处理的截留液,于65~70 ℃真空干燥机中干燥至水分含量低于8%,即得到低聚肽;
(2)低酯果胶的预处理
将0.4~1.0 g低聚肽缓慢加入100 ml浓度2%的低酯果胶水溶液中,边加边搅拌;在温度20~25 ℃、超声功率800~1000 W条件下超声处理5~10 min,得到低酯果胶-低聚肽混合液;在65~70 ℃真空干燥机中干燥至水分含量低于10%,得到低酯果胶-低聚肽混合干粉;用粉碎机研磨成粉,过100目筛,得到低酯果胶预处理粉;
(3)制备改性低酯果胶
将低酯果胶预处理粉置于温度60~65 ℃、相对湿度75±2 %的环境中,低聚肽对低酯果胶修饰24~30 h,研磨成粉,收集过80目筛子的修饰产物,得到改性低酯果胶;
(4)制备改性低酯果胶乳液
将2.0~2.5 g改性低酯果胶缓慢加入100 ml pH值 3.0~4.0的缓冲液中,在温度20~25 ℃、超声功率200~250 W的条件下超声处理20~30 min,得到改性低酯果胶分散体系;再向改性低酯果胶分散体系中缓慢加入食用油,改性低酯果胶分散体系与食用油的体积比为7:3~9:1,在转速15000~18000 r/min条件下剪切处理3~4 min,得到改性低酯果胶乳液。
3.根据权利要求1或2所述的一种改性低酯果胶乳液的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述蛋白粉溶液中的蛋白粉为大豆蛋白粉或鹰嘴豆蛋白粉或豌豆蛋白粉。
4.根据权利要求1或2所述的一种改性低酯果胶乳液的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述低酯果胶水溶液中的低酯果胶为柑橘果胶,酯化度26~30 %、半乳糖醛酸含量75~78%、分子量95-105 kDa。
5.根据权利要求1或2所述的一种改性低酯果胶乳液的制备方法,其特征在于:步骤(4)中,所述缓冲液为磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液或者磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液。
6.根据权利要求1或2所述的一种改性低酯果胶乳液的制备方法,其特征在于:步骤(4)中,所述食用油为大豆油、玉米油、山茶油、菜籽油或花生油中的一种。
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