CN110964732B - 蜡质调控基因SlMYB31及克隆方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种蜡质调控基因SlMYB31及其克隆方法和应用，该蜡质调控基因SlMYB31的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，该基因能够调控番茄积累蜡质，可以在改变番茄蜡质积累、培育新品种方面进行应用。
Description
技术领域
本发明涉及植物技术领域，尤其涉及一种蜡质调控基因SlMYB31及其克隆方法和应用。
背景技术
植物蜡质分为内蜡质和外蜡质，前者嵌合在角质层中，而后者则覆盖在角质层的表面。植物蜡质的合成过程主要包括如下步骤：
(1)可溶性脂肪酸合成酶复合物(fatty acid synthase complex,FAS)在质体中催化合成蜡质合成的底物C16和C18脂肪酸(Ohlrogge&Browse,1995)。丙二酸单酰辅酶A与酰基载体蛋白(ACP)结合之后，在酰基链被进一步还原的同时脂肪酸链也延伸2个碳原子。随后，合成的C16脂肪酸链或C18脂肪酸链在酰基-S-ACP在酰基-ACP硫酯酶(acyl-ACPthioesterase)的作用下，形成C16饱和脂肪酸或C18饱和脂肪酸(Post-Beittenmiller etal.,1992)。
(2)C16脂肪酸、C18脂肪酸在多酶复合体脂肪酸延伸酶(fatty acid elongase，FAE)的作用下被催化形成C20-C34的超长链脂肪酸。该合成过程在内质网中完成，主要分为四个步骤：延伸，还原，脱水，还原。第一步延伸反应由酮酰辅酶A合成酶(KCS)催化反应完成：将acyl-CoA聚合到malonyl-CoA上生成的β-ketoacyl-CoA(Wang et al.,2017)；第二步，β-ketoacyl-CoA在酮酰辅酶A还原酶(KCR)作用下形成β-hydroxyacyl-CoA(Beaudoinet al.,2002)；第三步，β-hydroxyacyl-CoA经羟酰辅酶脱水酶(HCD)脱水后，转变成enoyl-CoA(Bach et al.,2008)；最后，烯酰辅酶A还原酶(ECR)将enoyl-CoA还原成acyl-CoA(Kohlwein et al.,2001)。这一过程可以重复运行，每一个循环在原有脂肪酸链的基础上延伸2个C原子(Li-Beisson et al.,2010)。该过程的限速酶为酮酰辅酶A合成酶，该酶能够决定脂肪酸链中碳原子的个数。
经由脂肪酸合成酶产生的长链脂肪酸(VLFCAs)作为蜡质合成的通用底物，其继续在内质网中被加工成烷烃、醛、醇、酸等成分。
研究表明，在拟南芥中，酮酰辅酶A合成酶涉及多个基因。其中，KCS2，KCS19和KCS20参与形成C22的脂肪酰辅酶A(James et al.,1995；Lee et al.,2009)，而KCS5和KCS6则主要参与碳原子大于28的VLFCAs的合成。在拟南芥中，有5个KCSs基因报道与角质层的形成有关，分别是CER6(CUT1)，KCS1，KCS2(DAISY)，KCS20和FDH。其中，CER6被证实与表皮蜡质的积累有关(Li-Beisson et al.,2010)。
然而，SlCER6是番茄中蜡质合成研究得较多的基因，是合成超过28个碳原子的脂肪酸的必要因子。但是关于SlCER6调控番茄蜡质积累的机制并不清楚。另外，番茄中是否存在其它调控蜡质积累的基因也未可知。
发明内容
基于此，有必要提供一种蜡质调控基因S1MYB31及其克隆方法和应用。该基因能够调控番茄积累蜡质，可激活SlCER6的表达，可以在改变番茄蜡质积累方面及培育新品种中进行应用。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：
本发明提供一种蜡质调控基因SlMYB31，所述基因SlMYB31的cDNA序列如SEQ IDNO:1所示。
本发明还提供一种蜡质调控基因SlMYB31编码的蛋白，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
本发明还提供一种含上述所述的蜡质调控基因SlMYB31的表达载体。
在其中一个实施例中，所述含蜡质调控基因SlMYB31的表达载体为SlMYB31-OE表达载体。构建该SlMYB31-OE表达载体所采用的引物序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。
在其中一个实施例中，所述含蜡质调控基因SlMYB31的表达载体为SlMYB31-RNAi表达载体。构建该SlMYB31-RNAi表达载体所采用的引物序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。
本发明还提供一种蜡质调控基因SlMYB31的克隆方法，包括如下步骤：
1)提取番茄总RNA，反转录成cDNA；
2)合成特异性引物；
3)所述特异性引物在高保真酶的作用下以cDNA为模板克隆，即得。
在其中一个实施例中，所述特异性引物序列如SEQ ID NO:7和SEQ I D NO:8所示。
本发明还提供一种上述蜡质调控基因SlMYB31、蜡质调控基因SlMYB31编码的蛋白或者含蜡质调控基因SlMYB31的表达载体在改良番茄蜡质积累或者培育番茄新品种中的应用。
本发明的有益效果是：
与现有技术相比，本发明通过大量研究获取到可调控番茄蜡质的基因SlMYB31的cDNA序列。该基因能够调控番茄蜡质积累，可激活SlCER6的表达，可以在番茄蜡质方面及培育新品种进行应用。
附图说明
图1为实施例4的番茄植株叶片表面蜡含量测试统计图。
图2为实施例4中番茄植株果实表面蜡含量测试统计图。
图3为实施例4中番茄植株果实亮度对比图。
图4为实施例4中番茄植株果实失水率测试统计图。
图5为实施例4中番茄植株经体积比为1％的甲苯胺蓝溶液处理坐果20天后的果实对比图。
图6为SlMYB31调控蜡质合成相关基因CER 6表达的测试图。
具体实施方式
以下对本发明进行举例描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。
实施例1
本实施例提供一种蜡质调控基因S1MYB31的克隆方法，包括如下步骤：
1)提取番茄总RNA，反转录成cDNA。
2)合成特异性引物，正向引物：atgggaaggccaccttg(SEQ ID NO:7)，反向引物：tcaaaaaaagtcagcagattcac(SEQ ID NO:8)。
3)特异性引物在高保真酶的作用下以cDNA为模板进行克隆，即得。
本实施例获得的S1MYB31基因的cDNA序列全长如SEQ ID NO:1所示：atgggaaggccaccttgctgcgataaaataggggtgaaaaaaggaccatggacaccagaagaagatatcatcttggtttcatacattcaacaacatggtcctggtaactggagagctgttcccagtaatactggtttgcttagatgcagcaaaagctgtaggctcagatggactaattatctccggcccggaattaaacgtggaaacttcactgaacatgaagaaaaaatgattatccatcttcaagctcttctaggcaacagatgggctgcgattgcttcgtatctcccacaaaggacagataacgatataaaaaattactggaatactcatctgaggaaaaagctgaagaaacttcaagggaatgatgagaatagtactcaagaaggagaaagctcatcatcatcacaatccaatttctcaaagggacagtgggagaggaggcttcaaacagatatccacatggctagaaaagccctttgtgaggctttatcacttgacaaatctgattcatctgctaatccaattccagctcaacaacccgttacaggatccagctcttatgcttccagtgcggaaaacatttctaggttacttcaaaattggatgaaaaattcccccaaatcatctgaattaagtcgatcaaattctgagacaactcaaagctcgttgaataacccatcaattgggtcagggtcgagtcctagtgaaggtaccctaagtgctgcaacacctgagggatttgactcgttttttagtgaaggcaatgctttcacacctgaaaattcagcgatttttcaggttgaaagcaagccaaattttccgaacatgaattcggaaaatggatatttgtttcaagcggagagcaagccaagcttggaagattcacaagtcccgtttactttgctagagaagtggctatttgatgatgctattaatgcaccagcacaagaagatcagtttatggcgatgggtttgggtgaatctgctgactttttttga。
该基因ORF全长为1002bp，编码333个氨基酸(AA)，具体序列如SEQ ID NO:2所示：
MGRPPCCDKIGVKKGPWTPEEDIILVSYIQQHGPGNWRAVPSNTGLLRCSKSCRLRWTNYLRPGIKRGNFTEHEEKMIIHLQALLGNRWAAIASYLPQRTDNDIKNYWNTHLRKKLKKLQGNDENSTQEGESSSSSQSNFSKGQWERRLQTDIHMARKALCEALSLDKSDSSANPIPAQQPVTGSSSYASSAENISRLLQNWMKNSPKSSELSRSNSETTQSSLNNPSIGSGSSPSEGTLSAATPEGFDSFFSEGNAFTPENSAIFQVESKPNFPNMNSENGYLFQAESKPSLEDSQVPFTLLEKWLFDDAINAPAQEDQFMAMGLGESADFF。
实施例2
本实施例提供一种S1MYB31-OE表达载体，其构建过程包括如下步骤：
S1，利用PRIMERPREMIER 5软件设计如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的S1MYB31特异引物序列，其中，正向引物命名为OE-S1MYB31-F，序列为：
5’-catttggagaggacacgctcgagatcgtgtaggtagaatgggaagg-3’(SEQ ID NO:3)；
反向引物命名为OE-S1MYB31-R，序列为：
5’-tctcattaaagcaggactctagagctgtaatttaacaaacattgaaagg-3’(SEQ ID NO:4)。
S2，以番茄常规品种Alisa Craig(AC)的cDNA为模板，用高保真DNA聚合酶(PhantaMax Super-Fidelity DNA Polymerase,Vazyme Biotech Co.,Ltd)扩增S1MYB31全长cDNA，切胶回收扩增产物；同时用XbaI和XhoI双酶切pMV2载体，切胶回收载体骨架；将切胶回收的两组产物进行同源重组连接，热激转化Trans-T1大肠杆菌。
其中，大肠杆菌热激转化的步骤如下：从-80度冰箱中，取出大肠杆菌感受态Trans-T1或BL21，置于冰上冻融；将连接产物加入到刚刚融化的感受态细胞中，冰上孵育30min后，42℃热激1min；热激完的感受态细胞立即置于冰上2min；加入500μL LB液体培养基，37℃摇床中，200rpm，1h；5000rpm离心3min，吸掉400μL LB上清液，将剩余的LB溶液吸打混匀后，涂布到含有相应抗生素的LB平板上。倒置在37℃培养箱中，培养过夜，即得。
S3，挑单克隆测序正确的S1MYB31-OE表达载体。
大肠杆菌单克隆送至华大基因公司，利用35S通用引物进行测通。
实施例3
本实施例提供一种S1MYB31-RNAi表达载体，其构建过程包括如下步骤：
S1，利用NCBI网站CD serch预测S1MYB31基因的保守结构域，在S1MYB31基因的非保守结构域设计如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的S1MYB31-RNAi引物序列，其中，正向引物命名为RNAi-S1MYB31-F，序列为：
5’-ggggacaagtttgtacaaaaaagcaggctatcgtgtaggtagaatgggaa-3’(SEQ ID NO:5)，
反向引物命名为RNAi-S1MYB31-R，序列为
5’-ggggaccactttgtacaagaaagctgggtcagatgaatcagatttgtcaa-3’(SEQ ID NO:6)。
S2，以番茄常规品种Alisa Craig(AC)的cDNA为模板，用高保真DNA聚合酶(PhantaMax Super-Fidelity DNA Polymerase,Vazyme Biotech Co.,Ltd)扩增S1MYB31-RNAi片段，切胶回收扩增产物，与pHGRV进行BP重组(BP酶购自Vazyme Biotech Co.,Ltd)，热激转化Trans-T1大肠杆菌。大肠杆菌热激转化的步骤参见同实施例2。
S3，挑单克隆测序正确的S1MYB31-RNAi表达载体。
大肠杆菌单克隆送至华大基因公司，利用35S通用引物进行测通。
实施例4 S1MYB31基因的遗传转化及基因功能验证
分别以实施例2获得的S1MYB31-OE表达载体和实施例4获得的S1MYB31-RNAi表达载体采用农杆菌介导转化方式转染野生型番茄植株Alisa craig的子叶，分别获得S1MYB31基因超量表达转基因番茄植株和S1MYB31干扰表达转基因番茄植株。
1、蜡质含量测试
以野生型番茄植株(WT)作为对照，并选取其中的2株S1MYB31基因超量表达转基因番茄植株(分别S1MYB31-OE-12和S1MYB31-OE-13)和2株S1MYB31干扰表达转基因番茄植株(分别命名为S1MYB31-RNAi-6和S1MYB31-RNAi-6)进行蜡质含量测试，测试方法包括如下步骤：
(1)制备待测样品
挑选15-20片无伤口的成熟番茄叶片用清水冲洗几次，去掉表面尘土。将叶片摆放在灯箱上(无重叠)，并用相机拍照，用于叶面积的统计。然后，将40ml氯仿加入到玻璃烧杯中，每一片叶片置于氯仿溶液中涮1min，得叶片提取液。整个提取过程中，尽量轻柔，不要损伤叶片，以免内部脂质的溢出。
挑选8-10个表面无破损坐果后20天的果实，测定果实纵横径，将番茄看似球形，取纵横径平均值的1/2作为半径，计算表面积。将每个果实浸泡在氯仿中抽提90s，得果实提取液。注意不要将果疤没入氯仿中，以免果实内部脂质溢出。
分别将叶片提取液和果实提取液置于氮气吹干仪中吹干至剩余10ml，加入100μl1μg/μL的正二十四烷(内标)，再将溶液转移到15ml玻璃试管后继续用氮气吹干，得待测样品。
(2)GC-MS测定
吸取200μl吡啶加入到步骤(1)制备的每个待测样品中，晃动使之初步溶解。然后放置在50℃的烘箱中孵育30min，期间不断晃动，使试管底层蜡状物质充分溶解，直至澄清。再加入200μl l N,O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)溶液，将烘箱温度调整至75℃再孵育60min，使蜡质成分硅烷化。最后，使用氮气吹干仪将溶液吹干，得衍生物。
将衍生物置于500μl氯仿重新溶解，并用0.22um的有机滤头过滤两次，200μl上样测定。GC-MS测定条件如下：气相色谱-质谱联用(Thermo，DSQⅡ)，TR-1ms毛细管柱(100％二甲基聚硅氧烷,30m×25μm i.d.×0.1μm)，EI离子源(70eV)，扫描范围50～650m/z，进样口温度250℃，离子源温度300℃，传输线温度250℃，氦气为载气，流量为1.2mL/min；程序升温：70℃起始，以10℃/min升至200℃，保持2min，2℃/min升至285℃，1℃/min升至290℃,2℃/min升至300℃，保持10min,3℃/min升至320℃，保持20min；分流比10:1；自动进样，进样量1μL。番茄蜡质含量测试的统计结果见图1。
由图1可以看出，与WT相比，S1MYB31基因超量表达转基因番茄植株叶片表面的蜡质含量较高，S1MYB31干扰表达转基因番茄植株叶片表面的蜡质含量较低，说明S1MYB31基因可以调控番茄叶片表面积累蜡质。
由图2可以看出，与WT相比，S1MYB31基因超量表达转基因番茄果实表面的蜡质含量较高，S1MYB31干扰表达转基因番茄植株果实表面的蜡质含量较低，说明S1MYB31基因可以调控番茄果实表面积累蜡质。
另外，由图3可以看出，S1MYB31干扰表达转基因番茄植株的果实更加明亮。
2、果实失水率测试
采集红熟期完整无破损的S1MYB31干扰转基因植株和对照组植株的果实，果疤处涂抹凡士林(阻止该处的水分流失)，精确称量果实重量。
该试验设置3个平行试验组，每组采用8-10个果实。将每组所有果实置于铺满干燥剂的密闭盒子中(此时空气湿度近似于0)，分别在3天、5天、7天测定果实重量。计算不同时间点所减轻的重量，再除以初始重量值，即为waterloss值，统计结果见图4。
由图4可以看出，与WT对照组相比，S1MYB31干扰转基因植株果实的失水率较高。
3、甲苯胺蓝浸润测试及叶绿体渗透测试
将MG期的S1MYB31干扰转基因植株果实和对照组果实完全浸泡到100mg/ml甲苯胺蓝溶液中，24h以后，用清水冲洗干净，即可观察结果，详见图5。
由图5可以看出，与WT相比，S1MYB31干扰转基因植株果实表面的蓝色斑点很多，表明S1MYB31干扰转基因植株果实角质层缺失。
4、S1MYB31调控蜡质合成相关基因SlCER6表达
以野生型番茄植株(WT)作为对照，分别提取SlMYB31超量转基因株系SlMYB31-OE-12、SlMYB31-OE-13IMG期果实外果皮的RNA，并反转录成cDNA。
利用qRT-PCR的方法分析SlCER6基因的表达水平。使用LightCycler480SYBRGreen I试剂盒进行qRT-PCR试验。10μL的反应体系包括SYBR Premix Ex TaqTM5μL，正反向引物各0.5μL，模板4μL。反应程序为：95℃5min，95℃5s，58℃15s，72℃20s，共40个循环。其中，qRT-PCR引物序列如下：正向引物为aatggctgctcttattattcaggta(SEQ ID NO:9)，反向引物为aagaacagaggatttggaggagat(SEQ ID NO:10)。其中每个样品至少重复三次，以番茄β-Actin(Solyc11g005330)作为内参基因。结果见图6。
由图6可以看出，与WT相比，在SlMYB31-OE转基因植株中SlCER6基因的表达量上调了2倍以上，说明SlMYB31可以通过直接调控蜡质合成关键基因SlCER6的表达来影响番茄蜡质积累。
以上实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 华中农业大学
<120> 蜡质调控基因SlMYB31及其克隆方法和应用
<160> 10
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1002
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
atgggaaggc caccttgctg cgataaaata ggggtgaaaa aaggaccatg gacaccagaa 60
gaagatatca tcttggtttc atacattcaa caacatggtc ctggtaactg gagagctgtt 120
cccagtaata ctggtttgct tagatgcagc aaaagctgta ggctcagatg gactaattat 180
ctccggcccg gaattaaacg tggaaacttc actgaacatg aagaaaaaat gattatccat 240
cttcaagctc ttctaggcaa cagatgggct gcgattgctt cgtatctccc acaaaggaca 300
gataacgata taaaaaatta ctggaatact catctgagga aaaagctgaa gaaacttcaa 360
gggaatgatg agaatagtac tcaagaagga gaaagctcat catcatcaca atccaatttc 420
tcaaagggac agtgggagag gaggcttcaa acagatatcc acatggctag aaaagccctt 480
tgtgaggctt tatcacttga caaatctgat tcatctgcta atccaattcc agctcaacaa 540
cccgttacag gatccagctc ttatgcttcc agtgcggaaa acatttctag gttacttcaa 600
aattggatga aaaattcccc caaatcatct gaattaagtc gatcaaattc tgagacaact 660
caaagctcgt tgaataaccc atcaattggg tcagggtcga gtcctagtga aggtacccta 720
agtgctgcaa cacctgaggg atttgactcg ttttttagtg aaggcaatgc tttcacacct 780
gaaaattcag cgatttttca ggttgaaagc aagccaaatt ttccgaacat gaattcggaa 840
aatggatatt tgtttcaagc ggagagcaag ccaagcttgg aagattcaca agtcccgttt 900
actttgctag agaagtggct atttgatgat gctattaatg caccagcaca agaagatcag 960
tttatggcga tgggtttggg tgaatctgct gacttttttt ga 1002
<210> 2
<211> 333
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
Met Gly Arg Pro Pro Cys Cys Asp Lys Ile Gly Val Lys Lys Gly Pro
1 5 10 15
Trp Thr Pro Glu Glu Asp Ile Ile Leu Val Ser Tyr Ile Gln Gln His
20 25 30
Gly Pro Gly Asn Trp Arg Ala Val Pro Ser Asn Thr Gly Leu Leu Arg
35 40 45
Cys Ser Lys Ser Cys Arg Leu Arg Trp Thr Asn Tyr Leu Arg Pro Gly
50 55 60
Ile Lys Arg Gly Asn Phe Thr Glu His Glu Glu Lys Met Ile Ile His
65 70 75 80
Leu Gln Ala Leu Leu Gly Asn Arg Trp Ala Ala Ile Ala Ser Tyr Leu
85 90 95
Pro Gln Arg Thr Asp Asn Asp Ile Lys Asn Tyr Trp Asn Thr His Leu
100 105 110
Arg Lys Lys Leu Lys Lys Leu Gln Gly Asn Asp Glu Asn Ser Thr Gln
115 120 125
Glu Gly Glu Ser Ser Ser Ser Ser Gln Ser Asn Phe Ser Lys Gly Gln
130 135 140
Trp Glu Arg Arg Leu Gln Thr Asp Ile His Met Ala Arg Lys Ala Leu
145 150 155 160
Cys Glu Ala Leu Ser Leu Asp Lys Ser Asp Ser Ser Ala Asn Pro Ile
165 170 175
Pro Ala Gln Gln Pro Val Thr Gly Ser Ser Ser Tyr Ala Ser Ser Ala
180 185 190
Glu Asn Ile Ser Arg Leu Leu Gln Asn Trp Met Lys Asn Ser Pro Lys
195 200 205
Ser Ser Glu Leu Ser Arg Ser Asn Ser Glu Thr Thr Gln Ser Ser Leu
210 215 220
Asn Asn Pro Ser Ile Gly Ser Gly Ser Ser Pro Ser Glu Gly Thr Leu
225 230 235 240
Ser Ala Ala Thr Pro Glu Gly Phe Asp Ser Phe Phe Ser Glu Gly Asn
245 250 255
Ala Phe Thr Pro Glu Asn Ser Ala Ile Phe Gln Val Glu Ser Lys Pro
260 265 270
Asn Phe Pro Asn Met Asn Ser Glu Asn Gly Tyr Leu Phe Gln Ala Glu
275 280 285
Ser Lys Pro Ser Leu Glu Asp Ser Gln Val Pro Phe Thr Leu Leu Glu
290 295 300
Lys Trp Leu Phe Asp Asp Ala Ile Asn Ala Pro Ala Gln Glu Asp Gln
305 310 315 320
Phe Met Ala Met Gly Leu Gly Glu Ser Ala Asp Phe Phe
325 330
<210> 3
<211> 46
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
catttggaga ggacacgctc gagatcgtgt aggtagaatg ggaagg 46
<210> 4
<211> 49
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
tctcattaaa gcaggactct agagctgtaa tttaacaaac attgaaagg 49
<210> 5
<211> 50
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
ggggacaagt ttgtacaaaa aagcaggcta tcgtgtaggt agaatgggaa 50
<210> 6
<211> 50
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
ggggaccact ttgtacaaga aagctgggtc agatgaatca gatttgtcaa 50
<210> 7
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
atgggaaggc caccttg 17
<210> 8
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
tcaaaaaaag tcagcagatt cac 23
<210> 9
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
aatggctgct cttattattc aggta 25
<210> 10
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
aagaacagag gatttggagg agat 24
Claims (3)
1.蜡质调控基因SlMYB31在改良番茄蜡质积累或者培育番茄新品种中的应用，所述基因SlMYB31的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示。
2.权利要求1中所述蜡质调控基因SlMYB31编码的蛋白在改良番茄蜡质积累或者培育番茄新品种中的应用。
3.含权利要求1中所述蜡质调控基因SlMYB31的表达载体在改良番茄蜡质积累或者培育番茄新品种中的应用。
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| Natural variations in the MYB transcription factor MYB31 determine the evolution of extremely pungent peppers;Zhangsheng Zhu;《New Phytol》;20190731;第223卷(第2期);第922-938页 * |
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