CN110885297B - 二苯甲烷-4，4’-二酰腙类化合物及其应用 - Google Patents

二苯甲烷-4，4’-二酰腙类化合物及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110885297B
CN110885297B CN201811041803.6A CN201811041803A CN110885297B CN 110885297 B CN110885297 B CN 110885297B CN 201811041803 A CN201811041803 A CN 201811041803A CN 110885297 B CN110885297 B CN 110885297B
Authority
CN
China
Prior art keywords
diphenylmethane
compound
acid
carbon atom
pharmaceutically acceptable
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201811041803.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110885297A (zh
Inventor
杨鹏
陈岩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shenyang Pharmaceutical University
Original Assignee
Shenyang Pharmaceutical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shenyang Pharmaceutical University filed Critical Shenyang Pharmaceutical University
Priority to CN201811041803.6A priority Critical patent/CN110885297B/zh
Publication of CN110885297A publication Critical patent/CN110885297A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110885297B publication Critical patent/CN110885297B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C251/00—Compounds containing nitrogen atoms doubly-bound to a carbon skeleton
    • C07C251/72—Hydrazones
    • C07C251/86—Hydrazones having doubly-bound carbon atoms of hydrazone groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/44—Radicals substituted by doubly-bound oxygen, sulfur, or nitrogen atoms, or by two such atoms singly-bound to the same carbon atom
    • C07D213/53—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/12—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms
    • C07D295/135—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms with the ring nitrogen atoms and the substituent nitrogen atoms separated by carbocyclic rings or by carbon chains interrupted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
    • C09K11/06—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1003—Carbocyclic compounds
    • C09K2211/1007—Non-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
    • C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
    • C09K2211/1029—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing one nitrogen atom as the heteroatom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
    • C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
    • C09K2211/1044—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing two nitrogen atoms as heteroatoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明属于医药技术领域，涉及二苯甲烷‑4,4’‑二酰腙类化合物及其应用，具体涉及以二苯甲烷‑4,4’‑二甲酸为原料，制备的二苯甲烷‑4,4’‑二酰腙一系列化合物，并测试了它们与DNA的结合、荧光响应性能以及对四种肿瘤细胞生长的抑制性能。结果表明，该系列分子与双螺旋DNA均具有较好的结合，且对AT碱基对数量有明显的荧光响应：表现为375nm处出现较强的荧光，520nm处荧光猝灭；此外，该类化合物也具有较高的体外抗肿瘤活性。可以用于制备抗肿瘤药物。

Description

二苯甲烷-4，4’-二酰腙类化合物及其应用
技术领域
本发明属于生物技术领域，涉及二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物及其制备方法和应用，具体涉及二苯甲烷-4,4’-二水杨醛-二酰腙及其一系列衍生物，及其在荧光分子探针技术中的应用，还涉及该类化合物的抗肿瘤活性。
背景技术
常见的DNA荧光探针分为季铵盐类和非季铵盐类，其中季铵盐类由于细胞膜通透性不佳，无法染色活细胞，目前广泛商用的DNA荧光探针只有Hoechst。二苯甲烷-4,4--二酰腙类化合物是一类全新结构的DNA荧光分子探针。在没有双螺旋DNA的情况下，两端的两个苯环平面相互重叠，故520nm处有一荧光(excimer)峰。而当有双螺旋DNA存在时，化合物分子同DNA小沟结合，其上的酚羟基同T碱基上未结合羟基氧之间形成氢键，其两端水杨醛部分的重叠构象被解开，原有的推拉电子体系变化，导致520nm处荧光猝灭，同时在375nm处荧光强烈增强。
二苯甲烷二酰腙类DNA荧光探针在与双螺DNA结合前后荧光的明显差异，使其具有成为新型DNA荧光探针荧光探针的潜力。同时这种荧光探针是非季铵盐类，不受细胞膜通透性的限制，有可能实现对活细胞的染色，这对活体细胞体外染色技术带来了一种新的选择。
酰腙类化合物的酰腙键在肿瘤细胞的酸性环境下水解，生成酰肼，酰肼对肿瘤细胞具有较强烈的抑制增殖的作用，因此酰腙可以作为一类抗肿瘤的活性基团作为应用。
Figure BDA0001792298500000011
二苯甲烷-4,4’-二水杨醛-二酰腙
发明内容
本发明提供了一系列二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物，其化学结构通式为：
Figure BDA0001792298500000012
X为氮或碳原子；
Y为氮或碳原子；
Z为氮或碳原子；
R为氢、氨基、硝基、羟基、C1-C6酯基、卤素、取代或未取代的C1-C4胺、取代或未取代的5-10元杂环基或杂芳基，所述杂环基或杂芳基含有1-3个N、O或S的杂原子，所述取代基为：C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10烷氨基；
n为0-5。
本发明优选具有如下结构的二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物，
其中，
X为氮或碳原子；
Y为氮或碳原子；
Z为氮或碳原子；
R为氢、氨基、硝基、羟基、C1-C6酯基、卤素、取代或未取代的C1-C4胺、取代或未取代的5-10元杂环基，所述杂环基含有1-3个N、O或S的杂原子，所述取代基为：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氨基；
n为0-5。
本发明优选具有如下结构的二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物，
其中，
X为氮或碳原子；
Y为氮或碳原子；
Z为氮或碳原子；
R为氢、羟基、C1-C6酯基、卤素、取代或未取代的C1-C4胺、取代或未取代的5-6元杂环基，所述杂环基含有1-3个N、O或S的杂原子，所述取代基为：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氨基；
n为0-2。
本发明优选具有如下结构的二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物，
其中，
X为氮或碳原子；
Y为氮或碳原子；
Z为氮或碳原子；
R为氢、羟基、C1-C6酯基、卤素、取代或未取代的C1-C4胺、取代或未取代的5-6元杂环基，所述杂环基含有1-3个N原子，所述取代基为：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氨基；
n为0。
本发明优选具有如下结构的二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物，
当X、Y或Z为N原子时，R为氢、甲基、乙基、叔丁基、二甲胺基、二乙胺基、氯、溴、碘、氟、BOC保护的哌嗪、哌嗪-N盐酸盐、甲氧酰基、乙氧酰基，哌嗪-N溴酸盐，哌嗪-N碘酸盐；
当X和Y和Z同时为C原子时，R为氢、甲基、乙基、叔丁基、二甲胺基、二乙胺基、氯、溴、碘、氟、BOC保护的哌嗪、4-哌嗪-N盐酸盐、甲氧酰基、乙氧酰基。
本发明优选如下结构通式的二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物：
Figure BDA0001792298500000031
Figure BDA0001792298500000041
本发明的化合物还包括上述结构式所示化合物所形成的在药学上可接受的盐及其水合物，这些药学上可接受的盐包括该化合物与酸所形成的盐。所述的酸可以为盐酸、硫酸、氢溴酸、磷酸的无机酸或选自乙酸、柠檬酸、草酸、酒石酸、苯甲酸、苹果酸的有机酸。所述水合物的结晶水数目为0～4中的任意实数。
本发明的二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物制备方法包括以下步骤：
(1)二苯甲烷-4,4’-二酰肼的制备
二苯甲烷-4,4’-二甲酸首先与乙醇发生酯化反应，其后与水合肼发生氨解反应制备目标产物：
(2)二苯甲烷-4,4’-二酰腙的制备
二苯甲烷-4,4’-二酰肼与醛发生醛胺缩合反应，只酯化反应，制备目标产物。
Figure BDA0001792298500000042
具体地，本发明的二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物制备方法如下：
(1)二苯甲烷-4,4’-二酰肼的制备
1.1二苯甲烷-4,4’-二羧酸溶于无水乙醇中，冰浴条件下滴加二氯亚砜，转移至油浴，加热搅拌。反应结束，恢复至室温。将反应液倒入二氯甲烷中，饱和碳酸氢钠溶液洗涤两遍，清水洗涤一遍。二氯甲烷用无水硫酸钠干燥后，减压蒸馏得到化合物A。
1.2化合物A，溶于水甲醇，加入水合肼，室温搅拌，至反应结束，离心，取沉淀，分别用无水甲醇，二氯，石油醚，洗涤两次，得化合物B。
(2)二苯甲烷-4,4’-二水杨醛-二酰腙类化合物的制备
取化合物B和水杨醛，溶于甲醇和乙醚的混合溶液中，搅拌，至反应结束，恢复至室温，离心。分别用无水甲醇，二氯甲烷，石油醚洗涤两次，得化合物1。
Figure BDA0001792298500000051
取化合物B和邻羟基苯甲醛、间羟基苯甲醛、2-吡啶甲醛、3-吡啶甲醛、4-吡啶甲醛、5-溴水杨醛、4-氟水杨醛、4-N,N-二乙基胺基水杨醛、3-甲酰基-4-羟基苯甲酸甲酯、4-(3-甲酰基-4-羟基苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，溶于甲醇和乙醚的混合溶液中，搅拌，至反应结束，恢复至室温，离心。分别用无水甲醇，二氯甲烷，石油醚洗涤两次，得化合物2、3、4、5、6、7、8、9、10、11。
取化合物11，溶于二氯甲烷，滴入浓盐酸，室温搅拌。反应结束，有白色固体颗粒析出，黏附于反应瓶壁上。用二氯甲烷，石油醚分别洗涤两次，棕黄色粉末状固体纯品，得到化合物12。
本发明中二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物可以用于荧光分子探针技术中，用于检测核酸，还可以用于制备抗肿瘤药物。
具体地，所述的二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物可以作为小分子荧光探针使用，小分子荧光探针可与双螺旋DNA结合，并产生AT碱基对的荧光选择性。
包括：
(1)紫外检测
将化合物溶于缓冲溶液中逐渐加入一定比例的DNA溶液，得230nm–500nm的紫外吸收值，将其数据代入1:1结合方程，求得结合能K。
(2)荧光检测
设定波谱范围在300nm-650nm，激发波长为299nm，向一定浓度的化合物缓冲液中逐渐加入一定比例的DNA溶液，得到其荧光吸收的谱图。以[CDNA/C化合物]为横坐标，以F375/F520为纵坐标作图，可得荧光变化率图，检测限为0.26μM。
本发明的二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物具有较好的抑制肿瘤细胞增殖活性，在制备抗肿瘤药物中具有较好的发展前景。
附图说明
图1为二苯甲烷-4,4’-二水杨醛-二酰腙(化合物1)的与DNA(AT序列)的紫外滴定谱图：化合物浓度为20μM，[CDNA/C化合物]从0开始以每0.3个当量增加到4.5；随DNA增加，峰值降低持续降低。
图2为二苯甲烷-4,4’-二水杨醛-二酰腙(化合物1)的与DNA(GC序列)的紫外滴定谱图：化合物浓度为20μM，[CDNA/C化合物]从0开始以每0.3个当量增加到4.5；随DNA增加，峰值降低持续降低。
图3为二苯甲烷-4,4’-二水杨醛-二酰腙(化合物1)的与DNA(AT序列)的荧光滴定谱图：化合物浓度为10μM，[CDNA/C化合物]从0开始以每0.25个当量增加到4.0；随DNA增加，525nm峰值降低,375nm峰值升高。
图4为二苯甲烷-4,4’-二水杨醛-二酰腙(化合物1)的与DNA(GC序列)的荧光滴定谱图：化合物浓度为10μM，[CDNA/C化合物]从0开始以每0.25个当量增加到4.0；随DNA增加，525nm峰值降低,375nm峰值不变。
具体实施方式
实施例1
化合物A的合成
Figure BDA0001792298500000061
取200mg(0.78mmol,1.0eq)二苯甲烷-4,4’-二羧酸溶于100mL无水乙醇中，冰浴条件下滴加2mL二氯亚砜，转移至油浴，90℃搅拌3h。反应结束，恢复至室温。将反应液倒入500mL二氯甲烷中，饱和碳酸氢钠溶液洗涤两遍，清水洗涤一遍。二氯甲烷用无水硫酸钠干燥后，40℃减压蒸馏得到纯品145.2mg。收率：72.6％，TLC(二氯甲烷/甲醇＝40:1,v/v)，Rf＝0.3。
实施例2
化合物B的合成
Figure BDA0001792298500000062
取150mg(0.48mmol,1.0eq)化合物A，溶于50mL无水甲醇，加入10mL水合肼(80％,V)，室温搅拌8h，有大量白色针状固体析出，离心，取沉淀，分别用无水甲醇，二氯，石油醚，洗涤两次，得到白色粉末状固体纯品102.4mg。收率：75.0％，TLC(二氯甲烷：甲醇：氨水＝40:7:1)。
实施例3
目标化合物1的合成
Figure BDA0001792298500000071
取化合物B 13.0mg(0.0457mmol,1.0eq)，水杨醛22.3mg(0.1828mmol,4.0eq)，溶于4mL甲醇和4mL乙醚的混合溶液中，60℃搅拌4h。反应结束，有白色固体颗粒析出。恢复至室温，离心，得到白色固体。分别用0.5mL无水甲醇，0.5mL二氯甲烷，0.5mL石油醚洗涤两次，得到白色粉末状固体纯品16.5mg。收率73.5％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ12.05(s,1H),11.30(s,1H),8.63(s,1H),7.89(d,J＝8.1Hz,2H),7.54(d,J＝7.5Hz,1H),7.44(d,J＝7.9Hz,2H),7.30(t,J＝7.7Hz,1H),6.94(d,J＝8.1Hz,2H),6.92(d,J＝7.5Hz,1H),4.13(s,1H)；13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ163.0,157.8,148.5,145.3,131.7,131.1,129.8,129.3,128.3,119.7,119.0,116.7,41.0；HRMS(ESI):m/z:[M+Na]+calc.:515.1690；found:515.1695.
实施例4
目标化合物2的合成
Figure BDA0001792298500000072
取化合物B 13.0mg(0.0457mmol,1.0eq)，间羟基苯甲醛22.0mg(0.1801mmol,3.9eq)，溶于4mL甲醇和4mL乙醚的混合溶液中，60℃搅拌4h。反应结束，有白色固体颗粒析出。恢复至室温，离心，得到白色固体。分别用0.5mL无水甲醇，0.5mL二氯甲烷，0.5mL石油醚洗涤两次，得到白色粉末状固体纯品11.4mg。收率50.6％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.73(s,1H),9.62(s,1H),8.35(s,1H),7.86(d,J＝7.6Hz,2H),7.42(d,J＝7.6Hz,3H),7.24(d,J＝7.7Hz,1H),7.20(s,1H),7.09(d,J＝7.3Hz,1H),6.83(d,J＝7.6Hz,1H),4.10(s,0H)；13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ163.2,158.0,148.1,145.1,135.9,131.8,130.3,129.2,128.3,119.2,117.8,112.9,48.9；HRMS(ESI):m/z:[M+Na]+calc.:515.1690；found:515.1688.
实施例5
目标化合物3的合成
Figure BDA0001792298500000081
取化合物B 13mg(0.0457mmol,1.0eq)，对羟基苯甲醛22.0mg(0.1801mmol,3.9eq)，溶于4mL甲醇和4mL乙醚的混合溶液中，60℃搅拌4h。反应结束，有白色固体颗粒析出。恢复至室温，离心，得到白色固体。分别用0.5mL无水甲醇，0.5mL二氯甲烷，0.5mL石油醚洗涤两次，得到白色粉末状固体纯品12.8mg。收率56.9％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.57(s,1H),9.91(s,1H),8.33(s,1H),7.84(d,J＝7.6Hz,2H),7.55(d,J＝8.1Hz,2H),7.40(d,J＝7.5Hz,3H),6.83(d,J＝8.1Hz,2H),4.11(s,1H)；13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ163.0,159.7,148.3,144.9,131.9,129.2,129.2,128.2,125.7,116.1,41.0；HRMS(ESI):m/z:[M+Na]+calc.:515.1690；found:515.1631.
实施例6
目标化合物4的合成
Figure BDA0001792298500000082
取化合物B 13.0mg(0.0457mmol,1.0eq)，2-吡啶甲醛20.0mg(0.187mmol,4.1eq)，溶于4mL甲醇和4mL乙醚的混合溶液中，60℃搅拌4h。反应结束，有白色固体颗粒析出。恢复至室温，离心，得到白色固体。用0.5mL无水甲醇，0.5mL二氯甲烷，0.5mL石油醚洗涤两次，得到白色粉末状固体纯品13.3mg。收率62.9％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.98(s,1H),8.62(s,1H),8.47(s,1H),7.98(d,J＝7.4Hz,1H),7.90(s,1H),7.88(d,J＝7.3Hz,4H),7.45(s,1H),7.43–7.39(m,3H)；13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ163.5,153.6,149.9,148.2,145.3,137.2,131.5,129.3,128.4,124.8,120.3,41.1；HRMS(ESI):m/z:[M+H]+calc.:462.1882；found:462.1877.
实施例7
目标化合物5的合成
Figure BDA0001792298500000091
取化合物B 13.0mg(0.0457mmol,1.0eq)，3-吡啶甲醛20.0mg(0.187mmol,4.1eq)，溶于4mL甲醇和4mL乙醚的混合溶液中，60℃搅拌4h。反应结束，有白色固体颗粒析出。恢复至室温，离心，得到白色固体。用0.5mL无水甲醇，0.5mL二氯甲烷，0.5mL石油醚洗涤两次，得到白色粉末状固体纯品15.5mg。收率73.3％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.96(s,1H),8.86(s,0H),8.61(s,1H),8.50(s,1H),8.14(d,J＝7.1Hz,1H),7.87(d,J＝7.1Hz,3H),7.56–7.46(m,1H),7.44(d,J＝7.3Hz,3H),4.13(s,1H)；13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ163.4,151.1,149.1,145.3,133.8,131.6,130.6,129.3,128.4,124.4,123.5,41.1；HRMS(ESI):m/z:[M+H]+calc.:462.1882；found:462.1877
实施例8
目标化合物6的合成
Figure BDA0001792298500000092
取化合物B 13.0mg(0.0457mmol,1.0eq)，4-吡啶甲醛20.0mg(0.187mmol,4.1eq)，溶于4mL甲醇和4mL乙醚的混合溶液中，60℃搅拌4h。反应结束，有白色固体颗粒析出。恢复至室温，离心，得到白色固体。用0.5mL无水甲醇，0.5mL二氯甲烷，0.5mL石油醚洗涤两次，得到白色粉末状固体纯品13.8mg。收率65.3％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ12.06(s,1H),8.66(s,2H),8.44(s,1H),7.88(d,J＝6.5Hz,3H),7.67(s,2H),7.44(d,J＝7.1Hz,3H),4.13(s,1H).；13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ163.6,150.6,145.5,145.4,141.9,131.4,129.3,128.5,121.4,41.1；HRMS(ESI):m/z:[M+H]+calc.:462.1882；found:462.1877.
实施例9
目标化合物7的合成
Figure BDA0001792298500000101
取化合物B 13.0mg(0.0457mmol,1.0eq)，5-溴水杨醛35mg(0.174mmol,3.8eq)，溶于4mL甲醇和4mL乙醚的混合溶液中，60℃搅拌4h。反应结束，有白色固体颗粒析出。恢复至室温，离心，得到白色固体。用0.5mL无水甲醇，0.5mL二氯甲烷，0.5mL石油醚洗涤两次，得到白色粉末状固体纯品19.4mg。收率65.3％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ12.13(s,1H),11.30(s,1H),8.60(s,1H),7.89(d,J＝8.0Hz,3H),7.79(s,1H),7.44(d,J＝7.5Hz,3H),7.42(d,J＝2.0Hz,2H),6.91(d,J＝8.7Hz,1H),4.13(s,1H)；13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ163.1,156.8,145.8,145.4,133.9,131.1,130.8,129.3,128.4,121.7,119.1,110.8,56.4,41.1；HRMS(ESI):m/z:[M+H]+calc.:672.9885；found:672.9811.
实施例10
目标化合物8的制备
Figure BDA0001792298500000102
取化合物B 13.0mg(0.0457mmol,1.0eq)，4-氟水杨醛25mg(0.178mmol,3.9eq)，溶于4mL甲醇和4mL乙醚的混合溶液中，60℃搅拌4h。反应结束，有白色固体颗粒析出。恢复至室温，离心，得到白色固体。用0.5mL无水甲醇，0.5mL二氯甲烷，0.5mL石油醚洗涤两次，得到白色粉末状固体纯品15.6mg。收率64.6％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ12.05(s,0H),11.78(s,0H),8.60(s,0H),7.88(d,J＝8.1Hz,1H),7.62(d,J＝15.5Hz,0H),7.43(s,1H),6.80–6.79(m,0H),6.77(d,J＝9.5Hz,1H),4.13(s,1H)；13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ163.3,162.9,159.6,159.5,147.6,145.4,131.6,131.1,129.3,128.3,116.2,107.2,107.1,103.9,103.7,41.1,40.4；HRMS(ESI):m/z:[M+H]+calc.:529.1687；found:529.1682.
实施例11
目标化合物9的合成
Figure BDA0001792298500000111
取化合物B 13.0mg(0.0457mmol,1.0eq)，4-N,N-二乙基胺基水杨醛30.0mg(0.155mmol,3.4eq)，溶于4mL甲醇和4mL乙醚的混合溶液中，60℃搅拌4h。反应结束，有白色固体颗粒析出。恢复至室温，离心，得到白色固体。用0.5mL无水甲醇，0.5mL二氯甲烷，0.5mL石油醚洗涤两次，得到白色粉末状固体纯品18.7mg。收率64.5％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.73(s,1H),11.46(s,1H),8.40(s,175H),7.85(d,J＝7.9Hz,2H),7.41(d,J＝8.0Hz,3H),7.18(d,J＝8.7Hz,1H),6.26(d,J＝10.4Hz,1H),6.12(s,1H),4.11(s,1H),3.36(q,J＝6.8Hz,6H),2.50(p,J＝1.8Hz,12H),1.10(t,J＝6.9Hz,7H)；13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ162.4,160.1,150.5,150.2,145.0,131.9,131.5,129.2,128.2,106.8,103.9,97.9,44.2,12.9；HRMS(ESI):m/z:[M+2H]2+calc.:318.1712；found:318.1709.
实施例12
目标化合物10的合成
Figure BDA0001792298500000121
取化合物B 13.0mg(0.0457mmol,1.0eq)，3-甲酰基-4-羟基苯甲酸甲酯20.0mg(0.111mmol,2.4eq)，溶于4mL甲醇和4mL乙醚的混合溶液中，60℃搅拌4h。反应结束，有白色固体颗粒析出。恢复至室温，离心，得到白色固体。用0.5mL无水甲醇，0.5mL二氯甲烷，0.5mL石油醚洗涤两次，得到白色粉末状固体纯品12.3mg。收率44.2％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ12.11(s,1H),11.83(s,1H),8.70(s,1H),8.28(s,1H),7.89(d,J＝7.9Hz,3H),7.87(s,1H),7.44(d,J＝7.9Hz,3H),7.04(d,J＝8.6Hz,1H),4.14(s,1H),3.84(s,3H)；13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ166.1,163.2,161.5,146.1,145.4,132.6,131.2,130.3,129.3,128.4,121.2,119.8,117.0,52.3,41.1,40.4；HRMS(ESI):m/z:[M+H]+calc.:609.1985；found:609.1980.
实施例13
目标化合物11的合成
Figure BDA0001792298500000122
取化合物B 13.0mg(0.0457mmol,1.0eq)，4-(3-甲酰基-4-羟基苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯25.0mg(0.178mmol,3.9eq)，溶于4mL甲醇和4mL乙醚的混合溶液中，60℃搅拌4h。反应结束，有淡黄色固体颗粒析出。恢复至室温，离心，得到淡黄色固体。用0.5mL无水甲醇，0.5mL二氯甲烷，0.5mL石油醚洗涤两次，得到淡黄色粉末状固体纯品28.3mg。收率60.1％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ12.03(s,1H),10.78(s,1H),8.58(s,1H),7.88(d,J＝8.0Hz,3H),7.44(d,J＝8.0Hz,3H),7.11(s,1H),7.00(d,J＝11.2Hz,1H),6.84(d,J＝8.8Hz,1H),4.13(s,1H),3.46(s,6H),2.97(s,6H)；13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ163.0,154.2,152.0,148.5,145.3,144.6,131.2,129.3,128.4,121.8,118.9,117.3,117.2,79.3,50.4,28.5；HRMS(ESI):m/z:[M+H]+calc.:861.4294；found:861.4294.
实施例14
目标化合物12的合成
Figure BDA0001792298500000131
取20mg(0.0232mmol,1.0eq)化合物13，溶于5mL二氯甲烷，滴入50μL的36％浓盐酸，室温搅拌15min。反应结束，有白色固体颗粒析出，黏附于反应瓶壁上。用2mL二氯甲烷，2mL石油醚分别洗涤两次，得到棕黄色粉末状固体纯品14.2mg。收率83.4％。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ12.24(s,1H),10.24(s,0H),9.27(s,2H),8.70(s,1H),7.92(d,J＝7.7Hz,2H),7.43(d,J＝7.8Hz,3H),7.19(s,1H),7.06(d,J＝7.4Hz,2H),6.90(d,J＝8.8Hz,1H),4.13(s,1H),3.28(s,6H),3.24(s,7H)；13C NMR(151MHz,,DMSO-d6)δ163.1,152.7,147.9,145.3,143.1,131.2，129.3,128.4,121.8,119.3,117.5,117.1,47.5,43.1,41.1；HRMS(ESI):m/z:[M-2Cl]2+calc.:331.1645；found:331.1687.
实施例15
紫外检测用于求得探针与双螺旋DNA(AT序列)结合的结合常数K
设定波谱范围在230nm–500nm，向比色皿中加入1440μL的缓冲溶液溶液(pH＝7.25-7.35)，加入浓度为5mM的化合物(DMSO为溶剂)6.4μl，73.6μL DMSO，80μL的甲醇，使其终浓度达20μM，逐渐加入12AT-DNA，[CDNA/C化合物]依次为0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5、1.8、2.1、2.4、2.7，随DNA加入，峰值先降低后，得到其紫外吸收值变化图(见附图1)。
利用数值导入1:1结合方程，求得化合物1与12AT双螺旋DNA结合常数为K＝2.97×104M-1。
实施例16
紫外检测(GC序列)
设定波谱范围在230nm–500nm，向比色皿中加入1440μL的缓冲溶液溶液(pH＝7.25-7.35)，加入浓度为5mM的化合物(DMSO为溶剂)6.4μl，73.6μL DMSO，80μL的甲醇，使其终浓度达20μM，逐渐加入12GC-DNA，[CDNA/C化合物]依次为0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5、1.8、2.1、2.4、2.7、3.0、3.3、3.6、3.9、4.2，随DNA加入，峰值降低，得到其紫外吸收值变化图(见附图2)。
实施例17
荧光检测(AT序列)
设定波谱范围在300nm–660nm，激发波长为299nm，向比色皿中加入1440μl的缓冲溶液(pH＝7.25-7.35)加入浓度为5mM的化合物(DMSO为溶剂)6.4μl，73.6μL DMSO，80μL的甲醇，使其终浓度达20μM，逐渐加入12AT-DNA，随DNA加入量的增加，得到其荧光发射值的全谱图(图3)。在375nm处出现一个新的荧光峰并逐渐升高，在520nm处逐渐降低。
以[CDNA/C化合物]为横坐标，以F375/F520为纵坐标描点作图。
实施例18
荧光检测(GC序列)
在实例17相同检测条件下，加入12GC-DNA得到附图4，520nm处出现明显的下降，在375处并未出现新的荧光峰。
以上实验证明化合物1对12AT的有荧光响应选择性。
实施例19
化合物1-12的体外抗肿瘤活性测试
体外活性测试方法和结果如下：其中，临床常用的抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶、阿霉素(ADM)和紫杉醇为阳性对照实验组。
抗肿瘤活性体外筛选试验-1
筛选方法：四氮唑盐(micoculture tetrozolium,MTT)还原法
细胞株：人结肠癌细胞(HT29)
作用时间：48h
各化合物对肿瘤细胞生长的半数抑制浓度IC50(％，μM)见表-1。
抗肿瘤活性体外筛选试验-2
筛选方法：四氮唑盐(micoculture tetrozolium,MTT)还原法
细胞株：人肝癌细胞(HepG2)
作用时间：48h
各化合物对肿瘤细胞生长的半数抑制浓度IC50(％，μM)见表-1。
抗肿瘤活性体外筛选试验-3
筛选方法：四氮唑盐(micoculture tetrozolium,MTT)还原法
细胞株：人黑色素瘤细胞(A375)
作用时间：48h
各化合物对肿瘤细胞生长的半数抑制浓度IC50(％，μM)见表-1。
抗肿瘤活性体外筛选试验-4
筛选方法：四氮唑盐(micoculture tetrozolium,MTT)还原法
细胞株：人乳腺癌细胞(MCF-7)
作用时间：48h
各化合物对肿瘤细胞生长的半数抑制浓度IC50(％，μM)见表-1。
表-1化合物的体外细胞毒性测试数据(IC50(μmol/L))
Figure BDA0001792298500000151

Claims (10)

1.具有如下通式结构的二苯甲烷-二酰腙类化合物及其药学上可接受的盐，
Figure 713864DEST_PATH_IMAGE001
X为氮或碳原子；
Y为氮或碳原子；
Z为氮或碳原子；
X、Y、Z不同时为氮；
R为氢、氨基、卤素、硝基、羟基；
或
X为碳原子；
Y为碳原子；
Z为碳原子；
R为氨基、卤素、硝基、羟基、C1-C6酯基、取代或未取代的C1-C4胺、取代或未取代的5-6元杂环基，所述杂环基含有1-3个N原子，所述取代基为：C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10烷氨基；
n为0-5。
2.如权利要求1所述的二苯甲烷-二酰腙类化合物及其药学上可接受的盐，
其中，
X为碳原子；
Y为碳原子；
Z为碳原子；
R为氨基、硝基、羟基、C1-C6酯基、卤素、取代或未取代的C1-C4胺、取代或未取代的5-6元杂环基，所述杂环基含有1-3个N原子，所述取代基为：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氨基。
3.如权利要求1或2所述的二苯甲烷-二酰腙类化合物及其药学上可接受的盐，
其中，
X为碳原子；
Y为碳原子；
Z为碳原子；
R为羟基、C1-C6酯基、卤素、取代或未取代的C1-C4胺、取代或未取代的5-6元杂环基，所述杂环基含有1-3个N原子，所述取代基为：C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氨基。
4.如权利要求1-3任何一项所述的二苯甲烷-二酰腙类化合物及其药学上可接受的盐，
其中，
当X、Y或Z为N原子时， R为氢、甲基、乙基、叔丁基、二甲胺基、二乙胺基、氯、溴、碘、氟、BOC保护的哌嗪、哌嗪-N盐酸盐、甲氧酰基、乙氧酰基，哌嗪-N溴酸盐，哌嗪-N碘酸盐；
当X和Y和Z同时为C原子时， R为甲基、乙基、叔丁基、二甲胺基、二乙胺基、氯、溴、碘、氟、BOC保护的哌嗪、4-哌嗪-N盐酸盐、甲氧酰基、乙氧酰基。
5.如下的二苯甲烷-二酰腙类化合物及其药学上可接受的盐：
Figure 162162DEST_PATH_IMAGE002
Figure 676320DEST_PATH_IMAGE003
Figure 743634DEST_PATH_IMAGE004
Figure 292427DEST_PATH_IMAGE005
Figure 911627DEST_PATH_IMAGE006
Figure 913081DEST_PATH_IMAGE007
Figure 518506DEST_PATH_IMAGE008
Figure 187384DEST_PATH_IMAGE009
Figure 977486DEST_PATH_IMAGE010
Figure 466236DEST_PATH_IMAGE011
Figure 609772DEST_PATH_IMAGE012
Figure 929895DEST_PATH_IMAGE013
。
6.如权利要求1-5任何一项所述的二苯甲烷-二酰腙类化合物及其药学上可接受的盐，其中，所述的药学上可接受的盐为该化合物与酸所形成的盐，所述的酸为有机酸或无机酸，所述的无机酸为盐酸、硫酸、氢溴酸或磷酸，所述的有机酸为乙酸、柠檬酸、草酸、酒石酸、苯甲酸或苹果酸。
7.如权利要求1-3所述的二苯甲烷-4,4’-二酰腙类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：二苯甲烷-4,4’-二甲酸首先与乙醇发生酯化反应，其后与水合肼发生氨解反应制备二苯甲烷-4,4’-二酰肼，最后与醛发生醛胺缩合反应制备目标酰腙类化合物；
Figure DEST_PATH_IMAGE015
其中，X、Y、Z、n、R如权利要求1所述的含义。
8.一种药物组合物，包含权利要求1-6中任何一项所述的二苯甲烷-二酰腙类化合物及其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
9.权利要求1-6任何一项所述的二苯甲烷-二酰腙类化合物及其药学上可接受的盐或权利要求8所述的组合物在荧光分子探针技术中的应用。
10.权利要求1-6任何一项所述的二苯甲烷-二酰腙类化合物及其药学上可接受的盐或权利要求8所述的组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
CN201811041803.6A 2018-09-07 2018-09-07 二苯甲烷-4，4’-二酰腙类化合物及其应用 Active CN110885297B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811041803.6A CN110885297B (zh) 2018-09-07 2018-09-07 二苯甲烷-4，4’-二酰腙类化合物及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811041803.6A CN110885297B (zh) 2018-09-07 2018-09-07 二苯甲烷-4，4’-二酰腙类化合物及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110885297A CN110885297A (zh) 2020-03-17
CN110885297B true CN110885297B (zh) 2022-11-25

Family

ID=69744344

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811041803.6A Active CN110885297B (zh) 2018-09-07 2018-09-07 二苯甲烷-4，4’-二酰腙类化合物及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110885297B (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009155362A1 (en) * 2008-06-19 2009-12-23 Ligand Pharmaceuticals Inc. Small molecule hematopoietic growth factor mimetic compounds and their uses
CN103087054A (zh) * 2013-02-27 2013-05-08 山东大学 4-吡啶苯基醚类化合物及其制备方法与应用
CN104829487A (zh) * 2015-03-27 2015-08-12 福州大学 聚集发光增强的氨敏金属-有机凝胶复合软材料及其制备
CN106831489A (zh) * 2017-03-23 2017-06-13 郑州大学 苯环丙胺酰腙类化合物、制备方法及其应用
CN107827776A (zh) * 2017-11-10 2018-03-23 上海应用技术大学 具有抗肿瘤活性的酰腙类化合物、制备方法及其应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009155362A1 (en) * 2008-06-19 2009-12-23 Ligand Pharmaceuticals Inc. Small molecule hematopoietic growth factor mimetic compounds and their uses
CN103087054A (zh) * 2013-02-27 2013-05-08 山东大学 4-吡啶苯基醚类化合物及其制备方法与应用
CN104829487A (zh) * 2015-03-27 2015-08-12 福州大学 聚集发光增强的氨敏金属-有机凝胶复合软材料及其制备
CN106831489A (zh) * 2017-03-23 2017-06-13 郑州大学 苯环丙胺酰腙类化合物、制备方法及其应用
CN107827776A (zh) * 2017-11-10 2018-03-23 上海应用技术大学 具有抗肿瘤活性的酰腙类化合物、制备方法及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN110885297A (zh) 2020-03-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Pelaprat et al. DNA intercalating compounds as potential antitumor agents. 2. Preparation and properties of 7H-pyridocarbazole dimers
CN111448189A (zh) 一种联芳基衍生物、其制备方法和在药学上的应用
AU2020275818A1 (en) Fluorine-containing compound and anti-cancer medical use thereof
Ma et al. Synthesis and application of highly sensitive fluorescent probe for Hg2+ regulated by sulfur
JP5733760B2 (ja) 蛍光発生分子および標的核酸検出方法
Banik et al. Novel 6, 12-disubstituted chrysene as potent anticancer agent: synthesis, in vitro and in vivo study
Wang et al. Development of a near-infrared fluorescent ligand that visualizes and stabilizes G-quadruplexes by decorating the triphenylamine scaffold
Yu et al. Design, synthesis and antitumor activity of 4-aminoquinazoline derivatives targeting VEGFR-2 tyrosine kinase
TWI812223B (zh) 雜環取代的嘌呤酮衍生物的鹽型及晶型
Riechert-Krause et al. In vitro anticancer activity and evaluation of DNA duplex binding affinity of phenyl-substituted indoloquinolines
AU2018275123A1 (en) Use of EZH2 inhibitors for treating cancer
CN110105279B (zh) 一种喹啉类stat3特异性抑制剂及其制备方法和应用
US9194802B2 (en) Luminescent probes having a phenanthridinyl antenna, and methods of use
Lu et al. Selective visualization of DNA G-quadruplex structures in live cells with 1-methylquinolinium-based molecular probes: The importance of indolyl moiety position towards specificity
CN110885297B (zh) 二苯甲烷-4，4’-二酰腙类化合物及其应用
Jia et al. Interactions of newly designed dicationic carbazole derivatives with double-stranded DNA: syntheses, binding studies and AFM imaging
Liu et al. Highly efficient and selective red-emitting Ca2+ probe based on a BODIPY fluorophore
Kong et al. Neomycin B-cyclen conjugates and their Zn (II) complexes as RNA-binding agents
CN109666006A (zh) 芳基衍生联噻唑类化合物及其制备方法和应用
Havas et al. A convenient synthesis of 6, 6′-dimethyl-2, 2′-bipyridine-4-ester and its application to the preparation of bifunctional lanthanide chelators
Dai et al. One‐Step Reaction for Screening of Chromophores to Improve the Luminescence of Lanthanide Complexes
Lang et al. Novel synthetic 9-benzyloxyacridine analogue as both tyrosine kinase and topoisomerase I inhibitor
US20170121752A1 (en) Detection of acrylic acid
CN111848657B (zh) 靶向酪氨酸激酶识别的可逆性荧光化合物及其制备方法和应用
Ikbal et al. Benzo [a] acridinylmethyl esters as pH sensitive fluorescent photoactive precursors: synthesis, photophysical, photochemical and biological applications

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant