CN110862462A - 一种茶多糖的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种茶多糖的提取方法。首先将茶叶洗净干燥后，粉碎过筛，得茶叶粉末；将粉末经微波处理后，经球磨机械提取得上清液；将上清液减压浓缩后，利用超临界流体萃取以及无水乙醇沉淀纯化后，离心分离出沉淀，将沉淀冷冻干燥，既得天然茶多糖。本发明的提取方法，提取效率高，且得到的天然多糖纯度高。
Description
技术领域
本发明涉及茶叶提取技术，具体为一种茶多糖的提取方法。
背景技术
茶多糖是从茶叶中提取的活性多糖总称,是继茶多酚之后发现的茶中又一类有生理活性的重要物质。药理研究表明茶多糖具有降血糖、降血脂、降血压、抗癌、抗凝血、抗血栓、抗动脉粥样硬化、耐缺氧、防辐射、防治心血管疾病、增加冠状动脉血流量、增强机体免疫力等多种功能, 尤其是其降血脂效果和免疫活性,可望成为预防和治疗糖尿病、心血管病,增加免疫功能的天然药物。茶多糖的含量也是茶叶保健性功能理化指标之一。随着对多糖研究的日益深入, 特别是发现茶叶中降血糖的有效成分是水溶性组分中的多糖复合物以来,茶多糖的研究就引起了人们的极大关注，因此开发茶叶中茶多糖的提取方法具有重要的作用。
目前, 茶多糖的提取方法主要有热水浸提或者有机溶剂浸提法（CN02110999.0）、水提发酵法（CN 102296096 A）、水提法联合液液萃取法（CN104045732 A）、酶提法（CN105367679 A）这些方中水提取时间长，效率低，发酵法以及酶提取法后续纯化步骤繁琐，耗时长。因此，开发高效快捷的多糖提取方法具有重要的意义。
发明内容
为了解决茶多糖提取时提取时间长，效率低，后续纯化步骤繁琐等问题，本发明提供了一种茶多糖的提取方法。
为了实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案：
一种茶多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将新鲜茶叶洗净，自然晾干后，粉碎过60目筛，得到茶叶粉末；
（2）将茶叶粉末经微波处理后，与水按1：10-15的质量体积比混合后，经球磨机械提取后，收集上清液，茶渣继续加水后利用球磨机械提取2-3次，合并上清液；
（3）将上清液减压浓缩后，将浓缩液置于超临界流体装置中，萃取纯化后，剩余固体部分用2-3倍的无水乙醇沉淀，离心分离出沉淀物；
（4）将沉淀物冷冻干燥，既得天然茶多糖，并利用苯酚-硫酸法测量总多糖的含量。
优选的，步骤（2）中所述的微波处理条件为：微波温度为30-40℃，处理时间为5-10min。
优选的，步骤（2）中所述的球磨机械提取条件为：球与茶粉末的质量比为1：8-10；转速为600-800rpm/min;萃取时间为5-10min。
优选的，步骤（3）中所述的减压浓缩后，浓缩液的密度为1.1-1.2g/mL。
优选的，步骤（3）中所述的超临界流体萃取条件为:萃取压力为 25-30Mpa，CO2流速为18-22L/h，萃取时间为15-20min。
优选的，步骤（3）中所述的离心分离条件为:转速为10000rpm/min，离心时间为10min。
优选的，步骤（4）中所述的苯酚-硫酸法测量方法为：取10mg的茶多糖溶于1mL一级水后转移至10 mL具塞试管中,加入5%的重蒸酚1.0 mL,混匀, 加入5.0mL硫酸,混合均匀后, 室温静置30 min后, 于 487 nm处测定吸光度，最后将吸光度值与10mgD.L无水葡萄糖对照品经上述步骤处理后在487 nm处测定吸光度进行对比，得到茶多糖的含量。
与现有技术相比，本专利所述的一种茶多糖的提取方法具有以下有益效果：本发明采用微波处理破坏茶叶中植物细胞壁使得多糖化合物能快速浸出，提高提取效率；采用磨球机械辅助提取法，不仅提高了提取效率同时缩短提取时间，进一步提高了提取效率；采用超临界流体以及无水乙醇除去杂质，避免使用含氯的有机溶剂，更为环保。
具体实施方式
【实施例1】
一种茶多糖的提取方法，包括以下步骤：
（1）将新鲜茶叶洗净，自然晾干后，粉碎过60目筛，得到茶叶粉末；
（2）将茶叶粉末在35℃条件下，经微波处理8min后，与水按1：12的质量体积比混合后，在球与茶粉末的质量比为1：8，转速为650rpm/min条件下经球磨机械提取8min后，收集上清液，茶渣继续加水后利用球磨机械提取3次，合并上清液；
（3）将上清液减压浓缩至提取液密度为1.15-1.2g/mL后，转移至超临界流体装置中，在28Mpa，CO2流速为20L/h条件下萃取15min后，剩余固体部分用3倍的无水乙醇沉淀，10000rpm/min条件下离心10min分离出沉淀物；
（4）将沉淀物冷冻干燥，既得天然茶多糖。
【实施例2】
一种茶多糖的提取方法，包括以下步骤：
（1）将新鲜茶叶洗净，自然晾干后，粉碎过60目筛，得到茶叶粉末；
（2）将茶叶粉末在30℃条件下，经微波处理8min后，与水按1：15的质量体积比混合后，在球与茶粉末的质量比为1：10，转速为600rpm/min条件下经球磨机械提取9min后，收集上清液，茶渣继续加水后利用球磨机械提取3次，合并上清液；
（3）将上清液减压浓缩至提取液密度为1.15-1.2g/mL后，转移至超临界流体装置中，在25Mpa；CO2流速为20L/h条件下萃取18min后，剩余固体部分用3倍的无水乙醇沉淀，10000rpm/min条件下离心10min分离出沉淀物；
（4）将沉淀物冷冻干燥，既得天然茶多糖。
【实施例3】
一种茶多糖的提取方法，包括以下步骤：
（1）将新鲜茶叶洗净，自然晾干后，粉碎过60目筛，得到茶叶粉末；
（2）将茶叶粉末在30℃条件下，经微波处理5min后，与水按1：13的质量体积比混合后，在球与茶粉末的质量比为1：10，转速为800rpm/min条件下经球磨机械提取5min后，收集上清液，茶渣继续加水后利用球磨机械提取3次，合并上清液；
（3）将上清液减压浓缩至提取液密度为1.15-1.2g/mL后，转移至超临界流体装置中，在30Mpa；CO2流速为21L/h条件下萃取15min后，剩余固体部分用3倍的无水乙醇沉淀，10000rpm/min条件下离心10min分离出沉淀物；
（4）将沉淀物冷冻干燥，既得天然茶多糖。
【对比例1】
一种茶多糖的提取方法，包括以下步骤：
（1）将新鲜茶叶洗净，自然晾干后，粉碎过60目筛，得到茶叶粉末；
（2）将茶叶粉末与水按1：13的质量体积比混合后，在球与茶粉末的质量比混合后在70℃浸提60min后，过滤，取滤液；
（3）滤液在60℃条件下真空浓缩后用3倍的工业酒精沉淀；离心分离，得沉淀物粗茶多糖；
（4）将粗茶多糖用水溶解后，加入4倍体积的氯仿正丁醇混合液，搅拌30min后，静置分层，离心分离出沉淀物；
（4）用工业酒精沉淀，将沉淀物冷冻干燥，既得天然茶多糖。
取10mg的实施例1-3以及对比例制备的茶多糖溶于1mL一级水后转移至10 Ml具塞试管中,分加入5%的重蒸酚1.0 mL,混匀, 加入5.0mL硫酸,混合均匀后, 室温静置30 min后, 于 487 nm处测定吸光度，最后将吸光度值与10mgD.L无水葡萄糖对照品经上述步骤处理后在487 nm处测定吸光度进行对比，得到茶多糖的含量，所得结果如下表1所示。
实施例1-3以及对比例制天然茶多糖的时间以及多糖的纯度
| 萃取纯化时间 | 茶多糖含量 | |
| 实施例1 | 47min | 88.7& |
| 实施例2 | 53min | 90.2% |
| 实施例3 | 35min | 89．9% |
| 对比例1 | 90min | 45.5% |
从表1可以看出，本发明的提取方法，提取效率更高，得到的多糖含量更大，且本发明没有用到含氯的的有机溶剂，更为环保，因此具有更大的应用前景。
对于本领域的普通技术人员而言，具体实施例只是对本发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种非实质性的改进，或未经改进将本发明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种茶多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将新鲜茶叶洗净，自然晾干后，粉碎过60目筛，得到茶叶粉末；
（2）将茶叶粉末经微波处理后，与水按1：10-15的质量体积比混合后，经球磨机械提取后，收集上清液，茶渣继续加水后利用球磨机械提取2-3次，合并上清液；
（3）将上清液减压浓缩后，将浓缩液置于超临界流体装置中，萃取纯化后，剩余固体部分用2-3倍的无水乙醇沉淀，离心分离出沉淀物；
（4）将沉淀物冷冻干燥，既得天然茶多糖，并利用苯酚-硫酸法测量总多糖的含量。
2.根据权利要求1所示的一种茶多糖的提取方法其特征在于，步骤（2）中所述的微波处理条件为：微波温度为30-40℃，处理时间为5-10min。
3.根据权利要求1所示的一种茶多糖的提取方法其特征在于，步骤（2）中所述的球磨机械提取条件为：球与茶粉末的质量比为1：8-10；转速为600-800rpm/min;萃取时间为5-10min。
4.根据权利要求1所示的一种茶多糖的提取方法其特征在于，步骤（3）中所述的减压浓缩后，浓缩液的密度为1.1-1.2g/mL。
5.根据权利要求1所示的一种茶多糖的提取方法其特征在于，步骤（3）中所述的超临界流体萃取条件为:萃取压力为 25-30Mpa，CO2流速为18-22L/h，萃取时间为15-20min。
6.根据权利要求1所示的一种茶多糖的提取方法其特征在于，步骤（3）中所述的离心分离条件为:转速为10000rpm/min，离心时间为10min。
7.根据权利要求1所示的一种茶多糖的提取方法其特征在于，步骤（4）中所述的苯酚-硫酸法测量方法为：取10mg的茶多糖溶于1mL一级水后转移至10 mL具塞试管中,加入5%的重蒸酚1.0 mL,混匀, 加入5.0mL硫酸,混合均匀后, 室温静置30 min后, 于 487 nm处测定吸光度，最后将吸光度值与10mgD.L无水葡萄糖对照品经上述步骤处理后在487 nm处测定吸光度进行对比，得到茶多糖的含量。
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| CN201810983126.3A CN110862462A (zh) | 2018-08-27 | 2018-08-27 | 一种茶多糖的提取方法 |
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| CN (1) | CN110862462A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114602208A (zh) * | 2022-02-26 | 2022-06-10 | 祁鹏军 | 一种提取茶叶多糖含量的提取装置和方法 |
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2018
- 2018-08-27 CN CN201810983126.3A patent/CN110862462A/zh not_active Withdrawn
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