CN110669820A - 一种微生物药敏快速检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及药敏检测技术领域，特别涉及一种微生物药敏快速检测方法。该方法包括：设置抗生素处理组和不含抗生素的对照组，抗生素处理组采用标记有稳定性同位素、含有一系列浓度梯度的抗生素的培养基孵育待测微生物；稳定性同位素为15N的氮源和/或13C的碳源；取孵育后的微生物进行质谱检测，比较抗生素处理组的微生物质谱图与对照组的微生物质谱图的相似度，得到该抗生素对待测微生物的最低抑菌浓度。本发明检测方法将检测时间缩短至6小时内，甚至20分钟至1小时，极大的减少了临床等待时间，有利于指导合理用药，对抗微生物耐药。本方法可以得出准确的MIC值，且无需多次分离，洗涤步骤，节省了大量人力物力和时间。

Description

一种微生物药敏快速检测方法
技术领域
本发明涉及药敏检测技术领域，特别涉及一种微生物药敏快速检测方法。
背景技术
抗生素的问世，堪称人类抗击感染性疾病的里程碑。但随着抗微生物药物的大规模使用，其耐药性日益严重。抗微生物药物耐药(Antimicrobial Resistance，AMR)已经对实现全民健康构成巨大威胁，并危及许多可持续发展目标的进展，包括健康、粮食安全、清洁水、环境卫生等。联合国抗微生物药物耐药性问题机构间协调小组(IACG)2019年发文警告称：全球每年至少有70万人死于耐药性疾病，其中23万人死于耐多药结核病。如果不采取行动，到2050年，全球每年可能会有1000万人死于耐药性疾病。
抗微生物药物敏感性试验(AST)在控制抗微生物药物耐药(AntimicrobialResistance，AMR)的发展中起着重要作用，因为它提供了有关特定菌株对不同药物的耐药水平的有价值信息。医生依靠这些信息才能够提供最合适的处方并避免滥用药物。传统的药敏检测方法，如肉汤(微量)稀释，纸片扩散和E-实验法均是基于细菌的宏观生长，需要大量的初始微生物浓度，通常需要进行24-48小时的增菌培养，而在菌血症和败血症的情况下，还需要血瓶培养的步骤，总的增菌培养时间甚至需要5天，而药敏测试本身则需要额外的8-24小时，这极大地限制了测试的速度。在此期间，为了防止患者状况恶化，临床医生将经常开大剂量广谱活性的抗生素以确保其对目标病原体的功效，而广谱抗生素的大量使用将进一步加剧了耐药情况的发展，造成恶性循环。
对于临床来说，住院病人的理想的检验结果回报时间(Turn Around Time，TAT)应在数小时之内，近年来，人们提出了许多可用于快速药敏的新技术，如微流控、微阵列、拉曼光谱、电化学、原子力显微镜等。上述方法可以实现0.5-6h内完成药敏检测，但多数仍处于实验室研究阶段，因为各方面限制，无法真正应用于临床。
中国发明专利201810134176.4公开了一种基于拉曼光谱-重水同位素标记的耐药菌药敏性快速检测方法和判断合理用药的方法，利用抗生素作用下耐药菌和敏感菌活性不同，从而C-D拉曼峰强度不同的原理，将待检物在含有重水的培养液中孵育，其中含抗生素的作为处理组，不含抗生素的作为对照组，将孵育后的待检物离心清洗后进行拉曼检测，根据处理组和对照组的C-D/(C-D+C-H)比值不同，判断菌株的敏感或耐药。该实现了0.5至1小时内的药敏性快速检测。但该方法仍有以下缺点：该方法仅能通过设置比值的阈值，判断细菌是敏感或中介，但是无法给出准确的MIC值；水参与微生物的各种生化反应，代谢循环迅速，无法保证形成稳定的C-D键，会造成检测时差异较大。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种微生物药敏快速检测方法。该方法快速、操作简单，且可以得出准确的MIC值。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种微生物药敏快速检测方法，包括如下步骤：
设置抗生素处理组和不含抗生素的对照组，抗生素处理组采用标记有稳定性同位素、含有一系列浓度梯度的抗生素的培养基孵育待测微生物；不含抗生素的对照组采用标记有稳定性同位素的培养基孵育待测微生物；稳定性同位素为15N的氮源和/或13C的碳源；
取孵育后的微生物进行质谱检测，比较抗生素处理组的微生物质谱图与对照组的微生物质谱图的相似度，得到该抗生素对待测微生物的最低抑菌浓度。
本发明公开了一种基于包含13C标记碳源和或15N标记氮源培养基的快速药敏检测方法，本方法采用稳定同位素标记的，多数微生物都能利用的碳源和/或氮源，通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)分析加抗生素培养后特征蛋白基团同位素离子峰与原基团离子峰相对强度，并与对照孔(无抗生素孔)的同位素离子峰与原基团离子峰相对强度进行比较，得出微生物在不同浓度抗生素作用下对同位素标记培养基的利用率，进而判断微生物生长是否被抗生素抑制，从而得出最低抑菌浓度(MIC值)，且仅需6小时，甚至20分钟-1小时即可直接进行质谱分析得出准确的药敏结果，无需离心，清洗等步骤。
本发明原理：本发明采用15N及13C稳定性同位素标记的氮源、碳源作为微生物生长的必须营养物质，微生物大量利用15N及13C合成蛋白质、核酸、脂质等大分子物质，代谢活性越高、繁殖分裂越快，大分子结构中15N及13C的比例越大，相应的质谱中电离的特征基团的分子量也会越大。如果受到抗菌药物的影响，微生物代谢活性降低或被杀灭，则其大分子结构中15N及13C的含量将减少，质谱中电离的特征基团的分子量相对较少，通过特征基团分子量的变化，反应抗菌药物对微生物代谢活性剂生长的影响，进而得出最低抑菌浓度。
本发明采用的同位素标记法，是利用了生物生长的规律，将培养基中微生物生长所必须的碳源、氮源中的碳、氮原子，分别替换成了原子内中子数多一个的13C和15N，这样微生物分裂繁殖时，将利用同位素标记的碳源、氮源合成蛋白质，其蛋白结构中的碳、氮原子就比普通微生物多了一个分子量，从而使蛋白整体分子量明显增加。因为中子是电中性，所以质谱检测时，电离的蛋白基团电荷数不变，但分子质量增加，基团的质荷比(m/z)增加。而质荷比的增加量与细胞分裂代数有关，分裂代数越多，同位素标记的碳、氮原子所占比例越高，质荷比越大，而被抗生素杀死或者抑制生长的微生物，将不会利用或者很少利用培养基中的同位素标记氮源和碳源。通过对比分析不同浓度抗生素处理后微生物的质谱图中同位素离子峰与原基团离子峰相对强度变化，能够精确的反应微生物生长繁殖的活性，从而得出抗生素对该微生物的最低抑菌浓度。
作为优选，碳源为葡萄糖、乙酸钠或蔗糖中的一种或几种。
作为优选，标记有13C的碳源占总碳源的质量百分含量为30％～100％。
在本发明提供的具体实施例中，标记有13C的碳源占总碳源的质量百分含量为50％。
作为优选，氮源为无机氮源和/或有机氮源。
作为优选，无机氮源为氯化铵、硫酸铵、硝酸钾、硝酸铵中的一种或几种。
作为优选，有机氮源为尿素和/或氨基酸。
作为优选，标记有15N的氮源占总氮源的质量百分含量为30％～100％。
在本发明提供的具体实施例中，标记有15N的氮源占总氮源的质量百分含量为50％。
作为优选，抗生素的浓度范围为0mg/mL～10mg/mL。
在本发明提供的具体实施例中，抗生素的浓度范围为0.03mg/mL～4mg/mL。
作为优选，抗生素的浓度梯度为1～10倍。
在本发明提供的具体实施例中，抗生素的浓度梯度为2倍。
作为优选，待测微生物在培养基中的浓度为(1.0～6.0)×108/mL。
在本发明提供的具体实施例中，待测微生物在培养基中的浓度为1.5×108/mL。
作为优选，孵育的时间为20分钟～1小时。
优选地，孵育的时间为30分钟。
作为优选，最低抑菌浓度为相似度低于50％～70％所对应的抗生素处理组中最低的抗生素浓度。
优选地，最低抑菌浓度为相似度低于70％所对应的抗生素处理组中最低的抗生素浓度。
本发明提供了一种微生物药敏快速检测方法，该方法包括如下步骤：设置抗生素处理组和不含抗生素的对照组，抗生素处理组采用标记有稳定性同位素、含有一系列浓度梯度的抗生素的培养基孵育待测微生物；稳定性同位素为15N的氮源和/或13C的碳源；取孵育后的微生物进行质谱检测，比较抗生素处理组的微生物质谱图与对照组的微生物质谱图的相似度，得到该抗生素对待测微生物的最低抑菌浓度。本发明具有的技术效果为：
(1)碳、氮是有微生物的主要组成元素，与微生物的代谢活动机生长繁殖密切相关，本发明巧妙采用不衰变，不辐射分解，不污染环境，没有毒性的碳氮同位素标记碳源、氮源，通过检测15N及13C在微生物体内的变化，直接反应了微生物活性。
(2)与传统的基于纯培养的药敏性检测方法需18-24小时相比，同位素-质谱法快速药敏将检测时间缩短至6小时内，甚至20分钟至1小时，极大的减少了临床等待时间，有利于指导合理用药，对抗微生物耐药。
(3)与其他基于显微观察或微流控技术的快速药敏方法相比，本方法无需设计开发新的方法及材料、设备、仪器等，仅采用现有的成熟的MALDI-TOFMS微生物鉴定技术，通过分析抗生素孔与对照孔内微生物的特征图谱变化，即可给出准确的MIC值。
(4)与前所述拉曼-重水同位素标记的耐药菌药敏性快速检测方法相比，本方法可以得出准确的MIC值，且无需多次分离，洗涤步骤，节省了大量人力物力和时间。
(5)操作简便，仅需加入培养基孵育20分钟-1小时。
(6)通过不同抗菌药物浓度下微生物的特征曲线分析，可以区分不同作用机制的抑菌和杀菌类抗菌药物，应用范围广。
附图说明
图1为大肠埃希氏菌鉴定质谱图(普通培养基)；
图2为大肠埃希菌质谱特征峰(普通培养基)；
图3为大肠埃希菌质谱特征峰(稳定同位素培养基)。
具体实施方式
本发明公开了一种微生物药敏快速检测方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明检测方法包括如下步骤：
(1)本发明采用15N及13C稳定性同位素标记培养基，所述培养基的配方是：包括标记有15N的氮源和或标记有13C的碳源。其中碳源可以是葡萄糖、乙酸钠、蔗糖等，氮源可以是无机氮源如氯化铵、硫酸铵、硝酸钾、硝酸铵等，或者是有机氮源如尿素。
(2)其样本孵育步骤如下：将一定浓度的待测微生物添加至上述含有稳定同位素作为氮源和碳源的培养液孵育孔中孵育，不同孵育孔中含有一系列2倍稀释浓度的抗生素，其中抗生素的浓度范围为1/64—64倍MIC值，同时设置不含抗生素的对照孔。孵育时间20分钟-1小时，之后每孔分别取出10-100微升菌悬液，直接采用质谱微生物鉴定步骤进行检测。
(3)质谱检测步骤如下：将吸取的菌液转移到MALDI-TOFMS的靶板上，加入1-5微升基质液(通常为烟酸、α-氰基-4-羟基肉桂酸、芥子酸、3-羟基吡啶甲酸等，不同的待测样品需根据质谱说明书需求选择不同的基质)，对不同孔内微生物逐一进行质谱图谱采集，将所有含有抗生素孔内微生物质谱图与对照孔内微生物质谱图中特征基团的同位素离子峰与原基团离子峰相对强度变化比较分析，相似度低于50％-70％的图谱所对应的孔，表示微生物活性显著降低或被抗生素杀灭，记为无活性孔，抗生素浓度最低的无活性孔内的抗生素浓度，即为该抗菌药物对此微生物的最低抑菌浓度(MIC)。
(4)所述判断MIC值的方法：所有含有抗生素图谱与对照孔内微生物图谱进行比较分析，相似度低于50％-70％的图谱所对应的孔，表示微生物活性显著降低或被抗生素杀灭，记为无活性孔，抗生素浓度最低的无活性孔内的抗生素浓度，即为该抗菌药物对此微生物的最低抑菌浓度(MIC)。其中相似度比较方法包含但不限于皮尔森相关、斯皮尔曼等级相关等方法。相似度阈值范围为50％-70％，优选的，是70％。
本发明提供的微生物药敏快速检测方法中所用试剂或仪器均可由市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1
菌种采用大肠埃希菌质控菌株：ATCC25922；抗生素选择左氧氟沙星。用含有50％15N-KNO3及50％13C6-葡萄糖的全合成培养基，配制浓度为4mg/mL、2mg/mL、1mg/mL、0.5mg/mL、0.25mg/mL、0.12mg/mL、0.06mg/mL、0.03mg/mL、0mg/mL的左氧氟沙星溶液，每个浓度取100μL，分别加入96孔板内，制成9个浓度梯度反应孔。
大肠埃希菌ATCC25922用上述培养基配制成0.5麦氏浓度的菌液，上述反应孔中分别加入10μL菌液。之后将96孔板放入37℃恒温培养箱培养孵育1h，孵育完成后分别从每个反应孔抽取20μL菌液在质谱仪中得到各自的质谱图，分别与0mg/mL孔进行相似度比较，相似度低于50％认为未生长，未生长的最低浓度即为MIC值。
数据采集过程及对取得的质谱图及数据进行分析。首先在普通培养条件下(不加入稳定同位素培养基)，采集微生物质谱图(如图1)，其中横坐标表示质荷比(m/z)，纵坐标表示丰度值(M)。因为质谱图峰值较多，选取峰值较高的1-20个峰作为特征峰，分析时仅分析特征峰的变化(如图2)。稳定同位素培养的微生物，因细胞内的C、N元素替换为了13C和15N，电离的特征蛋白基团分子量增加，出现明显的同位素离子峰(图3)。
首先，计算每个孔内同位素离子峰与普通离子峰的相对丰度及特征峰整体相对丰度。
相对丰度M＝M’/M0
其中M’指同位素离子峰丰度，M0指原蛋白基团离子峰丰度。
整体相对丰度M总＝(M1+M2+M3…+Mn)/n，其中n为特征离子峰个数。
计算MIC(最低抑菌浓度时)分别求出各浓度培养孔内的整体相对丰度(M总1、M总2、M总3、….M总n)，用各孔的整体相对丰度与对照孔整体相对丰度(M总0)比较，得出的值称为相对活性A，该活性A反应微生物受抗菌药物影响下，生长分裂的速度，A越高，说明微生物生长越不受抗菌药物影响，A越低，说明微生物生长受到了抗生素的抑制或杀灭。
根据不同的微生物-抗菌药物组合，通过与金标准的微量肉汤稀释法比较，设定不同的A值作为判断MIC值得阈值，高于阈值的反应孔中，抗菌药物浓度的孔所对应的浓度，即为MIC值。
结果如下：
表1大肠埃希氏菌-左氧氟沙星同位素质谱相对活性
左氧氟沙星属于喹诺酮类药物，是一种速效杀菌剂，根据与肉汤稀释法临床试验对比，设定其阈值为70％，因此，根据上表的相对活性A，判断左氧氟沙星对大肠埃希菌ATCC25922的MIC值为1mg/mL。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种微生物药敏快速检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
设置抗生素处理组和不含抗生素的对照组，抗生素处理组采用标记有稳定性同位素、含有一系列浓度梯度的抗生素的培养基孵育待测微生物；不含抗生素的对照组采用标记有稳定性同位素的培养基孵育待测微生物；所述稳定性同位素为15N的氮源和/或13C的碳源；
取孵育后的微生物进行质谱检测，比较抗生素处理组的微生物质谱图与对照组的微生物质谱图的相似度，得到该抗生素对待测微生物的最低抑菌浓度。
2.根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述碳源为葡萄糖、乙酸钠或蔗糖中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述标记有13C的碳源占总碳源的质量百分含量为30％～100％。
4.根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述氮源为无机氮源和/或有机氮源，所述无机氮源为氯化铵、硫酸铵、硝酸钾、硝酸铵中的一种或几种，所述有机氮源为尿素和/或氨基酸。
5.根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述标记有15N的氮源占总氮源的质量百分含量为30％～100％。
6.根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述抗生素的浓度范围为0mg/mL～10mg/mL。
7.根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述抗生素的浓度梯度为1～10倍。
8.根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述待测微生物在培养基中的浓度为(1.0～6.0)×108/mL。
9.根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述孵育的时间为20分钟～1小时。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的快速检测方法，其特征在于，所述最低抑菌浓度为相似度低于50％～70％所对应的抗生素处理组中最低的抗生素浓度。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113376245A (zh) * 2021-02-26 2021-09-10 广东工业大学 用于检测微生物活性的标记峰筛选方法及应用
CN113897412A (zh) * 2021-09-23 2022-01-07 中国科学院城市环境研究所 一种荧光法耐药微生物的筛选方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10044132A1 (de) * 2000-09-06 2002-03-14 Basf Ag Verfahren zur qualitativen und quantitativen Analyse komplexer Gemische chemischer Verbindungen mit MALDI-TOF-Massenspektrometrie
CN104284984A (zh) * 2012-02-29 2015-01-14 哈佛大学校长及研究员协会 抗生素药敏性的快速测试
CN110305933A (zh) * 2019-08-20 2019-10-08 郑州安图生物工程股份有限公司 一种快速检测药敏的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10044132A1 (de) * 2000-09-06 2002-03-14 Basf Ag Verfahren zur qualitativen und quantitativen Analyse komplexer Gemische chemischer Verbindungen mit MALDI-TOF-Massenspektrometrie
CN104284984A (zh) * 2012-02-29 2015-01-14 哈佛大学校长及研究员协会 抗生素药敏性的快速测试
CN110305933A (zh) * 2019-08-20 2019-10-08 郑州安图生物工程股份有限公司 一种快速检测药敏的方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
J. S. JUNG ET AL.: ""Rapid detection of antibiotic resistance based on mass spectrometry and stable isotopes"", 《EUR J CLIN MICROBIOL INFECT DIS》, vol. 33, 14 December 2013 (2013-12-14), pages 949 - 955, XP035313703, DOI: 10.1007/s10096-013-2031-5 *
KATRIN SPARBIER ET AL.: ""MALDI Biotyper-Based Rapid Resistance Detection by Stable-Isotope Labeling"", 《JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY》 *
KATRIN SPARBIER ET AL.: ""MALDI Biotyper-Based Rapid Resistance Detection by Stable-Isotope Labeling"", 《JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY》, vol. 51, no. 11, 4 September 2013 (2013-09-04), pages 3741 - 3748 *
P. A. DEMIREV ET AL.: ""Establishing Drug Resistance in Microorganisms by Mass Spectrometry"", 《J. AM. SOC. MASS SPECTROM.》 *
P. A. DEMIREV ET AL.: ""Establishing Drug Resistance in Microorganisms by Mass Spectrometry"", 《J. AM. SOC. MASS SPECTROM.》, 9 April 2013 (2013-04-09), pages 1 - 8 *
夏佑林等: "《生物大分子多维核磁共振》", vol. 1, 中国科学技术大学出版社, pages: 155 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113376245A (zh) * 2021-02-26 2021-09-10 广东工业大学 用于检测微生物活性的标记峰筛选方法及应用
CN113897412A (zh) * 2021-09-23 2022-01-07 中国科学院城市环境研究所 一种荧光法耐药微生物的筛选方法

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