CN110632151B - 一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，包括如下步骤：1）室温下制备结构转换式电化学适配体传感器；2）将结构转换式电化学适配体传感器作为工作电极，与参比、对电极组成一个三电极检测体系，并将三电极放置在缓冲溶液中；3）对步骤2）得到的整体装置进行降温，使装置温度低于室温并维持稳定，通过电化学方法测量无待测物质时的电流信号；4）将待测物质加入到缓冲溶液中并混匀，测量待测物质存在时的电流信号；5）将步骤3）和4）得到的电流信号转换为待测物质存在时的传感器信号增益，通过与该传感器的校准曲线对比，得到待测物质的浓度信息。该方法不仅有利于提高传感器的灵敏度，而且易于实现，操作简便。

Description

一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法
技术领域
本发明属于核酸适配体技术领域，具体涉及一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法。
背景技术
核酸适配体是指一小段通过指数富集配体进化系统筛选得来的寡核苷酸序列，一般由15~150个核苷酸组成，能与靶标物质专一性紧密结合，故而又被称为“化学抗体”。相比于抗原抗体，适配体具有种类多元化、高化学稳定性、可逆等优点。电化学适配体传感器将电化学方法的灵敏度与基于适体的识别所提供的特异性相结合，开启了对广泛的先前无法实现的目标的电化学检测。而利用结构转换核酸适体的电化学适配体传感器是一种基于构象变化直接检测模式的电化学传感器。它将靶标诱导构象转变的适配体通过自组装单分子层修饰在电极表面，该适配体3’尾端共价连接有电化学活性的标签，适配体可以将靶标的浓度信息转化为电化学信号标签的电信号，从而对靶标物进行定量检测。这种传感器平台具有无试剂和可再生的特点，已经引起了研究人员的广泛关注。这种将电化学信号传导与适配体构象的变化耦合在分析传感中提供了若干优点：首先，因为氧化还原活性分子与核酸适体共价连接，所以电化学信号的变化仅由适体靶诱导的构象变化引起，这种信号传导机制不太容易产生由基质元件和电极表面之间的非特异性相互作用产生的信号；其次，因为氧化还原活性报道分子与核酸适体共价连接，所以传感器是无外源试剂且可逆的，这样可以在不添加外源试剂的情况下实现传感器功能，从而可以实时检测分析物浓度的变化。这些属性使这类传感器适合于现场可部署设备的开发。
然而，通常经过SELEX技术筛选而来的适配体并不具有结构转换功能，因此需要额外的工程步骤将结构转换功能引入这样的适体中，这需要对适配体进行截断，鉴定适体的靶结合域，然后使其去稳定化，使得适体可以经历大的靶诱导的构象变化。不幸的是，适体去稳定化极大地降低了其靶标亲和力。所以结构转换式电化学适配体传感器灵敏度往往无法到达实际应用的程度。例如用于检测可卡因、卡那霉素、多柔比星、ATP等小分子，受限于分子与靶标物质的亲和力，传感器的灵敏度多为微摩尔级别，这显然无法实际应用于实际检测环境中。因此，有必要开发一种方法，在保留折叠式适配体传感器无需外源试剂、可快速响应、实时监测靶标物质浓度变化等优点的同时，实现传感器信号放大，提高传感器的灵敏度，降低其检测线，从而扩大结构转换式适配体传感器应用范围，使其能够应用于复杂的实际检测场景。
为了提高电化学适配体传感器的灵敏度，通常会采用如酶循环放大、互补链与靶标竞争反应、滚环扩增、使用纳米材料或给电子体改性电极等策略。虽然传感器的灵敏度可以得到改善，但同时也使传感器制备过程变得更繁琐，延长了检测时间，使操作复杂化，传感器的稳定性也因此变得难以调控，并且以上策略也消除了结构转换式电化学适配体无需外加试剂的最大特点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，该方法不仅有利于提高传感器的灵敏度，而且易于实现，操作简便。
为实现上述目的，本发明的技术方案是：一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，包括如下步骤：
1）室温下制备结构转换式电化学适配体传感器，通过自组装将硫醇化的结构转换核酸适配体组装在金电极表面，并使用封闭剂封闭残余位点，冲洗掉多余物质，得到结构转换式电化学适配体传感器；
2）将结构转换式电化学适配体传感器作为工作电极，与参比、对电极组成一个三电极检测体系，并将三电极放置在缓冲溶液中；
3）对步骤2）得到的整体装置通过降温技术进行降温，使整体装置的温度低于室温并维持稳定，通过电化学方法测量无待测物质时的电流信号，记为i1；
4）将待测物质加入到缓冲溶液中并混匀，测量待测物质存在时的电流信号，记为i2；
5）将步骤3）和4）得到的电流信号转换为待测物质存在时的传感器信号增益，通过与该传感器的校准曲线对比，得到待测物质的浓度信息。
进一步地，步骤1）中，所述金电极为温度可调的温控金电极，进而得到可独立控温的结构转换式电化学适配体传感器；步骤3）中，在对整体装置通过降温技术进行降温，使整体装置的温度低于室温并维持稳定的同时，使用温度计实时监测溶液温度，仅调高温控金电极的温度，使其温度稳定在设定温度范围内，再通过电化学方法记录无待测物时的电流信号。
进一步地，所述降温技术为对整体装置进行冰水浴，使整体装置的温度降低并稳定在0~4℃范围内，同时调高温控金电极的温度，使其温度稳定在2~10℃范围内。
进一步地，步骤1）中，所述核酸适配体为预先合成的、可与待测物质特异性结合且具有结构转换功能的适配体；适配体的3’端修饰有电化学活性物质，电化学活性物质包括亚甲基蓝或二茂铁；适配体的5’端修饰有二硫键，使用前在避光室温下通过还原剂还原为巯基。
进一步地，步骤1）中，所述金电极的电极尺寸范围为0.1 ~10 mm。
进一步地，步骤2）中，所述缓冲溶液为pH=6~10，Tris与钠盐和镁盐的混合液。
进一步地，步骤3）中，所述降温技术为将整体装置置于恒温冰箱中进行控温或对整体装置进行低温水浴，使整体装置的温度降低并稳定在1~15℃范围内。
进一步地，步骤3）中，所述电化学方法为方波伏安法、交流伏安法或脉冲伏安法。
进一步地，步骤5）中，将电流信号转换为传感器信号增益的计算公式为：
信号增益 = (i2-i1) / i1*100 % 。
进一步地，步骤5）中，所述校准曲线为不同浓度靶标与传感器信号增益的关系曲线。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1、无需添加外加试剂，通过温度对电荷传递速率的影响以及对流富集作用，保留了传感器无外源试剂下即时响应靶标浓度变化、适体结构可逆可重复使用的特点；仅通过改变传感器的使用温度，极大的增大了传感器的信号增益，提高灵敏度，可降低2-3个数量级的检测限；
2、适配体功能化后的电极在4℃下亦可以长期存储，而且可以多次重复使用，降低成本；
3、冰水浴装置搭建也十分简单便捷，而且所需样品溶液较少（3mL~5mL），且冰浴可以在短时间内（5~10min）溶液温度即可稳定在1.0±0.5℃，在Tris缓冲液中检测限可低至1nM，在实际应用场景中亦可轻易实现，具有投入生产应用的前景；
4、本发明也可以直接对血样进行检测，检测限低至6.4nM。该方法在医疗点低成本的实时监测和现场快速检测有着重大的实用前景。
附图说明
图1为本发明实施例中结构转换式电化学适配体传感器的结构示意图。
图2为本发明实施例的方法进行低温水浴实验的示意图。
图3为本发明实施例中当靶标浓度为5、50、500μM时，结构转换式电化学适配体传感器信号强度随低温水浴温度变化的曲线图。
图4为本发明实施例中当Te为1℃、5℃、25℃时，结构转换式电化学适配体传感器信号强度随靶标浓度变化的曲线图。
图5为本发明实施例中当Te为1℃、Ts为5℃与Te为5℃时，结构转换式电化学适配体传感器信号强度随靶标浓度变化的曲线对比图。
图中：1-PT100温度探头，2-适配体功能化的温控金电极，3-参比电极，4-铂丝对电极，5-PID温度控制器，6-电化学工作站。
具体实施方式
为便于理解本发明，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供了一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，包括如下步骤：
1）室温下制备结构转换式电化学适配体传感器，通过自组装将硫醇化的结构转换核酸适配体组装在金电极表面，并使用封闭剂封闭残余位点，冲洗掉多余物质，得到结构转换式电化学适配体传感器，其结构如图1所示。
2）将结构转换式电化学适配体传感器作为工作电极，与参比、对电极组成一个三电极检测体系，并将三电极放置在缓冲溶液中。
3）对步骤2）得到的整体装置通过降温技术进行降温，使整体装置的温度低于室温并维持稳定，通过电化学方法测量无待测物质时的电流信号，记为i1。
4）将待测物质加入到缓冲溶液中并混匀，测量待测物质存在时的电流信号，记为i2。
5）将步骤3）和4）得到的电流信号转换为待测物质存在时的传感器信号增益，通过与该传感器的校准曲线对比，得到待测物质的浓度信息。
在本实施例中，为了进一步提高传感器的信号响应，步骤1）中，所述金电极采用温度可调的温控金电极（专利号：ZL201820687766.5），进而得到可独立控温的结构转换式电化学适配体传感器。相应地，步骤3）中，对整体装置通过冰水浴进行降温，使整体装置的温度低于室温并维持稳定在0~4℃范围内，同时使用温度计实时监测溶液温度，调高温控金电极的温度，使其温度稳定在2~10℃范围内，再通过电化学方法记录无待测物时的电流信号。设置温度计监测溶液温度的目的，是因为调高温控金电极时溶液温度会改变，如果溶液温度升高太多则需要进一步调控电极及冰水浴，使溶液温度稳定在设定范围内。本发明方法进行低温水浴实验的结构如图2所示。
步骤1）中，所述核酸适配体为预先合成的、可与待测物质特异性结合且具有结构转换功能的适配体；适配体的3’端修饰有电化学活性物质，电化学活性物质包括亚甲基蓝或二茂铁；适配体的5’端修饰有二硫键，使用前在避光室温下通过还原剂还原为巯基。所述金电极的电极尺寸范围为0.1 ~10 mm，优选范围0.5 ~5 mm。
步骤2）中，所述缓冲溶液优选为pH=6~10，Tris与钠盐和镁盐的混合液。
步骤3）中，所述电化学方法优选为方波伏安法（SWV）、交流伏安法（ACV）或脉冲伏安法（NPV）。所述降温技术还可以为将整体装置置于高精度恒温冰箱中进行控温或对整体装置进行低温水浴，使整体装置的温度降低并稳定在1~15℃范围内。
步骤5）中，所述校准曲线为不同浓度靶标与传感器信号增益的关系曲线。将电流信号转换为传感器信号增益的计算公式为：
信号增益 = (i2-i1) / i1*100 % 。
下面结合附图及具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，包括如下步骤：
（1）可卡因适配体的DNA序列为：5’-SH-HS-(CH2)6–AGA CAA GGA AAA TCC TTC AATGAA GTG GGT CT-(CH2)6-MB-3’；将1μL 200μM亚甲基蓝修饰的适配体与9μL 10 mM的TCEP在的7mL试管中室温(25℃)避光孵育2个小时来还原探针DNA的双硫键。最后用10mM pH=7.2PBS溶液稀释到8mL，得到8 mL，25 nM 硫醇化的适配体溶液。
（2）将温控金电极打磨抛光成镜面，经二次蒸馏水超声清洗移除抛光粉，紧接着在0.5 M H2SO4中进行电化学清洁直至循环伏安图出现三个经典的氧氧化峰，最后用氮气吹扫得到干净的电极表面。处理好的温控金电极浸没在步骤（1）得到的巯基化的适配体溶液中（450μL），在室温下避光孵育1小时，通过自组装单分子层将适配体接在温控金电极表面；再用巯基己醇对温控金电极表面残余位点进行封闭1小时，随后用去离子水轻轻冲洗温控金电极表面，冲洗掉非特异性吸附的适配体和MCH，得到适配体功能化后的温控金电极，并与参比电极、铂丝对电极和缓冲液组成得到结构转换式电化学适配体传感器。
（3）将步骤（2）得到的结构转换式电化学适配体传感器放入低温水浴中，并连接电化学工作站，传感器中适配体功能化后的温控金电极与PID温度控制器，静置10分钟，采用PT100温度探头测定传感器中缓冲液的温度Te，稳定至1℃后。
（4）直接加入待测靶标，轻轻混匀，静置1min使待测靶标与适配体充分结合，得到待测靶标浓度；或者使用PID温度控制器加热适配体功能化后的温控金电极至温度Ts为5℃后，再加入待测靶标，轻轻混匀，静置1min使待测靶标与适配体充分结合，得到待测靶标浓度。
性能测试：
图3所示，当靶标物浓度为5、50、500μM时，结构转换式电化学适配体传感器信号增益随着温度降低而增高，低于25℃均有信号增强。图4为当传感器使用温度为1℃，5℃时传感器性能与25℃正常使用时的比较；可以看出传感器在宽浓度范围的信号增益增强，在低浓度放大了信号，提高了传感器的灵敏度，降低了2-3个数量级的检测限。由图5可以看出：在Te为5℃情况下，由于温度降低，适配体传感器信号增强。然后在Te为1℃情况下仅加热配体功能化后的温控金电极表面温度为5℃，此时电极表面和溶液存在温度梯度，因此溶液会向电极表面流动，加快了靶标物的传质速率，进一步提高传感器的响应。相较于室温25℃下正常使用的传感器，低温水浴加热法最大可以提高2-3倍信号增益（1μM），1000μM时可以提高至1.5倍；降低约3个数量级的检测限，提高了传感器的灵敏度；低温水浴加热5℃（有温差）比整体温度5℃（无温差）的信号响应要高，体现了热电极富集的效果。
以上是本发明的较佳实施例，凡依本发明技术方案所作的改变，所产生的功能作用未超出本发明技术方案的范围时，均属于本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1）室温下制备结构转换式电化学适配体传感器，通过自组装将硫醇化的结构转换核酸适配体组装在金电极表面，并使用封闭剂封闭残余位点，冲洗掉多余物质，得到结构转换式电化学适配体传感器；
2）将结构转换式电化学适配体传感器作为工作电极，与参比、对电极组成一个三电极检测体系，并将三电极放置在缓冲溶液中；
3）对步骤2）得到的整体装置通过降温技术进行降温，使整体装置的温度低于室温并维持稳定，通过电化学方法测量无待测物质时的电流信号，记为i1；
4）将待测物质加入到缓冲溶液中并混匀，测量待测物质存在时的电流信号，记为i2；
5）将步骤3）和4）得到的电流信号转换为待测物质存在时的传感器信号增益，通过与该传感器的校准曲线对比，得到待测物质的浓度信息；
步骤1）中，所述金电极为温度可调的温控金电极，进而得到可独立控温的结构转换式电化学适配体传感器；步骤3）中，在对整体装置通过降温技术进行降温，使整体装置的温度低于室温并维持稳定的同时，使用温度计实时监测溶液温度，仅调高温控金电极的温度，使其温度稳定在设定温度范围内，再通过电化学方法记录无待测物时的电流信号。
2.根据权利要求1所述的一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，其特征在于，所述降温技术为对整体装置进行冰水浴，使整体装置的温度降低并稳定在0~4℃范围内，同时调高温控金电极的温度，使其温度稳定在2~10℃范围内。
3.根据权利要求1所述的一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，其特征在于，步骤1）中，所述核酸适配体为预先合成的、可与待测物质特异性结合且具有结构转换功能的适配体；适配体的3’端修饰有电化学活性物质，电化学活性物质包括亚甲基蓝或二茂铁；适配体的5’端修饰有二硫键，使用前在避光室温下通过还原剂还原为巯基。
4.根据权利要求1所述的一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，其特征在于，步骤1）中，所述金电极的电极尺寸范围为0.1 ~10 mm。
5.根据权利要求1所述的一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，其特征在于，步骤2）中，所述缓冲溶液为pH=6~10，Tris与钠盐和镁盐的混合液。
6.根据权利要求1所述的一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，其特征在于，步骤3）中，所述降温技术为将整体装置置于恒温冰箱中进行控温或对整体装置进行低温水浴，使整体装置的温度降低并稳定在1~15℃范围内。
7.根据权利要求1所述的一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，其特征在于，步骤3）中，所述电化学方法为方波伏安法、交流伏安法或脉冲伏安法。
8.根据权利要求1所述的一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，其特征在于，步骤5）中，将电流信号转换为传感器信号增益的计算公式为：
信号增益 = (i2-i1) / i1*100 % 。
9.根据权利要求1所述的一种提高结构转换式电化学适配体传感器灵敏度的方法，其特征在于，步骤5）中，所述校准曲线为不同浓度靶标与传感器信号增益的关系曲线。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023049324A1 (en) * 2021-09-24 2023-03-30 University Of Cincinnati Electrochemical aptamer sensor monolayer incubation with improved stability

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102608177B (zh) * 2012-03-02 2013-09-18 北京航空航天大学 基于离子通道和适配体制备生物传感器检测凝血酶的方法
CN107228892B (zh) * 2017-05-19 2019-08-09 福州大学 温度可控的电化学汞离子传感器及其制备方法
EP3505934A1 (en) * 2017-12-29 2019-07-03 Blink AG A sensor body for binding and/or enriching and/or detecting an analyte in a sample
CN208399426U (zh) * 2018-05-09 2019-01-18 福州大学 一种电化学加热温控电极
CN109521073B (zh) * 2018-12-26 2021-02-26 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 一种利用电化学发光适配体传感器检测双酚a含量的方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023049324A1 (en) * 2021-09-24 2023-03-30 University Of Cincinnati Electrochemical aptamer sensor monolayer incubation with improved stability

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