CN1105491C - 甘蓝型油菜隐性核不育制种方法 - Google Patents

Abstract

甘蓝型油菜隐性核不育三系选育及制种技术，本发明选育出隐性核不育临时完全保持系，实行隐性核不育纯合两用系、TAM系、恢复系三系配套制种，从而解决了隐性核不育制种难题，提高制种效率，制种产量提高40-60%，省工省时，提高制种纯度，制种简便，易于推广应用。

Description

甘蓝型油菜隐性核不育制种方法

技术领域

本发明属甘蓝型油菜隐性核不育杂种优势利用领域

背景技术

国内外大量研究证明，油菜品种间杂种优势明显，各国都把雄性不育作为油菜杂种优势利用研究重点。雄性不育包括质不育和核不育两种类型。目前，国内外利用的质不育系主要是Polima CMS和Ogu CMS，前者的不育性往往受环境条件影响，制种风险大，而且恢复源偏少，选育强优势组合受到限制。后者虽然不育性稳定，但存在缺绿症，在油菜中找不到恢复系等缺点，在我国研究较少，未见有组合应用于生产的报道，在国外，通过原生质体融合技术已使其缺绿症得到改良，由于没有恢复系，这一系统主要是利用掺合杂种(80％杂种(不育)+20％授粉者(正常品系))，目前在欧洲已有部分掺合杂种投放市场，但这种掺合杂种受气候影响较大，稳产性差，在花期雨水较多的地区很难推广应用。核不育在我国研究较多，与波里马等多数质不育相比，油菜核不育的共同优点是不育性稳定，不受环境条件的影响，可避免不育细胞质的负效应和细胞质单一化的潜在危险，易于转育。目前，利用的核不育主要有双隐性核不育“二系”系统和显性互作核不育“三系”系统。前者最主要的优点是恢复谱广，易选配强优势组合。如目前国内已通过审定并大面积推广的核不育杂种(如蜀杂1号、6号、7号；油研5号、7号等)都是利用这一类核不育育成，但是这一类核不育找不到保持系，在大面积制种时需于母本行拔除50％可育株，费工费时，且不易拔除干净，制种纯度得不到保证，制种效率低，从而限制了强优势组合的应用。后者虽然克服了“二系法”制种的缺点，但是这一类核不育恢复源稀少，很难选配强优势组合。目前利用这一类显性核不育选配的组合很少，且在生产上应用面积不大。

发明内容

本发明的目的主要针对上述两类核不育存在的缺点，将两者的优点有机地结合在一起，选育出隐性核不育临时完全保持系(简称TAM)，实行隐行核不育纯合两用系、TAM系、恢复系三系配套制种，从而解决了隐性核不育制种难题，提高制种效率，有利于充分发挥隐性核不育杂种优势利用的众多优点。同时，也为油菜隐性核不育杂种优势利用开辟一条新途径。

本发明是一种甘蓝型油菜隐性核不育制种方法，其关键在于选育出隐性核不育TAM系，利用隐性核不育纯合两用系，TAM系，恢复系三系配套的杂交种生产技术，即用隐性核不育纯合两用系与其TAM系测交生产隐性核不育全不育系，再用隐性核不育全不育系与恢复系生产杂交种的技术。

本发明的理论依据：甘蓝型油菜隐性核不育的不育性受两对隐性重叠不育基因(ms₁和ms₂)与一对隐性上位抑制基因(rf)互作控制，只有ms₁和ms₂同时纯合(ms₁ms₁ms₂ms₂)才可能表现不育，但纯合rf(rfrf)对ms₁ms₁ms₂ms₂的表达起抑制作用，又可使其表现可育。据此理论，成功地选育出隐性核不育TAM系，实行了隐性核不育两用系、TAM系和恢复系三系配套生产杂交种子的方法。为简便起见，以下将两对重叠基因的9种基因型根据显性基因的数目记为：Ms⁰＝ms₁ms₁ms₂ms₂；Ms¹＝Ms₁ms₁ms₂ms₂或ms₁ms₁Ms₂ms₂；Ms¹⁺¹＝Ms₁ms₁Ms₂ms₂；Ms^2-4＝Ms₁Ms₁ms₂ms₂或ms₁ms₁Ms₂Ms₂或Ms₁Ms₁Ms₂ms₂或Ms₁ms₁Ms₂Ms₂或Ms₁Ms₁Ms₂Ms₂。

1.不育材料来源：

甘蓝型隐性核不育材料来自优质(低芥中硫)油菜育种系“9012”，系陈凤祥同志于1991年春在其一个自交株系中发现，该自交株系共种植了82株，有6株不育(称为9012A)，不育株率为7.32％。经过连续兄妹交(或自交—兄妹交)，同时进行品质和综合农艺性状选择，育成具有双低品质的纯合两用系9012AB。95年从其特定的测交后代中通过基因的分离重组成功地选育出9012AB的TAM系2个，实行了三系配套。

2.甘蓝型油菜隐性核不育三系选育和繁殖方法

2.1.纯合两用系选育和繁殖方法及遗传模式

纯合两用系是隐性核不育三系配套的基础，其基因型为1/2Ms⁰RfRf+1/2Ms¹RfRf，选育方法如下：

2.1.1.连续兄妹交：从分离群体(发现天然不育株的原始群体或不育株与其它品种(系)杂交、回交后代，下同)开始，选不育株与可育株成对兄妹交，同时对相应的可育株自交，后代均按株系种植，根据兄妹交株系可育与不育1∶1分离，相应可育株自交株系可育与不育3∶1分离的条件，从中挑选出符合要求的兄妹交株系，并在当选株系中选择符合育种目标的不育株与可育株成对兄妹交，同时对相应可育株自交，后代按上述方法继续选株兄妹交，如此连续进行2-3代兄妹交，即可使其稳定保持兄妹交株系可育与不育1∶1分离，而可育株自交株系可育和不育3∶1分离，达到纯合两用系的标准。但达到育种目标则需更多世代。

2.1.2.连续自交，再兄妹交：从分离群体开始，选可育株自交，每代按株系种植，从中挑选出可育与不育3∶1分离的株系，在当选株系中选择符合育种目标的可育株继续自交，如此经过连续3-4代自交，待其他性状稳定后，再按A的方法进行1-2代兄妹交即可。

2.1.3.连续自交—兄妹交：从分离群体开始，选可育株自交，后代按株系种植，从中挑选育性3∶1分离的株系，在当选株系中选择符合育种目标的不育株与可育株兄妹交，再从兄妹交后代中选择符合育种目标的可育株自交，如此交替自交、兄妹交，直至完全符合育种目标。再按2.1.1的方法连续兄妹交2～3次。该方法有利于打破不育基因与其他不利基因的连锁。

纯合两用系的繁殖方法：把上述方法选育而成的稳定纯合两用系成对兄妹交组合种子种植在隔离区(可采用网室隔离或空间隔离，空间隔离距离不少于4Km)，让不育株与可育株自由授粉，成熟时收取不育株上结的种子混合留种——即为繁殖的纯合两用系种子(切不可把可育株上的种子混入)，可供继续繁殖或做为配制全不育系的母本用。

纯合两用系繁殖模式如图1。

2.2.隐性核不育TAM系的选育和繁殖方法及遗传模式

隐性核不育TAM系是隐性核不育三系配套的关键，也是最难获得的一个系，其基因型为Ms⁰rfrf，选育方法如下：

2.2.1.连续自交、测交：从隐性核不育测交后代表现可育与不育61∶3、13∶3、5∶3等特定的分离群体中大量选可育株自交，同时与纯合两用系中的不育株测交鉴定。如自交株系全可育，而测交组合全不育，则该自交株系基因型为Ms⁰rfrf，即为基因分离重组后所形成的TAM系，从中继续选择符合育种目标的单株自交、测交，直至各目标性状达到要求并稳定，即育成了符合育种目标的实用TAM系。如测交后代未出现全不育株系，可从测交后代育性分离，而自交后代不分离的自交株系中选择符合育种目标的可育株自交，并与纯合不育株测交，如此连续选株自交、测交直至测交后代出现全不育株系，则相对应的自交株系即为所选TAM系。

2.2.2.连续自交，再兄妹交：从隐性核不育测交后代表现可育与不育61∶3、13∶3、5∶3等特定的分离群体中大量连续选取可育株自交，后代按株系种植，以后每代均从13∶3分离株系中选择符合育种目标的可育株连续自交，待其他性状稳定后，扩大分离株系种植群体，大量选株成对兄妹交，相应可育株自交，若兄妹交后代全不育，相应可育株自交后代全可育，则该自交株系即基因分离重组后所形成的TAM系。若兄妹交后代1∶1分离，相应的可育株自交不分离，再经2-3代连续兄妹交，表现稳定，则兄妹交后代中的可育株为TAM系；若兄妹交后代1∶1分离，而可育株自交3∶1分离，再经过1-2代连续兄妹交，育性表现稳定，则为纯合两用系。这样可同时育成纯合两用系和TAM系。

2.2.3.以杂合两用系为桥梁连续回交转育：用上述方法获得的TAM系与一个新的纯合两用系测交，后代全不育，然后用TAM与全不育系回交。从回交后代的杂合两用系中选可育株再与选定的纯和两用系和全不育系回交，如此连续回交直至TAM系与新的纯合两用系性状一致。其回交转育模式如图2。

TAM系的繁殖方法：在隔离区(网室隔离或空间隔离，空间隔离距离4km)内按常规品种繁殖方法繁殖。

2.3.隐性核不育恢复系的选育和繁殖方法

恢复系好坏直接关系到杂交组合优势的强弱，由于自然界和生产上存在的稳定品种(或自交系)均是隐性核不育的恢复系，其基因型为Ms^2-4＿＿(共15种)，因此，恢复系的选育较为简单，对常规育种方法育成的品种(系)进行自交纯化和配合力鉴定即可筛选出配合力优良的恢复系。恢复系对不育株的恢复模式如图3。

恢复系的繁殖方法：在隔离区(网室隔离或空间隔离，空间隔离800～1000m)内按常规品种繁殖方法繁殖。

3.隐性核不育“三系”配套制种技术

隐性核不育三系是指：纯合两用系、TAM系和恢复系，由这三系配套生产杂交种子的技术可分为如下二个步骤：

3.1.全不育系的配制：

隐性核不育全不育系由隐性核不育纯合两用系与TAM系按“二系”制种法测交配制而来，全不育系只能通过纯合两用系与TAM系的测交一代获得，不能通过TAM系回交保持，故此称隐性核不育完全保持系为TAM系。其保持模式如图4。配制全不育系的具体做法是在隔离区(网室隔离或空间隔离，空间隔离距离不小于4Km)内把纯合两用系与TAM系按2∶1(网室隔离)或4∶1(空间隔离)的行比相间种植，开花前将纯合两用系株行内的可育株拔除，只留不育株与TAM系自由授粉，收不育株上结的种子混合留种，即为全不育系种子，供配制杂交种作母本用。

3.2. F₁杂交种的配制

F₁代杂交种子由全不育系与恢复系杂交配制而来。具体做法是在隔离区(空间隔离距离为800～1000m)内把全不育系与恢复系按4∶1到8∶1的行比相间种植(制种规模越大，隔离距离越大，行比越大)，开花前将全不育系株行内的少量杂株拔除，让其自由授粉，收不育株上结的种子混合留种即为F₁代杂交种，供大田生产用种。

甘蓝型油菜隐性核不育三系配套的制种模式如图5。

本发明与隐性核不育传统“二系法”制种相比具有以下优点：

1.制种产量高：由于不育系9012A柱头(雌蕊)生活力长，结实性好，加之采用全不育系制种，一般比传统“二系法”制种产量提高40～60％，

2.省工省时：“二系法”每亩制种地要花3-4个人工拔除可育株，“三系法”在配制全不育系时虽然也需花3-4个工拔除可育株，但配制一亩地的全不育系种子按80斤计算，每斤全不育系种子按供5亩制种地用，则三系法的用工量仅为“二系法”的1/400。实际上，由于9012A标志性状明显，易于识别，不必等开花即拔除可育株，用工比其他不育系还可减少1-2个人工，每亩地拔除可育株只需花2-3个人工，节省人工和时间更为明显。

3.提高制种纯度：二系法制种时，由于面广量大，技术指导难于周全，易造成拔株不及时或拔不干净而影响纯度，而“三系法”在配制全不育系时，面积小，便于指导，加之9012A易于识别，去杂，对质量更有保证。

4.制种简便，易于推广应用：“二系法”推广较困难的原因主要是拔除50％可育株，农民感到麻烦、可惜，难于接受，而“三系法”采用全不育系制种免除了拔除50％可育株的麻烦，比较简便，易为农民所接受。

本发明与上海显性核不育三系法相比，具有以下优点：

1.恢复谱广，配组容易。生产上所有稳定的品种都是其恢复系，配组灵活，不受限制，更易于选配强优势组合。1985～1995年，我国审定了7个油菜核不育杂交种，均为隐性核不育杂交种，而显性核不育杂交种虽然研究较早，但至今未能在生产上大面积应用。主要是未能选配出强优势组合。例如，我们利用隐性上位核不育系统选配的“双低”杂交油菜新组合“C022”和“5C21”参加安徽省区试(1994-1996)平均较秦油2号分别增产7.2％和4.3％；参加安徽省生产试验(1996-1997)平均较秦油2号分别增产16.4％和10.5％，产量优势十分突出，而且抗(耐)病性强，品质优。目前已通过全部中间试验，即将审定，并已开始大面积制种和生产示范，深受示范区农民欢迎。

2.制种条件相对宽松，风险小。由于恢复谱广，受条件限制时，可适当放宽隔离条件，对恢复率和纯度影响不大，制种风险小。

3.不育株与可育株易于识别，有利于提高育种和制种效率，保证制种质量。

附图说明

图1为隐性核不育纯合两用系繁殖模式。

图2为以杂合两用系为桥梁回交转育纯合两用系的同型TAM系的遗传模式。

图3为恢复系对不育株的恢复模式。

图4为TAM系一次性完全保持模式。

图5为隐性核不育三系配套制种程序模式。

图6为9012AB选育模式。

图7为TAM-148和TAM-204选育模式。

具有实施方式

下面结合高产、抗(耐)病甘蓝型双低杂交油菜新组合“C022”的选育及制种实施例对本发明作进一步具体说明：

(一)、“C022”试验情况及特征特性

“C022”系安徽省农科院作物所用新型隐性上位互作核不育系9012A与自交系4485-88配制而成。1994-1996年度参加安徽省区试，两年15点次平均亩产177.4Kg，较秦油2号(165.5Kg)增产7.2％，较中油821(144.4Kg)增产22.9％，居参试组合(品种)第一位。1996-1997年度参加安徽省生产试验，8点平均亩产154.6Kg，较秦油2号(132.8kg)增产16.4％，较中油821增产24.6％，居参试组合(品种)第一位。目前，已通过全部中间试验，即将审定，该组合在试验的同时，在寿县、当涂、蒙城等地同步组织了大面积生产试种、示范，表现出稳产高产的特点，部分高产田块亩产达250Kg左右，深受示范区农户的热烈欢迎，种子无法满足农户的强烈需求。

“C022”半冬性，春前苗期生长缓慢，春后随气温回升生长加快，初花期较迟，花期集中整齐。早播不会早苔早花，但可促进年后早熟高产。全生育期230天左右，较秦油2号早2-3天。直立，叶色浓绿，长柄叶侧裂片2-3对，缺刻较深，顶裂片椭圆，叶缘锯齿状。花瓣较大，侧叠覆瓦状，黄色。株高140cm左右，株型紧凑，枝多角多，一般一次有效分枝7-9个，再次分枝5-6个，单株有效角果数420个左右，每角粒数20个，千粒重3.8g。经济系数高，籽粒产量占整个生物学产量的比重，明显高于秦油2号，产量优势十分突出。茎杆韧性好，不易折断倒伏。抗寒性强，两年区试平均冻害指数在所有参试组合中最轻，对菌核病和病毒病的抗性优于中油821和秦油2号。耐渍性一般。含油量40-42％，芥酸含量低于2％，硫甙含量低于40umol/g，其菜籽加工出的油为低芥酸营养保健油，饼粕可作为高蛋白饲料使用。该组合稳产高产，地区适应性广，在高产生产条件下丰产潜力大，适于长江中下游及黄淮广大地区种植，特别是我省长江以北油菜高产区，宜重点推广。

(二)、“C022”配套亲本的选育及其遗传模式

1.隐性核不育纯合两用系9012AB的选育及遗传模式

纯合两用系9012AB的选育  以发现天然不育株的自交株系为基础，大量选择符合育种目标的不育株与可育株成对兄妹交，同时对应可育株自交，收获后，根据育种目标对双亲芥酸、硫甙等品质性状进行了筛选，将入选的成对兄妹交组合和相应自交种子分株系种植，花期根据兄妹交株系1∶1分离，相应可育株自交株系3∶1分离的条件，从中挑选符合要求的兄妹交株系，继续选择符合育种目标的不育株与可育株成对兄妹交，如此连续进行兄妹交直至各目标性状达到要求，育性稳定保持兄妹交1∶1分离，可育株自交3∶1分离。即育成了具双低品质的纯合两用系9012AB。其不育株基因型为Ms⁰RfRf，可育株基因型为Ms¹RfRf。9012AB 1991-1995的选育结果如表1，选育模式如图6。

9012AB的几个特点和一般配合力表现  ①不育株具有少量黄化蕾、花蕾瘦小、花瓣小、雄蕊退缩、花药空瘪，黄褐色以及黄化蕾脱落后的遗迹等明显形态标志，易于识别去杂。②不育株不育性彻底，无花粉，不受环境条件的影响，有利于保证制种纯度，减少制种风险。③不育株雌蕊生活力强，易于接受外来花粉，结实性好，繁种、制种产量高，有利于提高繁种、制种效率。④品质优，配合力强，易于选配强优势组合。1994～1997年9012AB一般配合力(GCA)表现如表2。

纯合两用系9012AB的繁殖  将9012AB成对兄妹交组合按常规品种高产栽培方法种植在隔离区内，花期让其自由授粉，为避免外来花粉污染(不要进行人工辅助授粉)，成熟后，根据不育株黄化蕾脱落遗迹标志将不育株单收混合脱粒，即为繁殖的纯合两用系。隔离区可采用网室或空间隔离，如采用网室隔离，筛网密度应大于50目，如采用空间隔离，隔离距离4Km以上，隔离区内不得种植任何十字花科植物，繁种田块不得有自生苗。

2.隐性核不育TAM系的选育及其遗传模式

TAM-148的选育  以(9012A×148)F₂群体(表现可育与不育13∶3分离)为基础，大量选择符合育种目标的可育株自交，同时与纯合两用系9012AB中不育株测交，后代按株系种植，花期调查育性表现，结果3357自交株系全可育，对应测交后代全不育。此株系即为TAM系，随后扩大群体，大量选择符合育种目标的单株自交，并进行测交，回交验证，收获后再进行品质性状筛选，如此连续定向选择育成具双低品质的TAM系，定名为TAM-148。1994-1997年选育结果如表2。

TAM-204的选育  以(9012A×88-204)F₂群体(表现可育与不育199∶57分离)为基础，大量选择符合符合育种目标的可育株自交，同时与纯合两用系9012AB中不育株测交，后代按株系种植，花期调查育性表现，结果3048自交株系全可育，而对应的测交组合全不育，此株系即为基因分离重组后形成的TAM系，随后同TAM-148选育一样，采取扩大群体，连续定向选择的方法，育成具双低品质的TAM系，定名为TAM-204。1994-1997年选育结果如表2。

上述两个TAM系的基因型为Ms⁰rfrf，选育模式如图7。TAM-148和TAM-204与9012AB测交保持的全不育系分别为12-148A和12-204A，它们和9012AB的GCA％如表4。12-148A的GCA％比9012AB有所提高，12-204A的GCA％比9012AB有所下降，但都与9012AB差异不明显。

3.恢复系4485-88的选育及遗传模式

以甘蓝型双低油菜品系8-03为基础，从中大量选择符合育种目标的单株自交，并与9012A、S45A等隐性核不育系测交，鉴定自交株系的配合力，淘汰配合力差的株系，保留配合力好的株系继续选株自交，并同时进行配合力鉴定，如此经过连续4代的自交纯化选育而成。它对不育株育性恢复模式如图3。

(三)、C022“三系”配套杂种生产技术及遗传模式。

C022“三系”配套杂种生产技术是指由隐性核不育纯合两用系9012AB与TAM系按“二系”制种法测交生产全不育系，再用全不育系与恢复系4485-88生产杂交一代种子的技术，具体分为以下二个步骤：

1.隐性核不育全不育系的生产及其遗传模式

全不育系的基因型是杂合型不育株Ms⁰Rfrf，它是由纯合两用系9012AB中的不育(Ms⁰RfRf)与TAM系(其基因型为三隐性纯合体Ms⁰rfrf)测交获得，全不育系只能出现在测交一代，不能用纯合三隐性可育株回交保持(故此称其为临时完全保持系(简称TAM))，其保持模式如图4。配制全不育系的具体方法如下：在隔离区(网室隔离或空间隔离)内把纯合两用系9012AB与TAM-148或TAM-204按2∶1(网室隔离)或4∶1(空间隔离)的行比相间种植，9012AB的行株距为30cm×10-13cm，TAM系的株距为16-20cm，在9012AB抽苔20cm左右，即可根据花蕾的形态特征识别可育株和不育株，将9012AB株行内的可育株拔除，并及时销毁或运出隔离区，在不育株开花前，再仔细检查一遍，清除少量漏拔的可育株，最后只留不育株与TAM系自由授粉，收不育株上结的种子混合留种，即为全不育系种子，供生产杂交一代种子用。

全不育系繁殖的关键是要搞好隔离，网室隔离纱网密度不低于50目，空间隔离距离不小于4Km，隔离区内不得种植任何其它十字花科植物，制种田块不能出现自生苗，如为网室，年年种植油菜，可在油菜种植前用水淹灌，待自生苗和杂草出齐后用灭生性除草剂(如克芜踪)一次性杀除。空间隔离区最好选择3年内未种植油菜的田块。为尽量减少花粉污染，开花期不要进行人工辅助授粉。

2.C022 F₁代杂交种的生产及遗传模式。

C022 F₁杂交种是采用全不育系与恢复系4485-88杂交配制而成。具体生产方法如下：在隔离区内把全不育系与恢复系按4∶1至8∶1的行比相间种植(制种面积越大，行比越大)，全不育系的行株距为33cm×15-16cm，恢复系株距为16-20cm，在不育系开花前，根据花蕾形态特征，拔除全不育系株行内的少量杂株，让不育株自由授粉，收全不育系上结的种子混合留种，即为F1代杂交种，供大田生产用种。

制种隔离距离一般为800-1000m，隔离区内不得种植其它十字花科植物，制种田块最好为水田，如为旱地应为三年内未种过油菜的田块。制种面积较大时，可放蜂辅助授粉，提高制种产量。

C022“三系”配套制种程序模式如图5。

表1.纯合两用系＂9012AB＂连续兄妹交后代的畜性表现

观察年度	系谱	兄妹交后代					对应父本自交后代
												代号	总数	可育株	不育株	Xc21∶1	代号	总数	可育株	不育株	Xc23∶1
		1991-92	繁13	T058	6	3	3	0.167	603	54	40											14	0.000
1992-93	T058											2189	258	130	128	0.004	2068	109	80	29	0.077
		2190	339	171	168	0.012	2070	154	120	34	0.554
												2191	180	89	91	0.006	-	-	-	-	-
		1993-94	2189	4411-12	117	61	56	0.137	4423	57	41											16	0.146
4413-14	117											63	54	0.547	4416	58	48	10	1.471
				1994-95	4412	4332	160	85	75	0.506	4333									98	75	23	0.054

表2  几个不育系的一般配合力(GCA)相对值

不育系	1994-1995		1995-1996		1996-1997
							GCA％	位次	GCA％	位次	GCA％	位次
	9012AB(GMS)	9.02	1	3.75	1	5.27							1
S45AB(GMS)							0.28	2	1.64	2	-3.89	3
	川068AB(GMS)	-	-	-5.37	3	-1.86							2
90A(CMS)							-9.27	3	-	-	-	-

表3  隐性核不育TAM系选育过程自交、测交、回交的育性表现

年度	可育株自交后代的育性表现					不育株与9012AB测交，与全不育同交后代育性表现
										世代	系号	可育	不育	MF∶MS(Xc2)	世代	可育	不育	MF∶MS(Xc2)
	TAM-148的选育表现
1993-94											F2	4157	115	27	13∶3(0.001)	-	-	-
	1994-95	F3	3357	214	0		F1’	0	27
1995-96											F4		＞660	0		F1’	0	665
	BC1	380	391	1∶1(0.130)
					1996-97	F5	470	＞2640	0							F1’	17	1048	1065
BC1	108	101	209
				TAM-204的选育表现
1993-94	F2	4027	41											15	199∶57(0.43)
				1994-95	F3	3048	72	0		F1’	0	31
1995-96	F4		＞1200											0		F1’	0	745
				BC1	542	527	1∶1(0.813)
								1996-97	F5	52	＞2800	0				F1’	21	1811	1832

表4  纯合两用系9012AB及其全不育系一般配合力(GCA)相对值(1996-97)

不育系	GCA％
		9012AB	1.13
12-148A	4.10
		12-204A	-5.19

Claims (7)

1、一种甘蓝型油菜隐性核不育制种方法，其特征在于从隐性核不育分离群体中选育出隐性核不育纯合两用系；从隐性核不育后代集合了隐性重叠不育基因与隐性上位基因的分离群体中通过基因分离重组选育出纯合三隐性基因重组株，即为隐性核不育临时完全保持系；然后由隐性核不育纯合两用系与隐性核不育临时完全保持系按“二系”制种法测交生产隐性核不育全不育系，再用隐性核不育全不育系与恢复系生产杂交一代种子。

2、根据权利要求1所述方法，其特征在于隐性核不育纯合两用系是从隐性核不育分离群体中选不育株与可育株成对兄妹交，同时对应可育株自交，根据兄妹交株系1∶1分离，相应可育株自交株系3∶1分离的条件，连续进行2～3代兄妹交选育而成的。

3、根据权利要求1、2所述方法，其特征在于隐性核不育纯合两用系是从隐性核不育分离群体中选可育株连续自交，再连续进行2～3代兄妹交选育而成的。

4、根据权利要求1、2所述方法，其特征在于隐性核不育纯合两用系是从隐性核不育分离群体中选可育株自交，再从自交后代3∶1分离株系中选不育株与可育株兄妹交，如此连续交替自交与兄妹交，再连续进行2～3代兄妹交选育而成的。

5、根据权利要求1所述方法，其特征在于隐性核不育临时完全保持系是从隐性核不育后代特定的分离群体，通过基因的分离重组，从中选可育株自交纯化，同时与隐性核不育纯合两用系不育株测交鉴定，根据测交后代全不育，自交后代全可育的条件筛选而获得的；上述特定的分离群体是指表现可育与不育13∶3分离，或199∶57分离，或61∶3分离，或5∶3分离的群体。

6、根据权利要求1或5所述方法，其特征在于隐性核不育临时完全保持系选育采用已选育隐性核不育临时完全保持系与隐性核不育纯合两用系不育株杂交，后代全不育，再用隐性核不育临时完全保持系与全不育系回交，从回交后代中选可育株和隐性纯合两用系回交，如此连续回交3～4代即可。

7、根据权利要求1所述方法，其特征在于恢复系是从甘蓝型油菜品种(系)选单株自交，并同时进行配合力鉴定，经过连续4代以上的自交纯化选育的。

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