CN110367207A - 一种松毛虫凸腿小蜂的大量饲养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种松毛虫凸腿小蜂的大量饲养方法，该方法包括（1）寄生蜂蜂种的获取；（2）寄主昆虫蛹的筛选；（3）寄生蜂子代的接种；（4）接种后寄主蛹的培养；（5）成蜂的保存；（6）未被寄生寄主的培养与保存；（7）寄主蛹质量的监控；共7个步骤。本发明筛选出一种可在室内大批量扩繁的柳杉毛虫蛹期寄生蜂及其适宜的替代寄主；通过控制各项室内繁蜂条件，能较好地延长寄生蜂的寿命，提高寄生效能；又提供了操作简单的室内饲养方法并初步建立了扩繁流程，能够高效地、批量生产出松毛虫凸腿小蜂，以满足实验、后续的林间释放所需，对柳杉毛虫的生物防治具有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及一种松毛虫凸腿小蜂的大量饲养方法，属于森林害虫生物防治技术领域。
背景技术
柳杉毛虫Dendrolimus houi (Lajonquiere)又称云南松毛虫，是一种猖獗的鳞翅目Lepidoptera枯叶蛾科Lasiocampidae食叶害虫，大量暴发时会将柳杉Cryptomeria fortunei Hooibrenk等林木啃食殆尽，受害植株如同火烧般，对林农造成巨大的经济损失，影响了景观效果并严重破坏了生态系统。
近年来，许多学者不断地对柳杉毛虫的防治展开研究，同时探究其生物学特性、预测预报、天敌种类等方面，发现合理利用寄生蜂是对柳杉毛虫进行生态治理的手段之一，可有效避免化学防治所造成的农药残留、环境污染、有益生物死亡等负面影响。通过前期调查发现，柳杉毛虫的蛹期寄生蜂——松毛虫凸腿小蜂 Kriechbaumerella dendrolimi(Sheng et Zhong)具较高林间寄生率，单蛹出蜂量大，存在共寄生现象且具联合控害潜力等特点，是一种柳杉毛虫重要的寄生蜂。但由于该天敌林间种群密度较低，目前尚不能完全对暴发林间的柳杉毛虫进行有效控害。因此，找出适宜的繁蜂条件，建立繁蜂流程，从而批量生产出松毛虫凸腿小蜂，以满足室内实验研究、林间批量释放所需，对柳杉毛虫的生物防治具有重要意义。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种操作便捷、高效的松毛虫凸腿小蜂的室内扩繁技术。
本发明采用以下方案实现：一种松毛虫凸腿小蜂的大量饲养方法，包括（1）寄生蜂蜂种的获取；（2）寄主昆虫蛹的筛选；（3）寄生蜂子代的接种；（4）接种后寄主蛹的培养；（5）成蜂的保存；（6）未被寄生寄主的培养与保存；（7）寄主蛹质量的监控；共七个步骤。
（1）寄生蜂蜂种的获取：松毛虫凸腿小蜂虫源采集自福建将乐的柳杉毛虫暴发林间，将茧采回后获得羽化成蜂，经人工饲养获得蜂种，置于温度为26 ℃，湿度40 %，光周期12L: 12D的人工气候箱内保存，提供浓度为100 %的蜂蜜为其补充营养，逐步建立室内种群。
（2）寄主昆虫蛹的筛选：选择柳杉毛虫、柞蚕Antherea pernyi、樟蚕Eriogyna pyretorum、思茅松毛虫Dendrolimus kikuchii等寄主蛹均可作为替代寄主。将寄主蛹放入2-6℃冰箱内保鲜，以便随时取用。经研究发现，柞蚕蛹是最佳替代寄主，其具有蛹期长、体型大、来源广泛的特点；前、中期饱满的柞蚕蛹最佳。
（3）寄生蜂子代的接种：在饲养装置内放入接种盒（长×宽×高：35×25×23 cm），接种盒可放50枚柞蚕蛹，接入50头7日龄且充分交尾的雌蜂，寄生蜂用脱脂棉蘸取分别蜂蜜、纯净水放入装置中喂养，放入30±1 ℃、湿度为40±10 %、光周期为12L: 12D的条件下寄生2 d，之后取出所有寄生蜂并将寄主蛹逐个放入培养盒（长×宽×高：17×11×5 cm）中。
（4）接种后寄主蛹的培养：将培养盒放入30±1℃，湿度40±10 %，光照为8L: 16D的恒温箱中培养，20 d后定期观察蛹发育、出蜂情况。由于发育进度不同，羽化时间持续1-6d，将从柞蚕蛹中羽化的寄生蜂收入饲养装置内，用脱脂棉分别蘸取蜂蜜与水喂养。
（5）成蜂的保存：将60头寄生蜂成虫用饲养盒（长×宽×高：17×11×5 cm）保存至22±1 ℃，湿度40±10 %，光照为8L: 16D的恒温气候箱饲养，用棉花蘸少量蜂蜜饲养，每2d更换一次，直到下次取用。
（6）未被寄生寄主的培养与保存：部分寄主蛹未被寄生，在培养过程中羽化成柞蚕成虫，将成虫收集到带有可拆卸的白色尼龙网罩的养虫笼（长×宽×高：75×75×75 cm）内，待其交尾后将受精卵收集、在温度26±2 ℃，湿度为40±10 %，光周期为12L: 12D的室内饲养，提供新鲜的柞树叶或枫香叶作为食物，待其化蛹后将蛹放置4 ℃冰箱保存备用；需要扩繁时提前取出在常温条件下放置1 d备用。
（7）寄主蛹质量的控制：在温度为30±1 ℃、湿度为30-50 %、光周期为12L: 12D条件下，观察已经寄生20 d 的寄主蛹的头部的圆点（即颅顶板），并将颅顶板为黑色的优质寄主蛹筛选出，为后续林间释放节省成本。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1.本发明筛选出一种适合在室内大量饲养柳杉毛虫的优势寄生性天敌，并建立了室内种群；操作简单，能够高效地扩繁批量的松毛虫凸腿小蜂。
2.本发明获得了松毛虫凸腿小蜂适宜且来源充足的替代寄主，单蛹能够繁育出大量寄生蜂，节约了成本。50枚柞蚕蛹可繁蜂1000头，相较原始寄主柳杉毛虫需100头蛹节约50蛹，节省成本约50 %。松毛虫凸腿小蜂在野外1年6-7代，在室内人工饲养1年可繁殖12代，缩短了繁蜂周期。
3.本发明初步建立了扩繁流程，通过控制松毛虫凸腿小蜂的温度等条件，延长了寄生蜂寿命（原雌蜂平均寿命8.1d，现平均寿命44.9 d），使寄生蜂种群以及替代寄主能够处于同一时空下，以供扩繁取用，同时可进行释放前的寄主蛹质量控制，增加了寄生效能(寄生率从54.3%增加至75.8%；平均出蜂数从每蛹38.3头增加至每蛹54.4头)，每扩繁1000头成蜂由50枚寄主蛹下降至25枚寄主蛹，节省了50 %的防治成本。
附图说明
图1是本发明的松毛虫凸腿小蜂的扩繁流程示意图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下将通过具体实施例对本发明作进一步详细说明。
实施例1
（1）寄生蜂收集
在柳杉毛虫蛹期（7-9月），从野外柳杉毛虫暴发地收集该虫，虫茧一般分布于该地区寄主枝条及周围的低矮灌木丛中，用枝剪将虫茧连枝剪下，带回实验室将多余枝条除去放入饲养盒中（长×宽×高：16×11×5 cm），饲养盒置于温度为24-28 ℃，优选为25-27 ℃，再优选为26 ℃，湿度为30-50%，优选为35-45 %，光照优选为12L: 12D的室内单独饲养，收集羽化的松毛虫凸腿小蜂。分别收集100头体长4.5-5.0 mm的雌蜂与50头体长7.0-7.5 mm的雄蜂，放入饲养笼（长×宽×高：30×30×30 cm）中使其充分交配；用脱脂棉分别蘸取浓度100 %蜂蜜（福建省神蜂科技开发有限公司）、纯净水放入装置中喂养寄生蜂，每隔1 d更换一次。
（2）寄主昆虫蛹的筛选
采用柞蚕、柳杉毛虫、思茅松毛虫、马尾松毛虫、樟蚕等5种寄主昆虫蛹供松毛虫凸腿小蜂选择发现，柞蚕、柳杉毛虫、思茅松毛虫均能培养出后代（表1）。但与其它寄主蛹相比，柞蚕蛹体积最大、质量最重，营养物质较为充足，能够满足松毛虫凸腿小蜂繁殖大量后代中同时取食单个寄主所需营养；同时，柞蚕在北方具有较完善的产业市场，来源充足，获取方便，可满足大量繁育天敌所需。选择个大、饱满，蛹期为3-15 d存于2-6 ℃冰箱保存，优选为4℃。扩繁前从冰箱取出，于24 ℃左右的室温下1 d备用。
表1 松毛虫凸腿小蜂雌蜂对不同寄主的选择性
（3）寄生蜂子代的接种
取30-100头羽化5-10 d且充分交尾的蜂雌，将其放入接种盒（长×宽×高：35×25×23cm）内，一盒可存放30-100个柞蚕蛹，寄生蜂用脱脂棉蘸取分别蜂蜜、纯净水放入装置中喂养，在温度为28-32 ℃，优选为29-31 ℃，再优选为30 ℃，湿度为30-50%，优选为35-45 %，再优选为40 %，光照优选为12L: 12D人工气候箱（上海一恒科学仪器有限公司）中接种，待寄生完毕将寄生蜂轻轻移出，挑选出寄主蛹单独放入培养盒，寄生时间1-3 d，优选为2 d。寄生结束后换上新一批寄主和寄生蜂。
（4）接种后寄主蛹培养
将饲养盒放入29-31 ℃，优选为30 ℃，湿度35-45 %，优选为40 %，光照优选为8L: 16D的人工气候箱中，定期观察寄主蛹体是否发生变化，并尽可能减少搬运和移动以减少蛹体因碰撞造成损伤。培养23-28 d后寄生蜂即可羽化，羽化时间持续1-6 d。
表2 温度对子代历期的影响
（5）成蜂的保存
将羽化后3-10日龄且经过充分交尾后的约60头雌蜂存于饲养盒（长×宽×高：17×11×5 cm）内，置于温度为21-23 ℃，优选为22 ℃，湿度为30-50 %，优选为40 %，光照优选为8L: 16D的人工气候箱中保存，用脱脂棉分别蘸取蜂蜜与水喂养，每隔2 d更换一次，雌蜂平均寿命可达44.9 d。
表3 温度对成蜂寿命的影响
（6）未被寄生寄主蛹的培养及保存
部分未被寄生的寄主蛹，在30±1 ℃的条件下30 d之内羽化成柞蚕成虫，将羽化的成虫收集到带有可拆卸的（120目）白色尼龙网罩的养虫笼（长×宽×高：75×75×75 cm）内，待其交尾并产卵后将受精卵收集，在温度24-28 ℃，湿度为30-50 %，光周期为12L: 12D的室内饲养，提供新鲜的柞树叶或枫香叶作为食物，以水培方式喂养寄主幼虫，待其化蛹后置于2-6 ℃，优选为4 ℃冰箱保存备用。扩繁前将寄主蛹取出在24-28 ℃的室温下放置1 d为其解冻。
（7）寄主蛹的质量控制
可在温度为32±1 ℃、湿度为30-50 %、光周期为12L: 12D条件下，20 d后保留寄主蛹头部的圆点（即颅顶板）为黑色的蛹，其寄生率(75.8%)、蛹出蜂数(54.4/寄主蛹)均优于未经筛选的蛹，以筛选获得优质、高产的寄主蛹，还可节省未被寄生的柞蚕蛹的培养成本；同时，根据颅顶板颜色也可筛选获得优质被寄生蛹，为后续提高集约化生产寄生蜂提供参考。
表4 寄主蛹的质量控制方法(20d)
上列较佳实施例，对本发明的目的、技术方案和优点进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (2)
1.一种松毛虫凸腿小蜂的大量饲养方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）寄生蜂蜂种的获取；（2）寄主昆虫蛹的筛选；（3）寄生蜂子代的接种；（4）接种后寄主蛹的培养；（5）成蜂的保存；（6）未被寄生寄主的培养与保存；（7）寄主蛹质量的监控。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：具体步骤如下：
（1）寄生蜂蜂种的获取：从野外采回的柳杉毛虫茧中获取松毛虫凸腿小蜂蜂种，保存在温度为26±1 ℃、湿度为40±10 %、光周期为12L: 12D的人工气候箱内，提供浓度为100 %的蜂蜜为其补充营养；
（2）寄主昆虫蛹的筛选：挑选个大、饱满且处于蛹前、中期的柞蚕蛹作为替代寄主，于4℃冰箱内保鲜，取用前在常温下解冻；
（3）寄生蜂子代的接种：挑选7日龄的松毛虫凸腿小蜂100头，待其在养虫笼内交配后，放入50枚寄主蛹进行接种，在温度为30±1 ℃、湿度为40±10 %、光周期为12L: 12D条件下寄生2 d，期间提供蜂蜜补充营养；
（4）接种后寄主蛹的培养：将步骤（3）的寄主蛹放入温度为30±1℃、湿度为40±10%、光照为8L:16D的恒温箱中培养，尽可能减少移动和碰撞；
（5）成蜂的保存：将柞蚕蛹中羽化的寄生蜂成虫收入饲养盒内，用蜂蜜喂养；并保存在温度为22±1℃、湿度为40±5%、光照为8L: 16D的人工气候箱中，用蜂蜜饲养，直至45 d内的下次取用；
（6）未被寄生寄主的培养与保存：少数未被寄生的柞蚕蛹羽化后，置于温度为26℃、湿度为40 %、光周期为12L: 12D的条件下，用水培的寄主植物继续饲养其幼虫，化蛹后将蛹放置于4 ℃冰箱内保存备用；
（7）寄主蛹质量的控制：可在温度为32±1℃、湿度为30-50 %、光周期为12L: 12D条件下，保留寄生后20 d且颅顶板仍为黑色的寄主蛹，从而提高寄主蛹寄生率及单蛹出蜂数，以获得优质寄主蛹。
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 林浩宇 等: "柳杉毛虫的主要寄生性天敌种类调查", 《中国生物防治学报》 * |
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