CN110327132A - 一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法 - Google Patents

一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110327132A
CN110327132A CN201910765846.7A CN201910765846A CN110327132A CN 110327132 A CN110327132 A CN 110327132A CN 201910765846 A CN201910765846 A CN 201910765846A CN 110327132 A CN110327132 A CN 110327132A
Authority
CN
China
Prior art keywords
telocoele
sturgeon
coordinate
injection
fish
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910765846.7A
Other languages
English (en)
Inventor
李志琼
汪斌
吴源冰
陈德芳
陈虎
唐妮
田正志
王书瑶
齐锦雯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sichuan Agricultural University
Original Assignee
Sichuan Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sichuan Agricultural University filed Critical Sichuan Agricultural University
Priority to CN201910765846.7A priority Critical patent/CN110327132A/zh
Publication of CN110327132A publication Critical patent/CN110327132A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61D—VETERINARY INSTRUMENTS, IMPLEMENTS, TOOLS, OR METHODS
    • A61D7/00—Devices or methods for introducing solid, liquid, or gaseous remedies or other materials into or onto the bodies of animals

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Farming Of Fish And Shellfish (AREA)

Abstract

本发明公开了一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法，提供一种简易的鲟鱼侧脑室注射方法，具体是以西伯利亚鲟幼鱼为对象，能迅速准确地将药物送递至西伯利亚鲟幼鱼侧脑室内，提供一种中枢系统直接给药的研究手段，此研究手段根据鲟鱼的解剖学结构定位鲟鱼侧脑室在背侧颅骨的坐标位置，准确定位其侧脑室的三维空间位置，通过微量进样器将药物递送至侧脑室内，实现某种药物的中枢投递及其功能探究，为鲟鱼中枢功能研究提供一种简易准确的技术手段，本技术手段适用于大多数鱼类的脑室注射试验，十分简便、准确地将药物送递至脑室内，从而满足相关生物功能的研究需求，本发明设计合理，更加人性化，适合推广使用。

Description

一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法。
背景技术
中枢神经系统的调控功能十分关键和广泛，如记忆、摄食和运动等。由于很多药物很难通过血脑屏障，因此需要一种直接地中枢给药方式，用以研究中枢功能。鲟鱼侧脑室是位于中脑视顶盖下方的空腔，药物直接导入该腔体后，可与脑脊液融合扩散至邻近脑区，从而快速准确地介入中枢系统的生物学功能。现有的侧脑室注射技术操作复杂且主要针对哺乳动物。针对此问题，以西伯利亚鲟幼鱼(350g+12g)为对象，建立一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法，为鲟鱼中枢生理功能研究提供一种方便准确的试验技术。
发明内容
本发明提供一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法，可以有效解决上述背景技术中的问题。
本发明的技术方案概述如下：
一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法，包括如下方法步骤：
第一步，测量：首先利用解剖学知识确定鲟鱼幼鱼的侧脑室在其背侧头部的投影区域坐标；具体如下：选取同批次孵化的西伯利亚鲟健康幼鱼，用一定浓度的MS-222麻醉致死，将致死后的鱼置于水平面板上，由鳃后缘处分离头部，用11号手术刀完整剥离颅骨，使近乎透明的内侧软骨分离并清理软骨腹侧的肌肉和脂肪，将软骨部分至于强光之上，观察标记中脑所在位置，用11号手术刀沿标记的中脑所在位置垂直切下，获得鲟鱼中脑内侧脑室的纵切面，将剥离的颅骨与软骨重叠，建立坐标，标记测量侧脑室在颅骨面的X和Y坐标以及侧脑室至颅骨面的Z坐标；
第二步，注射：将背侧至侧脑室的深度值标记于脑室注射仪，再用注射仪吸入伊文思蓝染液，根据确定的坐标注入染液，具体如下：选取同批次孵化的西伯利亚鲟幼鱼，用MS-222麻醉至鱼静止不动，将鱼放置水平面板上，用湿润毛巾包裹，暴露注射区域，通过解剖测量的侧脑室Z坐标值，获得颅骨背侧进入侧脑室的坐标范围，一般侧脑室注射体积为1μl，选取5-10μl的微量进样器，在进样器针管上标记Z轴坐标注射深度距针尖的位置距离，吸取一定质量体积浓度的伊文思蓝染液，根据已测量的侧脑室X-Y-Z坐标进行缓慢注射30-60秒，注射完成后垂直取出进样器，用α-氰基丙烯酸异丁酯滴于注射位点，约5-10秒后将鱼放回养殖池内，10-15分钟后恢复正常活动能力；
第三步，检测：试验结束后，解剖观察，确定注射效果，具体如下：在伊文思蓝染液注射一段时间后解剖观察，若侧脑室乃至第三脑室分布有蓝色染液，则达成注射目的；
优选的是，所述第一步中MS-222的浓度为120mg/L。
优选的是，所述第一步中建立坐标的方法为：鲟鱼背侧双眼连线和颅骨中轴线的交点记为点O(0，0，0)，中轴线向吻端方向为Y轴方向，以双眼连线向Y轴方向右侧的方向为X轴方向，以垂直于鲟鱼腹侧面为Z轴方向构建坐标系，其中，O为坐标轴原点。
优选的是，所述第二步中伊文思蓝染液的质量体积浓度为0.1％-0.5％。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：该种简易的鲟鱼侧脑室给药方法，技术设计完整紧凑，提供一种简易的鲟鱼侧脑室注射方法，具体是以西伯利亚鲟幼鱼为对象，能迅速准确地将药物送递至西伯利亚鲟幼鱼侧脑室内，提供一种中枢系统直接给药的研究手段，此研究手段根据鲟鱼的解剖学结构定位鲟鱼侧脑室在背侧颅骨的坐标位置，准确定位其侧脑室的三维空间位置，通过微量进样器将药物递送至侧脑室内，实现某种药物的中枢投递及其功能探究，为鲟鱼中枢功能研究提供一种简易准确的技术手段，本技术手段适用于大多数鱼类的脑室注射试验，十分简便、准确地将药物送递至脑室内，从而满足相关生物功能的研究需求，本发明设计合理，更加人性化，适合推广使用。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例
一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法，包括如下方法步骤：
第一步，测量：首先利用解剖学知识确定鲟鱼幼鱼的侧脑室在其背侧头部的投影区域坐标；具体如下：选取同批次孵化的西伯利亚鲟健康幼鱼1尾，用一定浓度的MS-222麻醉致死，将致死后的鱼置于水平面板上，由鳃后缘处分离头部，用11号手术刀完整剥离颅骨，使近乎透明的内侧软骨分离并清理软骨腹侧的肌肉和脂肪，将软骨部分至于强光之上，观察标记中脑所在位置，用11号手术刀沿标记的中脑所在位置垂直切下，获得鲟鱼中脑内侧脑室的纵切面，将剥离的颅骨与软骨重叠，建立坐标，标记测量侧脑室在颅骨面的X和Y坐标以及侧脑室至颅骨面的Z坐标；
第二步，注射：将背侧至侧脑室的深度值标记于脑室注射仪，再用注射仪吸入伊文思蓝染液，根据确定的坐标注入染液，具体如下：选取同批次孵化的西伯利亚鲟幼鱼20尾，用MS-222麻醉至鱼静止不动，将鱼放置水平面板上，用湿润毛巾包裹，暴露注射区域，通过解剖测量的侧脑室Z坐标值，在5-10μl微量进样器针管上标记进针深度，吸取0.1％-0.5％的伊文思蓝染液1μl，选取5-10μl的微量进样器，根据已测量的侧脑室X-Y-Z坐标进行缓慢注射30-60秒，注射完成后垂直取出进样器，用α-氰基丙烯酸异丁酯滴于注射位点，约5-10秒后将鱼放回养殖池内，10-15分钟后恢复正常活动能力；
第三步，检测：试验结束后，解剖观察，确定注射效果，具体如下：在伊文思蓝染液注射一段时间后解剖观察，若侧脑室乃至第三脑室分布有蓝色染液，则达成注射目的；
在该实施例中，第一步中MS-222的浓度为120mg/L。
在该实施例中，第一步中建立坐标的方法为：鲟鱼背侧双眼连线和颅骨中轴线的交点记为点O(0，0，0)，中轴线向吻端方向为Y轴方向，以双眼连线向Y轴方向右侧的方向为X轴方向，以垂直于鲟鱼腹侧面为Z轴方向构建坐标系，其中，O为坐标轴原点。
在该实施例中，第二步中伊文思蓝染液的质量体积浓度为0.1％-0.5％。
试验结果：按照本发明实施例中技术确定的侧脑室坐标，注射染液成功送抵至侧脑室的有17尾，成功率为85％，由此可见，该方法是有效且切实可行的。
该种简易的鲟鱼侧脑室给药方法，技术设计完整紧凑，提供一种简易的鲟鱼侧脑室注射方法，具体是以西伯利亚鲟幼鱼为对象，能迅速准确地将药物送递至西伯利亚鲟幼鱼侧脑室内，提供一种中枢系统直接给药的研究手段，此研究手段根据鲟鱼的解剖学结构定位鲟鱼侧脑室在背侧颅骨的坐标位置，准确定位其侧脑室的三维空间位置，通过微量进样器将药物递送至侧脑室内，实现某种药物的中枢投递及其功能探究，为鲟鱼中枢功能研究提供一种简易准确的技术手段，本技术手段适用于大多数鱼类的脑室注射试验，十分简便、准确地将药物送递至脑室内，从而满足相关生物功能的研究需求，本发明设计合理，更加人性化，适合推广使用。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出的实施例。

Claims (4)

1.一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法，其特征在于，包括如下方法步骤：
第一步，测量：首先利用解剖学知识确定鲟鱼幼鱼的侧脑室在其背侧头部的投影区域坐标；具体如下：选取同批次孵化的西伯利亚鲟健康幼鱼，用一定浓度的MS-222麻醉致死，将致死后的鱼置于水平面板上，由鳃后缘处分离头部，用11号手术刀完整剥离颅骨，使近乎透明的内侧软骨分离并清理软骨腹侧的肌肉和脂肪，将软骨部分至于强光之上，观察标记中脑所在位置，用11号手术刀沿标记的中脑所在位置垂直切下，获得鲟鱼中脑内侧脑室的纵切面，将剥离的颅骨与软骨重叠，建立坐标，标记测量侧脑室在颅骨面的X和Y坐标以及侧脑室至颅骨面的Z坐标；
第二步，注射：将背侧至侧脑室的深度值标记于脑室注射仪，再用注射仪吸入伊文思蓝染液，根据确定的坐标注入染液，具体如下：选取同批次孵化的西伯利亚鲟幼鱼，用MS-222麻醉至鱼静止不动，将鱼放置水平面板上，用湿润毛巾包裹，暴露注射区域，通过解剖测量的侧脑室Z坐标值，获得颅骨背侧进入侧脑室的坐标范围，一般侧脑室注射体积为1μl，选取5-10μl的微量进样器，在进样器针管上标记Z轴坐标注射深度距针尖的位置距离，吸取一定质量体积浓度的伊文思蓝染液，根据已测量的侧脑室X-Y-Z坐标进行缓慢注射30-60秒，注射完成后垂直取出进样器，用α-氰基丙烯酸异丁酯滴于注射位点，约5-10秒后将鱼放回养殖池内，10-15分钟后恢复正常活动能力；
第三步，检测：试验结束后，解剖观察，确定注射效果，具体如下：在伊文思蓝染液注射一段时间后解剖观察，若侧脑室乃至第三脑室分布有蓝色染液，则达成注射目的。
2.根据权利要求书1所述的一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法，其特征在于，所述第一步中MS-222的浓度为120mg/L。
3.根据权利要求书1所述的一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法，其特征在于，所述第一步中建立坐标的方法为：鲟鱼背侧双眼连线和颅骨中轴线的交点记为点O(0，0，0)，中轴线向吻端方向为Y轴方向，以双眼连线向Y轴方向右侧的方向为X轴方向，以垂直于鲟鱼腹侧面为Z轴方向构建坐标系，其中，O为坐标轴原点。
4.根据权利要求书1所述的一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法，其特征在于，所述第二步中伊文思蓝染液的质量体积浓度为0.1％-0.5％。
CN201910765846.7A 2019-08-19 2019-08-19 一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法 Pending CN110327132A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910765846.7A CN110327132A (zh) 2019-08-19 2019-08-19 一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910765846.7A CN110327132A (zh) 2019-08-19 2019-08-19 一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110327132A true CN110327132A (zh) 2019-10-15

Family

ID=68149852

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910765846.7A Pending CN110327132A (zh) 2019-08-19 2019-08-19 一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110327132A (zh)

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102028546A (zh) * 2010-12-24 2011-04-27 燕山大学 鲤鱼电极穿颅植入脑立体定位法
CN102512260A (zh) * 2011-12-20 2012-06-27 山东农业大学 一种肉仔鸡下丘脑食欲调控研究的方法
CN103284980A (zh) * 2013-06-18 2013-09-11 中国科学院昆明动物研究所 建立老年痴呆症动物模型的方法、专用药液及给药装置
CN103340859A (zh) * 2013-06-04 2013-10-09 中国科学院昆明动物研究所 侧脑室mpp+给药建立非人灵长类帕金森病动物模型的方法
CN104274255A (zh) * 2013-11-29 2015-01-14 沈阳药科大学 一种实验动物脑部给药的方法和装置
CN104568542A (zh) * 2014-12-30 2015-04-29 燕山大学 一种采用在体心脏灌流对鱼类脑组织标本固定的方法
CN106974653A (zh) * 2017-03-30 2017-07-25 燕山大学 一种借助磁共振定位和导航的鲤鱼颅脑电极植入方法
CN107485463A (zh) * 2017-07-19 2017-12-19 新疆医科大学第二附属医院 一种采用单侧两点注射法建造帕金森病模型鼠的方法
US20190134103A1 (en) * 2016-04-28 2019-05-09 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Compositions Comprising Extracellular Matrix of Primitive Animal Species and Related Methods

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102028546A (zh) * 2010-12-24 2011-04-27 燕山大学 鲤鱼电极穿颅植入脑立体定位法
CN102512260A (zh) * 2011-12-20 2012-06-27 山东农业大学 一种肉仔鸡下丘脑食欲调控研究的方法
CN103340859A (zh) * 2013-06-04 2013-10-09 中国科学院昆明动物研究所 侧脑室mpp+给药建立非人灵长类帕金森病动物模型的方法
CN103284980A (zh) * 2013-06-18 2013-09-11 中国科学院昆明动物研究所 建立老年痴呆症动物模型的方法、专用药液及给药装置
CN104274255A (zh) * 2013-11-29 2015-01-14 沈阳药科大学 一种实验动物脑部给药的方法和装置
CN104568542A (zh) * 2014-12-30 2015-04-29 燕山大学 一种采用在体心脏灌流对鱼类脑组织标本固定的方法
US20190134103A1 (en) * 2016-04-28 2019-05-09 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Compositions Comprising Extracellular Matrix of Primitive Animal Species and Related Methods
CN106974653A (zh) * 2017-03-30 2017-07-25 燕山大学 一种借助磁共振定位和导航的鲤鱼颅脑电极植入方法
CN107485463A (zh) * 2017-07-19 2017-12-19 新疆医科大学第二附属医院 一种采用单侧两点注射法建造帕金森病模型鼠的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Macé et al. Whole-brain functional ultrasound imaging reveals brain modules for visuomotor integration
Gur et al. Long-term social recognition memory is mediated by oxytocin-dependent synaptic plasticity in the medial amygdala
Budygin et al. Correlation between behavior and extracellular dopamine levels in rat striatum: comparison of microdialysis and fast-scan cyclic voltammetry
Lee et al. Whole-cell recordings in freely moving rats
Burman et al. Anatomical and physiological definition of the motor cortex of the marmoset monkey
Abdelwahab et al. Intracranial implantation with subsequent 3D in vivo bioluminescent imaging of murine gliomas
CN106029660A (zh) P2x3和/或p2x2/3化合物和方法
Mundinano et al. MRI-guided stereotaxic brain surgery in the infant and adult common marmoset
Echevarria et al. A novel behavioral test battery to assess global drug effects using the zebrafish
Heymann et al. Long term intravital multiphoton microscopy imaging of immune cells in healthy and diseased liver using CXCR6. Gfp reporter mice
Trujillo-Pisanty et al. Cannabinoid receptor blockade reduces the opportunity cost at which rats maintain operant performance for rewarding brain stimulation
Iriah et al. Oxycodone exposure: a magnetic resonance imaging study in response to acute and chronic oxycodone treatment in rats
Pierce et al. Creating anatomically accurate and reproducible intracranial xenografts of human brain tumors
Khadria et al. Photoacoustic imaging reveals mechanisms of rapid-acting insulin formulations dynamics at the injection site
Augustinaite et al. Intrinsic optical signal imaging and targeted injections through a chronic cranial window of a head-fixed mouse
CN102238908A (zh) 脑组织间液与脑细胞外间隙的生理参数测量方法
Rector et al. A miniature CCD video camera for high-sensitivity light measurements in freely behaving animals
CN104784676A (zh) 一种大鼠单肺肺纤维化模型的建立方法
Cho et al. High-throughput zebrafish intramuscular recording assay
CN110327132A (zh) 一种简易的鲟鱼侧脑室给药方法
Li et al. Procedure and protocols for optical imaging of cerebral blood flow and hemodynamics in awake mice
Chen et al. Stem cell tracking with nanoparticle-based ultrasound contrast agents
CN102784012A (zh) 一种血脑屏障药动学持续给药系统及检测系统
Kaur et al. A protocol for collection and infusion of cerebrospinal fluid in mice
Lau et al. Intravital multiphoton imaging of mouse tibialis anterior muscle

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20191015