CN110251577A - 一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法 - Google Patents

一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，包括以下步骤：一、制备包含疏水性柑橘活性物质的乳液；二、喷雾干燥转化为微胶囊；本发明通过将疏水性柑橘活性物质粉末溶入油相(中链甘油三酯，MCT)中，并将油相加入预先溶解好的乳化剂溶液中，通过高速剪切和高压微射流形成包含疏水性柑橘活性物质的乳液，可用来保护疏水性柑橘活性物质的活性，防止了活性成分降解、提高疏水性柑橘活性物质的溶解性，进而使其更好的被生物体吸收，达到了提高口服疏水性柑橘活性物质的生物利用度的效果。

Description

一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法
技术领域
本发明涉及一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法。
背景技术
类黄酮在功能食品、保健品和医药行业的应用吸引了业内关注。然而，生物制剂中的类黄酮由于具有较高的氧化还原能力，对环境胁迫(热、光、氧化和pH等)不稳定、敏感、易被破坏、渗透性差且生物利用度低。
许多柑橘类黄酮在体外实验中均表现出非常好的生物活性，但因其较差的吸收性和溶解性，这些活性成分在生物体中的生物利用度受到极大影响，无法发挥应有功效。橘皮素是一种高结晶性疏水化合物，属于柑橘类黄酮中的一种，该化合物口服生物利用度极差。据报道，大鼠口服50mg/kg的橘皮素剂量，血浆浓度不到0.49μg/mL。
因此本领域技术人员致力于开发一种可提高疏水性柑橘活性物质，特别是多甲氧基黄酮生物利用度的方法。
发明内容
有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种可提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法。
为实现上述目的，本发明提供了一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，包括以下步骤：
步骤一：制备包含疏水性柑橘活性物质的乳液；
步骤二：喷雾干燥转化为微胶囊。
优选的，步骤一中的包含疏水性柑橘活性物质的乳液按以下方法制备；
1)制备乳清浓缩蛋白溶液
1a)以重量计，将5份乳清浓缩蛋白粉末溶于95份超纯水；
1b)于磁力搅拌器上搅拌至充分溶解；
1c)用1：1摩尔比的NaOH和HCl调节pH至7；
1d)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，使其充分水合；
2)制备油相
2a)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，溶入油相物质；
2b)于100℃水浴中加热搅拌至少1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为10mg/g-37.5mg/g的油相；
3)乳液制备
3a)以重量计，将1份步骤1)制得的溶液加入4份步骤2)制得的油相，迅速高速剪切得到粗乳液；
3b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液。
更为优选的，步骤2a)中油相物质为中链甘油三酯，疏水性柑橘活性物质为橘皮素。
更为优选的，步骤2a)中油相物质为质量比为7:3的中链甘油三酯和肉桂醛的混合物。
优选的，步骤一中的包含疏水性柑橘活性物质的乳液按以下方法制备：
4)制备乳清浓缩蛋白/阿拉伯胶溶液
4a)以重量计，将2.5份乳清浓缩蛋白粉末和2.5份阿拉伯胶粉末溶于95份超纯水；
4b)于磁力搅拌器上搅拌至充分溶解；
4c)用1：1摩尔比的NaOH和HCl调节pH至7；
4d)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，使其充分水合；
5)制备油相
5a)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，溶入油相物质；
5b)于100℃水浴中加热搅拌至少1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为10mg/g-37.5mg/g的油相；
6)乳液制备
6a)以重量计，将1份步骤4)制得的溶液加入4份步骤5)制得的油相；迅速高速剪切得到粗乳液；
6b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液。
优选的，步骤一中的包含疏水性柑橘活性物质的乳液按以下方法制备：
7)制备乳清浓缩蛋白/羟丙基甲基纤维素溶液
7a)以重量计，将3份羟丙基甲基纤维素粉末溶于80℃热水中，于室温下搅拌至充分溶解；
7b)以重量计，将1份乳清浓缩蛋白溶于搅拌好的羟丙基甲基纤维素粉溶液，搅拌至充分混合；
8)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，使其充分水合；
8a)制备油相
8b)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，溶入油相物质；
8c)于100℃水浴中加热搅拌至少1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为10mg/g-37.5mg/g的油相；
9)乳液制备
9a)以重量计，将1份步骤7)制得的乳液加入4份步骤8)制得的油相；迅速高速剪切得到粗乳液；
9b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液。
更为优选的，还包括步骤10)制备乳液酸凝胶：
10a)制备好的乳清浓缩蛋白乳液在磁力搅拌下用1摩尔HCl将pH调节成4.5；
10b)定量分装后贮藏在4℃冰箱，形成酸凝胶。
更为优选的，还包括步骤11)制备乳液酸凝胶：
边搅拌边向制备好的乳清浓缩蛋白乳液中加入氯化钙水溶液，使钙离子在体系中的终浓度为2％，形成钙凝胶。
较佳的，步骤二中，采用0.5mm的雾化器喷嘴，喷雾流速为5mL/min，进风温度设置为180±5℃，出口温度设置为80±5℃。
较佳的，疏水性柑橘活性物质为多甲氧基黄酮。
本发明通过将疏水性柑橘活性物质粉末溶入油相中，并将油相加入乳清浓缩蛋白溶液中形成包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液，由于油相与乳清浓缩蛋白溶液互不相溶，因此两者混合后便形成乳液运载体，可用来保护疏水性柑橘活性物质的活性成分，防止了活性成分降解、提高了疏水性柑橘活性物质的溶解性，进而使其更好的被生物体吸收，达到了提高口服疏水性柑橘活性物质的生物利用度的效果。
附图说明
图1是本发明实施例1中乳液样品a的微观结构；
图2是本发明实施例1中微胶囊粉末样品a的重构乳液的微观结构；
图3是本发明实施例1中微胶囊粉末样品a的SEM图；
图4是本发明实施例2中乳液样品b的微观结构；
图5是本发明实施例2中微胶囊粉末样品b重构乳液的微观结构；
图6是本发明实施例2中微胶囊粉末样品b的SEM图；
图7是本发明实施例3中乳液样品c的微观结构；
图8是本发明实施例3中微胶囊粉末样品c重构乳液的微观结构；
图9是本发明实施例3中微胶囊粉末样品c的SEM图；
图10是本发明实施例4中乳液样品d的微观结构；
图11是本发明实施例4中微胶囊粉末样品d重构乳液的微观结构；
图12是本发明实施例4中微胶囊粉末样品d的SEM图；
图13是本发明实施例5中乳液样品e的微观结构；
图14是本发明实施例5中微胶囊粉末样品e重构乳液的微观结构；
图15是本发明实施例5中微胶囊粉末样品e的SEM图；
图16是本发明实施例6中乳液样品f的微观结构；
图17是本发明实施例6中微胶囊粉末样品f重构乳液的微观结构；
图18是本发明实施例6中微胶囊粉末样品f的SEM图；
图19是本发明实施例a、b、c、d、e、f各乳液样品体外消化实验得到的生物可及性数据。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明：
实施例1
一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，包括以下步骤：
步骤一：制备包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液；
步骤二：喷雾干燥转化为微胶囊，喷雾干燥时，采用0.5mm的雾化器喷嘴，喷雾流速为5mL/min，进风温度设置为180±5℃，出口温度设置为80±5℃。待喷雾干燥完成后，将微胶囊粉末收集在密封袋中置于干燥器中保存，记为微胶囊粉末样品a(WPC-E)。
其中，步骤一中的乳清浓缩蛋白乳液按以下方法制备：
1)制备乳清浓缩蛋白溶液
1a)以重量计，将5g乳清浓缩蛋白粉末溶于95g超纯水；
1b)于磁力搅拌器上搅拌至充分溶解；
1c)用1：1摩尔比的NaOH和HCl调节pH至7；
1d)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，使其充分水合；
2)制备油相
2a)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，优选的，疏水性柑橘活性物质粉末为橘皮素，溶入油相物质，优选的，油相物质为中链甘油三酯；
2b)于100℃水浴中加热搅拌1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为37.5mg/g的油相；
3)乳液制备
3a)以重量计，将20g步骤1)制得的包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液加入80g步骤2)制得的油相中；迅速高速剪切，得到粗乳液，优选的剪切转速为12000rpm,剪切时间为3min；
3b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液，并将所得乳液记为乳液样品a。
对乳液样品a和微胶囊粉末样品a进行验证试验，具体验证过程如下：
分别观察乳液样品a以及微胶囊粉末样品a复溶后的微观结构示意图；并用扫描电子显微镜观察微胶囊粉末样品a的SEM图，具体测量过程如下：
取步骤3b)中制备得到的乳液样品a，将其至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图1所示。
取5g微胶囊粉末样品a，将其与95g水复溶后，取10g至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图2所示。
取5g微胶囊粉末样品a，用扫描电子显微镜观察测量微胶囊粉末SEM图，如图3所示
实施例2
一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，包括以下步骤：
步骤一：制备包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液；
步骤二：喷雾干燥转化为微胶囊；喷雾干燥时，采用0.5mm的雾化器喷嘴，喷雾流速为5mL/min，进风温度设置为180±5℃，出口温度设置为80±5℃±5℃。待喷雾干燥完成后，将微胶囊粉末收集在密封袋中置于干燥器中保存，记为微胶囊粉末样品b(WPC/CA-E)。
其中，步骤一中的乳清浓缩蛋白乳液按以下方法制备：
1)制备乳清浓缩蛋白溶液
1a)以重量计，将5g乳清浓缩蛋白粉末溶于95g超纯水；
1b)于磁力搅拌器上搅拌至充分溶解；
1c)用1：1摩尔比的NaOH和HCl调节pH至7；
1d)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，使其充分水合；
2)制备油相
2a)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，优选的，疏水性柑橘活性物质粉末为橘皮素，溶入油相物质，该油相物质为质量比为7:3的中链甘油三酯和肉桂醛的混合物；
2b)于100℃水浴中加热搅拌至少1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为37.5mg/g的油相；
3)乳液制备
3a)以重量计，将20g步骤1)制得的乳清浓缩蛋白溶液加入80g步骤2)制得的油相；迅速高速剪切，得到粗乳液；优选的，剪切转速为12000rpm,时间为3min；
3b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液；并将所得乳液记为乳液样品b。
对乳液样品b和微胶囊粉末样品b进行验证试验，具体验证过程如下：
分别观察乳液样品b以及微胶囊粉末样品b复溶后的微观结构示意图；用扫描电子显微镜测量微胶囊粉末样品b的SEM图，具体测量过程如下：
取10g步骤3b)中制备的乳液样品b，将其至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图4所示。
取5g微胶囊粉末样品b，将其与95g水复溶后，取10g至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图5所示。
取5g微胶囊粉末样品b，用扫描电子显微镜测量微胶囊粉末SEM图，如图6所示。
实施例3
一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，包括以下步骤：
步骤一：制备包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液；
步骤二：喷雾干燥转化为微胶囊；喷雾干燥时，采用0.5mm的雾化器喷嘴，喷雾流速为5mL/min，进风温度设置为180±5℃，出口温度设置为80±5℃。待喷雾干燥完成后，将微胶囊粉末收集在密封袋中置于干燥器中保存，记为微胶囊粉末样品c(WPC/GA-E)。
其中，步骤一中的乳清浓缩蛋白乳液按以下方法制备：
1)制备乳清浓缩蛋白溶液
1a)以重量计，将2.5g乳清浓缩蛋白粉末和2.5g阿拉伯胶粉末溶于95份超纯水；
1b)于磁力搅拌器上搅拌至充分溶解；
1c)用1：1摩尔比的NaOH和HCl调节pH至7；
1d)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，优选的，冰箱保藏温度为4℃，保存时间为12h，使其充分水合；
2)制备油相
2a)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，优选的，疏水性柑橘活性物质粉末为橘皮素，溶入油相物质，优选的，油相物质为中链甘油三酯；
2b)于100℃水浴中加热搅拌至少1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为37.5mg/g的油相；
3)乳液制备
3a)以重量计，将20g步骤1a)制得的乳清浓缩蛋白溶液加入80g步骤1b)制得的油相；迅速高速剪切，得到粗乳液；优选的，剪切转速为12000rpm,剪切时间为3min；
3b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液；并将所得乳液记为乳液样品c。
对乳液样品c和微胶囊粉末样品c进行验证试验，具体验证过程如下：
分别观察乳液样品c以及微胶囊粉末样品c复溶后的微观结构示意图；，用扫描电子显微镜测量微胶囊粉末样品c的SEM图，具体测量过程如下：
取10g步骤1c2中制备得到的乳液样品c，将其至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图7所示。
取5g微胶囊粉末样品c，将其与95g水复溶后，取10g至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图8所示。
取5g微胶囊粉末样品c，用电子显微镜测量微胶囊粉末SEM图，如图9所示。
实施例4
一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，包括以下步骤：
步骤一：制备包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液；
步骤二：喷雾干燥转化为微胶囊；喷雾干燥时，采用0.5mm的雾化器喷嘴，喷雾流速为5mL/min，进风温度设置为180±5℃，出口温度设置为80±5℃。待喷雾干燥完成后，将微胶囊粉末收集在密封袋中置于干燥器中保存，记为微胶囊粉末样品d(WPC/HPMC-E)。
其中，步骤一中的乳清浓缩蛋白乳液按以下方法制备：
1)制备乳清浓缩蛋白溶液
1a)以重量计，将3g羟丙基甲基纤维素粉末溶于80℃热水中，于室温下搅拌至充分溶解；
1b)以重量计，将1g乳清浓缩蛋白溶于搅拌好的羟丙基甲基纤维素粉溶液，搅拌至充分混合；
1c)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，使其充分水合；
2)制备油相
1a)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，优选的，疏水性柑橘活性物质粉末为橘皮素，溶入油相物质，优选的，油相物质为中链甘油三酯；
1b)于100℃水浴中加热搅拌至少1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为37.5mg/g的油相；
3)乳液制备
3a)以重量计，将20g步骤1)制得的乳清浓缩蛋白溶液加入80g步骤2)制得的油相；迅速高速剪切，优选的，剪切转速为12000rpm,剪切时间为3min，得到粗乳液；
3b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液；并将所得乳液记为乳液样品d。
对乳液样品d和微胶囊粉末样品d进行验证试验，具体验证过程如下：
分别观察乳液样品d以及微胶囊粉末样品d复溶后的微观结构示意图，用扫描电子显微镜测量微胶囊粉末样品d的SEM图，具体测量过程如下：
取10g步骤3b)中制备得到的乳液样品d，将其至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图10所示。
取5g微胶囊粉末样品d，将其与95g水复溶后，取10g至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图11所示。
取5g微胶囊粉末样品d，用电子显微镜测量微胶囊粉末SEM图，如图12所示。
实施例5
一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，包括以下步骤：
步骤一：制备包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液；
步骤二：喷雾干燥转化为微胶囊；喷雾干燥时，采用0.5mm的雾化器喷嘴，喷雾流速为5mL/min，进风温度设置为180±5℃，出口温度设置为80±5℃。待喷雾干燥完成后，将微胶囊粉末收集在密封袋中置于干燥器中保存，记为微胶囊粉末样品e(WPC/HPMC-EG(pH＝4.5))。
其中，步骤一中的乳清浓缩蛋白乳液按以下方法制备：
1)制备乳清浓缩蛋白溶液
1a)以重量计，将3g羟丙基甲基纤维素粉末溶于80℃热水中，于室温下搅拌至充分溶解；
1b)以重量计，将1g乳清浓缩蛋白溶于搅拌好的羟丙基甲基纤维素粉溶液，搅拌至充分混合；
1c)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，使其充分水合；
2)制备油相
2a)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，优选的，疏水性柑橘活性物质粉末为橘皮素，溶入油相物质，优选的，油相物质为中链甘油三酯；
2b)于100℃水浴中加热搅拌至少1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为37.5mg/g的油相；
3)乳液制备
3a)以重量计，将10g步骤1a)制得的包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液加入40g步骤1b)制得的油相；迅速高速剪切,得到粗乳液；优选的，剪切转速为12000rpm,剪切时间为3min；
3b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液。
4)制备乳液酸凝胶
4a)制备好的含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液在磁力搅拌下，用1摩尔HCl将pH调节成pH＝4.5；
4b)定量分装后贮藏在4℃冰箱，形成酸凝胶；并将所得酸凝胶记为乳液样品e。
对乳液样品e和微胶囊粉末样品e进行验证试验，具体验证过程如下：
分别观察乳液样品e以及微胶囊粉末样品e复溶后的微观结构示意图；用扫描电子显微镜观察微胶囊粉末样品e的SEM图，具体测量过程如下：
取10g步骤1c2中制备得到的乳液样品e，将其至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图13所示。
取5g微胶囊粉末样品e，将其与95g水复溶后，取10g至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图14所示。
取5g微胶囊粉末样品e，用电子显微镜测量微胶囊粉末SEM图，如图15所示。
实施例6
一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，包括以下步骤：
步骤一：制备包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液；
步骤二：喷雾干燥转化为微胶囊；喷雾干燥时，采用0.5mm的雾化器喷嘴，喷雾流速为5mL/min，进风温度设置为180±5℃，出口温度设置为80±5℃。待喷雾干燥完成后，将微胶囊粉末收集在密封袋中置于干燥器中保存，记为微胶囊粉末样品f(WPC/HPMC-EG，(Ca2 +))。
其中，步骤一中的乳清浓缩蛋白乳液按以下方法制备：
1)制备乳清浓缩蛋白溶液
1a)以重量计，将3g羟丙基甲基纤维素粉末溶于80℃热水中，于室温下搅拌至充分溶解；
1b)以重量计，将1g乳清浓缩蛋白溶于搅拌好的羟丙基甲基纤维素粉溶液，搅拌至充分混合；
1c)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，使其充分水合；
2)制备油相
2a)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，优选的，疏水性柑橘活性物质粉末为橘皮素，溶入油相物质，优选的，油相物质为中链甘油三酯；
2b)于100℃水浴中加热搅拌至少1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为37.5mg/g的油相；
3)乳液制备
3a)以重量计，将20g步骤1a)制得的包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液加入4份步骤1b)制得的油相中；迅速高速剪切，优选的，剪切转速为12000rpm,剪切时间为3min，得到粗乳液；
3b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液。
4)制备乳液酸凝胶
边搅拌边向制备好的包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液中加入氯化钙水溶液，使钙离子在体系中的终浓度为2％，形成钙凝胶，并将所得钙凝胶记为乳液样品f。
对乳液样品f和微胶囊粉末样品f进行验证试验，具体验证过程如下：
分别观察乳液样品f以及微胶囊粉末样品f复溶后的微观结构示意图；用扫描电子显微镜观测微胶囊粉末样品f的SEM图，具体测量过程如下：
取10g步骤1c2中制备得到的乳液样品f，将其至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图16所示。
取5g微胶囊粉末样品f，将其与95g水复溶后，取10g至于荧光显微镜下观察，并在标尺为10μm时，测得乳液样品的微观结构，如图17所示。
取5g微胶囊样品微胶囊粉末样品f，用电子显微镜测量微胶囊粉末SEM图，如图18所示。
通过对实施例a、b、c、d、e、f进行的验证试验和观察可知，按照本方法制备的包含疏水性柑橘活性物质的乳清浓缩蛋白乳液分布均匀，制成微胶囊粉末后能够很好的复溶于水，这样人们在食用橘皮素时，能够保护橘皮素，避免其遭胃肠道的破坏，同时也改善了橘皮素水溶性差的缺点，进而提高了橘皮素的生物可及性。
分别对试验组的微胶囊粉末样品a、微胶囊粉末样品b、微胶囊粉末样品c、微胶囊粉末样品d、微胶囊粉末样品e、微胶囊粉末样品f以及对照样品进行生物可及性测试，其中对照样品为按照实施例1中步骤2)的方法制备的含有橘皮素的中链甘油三酯油相混合物。
取同样组份的微胶囊粉末样品a、微胶囊粉末样品b、微胶囊粉末样品c、微胶囊粉末样品d、微胶囊粉末样品e、微胶囊粉末样品f以及对照样品；按照100mg/kg的橘皮素给SD大鼠口服前述样品，负载TAN(表示橘皮素)的乳液(WPC-E、WPC/CA-E、WPC/GA-E、WPC/HPMC-E、WPC/HPMC-EG(pH＝4.5)和WPC/HPMC-EG(Ca2+)在生物体内会逐步释放TAN，进而逐步发挥药效；同时测量SD大鼠体内的药代动力学参数，测量数据如下表1所示：
表1TAN在大鼠血浆中的药代动力学参数
Table 1Pharmacokinetic parameters of tangeretin in rat plasma
其中，Tmax-达峰时间；Cmax-最大(峰)血浆药物浓度；T1/2-消除半衰期；AUC0.5-30-药时曲线下面积；CI-血浆清除率；MRT-平均滞留时间。
根据上表数据可知，SD大鼠口服100mg/kg的橘皮素后，负载橘皮素的乳液的TAN(橘皮素)的达峰时间均为4h，而MCT(表示油相)橘皮素油悬浮液的达峰时间为1h，说明乳液能有效延长TAN在体内的释放时间。
同时，WPC-E、WPC/CA-E、WPC/GA-E中TAN的达峰浓度分别为915.6382、867.1739、924.5229ng/mL，而WPC/HPMC-E、WPC/HPMC-EG(pH＝4.5)和WPC/HPMC-EG-(Ca2+)的达峰浓度分别为2147.9743、2247.7291、2090.3796ng/mL。加入HPMC(羟丙基甲基纤维素)的乳液达峰浓度明显高于WPC(乳清浓缩蛋白)乳液，消除半衰期T1/2和药时曲线下面积AUC也明显高于WPC乳液。
WPC-E、WPC/CA-E、WPC/GA-E的血浆清除率CI分别为21597.4171、20597.7333、20378.0699mL/hr/kg，明显高于HPMC/WPC-E(8270.29mL/hr/kg)、WPC/HPMC-EG(pH 4.5)(6666.8859mL/hr/kg)、WPC/HPMC-EG-(Ca2+)(8139.4662mL/hr/kg)的血浆清除率。因此，加入HPMC后，平均滞留时间MRT也比WPC乳液延长了1个多小时，说明HPMC的加入延长了TAN在体内的循环时间，使TAN长期维持在有效浓度以上。
综上，根据相关的药代动力学实验数据可以得出如下结论：
1.口服给药后，TAN能从乳液中缓慢释放出来，经过4h后达到最大药物浓度，而TAN油悬浮液则经过1h后便达到最大浓度，但其最大药物浓度远远小于经过乳液递送的TAN浓度；
2.口服WPC-E、WPC/CA-E、WPC/GA-E递送的TAN后，其Cmax、T1/2、AUC0.5-30、MRT均比WPC/HPMC-E、WPC/HPMC-EG(pH＝4.5)和WPC/HPMC-EG(Ca2+)小，说明HPMC增加乳液粘度后，能提高TAN的血浆浓度，从而促使其发挥药效。
取同样组份的微胶囊粉末样品a、微胶囊粉末样品b、微胶囊粉末样品c、微胶囊粉末样品d、微胶囊粉末样品e、微胶囊粉末样品f以及对照样品备用，然后分别对进行乳液样品体外消化实验。具体实验过程如下：
第一步：模拟口腔
将含有0.5wt％黏蛋白的6mL口腔模拟液和1.5mL的乳液样品(4％总油相)以及7.5mL的磷酸缓冲溶液(PBS,pH＝7.0,10mM)混合，使得油相比例为2％，进一步调节pH至6.8并在37℃水浴下150rpm 10min模拟口腔环境，将前述备用样品分别投入模拟口腔中进行消化，待口腔消化结束后取15mL进一步胃部消化。
第二步：模拟胃部
用2g/L NaCl、3.2g/L胃蛋白酶和7mL/L HCl制备模拟胃液，并调节pH至1.5。将口腔消化液和胃模拟液1:1混合，使得油相比例为1wt％。将混合液pH调至2.5，在37℃水浴条件下以150rpm搅拌1h来模拟胃部消化环境。取30ml胃部消化液进行下一步的实验。
第三步：模拟小肠
将胃部消化液pH调至7.0，加入3.5ml胆盐提取物和1.5ml的盐离子溶液后继续调节pH至7.0。加入新鲜制备的2.5ml新鲜制备的胰酶悬浮液，使得最终的溶液中含有5mg/mL胆盐，100mM NaCl,5mM CaCl2，和1.6mg/mL胰酶。在消化过程中添加NaOH溶液(0.25M)中和油脂消化产生的脂肪酸，使pH保持在7.0。2h小肠消化之后，根据NaOH的消耗量来计算脂肪酸的释放速率：
FFA％＝(VNaOH(t)×MNaOH×Moil)/moil×100％
VNaOH(t)是消耗的NaOH溶液的体积，MNaOH是NaOH溶液的摩尔浓度(mol.L-1),Moil是油脂的摩尔质量，moil是指小肠消化开始时油相的质量。
并对各组样品实验数据统计，计算出其对应的生物可及性数据，最终结果如图19所示。观察图19可知，相对于对照组(MCT橘皮素油悬浮液)而言，实验组(WPC-E乳液、WPC/CA-E乳液、WPC/GA-E乳液、WPC/HPMC-E乳液、WPC/HPMC-EG(pH＝4.5)乳液和WPC/HPMC-EG，(Ca2+)乳液)的生物利用度均有较高的提升，其中，微胶囊粉末样品f(WPC/HPMC-EG，(Ca2+)乳液)的生物利用度最佳。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。

Claims (10)

1.一种提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，其特征是：包括以下步骤：
步骤一：制备包含疏水性柑橘活性物质的乳液；
步骤二：喷雾干燥转化为微胶囊。
2.如权利要求1所述的提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，其特征是：所述步骤一中包含疏水性柑橘活性物质的乳液按以下方法制备：
1)制备乳清浓缩蛋白溶液
1a)以重量计，将5份乳清浓缩蛋白粉末溶于95份超纯水；
1b)于磁力搅拌器上搅拌至充分溶解；
1c)用1：1摩尔比的NaOH和HCl调节pH至7；
1d)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，使其充分水合；
2)制备油相
2a)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，溶入油相物质；
2b)于100℃水浴中加热搅拌至少1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为10mg/g-37.5mg/g油相；
3)乳液制备
3a)以重量计，将1份步骤1)制得的乳液加入4份步骤2)制得的油相；迅速高速剪切得到粗乳液；
3b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液。
3.如权利要求1所述的提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，其特征是：所述步骤一中的包含疏水性柑橘活性物质的乳液按以下方法制备：
4)制备乳清浓缩蛋白/阿拉伯胶乳液
4a)以重量计，将2.5份乳清浓缩蛋白粉末和2.5份阿拉伯胶粉末溶于95份超纯水；
4b)于磁力搅拌器上搅拌至充分溶解；
4c)用1：1摩尔比的NaOH和HCl调节pH至7；
4d)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，使其充分水合；
5)制备油相
5a)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，溶入油相物质；
5b)于100℃水浴中加热搅拌至少1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为10mg/g-37.5mg/g油相；
6)乳液制备
6a)以重量计，将1份步骤4)制得的乳液加入4份步骤5)制得的油相；迅速高速剪切得到粗乳液；
6b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液。
4.如权利要求1所述的提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，其特征是：所述步骤一中的包含疏水性柑橘活性物质的乳液按以下方法制备：
7)制备乳清浓缩蛋白/羟丙基甲基纤维素乳液
7a)以重量计，将3份羟丙基甲基纤维素粉末溶于80℃热水中，于室温下搅拌至充分溶解；
7b)以重量计，将1份乳清浓缩蛋白溶于搅拌好的羟丙基甲基纤维素粉溶液，搅拌至充分混合；
7c)将所得蛋白溶液放置冰箱保存，使其充分水合；
8)制备油相
8a)准确称取一定质量的疏水性柑橘活性物质粉末，溶入油相物质；
8b)于100℃水浴中加热搅拌至少1h，使疏水性柑橘活性物质粉末充分溶解，得到疏水性柑橘活性物质浓度为10mg/g-37.5mg/g的油相；
9)乳液制备
9a)以重量计，将1份步骤7)制得的溶液加入4份步骤8)制得的油相；迅速高速剪切得到粗乳液；
9b)经过高压微射流，在压强为9kpsi下均质，循环5次，即得油相含量重量比为20％，疏水性柑橘活性物质浓度为7.5mg/g的乳液。
5.如权利要求1至4任一项所述的提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，其特征是：所述油相物质为中链甘油三酯；所述疏水性柑橘活性物质为橘皮素。
6.如权利要求2所述的提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，其特征是：步骤2a)中所述油相物质为质量比为7:3的中链甘油三酯和肉桂醛的混合物。
7.如权利要求4所述的提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，其特征是：还包括步骤10)制备乳液酸凝胶：
10a)制备好的乳清浓缩蛋白乳液在磁力搅拌下，用1摩尔HCl将pH调节成4.5；
10b)定量分装后贮藏在4℃冰箱，形成酸凝胶。
8.如权利要求4所述的提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，其特征是：还包括步骤11)制备乳液酸凝胶：
边搅拌边向制备好的乳清浓缩蛋白乳液中加入氯化钙水溶液，使钙离子在体系中的终浓度为2％，形成钙凝胶。
9.如权利要求1至4及6至8任一项所述的提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，其特征是：所述步骤二中，采用0.5mm的雾化器喷嘴，喷雾流速为5mL/min，进风温度设置为180±5℃，出口温度设置为80±5℃。
10.如权利要求1至4任一所述的提高疏水性柑橘活性物质生物利用度的方法，其特征是：所述疏水性柑橘活性物质为多甲氧基黄酮。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113273693A (zh) * 2021-04-30 2021-08-20 重庆西南果品营养研究院 一种柑橘类黄酮蛋白粉及制备方法与应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102300474A (zh) * 2009-02-03 2011-12-28 热带产品公司 含有柑桔柠檬苦素类化合物的微胶囊化柑桔植物化学品及其在饮料中的应用
CN109953336A (zh) * 2019-03-19 2019-07-02 华中农业大学 一种高载量多甲氧基黄酮速溶微胶囊粉及其制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102300474A (zh) * 2009-02-03 2011-12-28 热带产品公司 含有柑桔柠檬苦素类化合物的微胶囊化柑桔植物化学品及其在饮料中的应用
CN109953336A (zh) * 2019-03-19 2019-07-02 华中农业大学 一种高载量多甲氧基黄酮速溶微胶囊粉及其制备方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113273693A (zh) * 2021-04-30 2021-08-20 重庆西南果品营养研究院 一种柑橘类黄酮蛋白粉及制备方法与应用

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