CN110241078A - 一种脂肪干细胞的提取和注射方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及美容技术领域。目的在于提供一种脂肪干细胞的提取和注射方法，能够提高脂肪的提取量和存活率，且能够在注射阶段实现精准注射。本发明所采用的技术方案是：将培养后的自体脂肪干细胞填装在脂肪精量注射器内，然后在受区采取先粗后精的方式进行注射；粗注射量是在预估注射量的基础上减少5％得到，精注射量是美容医师在粗注射完成后根据取得的实际效果进行注射器的缓慢推进得到，以实际注射量为准；所述预估注射量根据预期的美容效果预估得到。本发明能够提高自体脂肪干细胞的获取率和回填成活率，方便对自体脂肪的注射量进行有效的控制，利于实现精准注射。

Description

一种脂肪干细胞的提取和注射方法

技术领域

本发明涉及美容技术领域，具体涉及脂肪干细胞的提取和注射方法。

背景技术

脂肪干细胞(adipose-derivedstemcells，ADSCs)是近年来从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞，具有可迅速扩增、不易衰老等一般干细胞的优点。自体脂肪移植是美容项目中的重要项目之一，广泛应用在面部整形、隆乳术、隆臀术等整形手术中，具有无刀口、无排异反应、形态真实、手感自然等优点。

自体脂肪在移植的过程中，主要包括两大步骤：一是对脂肪干细胞的提取，二是对脂肪干细胞的注射。在脂肪干细胞的提取过程中，传统方式不仅提取率、成活率低，细胞的活性较差。在脂肪干细胞的注射中，受区脂肪注射量过多或过少都会影响到最终呈现的美容效果，只有精准的把握好注射量才能取得完美、自然的效果。传统方式直接在受区根据模拟的预估量进行一次性注射，但在实际操作过程中，该预估值也是具有一定偏差的，还需要美容医师根据实际情况进行一定的微调。为此，现有技术中在注射末期往往需要更换小型号的注射器，以便对注射量进行更好的控制，但这又会造成反复穿刺，不仅影响了手术的进程，也增加了顾客的痛楚。

发明内容

本发明的目的在于提供一种脂肪干细胞的提取和注射方法，能够提高脂肪的提取量和存活率，且能够在注射阶段实现精准注射。

本发明采用的技术方案为：一种脂肪干细胞的提取和注射方法，包括以下步骤：

一、自体脂肪干细胞提取：

①、在腹部或大腿内侧采集自体脂肪，待其中的肿胀液与脂肪组织自然分层后吸弃下层液体，然后加入等体积的质量浓度为0.9％的生理盐水至脂肪组织中，反复摇晃脂肪组织后静置5min，吸弃下层溶液；然后再次加入等体积的生理盐水，用650g离心力离心5min，吸弃上层油层；

②、对清洗脂肪组织进行机械破碎，在破碎后的脂肪组织中加入质量浓度为0.3％的混合酶，混合均匀后制得混合原液；所述混合酶由胶原酶Ⅰ型和胶原酶Ⅱ型按1:2的质量比加入生理盐水中配制形成；将混合原液在37摄氏度下恒温摇床培养30min，培养完成后以650g离心力离心5min，然后吸弃上清液，获得沉淀；

③、向沉淀中加入质量浓度为0.9％的生理盐水清洗、过滤、离心去上清，获得自体脂肪干细胞；将获得的自体脂肪干细胞体外培养2-3周，获得培养后的自体脂肪干细胞；

二、自体脂肪干细胞注射：

将培养后的自体脂肪干细胞与生理盐水注射液混合并填装在脂肪精量注射器内，然后在受区采取先粗后精的方式进行注射；粗注射量是在预估注射量的基础上减少5％得到，精注射量是美容医师在粗注射完成后根据取得的实际效果进行注射器的缓慢推进得到，以实际注射量为准；所述预估注射量根据预期的美容效果预估得到。

优选的，所述脂肪精量注射器包括注射器主体和注射针；

所述注射器主体包括外筒，所述外筒顶部的周面上设置有一圈第一挡盘，外筒底部的中心设置注射乳头，所述注射针安装在注射乳头上；所述外筒内设置有活塞，所述活塞的顶部设置有外推杆；所述外推杆的上端伸出外筒，并设置有第二挡盘，外推杆内设置有沿外推杆长度方向延伸的中心孔；

所述活塞包括第一塞体和第二塞体，所述第一塞体与外筒的内腔相配合，第一塞体的顶部与外推杆固接，第一塞体的内部设置有上小下大的阶梯通孔；所述第二塞体与阶梯通孔的下段相配合，并位于阶梯通孔的下段内；所述外推杆的中心孔内设置有与中心孔相配合的内推杆，所述内推杆的下端穿过阶梯通孔的上段，并与第二塞体的顶面固接；

还包括微量注射推杆，所述微量注射推杆与外推杆的中心孔相配合，微量注射推杆的上端设置按压头；所述外推杆的中心孔上端还设置有密封薄膜。

优选的，所述外筒一侧的第一挡盘上设置有杆孔，所述杆孔内设置有与杆孔相配合的限位杆，所述限位杆的上下两端均设置有端头，限位杆的上端与第二挡盘相对，限位杆的下端与环形的限位盘相对；所述限位盘套设在外筒上，且能够沿外筒上下移动或在外筒上形成定位。

优选的，所述注射针包括针座和设置在针座上的针体；所述针体远离针座的一端设置针尖，所述针尖呈密闭的半球面形，针尖与针体之间设置过渡斜面；所述针体靠近过渡斜面的侧壁上设置有与针体内部连通的出液孔，针体的外侧壁上沿针体的长度方向设置有穿刺刻度线；

优选的，所述出液孔对应的针体侧壁上设置有一圈环形的浅槽，所述浅槽内套设有一层弹性薄膜，所述弹性薄膜的外表面不高于针体的外侧壁。

优选的，所述出液孔上部和下部相对的弹性薄膜上设置有割口，所述割口延伸至弹性薄膜的边沿。

本发明的有益效果集中体现在：

1、能够提高自体脂肪干细胞的获取率和回填成活率。

2、完全采用自体脂肪进行移植，对人体无害、无排异反应。

3、移植后呈现的美容效果自然、真实、无创口。

4、便于对自体脂肪干细胞的注射量进行精准控制，利于实现精准注射，对取得完美的美容效果具有积极意义。

附图说明

图1为本发明的结构示意图；

图2为图1中A部放大图；

图3为图1中B部放大图；

图4为注射针的结构示意图；

图5为图4中C部放大图。

具体实施方式

以下将结合实施例的方式对本发明所述的一种脂肪干细胞的提取和注射方法进行阐释。

实施例一：

自体脂肪干细胞的提取方法，包括以下步骤：

①、在腹部或大腿内侧采集自体脂肪50ml，采集方式选择抽吸的方式，由于腹部和大腿内侧均是赘肉容易堆积的部位，脂肪的采集方便，且能够起到一定的抽脂减肥作用。当然，自体脂肪的采集量根据实际的情况进行选择，单部位、单次的采集量不易过大，否则容易出现表层皮肤皱纹、松弛等现象。

采集完成后，将自体脂肪注入采集杯中，在无菌环境下自然沉淀，待其中的肿胀液与脂肪组织自然分层后吸弃下层液体，然后加入等体积的质量浓度为0.9％的生理盐水至脂肪组织中，反复摇晃脂肪组织后静置5min，吸弃下层溶液；然后再次加入等体积的生理盐水(本发明中所述的生理盐水均选用质量浓度为0.9％的生理盐水)，用650g离心力离心5min，吸弃上层油层；

②、对清洗脂肪组织进行机械破碎，破碎至大小在1-2mm左右的小颗粒，在破碎后的脂肪组织中加入质量浓度为0.3％的混合酶，混合均匀后制得混合原液。所述混合酶由胶原酶Ⅰ型和胶原酶Ⅱ型按1:2的质量比加入生理盐水中配制形成；将混合原液在37摄氏度下恒温摇床培养30min，培养完成后以650g离心力离心5min，然后吸弃上清液，获得沉淀。

③、向沉淀中加入质量浓度为0.9％的生理盐水清洗、过滤、离心去上清，获得自体脂肪干细胞。

实施例二

以专利技术CN103667187A说明书第2页0016-0017段记载的提取方案为对照方法，采集人体脂肪组织并提取脂肪干细胞，具体方法详见专利技术CN103667187A。

实施例三

从志愿者身体抽脂，分别按照实施例一和实施例二的方式进行脂肪干细胞的提取，重复4次，每次进行5个样本的提取，统计自体脂肪干细胞数量及成活率，结果详见表1。

表1

根据表1，我们可以明确的看出，实施例一提取得到的脂肪干细胞的数量和成活率明显高于实施例二，且重复试验4次，各组间数据相近，且相对稳定，具有足够的证据支撑本发明的效果。

实施例四

将获得的自体脂肪干细胞体外培养2-3周，获得培养后的自体脂肪干细胞，体外培养的具体方案参考常规干细胞的体外培养方案。

实施例五

将培养后的自体脂肪干细胞与生理盐水注射液混合并填装在脂肪精量注射器内，然后在受区采取先粗后精的方式进行注射。这种方式能够有效的避免注射量过大或注射量过小的情况出现，在受区面积较大时，一般是体表投影面积大于5平方厘米时，还可以采用多点结合的注射方式，也就是在受区先确定中心注射点，然后在中心注射点附近确定侧注射点，多点结合的方式可以使得注射更加的均匀，后期呈现的效果更加的完美，防止出现囊肿。

本发明粗注射量是在预估注射量的基础上减少5％得到，精注射量是美容医师在粗注射完成后根据取得的实际效果进行注射器的缓慢推进得到，以实际注射量为准；所述预估注射量根据预期的美容效果预估得到。例如：在进行丰胸手术时，预估注射量为100ml，则粗注射量为95ml，在注射完95毫升后，美容医师根据实际情况进行精细注射，经注射的实际注射量可能是2ml、5ml、7ml等等。

实施例六

本发明还公开了一种与该方法配合使用的脂肪精量注射器，如图1所示，包括注射器主体和注射针1，本发明所述的注射针1可以是三角针、圆头针、扁针等，其中以圆头针最佳，如图1所示，所述注射针1为圆头针，所述圆头针的针头呈封闭的圆形，圆头针针头的侧壁上均匀设置有多个注射孔，采用圆头针能够实现钝性穿刺，防止扎伤血管、神经等，多个注射孔便于自体脂肪的均匀分散，当然，在一些特定情况下，如单侧注脂时，采用单注射孔的方式也是可行的。

本发明所述注射器主体包括外筒2，所述外筒2顶部的周面上设置有一圈第一挡盘3，便于手指勾靠。外筒2底部的中心设置注射乳头，所述注射针1安装在注射乳头上。所述外筒2内设置有活塞4，所述活塞4的顶部设置有外推杆5，通过外推杆5驱动活塞4整体移动。所述外推杆5的上端伸出外筒2，并设置有第二挡盘6，便于对外推杆5进行按压。

本发明的设计精巧精巧之处在于，外推杆5内设置有沿外推杆5长度方向延伸的中心孔7。如图3所示，所述活塞4包括第一塞体8和第二塞体9。所述第一塞体8与外筒2的内腔相配合，第一塞体8的顶部与外推杆5固接，第一塞体8的内部设置有上小下大的阶梯通孔。所述第二塞体9与阶梯通孔的下段相配合，并位于阶梯通孔的下段内。第一塞体8和第二塞体9整体移动，进行前期的粗量注射，第二塞体9单独移动，进行末期的微量、精量注射。第二塞体9的驱动方式后，所述外推杆5的中心孔7内设置有与中心孔7相配合的内推杆10，所述内推杆10的下端穿过阶梯通孔的上段，并与第二塞体9的顶面固接，通过内推杆10的升降来驱动第二塞体9。

至于内推杆10的驱动方式，如图2所示，本发明还包括微量注射推杆11，所述微量注射推杆11与外推杆5的中心孔7相配合，微量注射推杆11的上端设置按压头12，微量注射推杆11能够插入中心孔7内，挤推内推杆10，实现内推杆10的升降。在抽吸脂肪的过程中，由于第一塞体8和第二塞体9之间存在一定的摩擦力，通常其不会出现分离的情况，能够确保抽吸的顺利。当然，为了完全杜绝在抽吸的过程中出现第一塞体8和第二塞体9分离的现象，本发明所述外推杆5的中心孔7上端还设置有密封薄膜13，所述密封薄膜13采用树脂材料制成，对中心孔7的上端进行封闭。在抽吸脂肪时，由于中心孔7上端封闭，若第二塞体9与第一塞体8发生分离，中心孔7内会产生负压，第二塞体9会被迫压入第一塞体8内。在进行微量注射时，扎破密封薄膜13即可。

本发明在进行自体脂肪注射时，在注射前期，可直接推动外推杆5，外推杆5带动活塞4整体下移，将自体脂肪从注射针1推出，这与传统的注射器的使用方式相当。在注射后期，也就是自体脂肪的注射量接近需求量时。由于活塞4尺寸较大，不适宜再通过外推杆5进行注射，此时应当将密封薄膜13扎破，将微量注射推杆11插入外推杆5的中心孔7内，根据需求量缓慢推动微量注射推杆11，微量注射推杆11推动内推杆10，内推杆10推动第二塞体9，第二塞体9下移，将少量的自体脂肪从注射针1推出。采用这样的方式后，本发明能够对注射末期的注射量进行更加精确的控制，使得注射量与实际需求量达到更加完美的匹配，提升了美容效果。

在此基础上，为了使前期进行粗量注射时，注射量能够更加的精准，避免引起人为失误，本发明更好的做法还可以是，如图1所示，所述外筒2一侧的第一挡盘3上设置有杆孔，所述杆孔内设置有与杆孔相配合的限位杆14，所述限位杆14的上下两端均设置有端头，限位杆14的上端与第二挡盘6相对，限位杆14的下端与环形的限位盘15相对。所述限位盘15套设在外筒2上，且能够沿外筒2上下移动或在外筒2上形成定位。也就是说，本发明通过限位盘15在外筒2上的位置，对限位杆14的下端进行限制，在通过限位杆14的上端对第二挡盘6进行限制，进而实现对外推杆5推送距离的限制，最终实现对粗注射量的限制。这种情况下，外筒2表面通常还设置有刻度线，用于标识限制量，该刻度线基于限位盘15的位置进行设计，能够准确的反应出限制的粗注射量。

本发明限位盘15的具体安装结构多种多样，例如：所述外筒2与限位盘15螺纹连接，旋转限位盘15即可进行调节和定位。也可以是，所述限位盘15与外筒2之间设置橡胶胀套，通过橡胶胀套实现调节和定位，形成阻尼滑动。当然，采用其他起到相同作用的限位盘15安装方式也是可行的。

另外，本发明采用专用的注射针1配合注射器主体进行使用，如图4所示，所述注射针包括针座和设置在针座上的针体16，所述针座用于与注射器连接，针体16和针座0内部设置有注射通道，注射器内的脂肪经注射通道到达针体16的端部。所述针体16远离针座的一端设置针尖17，所述针尖17呈密闭的半球面形，针尖17与针体16之间设置过渡斜面18。能够进行钝性穿刺，穿刺过程中可将血管、神经推开，防止损伤。所述针体16靠近过渡斜面18的侧壁上设置有与针体16内部连通的出液孔19，穿刺完成后，脂肪经出液孔19进入机体内，针体16的外侧壁上沿针体16的长度方向设置有穿刺刻度线20，用于标识穿刺深度。

这种注射针最大的不同之处在于，为了防止在注射压力较大时，出现脂肪回退的现象，如图5所示，所述出液孔19对应的针体16侧壁上设置有一圈环形的浅槽21，所述浅槽21内套设有一层弹性薄膜22，所述弹性薄膜22的外表面不高于针体16的外侧壁，防止对进针在此干扰。注射时，脂肪推开弹性薄膜22，从弹性薄膜22的边沿溢出，若脂肪出现回退时，会将弹性薄膜22压覆在浅槽21内，实现对出液孔20的封闭，起到单向阀的作用。为了降低注射时需求的推送压力，还可以在所述出液孔19上部和下部相对的弹性薄膜22上设置有割口23，所述割口23延伸至弹性薄膜22的边沿，所述割口23的长度不宜过长，以覆盖出液孔19四分之一至五分之一的半径长度为宜，既不影响防回退效果，又能降低注射推送压力。另外，所述弹性薄膜22最好是由人体可降解的材料制成，例如：由聚对二环已酮和聚丙烯酰胺制成。聚丙烯酰胺是一种线状的有机高分子聚合物，具备絮凝性、增稠性、耐剪切性、降阻性、分散性等综合性能。聚对二环已酮植入机体内后，可在180天内被机体吸收，分解成二氧化碳和水排出体外。当然，采用其他起到相同作用的材料制成弹性薄膜22也是可行的。

Claims (6)

1.一种脂肪干细胞的提取和注射方法，其特征在于，包括以下步骤：

一、自体脂肪干细胞提取：

①、在腹部或大腿内侧采集自体脂肪，待其中的肿胀液与脂肪组织自然分层后吸弃下层液体，然后加入等体积的质量浓度为0.9％的生理盐水至脂肪组织中，反复摇晃脂肪组织后静置5min，吸弃下层溶液；然后再次加入等体积的生理盐水，用650g离心力离心5min，吸弃上层油层；

②、对清洗脂肪组织进行机械破碎，在破碎后的脂肪组织中加入质量浓度为0.3％的混合酶，混合均匀后制得混合原液；所述混合酶由胶原酶Ⅰ型和胶原酶Ⅱ型按1:2的质量比加入生理盐水中配制形成；将混合原液在37摄氏度下恒温摇床培养30min，培养完成后以650g离心力离心5min，然后吸弃上清液，获得沉淀；

③、向沉淀中加入质量浓度为0.9％的生理盐水清洗、过滤、离心去上清，获得自体脂肪干细胞；将获得的自体脂肪干细胞体外培养2-3周，获得培养后的自体脂肪干细胞；

二、自体脂肪干细胞注射：

将培养后的自体脂肪干细胞与生理盐水注射液混合并填装在脂肪精量注射器内，然后在受区采取先粗后精的方式进行注射；粗注射量是在预估注射量的基础上减少5％得到，精注射量是美容医师在粗注射完成后根据取得的实际效果进行注射器的缓慢推进得到，以实际注射量为准；所述预估注射量根据预期的美容效果预估得到。

2.根据权利要求1所述的脂肪干细胞的提取和注射方法，其特征在于：所述脂肪精量注射器包括注射器主体和注射针(1)；

所述注射器主体包括外筒(2)，所述外筒(2)顶部的周面上设置有一圈第一挡盘(3)，外筒(2)底部的中心设置注射乳头，所述注射针(1)安装在注射乳头上；所述外筒(2)内设置有活塞(4)，所述活塞(4)的顶部设置有外推杆(5)；所述外推杆(5)的上端伸出外筒(2)，并设置有第二挡盘(6)，外推杆(5)内设置有沿外推杆(5)长度方向延伸的中心孔(7)；

所述活塞(4)包括第一塞体(8)和第二塞体(9)，所述第一塞体(8)与外筒(2)的内腔相配合，第一塞体(8)的顶部与外推杆(5)固接，第一塞体(8)的内部设置有上小下大的阶梯通孔；所述第二塞体(9)与阶梯通孔的下段相配合，并位于阶梯通孔的下段内；所述外推杆(5)的中心孔(7)内设置有与中心孔(7)相配合的内推杆(10)，所述内推杆(10)的下端穿过阶梯通孔的上段，并与第二塞体(9)的顶面固接；

还包括微量注射推杆(11)，所述微量注射推杆(11)与外推杆(5)的中心孔(7)相配合，微量注射推杆(11)的上端设置按压头(12)；所述外推杆(5)的中心孔(7)上端还设置有密封薄膜(13)。

3.根据权利要求2所述的脂肪干细胞的提取和注射方法，其特征在于：所述外筒(2)一侧的第一挡盘(3)上设置有杆孔，所述杆孔内设置有与杆孔相配合的限位杆(14)，所述限位杆(14)的上下两端均设置有端头，限位杆(14)的上端与第二挡盘(6)相对，限位杆(14)的下端与环形的限位盘(15)相对；所述限位盘(15)套设在外筒(2)上，且能够沿外筒(2)上下移动或在外筒(2)上形成定位。

4.根据权利要求3所述的脂肪干细胞的提取和注射方法，其特征在于：所述注射针(1)包括针座和设置在针座上的针体(16)；所述针体(16)远离针座的一端设置针尖(17)，所述针尖(17)呈密闭的半球面形，针尖(17)与针体(16)之间设置过渡斜面(18)；所述针体(16)靠近过渡斜面(18)的侧壁上设置有与针体(16)内部连通的出液孔(19)，针体(16)的外侧壁上沿针体(16)的长度方向设置有穿刺刻度线(20)。

5.根据权利要求4所述的脂肪干细胞的提取和注射方法，其特征在于：所述出液孔(19)对应的针体(16)侧壁上设置有一圈环形的浅槽(21)，所述浅槽(21)内套设有一层弹性薄膜(22)，所述弹性薄膜(22)的外表面不高于针体(16)的外侧壁。

6.根据权利要求5所述的脂肪干细胞的提取和注射方法，其特征在于：所述出液孔(19)上部和下部相对的弹性薄膜(22)上设置有割口(23)，所述割口(23)延伸至弹性薄膜(22)的边沿。