CN110191886A - 5,6-二氢-11h-吲哚并[2,3-b]喹啉-11-酮作为alk抑制剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供了由式I表示的化合物以及其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中，R^1a、R^1b、R^2a、R^2b、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、E和(B)如说明书中所述地定义。本发明还提供式I的化合物在治疗对ALK的抑制有响应的病况或病症例如癌症中的用途：并且(B)为

Description

5,6-二氢-11H-吲哚并[2,3-B]喹啉-11-酮作为ALK抑制剂

技术领域

本发明提供了间变性淋巴瘤激酶抑制剂，以及治疗其中间变性淋巴瘤激酶的抑制提供有益效果的病况和疾病的治疗方法。

背景技术

间变性淋巴瘤激酶(ALK)是受体酪氨酸激酶的胰岛素受体超家族的成员，其参与造血肿瘤和非造血肿瘤中的肿瘤发生。已经报道了全长ALK受体蛋白在神经母细胞瘤和胶质母细胞瘤中的异常表达；并且ALK融合蛋白发生在间变性大细胞淋巴瘤中。ALK融合蛋白的研究也为ALK阳性恶性肿瘤患者提供了新的治疗方法的可能。Pulford等人,Cell.Mol.Life.Sci.61:2939-2953(2004)。

小分子ALK抑制剂对于其中ALK有作用的疾病和病况(包括癌症)的治疗具有治疗潜力。Roskoski,Pharmacological Research 68:68–94(2013)。ALK抑制剂公开于U.S.8,039,479和WO 2015/130014中。

一直需要用于治疗和/或预防癌症和对ALK抑制有响应的其它疾病的新的药剂，例如小分子。

发明内容

在一个方面，本发明提供由以下式I-VI中的任一个表示的化合物，及其药学上可接受的盐和溶剂化物，统称为“本发明的化合物”。本发明的化合物是ALK抑制剂，并因此可用于治疗或预防其中ALK抑制提供有益效果的疾病或病况。

在另一个方面，本发明提供了通过向有此需要的受试者例如人施用治疗有效量的本发明的化合物来治疗或预防病况或疾病的方法。可以通过抑制ALK来治疗或预防所关注的疾病或病况，例如癌症、慢性自身免疫性病症、炎性病况、增殖性病症、败血症或病毒感染。还提供了预防不需要的增殖细胞(如癌症中)在受试者中增殖的方法，该方法包括对具有发展以不需要的增殖细胞为特征的病况的风险的受试者施用治疗有效量的本发明的化合物。在一些实施方案中，本发明的化合物通过在那些细胞中诱导凋亡而减少不需要的细胞的增殖。

在另一个方面，本发明提供了在受试者中抑制ALK的方法，其包括向受试者施用有效量的至少一种本发明的化合物。

在另一个方面，本发明提供了药物组合物，其包含本发明的化合物和赋形剂和/或药学上可接受的载体。

在另一个方面，本发明提供了包含本发明的化合物和赋形剂和/或药学上可接受的载体的组合物，其用于治疗或预防其中ALK的抑制提供有益效果的疾病或病况，例如癌症。

在另一个方面，本发明提供一种组合物，其包括：(a)本发明的化合物；(b)第二治疗活性剂；和任选地(c)赋形剂和/或药学上可接受的载体。

在另一个方面，本发明提供了本发明的化合物，其用于治疗或预防所关注的疾病或病况，例如癌症。

在另一个方面，本发明提供了本发明的化合物用于制备用于治疗所关注的疾病或病况(例如癌症)的药物的用途。

在另一个方面，本发明提供了一种试剂盒，其包括本发明的化合物，以及任选地，包含可用于治疗所关注的疾病或病况的第二治疗剂的包装的组合物，和包装插页，所述包装插页包含用于治疗疾病或病况(例如癌症)的说明书。

另一个方面，本发明提供了制备本发明的化合物的方法。

本发明的另外的实施方案和优点将部分地在下面的描述中阐述，并将来自该描述，或者可以通过本发明的实践而得知。本发明的实施方案和优点可以通过所附权利要求书中特别指出的元素和组合来实现和获得。

应该理解的是，前面的概述和下面的详细描述都只是示例和解释性的，并且并不限制所请求保护的本发明。

附图说明

图1是显示化合物8、12、19以及20抑制小鼠KARPAS 299异种移植模型中肿瘤生长的线图。

具体实施方式

本发明的化合物是ALK抑制剂。

在一个实施方案中，本发明的化合物是具有式I的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中：

R^1a和R^1b独立地选自由氢、C_1-6烷基和C_3-6环烷基组成的组；或

R^1a和R^1b与它们所连接的碳原子一起形成3～6元任选取代的环烷基；或

R^1a和R^1b与它们所连接的碳原子一起形成4～6元杂环基(heterocyclo)；

R^2a和R^2b独立地选自由氢、C_1-6烷基和C_3-6环烷基组成的组；或

R^2a和R^2b与它们所连接的碳原子一起形成3～6元环烷基；或

R^2a和R^2b与它们所连接的碳原子一起形成4～6元杂环基；或

R^1b和R^2b合在一起是-X-，即R^1b和R^2b合在一起通过连接基团-X-与它们所连接的碳连接；

X选自由-CH₂-、-CH₂CH₂-、和-CH₂CH₂CH₂-组成的组；

R³选自由氢、C_1-6烷基、C_3-6环烷基和任选取代的4～8元杂环基组成的组；

R⁴选自由氢、C_1-6烷基和C_1-4烷氧基组成的组；

R⁵选自由氢、氟和氯组成的组；

R⁶选自由氢、C_1-6烷基、C_3-6环烷基和4～8元杂环基组成的组；

R⁷选自由氢、-CF₃、-NO₂和-CN组成的组；

E是碳原子并且是双键；或

E是-C(H)-并且是单键；或

E是氮原子并且是单键。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是具有式II的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^1a、R^1b、R^2a、R^2b、R³、E和如关于式I所定义。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是具有式III的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^1a、R^1b、R^2a、R^2b和R³如关于式I所定义。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是由具有式IV的化合物表示的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^1a、R^1b、R^2a、R^2b和R³如关于式I所定义。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是式V的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^1a、R^1b、R^2a、R^2b和R³如关于式I所定义。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是具有式I-V的任一项的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^1a和R^1b独立地选自由氢和甲基组成的组。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是具有式I-V的任一项的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^2a和R^2b独立地选自由氢和甲基组成的组。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是具有式I-V的任一项的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^1a和R^2a是甲基并且R^1b和R^2b是氢。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是具有式I-V的任一项的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^1a、R^1b、R^2a和R^2b是甲基。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是具有式VI的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R³和X如关于式I所定义。在另一个实施方案中，X是-CH₂-。在另一个实施方案中，X是-CH₂CH₂-。在另一个实施方案中，X是-CH₂CH₂CH₂-。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是具有式I-VI的任一项的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R³选自由氢、C_1-4烷基和任选取代的4～8元杂环基组成的组。在另一个实施方案中，R³是氢。在另一个实施方案中，R³是甲基(包括-CH₂D、-CH₂D和-CD₃)。在另一个实施方案中，R³是4～6元杂环基，例如

在另一个实施方案中，本发明的化合物是表1中的化合物，及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

表1

本发明的化合物抑制ALK并且可用于治疗或预防多种疾病和病况。特别地，本发明的化合物可用于治疗或预防其中ALK的抑制提供有益效果的疾病或病况的方法，所述疾病或病况例如癌症和增殖性疾病。本发明的治疗方法包括向有此需要的受试者施用治疗有效量的本发明的化合物。本发明的方法还包括对受试者施用除了本发明的化合物之外的第二治疗剂。所述第二治疗剂选自这样的药物，所述药物已知可用于治疗使有此需要的受试者遭受折磨的疾病或病况，例如，已知可用于治疗特定的癌症的化学治疗剂和/或放射。

本发明的某些化合物可以作为立体异构体存在，所述立体异构体即仅在原子的空间排列上不同的异构体，包括光学异构体和构象异构体(conformational isomer)(或构象异构体(conformer))和互变异构体。本发明包括所有立体异构体，包括纯的单个的立体异构体制剂和各自的富集制剂，以及这些立体异构体的外消旋混合物以及可以根据本领域技术人员熟知的方法分离的单个的非对映体和对映体。

如本文所用，术语“立体异构体”是仅在其原子的空间取向上不同的单个分子的所有异构体的通用术语。它包括具有一个以上手性中心的化合物的对映体和异构体，这些异构体彼此不是镜像(非对映体)。

术语“手性中心”或“不对称碳原子”是指与四个不同基团连接的碳原子。

术语“对映体”和“对映体的”是指不能在其镜像上叠加并因此具有光学活性的分子，其中对映体在一个方向上旋转偏振光平面，并且其镜像化合物在相反方向上旋转偏振光平面。

术语“外消旋的”或“外消旋物”是指等份的对映体的混合物，并且该混合物是不旋光的。

术语“绝对构型”是指手性分子实体(或基团)的原子的空间排列及其立体化学描述，例如R或S。

除非另有说明，否则本说明书中使用的立体化学术语和惯例意在与Pure&ApplChem 68:2193(1996)中描述的那些一致。

术语“对映体过量(enantiomeric excess)”或“ee”是指一种对映体与另一种对映体相比存在多少的量度。对于R和S对映体的混合物，对映体过量百分比被定义为│R-S│*100，其中R和S是混合物中对映体的各自的摩尔或重量分数，使得R+S＝1。根据手性物质的旋光度知识，对映体过量百分比被定义为([α]_obs/[α]_max)*100，其中[α]_obs是对映体混合物的旋光度并且[α]_max是纯对映体的旋光度。可以使用多种分析技术确定对映体过量，其包括NMR光谱、手性柱色谱或光学偏振测定。

术语“对映体纯的(enantiomerically pure)”或“对映体纯的(enantiopure)”是指其所有分子(在检测限内)具有相同的手性感测(chirality sense)的手性物质的样品。

术语“对映体富集的(enantiomerically enriched)”或“对映体富集的(enantioenriched)”是指对映体比例大于50:50的手性物质样品。对映体富集的化合物可以是对映体纯的。

本发明包括通过使一个或多个原子被具有不同原子质量或质量数的原子取代而被同位素标记的(即放射性标记的)任意本发明的化合物。可以掺入本发明的化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、硫、氧、氟和氯的同位素，例如²H(或氘(D))、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸O、¹⁷O、³⁵S、¹⁸F和³⁶Cl，例如，²H、³H和¹³C。在一个实施方案中，本发明的化合物中的某一位置的一部分原子被取代，即，本发明的化合物在某一位置上富集了具有不同原子质量或质量数的原子。在一个实施方案中，至少约1％的原子被具有不同原子质量或质量数的原子取代。在另一个实施方案中，至少约5％、至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或至少约100％的原子被具有不同原子质量或质量数的原子取代。例如，当式I-VI中的任一项的R³是甲基时，该甲基上的一个、两个或三个氢原子可以被氘取代以分别得到-CH₂D、-CHD₂或-CD₃。同位素标记的本发明的化合物可通过本领域已知的方法制备。

本发明的化合物的盐、水合物和溶剂化物也可以在本文所公开的方法中使用。本发明涵盖本发明化合物的盐的制备和使用。如本文所用，药物的“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的盐或两性离子形式。本发明的化合物的盐可在化合物的最终分离和纯化期间制备或单独通过使化合物与具有合适的阳离子的酸反应制得。本发明的化合物的药学上可接受的盐可以是用药学上可接受的酸形成的酸加成盐。可用于形成药学上可接受的盐的酸的实例包括无机酸如硝酸、硼酸、盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸，以及有机酸如草酸、马来酸、琥珀酸和柠檬酸。本发明的化合物的盐的非限制性实例包括，但不限于，盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、2-羟基乙烷磺酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、甘油磷酸盐(glycerolphosphate)、半硫酸盐(hemisulfate)、庚酸盐、己酸盐、甲酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、马来酸盐、抗坏血酸盐、羟乙基磺酸盐、水杨酸盐、甲烷磺酸盐(methanesulfonate)、均三甲苯磺酸盐(mesitylenesulfonate)、亚萘基磺酸盐(naphthylenesulfonate)、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、三氯乙酸、三氟乙酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、葡糖酸盐、甲烷磺酸盐、乙烷二磺酸盐、苯磺酸盐和对甲苯磺酸盐。此外，本发明的化合物中可用的氨基团可以用甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸盐；癸基、月桂基、肉豆蔻基和甾醇基氯化物、溴化物和碘化物；和苄基和苯乙基溴化物季铵化。根据上述，本文出现的本发明的化合物的任何指代旨在包括本发明的化合物以及它们的药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的化合物。

本发明涵盖本发明的化合物的溶剂化物的制备和使用。溶剂化物通常不显著改变所述化合物的生理活性或毒性，因此可以用作药理学等同物。如本文所用的术语“溶剂化物”是本发明的化合物与溶剂分子的化合(combination)、物理缔合和/或溶剂化，诸如，例如二溶剂化物、单溶剂化物或半溶剂化物，其中溶剂分子与本发明的化合物的比例分别为约2：1、约1：1或约1：2。该物理缔合涉及不同程度的离子和共价键合，包括氢键键合。在某些情况下，可以分离溶剂化物，例如当一个或多个溶剂分子结合到结晶固体的晶格中时。因此，“溶剂化物”涵盖溶液相和可分离的溶剂化物。本发明的化合物可以作为具有药学上可接受的溶剂如水、甲醇和乙醇的溶剂化形式存在，并且意图是本发明包括本发明的化合物的溶剂化和非溶剂化形式。

溶剂化物的一种类型是水合物。“水合物”涉及其中溶剂分子是水的溶剂化物的特定亚组(subgroup)。溶剂化物通常可以作为药理学等同物。溶剂化物的制备在本领域中是已知的。参见，例如，M.Caira等人,J.Pharmaceut.Sci.,93(3):601-611(2004)，其描述了用乙酸乙酯和用水制备氟康唑的溶剂化物。溶剂化物，半溶剂化物，水合物等的类似制备由van Tonder等人,AAPS Pharm.Sci.Tech.,5(1):Article 12(2004)，和A.L.Bingham等人.,Chem.Commun.603-604(2001)描述。制备溶剂化物的典型的非限制性的方法将涉及在高于20℃至约25℃的温度下将本发明的化合物溶解于期望溶剂(有机溶剂、水或其混合物)中，然后以足以形成晶体的速度冷却该溶液，并用已知的方法例如，过滤分离晶体。分析技术如红外光谱法可用于确认溶剂化物的晶体中溶剂的存在。

本发明提供了作为ALK抑制剂用于治疗其中抑制具有有益效果的多种疾病和病况的本发明化合物。通常，本发明的化合物对ALK具有小于100μM，例如小于约50μM、小于约25μM、小于约5μM、小于约1μM、小于约0.5μM、小于约0.1μM、小于约0.05μM、小于约0.01μM、小于约0.005μM或小于约0.001μM的结合亲和力(IC₅₀)。在一个实施方案中，本发明涉及一种治疗患有其中ALK的抑制提供有益效果的疾病或病况的受试者的方法，其包括向有此需要的受试者施用治疗有效量的本发明的化合物。

由于本发明的化合物是ALK的抑制剂，因此一些通过ALK介导的疾病和病况可以通过采用这些化合物治疗。因此，本发明大体上涉及一种这样的方法，所述方法用于在患有响应于ALK或其同种型或突变体的抑制的疾病或病况或具有患所述疾病或病况风险的动物(例如人类)患者中治疗所述疾病或病况，所述方法包括对动物施用有效量的一种或多种本发明的化合物。

本发明还涉及在有此需要的动物中抑制ALK或其同种型或突变体的方法，所述方法包括对动物施用有效量的至少一种本发明的化合物。

本发明的方法可以通过施用作为净化合物或作为药物组合物的本发明的化合物来完成。本发明的化合物的药物组合物或净化合物的施用可以在所关注的疾病或病况发作期间或者之后进行。通常，所述药物组合物是无菌的，并且不含施用时会导致不良反应的毒性、致癌性或致突变化合物。

还提供了试剂盒，其包含本发明的化合物和任选地可用于治疗其中ALK或其同种型或突变体的抑制提供有益效果的疾病和病况的第二治疗剂，它们单独或一起包装，以及具有使用这些活性剂的用法说明的插页。

在一个实施方案中，本发明的化合物与可用于治疗其中ALK蛋白的抑制提供有益效果的疾病和病况的第二治疗剂联合施用。所述第二治疗剂不同于本发明的化合物。本发明的化合物和第二治疗剂可以同时或依次施用以达到期望效果。此外，本发明的化合物和第二治疗剂可以以单个组合物或两个单独的组合物施用。

以提供所需的治疗效果的量施用第二治疗剂。每种第二治疗剂的有效剂量范围是本领域中已知的，并且在这样已建立的范围内对有此需要的受试者施用所述第二治疗剂。

本发明的化合物和第二治疗剂可以作为单个单位剂量一起施用或作为多单位剂量分开施用，其中本发明的化合物在第二治疗剂之前施用，或反之亦然。可以施用一个或多个剂量的本发明的化合物和/或一个或多个剂量的第二治疗剂。因此，本发明的化合物可以与一种或多种第二治疗剂例如但不限于抗癌剂联合使用。

可由本发明的方法治疗的疾病和病况包括但不限于癌症和其他增殖性病症、炎性疾病、败血症、自身免疫性疾病和病毒感染。在一个实施方案中，可通过本发明的方法治疗的疾病和病况是癌症、慢性自身免疫性病症、炎性病况或增殖性病症。在一个实施方案中，用本发明的化合物或包含本发明的化合物的药物组合物治疗人类患者，其中以足以抑制所述患者的ALK的量施用所述化合物。

在一个实施方案中，要通过本发明的化合物治疗或预防的疾病是癌症。在另一个实施方案中，本发明提供了在有此需要的受试者中治疗或预防癌症的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的本发明的化合物。不限于特定机制，在一些实施方案中，本发明的化合物可通过抑制ALK来治疗或预防癌症。可治疗的癌症的实例包括但不限于表3的癌症中的任意一种或多种。

表3

在另一个实施方案中，癌症是白血病，例如选自急性单核细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病和混合谱系白血病(MLL)的白血病。在另一个实施方案中，癌症是NUT-中线癌。在另一个实施方案中，癌症是多发性骨髓瘤。在另一个实施方案中，癌症是肺癌如小细胞肺癌(SCLC)。在另一个实施方案中，癌症是神经母细胞瘤。在另一个实施方案中，癌症是伯基特淋巴瘤。在另一个实施方案中，癌症是宫颈癌。在另一个实施方案中，癌症是食道癌。在另一个实施方案中，癌症是卵巢癌。在另一个实施方案中，癌症是结直肠癌。在另一个实施方案中，癌症是前列腺癌。在另一个实施方案中，癌症是乳腺癌。

在另一个实施方案中，癌症是间变性大细胞淋巴瘤、非小细胞肺癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、炎性肌纤维母细胞瘤、神经母细胞瘤、未分化甲状腺癌和横纹肌肉瘤。

在另一个实施方案中，癌症是乳腺癌、结直肠癌、食道鳞状细胞癌和肾细胞癌。

在另一个实施方案中，本发明提供了一种治疗良性增殖性病症，诸如，但不限于，良性软组织肿瘤、骨肿瘤、脑和脊髓肿瘤、眼睑和眼眶肿瘤、肉芽肿瘤、脂肪瘤、脑膜瘤、多发性内分泌肿瘤、鼻息肉、垂体瘤、泌乳素瘤、脑假瘤、脂溢性角化病、胃息肉、甲状腺结节、胰腺的囊性肿瘤、血管瘤、声带结节、息肉、和囊肿、Castleman病、慢性藏毛病、皮肤纤维瘤、毛发囊肿(pilar cyst)、化脓性肉芽肿瘤和幼年性息肉综合征的方法。

本发明的化合物也可以通过对需要这种治疗的哺乳动物特别是人类施用有效量的本发明的化合物来治疗感染性和非感染性炎症事件和自身免疫性和其他炎性疾病。使用本文所述的化合物和方法治疗的自身免疫性和炎性疾病、病症和症状的实例包括炎性骨盆疾病、尿道炎、皮肤晒伤、鼻窦炎、肺炎、脑炎、脑膜炎、心肌炎、肾炎、骨髓炎、肌炎、肝炎、胃炎、肠炎、皮炎、牙龈炎、阑尾炎(appendictitis)、胰腺炎、胆囊炎(cholocystitus)、无丙种球蛋白血症、牛皮癣、过敏症、克罗恩氏病(Crohn's disease)、肠易激综合症、溃疡性结肠炎、斯耶格伦氏病(Sjogren's disease)、组织移植排斥、移植器官的超急性排斥、哮喘、过敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、自身免疫性多腺体疾病(也称为自身免疫性多腺体综合征)、自身免疫性脱发、恶性贫血、肾小球肾炎、皮肌炎、多发性硬化、硬皮病、血管炎、自身免疫性溶血性和血小板减少的状态、古德帕斯彻综合征(Goodpasture's syndrome)、动脉粥样硬化、阿狄森氏病(Addison's disease)、帕金森氏病(Parkinson's disease)、阿尔茨海默氏病(Alzheimer's disease)、I型糖尿病、脓毒性休克、系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎、牛皮癣关节炎、幼年型关节炎、骨关节炎、慢性特发性血小板减少性紫癜、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、重症肌无力、桥本氏甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis)、特应性皮炎、退行性关节病、白癜风、自身免疫性垂体功能减退症(autoimmunehypopituatarism)、格林-巴利综合症(Guillain-Barre syndrome)、白塞氏病(Behcet'sdisease)、硬皮病(scleracierma)、蕈样肉芽肿、急性炎症反应(如急性呼吸窘迫综合征和局部缺血/再灌注损伤)和格雷夫斯病(Graves'disease)。

在另一个实施方案中，本发明提供通过对需要这种治疗的哺乳动物特别是人类施用有效量的本发明的化合物来治疗全身性炎症反应综合征，诸如LPS诱导的内毒素休克和/或细菌引起的败血症的方法。

在另一个实施方案中，本发明提供了用于治疗病毒感染和疾病的方法。使用本文所述的化合物和方法治疗的病毒感染和疾病的实例包括基于附加体的DNA病毒，包括但不限于，人乳头状瘤病毒、疱疹病毒、Epstein-Barr病毒、人类免疫缺陷病毒、乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒。

在另一个实施方案中，本发明提供了通过对需要这种治疗的受试者施用治疗有效量的本发明的化合物来体内调节上述疾病特别是癌症、炎性疾病和/或病毒疾病中的蛋白甲基化、基因表达、细胞增殖、细胞分化和/或细胞凋亡的治疗方法。

在另一个实施方案中，本发明提供了通过使细胞与本发明的化合物接触来调节内源或异源启动子活性的方法。

在本发明的方法中，对有此需要的人类施用治疗有效量的、通常按照药学实践配制的本发明的化合物。是否指定这样的治疗取决于个体情况并进行医疗评估(诊断)，所述医疗评估(诊断)考虑到所存在的体征、症状和/或机能障碍，发展特定体征、症状和/或机能障碍的风险以及其它因素。

本发明的化合物可以通过任意合适的途径施用，例如通过口服、经颊、吸入、舌下、直肠、阴道、脑池内或鞘内(通过腰椎穿刺)、经尿道、经鼻、经皮(即，透皮)或胃肠外(包括静脉内、肌内、皮下、冠状动脉内、皮内、乳房内、腹膜内、关节内、鞘内、眼球后、肺内注射和/或在特定位点外科手术植入)施用。肠胃外施用可以使用针和注射器或使用高压技术来完成。

药物组合物包括其中本发明的化合物以有效量施用以实现其预期目的的那些。通过个体医生考虑到所诊断的病况或疾病来决定确切的制剂、施用途径和剂量。可以单独地调整剂量和间隔以提供足以维持治疗效果的本发明的化合物的水平。

可通过在细胞培养物或实验动物中的标准药学方法确定本发明的化合物的毒性和治疗功效，例如，用于确定化合物的最大耐受剂量(MTD)(其定义为在动物中不导致毒性的最高剂量)。最大耐受剂量和治疗效果(例如，抑制肿瘤生长)之间的剂量比是治疗指数。该剂量可根据所采用的剂型和所利用的施用途径在此范围内改变。治疗有效量的确定在本领域技术人员的能力范围内，特别是根据本文提供的详细的公开内容。

需要在治疗中使用的本发明的化合物的治疗有效量随待治疗的病况的性质、期望活性的时间长度以及患者的年龄和状况而变化，并且最终由主治医生决定。可以单独地调整剂量和时间间隔以提供足以维持所需的治疗效果的ALK抑制剂的血浆水平。所需剂量可方便地以单剂量施用，或以多剂量以适当的时间间隔施用，例如以每天一、二、三、四或更多个亚剂量。常常期望或需要多剂量。例如，本发明的化合物可以以如下频率施用：以四天的时间间隔按每日一剂递送四个剂量(q4d×4)；以三天的时间间隔按每日一剂递送四个剂量(q3d×4)；以五天的时间间隔每日递送一剂(qd×5)；每周一个剂量持续三周(qwk3)；五个日剂量(five daily doses)，休息两天，再五个日剂量(5/2/5)；或者，为适合情况而确定的任何剂量方案。

在本发明的方法中使用的本发明的化合物可以以每剂约0.005至约500mg的量，每剂约0.05至约250mg的量，或每剂约0.5至约100mg的量施用。例如，本发明的化合物可以每剂约0.005、0.05、0.5、5、10、20、30、40、50、100、150、200、250、300、350、400、450或500mg的量施用，包括0.005和500mg之间的所有剂量。

含有本发明的化合物的组合物，或含有其的组合物的剂量可以是约1ng/kg至约200mg/kg、约1μg/kg至约100mg/kg或约1mg/kg至约50mg/kg。组合物的剂量可以是任何剂量，包括但不限于约1μg/kg。组合物的剂量可以是任何剂量，包括但不限于，约1μg/kg、约10μg/kg、约25μg/kg、约50μg/kg、约75μg/kg、约100μg/kg、约125μg/kg、约150μg/kg、约175μg/kg、约200μg/kg、约225μg/kg、约250μg/kg、约275μg/kg、约300μg/kg、约325μg/kg、约350μg/kg、约375μg/kg、约400μg/kg、约425μg/kg、约450μg/kg、约475μg/kg、约500μg/kg、约525μg/kg、约550μg/kg、约575μg/kg、约600μg/kg、约625μg/kg、约650μg/kg、约675μg/kg、约700μg/kg、约725μg/kg、约750μg/kg、约775μg/kg、约800μg/kg、约825μg/kg、约850μg/kg、约875μg/kg、约900μg/kg、约925μg/kg、约950μg/kg、约975μg/kg、约1mg/kg、约5mg/kg、约10mg/kg、约15mg/kg、约20mg/kg、约25mg/kg、约30mg/kg、约35mg/kg、约40mg/kg、约45mg/kg、约50mg/kg、约60mg/kg、约70mg/kg、约80mg/kg、约90mg/kg、约100mg/kg、约125mg/kg、约150mg/kg、约175mg/kg、约200mg/kg或更多。上述剂量是一般情况的示例，但是存在其中较高或较低剂量有优势的个别情况，并且这些都在本发明的范围之内。在实践中，医生确定最适于个体受试者(即患者)的实际施用方案，其可以随着具体患者的年龄、体重和反应而变化。

如上所述，本发明的化合物可以与第二治疗活性剂联合施用。在一些实施方案中，第二治疗剂是表观遗传药物。如本文所用，术语“表观遗传药物”是指靶向表观遗传调节子的治疗剂。表观遗传调节子的实例包括组蛋白赖氨酸甲基转移酶、组蛋白精氨酸甲基转移酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白去乙酰化酶、组蛋白乙酰化酶和DNA甲基转移酶。组蛋白去乙酰化酶抑制剂包括，但不限于，伏立诺他(vorinostat)。

在另一个实施方案中，化疗剂或其他抗增殖剂可以与本发明的化合物联合以治疗增殖性疾病和癌症。可以与本发明的化合物联合使用的疗法和抗癌剂的实例包括外科手术、放射疗法(例如，伽马辐射、中子束放射疗法、电子束放射疗法、质子疗法、近距离放射疗法和全身放射性同位素)、内分泌疗法、生物反应调节剂(例如，干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子(TNF)、热疗和冷冻疗法、减弱任何不良效应(例如，止吐)的试剂以及任何其他经过批准的化疗药物。

抗增殖化合物的实例包括，但不限于，芳香酶抑制剂；抗雌激素药；抗雄激素药；促性激素释放素激动剂；拓扑异构酶I抑制剂；拓扑异构酶II抑制剂；微管活性剂；烷基化剂；类维生素A，类胡萝卜素或生育酚；环氧合酶抑制剂；MMP抑制剂；mTOR抑制剂；抗代谢药；铂族(platin)化合物；甲硫氨酸氨基肽酶抑制剂；双膦酸盐；抗增殖抗体；类肝素酶抑制剂；Ras致癌同种型的抑制剂；端粒酶抑制剂；蛋白酶体抑制剂；在血液学恶性肿瘤的治疗中使用的化合物；Flt-3抑制剂；Hsp90抑制剂；驱动蛋白纺锤体蛋白抑制剂；MEK抑制剂；抗肿瘤抗生素；亚硝基脲；靶向/降低蛋白质或脂质激酶活性的化合物，靶向/降低蛋白质或脂质磷酸酶活性的化合物，或另外的任何抗血管生成化合物。

非限制性示例性芳香酶抑制剂包括，但不限于，类固醇，如阿他美坦(atamestane)、依西美坦(exemestane)和福美坦(formestane)，和非甾族化合物，如氨鲁米特(aminoglutethimide)、罗谷亚胺(roglethimide)、吡鲁米特(pyridoglutethimide)、曲洛司坦(trilostane)、睾内酯(testolactone)、酮康唑(ketokonazole)、伏氯唑(vorozole)、法倔唑(fadrozole)、阿那曲唑(anastrozole)和来曲唑(letrozole)。

非限制性抗雌激素药包括，但不限于，他莫昔芬(tamoxifen)、氟维司群(fulvestrant)、雷洛昔芬(raloxifene)和盐酸雷洛昔芬。抗雄激素药包括，但不限于比卡鲁胺(bicalutamide)。促性激素释放素激动剂包括，但不限于，阿巴瑞克(abarelix)、戈舍瑞林(goserelin)和醋酸戈舍瑞林。

示例性的拓扑异构酶I抑制剂包括但不限于拓扑替康、吉马替康、伊立替康，喜树碱及其类似物、9-硝基喜树碱和大分子喜树碱缀合物PNU-166148。拓扑异构酶II抑制剂包括但不限于蒽环类，如阿霉素、柔红霉素、表阿霉素、伊达比星和奈莫柔比星；蒽醌类，如米托蒽醌和洛索蒽醌；和鬼臼毒素类(podophillotoxines)，如依托泊苷和替尼泊苷。

微管活性剂包括微管稳定化化合物、微管去稳定化化合物和微管聚合抑制剂，包括但不限于紫杉烷类，如紫杉醇和多西他赛；长春花生物碱，如长春碱、硫酸长春碱、长春新碱、硫酸长春新碱和长春瑞滨；圆皮海绵内酯(discodermolides)；秋水仙碱和埃博霉素及其衍生物。

示例性的非限制性的烷基化剂包括环磷酰胺、异环磷酰胺、美法仑和亚硝基脲，如卡莫司汀和洛莫司汀。

示例性的非限制性的环氧合酶抑制剂包括Cox-2抑制剂、5-烷基取代的2-芳基氨基苯基乙酸和衍生物，如塞来考昔(celecoxib)、罗非考昔(rofecoxib)、艾托考昔(etoricoxib)、伐地考昔(valdecoxib)或5-烷基-2-芳基氨基苯基乙酸，例如罗美昔布(lumiracoxib)。

示例性的非限制性的基质金属蛋白酶抑制剂(“MMP抑制剂”)包括胶原拟肽和非拟肽抑制剂、四环素衍生物、巴马司他(batimastat)、马立马司他(marimastat)、普马司他(prinomastat)、美他司他(metastat)、BMS-279251、BAY 12-9566、TAA211、MMI270B和AAJ996。

示例性的非限制性的mTOR抑制剂包括抑制雷帕霉素(mTOR)的哺乳动物靶标并具有抗增殖活性的化合物，如西罗莫司(sirolimus)、依维莫司(everolimus)、CCI-779和ABT578。

示例性的非限制性的抗代谢物包括5-氟尿嘧啶(5-FU)、卡培他滨、吉西他滨、DNA去甲基化合物，例如5-氮杂胞苷和地西他滨，甲氨蝶呤和依达曲沙，以及叶酸拮抗剂，如培美曲塞。

示例性的非限制性的铂族化合物包括卡铂、顺-铂(cis-platin)、顺铂(cisplatinum)和奥沙利铂。

示例性的非限制性的甲硫氨酸氨基肽酶抑制剂包括bengamide或其衍生物和PPI-2458。

示例性的非限制性的二膦酸盐包括依替膦酸(etridonic acid)、氯膦酸、替鲁膦酸、帕米膦酸、阿仑膦酸、伊班膦酸、利塞膦酸和唑来膦酸。

示例性的非限制性的抗增殖性抗体包括曲妥单抗、曲妥单抗-DM1、西妥昔单抗、贝伐单抗、利妥昔单抗、PR064553和2C4。术语“抗体”包括完整的单克隆抗体、多克隆抗体、由至少两种完整的抗体形成的多特异性抗体和抗体片段，只要它们表现出期望的生物学活性。

示例性的非限制性的类肝素酶抑制剂包括靶向、降低或抑制硫酸肝素降解的化合物，如PI-88和OGT2115。

如本文所使用的术语“Ras致癌同种型的抑制剂”，如H-Ras、K-Ras或N-Ras是指靶向、降低或抑制Ras的致癌活性的化合物，例如，法呢基(farnesyl)转移酶抑制剂，例如L-744832、DK8G557、替吡法尼(tipifarnib)和洛那法尼(lonafarnib)。

示例性的非限制性的端粒酶抑制剂包括靶向、降低或抑制端粒酶活性的化合物，如抑制端粒酶受体的化合物，例如端粒抑素(telomestatin)。

示例性的非限制性的蛋白酶抑制剂包括靶向、降低或抑制蛋白酶体的活性的化合物，包括但不限于硼替佐米(bortezomid)。

如本文所用的短语“在血液学恶性肿瘤的治疗中使用的化合物”包括FMS-样酪氨酸激酶抑制剂，其是靶向、降低或抑制FMS-样酪氨酸激酶受体(Flt-3R)的活性的化合物；干扰素、1-β-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶(ara-c)和白消安(bisulfan)；和ALK抑制剂，其是靶向、降低或抑制间变性淋巴瘤激酶的化合物。

示例性的非限制性的Flt-3抑制剂包括PKC412、米哚妥林、星孢菌素衍生物、SU11248和MLN518。

示例性的非限制性的HSP90抑制剂包括靶向、降低或抑制HSP90的固有ATP酶活性的化合物；或经由泛素蛋白酶体途径降解、靶向、降低或抑制HSP90客户蛋白的化合物。靶向、降低或抑制HSP90的固有ATP酶活性的化合物特别是抑制HSP90的ATP酶活性的化合物、蛋白质或抗体，例如17-烯丙基氨基、17-去甲氧基格尔德霉素(17AAG)、格尔德霉素衍生物；其他格尔德霉素相关的化合物；根赤壳菌素和HDAC抑制剂。

如本文所用的短语“靶向/降低蛋白质或脂质激酶活性；或靶向/降低蛋白质或脂质磷酸酶活性的化合物；或另外的任何抗血管生成的化合物”包括蛋白酪氨酸激酶和/或丝氨酸和/或苏氨酸激酶抑制剂或脂质激酶抑制剂，例如：a)靶向、降低或抑制血小板衍生生长因子受体(PDGFR)的活性的化合物，诸如靶向、降低或抑制PDGFR的活性的化合物，如N-苯基-2-嘧啶-胺衍生物，例如伊马替尼、SUlOl、SU6668和GFB-111；b)靶向、降低或抑制成纤维细胞生长因子受体(FGFR)的活性的化合物；c)靶向、降低或抑制胰岛素样生长因子受体I(IGF-IR)的活性的化合物，诸如靶向、降低或抑制IGF-IR的活性的化合物；d)靶向、降低或抑制Trk受体酪氨酸激酶家族的活性的化合物，或肝配蛋白B4抑制剂；e)靶向、降低或抑制Axl受体酪氨酸激酶家族的活性的化合物；f)靶向、降低或抑制Ret受体酪氨酸激酶的活性的化合物；g)靶向、降低或抑制Kit/SCFR受体酪氨酸激酶的活性的化合物，如伊马替尼；h)靶向、降低或抑制c-Kit受体酪氨酸激酶的活性的化合物，如伊马替尼；i)靶向、降低或抑制c-Abl家族成员、其基因-融合产物(例如Bcr-Abl激酶)和突变体的活性的化合物，如N-苯基-2-嘧啶-胺衍生物，如伊马替尼或尼洛替尼；PD180970；AG957；NSC 680410；PD173955；或达沙替尼；j)靶向、降低或抑制蛋白激酶C(PKC)和丝氨酸/苏氨酸激酶的Raf家族的成员，MEK、SRC、JAK、FAK、PDK1、PKB/Akt的成员和Ras/MAPK家族成员，和/或细胞周期蛋白依赖性激酶家族(CDK)的成员的活性的化合物，如在美国专利号5093330中公开的星孢菌素衍生物，如米哚妥林；进一步的化合物的实例包括UCN-01、沙芬戈(safingol)、BAY 43-9006、苔藓抑素1、哌立福辛；伊莫福新；RO 318220和RO 320432；GO 6976；Isis 3521；LY333531/LY379196；异喹啉化合物；法尼基转移酶抑制剂；PD184352或QAN697，或AT7519；k)靶向、降低或抑制蛋白质-酪氨酸激酶的活性的化合物，如甲磺酸伊马替尼或酪氨酸磷酸化抑制剂，如酪氨酸磷酸化抑制剂A23/RG-50810；AG 99；酪氨酸磷酸化抑制剂AG 213；酪氨酸磷酸化抑制剂AG 1748；酪氨酸磷酸化抑制剂AG 490；酪氨酸磷酸化抑制剂B44；酪氨酸磷酸化抑制剂B44(+)对映体；酪氨酸磷酸化抑制剂AG 555；AG 494；酪氨酸磷酸化抑制剂AG 556，AG957和阿达斯汀(adaphostin)(4-{[(2,5-二羟基苯基)甲基]氨基}-苯甲酸金刚烷基酯；NSC680410，阿达斯汀)；l)靶向、降低或抑制受体酪氨酸激酶的表皮生长因子家族(作为均聚或异聚二聚体的EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4)和它们的突变体的活性的化合物，如CP 358774、ZD 1839、ZM 105180；曲妥珠单抗、西妥昔单抗、吉非替尼、厄洛替尼、OSI-774、CL-1033、EKB-569、GW-2016、抗体El.l、E2.4、E2.5、E6.2、E6.4、E2.11、E6.3和E7.6.3，和7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物；和m)靶向、降低或抑制c-Met受体的活性的化合物。

靶向、降低或抑制蛋白质或脂质磷酸酶活性的示例性化合物包括磷酸酶1、磷酸酶2A或CDC25的抑制剂，例如冈田酸或其衍生物。

另外的抗血管生成化合物包括具有与蛋白或脂质激酶抑制无关的另一活性机制的化合物，例如，沙利度胺和TNP-470。

另外的非限制性的示例性的化疗化合物(其中的一种或多种可以与本发明的ALK抑制剂联合使用)包括：柔红霉素、阿霉素、Ara-C、VP-16、替尼泊苷、米托蒽醌、伊达比星、卡铂、PKC412、6-巯基嘌呤(6-MP)、磷酸氟达拉滨、奥曲肽、SOM230、FTY720、6-硫鸟嘌呤、克拉屈滨、6-巯基嘌呤、喷司他丁、羟基脲、2-羟基-1H-异吲哚-1,3-二酮衍生物、l-(4-氯苯胺基)-4-(4-吡啶基甲基)酞嗪或其药学上可接受的盐、1-(4-氯苯胺基)-4-(4-吡啶基甲基)酞嗪琥珀酸酯、血管抑素、内皮抑素、邻氨基苯甲酸酰胺、ZD4190、ZD6474、SU5416、SU6668、贝伐单抗、rhuMAb、rhuFab、macugon；FLT-4抑制剂、FLT-3抑制剂、VEGFR-2IgGI抗体、RPI4610、贝伐单抗、卟吩姆钠、阿奈可他、曲安西龙、氢化可的松、11-a-表氢皮质醇(11-a-epihydrocotisol)、皮甾酮(cortex olone)、17α-羟孕酮、皮质酮、去氧皮质酮、睾酮、雌酮、地塞米松、氟轻松、植物生物碱、激素化合物和/或拮抗剂、生物反应调节剂、例如淋巴因子或干扰素、反义寡核苷酸或寡核苷酸衍生物、shRNA和siRNA。

第二治疗剂的其它实例(其中的一种或多种也可以与本发明的ALK抑制剂联合)包括但不限于：用于阿尔茨海默病的治疗，如多奈哌齐(donepezil)和利凡斯的明(rivastigmine)；用于帕金森氏病的治疗，如L-DOPA/卡比多巴、恩他卡朋、罗吡尼洛(ropinrole)、普拉克索、溴隐亭、培高利特、三己芬迪(trihexephendyl)和金刚烷胺；用于治疗多发性硬化(MS)的剂，诸如β干扰素(例如，和)、乙酸格拉替雷(glatiramer acetate)和米托蒽醌；用于哮喘的治疗，例如沙丁胺醇和孟鲁司特；用于治疗精神分裂症的剂，如再普乐、维思通、思瑞康和氟哌啶醇；抗炎剂，如皮质类固醇、TNF阻断剂、IL-1RA、硫唑嘌呤、环磷酰胺和柳氮磺吡啶；免疫调节剂，包括免疫抑制剂，如环孢菌素、他克莫司、雷帕霉素、霉酚酸酯(mycophenolate mofetil)、干扰素、皮质类固醇、环磷酰胺、硫唑嘌呤和柳氮磺吡啶；神经营养因子，诸如乙酰胆碱酯酶抑制剂、MAO抑制剂、干扰素、抗惊厥剂、离子通道阻断剂、利鲁唑或抗帕金森氏剂；用于治疗心血管疾病的剂，诸如β-阻断剂、ACE抑制剂、利尿药、硝酸盐、钙通道阻断剂或他汀类药物；用于治疗肝病的剂，例如皮质类固醇、考来烯胺、干扰素和抗病毒剂；用于治疗血液疾病的剂，如皮质类固醇、抗白血病剂，或生长因子；或用于治疗免疫缺陷性病症的剂，诸如γ球蛋白。

如本领域中所描述地制备和施用上述第二治疗活性剂(其中的一种或多种可以与本发明的化合物联合使用)。

本发明的化合物通常与就预期施用途径和标准药物实践而选择的药物载体混合施用。使用一种或多种生理学上可接受的载体以常规方式配制根据本发明使用的药物组合物，所述生理学上可接受的载体包括有利于本发明化合物的加工的赋形剂和/或助剂。

可以例如通过常规的混合、溶解、制粒、制锭(dragee-making)、乳化、包封、包埋或冻干工艺制造这些药物组合物。适当的制剂取决于所选择的施用途径。当治疗有效量的本发明的化合物以口服施用时，组合物通常是片剂、胶囊、粉末、溶液或酏剂的形式。当以片剂形式施用时，组合物还可以包含固体载体，如明胶或佐剂。片剂、胶囊和粉末含有约0.01％至约95％，优选约1％至约50％的本发明的化合物。当以液体形式施用时，可以加入液体载体，例如水、石油、或动物或植物来源的油。组合物的液体形式可以进一步含有生理盐水溶液、右旋糖或其它糖类溶液或二醇类。当以液体形式施用时，该组合物含有按重量计约0.1％至约90％，优选约1％至约50％的本发明的化合物。

当通过静脉内、皮肤或皮下注射施用治疗有效量的本发明化合物时，组合物是无热原的、肠胃外可接受的水溶液的形式。适当考虑pH、等渗性、稳定性等的这种肠胃外可接受溶液的制备在本领域的技术范围内。用于静脉内、皮肤或皮下注射的优选的组合物通常包含等渗溶媒。

本发明的化合物可以很容易地与本领域中公知的药学上可接受的载体组合。在一个实施方案中，提供了一种药物组合物，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐或水合物以及药学上可接受的载体。标准药物载体在Remington's PharmaceuticalSciences,Mack Publishing Co.,Easton,PA,第19版，1995中描述。这样的载体使活性剂能够配制成片剂、丸剂、糖衣丸、胶囊、液体、凝胶、糖浆、浆液，悬浮液等，用于由待治疗的患者口服摄取。用于口服使用的药物制剂可以通过将本发明的化合物添加到固体赋形剂中，任选研磨所得的混合物并加工颗粒的混合物，在加入合适的助剂后(如果需要的话)，以获得片剂或糖衣丸芯而获得。合适的赋形剂包括，例如，填料和纤维素制品。如果需要的话，可以加入崩解剂。

本发明的化合物可被配制成通过注射(例如通过推注(bolus injection)或连续输注)肠胃外施用。用于注射的制剂可以以单位剂量形式存在，例如，在安瓿或多剂量容器中，添加有防腐剂。该组合物可以采取这样的形式，如悬浮液、溶液或在油性或水性溶媒中的乳剂，并且可以包含配制剂如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。

用于肠胃外施用的药物组合物包括水溶性形式的活性剂的水溶液。此外，本发明的化合物的悬浮液可以制备成适当的油性注射悬浮液。合适的亲脂性溶剂或溶媒包括脂肪油或合成脂肪酸酯。水性注射悬浮液可含有增加悬浮液粘度的物质。任选地，悬浮液还可以包含合适的稳定剂或增加化合物的溶解度并允许制备高度浓缩溶液的试剂。可选地，本发明的组合物可以是在使用前用合适的溶媒例如无菌无热原水重构的粉末形式。

本发明的化合物还可以配制在直肠组合物中，诸如栓剂或保留灌肠剂，例如含有常规栓剂基质。除了先前描述的制剂，本发明的化合物还可以配制成储库制剂(depotpreparation)。这样的长效制剂可通过植入(例如，皮下或肌内)或通过肌内注射施用。因此，例如，本发明的化合物可以用合适的聚合材料或疏水材料(例如，作为在可接受的油中的乳剂)或离子交换树脂配制。

特别地，本发明的化合物可以以含赋形剂如淀粉或乳糖的片剂形式，或者以单独或与赋形剂混合的胶囊或胚珠的形式，或以包含调味剂或着色剂的酏剂或悬浮液的形式口服、向颊或舌下施用。这种液体制剂可以用药学上可接受的添加剂，例如悬浮剂来制备。本发明的化合物也可以肠胃外注射，例如，静脉内、肌内、皮下或冠脉内。对于肠胃外施用，本发明的化合物通常以无菌水溶液的形式使用，所述无菌水溶液可以含有其它物质，例如盐或单糖，如甘露糖醇或葡萄糖，以使溶液与血液等渗。

在另一个实施方案中，本发明提供了试剂盒，其包含以有利于本发明的化合物(或包括本发明的化合物的组合物)用于实施本发明的方法的方式封装的本发明的化合物(或包括本发明的化合物的组合物)。在一个实施方案中，所述试剂盒包括包装在容器例如密封的瓶子或器皿中的本发明的化合物(或包括本发明的化合物的组合物)，具有被固定到容器或被包括在所述试剂盒中的标签，所述标签描述使用该化合物或组合物来实施本发明的方法。在一个实施方案中，所述化合物或组合物被包装在单位剂型中。所述试剂盒还可以包括适于根据预期施用途径施用组合物的装置。

术语“其中ALK的抑制提供有益效果的疾病或病况”涉及这样一种疾病或病况，其中ALK对于例如该疾病或病况或已知通过ALK抑制剂进行治疗的疾病或病况的发作、发展、表达是重要的或必要的。这类病况的实例包括，但不限于，癌症、慢性自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性疾病、败血症和病毒感染。本领域的普通技术人员能够容易地确定一种化合物是否治疗由任意特定的细胞类型的ALK抑制剂介导的疾病或病况，例如，通过可方便地用于评估特定化合物的活性的测定法。术语“间变性淋巴瘤激酶”或“ALK”包括ALK的同种型和突变体。

术语“第二治疗剂”是指不同于本发明的化合物并且已知治疗所关注的疾病或病况的治疗剂。例如当所关注的疾病或病况是癌症时，第二治疗剂可以是已知的化学治疗药物如紫杉酚，或例如辐射。

术语“疾病”或“病况”表示这样的障碍和/或异常，其通常被认为是病理性的状况或功能，并且其自身可以以特定体征、症状和/或机能障碍的形式表现出来。如下所示，本发明的化合物是ALK的抑制剂，并可以用于治疗其中ALK的抑制提供有益效果的疾病和病况。

如本文所用，术语“治疗”("treat","treating","treatment"等)是指消除、减少或改善疾病或病况和/或与它们相关联的症状。虽然不排除，然而治疗疾病或病况不需要完全消除疾病、病况或与之相关联的症状。术语“治疗”和同义词考虑对需要这种治疗的受试者施用治疗有效量的本发明的化合物。治疗可以根据症状定向，例如，以抑制症状。它可以实现在短时间内起效，在中期内对症或者可以是长期治疗，例如在维持治疗的范围内。

如本文所用，术语“预防”("prevent","preventing"和"prevention")是指预防疾病或病况和/或其伴随症状的发作或阻止受试者患上疾病的方法。如本文所用，“预防”还包括延迟疾病和/或其伴随症状的发作并降低受试者患上疾病的风险。术语“预防”可以包括“预防性治疗”，这是指在不患有但有风险或易于再发展疾病或病况或复发所述疾病或病况的受试者中，减少再发展疾病或病况的概率，或减少复发先前受控的疾病或病况复发的概率。

如本文所使用的术语“治疗有效量”或“有效剂量”是指当通过本发明的方法向有此需要的个体施用(多种)活性成分时，有效地递送足以治疗所关注的病况或疾病的(多种)活性成分的量。在癌症或其他增殖病症的情况下，治疗有效量的药剂可减少(即，减缓到一定程度并优选停止)不需要的细胞增殖；减少癌细胞的数目；减少肿瘤尺寸；抑制(即，减缓到一定程度并优选停止)癌细胞浸润到周围器官中；抑制(即，减缓到一定程度并优选停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；和/或在一定程度上减轻与癌症相关的一种或多种症状。所施用的化合物或组合物可以是抑制细胞生长的和/或细胞毒性的，达到阻止生长和/或杀死现有的癌细胞的程度。

术语“容器”是指任何容器和闭包，因此适合于储存、运输、分配和/或处理药物产品。

术语“插页(insert)”是指伴随药物产品的信息，其提供如何施用该产品的描述，以及使医生、药剂师及患者能够就该产品的使用做出明智决定所需的安全性和有效性数据。包装插页通常被视为药物产品的“标签”。

“并行施用”、“联合施用”、“同时施用”和类似短语指对待治疗的受试者并行施用两种或更多种药剂。关于“并行”，其是指同时或在不同的时间点以任意顺序依次施用每种药剂。但是，如果不同时施用，其意思是按顺序并以充分接近的时间对个体施用它们，以提供所需的治疗效果，并且可以一齐起效。例如，本发明的化合物可以与第二治疗剂同时或在不同的时间点以任意顺序依次施用。本发明的化合物和第二治疗剂可以以任意适当的形式和通过任意合适的途径分别施用。当本发明的化合物和第二治疗剂不并行施用时，应当理解的是，它们可以以任意顺序对有此需要的受试者施用。例如，本发明的化合物可以在对有此需要的个体施用第二治疗剂治疗方法(例如，放射治疗)之前(例如，5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周前)、同时或之后(例如5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周后)施用。在各种实施方案中，本发明的化合物和第二治疗剂以1分钟间隔、10分钟间隔、30分钟间隔、小于1小时间隔、1小时间隔、1小时至2小时间隔、2小时至3小时间隔、3小时至4小时间隔、4小时至5小时间隔、5小时至6小时间隔、6小时至7小时间隔、7小时至8个小时间隔、8小时至9小时间隔、9小时至10小时间隔、10小时至11小时间隔、11个小时至12小时间隔，不超过24小时间隔或不超过48小时间隔施用。在一个实施方案中，该组合疗法的组分以约1分钟至约24小时间隔施用。

除非另有说明，否则在描述本发明的背景中(特别是在权利要求书的背景中)，术语“一”、“该”、“所述”以及类似指称对象的使用应被解释为涵盖单数和复数。除非本文另外指出，否则本文中的数值范围的叙述仅旨在用作单独提及落入该范围内的每个单独的数值的速记方法，并且每个单独的数值均被并入本说明书中，如同其在本文中单独列举一样。除非另有声明，否则本文所提供的任何和所有实施例或示例性语言(例如，“如”)的使用旨在更好地说明本发明而不是对本发明的范围的限制。说明书中的任何语言都不应被解释为指示任意非要求保护的要素对于本发明的实施是必要的。

本文所用的术语“约”包括所记载的数±10％。因此，“约10”表示9至11。

在本发明中，单独使用或作为另一基团的一部分的术语“卤素”是指-Cl、-F、-Br或-I。

在本发明中，单独使用或作为另一基团的一部分的术语“硝基”是指-NO₂。

在本发明中，单独使用或作为另一基团的一部分的术语“氰基”是指-CN。

在本发明中，单独使用或作为另一基团的一部分的术语“羟基”是指-OH。

在本发明中，单独使用或作为另一基团的一部分的术语“烷基”是指含有一到十二个碳原子的未取代的直链或支链脂族烃(即C_1-12烷基)，或者含有指定的碳原子数的未取代的直链或支链脂族烃，例如，C₁烷基如甲基，C₂烷基如乙基，C₃烷基如丙基或异丙基，C_1-3烷基如甲基、乙基、丙基或异丙基等。在一个实施方案中，烷基是C_1-6烷基。在另一个实施方案中，烷基是C_1-4烷基。在另一个实施方案中，烷基基团被部分或完全氘化，即烷基基团的一个或多个氢原子被氘原子取代。非限制性的示例性C_1-12烷基基团包括甲基(包括-CH₂D、-CHD₂和-CD₃)、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、异丁基、3-戊基、己基、庚基、辛基、壬基和癸基。示例性C_1-4烷基为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基和异丁基。

在本发明中，单独使用或作为另一基团的一部分的术语“环烷基”是指含有具有3-12个碳原子的一个或两个环的饱和和部分不饱和(含有一个或两个双键)环状脂族烃(即C_3-12环烷基)，或含有具有指定碳原子数目的一个或两个环的饱和和部分不饱和(含有一个或两个双键)环状脂族烃。在一个实施方案中，环烷基基团具有两个环。在一个实施方案中，环烷基基团具有一个环。在另一个实施方案中，环烷基基团选自C_3-8环烷基基团。在另一个实施方案中，环烷基基团选自C_3-6环烷基基团。非限制性的示例性的环烷基基团包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、降冰片基、十氢化萘、金刚烷基、环己烯基、环戊烯基和环己烯基。

在本发明中，本文单独使用或作为另一基团的一部分的术语“任选取代的环烷基”是指如上定义的环烷基未被取代或被1至4个取代基取代，所述取代基独立地选自由卤素、氰基、羟基、烷基和烷氧基组成的组。非限制性的示例性的任选取代的环烷基包括：

在本发明中，单独使用或作为另一基团的一部分的术语“杂环基”是指饱和和部分不饱和(例如，含有一个或两个双键)的环状基团，其含有具有三至十四个环成员的一个、两个或三个环，即3至14元杂环基，其中所述环之一的至少一个碳原子被杂原子取代。每个杂原子独立地选自由氧、硫(包括亚砜和砜)和/或氮原子组成的组，其可以被氧化或季铵化。术语“杂环基”旨在包括这样的基团，其中环-CH₂-被-C(＝O)-取代，例如，环状脲基，如2-咪唑啉酮和环酰胺基团，如β-内酰胺、γ-内酰胺、δ-内酰胺、ε-内酰胺和哌嗪-2-酮。在一个实施方案中，杂环基基团是含有一个环和一个或两个氧和/或氮原子的3元至8元环状基团。在一个实施方案中，杂环基基团是含有一个环和一个或两个氧和/或氮原子的4元、5元或6元环状基团。在另一个实施方案中，杂环基基团是含有一个环和一个氧或氮原子的4元或6元环状基团。在另一个实施方案中，杂环基基团是含有两个环和一个或两个氮原子的7元或10元双环基团。杂环基可通过任意可利用的碳或氮原子任选地被连接到分子的其余部分。非限制性的示例性杂环基团包括二氧杂环己烷基(dioxanyl)、四氢吡喃基、2-氧代吡咯烷-3-基、哌嗪-2-酮、哌嗪-2,6-二酮、2-咪唑啉酮、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和二氢吲哚基。

在本发明中，本文单独使用或作为另一基团的一部分的术语“任选取代的杂环基”是指未被取代或被独立地选自由卤素、氰基、羟基、烷基和烷氧基组成的组的一个至四个取代基取代的如上所定义的杂环基。取代可以发生在任意可用的碳或氮原子或两者上。非限制性的示例性任选取代的杂环基基团包括：

在本发明中，单独使用或作为另一基团的一部分的术语“烷氧基”是指连接到末端氧原子的烷基或环烷基。在一个实施方案中，烷氧基基团是C_1-4烷氧基基团。在另一个实施方案中，烷氧基基团是连接到末端氧原子的C_1-4烷基，例如，甲氧基、乙氧基和叔丁氧基。

本发明的化合物可根据以下通用合成方案制备。在通用方案1中，6-氰基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(中间体1.1)与2,3-二氟-N-异丙基-4-甲氧基苯胺反应，得到6-氰基-2-((2,3-二氟-4-甲氧基苯基)(异丙基)氨基)-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(中间体1.2)，将其环化得到3,4-二氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(中间体1.3)。中间体1.3与具有式VII(其中R^1a、R^2a、R^2a、R^2b和R³如关于式I所定义)的化合物反应，得到具有式V的化合物。

通用方案1

在通用方案2中，具有式V(其中R³是氢)的化合物与(C_1-5烷基)-CHO的还原胺化，得到具有式V(其中R³是C_1-6烷基)的化合物。

通用方案2

在通用方案3中，2-溴-3-氟-1-甲氧基-4-硝基苯(中间体3.1)与具有式VIII(其中R^1a、R^2a、R^2a、R^2b和R³如关于式I所定义)的化合物反应，得到中间体3.2。将中间体3.2的烯烃还原，得到中间体3.3。将中间体3.3还原胺化，得到中间体3.4。

中间体3.4与6-氰基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(中间体3.5)反应，得到中间体3.6，将其环化得到具有式III的化合物。

通用方案3

在通用方案4中，将2-溴-3-氟-1-甲氧基-4-硝基苯(中间体4.1)还原，得到3-溴-2-氟-4-甲氧基苯胺(中间体4.2)。将中间体4.2还原胺化，得到3-溴-2-氟-N-异丙基-4-甲氧基苯胺(中间体4.3)。

中间体4.3与6-氰基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(中间体4.4)反应，得到2-((3-溴-2-氟-4-甲氧基苯基)(异丙基)氨基)-6-氰基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(中间体4.5)，将其环化得到3-溴-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(中间体4.6)。使中间体4.6与具有式VIII(其中R^1a、R^2a、R^2a、R^2b和R³如关于式I所定义)的化合物反应，得到具有式IV的化合物。

通用方案4

实施例

实施例1

(S)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(3-甲基哌嗪-1-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物1)的合成

步骤A：2,3-二氟-N-异丙基-4-甲氧基苯胺的合成。

将丙酮(11.6g，200mmol)、乙酸(1.8g，30mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(6.36g，30mmol)加入到2,3-二氟-4-甲氧基苯胺(3.18g，20mmol)的DCM(120mL)溶液中，并将混合物在室温(RT)下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。除去溶剂，并将残余物通过硅胶色谱法用己烷/乙酸乙酯(9/1，v/v)纯化，得到标题化合物(2.8g，70％收率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δppm 6.65(td,J＝8.7,2.3Hz,1H),6.39(td,J＝8.7,2.3Hz,1H),3.85(s,3H),3.58-3.56(m,1H),3.46(s,1H),1.24(d,J＝6.2Hz,6H)。

步骤B：6-氰基-2-((2,3-二氟-4-甲氧基苯基)(异丙基)氨基)-1H-吲哚-3-羧酸甲酯的合成。

将DABCO(62mg，0.55mmol)加入到6-氰基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(200mg，1mmol)的DCM(20mL)溶液中，并将混合物冷却至0℃。然后加入N-氯代琥珀酰亚胺(147mg，1.1mmol)并将反应在0℃下搅拌2小时。滴加2,3-二氟-N-异丙基-4-甲氧基苯胺(201mg，1mmol)和三氯乙酸(41mg，0.25mmol)的DCM(5mL)溶液，并将反应在RT搅拌2小时。通过加水淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，将残余物通过硅胶色谱法用己烷/乙酸乙酯(4/1，v/v)纯化，得到标题化合物(225mg，56％收率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 8.25(s,1H),8.02(d,J＝8.0Hz,1H),7.45-7.36(m,2H),7.13-7.06(m,1H),6.846.80(m,1H),4.85-4.79(m,1H),3.95(s,3H),3.85(s,3H),1.27(dd,J＝6.5,1.1Hz,6H)。

步骤C：3,4-二氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈的合成。

将6-氰基-2-((2,3-二氟-4-甲氧基苯基)(异丙基)氨基)-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(225mg，0.56mmol)溶于二苯醚(10mL)并将溶液回流1小时。将混合物冷却至RT。加入己烷(20mL)并通过过滤收集沉淀物。通过硅胶色谱法用己烷/乙酸乙酯(2/1，v/v)纯化沉淀物，得到标题化合物(135mg，65％收率)。MS m/z＝368[M+H]。

步骤D：(S)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(3-甲基哌嗪-1-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈的合成。

将(S)-2-甲基哌嗪(0.5mL)和DIPEA(0.5ml)加入到3,4-二氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(367mg，1.0mmol)的DMSO(3ml)溶液中，并将混合物加热至120℃-140℃，保持3天。将反应混合物冷却至RT，并通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(150mg，33％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.36(d,J＝8.1Hz,1H),7.82-7.76(m,2H),7.55(d,J＝8.1Hz,1H),5.15-5.08(m,1H),4.04(s,3H),3.65-3.55(m,5H),3.50-3.45(m,1H),3.44-3.35(m,1H),1.80-1.72(m,6H),1.41(d,J＝6.4Hz,3H)。

实施例2

(R)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(3-甲基哌嗪-1-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物2)的合成

将(R)-2-甲基哌嗪(0.5mL)和DIPEA(0.5ml)加入到3,4-二氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(367mg，1.0mmol)的DMSO(3ml)溶液中，并将混合物加热至120℃-140℃，保持3天。将反应混合物冷却至RT，并通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(132mg，30％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.36(d,J＝8.1Hz,1H),7.82–7.76(m,2H),7.55(d,J＝8.1Hz,1H),5.15-5.08(m,1H),4.04(s,3H),3.65-3.55(m,5H),3.50-3.45(m,1H),3.44-3.35(m,1H),1.80-1.72(m,6H),1.41(d,J＝6.4Hz,3H)。

实施例3

3-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物3)的合成

将2,2-二甲基哌嗪(0.5mL)和DIPEA(0.5ml)加入到3,4-二氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(367mg，1.0mmol)的DMSO(3ml)溶液中，并将混合物加热至120℃-140℃，保持3天。将反应混合物冷却至室温，并通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(200mg，43％收率)。¹H NMR(300MHz,甲醇-d₄)δ8.34(d,J＝7.8Hz,1H),7.80-7.76(m,2H),7.53(d,J＝7.8Hz,1H),5.15-5.05(m,1H),4.05(s,3H),3.61-3.36(m,6H),1.75(d,J＝6.7Hz,6H),1.56(s,6H)。

实施例4

(S)-3-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物4)的合成

向(S)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(3-甲基哌嗪-1-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(60mg，0.134mmol)的DCM(10mL)溶液中加入37％甲醛溶液(33mg，0.40mmol)、乙酸(12mg，0.20mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(43mg，0.20mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(40mg，65％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.84-7.72(m,2H),7.50(d,J＝8.0Hz,1H),5.20-5.01(m,1H),4.04(s,3H),3.71-3.59(m,5H),3.50-3.44(m,1H),3.40-3.34(m,1H),3.05(s,3H),1.75(d,J＝6.8Hz,6H),1.47(d,J＝6.2Hz,3H)。

实施例5

(R)-3-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物5)的合成

向(R)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(3-甲基哌嗪-1-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(60mg，0.134mmol)的DCM(10mL)溶液中加入37％甲醛溶液(33mg，0.40mmol)、乙酸(12mg，0.20mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(43mg，0.20mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(47mg，76％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.84-7.72(m,2H),7.50(d,J＝8.0Hz,1H),5.20-5.01(m,1H),4.04(s,3H),3.71-3.59(m,5H),3.50-3.44(m,1H),3.40-3.34(m,1H),3.05(s,3H),1.75(d,J＝6.8Hz,6H),1.47(d,J＝6.2Hz,3H)。

实施例6

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物6)的合成

向3-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(200mg，0.43mmol)的DCM(10mL)溶液中加入37％甲醛溶液(175mg，2.17mmol)、乙酸(39mg，0.65mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(138mg，0.65mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(150mg，73％收率)。¹H NMR(300MHz,甲醇-d₄+CDCl₃)δ8.39(d,J＝8.0Hz,1H),7.81-7.75(m,2H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),5.19-4.99(m,1H),4.04(s,3H),3.66-3.35(m,6H),2.88(s,3H),1.82-1.70(m,6H),1.63(s,3H),1.50(s,3H)。

实施例7

3-(顺式-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物7)的合成

将顺式-2,6-二甲基哌嗪(0.5mL)和DIPEA(0.5ml)加入到3,4-二氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(300mg，0.817mmol)的DMSO(3ml)溶液中，并将混合物加热至120℃-140℃，保持3天。将反应混合物冷却至RT，并通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(162mg，43％收率)。¹H NMR(300MHz,甲醇-d₄)δ8.39(d,J＝8.1Hz,1H),7.88-7.82(m,2H),7.59(d,J＝8.1Hz,1H),5.15-5.01(m,1H),4.04(s,3H),3.70-3.50(m,4H),3.40-3.32(m,2H),1.76(d,J＝6.5Hz,6H),1.39(d,J＝6.3Hz,6H)。

实施例8

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(顺式-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物8)的合成

向3-(顺式-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(200mg，0.43mmol)的DCM(10mL)和甲醇(2mL)溶液中加入37％甲醛溶液(175mg，2.17mmol)、乙酸(39mg，0.65mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(138mg，0.65mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(135mg，66％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.33(d,J＝8.1Hz,1H),7.87-7.70(m,2H),7.52(d,J＝8.1Hz,1H),5.25-5.10(m,1H),4.05(s,3H),3.66-3.40(m,6H),3.06(s,3H),1.72(d,J＝7.1Hz,6H),1.49(d,J＝6.0Hz,6H)。

实施例9

3-(顺式-4-乙基-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物9)的合成

向3-(顺式-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(40mg，0.087mmol)的DCM(10mL)和甲醇(2mL)溶液中加入40％乙醛的异丙醇溶液(29mg，0.26mmol)、乙酸(8mg，0.13mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(28mg，0.13mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(11mg，26％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.33(d,J＝8.1Hz,1H),7.80-7.75(m,2H),7.52(d,J＝8.1Hz,1H),5.16-5.06(m,1H),4.05(s,3H),3.70-3.40(m,8H),1.75(d,J＝7.1Hz,6H),1.46(d,J＝6.5Hz,6H),1.41(t,J＝7.6Hz,3H)。

实施例10

3-(顺式-3,5-二甲基-4-(甲基-d₂)哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物13)的合成

向3-(顺式-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(40mg，0.087mmol)的DCM(10mL)溶液中加入20％甲醛-d₂溶液(42mg，0.26mmol)、乙酸(7.8mg，0.13mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(28mg，0.13mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(23mg，55％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.34(d,J＝8.1Hz,1H),7.80-7.74(m,2H),7.53(dd,J＝8.1,1.5Hz,1H),5.19-5.07(m,1H),4.04(s,3H),3.70-3.40(m,6H),3.03(s,1H),1.75(dd,J＝7.0,2.0Hz,6H),1.49(d,J＝6.3Hz,6H)。

实施例11

3-(顺式-3,5-二甲基-4-(甲基-d₃)哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物14)的合成

向3-(顺式-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(40mg，0.087mmol)的DCM(10mL)溶液中加入20％甲醛-d₂溶液(42mg，0.26mmol)、乙酸(7.8mg，0.13mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠-d(28mg，0.13mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(24mg，59％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.27(d,J＝8.0Hz,1H),7.74(d,J＝1.6Hz,1H),7.67(s,1H),7.45(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),5.15-5.03(m,1H),4.04(s,3H),3.70-3.30(m,6H),1.74(dd,J＝7.0,1.9Hz,6H),1.49(d,J＝6.2Hz,6H)。

实施例12

3-(顺式-3,5-二甲基-4-(甲基-d)哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物15)的合成

向3-(顺式-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(40mg，0.087mmol)的DCM(10mL)溶液中加入37％甲醛溶液(21mg，0.26mmol)、乙酸(7.8mg，0.13mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠-d(28mg，0.13mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(21mg，50％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.79-7.71(m,2H),7.50(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),5.18-5.04(m,1H),4.04(s,3H),3.71-3.35(m,6H),3.04(s,2H),1.75(dd,J＝7.1,2.0Hz,6H),1.49(d,J＝6.2Hz,6H)。

实施例13

3-(顺式-3,5-二甲基-4-(甲基-d)哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物11)的合成

步骤A：2-溴-3-氟-1-甲氧基-4-硝基苯的合成。

将25％甲醇钠(0.9g，4.2mmol)滴加到2-溴-1,3-二氟-4-硝基苯(1g，4.2mmol)的甲醇(5mL)溶液中，并将混合物在0℃下搅拌1小时并在RT下搅拌4小时。加入水淬灭反应并将产物用乙酸乙酯萃取。在减压下除去溶剂，并将残余物通过硅胶色谱法用己烷/乙酸乙酯(10/1，v/v)纯化，得到标题化合物(0.58g，55％收率)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δppm 8.14(dd,J＝9.3,8.3Hz,1H),6.80(dd,J＝9.3,1.7Hz,1H),4.03(s,3H)。

步骤B：3-溴-2-氟-4-甲氧基苯胺的合成。

向2-溴-3-氟-1-甲氧基-4-硝基苯(700mg，2.8mmol)的乙醇(10mL)溶液中加入铁粉(940mg，16.8mmol)和10％HCl(1mL)并将混合物在70℃剧烈搅拌2小时。冷却至室温后，通过加入饱和碳酸钠将pH调节至7-8。过滤除去铁，并在减压下除去溶剂。该产物无需进一步纯化直接被用于下一步。

步骤C：3-溴-2-氟-N-异丙基-4-甲氧基苯胺的合成。

将丙酮(2.05mL，28mmol)、乙酸(252mg，4.2mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(890mg，4.2mmol)加入到3-溴-2-氟-4-甲氧基苯胺(613mg，2.8mmol)的DCM(20mL)溶液中，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。除去溶剂，并将残余物通过硅胶色谱法用己烷/乙酸乙酯(10/1，v/v)纯化，得到标题化合物(550mg，75％收率)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δppm 7.20-7.02(m,2H),3.83(s,3H),3.70-3.50(m,1H),3.40(s,1H),1.21(d,J＝6.2Hz,6H)。

步骤D：2-((3-溴-2-氟-4-甲氧基苯基)(异丙基)氨基)-6-氰基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯的合成。

将DABCO(129mg，1.16mmol)加入到6-氰基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(420mg，2.1mmol)的DCM(20mL)溶液中，并将混合物冷却至0℃。然后加入N-氯代琥珀酰亚胺(307mg，2.31mmol)并将反应在0℃下搅拌2小时。滴加3-溴-2-氟-N-异丙基-4-甲氧基苯胺(550mg，2.1mmol)和三氯乙酸(86mg，0.53mmol)的DCM(5mL)溶液，并将反应在室温下搅拌2小时。通过加水淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过硅胶色谱法用己烷/乙酸乙酯(3/1，v/v)纯化，得到标题化合物(500mg，52％收率)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δppm 8.44(s,1H),7.99(d,J＝8.3Hz,1H),7.42-7.35(m,3H),6.75(dd,J＝1.7,9.0Hz,1H),4.80-4.70(m,1H),3.92(s,3H),3.81(s,3H),1.25(d,J＝6.9Hz,6H)。

步骤E：3-溴-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈的合成。

将2-((3-溴-2-氟-4-甲氧基苯基)(异丙基)氨基)-6-氰基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(500mg，1.09mmol)溶解在二苯醚(10mL)中并将溶液回流1小时。将该混合物冷却至RT。加入己烷(20mL)并通过过滤收集沉淀物。将该沉淀物通过硅胶色谱法用己烷/乙酸乙酯(2/1，v/v)纯化，得到标题化合物(350mg，75％收率)。MS m/z＝428[M+H]。

步骤F：4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(2,2,6,6-四甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈的合成。

将3-溴-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(100mg，0.234mmol)、Pd(dppf)Cl₂(7mg，0.0094mmol)和K₂CO₃(97mg，0.70mmol)加入到2,2,6,6-四甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(62mg，0.234mmol)的DME-H₂O(11mL，10/1，v/v)溶液中。将该混合物在氮气下在80℃下搅拌12小时。将反应冷却至RT并用乙酸乙酯萃取产物。减压除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(110mg，96％收率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.80(s,1H),8.44(d,J＝8.1Hz,1H),7.86(s,1H),7.80(d,J＝1.4Hz,1H),7.48(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),5.71(s,1H),5.19–5.10(m,1H),3.81(s,3H),2.20(s,2H),1.77(d,J＝6.4Hz,6H),1.40(s,6H),1.38(s,6H)。

实施例14

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(1,2,2,6,6-五甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物12)的合成

向4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(2,2,6,6-四甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(60mg，0.123mmol)的DCM(10mL)溶液中加入37％甲醛溶液(30mg，0.37mmol)、乙酸(11mg，0.185mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(39mg，0.185mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(55mg，89％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.21(d,J＝8.1Hz,1H),7.69(s,1H),7.65(s,1H),7.40(d,J＝8.1Hz,1H),5.82(d,J＝2.5Hz,1H),5.10-4.98(m,1H),3.89(s,3H),2.88(s,3H),2.87-2.80(m,1H),2.45(d,J＝17.9Hz,1H),1.73-1.60(m,6H),1.58(s,3H),1.55(s,3H),1.51(s,3H),1.46(s,3H)。

实施例15

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物16)的合成

将3-溴-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(200mg，0.47mmol)、Pd(dppf)Cl₂(14mg，0.019mmol)和K₂CO₃(195mg，1.41mmol)加入到4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(146mg，0.70mmol)的DME-H₂O(11mL，10/1，v/v)溶液中。将该混合物在氮气下在80℃下搅拌12小时。将反应冷却至RT并用乙酸乙酯萃取产物。减压除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(170mg，85％收率)。MS m/z＝431[M+H]。

实施例16

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物17)的合成

向4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(53mg，0.123mmol)的DCM(10mL)溶液中加入37％甲醛溶液(30mg，0.37mmol)、乙酸(11mg，0.185mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(39mg，0.185mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(45mg，82％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.36(d,J＝8.1Hz,1H),7.86-7.77(m,2H),7.55(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),5.95-5.85(m,1H),5.22-5.06(m,1H),4.25-4.10(m,1H),4.01(s,3H),3.98-3.86(m,1H),3.76-3.72(m,1H),3.43-3.34(m,1H),3.08(s,3H),2.96-2.92(m,1H),2.75-2.18(m,1H),1.75(dd,J＝7.0,2.2Hz,6H)。

实施例17

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物20)的合成

向4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(202mg，0.47mmol)的DCM(20mL)溶液中加入四氢-4H-吡喃-4-酮(141mg，1.41mmol)、乙酸(43mg，0.71mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(150mg，0.71mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(145mg，60％收率)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.36(d,J＝8.0Hz,1H),7.86-7.76(m,2H),7.59-7.49(m,1H),5.99-5.91(m,1H),5.19-5.07(m,1H),4.20-4.04(m,4H),4.00(s,3H),3.67-3.40(m,5H),3.00-2.63(m,2H),2.20-2.10(m,2H),1.90-1.85(m,2H),1.75(dd,J＝7.0,2.2Hz,6H)。

实施例18

3-(顺式-2,6-二甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物18)的合成

步骤A：顺式-1-(4-甲氧基苄基)-2,6-二甲基哌啶-4-酮的合成。

向丙酮二羧酸(4g，27.4mmol)的水(20mL)溶液中加入40％乙醛(6g，54.8mmol)。然后在10分钟内以小份加入4-甲氧基苯基甲胺(3.75g，27.4mmol)。将得到的黄色溶液在室温下搅拌3天。用二氯甲烷(3×60mL)萃取反应混合物。将合并的萃取物用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥。过滤溶液并蒸发以得到棕色残余物。通过硅胶色谱法用二氯甲烷/乙酸乙酯(9/1，v/v)分离异构的哌啶酮。得到的所需标题化合物(4.0g，59％)，为浅黄色油状物。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.30(d,J＝8.5Hz,2H),6.87(d,J＝8.5Hz,2H),3.86(d,J＝13.7Hz,1H),3.81(s,3H),3.55(d,J＝13.7Hz,1H),3.28-3.24(m,2H),2.49-2.45(m,2H),2.20-2.16(m,2H),1.09(d,J＝6.6Hz,6H)。

步骤B：顺式-2,6-二甲基哌啶-4-酮的合成。

将顺式-1-(4-甲氧基苄基)-2,6-二甲基哌啶-4-酮(4.0g，16.2mmol)溶解在乙醇(20mL)中，并加入催化剂(0.4g，10％Pd-C)。将混合物在氢气氛下搅拌12小时。通过过滤除去催化剂并在减压下蒸发滤液，得到标题化合物(1.8g，88％收率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ3.58-3.50(m,2H),2.50-2.48(m,2H),2.20-2.11(m,2H),1.17(d,J＝6.6Hz,6H)。

步骤C：顺式-2,6-二甲基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯的合成。

将二碳酸二叔丁酯(3.14g，14.4mmol)和N,N-二异丙基乙胺(3.1g，24mmol)加入到顺式-1-(4-甲氧基苄基)-2,6-二甲基哌啶-4-酮(1.54g，12mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液中，并将该混合物在室温下搅拌12小时。在减压下除去溶剂并将残余物通过硅胶色谱法用己烷/乙酸乙酯(8/2，v/v)纯化，得到标题化合物(2.0g，73％收率)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ4.41-4.39(m,2H),2.85(dd,J＝17.8,6.5Hz,2H),2.37(dd,J＝17.8,1.9Hz,2H),1.50(s,9H),1.25(d,J＝6.8Hz,6H)。

步骤D：顺式-2,6-二甲基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯的合成。

在-78℃，向顺式-2,6-二甲基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg，2.2mmol)的THF(20mL)溶液中缓慢加入在THF中的2.0M LDA(1.1mL，2.2mmol)。20分钟后，将1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺酰基)甲烷磺酰胺(786mg，2.2mmol)的溶液缓慢加入混合物中。将反应混合物在0℃下搅拌3小时。减压蒸发溶剂，并将残余物通过柱色谱法用己烷/乙酸乙酯(20/1，v/v)纯化，得到标题化合物(600mg，76％收率)。

步骤E：顺式-2,6-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯的合成。

将顺式-2,6-二甲基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(600mg，1.67mmol)、双(频哪醇合)二硼(467mg，1.84mmol)、醋酸钾(490mg，5.01mmol)、1,10-双(二苯基膦基)二茂铁(47mg，0.084mmol)和[1,10-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)复合物的二氯甲烷(61mg，0.084mmol)悬浮液在80℃下在1,4-二噁烷(10mL)中搅拌12小时。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，并将有机层用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥并过滤。减压蒸发溶剂，并将残余物通过柱色谱法用己烷/乙酸乙酯(9/1，v/v)纯化，得到标题化合物(500mg，89％收率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ6.59(dd,J＝5.0,3.0Hz,1H),4.21-4.17(m,2H),2.44-2.33(m,1H),2.22-2.13(m,1H),1.48(s,9H),1.30-1.20(m,15H),1.05(d,J＝6.4Hz,3H)。

步骤F：3-(顺式-2,6-二甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈的合成。

将3-溴-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(200mg，0.47mmol)、Pd(dppf)Cl₂(14mg，0.019mmol)和K₂CO₃(195mg，1.41mmol)加入到顺式-2,6-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(236mg，0.70mmol)的DME-H₂O(11mL，10/1，v/v)溶液中。将该混合物在氮气下在80℃下搅拌12小时。将反应冷却至RT并用乙酸乙酯萃取产物。减压除去溶剂并将残余物溶于DCM(5mL)中。然后加入TFA(1mL)并将该混合物在室温下搅拌2小时。减压除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(175mg，82％收率)。MS m/z＝459[M+H]。

实施例19

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(顺式-1,2,6-三甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物19)的合成

向3-(顺式-2,6-二甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(56mg，0.123mmol)的DCM(10mL)溶液中加入37％甲醛溶液(30mg，0.37mmol)、乙酸(11mg，0.185mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(39mg，0.185mmol)，并将该混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(42mg，73％收率)。MS m/z＝473[M+H]。

实施例20

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈(化合物10)的合成

步骤A：3-(2-氟-6-甲氧基-3-硝基苯基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-烯-8-羧酸叔丁酯的合成。

将2-溴-3-氟-1-甲氧基-4-硝基苯(750mg，3mmol)、Pd(dppf)Cl₂(88mg，0.12mmol)和K₂CO₃(1.242g，9mmol)加入到3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-烯-8-羧酸叔丁酯(1.0g，3mmol)的DME-H₂O(22mL，10/1，v/v)溶液中。将该混合物在氮气下在80℃下搅拌12小时。将反应冷却至RT并用乙酸乙酯萃取产物。减压除去溶剂，并将残余物通过硅胶色谱法用己烷/乙酸乙酯(5/1，v/v)纯化，得到标题化合物(850mg，75％收率)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δppm 8.06(dd,J＝8.5,9.3Hz,1H),6.72(dd,J＝1.3,9.3Hz,1H),6.07-5.95(m,1H),4.60-4.25(m,2H),3.89(s,3H),3.20-2.95(m,1H),2.40-2.20(m,1H),2.18-2.00(m,2H),1.90-1.78(m,2H),1.52(2,9H)。

步骤B：3-(2-氟-3-(异丙基氨基)-6-甲氧基苯基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯的合成。

将10％Pd-C(85mg)加入到3-(2-氟-6-甲氧基-3-硝基苯基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-烯-8-羧酸叔丁酯(850g，2.25mmol)的甲醇(20mL)溶液中，并将混合物在室温下氢化过夜。滤除Pd-C并减压除去溶剂。将残余物溶于DCM(20mL)中，然后加入丙酮(870mg，15mmol)、乙酸(270mg，4.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(954mg，4.5mmol)。将混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。除去溶剂，并将残余物通过硅胶色谱法用己烷/乙酸乙酯(9/1，v/v)纯化，得到标题化合物(800mg，91％收率)。MS m/z＝393[M+H]。

步骤C：2-((3-(8-(叔丁氧基羰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-2-氟-4-甲氧基苯基)(异丙基)氨基)-6-氰基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯的合成。

将DABCO(115mg，1.02mmol)加入到6-氰基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(372mg，1.86mmol)的DCM(20mL)溶液中，并将混合物冷却至0℃。然后加入N-氯代琥珀酰亚胺(272mg，2.05mmol)并将反应在0℃下搅拌2小时。滴加3-(2-氟-3-(异丙基氨基)-6-甲氧基苯基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(730mg，1.86mmol)和三氯乙酸(76mg，0.465mmol)的DCM(5mL)溶液，并将反应在室温下搅拌2小时。通过加水淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过硅胶色谱法用己烷/乙酸乙酯(3/1，v/v)纯化，得到标题化合物(1.0g，91％收率)。MS m/z＝591[M+H]。

步骤D：6-氰基-2-((2-氟-4-甲氧基-3-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)苯基)(异丙基)氨基)-1H-吲哚-3-羧酸甲酯的合成。

将TFA(1mL)加入到2-((3-(8-(叔丁氧基羰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-2-氟-4-甲氧基苯基)(异丙基)氨基)-6-氰基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(242mg，0.41mmol)的DCM(10mL)溶液中，并将该混合物在室温下搅拌12小时。在真空下除去溶剂，并将残余物溶于DCM(20mL)中。然后加入37％甲醛溶液(100mg，1.23mmol)、乙酸(37mg，0.62mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(130mg，0.62mmol)，并将混合物在RT下搅拌12小时。加入水以淬灭反应，并将混合物用DCM萃取。在真空下除去溶剂，并将残余物通过快速柱色谱法用乙酸乙酯/甲醇(70/30，v/v)纯化，得到标题化合物(354mg，70％收率)。MS m/z＝505[M+H]。

步骤F：4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈的合成。

将6-氰基-2-((2-氟-4-甲氧基-3-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)苯基)(异丙基)氨基)-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(160mg，0.317mmol)溶解在二苯醚(10mL)中，并将溶液回流1小时。将混合物冷却至RT。加入己烷(20mL)并通过过滤收集沉淀物。通过制备型HPLC纯化沉淀物，得到标题化合物(85mg，57％收率)。MS m/z＝473[M+H]。

实施例21

体外活性

Kappas-299和H3122细胞系购自美国模式培养物保藏所(American Type CultureCollection，Manassas，VA，美国)，并在从原始储液开始后2个月内使用。所有细胞系均按推荐方法培养。为进行细胞生长抑制测定，将细胞用不同浓度的测试化合物处理，所述测试化合物从储液稀释到含有最终浓度0.2％的DMSO的培养基。使用WST-8细胞增殖测定试剂盒(Dojindo Molecular Technologies)根据制造商的说明书测定细胞活力。一式三份进行三个独立实验。使用Prism软件分析数据以确定相对于DMSO对照的50％的细胞生长抑制(IC₅₀)值。见表2。

表2

实施例22

体内功效

化合物制备

将化合物8、12、19和20溶解在98％PEG200:2％TPGS(Sigma)的溶液中。LDK378(ceritinib)是已知的ALK抑制剂。

异种移植肿瘤细胞注射

将异种移植物的肿瘤细胞在PBS中洗涤两次，并在1：1的PBS和Matrigel(BDBiosciences，Invitrogen公司)的冰冷混合物中重悬，最终Matrigel蛋白浓度为5mg/ml。将细胞以0.1ml中5×10⁶个细胞皮下(s.c.)注射到每只小鼠的侧腹区域。将所有肿瘤接种到SCID小鼠(品系：236C.B-17SCID，Charles River)中。

异种移植肿瘤生长和体重监测

使用卡尺在二个维度上测量小鼠中生长的肿瘤的尺寸。肿瘤体积(mm³)＝(AxB²)/2，其中A和B分别是肿瘤长度和宽度(以mm计)。在治疗期间，每周测量三次肿瘤体积和体重。停止治疗后，每周至少测量一次肿瘤体积和体重。

评估毒性和终点

不允许肿瘤超过动物总体重的10％。如果动物有两个或更多个肿瘤，则不允许所有肿瘤的总重量超过动物总体重的10％。在实验期结束时或当肿瘤大小接近总体重的10％时，对动物实施安乐死。对表现出严重病态或体重减轻超过20％体重的动物实施安乐死。

测定体内抗肿瘤功效

在治疗开始之前，使肿瘤体积增长至平均150mm³(70-270mm³)，此时向肿瘤的血管供应应该已经很好地建立起来。将具有可接受尺寸范围内的肿瘤的小鼠随机分成7只小鼠的治疗组。口服给药，每日一次，持续3周。对照组仅接受溶媒对照。见图1。

实施例23

对ALK突变体的体外活性

作为N-末端GST-融合蛋白表达的野生型人ALK蛋白的细胞质结构域(氨基酸1058-1620)购自Carna Biosciences有限公司(日本)。突变的ALK蛋白在SF9昆虫细胞中表达，其N末端标签在纯化后被切割。使用来自铂金埃尔默生命科学公司(Perkin Elmer LifeSciences，Waltham，MA)的Lance TR-FRET测定试剂盒评估所有酶的激酶活性。将2.5μL化合物溶液和5μL蛋白质溶液加入黑色低体积384孔微量滴定板中，将其在室温下温和振荡培养30分钟，然后加入2.5μL荧光标记的肽底物和ATP混合物溶液。激酶反应在50mM HEPES(pH7.5)中进行，其中在测定之前加入1mM EGTA、1mM MgCl₂、2mM DTT、0.01％Tween-20。ATP、底物和DMSO的最终浓度分别为100μM、20nM和0.5％。相应地调节不同ALK蛋白的浓度，以使野生型和所有突变的ALK蛋白达到相当的酶活性。对于野生型、F1174L、L1196M、S1206Y、G1269A和G1202R，最终的ALK浓度分别为1nM、1nM、1nM、128nM、2nM和4nM。使反应在黑暗中在室温下以温和振荡进行90分钟，然后加入10μL的、来自制造商的检测缓冲液中的20mM EDTA和2nM Eu-W1024抗磷酸酪氨酸抗体(PT66)混合物溶液，以终止反应并检测肽底物的磷酸化。将最终混合物在黑暗中孵育1小时，然后将板在Tecan Infinite M-1000多功能酶标仪(Tecan，Durham NC)上在320nm的激发波长下读取。在620和665nm处测量发射强度，其中665和620nm之间的强度比对应于肽底物磷酸化。通过用非线性回归将665/620nm的比值与抑制剂浓度拟合成s型剂量-反应曲线(可变斜率)，得到抑制剂的IC₅₀值。结果列于表4中。

表4

应理解，前述实施方案和示例不旨在在任何方面限制本公开的范围，并且本文提出的权利要求旨在涵盖所有实施方案和示例，无论其是否在本文中明确呈现。

本文引用的所有专利和出版物均通过引用整体并入。

Claims (37)

1.一种具有式I的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中：

R^1a和R^1b独立地选自由氢、C_1-6烷基和C_3-6环烷基组成的组；或

R^1a和R^1b与它们所连接的碳原子一起形成3～6元任选取代的环烷基；或

R^1a和R^1b与它们所连接的碳原子一起形成4～6元杂环基；

R^2a和R^2b独立地选自由氢、C_1-6烷基和C_3-6环烷基组成的组；或

R^2a和R^2b与它们所连接的碳原子一起形成3～6元环烷基；或

R^2a和R^2b与它们所连接的碳原子一起形成4～6元杂环基；

R^1b和R^2b合在一起是-X-；

X选自由-CH₂-、-CH₂CH₂-和-CH₂CH₂CH₂-组成的组；

R³选自由氢、C_1-6烷基、C_3-6环烷基和任选取代的4～8元杂环基组成的组；

R⁴选自由氢、C_1-6烷基和C_1-4烷氧基组成的组；

R⁵选自由氢、氟和氯组成的组；

R⁶选自由氢、C_1-6烷基、C_3-6环烷基和4～8元杂环基组成的组；

R⁷选自由氢、-CF₃、-NO₂和-CN组成的组；

E是碳原子并且是双键；或

E是-C(H)-并且是单键；或

E是氮原子并且是单键。

2.如权利要求1所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述化合物具有式II：

3.如权利要求2所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述化合物具有式III：

4.如权利要求1所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述化合物具有式IV：

5.如权利要求1所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述化合物具有式V：

6.如权利要求1-5中的任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^1a和R^1b独立地选自由氢和甲基组成的组。

7.如权利要求1-6中的任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^2a和R^2b独立地选自由氢和甲基组成的组。

8.如权利要求1-7中的任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^1a和R^2a是甲基，并且R^1b和R^2b是氢。

9.如权利要求1-7中的任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R^1a、R^1b、R^2a和R^2b是甲基。

10.如权利要求1所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述化合物具有式VI：

11.如权利要求10所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X是-CH₂CH₂-。

12.如权利要求1-11中的任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R³选自由氢、C_1-4烷基和任选取代的4～8元杂环基组成的组。

13.如权利要求1所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述化合物选自由以下组成的组：

(S)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(3-甲基哌嗪-1-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

(R)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(3-甲基哌嗪-1-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

3-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

(S)-3-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

(R)-3-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

3-((3R,5S)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

3-((3R,5S)-4-乙基-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(2,2,6,6-四甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(1,2,2,6,6-五甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

3-((3R,5S)-3,5-二甲基-4-(甲基-d₂)哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

3-((3R,5S)-3,5-二甲基-4-(甲基-d₃)哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

3-((3R,5S)-3,5-二甲基-4-(甲基-d)哌嗪-1-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

3-((2S,6R)-2,6-二甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-((2S,6R)-1,2,6-三甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈；和

4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈。

14.如权利要求13所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其为4-氟-5-异丙基-2-甲氧基-11-氧代-3-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)-6,11-二氢-5H-吲哚并[2,3-b]喹啉-8-甲腈。

15.一种药物组合物，其包括权利要求1-14中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐或水合物，以及药学上可接受的载体。

16.一种治疗患者的方法，所述方法包括对所述患者施用治疗有效量的权利要求1-14中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述患者患有癌症、慢性自身免疫性病症、炎性病况或增殖性病症。

17.如权利要求16所述的方法，其中所述患者患有癌症。

18.如权利要求17所述的方法，其中所述癌症选自表3的癌症中的任意一种或多种。

19.如权利要求17所述的方法，其中所述癌症选自由间变性大细胞淋巴瘤、非小细胞肺癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、炎性肌纤维母细胞瘤、神经母细胞瘤、未分化甲状腺癌、横纹肌肉瘤、乳腺癌、结直肠癌、食道鳞状细胞癌和肾细胞癌组成的组。

20.如权利要求16-19中任一项所述的方法，其还包括施用治疗有效量的、用于治疗所述疾病或病况的第二治疗剂。

21.如权利要求15所述的药物组合物，其用于治疗癌症、慢性自身免疫性病症、炎性病况或增殖性病症。

22.如权利要求21所述的药物组合物，其用于治疗癌症。

23.如权利要求22所述的药物组合物，其中所述癌症选自表3的癌症中的任意一种或多种。

24.如权利要求22所述的药物组合物，其中所述癌症选自由间变性大细胞淋巴瘤、非小细胞肺癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、炎性肌纤维母细胞瘤、神经母细胞瘤、未分化甲状腺癌、横纹肌肉瘤、乳腺癌、结直肠癌、食道鳞状细胞癌和肾细胞癌组成的组。

25.如权利要求1-14中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗癌症、慢性自身免疫性病症、炎性病况或增殖性病症。

26.如权利要求25所述的化合物，其用于治疗癌症。

27.如权利要求26所述的化合物，其中所述癌症选自表3的癌症中的任意一种或多种。

28.如权利要求26所述的化合物，其中所述癌症选自由间变性大细胞淋巴瘤、非小细胞肺癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、炎性肌纤维母细胞瘤、神经母细胞瘤、未分化甲状腺癌、横纹肌肉瘤、乳腺癌、结直肠癌、食道鳞状细胞癌和肾细胞癌组成的组。

29.如权利要求1-14中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗癌症、慢性自身免疫性病症、炎性病况或增殖性病症的药物中的用途。

30.如权利要求29所述的用途，其用于治疗癌症。

31.如权利要求30所述的用途，其中所述癌症选自表3的癌症中的任意一种或多种。

32.如权利要求30所述的用途，其中所述癌症选自由间变性大细胞淋巴瘤、非小细胞肺癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、炎性肌纤维母细胞瘤、神经母细胞瘤、未分化甲状腺癌、横纹肌肉瘤、乳腺癌、结直肠癌、食道鳞状细胞癌和肾细胞癌组成的组。

33.一种试剂盒，其包括权利要求1-14中的任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及用于对患有癌症、慢性自身免疫性病症、炎性病况或增殖性病症的患者施用所述化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的说明书。

34.如权利要求33所述的试剂盒，其中所述患者患有癌症。

35.如权利要求34所述的试剂盒，其中所述癌症选自表3的癌症中的任意一种或多种。

36.如权利要求34所述的试剂盒，其中所述癌症选自由间变性大细胞淋巴瘤、非小细胞肺癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、炎性肌纤维母细胞瘤、神经母细胞瘤、未分化甲状腺癌、横纹肌肉瘤、乳腺癌、结直肠癌、食道鳞状细胞癌和肾细胞癌组成的组。

37.如权利要求33-36中的任一项所述的试剂盒，其还包括一种或多种另外的治疗剂。