CN110187125B - 一种结核性胸腔积液诊断装置及方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种结核性胸腔积液诊断装置及方法，一种结核性胸腔积液诊断方法，包括以下步骤：S1.利用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测样本中CCL18的含量；S2.判断样本中CCL18的含量是否大于阈值，若大于阈值，则判断为结核性胸腔积液高风险，如检测值小于阈值，则判断为结核性胸腔积液低风险。本发明的装置包括CCL18捕获抗体和检测抗体、稀释液、标准品、显色液、终止液、底物、包被缓冲液和洗涤缓冲液。本发明可以对结核性胸腔积液进行快速、便捷、准确的诊断，使用方便，准确率高。

Description

一种结核性胸腔积液诊断装置及方法
技术领域
本发明涉及结核性诊断方法，具体涉及一种结核性胸腔积液诊断装置及方法。
背景技术
结核病是一种严重危害生命健康的传染病，其患病人群的社会及家庭负担重，尤其在发展中国家其发病率仍居高不下，是我国重点防治的疾病之一，而在结核病高发区，结核性胸膜炎是导致胸腔积液的一个重要病因，因此对结核病及时准确的诊断和彻底治疗，不仅可恢复患者健康，而且是消除传染源、控制结核病流行的最重要措施。目前的共识认为，结核性胸腔积液的确诊方法包括胸腔积液中找到结核分枝杆菌，或者胸膜组织切片发现典型的结核性病理改变形成。但是通常胸腔积液中结核分枝杆菌的数量少，极难通过胸水涂片后抗酸染色检查到，此种诊断检测方法灵敏度极低；而获取胸膜组织切片又属于侵入性操作，存在创伤及相关风险，临床操作有局限性。因此，目前临床上对于结核性胸腔积液的诊断以临床诊断为主，即通过胸水的细胞学检测、腺苷脱氨酶(ADA)含量的检测来辅助诊断，但特异性不够理想，不能完全满足临床需求。因此，临床上亟需针对结核性胸腔积液新的简便易行的诊断方法。
CCL18(CC chemokine ligand 18)是趋化因子CC家族中的一员，对介导免疫反应、激发炎症反应、参与血细胞与血管生成等发挥着重要作用，CCL18能够激活除中性粒细胞外的B淋巴细胞、T淋巴细胞、DC、单核巨噬细胞等的生物学反应，因为结核感染也是一种炎症反应，主要参与细胞是淋巴细胞，因此CCL18也是结核的重要参与因子，在结核性胸腔积液中的含量明显升高，对于结核性胸腔积液的诊断具有良好的临床应用价值。
本发明将提供一种基于CCL18的结核性胸腔积液的诊断试剂材料及装置，以对结核性胸腔积液进行快速、便捷、准确的诊断。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，本发明的目的是提供一种结核性胸腔积液诊断装置及方法。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：
一种结核性胸腔积液诊断方法，包括以下步骤：
S1.利用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测样本中CCL18的含量；
S2.判断样本中CCL18的含量是否大于阈值，若大于阈值，则判断为结核性胸腔积液高风险，如检测值小于阈值，则判断为结核性胸腔积液低风险。
进一步的，所述阈值为80000-11000pg/mL。
进一步的，所述阈值为99151.46pg/mL。
一种结核性胸腔积液诊断装置，包括CCL18捕获抗体和检测抗体、稀释液、标准品、显色液、终止液、底物、包被缓冲液和洗涤缓冲液。
进一步的，所述稀释液包括牛血清白蛋白、硫柳汞和磷酸缓冲液中的任意一种，显色液为辣根过氧化物酶，终止液为稀硫酸溶液。
进一步的，所述底物包括四甲基联苯胺、磷酸枣柠檬酸、双氧水和蒸馏水中的任意一种或多种。
进一步的，包被缓冲液为磷酸盐和碳酸盐溶液中的任意一种或多种。
进一步的，洗涤缓冲液包括磷酸盐、氯化钠、氯化钾、吐温20和蒸馏水中的任意一种或多种。
进一步的，还包括固体载体24孔板和封板膜。
本发明的有益效果为：本发明可以对结核性胸腔积液进行快速、便捷、准确的诊断，使用方便，准确率高。
附图说明
图1为本发明的ROC曲线图。
具体实施方式
以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
一种结核性胸腔积液诊断方法，包括以下步骤：
S1.利用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测样本中CCL18的含量；
S2.判断样本中CCL18的含量是否大于阈值，若大于阈值，则判断为结核性胸腔积液高风险，如检测值小于阈值，则判断为结核性胸腔积液低风险。
作为一种实施方式，所述阈值为80000-11000pg/mL。
作为一种实施方式，所述阈值为99151.46pg/mL。
一种结核性胸腔积液诊断装置，包括CCL18捕获抗体和检测抗体、稀释液、标准品、显色液、终止液、底物、包被缓冲液和洗涤缓冲液。
作为一种实施方式，所述稀释液包括牛血清白蛋白、硫柳汞和磷酸缓冲液中的任意一种，显色液为辣根过氧化物酶，终止液为稀硫酸溶液。
作为一种实施方式，所述底物包括四甲基联苯胺、磷酸枣柠檬酸、双氧水和蒸馏水中的任意一种或多种。
作为一种实施方式，包被缓冲液为磷酸盐和碳酸盐溶液中的任意一种或多种。
作为一种实施方式，洗涤缓冲液包括磷酸盐、氯化钠、氯化钾、吐温20和蒸馏水中的任意一种或多种。
作为一种实施方式，还包括固体载体24孔板和封板膜。
本发明的实验过程如下：
在前期，我们共收集了来自华中科技大学同济医学院附属协和医院呼吸内科患者的5对胸水标本，分别为确诊的肺癌来源的恶性胸腔积液和结核性胸腔积液，对上述5对胸水标本的上清蛋白进行表达测序，结果显示在两组胸水中的含量差异在2倍以上的蛋白共250个，其中在结核性胸腔积液中表达升高的为195个，然后通过查找各差异蛋白与结核的相关文献，及ELISA试剂盒的购买情况，后从中选定了CCL18进行验证试验。然后，我们收集了来自华中科技大学同济医学院附属协和医院呼吸内科患者的20对胸水标本，其中20例为肺癌来源的恶性胸腔积液，均为细胞学或病理性确诊，作为对照组，另外20例为结核性胸腔积液，其中4例为胸膜活检确诊，其他均为临床诊断，作为试验组。将上述20对胸水上清进行CCL18的ELISA检测，具体结果见下表1(其中1为恶性胸腔积液组，2为结核性胸腔积液组)，统计结果见表2，可见结核性胸腔积液中CCL18含量较恶性胸腔积液中明显升高，通过绘制ROC曲线分析数据显示CCL18诊断结核性胸腔积液的阈值定为99151.46时，其敏感性为0.8，特异性为0.7，AUC为0.82，如图1所示，因此我们选定胸水样本中CCL18的检测值大于等于判定阈值99151.46时，判断为结核性胸腔积液，如检测值小于阈值，则不考虑为结核性胸腔积液。
表1
Figure GDA0002487467440000041
Figure GDA0002487467440000051
表2
Figure GDA0002487467440000052
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.CCL18抗体在制备结核性胸腔积液诊断装置上的应用，其特征在于，所述诊断用于区分恶性胸腔积液和结核性胸腔积液，通过双抗体夹心酶联免疫吸附法检测胸水样本中CCL18的含量，判断样本中CCL18的含量是否大于阈值确定样本提供者患有结核性胸腔积液的风险，若CCL18的含量检测值大于阈值，则判断为结核性胸腔积液高风险，如CCL18的含量检测值小于阈值，则判断为结核性胸腔积液低风险。
2.根据权利要求1所述的CCL18抗体在制备结核性胸腔积液诊断装置上的应用，其特征在于，所述阈值为80000-11000pg/ mL。
3.根据权利要求1所述的CCL18抗体在制备结核性胸腔积液诊断装置上的应用，其特征在于，所述阈值为99151.46pg/ mL。
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