CN110179918A - 治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药及制剂和制备方法 - Google Patents

治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药及制剂和制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药，由下列原料药按重量份制成：黄柏（8～12）份，大黄（8～12）份，虎杖（8～12）份，白及（8～12）份，苦参（6～10）份，五倍子（4～8）份，冰片（0.8～1.2）份；同时公开了一种中药凝胶剂，由中药与基质按重量份制成：黄柏（8～12）份，大黄（8～12）份，虎杖（8～12）份，白及（8～12）份，苦参（6～10）份，五倍子（4～8）份，冰片（0.8～1.2）份，甘油（3.0～3.4）份，丙二醇（3.8～4.2）份，卡波姆（0.6～1.0）份，氯甲酚（0.02～0.06）份，纯化水（20～30）份。本发明具有疗效确切且远期效果明显的优点。

Description

治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药及制剂和制备方法
技术领域
本发明涉及中药及中药制剂技术领域，具体涉及一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药、制剂及制备方法。
技术背景
阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂等妇科炎症是育龄妇女的常见病、多发病，发病率约占育龄妇女的60％至80％。目前，有许多西药可用于阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的治疗，但西药的缺陷比较明显，如作用单一，易产生抗药性、刺激性、过敏性，对肝肾等脏器有较大的毒副作用，不适于孕妇或哺乳期妇女使用，对阴道内的有益菌群(如乳酸杆菌)同样具有杀灭作用，易造成阴道内菌群失调，破坏阴道自洁系统等等，有些药物本身可能还有致癌、致畸的潜在危险(如甲硝唑等)。
按中医理论组方的中药复方制剂既可克服化学药的诸多不足，又可发挥化学药无法比拟的多方面的治疗作用(如祛腐生肌、利湿活血等)，可广泛用于细菌、真菌、原虫、衣原体、支原体等致病原所引起的妇科炎症。现代病理学认为，人乳头状瘤病毒、疱疹病毒尤其是Ⅱ型单纯疱疹病毒是宫颈癌的主要诱因之一，而中药对病毒的综合抑制作用要远远好于西药。因此，在治疗妇科炎症方面，开发疗效确切、剂型新颖的纯中药制剂具有广阔的市场前景。然而，纵观目前临床上所使用的治疗妇科炎症的中药制剂，如康妇消炎栓、治糜灵泡腾片等，在治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂等方面均有一定疗效，但总体上品种单一，适应症较窄，剂型陈旧，有些药物因开发时间较早，制备工艺、质量标准均比较落后，剂量偏大，使用不便，且药理基础不扎实，药效指标不完善，有的因基质质量不过关而达不到预期的治疗效果，所有这些都直接影响了中药优势的发挥，削弱了中药在妇科市场上的竞争力。有鉴于此，非常有必要开发既能克服诸多西药之缺陷，又能弥补同类中药之不足的新一代妇科良药，以造福广大妇女。
水溶性凝胶剂是用一些水溶性高分子材料作为基质而制成的一种软膏状制剂，使用方便，起效迅速，便于清洗，与栓剂和泡腾片相比，它不受体温或阴道干湿度的影响，能充盈整个阴道，不留死角。由于是水溶性基质，药物能与阴道黏膜密切接触，释药速度较快，并能在整个阴道和宫颈部位发挥药效。
发明内容
本发明的第一个目的是提供一种疗效确切，远期效果明显的治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药。
为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药，由下列原料药按重量份配制而成：黄柏(8～12)份，大黄(8～12)份，虎杖(8～12)份，白及(8～12)份，苦参(6～10)份，五倍子(4～8)份，冰片(0.8～1.2)份。
进一步地，前述的一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药，其中：由下列原料药按重量份配制而成：黄柏10份，大黄10份，虎杖10份，白及10份，苦参8份，五倍子6份，冰片1份。
通过上述技术方案的实施，本发明的有益效果是：疗效确切，远期效果明显，具有清利湿热、化瘀祛腐、凉血止血之效，用于阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂湿热下注证，症见白带、黄带或赤白相兼，量或多或少，有腥臭味，常伴有外阴搔痒、灼热、小腹坠痛、腰酸膝软等。
本发明的第二个目的是提供一种起效迅速，使用方便，病人的依从性较好的治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药凝胶剂。
为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药凝胶剂，由中药与基质按重量份配制而成：黄柏(8～12)份，大黄(8～12)份，虎杖(8～12)份，白及(8～12)份，苦参(6～10)份，五倍子(4～8)份，冰片(0.8～1.2)份，甘油(3.0～3.4)份，丙二醇(3.8～4.2)份，卡波姆(0.6～1.0)份，氯甲酚(0.02～0.06)份，纯化水(20～30)份。
进一步地，前述的一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药凝胶剂，其中：黄柏10份，大黄10份，虎杖10份，白及10份，苦参8份，五倍子6份，冰片1份，甘油3.2份，丙二醇4份，卡波姆0.8份，氯甲酚0.04份，纯化水25份。
通过上述技术方案的实施，本发明的有益效果是：起效迅速，使用方便，病人的依从性较好，疗效确切，远期效果明显，具有清利湿热、化瘀祛腐、凉血止血之效，用于阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂湿热下注证，症见白带、黄带或赤白相兼，量或多或少，有腥臭味，常伴有外阴搔痒、灼热、小腹坠痛、腰酸膝软等。
本发明的第三个目的是提供一种操作简单的治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药凝胶剂的制备方法。
为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药凝胶剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：中药除冰片外，其余味药经乙醇渗漉提取或水提醇沉处理后，经减压浓缩、喷雾干燥而制得中药干浸膏细粉；并将中药中的冰片研成细粉；
步骤二：将氯甲酚加入温水中溶解，再将卡波姆缓缓加入氯甲酚水溶液中，边加边搅，直至搅成细腻的胶浆；
步骤三：取甘油和丙二醇混合液，加入混合均匀的中药干浸膏细粉及冰片细粉，充分研匀得到药物部分；
步骤四：将步骤三得到的药物部分缓缓加入步骤二得到的胶浆中，搅匀，用pH调节剂调节pH值至6.5，再加水充分搅匀，即得。
进一步地，前述的中药凝胶剂的制备方法，其中：在步骤一中，中药中的黄柏与苦参混合后经浓度为(50～80)％的乙醇渗漉提取，大黄与虎杖混合后经浓度为(70～90)％的乙醇渗漉提取，白及与五倍子混合后经水提醇沉处理，以上三部分乙醇液分别减压浓缩、喷雾干燥，最后混匀，得中药干浸膏细粉。
进一步地，前述的中药凝胶剂的制备方法，其中：pH调节剂为三乙醇胺。
通过上述技术方案的实施，本发明的有益效果是：操作简单方便。
附图说明
图1为本发明的中药凝胶剂对角叉菜胶致大鼠不同时间足肿胀度的影响对比图。
图2为本发明的中药凝胶剂对小鼠不同时间痛阈值的影响对比图。
图3为本发明的中药凝胶剂对实验性大鼠宫颈炎模型白细胞总数及分类的影响对比图。
具体实施方式
为了更好地了解本发明，下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明要求保护的范围并不局限于实施例所表述的范围。
一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药，由下列原料药按重量份配制而成：黄柏(8～12)份，大黄(8～12)份，虎杖(8～12)份，白及(8～12)份，苦参(6～10)份，五倍子(4～8)份，冰片(0.8～1.2)份；最优的重量份比例为：黄柏10份，大黄10份，虎杖10份，白及10份，苦参8份，五倍子6份，冰片1份。
一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药凝胶剂，由中药与基质按重量份配制而成：黄柏(8～12)份，大黄(8～12)份，虎杖(8～12)份，白及(8～12)份，苦参(6～10)份，五倍子(4～8)份，冰片(0.8～1.2)份，甘油(3.0～3.4)份，丙二醇(3.8～4.2)份，卡波姆(0.6～1.0)份，氯甲酚(0.02～0.06)份，纯化水(20～30)份；最优的重量份比例为：黄柏10份，大黄10份，虎杖10份，白及10份，苦参8份，五倍子6份，冰片1份，甘油3.2份，丙二醇4份，卡波姆0.8份，氯甲酚0.04份，纯化水25份。
本品的优点是：疗效确切，远期效果明显，具有清利湿热、化瘀祛腐、凉血止血之效，用于阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂湿热下注证，症见白带、黄带或赤白相兼，量或多或少，有腥臭味，常伴有外阴搔痒、灼热、小腹坠痛、腰酸膝软等。
一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药凝胶剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：中药除冰片外，其余味药经乙醇渗漉提取或水提醇沉处理后，经减压浓缩、喷雾干燥而制得中药干浸膏细粉；并将中药中的冰片研成细粉；
具体的操作如下：将中药中的黄柏与苦参混合后经浓度为(50～80)％的乙醇渗漉提取，大黄与虎杖混合后经浓度为(70～90)％的乙醇渗漉提取，白及与五倍子混合后经水提醇沉处理，以上三部分乙醇液分别减压浓缩、喷雾干燥，最后混匀，得中药干浸膏细粉；
步骤二：将氯甲酚加入70℃的温水中溶解，再将卡波姆缓缓加入氯甲酚水溶液中，边加边搅，直至搅成细腻的胶浆；
步骤三：取甘油和丙二醇混合液，加入混合均匀的中药干浸膏细粉及冰片细粉，充分研匀得到药物部分；
步骤四：将步骤三得到的药物部分缓缓加入步骤二得到的胶浆中，搅匀，用三乙醇胺调节pH值至6.5，再加水充分搅匀，即得中药凝胶剂(相当于中药材的药物含量为200％)。
主要药效学试验
[实验目的]通过主要药效学试验，验证中药凝胶剂与临床功能、主治相关的作用，在本实验中，本发明的中药凝胶剂以“妇舒保”表示。
[实验材料]
(1)药品与试剂
中药提取物由苏州三江新医药科技有限公司制备并提供，批号020808，试验时按制剂量折算。
0.03mol/L PBS，pH7.2。
细胞完全培养基(含10％FCS的RPMI1640)。
维持培养基(含2％FCS的RPMI1640)。
肝浸液培养基。
(2)实验用仪器
A1004电子分析天平 上海分析天平厂。
打孔器 上海仪器厂。
CH-10-A型测厚仪 上海六菱仪器厂。
7550分光光度计 上海惠普分析仪器厂。
恒温水浴锅(四孔) 上海分析仪器厂。
(3)实验用菌株和毒株
标准菌株：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单孢菌、藤黄双球菌、白色念珠菌由卫生部微生物检定所提供。
临床分离菌株：金黄色葡萄球菌、人葡萄球菌、阴沟肠杆菌、产碱杆菌、不动杆菌、枸橼酸肠杆菌、变形杆菌、洋葱假单孢菌、表葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌等由江苏省人民医院微生物室分离、鉴定后提供。
(4)实验用动物和饲料
ICR小鼠、SD大鼠、豚鼠由南京医科大学实验动物中心提供(合格证号：SCXK(苏)2001-0015)。
全价颗粒饲料，由南京江浦振兴实验动物饲料厂提供(合格证号：苏动(饲)字96001)。
(5)实验条件
用药前后实验动物分笼饲养，喂全价颗粒饲料，自由饮水，室温22±2℃，湿度55-65％。
[实验方法和结果]
1、抗炎作用
1.1对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
取ICR小鼠60只，雌雄各半，体重18～22g，随机分6组，每组10只；
(1)空白对照组：等量基质(卡波姆934，下同)，1ml/10g；
(2)醋酸去炎松组：0.025g/kg；
(3)康妇消炎栓组：20g/kg，0.2g/ml，1ml/10g；
(4)妇舒保Ⅰ组：8.5g/kg，0.085g/ml，1ml/10g；
(5)妇舒保Ⅱ组：17g/kg，0.17g/ml，1ml/10g；
(6)妇舒保Ⅲ组：34g/kg，0.34g/ml，1ml/10g；
(试验药物的配制方法：称取一定量卡波姆934，加入适量水中，配成一定浓度的凝胶基质后，加入计算量混合药粉，充分搅匀。下同)
以上各组动物均耳廓给药，给药组与正常组每隔30min给药1次，共给2次，并于第2次给药30min后，将正常对照组和各给药组小鼠右耳两侧涂二甲苯30μl致炎，45min后脱颈椎处死小鼠，剪下左右耳片，用8mm打孔器冲下等面积左右耳片，于电子天平上称重，计算两耳重量差和抑制肿胀率(％)，比较各组间差异，结果见表1。
表1妇舒保对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
实验结果显示：妇舒保34g/kg剂量组能明显减轻二甲苯所致小鼠耳廓肿胀程度，肿胀抑制率为29.94％，与空白对照组比较具有显著性差异。
提示：妇舒保能明显抑制炎症早期毛细血管通透性亢进的作用。
1.2对磷酸组胺所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响
取ICR小鼠60只，雄性，体重18～22g，随机分6组，每组10只。
(1)空白对照组：等量基质，1ml/10g。
(2)醋酸去炎松组：0.025g/kg。
(3)康妇消炎栓组：20g/kg，0.2g/ml，1ml/10g。
(4)妇舒保Ⅰ组：8.5g/kg，0.085g/ml，1ml/10g
(5)妇舒保Ⅱ组：17g/kg，0.17g/ml，1ml/10g
(6)妇舒保Ⅲ组：34g/kg，0.34g/ml，1ml/10g
实验前日，用10％硫化钠溶液脱去各组小鼠背部毛(面积约2×2cm2)。次日将各组动物每隔30min涂药或涂基质一次，第2次涂药30min后，每只小鼠皮内注入0.1％磷酸组胺0.1ml，立即尾静脉注入1％伊文思兰生理盐水溶液0.1ml，30min后处死各组小鼠，剪开背部皮肤，观察各组动物兰斑面积，并用1cm打孔器以兰斑为中心，打下一圆形皮肤，剪碎，用丙酮-生理盐水(7:3)混合液5ml浸泡36h，1500rpm离心10min，取上清液,用7550分光光度计于610nm波长处测定OD值，比较各组间差异，结果见表2。
表2妇舒保对磷酸组胺所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响
实验结果显示：妇舒保17g/kg和34g/kg剂量组能明显降低磷酸组胺所致小鼠皮肤毛细血管通透性亢进的作用，与空白对照组比较具有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)。
提示:妇舒保具有较好的抗炎作用。
1.3对角叉菜胶所致大鼠足肿胀度的影响
取SD大鼠60只，雄性，随机分6组，体重140～160g，每组10只；
(1)空白对照组：等量基质，1ml/10g；
(2)醋酸去炎松组：0.01g/kg；
(3)康妇消炎栓组：14g/kg；
(4)妇舒保Ⅰ组：3.4g/kg；
(5)妇舒保Ⅱ组：6.8g/kg；
(6)妇舒保Ⅲ组：13.6g/kg；
以上各组动物均于实验前日用10％硫化钠溶液脱去背部毛(面积3×5cm2)，次日将各组动物每隔30min涂药或基质一次，并于第2次涂药后30min，各组大鼠右后足皮下注入1％角叉菜胶溶液0.1ml/只，注入前后测量右后足厚度，致炎后分别于1、2、3、4、5，6h测定右后足厚度，计算肿胀值，比较各时间段组间差异，结果见表3和图1。
表3妇舒保对角叉菜胶致大鼠不同时间足肿胀度的影响
与空白对照组比较：*P<0.05**P<0.01
如图1所示，图1为妇舒保对角叉菜胶致大鼠不同时间足肿胀度的影响对比图，实验结果显示：妇舒保3.4g/kg、6.8g/kg和13.6g/kg剂量组对角叉菜胶致大鼠足肿胀有明显的抑制作用，并分别从致炎后1h开始，持续至4h止。
提示：妇舒保有较好的抗炎作用。
2、镇痛作用
选用具有合格痛阈值的ICR小鼠用于实验，体重18～22g，雌性。
2.1热板法
取痛阈值合格小鼠60只，随机分6组，每组10只。
(1)空白对照组：等量基质，1ml/10g；
(2)安痛定组：7.9g/kg；
(3)康妇消炎栓组：20g/kg，0.2g/ml，1ml/10g；
(4)妇舒保Ⅰ组：8.5g/kg，0.085g/ml，1ml/10g；
(5)妇舒保Ⅱ组：17g/kg，0.17g/ml，1ml/10g；
(6)妇舒保Ⅲ组：34g/kg，0.34g/ml，1ml/10g；
实验前日用1％硫化钠溶液脱去小鼠背部毛(面积2×3cm2)，实验当日涂药2次，每次间隔30min，第2次给药后于15min、30min、60min、90min和120min取各组小鼠置恒温水浴箱热板上，测定痛阈值，如60秒无反应，将小鼠取出，以60秒计算，并比较各组间差异，结果见表4和图2。
表4妇舒保对小鼠不同时间痛阈值的影响
与空白对照组比较：*P<0.05**P<0.01
如图2所示，图2为妇舒保凝胶对小鼠不同时间痛阈值的影响对比图，实验结果显示：妇舒保8.5g/kg、17g/kg和34g/kg剂量组分别从15min和30min开始即可明显提高痛阈值，并持续至90min和120min，与空白对照组比较具有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)。
结论：妇舒保具有较好的镇痛作用。
2.2扭体法
取痛阈值合格小鼠60只，随机分6组，每组10只。
(1)空白对照组：等量基质，1ml/10g。
(2)安痛定组：7.9g/kg。
(3)康妇消炎栓组：20g/kg，0.2g/ml，1ml/10g。
(4)妇舒保Ⅰ组：8.5g/kg，0.085g/ml，1ml/10g
(5)妇舒保Ⅱ组：17g/kg，0.17g/ml，1ml/10g
(6)妇舒保Ⅲ组：34g/kg，0.34g/ml，1ml/10g
以上各组动物于实验前日用10％硫化钠溶液脱去小鼠背部毛(面积2×3cm2)，实验当日给药2次，每次间隔30min，第2次给药后30min，各组小鼠均腹腔注入0.5％醋酸0.2ml/只，观察10min内各组动物出现扭体反应次数，计算各组镇痛百分率，结果见表5。
表5妇舒保对醋酸所致小鼠疼痛的影响
与空白对照组比较：*P＜0.05**P＜0.01
实验结果显示：妇舒保8.5g/kg、17g/kg和34g/kg剂量组对醋酸所致小鼠疼痛有明显的抑制作用，并可延长扭体潜伏期，减少扭体次数，镇痛百分率分别为34.7％、40.4％和43.5％，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)。
结论：妇舒保有较好的镇痛作用。
3、体外抑菌作用(二倍稀释法)
3.1增菌培养
取各菌株菌落少许，接种于营养肉汤培养基中，37℃培养18h，取出后用生理盐水稀释至10-5备用。
3.2含药平皿制备
取妇舒保混合药粉20g，加纯化水配成1g/ml的溶液，116℃20min高压灭菌备用；将上述药液按2倍法稀释，加至已融化并保持60℃的营养琼脂培养基中，制成100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.56mg/ml系列浓度含药平皿待用。
另取盐酸环丙沙星适量与融化并保持60℃的营养琼脂培养基混匀，以2倍法稀释，制成64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.0313μg/ml系列浓度含药平皿待用。
3.3体外抗菌活性MIC的测定
在上述系列含药平皿上用6mm钢圈打3个孔，每孔加入含菌量约为10-5CFU/ml的溶液0.1ml，37℃培养18～20h，以无菌生长平皿培养基中所含药物的浓度即为药物对该菌的MIC，结果见表6。
表6妇舒保凝胶对各菌株的MIC
实验结果显示：妇舒保对标准菌株和临床分离菌株——金黄色葡萄球菌、人葡萄球菌、产碱杆菌、枸橼酸肠杆菌、变形杆菌、表葡萄球菌、白色念珠菌等具有较强的抑制作用，MIC在3.125～25mg/ml之间。
结论：妇舒保有较强的体外抑菌作用。
4、对磷酸组胺所致豚鼠致痒阈的影响
取白色豚鼠50只，雌雄各半，体重280～360g，随机分为5组，每组10只。
(1)空白对照组：等量基质，
(2)康妇消炎栓组：14g/kg，1.4g/ml，
(3)妇舒保Ⅰ组：3.4g/kg，
(4)妇舒保Ⅱ组：6.8g/kg，
(5)妇舒保Ⅲ组：13.6g/kg，
以上各组动物于实验前日用10％硫化钠溶液脱去右后足背毛，实验当日用粗砂纸擦伤右后足脱毛处，面积约1.5×1.5cm2，并于擦伤处涂药或基质，每隔30min一次，于第2次涂药后30min，开始在右后足创面处，滴磷酸组胺0.1ml/只，以后每隔3min一次，磷酸组胺浓度依次为0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％的递增浓度，每次均为0.1ml/只，直至出现豚鼠回头舔后足，以最后出现豚鼠回头舔右足时所给予的磷酸组胺量为致痒阈，记录并比较各组间致痒阈，结果见表7。
表7妇舒保对磷酸组胺所致豚鼠致痒阈的影响
与空白对照组比较：*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001
实验结果显示：妇舒保3.4g/kg、6.8g/kg和13.6g/kg剂量组可明显提高磷酸组胺致豚鼠的致痒阈，与空白对照组比较具有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001)。
结论：妇舒保具有较好的止痒作用。
5、妇舒保对实验性大鼠宫颈炎模型的治疗作用
5.1实验性大鼠宫颈炎模型的建立
取苯酚25g，加阿拉伯树胶75g，配成25％苯酚胶浆备用；取SD大鼠足够量，体重180～220g，雌性，用1ml注射器轻轻插入大鼠阴道深处约1cm处，注入25％苯酚胶浆0.1ml，1次/2天，共5次；造模过程中注意观察阴道变化，造模4次后大部分大鼠阴道有白色分泌物，阴道红肿，阴道内充血，继续造模1次后，随机分组，分组前测定白细胞总数及分类。
5.2对实验性大鼠宫颈炎模型的治疗作用
取造模成功大鼠50只，随机分5组，每组10只；未造模大鼠10只作为正常对照组。
(1)正常对照组：等量基质。
(2)模型对照组：等量基质。
(3)康妇消炎栓组：2.2g/kg，2.2g/ml。
(4)妇舒保Ⅰ组：0.34g/kg，
(5)妇舒保Ⅱ组：0.68g/kg，
(6)妇舒保Ⅲ组：1.36g/kg。
以上各组动物用1ml注射器吸取药液或基质注入阴道深部，分2次注入，每次0.1ml/100g，间隔4h，连续给药10d，末次给药后1h，眼球取血测白细胞总数和分类后，立即处死各组大鼠，取阴道至子宫分角处组织，一半称重后，置5mlNS内浸泡1h，1500rpm离心10min，取上清液1ml，加0.5mol/L KOH-甲醇溶液2ml，置50℃水浴中异构化20min，取出后，立即冷却，取1ml加甲醇2ml，于波长278nm处测OD值，计算每克阴道子宫组织中PGE含量；另一半随即放入10％甲醛中浸泡固定，作病理组织学检查，结果见表8和图3。
表8对实验性大鼠宫颈炎模型白细胞总数、分类及PGE含量的影响
与模型对照组比较：*P＜0.05**P＜0.01
与正常对照组比较：△P＜0.05△△P＜0.01
如图3所示，图3为对实验性大鼠宫颈炎模型白细胞总数及分类的影响对比图，实验结果显示：SD大鼠经25％苯酚胶浆阴道注入后，血中白细胞明显升高，与正常对照组比较具有显著性差异(P＜0.05)，提示：造模是成功的。连续采用妇舒保0.68g/kg和1.36g/kg剂量治疗10d后，可明显降低阴道、子宫组织中PGE含量，0.68g/kg和1.36g/kg剂量组可使血中白细胞总数和中性粒细胞明显降低，与模型对照组比较具有显著性差异(P＜0.05)。
病理组织学检查结果表明：
(1)正常对照组大鼠阴道、子宫组织正常；阴道组织表面被覆鳞状上皮完整，无变性、坏死，无溃疡形成，亦无过度增生；固有层内可见疏松结缔组织、平滑肌及骨骼肌，无充血、水肿及炎细胞浸润，外膜亦未见明显异常；子宫内膜上皮、腺体上皮无变性、坏死，亦无过度增生，间质无充血、水肿及急性炎细胞浸润。肌层、浆膜无病变。
(2)模型组所有大鼠阴道组织均呈现轻重不等之急性炎症反应；约1/3标本病变较重，表现为被覆鳞状上皮变性、坏死、脱落，形成溃疡，在溃疡底部可见肉芽组织增生、血管充血及大量中性粒细胞浸润；外膜未见明显异常，所有子宫内膜均有轻重不等之急性炎症反应，其中大部分为中到重度病变，呈现粘膜上皮、腺体上皮变性、坏死，间质充血、水肿及大量急性炎细胞浸润，个别标本之宫腔内有较多炎性渗出物；肌层、浆膜无病变。
(3)康妇消炎栓组的大鼠阴道和子宫内膜总体病变程度远轻于模型组；其中2/5阴道标本基本无病变，其余均为轻度病变；所有子宫内膜均有急性炎症反应，但程度较轻。
(4)妇舒保低剂量组的大鼠阴道病变较模型组略轻，其中2例见中等量白细胞浸润；子宫内膜均有急性炎症反应，多数标本为轻到中度病变，但总体病变程度较模型组轻。
(5)妇舒保中剂量组的大鼠阴道总体病变程度与低剂量组相当；子宫内膜总体病变程度与康妇消炎栓组相当，较模型组轻。
(6)妇舒保高剂量组的阴道和子宫内膜总体病变程度轻于中剂量组，其中2/5阴道标本基本无病变，其余均为轻度病变；所有子宫内膜均有急性炎症反应，但程度较轻，与康妇消炎栓组相当。
上述结果提示，妇舒保对大鼠急性阴道炎、子宫内膜炎有一定治疗作用，其中以中、高剂量组疗效较好，与阳性药康妇消炎栓相当。
本发明的主要药效试验结果如下：
(1)抗炎试验结果表明：妇舒保凝胶34g/kg剂量组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有一定的抑制作用，抑制率为29.9％，与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05)；17g/kg和34g/kg剂量组可明显降低磷酸组胺所致小鼠毛细血管通透性增高的作用，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)；3.4g/kg、6.8g/kg和13.6g/kg剂量组自给药1h至4h后对角叉菜胶致大鼠足肿胀有明显的抑制作用，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)；
结论：妇舒保对二甲苯、磷酸组胺和角叉菜胶致炎均有较好的抗炎作用。
(2)镇痛试验结果表明：采用热板法，妇舒保凝胶8.5g/kg、17g/kg、34g/kg剂量组可明显提高小鼠痛阈值，而且镇痛作用维持时间长，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)；采用扭体法，妇舒保凝胶8.5g/kg、17g/kg、34g/kg剂量组对醋酸所致疼痛有明显的抑制作用，可使扭体次数减少，扭体潜伏期延长，镇痛百分率分别为34.7％、40.4％和43.5％，与空白对照组比较具有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)；
结论：妇舒保具有较强的镇痛作用。
(3)体外抑菌试验结果表明：妇舒保凝胶对标准和临床分离金黄色葡萄球菌、人葡萄球菌、产碱杆菌、白色念珠菌、表葡萄球菌等具有较强的抑菌作用，MIC在3.125～25mg/ml之间。
结论：妇舒保具有较好的体外抑菌作用。
(4)止痒试验结果表明：妇舒保凝胶3.4g/kg、6.8g/kg和13.6g/kg剂量组可明显提高磷酸组胺致豚鼠的致痒阈，与模型组比较具有显著性差异(P＜0.01，P＜0.001)；
结论：妇舒保具有较好的止痒作用。
(5)对实验性大鼠宫颈炎模型的治疗结果表明：妇舒保凝胶0.68g/kg和1.36g/kg剂量组对25％苯酚胶浆所致实验性大鼠宫颈炎模型，经阴道给药10天，可明显降低子宫和阴道组织中PGE含量，与模型组比较具有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)；白细胞总数和中性粒细胞显著降低，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)；病理组织学检查结果也表明，妇舒保凝胶对大鼠急性阴道炎、子宫内膜炎有较好的治疗作用，其中以中剂量和高剂量组疗效更好。

Claims (7)

1.一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药，其特征在于：由下列原料药按重量份配制而成：黄柏（8～12）份，大黄（8～12）份，虎杖（8～12）份，白及（8～12）份，苦参（6～10）份，五倍子（4～8）份，冰片（0.8～1.2）份。
2.根据权利要求1所述的一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药，其特征在于：由下列原料药按重量份配制而成：黄柏10份，大黄10份，虎杖10份，白及10份，苦参8份，五倍子6份，冰片1份。
3.一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药凝胶剂，其特征在于：由权利要求1所述的中药与基质按重量份配制而成：黄柏（8～12）份，大黄（8～12）份，虎杖（8～12）份，白及（8～12）份，苦参（6～10）份，五倍子（4～8）份，冰片（0.8～1.2）份，甘油（3.0～3.4）份，丙二醇（3.8～4.2）份，卡波姆（0.6～1.0）份，氯甲酚（0.02～0.06）份，纯化水（20～30）份。
4.根据权利要求3所述的一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药凝胶剂，其特征在于：黄柏10份，大黄10份，虎杖10份，白及10份，苦参8份，五倍子6份，冰片1份，甘油3.2份，丙二醇4份，卡波姆0.8份，氯甲酚0.04份，纯化水25份。
5.如权利要求3或4所述的一种治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂的中药凝胶剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：中药除冰片外，其余药味经乙醇渗漉提取或水提醇沉处理后，经减压浓缩、喷雾干燥而制得中药干浸膏细粉；并将中药中的冰片研成细粉；
步骤二：将氯甲酚加入温水中溶解，再将卡波姆缓缓加入氯甲酚水溶液中，边加边搅，直至搅成细腻的胶浆；
步骤三：取甘油和丙二醇混合液，加入混合均匀的中药干浸膏细粉及冰片细粉，充分研匀得到药物部分；
步骤四：将步骤三得到的药物部分缓缓加入步骤二得到的胶浆中，搅匀，用pH调节剂调节pH值至6.5，再加水充分搅匀，即得。
6.根据权利要求5所述的中药凝胶剂的制备方法，其特征在于：在步骤一中，中药中的黄柏与苦参混合后经浓度为（50～80）%的乙醇渗漉提取，大黄与虎杖混合后经浓度为（70～90）%的乙醇渗漉提取，白及与五倍子混合后经水提醇沉处理，以上三部分乙醇液分别减压浓缩、喷雾干燥，最后混匀，得中药干浸膏细粉。
7.根据权利要求5所述的中药凝胶剂的制备方法，其特征在于：pH调节剂为三乙醇胺。
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