CN110149947B - 一种烟草田间抗蓟马性状的筛选研究方法 - Google Patents

Abstract

一种烟草田间抗蓟马性状的筛选研究方法，本发明的方法包括以下步骤：1)选材；2)样地播种；3)数据统计；4)数据分析；5)计算烟草蓟马的发病指数，得到各品种烟草对蓟马抗虫性的抗性筛选类别。本发明是通过田间烟草田间自然感蓟马状态下进行，与传统接虫试验相比，更能体现出自然状态下烟草不同类型和品种的抗蓟马性状，同时也更容易受到自然环境的影响。本发明可为将来蓟马严重发生地区烟草生产上大面积的推广提供理论依据。

Description

一种烟草田间抗蓟马性状的筛选研究方法

技术领域

本发明涉及烟草害虫综合治理技术领域，具体涉及一种烟草抗蓟马性状筛选研究方法。

背景技术

烟草作为云南省重要的经济作物，面积和总产量均居全国首位。虫害的发生严重影响其 的质量和产量，进而影响烟草种植户的经济收入。其中蓟马是为害烟草的重要害虫之一。蓟 马是缨翅目(Thysanoptera)昆虫的统称，除直接取食对烟草造成危害之外，蓟马还能高效传 播多种植物病毒。传毒所造成的经济损失远远大于直接取食造成的危害，严重威胁烟叶生产。

目前世界已报道蓟马种类约为7700余种，我国对蓟马的调查和研究起步较晚，报道较少， 仅记载有157属570余种。据统计，害虫类蓟马约占已记录蓟马种类的1％，且多为植食性， 其中90％属锯尾亚目的蓟马科。

自20世纪70年代以来，在我国许多地区不断有蓟马严重为害的报道。蓟马可通过直接 取食对作物造成为害，且1、2龄若虫及成虫均可取食为害作物，取食时蓟马用其未退化的左 上颚在植物表面锉一个缺口，然后使用成对的下颚针插入植物组织内吸取植物的汁液，从而 危害植物叶、茎、花、蕾和果，并留下取食痕迹，如银白色的斑点或下凹的小斑。蓟马的寄 主种类非常广泛，多达千余种，涉及花卉、果蔬、茶树和粮食作物等。

此外最重要的，许多蓟马通常能够携带并传播多种病毒，对作物造成十分严重的病害威 胁。据不完全统计，至少有18种植物病毒能够由蓟马传播，主要包括番茄斑萎病毒属Tospo virus、玉米褪绿斑驳病毒属Machlomo virus、香石竹斑驳病毒属Carmo virus和等轴不稳环斑病 毒属Ilar virus等的病毒。其中由蓟马所传播的番茄斑萎病毒属的番茄斑萎病毒TSWV对作物的 危害最大。据统计，全球每年因TSWV造成的经济损失高达10亿美元。美国在1996-2006年间， 因该病毒造成了超过14亿美元的经济损失，且番茄斑萎病毒是影响烟草生产的重要病毒之一。

近年来，随着人们生活水平的提高，对烟草生产过程中品质要求越来越高，但蓟马类害 虫的为害长期制约着烟草的种植。通过本发明的田间烟草种植中的蓟马类群的田间抗性鉴定 方法研究，为烟草的抗蓟马类害虫的选育和推广提供科学依据。

发明内容

本发明的目的在于提供一种烟草田间抗蓟马性状的筛选研究方法，解决使用化学杀虫剂 在杀死害虫的同时，也杀死了害虫的天敌，造成生态平衡的破坏和环境的污染问题。

为解决上述的技术问题，本发明采用以下技术方案实现。

一种烟草田间抗蓟马性状的筛选研究方法，本发明的方法包括以下步骤：1)选材；2) 样地播种；3)数据统计；4)数据分析；5)计算烟草蓟马的发病指数，得到各品种烟草对蓟马抗虫性的抗性筛选类别。

进一步为，本发明步骤1)选材，具体为：供试烟草品种由烟草公司提供；

进一步为，本发明步骤2)样地播种，具体为：每个烟草品种为1个处理，每处理3次重复， 每个重复小区种植120株烟草，分为8行，株间距0.8m，行间距1.3m，处理面积为30m²；

进一步为，本发明步骤3)数据统计，具体为：对烟草进行五点取样法调查，每个品种 调查15株，每15天调查一次；在烟草的生育期：返苗期、伸根期、旺长期和成熟期四个时期；记录各生育期成若虫的种群数量、各被害等级株数、受蓟马为害烟草株数(受害株数)、烟草病毒病发病率；

进一步为，本发明步骤4)数据分析，具体为：使用Sigmaplot 11.0作图、使用SAS8.0 进行数据分析；

进一步为，本发明步骤4)数据分析，包括烟草苗期数据分析和烟草花期数据分析两部 分；

进一步为，本发明所述的烟草苗期数据分析具体为，包含以下步骤：

烟草苗期数据分析步骤为：根据步骤3)所得数据，即根据各生育期调查得到的生育期 成若虫的种群数量，计算出单位叶面积内的蓟马种群数量，根据烟草苗期抗性性状分析参数， 至步骤5)；

进一步为，本发明所述的烟草花期数据分析具体为，包含以下步骤：

烟草花期数据分析步骤为：根据步骤3)所得数据，即根据各生育期调查得到的生育期 成若虫的种群数量，即每朵花朵上的蓟马种群数量，计算出烟草花期蓟马的发病指数；至步 骤5)；

进一步为，本发明所述的烟草苗期抗性性状分析参数为，对烟草上的蓟马若虫和成虫的 数量以每100cm²叶片为单位分别进行统计，设置5个等级被害等级，采用5级划分：0级， 0头蓟马；1级，1-10头蓟马；2级，11-30头蓟马；3级，31-50头蓟马；4级，51-150头 蓟马；5级，大于150头蓟马；

进一步为，本发明所述的烟草花期抗性性状分析参数为，对烟草上的蓟马若虫和成虫的 数量以每朵花叶片为单位分别进行统计，设置5个等级被害等级，采用5级划分：0级，0 头蓟马；1级，1-5头蓟马；2级，6-20头蓟马；3级，21-40头蓟马；4级，41-100头蓟 马；5级，大于100头蓟马；

进一步为，本发明步骤5)具体为：计算发病指数；发病指数采用如下公式：

发病指数＝∑(被害等级×该等级株数)/(调查总株数×5)×100％；

进一步为，本发明步骤5)根据发病指数多少换算为害级别，根据为害级别确立各品种 烟草对蓟马抗虫性的抗性筛选类别：高抗(HR)害虫的为0级和1级；抗(R)害虫的为2级；中抗(MR)害虫的为3级；感(S)害虫的为4级；高感(HS)害虫的为5级。

蓟马是烟草大部分病毒病如烟草重要病毒烟草花叶病毒的传播媒介，所以发病指数能一 定程度上反应烟草对蓟马的抗性能力，但有不能完全反应，有些细菌性和真菌性病害不是由 蓟马传播的，但蓟马为害后的伤口等促进细菌性和真菌性病害的传播，所以在烟草田间抗蓟 马性状的筛选时分两个层次：1)依靠上述的发病指数来确立各品种烟草对蓟马抗虫性的抗性 筛选类别；2)在1)的基础上，增加步骤3中的烟草病毒病发病率；采用二者集合的方式来 确立更加准确。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明是通过田间烟草田间自然感蓟马状态下 进行，与传统接虫试验相比，更能体现出自然状态下烟草不同类型和品种的抗蓟马性状，同 时也更容易受到自然环境的影响。传统接虫试验测试抗蓟马性状一般需要记录其烟草叶片受 害面积和烟草植株受病毒感染率，但在自然田间状态下，记录其叶片受害面积难度较大，而 采用直接针对花朵中蓟马的种群密度进行调查、分析的方式；成熟期的烟草以花朵中蓟马的 种群密度抗感的方式来分析烟草的抗蓟马性状。考虑到田间烟草抗蓟马性状鉴定试验易受环 境、气候、统计方法等因素的影响，因此，需要对本发明中抗蓟马性状较好的品种进行不同 地区连年抗性重复鉴定，更好地检测和筛选抗性品种，以获得更准确客观的结果，本发明可 为将来蓟马严重发生地区烟草生产上大面积的推广提供理论依据。

附图说明

图1为不同烟草品种的苗期花叶指数说明图；

图2为烟草发病指数与蓟马为害级别的相关性说明图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发 明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用 于限定本发明。

一种烟草田间抗蓟马性状的筛选研究方法，本发明的方法包括以下步骤：1)选材；2) 样地播种；3)数据统计；4)数据分析；5)计算烟草蓟马的发病指数，得到各品种烟草对蓟马抗虫性的抗性筛选类别。

进一步为，本发明步骤1)选材，具体为：供试烟草品种由云南省文山市烟草公司提供， 所选品种分别是MSK326、云烟100、巴斯玛1号、云烟97、云烟317、MS云烟85、红花大金元、 MS云烟87；

进一步为，本发明步骤2)样地播种，具体为：在云南省丘北县普者黑村。每个烟草品种 为1个处理，每处理3次重复，每个重复小区种植120株烟草，分为8行，株间距0.8m，行间距 1.3m，处理面积为30m²，烟草播种时间为2017年4月8日。

进一步为，本发明步骤3)数据统计，具体为：对烟草进行五点取样法调查，每个品种 调查15株，每15天调查一次；在烟草的生育期：返苗期、伸根期、旺长期和成熟期四个时期；记录各生育期成若虫的种群数量、各被害等级株数、受蓟马为害烟草株数(受害株数)、烟草病毒病发病率；

进一步为，本发明步骤4)数据分析，具体为：使用Sigmaplot 11.0作图、使用SAS8.0 进行数据分析。

进一步为，本发明步骤4)数据分析，包括烟草苗期数据分析和烟草花期数据分析两部 分。

进一步为，本发明所述的烟草苗期数据分析具体为，包含以下步骤：

烟草苗期数据分析步骤为：根据步骤3)所得数据，即根据各生育期调查得到的生育期 成若虫的种群数量，计算出单位叶面积内的蓟马种群数量，根据烟草苗期抗性性状分析参数， 至步骤5)。

进一步为，本发明所述的烟草花期数据分析具体为，包含以下步骤：

烟草花期数据分析步骤为：根据步骤3)所得数据，即根据各生育期调查得到的生育期 成若虫的种群数量，即每朵花朵上的蓟马种群数量，计算出烟草花期蓟马的发病指数；至步 骤5)。

进一步为，本发明所述的烟草苗期抗性性状分析参数为，对烟草上的蓟马若虫和成虫的 数量以每100cm²叶片为单位分别进行统计，设置5个等级被害等级，采用5级划分：0级， 0头蓟马；1级，1-10头蓟马；2级，11-30头蓟马；3级，31-50头蓟马；4级，51-150头 蓟马；5级，大于150头蓟马。

进一步为，本发明所述的烟草花期抗性性状分析参数为，对烟草上的蓟马若虫和成虫的 数量以每朵花叶片为单位分别进行统计，设置5个等级被害等级，采用5级划分：0级，0 头蓟马；1级，1-5头蓟马；2级，6-20头蓟马；3级，21-40头蓟马；4级，41-100头蓟 马；5级，大于100头蓟马。

进一步为，本发明步骤5)具体为：计算发病指数；发病指数采用如下公式：

发病指数＝∑(被害等级×该等级株数)/(调查总株数×5)×100％；

进一步为，本发明步骤5)根据发病指数多少换算为害级别，根据为害级别确立各品种 烟草对蓟马抗虫性的抗性筛选类别：高抗(HR)害虫的为0级和1级；抗(R)害虫的为2级；中抗(MR)害虫的为3级；感(S)害虫的为4级；高感(HS)害虫的为5级。

表1不同烟草品种苗期抗蓟马性状表

Table 1Resistance to Thrips of Different tobacco Varieties atSeedling Stage

注：表中数据为平均值±标准误。表中HR代表高抗，R代表抗，MR代表中抗，S代表感虫，HS代表高感。同列不同小写字母分别表示经Tukey’s HSD法检验在不同单色系菊花品种间和不同双色系菊花品种间差异显著(P<0.05)。

Note:The data in the figure are mean±SE.HR stands for highresistance,R stands for resistance,MR stands for neutral resistance,S standsfor susceptibility,HS stands for high susceptibility.Different lowercaseletters in the same column indicate significant difference the number ofthrips among different tobacco varieties by Tukey’s HSD test(P<0.05).

不同品种烟草苗期蓟马种群数量差异显著(F＝28.66，P<0.05)，其中MSK326和云烟100 的蓟马种群数量最低，分别为4.25和4.88头，红花大金元和MS云烟87上的蓟马种群数量 最高，分别为41.65和52.26头(表1)。

烟草苗期蓟马抗性评价为高抗的品种有2个，分别MSK326和云烟云烟100(表1)；评价为抗的品种有4个，分别是巴斯玛1号、云烟97、云烟317、MS云烟85(表1)；评价 为中抗的品种有1个，分别为红花大金元；评价为感的品种有1个为MS云烟87(表1)。

表2不同烟草品花期抗蓟马性状表

Table 2Resistance to Thrips of Different tobacco Varieties atflowering Stage

注：表中数据为平均值±标准误。表中HR代表高抗，R代表抗，MR代表中抗，S代表感虫，HS代表高感。同列不同小写字母分别表示经Tukey’s HSD法检验在不同单色系菊花品种间和不同双色系菊花品种间差异显著(P<0.05)。

Note:The data in the figure are mean±SE.HR stands for highresistance,R stands for resistance,MR stands for neutral resistance,S standsfor susceptibility,HS stands for high susceptibility.Different lowercaseletters in the same column indicate significant difference the number ofthrips among different tobacco varieties by Tukey’s HSD test(P<0.05).

不同品种烟草苗期蓟马种群数量差异显著(F＝14.28，P<0.05)，其中花期的MSK326、 MS云烟85和云烟100上蓟马种群数量最低，分别为3.44、5.23和5.66头，红花大金元和 MS云烟87上的蓟马种群数量最高，分别为20.56和22.56头(表2)。

烟草开花期蓟马抗性评价为高抗的品种有3个，分别MSK326、MS云烟85和云烟100(表 2)；评价为抗的品种有3个，分别是巴斯玛1号、云烟97、云烟317(表2)；评价为中抗 的品种有1个，分别为红花大金元；评价为感的品种有1个为MS云烟87(表2)。

不同烟草品种发病指数见图1。由图1可以看出，花叶指数小于20％的品种有3个，分 别为MSK326、MS云烟85、云烟100，花叶指数分别为13.66％、15.82％、15.97％；花叶 指数介于20％～29％的有5个，分别为巴斯玛1号、云烟97、云烟317、红花大金元、MS 云烟87，花叶指数分别为20.01％、21.12％、23.29％、24.88％、29.66％。红花大金元和MS 云烟87的发病指数最高，显著高于MSK326、MS云烟85、云烟100、云烟97和云烟317， MSK326和MS云烟85的发病指数最低(P＝0.015)。

将烟草发病指数及蓟马为害级别两者进行相关性检验(图2)，分析结果显示二者相关 性极为显著(P＝0.032)，R＝0.95，说明烟草发病指数可以作为烟草抗蓟马性状鉴定的参考 指标。经上述具体实验数据证实，本发明可为将来蓟马严重发生地区烟草生产上大面积的推 广提供理论依据。

以上所述的仅是本发明的部分具体实施例，方案中公知的具体内容或常识在此未作过多 描述。应当指出，上述实施例不以任何方式限制本发明，对于本领域的技术人员来说，凡是 采用等同替换或等效变换的方式获得的技术方案均落在本发明的保护范围内。本申请要求的 保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利 要求的内容。

Claims (5)

1.一种烟草田间抗蓟马性状的筛选研究方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1）选材：供试烟草品种由烟草公司提供；

2）样地播种：每个烟草品种为1个处理，每处理3次重复，每个重复小区种植120株烟草，分为8行，株间距0.8m，行间距1.3m，处理面积为30 m²；

3）数据统计：对烟草进行五点取样法调查，每个品种调查15株，每15天调查一次；在烟草的生育期：返苗期、伸根期、旺长期和成熟期四个时期；记录各生育期成若虫的种群数量、各被害等级株数、受蓟马为害烟草株数、烟草病毒病发病率；

4）数据分析：使用Sigmaplot 11.0 作图、使用SAS 8.0进行数据分析；步骤4）数据分析包括烟草苗期数据分析和烟草花期数据分析两部分；所述的烟草苗期数据分析具体为，包含以下步骤：烟草苗期数据分析步骤为：根据步骤3）所得数据，即根据各生育期调查得到的生育期成若虫的种群数量，计算出单位叶面积内的蓟马种群数量和烟草苗期抗性性状分析参数，至步骤5）；所述的烟草花期数据分析具体为，包含以下步骤：烟草花期数据分析步骤为：根据步骤3）所得数据，即根据各生育期调查得到的生育期成若虫的种群数量，即每朵花朵上的蓟马种群数量，烟草花期抗性性状分析参数，计算出烟草花期蓟马的发病指数；至步骤5）；

5）计算烟草蓟马的发病指数，得到各品种烟草对蓟马抗虫性的抗性筛选类别。

2.根据权利要求1所述的一种烟草田间抗蓟马性状的筛选研究方法，其特征在于，所述的烟草苗期抗性性状分析参数为，对烟草上的蓟马若虫和成虫的数量以每100 cm²叶片为单位分别进行统计，设置5 个等级被害等级，采用5级划分：0级，0头蓟马；1级，1-10头蓟马；2 级，11-30 头蓟马；3 级，31-50 头蓟马；4 级，51-150 头蓟马；5级，大于150 头蓟马。

3.根据权利要求1所述的一种烟草田间抗蓟马性状的筛选研究方法，其特征在于，所述的烟草花期抗性性状分析参数为，对烟草上的蓟马若虫和成虫的数量以每朵花叶片为单位分别进行统计，设置 5 个等级被害等级，采用5级划分：0级，0头蓟马；1级，1-5头蓟马；2级，6-20 头蓟马；3 级，21-40 头蓟马；4 级，41-100 头蓟马；5级，大于100 头蓟马。

4.根据权利要求1所述的一种烟草田间抗蓟马性状的筛选研究方法，其特征在于，步骤5）具体为：计算发病指数；发病指数采用如下公式：

发病指数 = ∑(被害等级×该等级株数）/（调查总株数 × 5）× 100%。

5.根据权利要求1所述的一种烟草田间抗蓟马性状的筛选研究方法，其特征在于，根据发病指数多少换算为害级别，根据为害级别确立各品种烟草对蓟马抗虫性的抗性筛选类别：高抗害虫的为0级和1级；抗害虫的为2级；中抗害虫的为3级；感害虫的为4级；高感害虫的为5级。

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