CN110105444A - 一种可控分子量鱼胶原蛋白的制备方法 - Google Patents

一种可控分子量鱼胶原蛋白的制备方法 Download PDF

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陈毅明
赵佩霞
张鹏
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刘春巧
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    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/78Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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Abstract

本发明涉及一种可控分子量鱼胶原蛋白的制备方法,以鱼皮为原料,采用反应分离耦合,将符合分子量要求的胶原肽移出,大分子胶原循环反应,进一步降解。应用本方法生产鱼胶原蛋白既能达到控制分子量的目的,又可提高酶利用效率。

Description

一种可控分子量鱼胶原蛋白的制备方法
技术领域
本发明涉及胶原蛋白生产领域,特别是指一种可控分子量鱼胶原蛋白的制备方法。
背景技术
胶原蛋白以其在医药、保健品和化妆品等应用上的独特功效被越来越多的消费者所青睐,全球需求量非常高。
鱼类废弃物用于生产胶原蛋白逐渐受到人们的关注,相较于动物胶原,其优势十分明显。首先,鱼类胶原蛋白原料来源广,价格低廉;其次,安全性较哺乳动物更高;
目前,从鱼皮中提取胶原蛋白的研究很多,一般工艺都包括原料的处理、酶解、过滤、浓缩和喷雾干燥等步骤。目前国内普遍是酶解完成后进行高温(90℃)灭酶的工艺,使酶失活,存在酶利用效率低、分子量控制不好等问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种可控分子量鱼胶原蛋白的制备方法,以鱼皮为原料,采用反应分离耦合,将符合分子量要求的胶原肽移出,大分子胶原循环反应,进一步降解。既达到控制分子量的目的,又能提高酶的利用效率。通过纳滤浓缩将500分子量以下的小分子移除,使胶原肽产品分子量范围更符合要求。
为解决上述技术问题,本发明采用下述技术方案,
一种可控分子量鱼胶原蛋白的制备方法,包括如下步骤 :
a、原料预处理:将鱼皮除杂清洗后粉碎,备用;所述鱼皮为河豚鱼皮;
b、酶解:在100份水中加入40-60份步骤a得到的鱼皮、0.2-0.6份的蛋白酶,于 40-60℃酶解30-60分钟,得到鱼皮胶原蛋白部分水解液 ;所述蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照1:1的质量比混合而成。
c、反应分离耦合:采用截留分子量为8000Da的超滤设备进行反应分离耦合,将步骤b得到的鱼皮胶原蛋白部分水解液中符合分子量要求的胶原肽移出,得到鱼皮胶原肽溶液,大分子胶原循环反应,进一步降解;并按超滤的出液速度添加等量的水;
d、补料:每间隔20-40分钟补加10-20份的的鱼皮继续反应分离耦合,重复3-5次;
e、反应终止:补料完成后停止加水,暂停超滤,继续反应30-60分钟,然后继续超滤,得到鱼皮胶原肽溶液和残渣;
f、纳滤浓缩:用分子量为500Da的纳滤膜去除步骤c得到鱼皮胶原肽溶液中的小分子杂质并浓缩,得到鱼皮胶原肽浓缩溶液;
g、脱色脱腥:在步骤f获得的鱼皮胶原肽浓缩溶液中加入鱼皮重量 1-4%的活性炭,搅拌20-60分钟,进行脱色脱腥,过滤得到鱼皮胶原肽滤液;
h、喷雾干燥:喷雾干燥鱼皮胶原肽浓缩溶液,得到鱼皮胶原肽粉末。
与现有从鱼皮中提取胶原蛋白的技术相比,本发明具有如下优点:
1、采用截留分子量为8000Da的超滤设备进行反应分离耦合,既获得了符合分子量要求的胶原蛋白,又达到提高酶利用效率的目的。
2、通过纳滤浓缩将500分子量以下的小分子移除,使胶原肽产品分子量范围更符合要求。
下面结合具体实施方式,进一步说明本发明。
实施例1
a、原料预处理:将鱼皮除杂清洗后粉碎,备用;所述鱼皮为河豚鱼皮;
b、酶解:在100份水中加入40份步骤a得到的鱼皮、0.6份的蛋白酶,于60℃酶解30分钟,得到鱼皮胶原蛋白部分水解液 ;所述蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照1:1的质量比混合而成。
c、反应分离耦合:采用截留分子量为8000Da的超滤设备进行反应分离耦合,将步骤b得到的鱼皮胶原蛋白部分水解液中符合分子量要求的胶原肽移出,得到鱼皮胶原肽溶液,大分子胶原循环反应,进一步降解;并按超滤的出液速度添加等量的水;
d、补料:每间隔20分钟补加12份的的鱼皮继续反应分离耦合,重复5次;
e、反应终止:补料完成后停止加水,暂停超滤,继续反应30分钟,然后继续超滤,得到鱼皮胶原肽溶液和残渣;
f、纳滤浓缩:用分子量为500Da的纳滤膜去除步骤c得到鱼皮胶原肽溶液中的小分子杂质并浓缩,得到鱼皮胶原肽浓缩溶液;
g、脱色脱腥:在步骤f获得的鱼皮胶原肽浓缩溶液中加入鱼皮重量 2%的活性炭,搅拌30分钟,进行脱色脱腥,过滤得到鱼皮胶原肽滤液;
h、喷雾干燥:喷雾干燥鱼皮胶原肽浓缩溶液,得到河豚鱼皮胶原肽粉末。
实施例2
a、原料预处理:将鱼皮除杂清洗后粉碎,备用;所述鱼皮为河豚鱼皮;
b、酶解:在100份水中加入50份步骤a得到的鱼皮、0.4份的蛋白酶,于 55℃酶解40分钟,得到鱼皮胶原蛋白部分水解液 ;所述蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照1:1的质量比混合而成。
c、反应分离耦合:采用截留分子量为8000Da的超滤设备进行反应分离耦合,将步骤b得到的鱼皮胶原蛋白部分水解液中符合分子量要求的胶原肽移出,得到鱼皮胶原肽溶液,大分子胶原循环反应,进一步降解;并按超滤的出液速度添加等量的水;
d、补料:每间隔30分钟补加18份的的鱼皮继续反应分离耦合,重复3次;
e、反应终止:补料完成后停止加水,暂停超滤,继续反应40分钟,然后继续超滤,得到鱼皮胶原肽溶液和残渣;
f、纳滤浓缩:用分子量为500Da的纳滤膜去除步骤c得到鱼皮胶原肽溶液中的小分子杂质并浓缩,得到鱼皮胶原肽浓缩溶液;
g、脱色脱腥:在步骤f获得的鱼皮胶原肽浓缩溶液中加入鱼皮重量 3%的活性炭,搅拌20分钟,进行脱色脱腥,过滤得到鱼皮胶原肽滤液;
h、喷雾干燥:喷雾干燥鱼皮胶原肽浓缩溶液,得到河豚鱼皮胶原肽粉末。

Claims (3)

1.一种可控分子量鱼胶原蛋白的制备方法,包括如下步骤 :
a、原料预处理:将鱼皮除杂清洗后粉碎,备用;所述鱼皮为河豚鱼皮;
b、酶解:在100份水中加入40-60份步骤a得到的鱼皮、0.2-0.6份的蛋白酶,于 40-60℃酶解30-60分钟,得到鱼皮胶原蛋白部分水解液 ;所述蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照1:1的质量比混合而成;
c、反应分离耦合:采用截留分子量为8000Da的超滤设备进行反应分离耦合,将步骤b得到的鱼皮胶原蛋白部分水解液中符合分子量要求的胶原肽移出,得到鱼皮胶原肽溶液,大分子胶原循环反应,进一步降解;并按超滤的出液速度添加等量的水;
d、补料:每间隔20-40分钟补加10-20份的的鱼皮继续反应分离耦合,重复3-5次;
e、反应终止:补料完成后停止加水,暂停超滤,继续反应30-60分钟,然后继续超滤,得到鱼皮胶原肽溶液和残渣;
f、纳滤浓缩:用分子量为500Da的纳滤膜去除步骤c得到鱼皮胶原肽溶液中的小分子杂质并浓缩,得到鱼皮胶原肽浓缩溶液;
g、脱色脱腥:在步骤f获得的鱼皮胶原肽浓缩溶液中加入鱼皮重量 1-4%的活性炭,搅拌20-60分钟,进行脱色脱腥,过滤得到鱼皮胶原肽滤液;
h、喷雾干燥:喷雾干燥鱼皮胶原肽浓缩溶液,得到鱼皮胶原肽粉末。
2.根据权利要求 1 所述的方法,其特征在于,所述的鱼皮为河豚鱼皮。
3.根据权利要求 1 所述的方法,其特征在于,所述步骤(c)中所使用的超滤膜截留分子量为8000D、膜压力为 0.5-1 MPa,工作温度为 25-40℃。
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