CN110100672B - 一种快速生产水稻光温敏不育系原种的方法 - Google Patents

Abstract

本申请公开了一种快速生产水稻光温敏不育系原种的方法。本申请提供的方法，可以缩短生产年限、加快原种生产速度，只需通过一年不同地域的两季生产鉴定，即可生产出水稻温敏不育系株行代原种。可以快速稳定不育系的农艺性状和保持不育起点温度的一致，获得典型性状和农艺性状以及不育起点温度整齐一致的水稻光温敏不育系株行代原种种子。

Description

一种快速生产水稻光温敏不育系原种的方法

技术领域

本申请涉及杂交水稻种子生产技术领域，特别是涉及一种快速生产水稻光温敏不育系原种的方法。

背景技术

20世纪90年代，两系杂交水稻研制成功，进一步提高了水稻的产量和品质。两系法杂交水稻是利用水稻光温敏核不育基因培育水稻光温敏不育系而选配的杂交水稻，水稻光温敏不育系的雄性不育性受环境温度与光照控制，具有育性转换特性，起到“一系两用”的作用，即在高温长日条件下雄性不育，进行杂交制种，生产杂交种子；在低温短日条件下，转为雄性可育，实现自身繁殖。

由于水稻光温敏不育系的雄性不育起点温度具有“遗传漂移”特性，即随着不育系繁殖世代的增加，不育起点温度会随着世代的增加而提高，因此在水稻光温敏不育系原种生产过程中，既需要保持不育系的典型农艺性状及性状的整齐一致，又要保持不育起点温度的稳定，相比杂交水稻其他亲本原种生产更加复杂。目前按水稻光温敏不育系原种生产技术生产株行代原种，需要经历选种圃、株行圃两代两年的生产才能获得种子，时间长、进度慢，不利于种业企业加快新品种市场化进程。

因此，如何加快水稻光温敏不育系原种的生产，是本领域技术人员亟待解决的技术问题。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的为提供一种快速生产水稻光温敏不育系原种的方法；本申请提供的方法，可以有效加快原种的生产速度，只需通过一年不同地域的两季生产鉴定，即可生产出株行代原种。可以快速稳定不育系的农艺性状和保持不育起点温度的一致，获得典型性状特性和农艺性状以及不育起点温度更为整齐一致的水稻光温敏不育系株行代原种种子。

本发明提供的技术方案如下：

一种快速生产水稻光温敏不育系原种的方法，包括以下步骤：

将待生产不育系的选种圃种植在海南南部稻作区或同纬度稻作地区的稻田，按不育系在二月上中旬抽穗的要求确定播种时间进行播种，在抽穗前选取具有该不育系典型性状特性的单株作为标准单株；

将标准单株上即将抽穗尚未开花的3～4个穗套袋，使其完全自交结实，套袋时其余幼穗Ⅵ期以上稻穗拔除，留下小的迟的分蘖苗；

在不育系的育性波动期进行第一轮花粉镜检，依据第一轮花粉镜检结果，根据中选单株数量目标，按染色花粉率从低到高的原则选留核心单株，分别收获核心单株的种子；

将收获的所述每株核心单株种子分为两份，第一份核心单株种子和第二份核心单株种子，第一份核心单株种子播种种植在可冷水串灌的田地内，分单株种植成第一株行圃；第二份核心单株种子播种种植在低纬度高海拔地区稻田内，或种植在可冷水串灌的田地内，分单株种植成第二株行圃；

在第一株行圃的育性温度敏感期，使用低于该不育系不育起点温度的恒温冷水串灌6-8天，灌水深度15-20cm，在第一株行圃的开花期进行第二轮花粉镜检，依据第二轮花粉镜检结果，指导第二株行圃各株行的选留，将选留下的第二株行圃的各株行种子混收即为株行代原种。

优选地，所述依据第二轮花粉镜检结果，指导第二株行圃的选留具体方法为：根据第二轮花粉镜检中各株行的单株染色花粉率最大值、染色花粉率为0的株率、平均染色花粉率中的一个或多个指标，选留同一核心单株在第二份核心单株的株行种子。

优选地，根据中选率要求，按照株行内染色花粉率最高值和平均染色花粉率从低到高、染色花粉率为0的株率从高到低来选留相应株行。

优选地，每株核心单株收获的所述核心单株种子分为两份时，所述第一份核心单株种子40-60粒，其余为所述第二份核心单株种子。

优选地，还包括将第二株行圃，分别在苗期、分蘖盛期、抽穗开花期、成熟期鉴定株叶穗粒形态和农艺性状的典型性和整齐一致性，保留具有典型性状和性状完全整齐一致的株行，淘汰性状不整齐一致性的株行，在留下的株行中再根据第二轮花粉镜检结果，选留相应株行。

优选地，还包括将所述生产的株行代原种与该不育系的标准种种子或育种家种子进行SSR分子检测一致性比对的步骤。

优选地，所述SSR分子检测一致性比对是指，将所述原种与该不育系的标准种或育种家种子进行48对引物的DNA分子一致性比对，比对结果完全一致的作为不育系株行代原种使用。

优选地，所述第一轮花粉镜检和所述第二轮花粉镜检包括1-3次花粉镜检的操作。

优选地，在第一株行圃的育性温度敏感期，使用低于该不育系不育起点温度0.5-1.0℃的恒温冷水串灌。

优选地，将待生产的不育系种子播种种植成选种圃，采用“三层穗法”培育单株抽穗历期达15天以上，至少有主穗、大田第一次分蘖期、大田第二次分蘖期的三层穗水稻，第一层穗在二月上中旬抽穗开花，第三层穗在三月上中旬抽穗开花，育性波动时进行第一轮花粉镜检，根据花粉镜检结果，在标准单株中选取核心单株，对所述核心单株的套袋种子分株单收。

本申请提供的快速生产水稻光温敏不育系原种的方法，先将不育系种子的选种圃种植在适宜地区，如海南南部稻作区或同纬度稻作地区，选取标准单株套袋部分抽穗未开花的穗，通过第一轮花粉镜检，选留核心单株，分株收获核心单株种子，然后将每一核心单株留取的核心单株种子分为两份，分别种植，通过控制第一份核心单株种子、第二份核心单株种子的种植时间和开花时间，利用第一株行圃在育性敏感期冷水串灌条件下的第二轮花粉镜检的结果，指导第二株行圃的选择。通常情况下，第二份核心单株种子是在低纬度高海拔，例如云南保山的海拔1500mzuoy的稻区种植，也可在冷水串灌条件下种植。

本申请提供的方法，具有以下优点：

1、可以有效加快原种的生产速度，只需通过一年不同地域的两季生产鉴定，即可生产出株行代原种。通过海南一次核心单株生产和长沙或其他地区一次株行圃花粉镜检鉴定筛选，可控制不育起点温度向上漂移，保持所产原种不育起点温度的稳定。

2、只需要一年两代就能获得原种，便于快速繁殖水稻光温敏不育系良种。

3、通过对第一株行圃农艺性状鉴定和不育起点温度的筛选、第二株行圃农艺性状的鉴定和筛选，避免农艺性状变异和退化，容易获得农艺性状更为整齐一致的水稻两系不育系株行代原种种子。

具体而言，不育系每年10-12月在海南南部稻区或其他同等条件稻区播种种植成选种圃，保证不育系在次年2月上中旬抽穗，始穗期选择具有典型性状的植株作为标准单株(可以选择数十至数百株，例如20-300株)，然后在其可育度高、开花散粉较好时对标准单株上刚抽穗未开花的穗子套袋，每株套袋3-4穗，其余幼穗VI期以上的穗从穗颈节剪除；使标准单株继续分蘖生长，在3月上中旬不育系迟发分蘖抽穗开花的育性波动期，进行第一轮花粉镜检，依据第一轮花粉镜检结果，在标准单株中选择留取的核心单株，分单株收获核心单株种子，每个核心单株可收种子200-300粒左右。将每个核心单株的核心单株种子分为两部分，第一份核心单株种子和第二份核心单株种子，分别种植成第一株行圃和第二株行圃。控制播种时间，使得第一株行圃的育性温度敏感期在6月下旬至7月中旬，使用低于该不育系不育起点温度的冷水串灌，7月上旬至7月下旬旬抽穗开花，进行第二轮花粉镜检；而第二份标准单株种子在4至5月中旬播种，确保在8月上中旬开花，此时第一株行圃的第二轮花粉镜检结果已经出来，可以指导第二株行圃的选择，而无需对第二株行圃进行花粉镜检，节约时间。选定保留的核心株在9月中下旬收种，作为株行代原种。因此，本申请提供的方法，于第一年的10-11月启动，在第二年的9月即可收获原种，实现在12个月内生产水稻温敏不育系株行代原种，较现行的两年期生产原种的周期，速度有较大提高，便于两系杂交水稻新品种的快速推广应用。

具体实施方式

为了使本技术领域的人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本申请保护的范围。

需要说明的是，当元件被称为“固定于”或“设置于”另一个元件上，它可以直接在另一个元件上或者间接设置在另一个元件上；当一个元件被称为是“连接于”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或间接连接至另一个元件上。

此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本申请的描述中，多个”、“若干个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。

本申请实施例采用递进的方式撰写。

本发明实施例提供一种快速生产水稻光温敏不育系原种的方法，包括以下步骤：

将待生产不育系的选种圃种植在海南南部稻作区或同纬度稻作地区的稻田，按不育系在二月上中旬抽穗的要求确定播种时间进行播种，在抽穗前选取具有该不育系典型性状特性的单株作为标准单株；

将标准单株上即将抽穗尚未开花的3～4个穗套袋，使其完全自交结实，套袋时对其余幼穗Ⅵ期以上稻穗拔除，留下小的迟的分蘖苗；

在不育系的育性波动期进行第一轮花粉镜检，依据第一轮花粉镜检结果，根据中选单株数量目标，按染色花粉率从低到高的原则选留核心单株，分别收获核心单株的种子；

将收获的所述每株核心单株种子分为两份，第一份核心单株种子和第二份核心单株种子，第一份核心单株种子播种种植在可冷水串灌的田地内，分单株种植成第一株行圃；第二份核心单株种子播种种植在低纬度高海拔地区稻田内，或种植在可冷水串灌的田地内，分单株种植成第二株行圃；

在第一株行圃的育性温度敏感期，使用低于该不育系不育起点温度的恒温冷水串灌6-8天，灌水深度15-20cm，在第一株行圃的开花期进行第二轮花粉镜检，依据第二轮花粉镜检结果，指导第二株行圃的选留，将选留下的第二株行圃的各株行种子混收即为株行代原种。

本申请提供的快速生产水稻光温敏不育系原种的方法，先将不育系种子的选种圃种植在适宜地区，如海南南部稻作区或同纬度稻作地区，选取标准单株，通过第一轮花粉镜检，选留核心单株，分株收获核心单株种子，然后将每一核心单株收获的核心单株种子分为两份，分别种植，通过控制第一份核心单株种子、第二份核心单株种子的种植时间和开花时间，利用第一株行圃在育性温度敏感期冷水串灌条件下的第二轮花粉镜检的结果，指导第二株行圃的选择。通常情况下，第二份核心单株种子是在低纬度高海拔(例如云南保山海拔1500m左右的稻区)条件下进行种植，也可在冷水串灌条件下种植。

本申请提供的方法，具有以下优点：

1、可以有效加快原种的生产速度，只需通过一年不同地域的两季生产鉴定，即可生产出株行代原种。通过海南一次核心单株生产和长沙或其他地区一次株行圃花粉镜检，可控制不育起点温度向上漂移，保持所产原种不育起点温度的稳定。

2、只需要一年两代就能获得原种，便于快速繁殖水稻光温敏不育系良种。

3、通过对第一株行圃农艺性状鉴定和不育起点温度的筛选、第二株行圃农艺性状鉴定和筛选，避免农艺性状变异和退化，容易获得农艺性状更为整齐一致的水稻两系不育系株行代原种种子。

具体而言，不育系每年10-12月在海南南部稻区或其他同等条件稻区播种种植成选种圃，保证不育系在次年2月上中旬抽穗，始穗期选择具有典型性状的植株作为标准单株(可以选择数十至数百株，例如20-300株)，然后在其可育度高、开花散粉较好时对标准单株上刚抽穗未开花的穗子套袋，每株套袋3-4穗，其余幼穗VI期以上的穗从穗颈节剪除；使标准单株继续分蘖生长，在3月上中旬不育系迟发分蘖抽穗开花的育性波动期，进行第一轮花粉镜检，依据第一轮花粉镜检结果，在标准单株中选择留取核心单株，分单株收获核心单株种子，每个核心单株可收种子约200-300粒。将每个核心单株的核心单株种子分为两部分，第一份核心单株种子和第二份核心单株种子，分别种植成第一株行圃和第二株行圃。控制播种时间，使得第一株行圃的育性温度敏感期在6月下旬至7月下旬，使用低于不育系不育起点温度0.5-1.0℃的恒温冷水串灌，7月上旬至7月下旬抽穗开花，进行第二轮花粉镜检；而第二份标准单株种子在4至5月中旬播种，确保在8月上中旬开花，此时第一株行圃的第二轮花粉镜检结果已经出来，可以指导第二株行圃的选择，而无需对第二株行圃进行花粉镜检，节约时间。选定保留的核心株在9月中下旬收种，作为株行代原种。因此，本申请提供的方法，于第一年的10-11月启动，在第二年的9月即可收获原种，实现在12个月内生产水稻温敏不育系株行代原种，较现行的两年期生产原种的周期，速度有较大提高，便于新品种的研发加速和扩大种植。

优选地，所述依据第二轮花粉镜检结果，指导第二株行圃的选留具体方法为：根据第二轮花粉镜检中各株行的单株染色花粉率最大值、染色花粉率为0的株率、平均染色花粉率中的一个或多个指标，选留同一核心单株在第二份核心单株的株行种子。

优选地，根据中选率要求，按照株行内染色花粉率最高值和平均染色花粉率从低到高、染色花粉率为0的株率从高到低来选留相应株行。

本申请中，依据第二轮花粉镜检结果，指导第二株行圃的选留主要是依据染色花粉率的镜检结果。为了避免单个植株突变或因气象条件等因素发生变化影响选择，第一株行圃中，每一个核心单株有多粒种子长成了植株，进行第二轮花粉镜检时，选择其中多个植株的花粉进行镜检，并按照株行内染色花粉率最高值和平均染色花粉率从低到高、染色花粉率为0的株率从高到低来选留相应株行。

优选地，收获的所述每株核心单株种子分为两份时，所述第一份核心单株种子40-60粒，其余为所述第二份核心单株种子。

例如，每一标准单株所收获的种子为200粒，分成两部分，第一份标准单株种子为50粒，第二份标准单株种子为150粒。第一份标准单株种子主要是为了指导第二份标准单株种子的选择，在满足花粉镜检及其他性状要求、满足可重复性要求的情况下，可以多留出种子进入第二份核心单株种子，增加最终收获的株行代原种数量。

优选地，还包括将第二株行圃，分别在苗期、分蘖盛期、抽穗开花期、成熟期鉴定株叶穗粒形态和农艺性状的典型性和整齐一致性，保留具有典型性状和性状完全整齐一致的株行，淘汰性状不整齐一致性的株行，在留下的株行中再根据第二轮花粉镜检结果，选留相应株行。

第二轮花粉镜检的结果，是第二份核心单株中选择对应株行的重要参数，但由于植物生长的不确定性较强，选定的对应核心单株株行，经过株叶穗粒形态和农艺性状的典型性、整齐一致性鉴定后，淘汰株叶穗粒形态有差异的株行，从而最终确定混收株行。本申请中，株叶穗粒形态典型性、一致性鉴定为本领域常用的常规方法。

优选地，还包括将所述生产的株行代原种与该不育系的标准种种子或育种家种子进行SSR分子检测一致性比对的步骤。

优选地，所述SSR分子检测一致性比对是指，将所述原种与该不育系的标准种或育种家种子进行48对引物的DNA分子一致性比对，比对结果完全一致的作为不育系株行代原种使用。

进一步的，将得到的原种，与该不育系的标准种种子或育种家种子进行SSR分子检测一致性比对的步骤，比对结果完全一致的原种作为不育系良种使用。优选将所述原种与该不育系的标准种或育种家种子进行48对引物的DNA分子一致性比对，比对结果完全一致的作为不育系株行代原种使用。本申请中，使用的SSR分子检测一致性比对方法，是本领域的常规方法。

优选地，所述第一轮花粉镜检和所述第二轮花粉镜检包括1-3次花粉镜检的操作。

第一轮花粉镜检和第二轮花粉镜检包括1-3次镜检操作，是为了更全面地了解各单株不育起点温度的一致性和稳定性。。

优选地，在第一株行圃的育性温度敏感期，使用低于该不育系不育起点温度0.5-1.0℃的恒温冷水串灌。是为了让不育系开花时正处于育性波动期，不同单株间的染色花粉率有较大差异，从而优选染色花粉率低的单株。

优选地，将待生产的不育系种子播种种植成选种圃，采用“三层穗法”培育单株抽穗历期达15天以上，至少有主穗、大田第一次分蘖期、大田第二次分蘖期的三层穗水稻，第一层穗在二月上中旬抽穗开花，第三层穗在三月上中旬抽穗开花，育性波动时进行第一轮花粉镜检，根据花粉镜检结果，在标准单株中选取核心单株，对所述核心单株的套袋种子分株单收。

实施例1

一、2017年10月-2018年4月的海南核心种子生产

2017年10月下旬在海南三亚大茅基地播种深08S，种植选种圃，利用1月底-2月初的低温进行深08S核心单株的筛选，并让其核心单株套袋自交结实收获核心种子。筛选过程如下：

1、选种圃构建选择深08S高纯度原种2000粒左右，于2017年10月22日按传统水育秧方法播种育秧。精细苗期管理、培育整齐一致的有蘖壮秧。秧苗叶龄6.5叶左右移栽。移栽前选择叶龄、秧苗素质较为整齐一致的秧苗栽插，每株保留1-2个最大的分蘖，其余分蘖除去后再移栽。栽插密度8×10寸，均单本栽插，栽插1000株。

按照水稻温敏不育系“三层穗法“核心种子生产程序进行选种圃的栽培管理，培育单株抽穗历期达20天以上，至少有主穗(第一层穗)、大田第一次分蘖期(第二层穗)、大田第二次分蘖期(第三层穗)的三层穗水稻。

2、标准单株筛选选种圃于2018年2月15日始穗。于2018年2月16日在选种圃内，选择株叶穗粒形态具有典型性、一致性、抽穗期相同的单株370株，作为标准单株。

3、标准单株育性观察及套袋从始穗开始，每天观察标准单株的开花散粉情况。2月16日-3月4日抽穗的有一定可育花粉。每个标准单株选择3-4个散粉好的穗子，用羊皮纸袋套袋，使其完全自交，获得自交结实种子。

4、花粉镜检和核心单株筛选于育性观察发现，2018年3月5日开始，出现由可育向不育转换的过程。分别于3月5日、3月9日对上述筛选的370株深08S标准单株进行2次花粉镜检。

镜检方法为：每个标准单株选择镜检当天能开花的10朵颖花内全部花药，放置载玻片上在0.2％碘-碘化钾溶液内捣碎，制成1个花粉镜检观察片。在100倍显微镜下观察染色花粉与非染色花粉的比值，计算出每个标准单株的染色花粉率％。

按照需筛选150株左右的中选率，选择第1、2次镜检染色率均＜2％的单株为核心单株，共145株。

5、分株收获套袋穗上的核心单株种子上述中选的145株核心单株，于2018年3月20日套袋穗种子成熟后分株收获晾晒，得145份核心种子，每株200粒左右。

二、2018年长沙人工冷水处理池进行株行圃不育起点温度的鉴定

1、深08S核心种子准备将上述2018年3月海南收获的145份核心单株种子每株分成2份，一份60粒，在长沙种植成株行，用于不育起点温度的鉴定；另一份约140粒，在云南施甸种植成株行圃，用于繁殖原种。

2、长沙深08S株行圃种植将145份核心单株种子种植(每份60粒的)成株行圃，种植过程如下：

(1)分株播种育秧于4月19日播种。采用湿润育秧，播种前平整好秧厢，施20kg/亩45％复合肥作底肥，稀匀播种。所有60粒种子全部播完。精细田间管理，防治好病虫草害，特别注意防治稻瘟病，培育整齐一致的多蘖壮秧。

(2)移栽于5月19日移栽。移栽前，平整好选种圃移栽田，亩施30kg/亩复合肥(45％)作底肥。秧龄30-35天、叶龄7叶左右时，采用人工移栽方式栽插。栽插密度6×8寸，单本栽插，每个株行栽插40株，种植成一个株行小区。深08S共种植成145个小区的株行圃。

(3)株行圃的田间培管各株行稀植、高肥培管，以湿润管理为主，尽可能多发分蘖，延长分蘖时间，使各不育系单株的抽穗历期达到20天以上，且呈现分3层抽穗形态，第一层为主穗，第二层为2-4个大分蘖，三层为众多的小分蘖。防治好病虫草害，重点防治稻瘟病。

3、株行鉴定于分蘖盛期和封行期对145个株行进行农艺性状典型性和一致性鉴定，淘汰单株见性状不一致的株行(割除)，保留118个性状典型一致的株行。

4、标准单株的初选在上述中选的118个株行内，每个株行选择农艺性状典型一致的单株5株，分别挂牌编号，共选择590株单株。

5、标准单株冷灌处理

对中选的590株单株，在育性温度敏感期分两段进行冷水处理，第1段冷灌从7月8日-7月13日，处理水温为22.5℃，时间为6d。

第2段冷灌从7月14日-7月24日，即第1段冷灌结束时起至后发小分蘖达到Ⅶ期(剑叶突出2cm)时止，处理水温在21.0℃，时间为10-12d。

6、镜检穗的标记分别于冷灌后第7天即7月14日，每个单株分别标记刚好处于幼穗分化7期初的穗子，共标记590穗用于花粉镜检。

7、花粉镜检对通过冷水处理的590株单株于7月26日、7月28日，进行2次花粉镜检，镜检对象是上述590株单株的标记穗子，每次镜检选取当天能开花的颖花(花药伸长至颖花三分之二以上)8-10朵的全部花药制片，每片观察3个视野，记数染色花粉与非染色花粉的数量，染色花粉包括黒染花粉和半染色花粉，非染色花粉包括典败花粉和圆败花粉，计算染色花粉率％。

8、镜检染色花粉率的统计分析统计每个株行所标记的5株单株的最高染色花粉率、平均染色花粉率、染色花粉率为0的株率等指标，在118个株行内，选留花粉染色率最大值＜40％、平均染色率＜1.5％、染色花粉率为0的株率％＞40％的株行共67个株行。

三、2018年云南株行圃原种繁殖

1、种源2018年3月三亚收获的145株核心单株种子的第一份(约140粒)。

2、云南株行圃种植

(1)分核心单株播种育秧于4月12日播种。采用湿润水育秧，播种前平整好秧厢，施20kg/亩45％复合肥作底肥，稀匀播种。所有约140粒种子全部播完。强化田间管理，防治好病虫草害，特别注意防治稻瘟病，培育整齐一致的多蘖壮秧。

(2)移栽于5月22日移栽。移栽前，平整好选种圃移栽田，亩施30kg/亩复合肥(45％)作底肥。秧龄40天、叶龄6.5叶左右时，采用人工移栽方式栽插。栽插密度6×6寸，单本栽插，每个株行把秧插完，种植成一个小区。深08S共种植成145个小区的株行圃。

(3)株行圃的田间培管各株行稀植、高肥培管，以湿润管理为主，尽可能多发分蘖，培育高产稳健苗架。

3、抽穗前株行鉴定抽穗前，根据长沙对应株行在分蘖盛期和封行期的株行鉴定结果，淘汰性状变异或不整齐的株行共27个(割除)，保留118个株行用于抽穗期鉴定。

4、抽穗期株行鉴定于8月15日株行圃始穗期，根据长沙株行7月26日镜检分析结果，淘汰群体不育起点温度较高的株行51个(割除)，保留起点温度较低的株行67个。

5、成熟期鉴定于9月10日株行成熟期，对上述中选的起点温度较低的67个株行再进行1次田间农艺性状整齐度筛选，淘汰群体内农艺性状不整齐的株行3个，最终保留64个株行。

6、原种收割将中选的64个深08S株行的种子混收即为原种，共收获深08S原种150kg。

7、原种鉴定将上述所收的150kg深08S原种于2018年冬在海南进行纯度种植鉴定，结果显示纯度为100％。

对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (9)

1.一种快速生产水稻光温敏不育系原种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将待生产的不育系的种子种植在海南南部稻作区或其他同纬度稻作地区的稻田，形成选种圃，按不育系在二月上中旬抽穗的要求确定播种时间进行播种，在抽穗前选取具有该不育系典型性状特性的单株作为标准单株；

将标准单株上即将抽穗尚未开花的3～4个穗套袋，使其完全自交结实，套袋时其余幼穗Ⅵ期以上稻穗拔除，留下小的迟的分蘖苗；

在不育系的育性波动期进行第一轮花粉镜检，依据第一轮花粉镜检结果，根据中选单株数量目标，按染色花粉率从低到高的原则选留核心单株，分株收获核心单株的种子；

将收获的所述每个核心单株种子分为两份，第一份核心单株种子和第二份核心单株种子，第一份核心单株种子播种种植在可冷水串灌的田地内，分单株种植成第一株行圃；第二份核心单株种子播种种植在云南保山海拔1500m的稻区稻田内，或种植在可冷水串灌的田地内，分单株种植成第二株行圃；控制播种时间，使得第一株行圃的育性温度敏感期在6月下旬至7月下旬，7月上旬至7月下旬抽穗开花，进行第二轮花粉镜检；而第二份标准单株种子在4至5月中旬播种，确保在8月上中旬开花；

在第一株行圃的育性温度敏感期，使用低于该不育系不育起点温度的恒温冷水串灌6-8天，灌水深度15-20cm，在第一株行圃的开花期进行第二轮花粉镜检，依据第二轮花粉镜检结果，指导第二株行圃各株行的选留，将选留下的第二株行圃的各株行种子混收即为株行代原种；其中，所述依据第二轮花粉镜检结果，指导第二株行圃的选留具体方法为：根据第二轮花粉镜检中各株行的单株染色花粉率最大值、染色花粉率为0的株率、平均染色花粉率中的一个或多个指标，选留同一核心单株在第二份核心单株的株行种子。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，根据中选率要求，按照株行内染色花粉率最高值和平均染色花粉率从低到高、染色花粉率为0的株率从高到低来选留相应株行。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，每株核心单株收获的所述核心单株种子分为两份时，所述第一份核心单株种子40-60粒，其余为所述第二份核心单株种子。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括将第二株行圃，分别在苗期、分蘖盛期、抽穗开花期、成熟期鉴定株叶穗粒形态和农艺性状的典型性和整齐一致性，保留具有典型性状和性状完全整齐一致的株行，淘汰性状不整齐一致的株行，在留下的株行中再根据第二轮花粉镜检结果，选留相应株行。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括将所述生产的株行代原种与该不育系的标准种种子或育种家种子进行SSR分子检测一致性比对的步骤。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述SSR分子检测一致性比对是指，将所述原种与该不育系的标准种或育种家种子进行48对引物的DNA分子一致性比对，比对结果完全一致的作为不育系株行代原种使用。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一轮花粉镜检和所述第二轮花粉镜检包括1-3次花粉镜检的操作。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在第一株行圃的育性温度敏感期，使用低于该不育系不育起点温度0.5-1.0℃的恒温冷水串灌。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将待生产的不育系种子播种种植成选种圃，采用“三层穗法”培育单株抽穗历期达15天以上，至少有主穗、大田第一次分蘖期、大田第二次分蘖期的“三层穗”水稻，第一层穗在二月上中旬抽穗开花，第三层穗在三月上中旬抽穗开花，育性波动时进行第一轮花粉镜检，根据花粉镜检结果，在标准单株中选取核心单株，对所述核心单株的套袋自交结实种子分株单收。