CN110089276A - 一种猕猴桃花粉的收集保存方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种猕猴桃花粉的收集保存方法,涉及生物技术领域,本发明所述猕猴桃花粉的收集保存方法,首先利用生石灰对花药进行受热散粉:将生石灰粉碎后用泡沫箱倒扣,生石灰吸收空气中的少量水分生成氢氧化钙并释放热量,泡沫箱不会阻隔空气中的水分进入并且具有一定的保温作用,可使泡沫箱表面的温度稳定维持在27~30℃,构成加热台;将采集的花药置于泡沫箱表面,在缓慢受热下散粉,从而收集到花粉活力高的花粉。将散粉后的花粉置于带有硅胶的容器中密闭,‑18℃下保存即可。利用本发明提供的花粉收集保存方法,花粉活力高、对花粉伤害小,操作简便,易于推广。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种猕猴桃花粉的收集保存方法。
背景技术
猕猴桃是猕猴桃科(Actinidiaceae)猕猴桃属(Actinidia Lindl)藤本植物,是原产于我国特有的多年生落叶藤本水果树种,因其富含丰富的营养物质及其良好的保健功效颇受消费者和生产者的关注。猕猴桃是雌雄异株植物,需要异花授粉,只有雄株花粉粒充分接触到雌花柱头时才能授粉受精,未完成授粉受精的雌花在后期不能很好地生长发育,坐果率低、易脱落、种子少、果个小。
近年来由于环境气候恶劣、花期不遇、蜜蜂和昆虫的数量严重不足等因素,猕猴桃在自然条件下很难达到优质高产的效果,借助人工授粉才能提高果实产量,而雄株花粉量的多少以及花粉生活力的高低对授粉受精起着至关重要的作用。因此雄株花粉的收集、保存过程就显得尤为重要。
发明内容
为了进一步指导生产实践,提高农户自己收集、保存花粉的有效性,提高花粉利用率。本发明专利涉及一种猕猴桃花粉的收集保存方法,保存及活力测定方法。该收集方法对花粉的损害小,花粉存活率高。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本发明提供了一种猕猴桃花粉的收集保存方法,包括以下步骤:
(1)采集即将开放的猕猴桃花苞,取出花药;
(2)将生石灰粉碎后,用泡沫箱倒扣在粉碎的生石灰上,得到加热台;
(3)将花药置于加热台表面进行散粉,得到散粉的花药;
(4)将散粉的花药置于带有硅胶的容器中,密闭,-15~-20℃下储存。
优选的,步骤(1)中,所述花苞来源于金魁猕猴桃、金艳猕猴桃、红阳猕猴桃及徐香猕猴桃。
优选的,步骤(1)中,所述生石灰粉碎至1~3mm。
优选的,步骤(2)中,所述生石灰的质量与泡沫箱的体积之比为3~8kg:35000~45000cm3。
优选的,所述泡沫箱的长、宽、高之比为40~50:20~40:20~45。
优选的,步骤(2)中,所述加热台表面的温度为27~30℃。
优选的,步骤(4)中,所述带有硅胶的容器中,硅胶被带孔的包装材料包裹以隔离花粉与硅胶。
优选的,所述散粉的花药与硅胶的体积比为0.5~2:0.5~2。
本发明还提供了一种金魁猕猴桃花粉活性的检测方法,包括以下步骤:
S1、按照上述技术方案所述方法收集保存猕猴桃花粉;
S2、挑取步骤S1收集保存的猕猴桃花粉于载玻片上,滴加萌发培养基后,静置4h后显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数;
所述萌发培养基由质量浓度5%的蔗糖和质量浓度0.01%的硼酸组成。
与现有技术相比,本发明的有益效果:
本发明提供了一种猕猴桃花粉的收集保存方法,首先利用生石灰对花药进行受热散粉:将生石灰粉碎后用泡沫箱倒扣,生石灰吸收空气中的少量水分生成氢氧化钙并释放热量,泡沫箱不会阻隔空气中的水分进入并且具有一定的保温作用,可使泡沫箱表面的温度稳定维持在27~30℃,构成加热台;将采集的花药置于泡沫箱表面,在缓慢受热下散粉,从而收集到花粉活力高的花粉。将散粉后的花粉置于带有硅胶的容器中密闭,-18℃下保存即可。利用本发明提供的花粉收集保存方法,花粉活力高、对花粉伤害小,操作简便,易于推广。
本发明还提供了一种猕猴桃花粉活性的测定方法,将待测花粉置于载玻片上,滴加由质量浓度5%的蔗糖和质量浓度0.01%的硼酸组成的萌发培养基培养4h,显微镜观察花粉萌发数和总花粉数即可。本发明提供的猕猴桃花粉活性的测定方法,操作简便,速度快,效率高。
附图说明
图1为实施例3和对比例1~8不同方法下,金魁猕猴桃花粉萌发的镜检图。
具体实施方式
本发明提供了一种猕猴桃花粉的收集保存方法,包括以下步骤:
(1)采集即将开放的猕猴桃花苞,取出花药;
(2)将生石灰粉碎后,用泡沫箱倒扣在粉碎的生石灰上,得到加热台;
(3)将花药置于加热台表面进行散粉,得到散粉的花药;
(4)将散粉的花药置于带有硅胶的容器中,密闭,-15~-20℃下储存。
本发明所述猕猴桃花粉的收集保存方法可适用于各种品种的猕猴桃花粉收集保存,包括但不限于金魁猕猴桃、金艳猕猴桃、红阳猕猴桃及徐香猕猴桃。
在本发明中,所述取出花药的方法优选的采用打花机处理所述花苞而得到。取出的花药为湿润的,需要烘干散粉后才能够进行保存。
在本发明中,所述生石灰优选的粉碎至1~3mm。本发明对生石灰粉碎是为了增大其与空气的接触面积,好充分吸水发生放热反应。在本发明中,所述生石灰的质量与泡沫箱的体积之比优选为3~8kg:35000~45000cm3;更优选为5kg:40500m3。在本发明中,所述泡沫箱的长、宽、高之比优选为40~50:20~40:20~45;更优选为45:30:30。在本发明中,所述泡沫箱的厚度优选为1~2cm。本发明采用泡沫箱倒扣在粉碎的生石灰上是因为泡沫箱有保温作用,使热量慢慢散出,使报纸上的花粉不至受热过度损伤花粉。生石灰与空气中的少量水分发生反应,生成氢氧化钙和热量。按照本发明所述的方法利用生石灰产生的热量对花药进行散粉,具有加热缓慢、温度稳定维持在27~30℃的特点。
本发明所述的加热台表面温度在27~30℃,在加热台上进行散粉具有受热均匀、缓慢散热的优势。相比于常规散粉方法更为节能环保,并且对花粉的损伤小,所得花粉活力高。
在本发明中,所述带有硅胶的容器中,硅胶优选的被带孔的包装材料包裹以隔离花粉与硅胶。在本发明中,所述散粉的花药与硅胶的体积比优选为0.5~2:0.5~2;更优选为1:1。本发明在保存花药的容器中放置硅胶可有效吸附水分,防止花药受潮。
本发明还提供了一种猕猴桃花粉活性的检测方法,包括以下步骤:
S1、按照上述技术方案所述方法收集保存猕猴桃花粉;
S2、挑取步骤S1收集保存的猕猴桃花粉于载玻片上,滴加萌发培养基后,静置4h后显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数;
所述萌发培养基由质量浓度5%的蔗糖和质量浓度0.01%的硼酸组成。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明,但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
1、采集即将开放的金魁花苞,用打花机处理获得花药后,将花药放于洁净的报纸上;
2、取5kg生石灰粉碎至1~3mm,用长宽高为45cm×30cm×30cm、厚度1cm的泡沫箱子倒扣盖在上面,得到加热台;
3、将盛放有花粉的报纸铺放在泡沫箱子表面,利用生石灰遇水会发生化学反应放热的原理(CaO+H2O=Ca(OH)2),生石灰吸收空气中的少量水分发生反应,缓缓放出少量热量,报纸上的花药慢慢受热散粉,温度约为27~30℃。此种散粉方式相比于其他方式更节能环保,而且慢慢散热,花药受热均匀,所得花粉活力高,花粉损伤小。
4、待花药充分散粉后分盛放于塑料瓶中,并用纱布包适量硅胶放于塑料瓶内(硅胶与花粉的体积比例1:1)防止花粉受潮。盖好盖子,放于-18℃冰箱内。
实施例2
1、采集即将开放的红阳猕猴桃花苞,用打花机处理获得花药后,将花药放于洁净的报纸上;
2、取5kg生石灰粉碎至1~3mm,用长宽高为45cm×30cm×30cm、厚度1cm的泡沫箱子倒扣盖在上面,得到加热台;
3、将盛放有花粉的报纸铺放在泡沫箱子表面,利用生石灰遇水会发生化学反应放热的原理(CaO+H2O=Ca(OH)2),生石灰吸收空气中的少量水分发生反应,缓缓放出少量热量,报纸上的花药慢慢受热散粉,温度约为27~30℃。此种散粉方式相比于其他方式更节能环保,而且慢慢散热,花药受热均匀,所得花粉活力高,花粉损伤小;
4、待花药充分散粉后分盛放于塑料瓶中,并用纱布包适量硅胶放于塑料瓶内(硅胶与花粉的体积比例1:1)防止花粉受潮。盖好盖子,放于-18℃冰箱内。
实施例3
1、萌发培养基:质量百分比5%的蔗糖和质量百分比0.01%的硼酸,溶剂为水。
2、取实施例1所示方法保藏2天的花粉置于载玻片上,滴加萌发培养基,在室温(25~27℃)下静置培养4h,显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数,并拍照,如图1-A所示。重复三次试验,经计算,金魁猕猴桃花粉的萌发率为88.6%±2.25%。
实施例4
1、萌发培养基:质量百分比5%的蔗糖和质量百分比0.01%的硼酸,溶剂为水。
2、取实施例2所示方法保藏2天的花粉置于载玻片上,滴加萌发培养基,在室温(25~27℃)下静置培养4h,显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数,并拍照。重复三次试验,经计算,红阳猕猴桃花粉的萌发率在80%以上。
对比例1
1、萌发培养基:质量百分比5%的蔗糖和质量百分比0.015%的硼酸,溶剂为水。
2、取实施例1所示方法保藏2天的花粉置于载玻片上,滴加萌发培养基,在室温(25~27℃)下静置培养4h,显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数,并拍照,如图1-B所示。重复三次试验,经计算,金魁猕猴桃花粉的萌发率为69.57%±4.76%。
对比例2
1、萌发培养基:质量百分比5%的蔗糖和质量百分比0.02%的硼酸,溶剂为水。
2、取实施例1所示方法保藏2天的花粉置于载玻片上,滴加萌发培养基,在室温(25~27℃)下静置培养4h,显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数,并拍照,如图1-C所示。重复三次试验,经计算,金魁猕猴桃花粉的萌发率为58.76%±2.1%。
对比例3
1、萌发培养基:质量百分比10%的蔗糖和质量百分比0.01%的硼酸,溶剂为水。
2、取实施例1所示方法保藏2天的花粉置于载玻片上,滴加萌发培养基,在室温(25~27℃)下静置培养4h,显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数,并拍照,如图1-D所示。重复三次试验,经计算,金魁猕猴桃花粉的萌发率为10.8%±1.22%。
对比例4
1、萌发培养基:质量百分比10%的蔗糖和质量百分比0.015%的硼酸,溶剂为水。
2、取实施例1所示方法保藏2天的花粉置于载玻片上,滴加萌发培养基,在室温(25~27℃)下静置培养4h,显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数,并拍照,如图1-E所示。重复三次试验,经计算,金魁猕猴桃花粉的萌发率为9.7%±2.2%。
对比例5
1、萌发培养基:质量百分比10%的蔗糖和质量百分比0.02%的硼酸,溶剂为水。
2、取实施例1所示方法保藏2天的花粉置于载玻片上,滴加萌发培养基,在室温(25~27℃)下静置培养4h,显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数,并拍照,如图1-F所示。重复三次试验,经计算,金魁猕猴桃花粉的萌发率16.33%±3.24%。
对比例6
1、萌发培养基:质量百分比20%的蔗糖和质量百分比0.01%的硼酸,溶剂为水。
2、取实施例1所示方法保藏2天的花粉置于载玻片上,滴加萌发培养基,在室温(25~27℃)下静置培养4h,显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数,并拍照,如图1-G所示。重复三次试验,经计算,金魁猕猴桃花粉的萌发率0。
对比例7
1、萌发培养基:质量百分比20%的蔗糖和质量百分比0.015%的硼酸,溶剂为水。
2、取实施例1所示方法保藏2天的花粉置于载玻片上,滴加萌发培养基,在室温(25~27℃)下静置培养4h,显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数,并拍照,如图1-H所示。重复三次试验,经计算,金魁猕猴桃花粉的萌发率0。
对比例8
1、萌发培养基:质量百分比20%的蔗糖和质量百分比0.02%的硼酸,溶剂为水。
2、取实施例1所示方法保藏2天的花粉置于载玻片上,滴加萌发培养基,在室温(25~27℃)下静置培养4h,显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数,并拍照,如图1-I所示。重复三次试验,经计算,金魁猕猴桃花粉的萌发率0。
综合实施例3和对比例1~8来看,本发明提供的金魁猕猴桃花粉活性的测定方法更为适宜。金魁猕猴桃花粉活性受萌发培养基中的蔗糖浓度影响显著,当蔗糖浓度为10%时,花粉萌发率仅在10%左右,而蔗糖浓度为20%时,其花粉萌发率为0。
对比例9
采集即将开放金魁猕猴的雄花蕾后用打花机处理,获得花药后阴干散粉收集。保存方法与实施例1相同。
按照实施例3所示方法测定花粉的萌发率为66.7%。
对比例10
采集即将开放金魁猕猴的雄花蕾后用打花机处理,获得花药后阴干散粉,使用非铁质工具研磨收粉,保存方法与实施例1相同。
按照实施例3所示方法测定花粉的萌发率为59.9%。
由实施例1所示方法收集保存的花粉其萌发率以及对比例9~10所示方法收集保存的花粉萌发率可以看出,按照本发明提供的花粉收集方法对花粉损伤更小,花粉活性更强。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种猕猴桃花粉的收集保存方法,包括以下步骤:
(1)采集即将开放的猕猴桃花苞,取出花药;
(2)将生石灰粉碎后,用泡沫箱倒扣在粉碎的生石灰上,得到加热台;
(3)将花药置于加热台表面进行散粉,得到散粉的花药;
(4)将散粉的花药置于带有硅胶的容器中,密闭,-15~-20℃下储存。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述花苞来源于金魁猕猴桃、金艳猕猴桃、红阳猕猴桃及徐香猕猴桃。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述生石灰粉碎至1~3mm。
4.根据权利要求1或3所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述生石灰的质量与泡沫箱的体积之比为3~8kg:35000~45000cm3。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述泡沫箱的长、宽、高之比为40~50:20~40:20~45。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述加热台表面的温度为27~30℃。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述带有硅胶的容器中,硅胶被带孔的包装材料包裹以隔离花粉与硅胶。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述散粉的花药与硅胶的体积比为0.5~2:0.5~2。
9.一种猕猴桃花粉活性的检测方法,包括以下步骤:
S1、按照权利要求1~8所述方法收集保存猕猴桃花粉;
S2、挑取步骤S1收集保存的猕猴桃花粉于载玻片上,滴加萌发培养基后,静置4h后显微镜下观察萌发花粉数和总花粉数;
所述萌发培养基由质量浓度5%的蔗糖和质量浓度0.01%的硼酸组成。
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