CN109847072A - 一种甲状旁腺血供检测试剂盒 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种甲状旁腺血供检测试剂盒，它包含吲哚菁绿水溶液。本发明还提供了前述试剂盒的用法，它是将吲哚菁绿水溶液通过外周静脉注射入人体，再通过荧光观察甲状旁腺的血供是否正常。本发明的试剂盒能帮助医生准确判断甲状旁腺血供是否受损；在甲状腺全切及中央区淋巴结清扫手术中，能指导医生关于是否保留或者移植的决策，从而降低患者术后暂时性及永久性甲状旁腺功能减退的并发症发生率，提高甲状腺手术的安全性。

Description

一种甲状旁腺血供检测试剂盒

技术领域

本发明涉及医学检验领域，尤其涉及一种甲状旁腺血供检测试剂盒。

背景技术

甲状腺癌是全球范围内发病率上升最快的实体恶性肿瘤。手术是甲状腺癌(除未分化癌外)的首选治疗方式。其中，甲状腺全切及中央区淋巴结清扫已成为最常用的手术方式。该手术方式最常见的并发症之一是甲状旁腺损伤，其导致的术后甲状旁腺功能低下(包括暂时性和永久性甲状旁腺功能低下)一直是困扰甲状腺外科医师的难题。

暂时性甲状旁腺功能低下会造成一过性低钙症状，对患者的生活质量不会造成严重的长期影响，但可能会延长住院时间和增加费用；而永久性甲状旁腺功能低下会造成永久性低钙症状，多以手足麻木和四肢抽搐为表现，严重影响患者的生活质量，病情严重时可伴有喉和膈肌痉挛，甚至引起窒息死亡，该并发症已成为甲状腺术后医疗纠纷的常见原因之一。

减少甲状腺术后甲状旁腺功能低下的发生最有效方式是原位保留所有甲状旁腺及其血供。若术中能即时发现甲状旁腺血供受损，将其进行自体移植，可有效保留甲状旁腺功能，减少术后永久性甲状旁腺功能低下的发生。然而，目前关于甲状旁腺血供受损主要根据其颜色改变来判断，尚无客观的判断指标。该判断方法有较多缺点：①主观性，判断颜色容易出现偏差；②甲状旁腺血管痉挛可导致其颜色发生短暂性缺血样改变，造成假阳性；③少数甲状旁腺血供真正受损时，其颜色在短时间内不发生改变，术后发生延迟性缺血坏死，造成假阴性。由此可见，甲状腺手术中仅根据甲状旁腺颜色改变来判断其血供是否受损具有不可靠性。甲状腺手术中急需一种能够客观反映甲状旁腺血供的指标，从而准确指导甲状旁腺是否能原位保留。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种检测甲状旁腺血供检测试剂盒。

本发明提供了一种甲状旁腺血供检测试剂盒，它包括荧光染色剂；

所述荧光染色剂为吲哚菁绿水溶液或吲哚菁绿干粉。

如前述的试剂盒，所述水溶液中还含有生理盐水或磷酸缓冲液中所含的离子。

如前述的试剂盒，所述荧光染色剂为吲哚菁绿水溶液；所述吲哚菁绿水溶液中吲哚菁绿的浓度为2～3mg/ml。

如前述的试剂盒，所述吲哚菁绿水溶液中吲哚菁绿的浓度为2.5mg/ml。

如前述的试剂盒，试剂盒内每个最小使用单元含有6～15mg的吲哚菁绿。

本发明还提供了前述试剂盒的使用方法，包括：

(1)将吲哚菁绿溶液通过外周血注射入人体；

(2)荧光造影设备检测甲状旁腺。

如前述的方法，步骤(1)所述吲哚菁绿溶液浓度为2～3mg/ml；和/或所述吲哚菁绿的单次注射剂量为3～5ml。

如前述的方法，其特征在于：步骤(1)所述注射在10s以内完成。

本发明还提供了吲哚菁绿在制备甲状旁腺血供检测试剂盒中的用途。

如前述的用途，所述吲哚菁绿的工作浓度为2～3mg/ml；所述工作浓度为注射时的浓度。

本发明的试剂盒能帮助医生准确判断甲状旁腺血供是否受损。临床实验证明，本发明在甲状腺全切及中央区淋巴结清扫手术中，能指导医生关于是否保留或者移植的决策，从而降低患者术后暂时性及永久性甲状旁腺功能减退的并发症发生率，提高甲状腺手术的安全性。

本发明的试剂盒对患者是安全的。临床实验的受试者均未出现过敏、休克现象，肝肾功能与对照组无统计学显著差别。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过具体实施方式对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1是荧光显像提示甲状旁腺呈黑色(评分0)的示例图。

图2是荧光显像提示甲状旁腺呈灰色(评分1)的示例图。

图3是荧光显像提示甲状旁腺呈白色(评分2)的示例图。

具体实施方式

实施例1本发明试剂盒的组成

包括2.5mg/ml的ICG水溶液；也可以是ICG粉末，使用时配制为2.5mg/ml的水溶液；所述水溶液中还可以包含生理盐水或者磷酸缓冲液中的溶质。

单次用量单元为4ml。

实施例2本发明试剂盒的组成

包括2mg/ml的ICG水溶液；也可以是ICG粉末，使用时配制为2mg/ml的水溶液；所述水溶液中还可以包含生理盐水或者磷酸缓冲液中的溶质。

单次用量单元为3ml。

实施例3本发明试剂盒的组成

包括3mg/ml的ICG水溶液；也可以是ICG粉末，使用时配制为3mg/ml的水溶液；所述水溶液中还可以包含生理盐水或者磷酸缓冲液中的溶质。

单次用量单元为5ml。

实施例4本发明试剂盒的使用方法

在甲状腺手术中需要判断甲状旁腺血供情况时，取本发明试剂盒单次用量单元对患者进行外周静脉注射，10s内注射完。可以反复注射，但最大剂量不超过5mg/kg/d。

注射1-2min后，采用连接至荧光造影系统的腹腔镜镜头，在手术中进行采图。

甲状旁腺血供显像采用评分标准：

黑色-0分(如图1所示)，提示血供障碍，进行甲状旁腺自体移植；

灰色-1分(如图2所示)，提示血供轻度受损，可移植，可原位保留，手术结束时再次确认血供；

白色-2分(如图3所示)，提示血供良好，原位保留。

为了进一步说明本发明的效果，有以下实验例：

实验例临床检测

1、实验方法

(A)实验对象

选取2017年6月至2018年1月的60例甲状腺乳头状癌(PTC)手术病人，所有患者术前穿刺提示为PTC，术前签署知情同意书，然后采用计算机随机分组的方法进行分组：实验组(30例)，对照组(30例)。

纳入标准：PTC患者初次手术，行甲状腺全切+双侧中央区淋巴结清扫(包括侧区)

排除标准：术前甲状旁腺激素(PTH)异常、再次手术、非PTC、腺叶切除、单侧中央区淋巴结清扫

(B)术中甲状旁腺血供辨识方法分组

实验组：在甲状腺手术中需要判断甲状旁腺血供情况时，取本发明试剂盒单次用量单元对患者进行外周静脉注射，10s内注射完。1-2min后使用NOVADAQ的荧光造影系统(PC9000)进行观察采图。吲哚菁绿对甲状旁腺血供显像采用评分标准(吲哚菁绿显像：黑色-0分，移植；灰色-1分，间隔15-30min再次观察，若向黑色转化，移植；若无明显变化或向白色转化，原位保留；白色-2分，原位保留)。

对照组：在甲状腺手术中需要判断甲状旁腺血供情况时，手术医生根据肉眼观察甲状旁腺颜色变化决定是否移植(颜色变为暗黑色或深黑色，即需要移植；其余均原位保留)。

(C)信息采集

采集指标包括：

(1)术前：基本信息(年龄、性别、合并症等)、PTH、血钙、维生素D；

(2)术中：记录发现甲状旁腺个数、类型、原位保留及移植个数、甲状旁腺血供情况(吲哚菁绿)；

(3)术后：暂时性和永久性甲状旁腺功能低下的发生率(6个月内PTH恢复正常定义为暂时性甲状旁腺功能低下；6个月PTH仍未恢复至正常水平，则定义为永久性甲状旁腺功能低下)，PTH的恢复水平(术后1天，1月，6月)，病理报告是否存在误切；

(4)随访：6个月，随访指标包括PTH、血钙、维生素D水平，是否行131I治疗。

检测术前、术中、术后(1天、1个月及6个月)的PTH水平，以及手术后住院时间。6个月内PTH恢复正常定义为暂时性甲状旁腺功能低下；6个月PTH仍未恢复至正常水平，则定义为永久性甲状旁腺功能低下。

两组患者的肝功能(ALT、AST)、肾功能(肌酐、尿素氮)数据也被采集，用于评价本发明的安全性。

(D)统计差异性分析

采用SPSS19.0对实验组和对照组进行统计分析。

2、实验结果

①有效性评价

结果显示，PTC患者行甲状腺全切+双侧中央区淋巴结清扫时，术中使用ICG荧光显像能显著减少术后暂时性甲状旁腺功能低下的发生(实验组vs对照组：5/30vs 13/30，P＜0.05)；减少术后住院时间(实验组vs对照组：2.03±0.41vs 2.30±0.54天，P＜0.05)；有利于术后(1天、1个月及6个月)PTH水平的恢复(实验组vs对照组：术后1天-2.37±1.32vs2.02±1.14pmol/L，P＜0.05；术后1个月-3.68±1.35vs 3.27±1.24pmol/L，P＜0.05；术后6个月-3.97±1.62vs 3.45±1.79pmol/L，P＜0.05)。两组中永久性甲状旁腺功能低下的发生率无统计学差异(0/30vs 1/30，P＞0.05)。

因此，PTC患者行甲状腺全切+双侧中央区淋巴结清扫时，术中使用ICG荧光显像能显著减少术后暂时性甲状旁腺功能低下的发生，减少术后住院时间，促进甲状旁腺功能的快速恢复。

②安全性评价

术中术后实验组所有患者未出现过敏、休克现象；两组患者的肝功能(ALT、AST)、肾功能(肌酐、尿素氮)比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

3、结论

综上，本发明可以辅助判断甲状旁腺血供是否受损，从而帮助决定甲状旁腺原位保留还是自体移植。本发明能显著减少术后暂时性甲状旁腺功能低下的发生，减少术后住院时间，促进甲状旁腺功能的快速恢复，并且使用安全可靠，临床应用前景良好。

Claims (10)

1.一种甲状旁腺血供检测试剂盒，其特征在于：它包括荧光染色剂；

所述荧光染色剂为吲哚菁绿水溶液或吲哚菁绿干粉。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述水溶液中还含有生理盐水或磷酸缓冲液中所含的离子。

3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述荧光染色剂为吲哚菁绿水溶液；

所述吲哚菁绿水溶液中吲哚菁绿的浓度为2～3mg/ml。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述吲哚菁绿水溶液中吲哚菁绿的浓度为2.5mg/ml。

5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：试剂盒内每个最小使用单元含有6～15mg的吲哚菁绿。

6.权利要求1～5中任一所述试剂盒的使用方法，其特征在于，包括：

(1)将吲哚菁绿溶液通过外周血注射入人体；

(2)荧光造影设备检测甲状旁腺。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤(1)所述吲哚菁绿溶液浓度为2～3mg/ml；和/或所述吲哚菁绿的单次注射剂量为3～5ml。

8.如权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤(1)所述注射在10s以内完成。

9.吲哚菁绿在制备甲状旁腺血供检测试剂盒中的用途。

10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述吲哚菁绿的工作浓度为2～3mg/ml；所述工作浓度为注射时的浓度。