CN109819942A - 一种松针鞘瘿蚊越冬幼虫分离方法及其应用 - Google Patents

一种松针鞘瘿蚊越冬幼虫分离方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种松针鞘瘿蚊越冬幼虫分离方法及其应用，所述分离方法包括：取待检土样置于第一分样筛中筛出土样中的枯枝落叶和大型砂砾；将筛下的土样置于第二分样筛中筛出土样中型砂砾；将筛下的土样置于第三分样筛中筛下土壤中的细土；将装有土样的第三分样筛进行水浴振荡处理；将水浴振荡处理后的第三分样筛置于清水中，搅拌去除漂浮物后，用漏勺捞起幼虫，反复至将第三分样筛中的幼虫捞取完毕。本发明分离方法能够快速从土壤中分离松针鞘瘿蚊越冬幼虫并进行收集，简单易行，且不需要复杂设备，极大节约人力物力成本，显著提高检出速度效率，且明显降低漏检率，因此具有良好的实际应用之价值。

Description

一种松针鞘瘿蚊越冬幼虫分离方法及其应用
技术领域
本发明属于病虫害监测与防治技术领域，具体涉及一种松针鞘瘿蚊越冬幼虫分离方法及其应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
松针鞘瘿蚊(Thecodiplosis Japonensis Uchida&Inouye)属双翅目(Diplera)，瘿蚊科(Cecidomyidae)，鞘瘿蚊属(Thecodiplosis)，是我国新发现的危害黑松、赤松和油松等松科植物的重要入侵性害虫。该虫以幼虫匿居在松针基部内，吸吮叶基汁液为害，导致针叶基部膨大形成虫瘿，生长停滞，逐渐枯黄脱落。经2-3年连续危害会导致寄主树势显著衰弱，当年生枝条枯梢率达50％的植株可致死。严重损害了沿海防护林和生态公益林的生态效益和景观价值，成为影响区域经济和生态安全的重要生物危害因子。
松针鞘瘿蚊主要以幼虫在5-10cm厚的壤质沙土内越冬，越冬虫口调查是开展虫情监测和预报的重要内容之一，可为制定该虫的有效防治措施提供基础依据。发明人发现，目前主要采用手捡法(将采集的土样带回实验室，用镊子或昆虫针一点一点摊开寻找里面的越冬幼虫)确定土样中越冬幼虫的虫口数量，费工费时效率低下，且存在较高的漏检率。
发明内容
针对上述现有技术的不足，本发明提供一种松针鞘瘿蚊越冬幼虫分离方法及其应用，本发明通过多次分离待测土样并采用水浴方式，快速从土壤中分离松针鞘瘿蚊越冬幼虫并进行收集统计，因此具有良好的实际应用之价值。
本发明是通过如下技术方案实现的：
本发明的第一个方面，提供一种松针鞘瘿蚊越冬幼虫分离方法，所述分离方法包括：
--取待检土样置于第一分样筛中筛出土样中的枯枝落叶和大型砂砾；
--将筛下的土样置于第二分样筛中筛出土样中型砂砾；
--将筛下的土样置于第三分样筛中筛下土壤中的细土；
--将装有土样的第三分样筛进行水浴振荡处理；
--将水浴振荡处理后的第三分样筛置于清水中，搅拌去除漂浮物后，用漏勺捞起幼虫，反复至将第三分样筛中的幼虫捞取完毕。
进一步的，所述第一分样筛的孔径3-5mm，优选4mm；
进一步的，所述第二分样筛的孔径1-2mm，优选1.6mm；
进一步的，所述第三分样筛的孔径0.3-0.5mm，优选0.45mm。
进一步的，所述水浴振荡处理具体条件为：优选采用往复式震荡处理，振荡频率30-200转/分，优选80-100转/分；振荡幅度：10-30mm，优选20mm；温度设置为6-25℃，优选10-15℃。
更进一步的，水浴振荡处理过程中，水浴用水浑浊后及时更换，振荡水浴处理结束时保持水浴用水的清澈。
进一步的，所述漏勺孔径不大于0.35mm，因松针鞘瘿蚊越冬幼虫体型普遍大于上述孔径大小，因此采用上述孔径，可有效捞出所有松针鞘瘿蚊越冬幼虫。
本发明的第二个方面，提供上述分离方法在分离筛选土壤昆虫中的应用。
与现有技术相比，本发明取得的有益效果是：
本发明首次提供一种松针鞘瘿蚊越冬幼虫快速分离方法，与传统采用手检法处理方式相比，本发明分离方法对土样中土壤性状要求低。传统手捡法要求土壤干燥松散不黏连，而本发明分离方法实际对任何性状的土壤均可实现快速高效分离。
同时，本发明的分离方法对松针鞘瘿蚊幼虫无伤害。实际上，传统手捡法需反复拨弄带虫土壤才能将幼虫辨识并分离开来(对操作人员而言，显然需要高度集中注意力，因此非常容易疲劳，从而降低工作效率)，这极易造成柔软的虫体被坚硬固体伤害，并且在这个过程中将遭受较长时间的干旱环境；而本发明方法全过程可保持松针鞘瘿蚊在适宜栖境(该虫喜好潮湿湿润的环境)，且在分离过程中则无外力损伤虫体，因此分离的幼虫可为试验观察提供健康虫源；而且，本发明显著提高分离效率，经试验证实，本发明捡出速度是传统手检法的4倍以上，同时显著降低漏检率。
综上，本发明针对松针鞘瘿蚊越冬幼虫的分离方法简单易行，且不需要复杂设备，极大节约人力物力成本，显著提高检出速度效率，明显降低漏检率，因此具有良好的实际应用之价值。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本发明使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
如前所述，发明人发现，针对松针鞘瘿蚊越冬幼虫目前主要采用手捡法(将采集的土样带回实验室，用镊子或昆虫针一点一点摊开寻找里面的越冬幼虫)确定土样中越冬幼虫的虫口数量，费工费时效率低下。
有鉴于此，本发明的一个具体实施方式中，提供一种松针鞘瘿蚊越冬幼虫分离方法，所述分离方法包括：
(1)取待检土样置于第一分样筛中筛出土样中的枯枝落叶和大型砂砾；
(2)将筛下的土样置于第二分样筛中筛出土样中型砂砾；
(3)将筛下的土样置于第三分样筛中筛下土壤中的细土；
(4)将装有土样的第三分样筛进行水浴振荡处理；
(5)将水浴振荡处理后的第三分样筛置于清水中，搅拌去除漂浮物后，用漏勺捞起幼虫，反复至将第三分样筛中的幼虫捞取完毕。
本发明的又一具体实施方式中，所述第一分样筛的孔径3-5mm，优选4mm；
本发明的又一具体实施方式中，所述第二分样筛的孔径1-2mm，优选1.6mm；
本发明的又一具体实施方式中，所述第三分样筛的孔径0.3-0.5mm，优选0.45mm。
通过利用不同孔径的分样筛，从而依次将土样中的枯枝落叶和大型砂砾、中型砂砾和细土分离，便于后续从土样中分离幼虫。
本发明的又一具体实施方式中，所述水浴振荡处理具体条件为：采用往复式震荡处理，振荡频率30-200转/分，优选80-100转/分；振荡幅度：10-30mm，优选20mm；温度设置为6-25℃，优选10-15℃；通过使用往复式震荡带动水流，同时控制上述振荡频率、幅度等，有利于快速将将幼虫和土壤细粒剥离并通过筛孔使土壤细粒漏出；
本发明的又一具体实施方式中，水浴振荡处理过程中，水浴用水浑浊后及时更换，振荡水浴处理结束时保持水浴用水的清澈。
本发明的又一具体实施方式中，所述漏勺孔径不大于0.35mm，因松针鞘瘿蚊越冬幼虫体型均大于上述孔径大小，因此采用上述孔径，可有效捞出全部松针鞘瘿蚊越冬幼虫。
本发明的又一具体实施方式中，所述步骤(5)具体方法为：将第三分样筛置于清水中，搅拌后用第一漏勺滤去漂浮物，便于后续捞取幼虫；然后分离与细沙混合的幼虫：将第三分样筛一侧抬起，然后快速下压分样筛，使得幼虫与筛网分离，同时第二漏勺将慢慢下沉的幼虫捞起并计数。如此反复，直至将分样筛中幼虫全部捞取完毕。
本发明的又一具体实施方式中，水面不高于分样筛顶部，优选水面为分样筛高度的1/2；既便于后续分离漂浮物，同时防止幼虫飘出。
本发明的又一具体实施方式中，所述第一漏勺孔径控制为2mm；便于捞取漂浮物；第二漏勺孔径控制为不大于0.35mm(优选为0.35mm)，便于捞取幼虫。
本发明的又一具体实施方式中，提供上述分离方法在分离筛选土壤昆虫中的应用。所述昆虫包括但不限于松针鞘瘿蚊越冬幼虫。
以下通过实施例对本发明做进一步解释说明，但不构成对本发明的限制。应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例1
1.取土样1000g，先用1#分样筛(直径20cm，高度6cm，孔径4mm，304不锈钢材质)将土样中的枯枝落叶和大型砂砾筛出，分样筛下铺一黑色聚乙烯塑料薄膜(0.5m×0.5m，厚度0.05-0.12mm，优选0.1mm)用于接收筛下来的有虫土样备用。
2.将1#分样筛筛出的有虫土样转入2#分样筛(直径30cm，高度6cm，孔径1.6mm，304不锈钢材质)将土样中的中型砂砾筛出，分样筛下同样铺一黑色聚乙烯塑料薄膜(0.5m×0.5m，厚度0.05-0.12mm，优选0.1mm)用于接收筛下来的有虫土样备用。
3.将2#分样筛筛出的有虫土样转入3#分样筛(直径30cm，高度6cm，孔径0.45mm，优选304不锈钢材质)将土样中的细土筛出。
4.将装有带虫土样的3#分样筛置于水浴振荡器上(水箱尺寸长度不低于45cm，宽度不低于35cm，高度不低于15cm；振荡频率100转/分；振荡幅度：20mm；恒温范围：10℃；振荡方法：往复式)，震荡20分钟，震荡期间及时更换振荡器中的水，直至浑水变清。
5.将水浴后的3#分样筛置于塑料水盆内(水盆上口径不低于45cm，下口径不低于35cm，深度不低于15cm)，加水至分样筛高度的1/2，搅拌1-2min后用1#漏勺(勺宽10cm，孔径2mm，304不锈钢材质)滤去上次漂浮物。然后开始分离与细沙混合的幼虫，具体方法为：单手握住分样筛一侧轻轻抬起3-5cm，然后快速下压分样筛，同时用2#漏勺(勺宽12cm，孔径0.35mm，304不锈钢材质)将慢慢下沉的幼虫捞起并计数。如此反复，直至将分样筛中幼虫全部捞取完毕。
实施例2
1.取土样1500g，先用1#分样筛(直径20cm，高度6cm，孔径5mm，304不锈钢材质)将土样中的枯枝落叶和大型砂砾筛出，分样筛下铺一黑色聚乙烯塑料薄膜(0.5m×0.5m，厚度0.05-0.12mm，优选0.1mm)用于接收筛下来的有虫土样备用。
2.将1#分样筛筛出的有虫土样转入2#分样筛(直径30cm，高度6cm，孔径2mm，304不锈钢材质)将土样中的中型砂砾筛出，分样筛下同样铺一黑色聚乙烯塑料薄膜(0.5m×0.5m，厚度0.05-0.12mm，优选0.1mm)用于接收筛下来的有虫土样备用。
3.将2#分样筛筛出的有虫土样转入3#分样筛(直径30cm，高度6cm，孔径0.45mm，优选304不锈钢材质)将土样中的细土筛出。
4.将装有带虫土样的3#分样筛置于水浴振荡器上(水箱尺寸长度不低于45cm，宽度不低于35cm，高度不低于15cm；振荡频率200转/分；振荡幅度：20mm；恒温范围：12℃；振荡方法：往复式)，震荡20分钟，震荡期间及时更换振荡器中的水，直至浑水变清。
5.将水浴后的3#分样筛置于塑料水盆内(水盆上口径不低于45cm，下口径不低于35cm，深度不低于15cm)，加水至分样筛高度的1/2，搅拌1-2min后用1#漏勺(勺宽10cm，孔径2mm，304不锈钢材质)滤去上次漂浮物。然后开始分离与细沙混合的幼虫，具体方法为：单手握住分样筛一侧轻轻抬起3-5cm，然后快速下压分样筛，同时用2#漏勺(勺宽12cm，孔径0.35mm，304不锈钢材质)将慢慢下沉的幼虫捞起并计数。如此反复，直至将分样筛中幼虫全部捞取完毕。
实施例3
1.取土样1200g，先用1#分样筛(直径20cm，高度6cm，孔径5mm，304不锈钢材质)将土样中的枯枝落叶和大型砂砾筛出，分样筛下铺一黑色聚乙烯塑料薄膜(0.5m×0.5m，厚度0.05-0.12mm，优选0.1mm)用于接收筛下来的有虫土样备用。
2.将1#分样筛筛出的有虫土样转入2#分样筛(直径30cm，高度6cm，孔径1.6mm，304不锈钢材质)将土样中的中型砂砾筛出，分样筛下同样铺一黑色聚乙烯塑料薄膜(0.5m×0.5m，厚度0.05-0.12mm，优选0.1mm)用于接收筛下来的有虫土样备用。
3.将2#分样筛筛出的有虫土样转入3#分样筛(直径30cm，高度6cm，孔径0.45mm，优选304不锈钢材质)将土样中的细土筛出。
4.将装有带虫土样的3#分样筛置于水浴振荡器上(水箱尺寸长度不低于45cm，宽度不低于35cm，高度不低于15cm；振荡频率150转/分；振荡幅度：20mm；恒温范围：15℃；振荡方法：往复式)，震荡20分钟，震荡期间及时更换振荡器中的水，直至浑水变清。
5.将水浴后的3#分样筛置于塑料水盆内(水盆上口径不低于45cm，下口径不低于35cm，深度不低于15cm)，加水至分样筛高度的1/2，搅拌1-2min后用1#漏勺(勺宽10cm，孔径2mm，304不锈钢材质)滤去上次漂浮物。然后开始分离与细沙混合的幼虫，具体方法为：单手握住分样筛一侧轻轻抬起3-5cm，然后快速下压分样筛，同时用2#漏勺(勺宽12cm，孔径0.35mm，304不锈钢材质)将慢慢下沉的幼虫捞起并计数。如此反复，直至将分样筛中幼虫全部捞取完毕。
应用案例一：在青岛市黄岛区采集的2批次共30个相同体积的土样，分别采用传统手捡法和本发明实施例1的方法对越冬幼虫虫口数量的分离结果表明，相同体积的土样，采用手捡法平均每人每小时可分离幼虫58.64头，而采用本发明分离方法，平均每人每小时可分离幼虫251.90头，效率提高4.28倍(表1)。
表1松针鞘瘿蚊越冬幼虫分离时效统计表
应用案例二：在手捡法分离后的土壤随机取样3个(每个小样质量在150-180g)，再用本发明实施例1方法分离，结果表明，手捡法漏检率分别为10.11％、8.30％和7.70％，平均为8.70％。该试验表明采用本发明分离方法能明显降低漏检率。
表2松针鞘瘿蚊越冬幼虫手捡法分离的漏检率
土样编号 土样质量 幼虫数量 漏检率
1 178.07 18 10.11
2 192.75 16 8.30
3 168.8 13 7.70
平均 179.87 15.67 8.70
应注意的是，以上实例仅用于说明本发明的技术方案而非对其进行限制。尽管参照所给出的实例对本发明进行了详细说明，但是本领域的普通技术人员可根据需要对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.一种松针鞘瘿蚊越冬幼虫分离方法，其特征在于，所述分离方法包括：
--取待检土样置于第一分样筛中筛出土样中的枯枝落叶和大型砂砾；
--将筛下的土样置于第二分样筛中筛出土样中型砂砾；
--将筛下的土样置于第三分样筛中筛下土壤中的细土；
--将装有土样的第三分样筛进行水浴振荡处理；
--将水浴振荡处理后的第三分样筛置于清水中，搅拌去除漂浮物后，用漏勺捞起幼虫，反复至将第三分样筛中的幼虫捞取完毕。
2.如权利要求1所述的一种分离方法，其特征在于，所述第一分样筛的孔径3-5mm，优选4mm。
3.如权利要求1所述的一种分离方法，其特征在于，所述第二分样筛的孔径1-2mm，优选1.6mm。
4.如权利要求1所述的一种分离方法，其特征在于，所述第三分样筛的孔径0.3-0.5mm，优选0.45mm。
5.如权利要求1所述的一种分离方法，其特征在于，所述水浴振荡处理具体条件为：采用往复式震荡处理。
6.如权利要求1所述的一种分离方法，其特征在于，振荡频率30-200转/分；振荡幅度：10-30mm；温度设置为6-25℃。
7.如权利要求6所述的一种分离方法，其特征在于，振荡频率80-100转/分；振荡幅度：20mm；温度设置为10-15℃。
8.如权利要求1所述的一种分离方法，其特征在于，水浴振荡处理过程中，水浴用水浑浊后及时更换，振荡水浴处理结束时保持水浴用水的清澈。
9.如权利要求1所述的一种分离方法，其特征在于，所述漏勺孔径不大于0.35mm。
10.权利要求1-9任一项所述分离方法在分离筛选土壤昆虫中的应用。
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