CN109793809A - 一种用于预防和治疗高血脂症的物质及制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种用于预防和治疗高血脂症的物质及制备方法和用途。该物质为橡胶树的种子的脂溶性部分的不皂化物,可以应用到药品、保健食品、食品中,用于预防和治疗高血脂症。高血脂症患者每日通过服用或者食用添加了该物质的药品、保健食品、食品即可获得良好的治疗与辅助治疗效果。
Description
技术领域
本发明属于生物医药领域,具体的说本发明涉及一种用于预防和治疗高血脂症的物质(橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物)及其应用。
背景技术
近些年来,高脂血症的发生率呈明显上升趋势,发病年龄也有所提前,对人体健康危害极大,这种趋势主要是随着人们社会的进步,生活水平的不断提高,人们的饮食习惯也逐渐发生着改变,由原来的粗茶淡饭到现在的大鱼大肉、暴食暴饮,造成现在很多人都患有高血压症。
高血脂是指血中胆固醇(TC)或甘油三酯(TG)过高或高密度脂蛋白胆固醇(HLD-C)过低,现代医学称之为血脂异常。如果血脂过多,容易造成“血稠”,在血管壁上沉积,逐渐堵塞血管,使血流变慢,严重血流中断。
目前临床上用于治疗高血脂的药物主要以他汀类为主,药效显著但具有副作用。因此,开发可以用来预防和治疗高血脂,且没有毒副作用的物质极其重要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于预防和治疗高血脂症的物质(橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物)及制备方法和应用。该物质为橡胶树的种子的脂溶性部分的不皂化物,可以应用到药品、保健食品、食品中,用于预防和治疗高血脂症。高脂血脂症患者每日通过服用或者食用添加了该物质的药品、保健食品、食品即可获得良好的治疗与辅助治疗效果。
为了实现本发明的上述目的,本发明提供了如下的技术方案:
橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物,该橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物由下述方法种制备而得:
以新鲜橡胶树种子为原料,烘干脱壳之后,制备种仁,种仁通过机械挤压法、溶剂浸出法、超临界萃取法中的一种或几种制得橡胶树种子的脂溶物,以橡胶树种子的脂溶物为原料,加入过量的氢氧化钾-乙醇溶液进行皂化反应,皂化反应结束之后,在真空条件下,加热回收乙醇,之后加入不皂化物萃取剂乙醚、乙酸乙酯、正己烷、6号溶剂中的一种进行萃取,分离出上层萃取液,在真空条件下二次加热,回收萃取剂,剩余的液态物质为橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物。
本发明同时提供了含有治疗有效量的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物和药学上可接受的载体的药物组合物。
以及,保健食品,由橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物和保健食品常用载体所组成。
和食品,由橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物和食品常用载体所组成。
本发明还提供了橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物在制备用于治疗高血脂症的药物中的应用。
如所述的应用,其中橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物作为药物唯一活性成分。
本发明此外还提供了橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物在制备用于预防和辅助治疗高血脂症的保健食品中的应用。
如所述的应用,其中橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物为保健食品的唯一活性成分。
本发明另外还提供了橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物在制备用于预防和辅助治疗高血脂症的食品中的应用。
如所述的应用,其中橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物为食品的唯一活性成分。
根据高血脂症动物模型的实验数据,以及其它的实验数据,与现有的针对高血脂症患者进行治疗与辅助治疗的药品相比,本发明具有如下优点:(1)为高血脂的预防与辅助治疗提供了一种全新的物质;(2)无副作用,可以供高血脂患者长期使用;(3) 预防和治疗高血脂效果显著,实验结果表明本发明物质能显著降低小鼠血清中的胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,明显升高高密度脂蛋白胆固醇(HLD-C)水平。
具体实施方式
下面结合本发明的实施例来对本发明做进一步说明,但并不以此来限定本发明的内容。
实施例1
本实例为证明本发明物质对小鼠血清血脂水平的影响。给予受试物前,用高脂料造模。造模完成后给予对照物和本发明物进行实验,实验结束后,测定小鼠血清中CHO、TG、HDL-C、LDL-C含量。具体实验方法及步骤如下:
1 实验动物
选用北京维通利华实验动物技术有限公司提供的健康成年清洁级BALB/c雄性小鼠(许可证编号为SCXK(京)2012-0001),小鼠体重范围为20.0±2.0g。
2 实验设计
BALB/c雄性小鼠适应性饲养1周后,根据小鼠体重,将45只小鼠随机分为3组,分别为:高剂量物质对照组、本发明物质低剂量组和本发明物质高剂量组,每组15只。各组小鼠均给于高脂料,高脂饲料配方为:猪油18%,蔗糖10%,胆固醇0.9%,剩余的均为基础饲料。
3 剂量选择与受试物给予方式:
小鼠适应饲养一个周后连续灌胃给予受试物。受试物人体推荐量为1.5g/日,按成人60kg体重计,相当于每日每公斤体重推荐量为25.0mg。高、低剂量组小鼠分别给予750.0mg/kg.BW和250.0mg/kg.BW的受试物,分别相当人体推荐量的30、10倍剂量,各剂量组给予本发明制备的不皂化物,高剂量物质对照组给予橄榄油制备的不皂化物。连续灌胃30天后,摘眼球取血(采血前禁食12h,不禁水),3000r/min离心15min分离血清,按照试剂盒说明要求测定小鼠血清中CHO、TG、HDL-C、LDL-C含量。
4 试验方法
按试验设计对各组小鼠进行饲喂,小鼠自由采食与饮水,饲养温度20-25℃,湿度40%-45%。每天上午9:00灌胃。
灌胃第30天,摘眼球取血(采血前禁食12h,不禁水),3000r/min离心15min分离血清,按照试剂盒说明要求测定小鼠血清中CHO、TG、HDL-C、LDL-C含量。
5 数据处理与结果判定
实验数据录入计算机,以EXCEL软件建立数据库,采用SPSS19.0软件进行统计分析。若各组方差齐,采用单因素方差分析法(oneway-ANOVA),以α=0.05作为显著性水平,计算F值,若F<F0.05,得结论各组差异无显著性;若F≥F0.05, P≤0.05,则用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计。若不能满足方差齐性,则采用Duncan’s 法进行多重比较。实验结果以“平均值±标准差((±SD)”表示。
6 结果与分析
表1 本发明物质对小鼠血清胆固醇水平的影响(±SD)
分组 | 动物数(只) | CHO | TG | HDL-C | LDL-C |
高剂量物质对照组 | 15 | 3.12±0.34A | 0.98±0.21A | 1.49±0.13A | 0.67±0.16A |
本发明物质低剂量组 | 15 | 2.59±0.46B | 0.67±0.26B | 1.84±0.36B | 0.47±0.12B |
本发明物质高剂量组 | 15 | 2.16±0.13C | 0.61±0.20B | 2.23±0.24C | 0.24±0.04C |
注:表中同列数据不同小写字母表示差异显著(P<0.05);不同大写字母表示差异极显著(P<0.01);相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
实验结果表明小鼠灌胃30d后,本发明物质剂量组与高脂模型对照组相比,血清CHO、TG、LDL-C含量均降低,且差异极显著(P<0.01);本发明物质剂量组与高剂量物质对照组相比,血清HDL-C含量均升高,且差异极显著(P<0.01)。
实施例2
以100kg新鲜橡胶树种子为原料,烘干脱壳之后,制备种仁40kg。种仁物料在热到80-100℃,然后经过静态的挤压,压力为50MPa,挤出12kg液态物质即为本发明的物质橡胶树种子脂溶性部分。
以10kg橡胶树种子的脂溶物为原料,加入10kg氢氧化钾-乙醇溶液进行皂化反应,氢氧化钾在乙醇中的质量百分比浓度为22%。皂化反应结束之后,0.01atm真空条件下,加热至120℃回收乙醇;之后加入5kg乙醚作为不皂化物萃取剂萃取,分离出上层萃取液,在0.01atm真空条件下,加热至85℃回收萃取剂,得到400g液态物质,即为本发明的橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物。
本效果例在医院中随机选取体检胆固醇偏高的16位患者参与验证,将16位志愿者随机分为两组,每组8人,其中一组每天早中晚餐前食用本发明物物质橡胶树种子油脂溶性部分的不皂化物,食用量为1.5g/日,食用方法为每日三餐前服用。另外一组食用由橄榄油制成的脂溶性部分不皂化物,食用量和食用方法与本发明物质相同。观察2个月胆固醇数据,并制备表格如下表2、表3:(单位:mmol/L)
表2 橄榄油不皂化物数据
志愿者编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
原胆固醇数据 | 8.34 | 8.35 | 7.55 | 10.16 | 11.27 | 9.49 | 11.32 | 7.64 |
一个月后 | 8.21 | 7.97 | 7.43 | 9.91 | 10.71 | 8.92 | 10.51 | 7.33 |
两个月后 | 8.12 | 7.09 | 7.13 | 9.72 | 10.43 | 8.59 | 10.01 | 7.34 |
表3 本发明不皂化物数据
志愿者编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
原胆固醇数据 | 8.52 | 8.27 | 7.51 | 8.21 | 10.17 | 11.21 | 12.12 | 7.36 |
一个月后 | 6.51 | 6.31 | 5.13 | 6.54 | 8.21 | 9.33 | 9.71 | 5.12 |
两个月后 | 4.73 | 5.07 | 4.01 | 5.13 | 6.53 | 5.81 | 6.01 | 4.11 |
实验结果表明,本发明物质对于降低人体胆固醇偏高有明显效果。
实施例3
以100kg新鲜橡胶树种子为原料,烘干脱壳之后,制备种仁40kg。种仁物料在热到80-100℃,然后经过动态的螺旋挤压,螺旋挤压时间为45秒左右,挤出15kg液态物质即为本发明的物质橡胶树种子脂溶性部分。
以10kg橡胶树种子的脂溶物为原料,加入10kg氢氧化钾-乙醇溶液进行皂化反应,氢氧化钾在乙醇中的质量百分比浓度为22%。皂化反应结束之后,0.005atm真空条件下,加热至120℃回收乙醇;之后加入5kg乙酸乙酯作为不皂化物萃取剂萃取,分离出上层萃取液,在0.01atm真空条件下,加热至120℃回收萃取剂,得到440g剩余的液态物质即为本发明的橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物。
本效果例为了验证本发明对人体具有辅助降血脂性能,本发明人组织100位志愿者进行测试。志愿者的选择标准为在在正常饮食情况下,检测禁食12-14小时后的血脂水平,半年内至少有两次血脂检测,血清总胆固醇在5.18-6.21mmol/L,并且血清甘油三酯在1.70-2.25mmol/L。其中50位志愿者按食用量为2.0g/日,食用方法为每日三餐前服用本发明的物质橡胶树种子油脂溶性部分的不皂化物,另外50位志愿者作为对照服用安慰剂。受试样品给予时间45天。实验期间对照组和试食组原生活、饮食不变。测试结束后测试志愿者的测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,如TC降低>10%、TG降低>15%、HDL-C上升>0.104mmol/L,则判定具有辅助降血脂功效有效,如达不到有效的标准,则判断无效。
通过志愿者的测试:50位服用安慰剂的志愿者血清TC、TG、LDL-C水平测试前后均无明显变化;50位服用本发明物质的志愿者中49位达到有效标准,总有效率为98%。此外,所有志愿者的试验过程中及试验结束后6个月内,均未出现对肌体健康的影响。
实施例4
以100kg新鲜橡胶树种子为原料,烘干脱壳之后,制备种仁40kg。然后将种仁进行膨化处理之后,放入密封的浸出容器,加入2倍重量的溶剂。在55℃(低于溶剂沸点)条件与常压下,对物料与溶剂进行搅拌与混合,让物料与溶剂充分接触。之后静置沉淀,沥出溶剂,然后在120℃(高于溶剂沸点温度)与100Pa真空条件下,让溶剂挥发,留下来18kg液态物质即为本发明的物质橡胶树种子脂溶性部分。
以10kg橡胶树种子的脂溶物为原料,加入10kg氢氧化钾-乙醇溶液进行皂化反应,氢氧化钾在乙醇中的质量百分比浓度为22%。皂化反应结束之后,0.005atm真空条件下,加热至120℃回收乙醇;之后加入正己烷作为不皂化物萃取剂萃取,分离出上层萃取液,在0.005atm真空条件下,加热至120℃回收萃取剂,得到430g液态物质即为本发明的橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物。
本效果例为跟踪100名高血脂患者,连续食用本发明提供的脂溶性部分的不皂化物三个月,其中食用量为2.5g/日,食用方法为每日三餐前服用本发明的物质橡胶树种子油脂溶性部分的不皂化物,开始一个月,不降低常规降血脂用药量,严格戒烟解酒,从第二个月起,开始逐渐减少常规降血脂用药量,到第三个月,停止饮用降血脂药,保持每天食用本发明提供的脂溶性部分的不皂化物,100天后,空腹测量血脂,结果见下表:
血浆总胆固醇(mmol/L) | <5.2 | <5.8 | <6.0 |
血浆甘油三酯(mmol/L) | <1.7 | <2.0 | <2.3 |
人数 | 75 | 20 | 5 |
结论 | 正常 | 正常 | 勉强正常 |
从表中可以看出,对于检测的100名高血脂患者,食用本发明提供的脂溶性分不皂化物后,可以有效降低血脂的人数为95人,其中另外5人由于年龄较大,也属正常血脂,因此高血脂患者可以放心食用本发明提供的脂溶性部分不皂化物。
实施例5
以100kg新鲜橡胶树种子为原料,烘干脱壳之后,制备种仁40kg。将种仁进行造粒处理之后,放入密封耐压的超临界萃取容器,加入溶剂,溶剂质量为物料质量的2倍。在35℃,10MPa(超过溶剂的临界温度与临界压力)的条件下,对物料与溶剂进行搅拌与混合,让物料与溶剂充分接触。之后静置沉淀,沥出溶剂,然后在25℃室温条件下,减小压力至常压(0.1MPa),让溶剂挥发,留下来18kg液态物质即为本发明的物质橡胶树种子脂溶性部分。
以10kg橡胶树种子的脂溶物为原料,加入10kg氢氧化钾-乙醇溶液进行皂化反应,氢氧化钾在乙醇中的质量百分比浓度为22%。皂化反应结束之后,0.005atm真空条件下,加热至120℃回收乙醇;之后加入5kg6号溶剂作为不皂化物萃取剂萃取,分离出上层萃取液,在0.005atm真空条件下,加热至140℃回收萃取剂,得到450g剩余的液态物质即为本发明的橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物。
林某,男,45岁,患有高血脂2年有余,经常感觉头晕胸闷、心慌心悸、四肢乏力、肢体麻木等症状,甘油三脂2.89,高密度脂蛋白胆固醇HDL-C 2.06mol/L,食用本发明脂溶性部分的不皂化物(其中食用量为3.0g/日,食用方法为每日三餐前服用)6个月后,乏力、胸闷症状消失,食用1年零八个月后甘油三酯降为正常值,食用1年零6个月后高密度脂蛋白胆固醇降为正常值。
实施例6
按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物,按该部分与赋形剂重量比1:1或1:2的比例加入赋形剂,制粒压片。片剂可以作为药品,保健食品或者食品。
实施例7
按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物,按该部分,包裹在软胶囊囊材中,按常规胶囊制剂方法制成软胶囊。软胶囊可以作为药品,保健食品或者食品。
实施例8
按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物的不皂化物,以该部分,加上乳化剂、渗透压调节剂和水,经过高压均质乳化,得到注射用乳剂。该注射用乳剂可以作为药品。
实施例9
按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物,按该部分,再按下述方法制成片剂:
片剂:橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物 100mg
淀粉 适量
玉米浆 适量
硬脂酸镁 适量
制备方法:将橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物与助剂混合,过筛,在合适的容器中均匀混合,把得到的混合物制粒压片。
实施例10
按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物,按该部分,再按下述方法制成软胶囊剂:
软胶囊剂: 橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物 1000mg
明胶 适量
甘油 适量
水 适量
制备方法:将明胶、甘油放入蒸馏水中浸泡使明胶膨胀、软化,然后搅拌混合均匀,得到囊材胶液。取出配制好的囊材胶液,涂在平坦的板表面上,使厚薄均匀,然后用90℃左右的温度加热,使表面水分蒸发,成为有一定韧性、有一定弹性的软胶片。最后用压丸模具或者自动旋转轧囊机,将橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物(1000mg)装入软胶囊皮中,生产出软胶囊。
实施例11
按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物,按该部分,再按下述方法制成软胶囊剂:
软胶囊剂: 橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物 1000mg
明胶 适量
甘油 适量
水 适量
制备方法:将明胶、甘油放入蒸馏水中浸泡使明胶膨胀、软化,然后搅拌混合均匀,得到囊材胶液。取出配制好的囊材胶液,涂在平坦的板表面上,使厚薄均匀,然后用90℃左右的温度加热,使表面水分蒸发,成为有一定韧性、有一定弹性的软胶片。最后用压丸模具或者自动旋转轧囊机,将橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物(1000mg)装入软胶囊皮中,生产出软胶囊。
实施例12
片剂:按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物10mg,乳糖180mg,淀粉55mg,硬脂酸镁5mg;
制备方法:将按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物、乳糖和淀粉混合,用水均匀湿润,把湿润后的混合物过筛并干燥,再过筛,加入硬脂酸镁,然后将混合物压片,每片重250mg,本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物含量为10mg。
实施例13
胶囊剂:按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物2000g,明胶1000g,甘油500g,水1000g;
制备方法:将明胶1000g、甘油500g,放入1000g水中浸泡使明胶膨胀、软化,然后搅拌混合均匀,得到囊材胶液。取出配制好的囊材胶液,涂在平坦的板表面上,使厚薄均匀,然后用90℃左右的温度加热,使表面水分蒸发,成为有一定韧性、有一定弹性的软胶片。最后用压丸模具或者自动旋转轧囊机,将橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物500mg装入软胶囊皮中,制得软胶囊。每粒软胶囊重800mg,本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物含量为500mg。
实施例14
注射乳剂:按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物200g,甘油25g,卵磷脂12g,水1000g,氯化钠1g,。
制备方法:精确称量按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物200g、甘油25g、卵磷脂12g,混合,加水至1000mL,添加氯化钠,将渗透压调整至350mosm/kg H2O。高压均质乳化得到乳浊液,121℃灭菌,降至室温,在无菌条件下灌装到250mL的无菌玻璃瓶中封装。每瓶注射乳剂规格为250mL,本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物含量为50g。
实施例15
食品:按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物,按该部分,与普通食用油调和,直接成为食品(食用油)
制备方法:1kg按实施例2-5中的方法制得本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物,添加到9kg大豆油中,得到10kg调和食用油。将调和食用油灌装成500g的玻璃瓶,每瓶油中本发明的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物含量为50g。
Claims (10)
1.橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物,其特征在于该橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物由下述方法种制备而得:
以新鲜橡胶树种子为原料,烘干脱壳之后,制备种仁,种仁通过机械挤压法、溶剂浸出法、超临界萃取法中的一种或几种制得橡胶树种子的脂溶物,然后以橡胶树种子的脂溶物为原料,加入过量的氢氧化钾-乙醇溶液进行皂化反应,皂化反应结束之后,在真空条件下,加热回收乙醇,之后加入不皂化物萃取剂进行萃取,所选萃取剂为乙醚、乙酸乙酯、正己烷、6号溶剂中的一种,分离出上层萃取液,在真空条件下二次加热,回收萃取剂,剩余的液态物质为橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物。
2.含有治疗有效量的权利要求1所述的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物和药学上可接受的载体的药物组合物。
3.保健食品,由权利要求1所述的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物和保健食品常用载体所组成。
4.食品,由权利要求1所述的橡胶树种子脂溶性部分的不皂化物和食品常用载体所组成。
5.橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物在制备用于预防和治疗高血脂症的药物中的应用。
6.如权利要求书5所述的应用,其特征在于,橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物为药物唯一活性成分。
7.橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物在制备用于预防和辅助治疗高血脂症的保健食品中的应用。
8.如权利要求书7所述的应用,其特征在于,橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物为保健食品的唯一活性成分。
9.橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物在制备用于预防和辅助治疗高血脂症的食品中的应用。
10.如权利要求书9所述的应用,其特征在于,橡胶树种子的脂溶性部分的不皂化物作为食品的唯一活性成分。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190524 |
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