CN109769876A - 一种防治苹果树腐烂病的复配生物农药及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明实施例公开了一种防治苹果树腐烂病的复配生物农药，所述农药包括微生物菌种水剂部分和中草药水剂部分，所述微生物菌种水剂部分包括解淀粉芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌和哈茨木霉菌；所述中草药水剂部分包括大蒜提取物、鸡血藤提取物、紫苏提取物和苦参提取物。该农药同时可以诱导苹果树产生抗性，提高土壤肥效，兼具杀菌效果，是一种肥药双效的新型生物农药。本发明实施例还提供了所述复配生物农药的制备方法。

Description

一种防治苹果树腐烂病的复配生物农药及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物农药技术领域，具体涉及一种防治苹果树腐烂病的复配生物农药及其制备方法。

背景技术

苹果树腐烂病(Valsa mali Miyabe et Yamada)别称臭皮病、烂皮病，是一类由黑腐皮壳属真菌引起的真菌型病害，具有发生普遍、危害严重及难治愈等特点，是影响苹果产量和品质的重要限制因素。苹果园一旦发生腐烂病，轻者使苹果减产，重者造成果树大量死亡甚至毁园，由此会给果农造成严重的经济损失。苹果树腐烂病已成为威胁我国苹果产业发展的重要病害。

目前，在生产上常用化学药剂进行苹果树腐烂病的田间防治。例如使用化学药剂包括多菌灵、咪鲜胺及丙环唑等来进行苹果树腐烂病的防治，多菌灵、咪鲜胺及丙环唑均已在我国苹果树防治用药名录上登记，但咪鲜胺登记的防治对象为炭疽病，暂不包括腐烂病。另外还有使用倍量式波尔多液(Cu∶CaO∶H2O＝1∶2∶200)防控苹果树腐烂病的报道，其对苹果树腐烂病菌分生孢子的萌发有较高抑制率，但其公开的为用于防治榛子白粉病的化学农药。

另外，由于化学药剂的大量、长期使用，不仅对人体健康造成了严重威胁，而且常造成环境污染和病原菌的抗药性，因此，开发环境友好型生物制剂来高效防治苹果树腐烂病已成为当前苹果生产中亟须解决的关键问题。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种防治苹果树腐烂病的复配生物农药，该农药同时可以诱导苹果树产生抗性，提高土壤肥效，兼具杀菌效果，是一种肥药双效的新型生物农药。本发明实施例还提供了所述复配生物农药的制备方法。

为实现上述目的，本发明实施例提供一种防治苹果树腐烂病的复配生物农药，所述农药包括微生物菌种水剂部分和中草药水剂部分，所述微生物菌种水剂部分包括解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、淡紫拟青霉菌(Paecilomyces lilacinus(Thom.)Samson)和哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)；所述中草药水剂部分包括大蒜提取物、鸡血藤提取物、紫苏提取物和苦参提取物。

其中，所述解淀粉芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌和哈茨木霉菌是经发酵、分离筛选得到的活菌制剂。

进一步的，所述微生物菌种水剂部分中，解淀粉芽孢杆菌的浓度为10000-100000CFU/μL，淡紫拟青霉菌的浓度为10000-100000CFU/μL，哈茨木霉菌的浓度为10000-100000CFU/μL。

进一步的，所述微生物菌种水剂部分中，解淀粉芽孢杆菌的浓度为50000-80000CFU/μL，淡紫拟青霉菌的浓度为50000-80000CFU/μL，哈茨木霉菌的浓度为50000-80000CFU/μL。

进一步的，所述中草药水剂部分中，以质量百分比计，所述大蒜提取物的浓度为2-4％，所述鸡血藤提取物的浓度为1-4％，所述紫苏提取物的浓度为1-4％，以及所述苦参提取物的浓度为1-4％。

进一步的，所述中草药水剂部分中，以质量百分比计，所述大蒜提取物的浓度为3-4％，所述鸡血藤提取物的浓度为2-3％，所述紫苏提取物的浓度为2-3％，以及所述苦参提取物的浓度为2-3％。

进一步的，所述中草药水剂部分中，以质量百分比计，还含有氯化钠3.5-12.5％，优选6-10％。

进一步的，微生物菌种水剂部分和中草药水剂部分的质量比为1:1。

本发明实施例的另一个方面还提供了所述防治苹果树腐烂病的复配生物农药的制备方法，所述制备方法包括微生物菌种水剂部分的制备方法和中草药水剂部分的制备方法，其中，

所述微生物菌种水剂部分的制备方法包括下列步骤：

(1)分别将淡紫拟青霉菌、哈茨木霉菌置于PD(土豆)液体培养基中25℃发酵培养3天，解淀粉芽孢杆菌置于牛肉膏蛋白胨培养基中25℃发酵培养3天，将三种菌体经离心冷冻干燥制成活菌制剂，

(2)将上述三种菌体的活菌制剂混合，然后加入水搅拌均匀，制成所述微生物菌种水剂部分；

所述中草药水剂部分的制备方法包括下列步骤：

(1)取大蒜压榨后滤渣，在所得汁液中加3-5倍水搅拌均匀，获得大蒜提取物稀释液，

(2)取鸡血藤、紫苏和苦参，加入3-5倍水淹没并浸泡4-8h后，加热煎煮，提取一次煎煮液；之后每次加入3-5倍水煎煮并提取煎煮液，共计提取3次，将三次提取的煎煮液合并，浓缩，获得鸡血藤提取物、紫苏提取物和苦参提取物混合浓缩液，

(3)将所述鸡血藤提取物、紫苏提取物和苦参提取物混合浓缩液加入所述大蒜提取物稀释液中并搅拌均匀获得中草药成分混合物，然后加水稀释，制成所述中草药水剂部分。

进一步的，步骤(3)中，将所述中草药成分混合物用质量百分比浓度为5-15％的氯化钠水溶液稀释，制成所述中草药水剂部分。

本发明实施例的另一个方面还提供了所述防治苹果树腐烂病的复配生物农药的使用方法，所述使用方法包括：当苹果树出现腐烂病症状时，先用所述微生物菌种水剂部分喷施1次，三天后用所述中草药水剂部分喷施1次，七天后用所述微生物菌种水剂部分补喷1次，十天后用所述中草药水剂部分补喷1次。

其中所述复配生物农药的喷施需在早晚进行，尽量避免强光照射。

优选的，所述复配生物农药在苹果树的苹果生长期中出现腐烂病症状时使用。

本发明实施例具有如下优点：

1、本制剂主要以生物活菌和中草药为主原料，解淀粉芽孢杆菌、淡紫拟青霉、哈茨木霉菌对苹果树腐烂病防效良好，并可以提高作物抗病能力，诱导抗性，提高土壤肥力，增强土壤氮肥利用效率；而中草药中大蒜、鸡血藤、紫苏和苦参对多种致病真菌具有抑制或杀灭作用。通过将生物活菌和中草药二者复配，可以发挥协同效应，同时降低用药量，减少抗药性发生。

2、本发明具有抑制苹果腐烂病菌作用，对人畜无害，不污染环境，且配比简单，使用方便，能有效防治多种病虫害。

3、本制剂分散性好，溶解均匀、吸收快，药效高、粘着性、渗透性强，极易被植物叶片和害虫虫体吸收。

4、本制剂以氯化钠水溶液为辅助制剂，不会污染叶面、果面，不易产生药害，安全环保。

具体实施方式

以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1防治苹果树腐烂病的复配生物农药的制备

所述农药包括微生物菌种水剂部分和中草药水剂部分，所述微生物菌种水剂部分包括解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、淡紫拟青霉菌(Paecilomyceslilacinus(Thom.)Samson)和哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)；所述中草药水剂部分包括大蒜提取物、鸡血藤提取物、紫苏提取物和苦参提取物。其中，所述微生物菌种水剂部分的制备方法包括下列步骤：

(1)分别将淡紫拟青霉菌、哈茨木霉菌置于PD(土豆)液体培养基中25℃发酵培养3天，解淀粉芽孢杆菌置于牛肉膏蛋白胨培养基中25℃发酵培养3天，将三种菌体经离心冷冻干燥制成活菌制剂，

(2)将上述三种菌体的活菌制剂混合，然后加入水中搅拌均匀，制成100kg所述微生物菌种水剂部分；所述微生物菌种水剂部分中，解淀粉芽孢杆菌的浓度为约50000CFU/μL，淡紫拟青霉菌的浓度为约50000CFU/μL，哈茨木霉菌的浓度为约50000CFU/μL。

另外，所述中草药水剂部分的制备方法包括下列步骤：

(1)取大蒜5kg压榨后滤渣，在所得汁液中加16kg水搅拌均匀，获得大蒜提取物稀释液，

(2)取鸡血藤、紫苏和苦参各4kg，加入16kg水淹没并浸泡4-8h后，置于煎煮设备中，加热煎煮，提取一次煎煮液；之后每次加入16kg水煎煮并提取煎煮液，共计提取3次，将三次提取的煎煮液合并，浓缩，获得鸡血藤提取物、紫苏提取物和苦参提取物混合浓缩液，

(3)将所述鸡血藤提取物、紫苏提取物和苦参提取物混合浓缩液加入所述大蒜提取物稀释液中并搅拌均匀获得中草药成分混合物，然后用10％氯化钠水溶液稀释至100kg，制成所述中草药水剂部分。

实施例2

应用实施例1获得的复配生物农药，对处于苹果生长期且出现腐烂病症状的苹果树用药。

选择苹果树品种为“寒富”，树龄10年，树势中庸，行株距4m×3m，沙壤土，肥力中等，管理水平中等。对于发病部位采用药剂涂抹法，涂药前将病斑刮除干净，后将病斑四周宽约0.5cm的健康组织刮除，刮除时需将韧皮部完全清除，刮至木质部并深入约0.5cm，病疤四周边缘光滑呈圆弧形。

先用微生物菌种水剂部分涂抹2次，全树喷施1次，注意需在早晚进行，尽量避免强光照射，三天后用中草药水剂部分涂抹2次，全树喷施1次，七天后用微生物菌种水剂部分涂抹1次，全树补喷1次，十天后用中草药水剂部分再涂抹1次，全树补喷1次。

设本发明农药制剂2个处理，另设空白对照1个处理，其中空白对照组将病疤刮除后不作任何处理。每个处理分别设在4个小区(4个地块)进行，即4次重复，每处理选择有腐烂病疤树10株，共计40株。涂药后第2年调查腐烂病病疤复发率，统计并计算各药剂防治效果，计算方法如下：

防治效果(％)＝(1-病疤复发率)×100％。

结果见表1。

表1复配生物农药防治苹果树腐烂病药效实验结果

处理	制剂处理1	制剂处理2	空白对照处理
				病疤处理数/个	48	50	52
病疤复发数/个	6	5	33
				病疤复发率/％	12.5	10	63.5
防治效果	87.5％	90％	36.5％

本发明以生物活菌和中草药为主原料，以不同配比构成复配生物农药，同时采用分期喷施的方法，通过实验和大田观察防治苹果腐烂病效果，本发明两个处理的苹果树腐烂病防治效果分别达到87.5％和90.0％；而空白对照处理的防治效果仅为36.5％。

另据观察，本发明实施例的实验药剂的所述剂量对苹果生长无药害现象，对其他农作物无害。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种防治苹果树腐烂病的复配生物农药，其特征在于，所述农药包括微生物菌种水剂部分和中草药水剂部分，所述微生物菌种水剂部分包括解淀粉芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌和哈茨木霉菌；所述中草药水剂部分包括大蒜提取物、鸡血藤提取物、紫苏提取物和苦参提取物。

2.根据权利要求1所述的复配生物农药，其特征在于，所述微生物菌种水剂部分中，解淀粉芽孢杆菌的浓度为10000-100000CFU/μL，淡紫拟青霉菌的浓度为10000-100000CFU/μL，哈茨木霉菌的浓度为10000-100000CFU/μL。

3.根据权利要求2所述的复配生物农药，其特征在于，所述微生物菌种水剂部分中，解淀粉芽孢杆菌的浓度为50000-80000CFU/μL，淡紫拟青霉菌的浓度为50000-80000CFU/μL，哈茨木霉菌的浓度为50000-80000CFU/μL。

4.根据权利要求2所述的复配生物农药，其特征在于，所述中草药水剂部分中，以质量百分比计，所述大蒜提取物的浓度为2-4％，所述鸡血藤提取物的浓度为1-4％，所述紫苏提取物的浓度为1-4％，以及所述苦参提取物的浓度为1-4％。

5.根据权利要求4所述的复配生物农药，其特征在于，所述中草药水剂部分中，以质量百分比计，所述大蒜提取物的浓度为3-4％，所述鸡血藤提取物的浓度为2-3％，所述紫苏提取物的浓度为2-3％，以及所述苦参提取物的浓度为2-3％。

6.根据权利要求4所述的复配生物农药，其特征在于，所述中草药水剂部分中，以质量百分比计，还含有氯化钠3.5-12.5％。

7.根据权利要求6所述的复配生物农药，其特征在于，所述微生物菌种水剂部分和中草药水剂部分的质量比为1:1。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的复配生物农药的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括微生物菌种水剂部分的制备方法和中草药水剂部分的制备方法，其中，

所述微生物菌种水剂部分的制备方法包括下列步骤：

(1)分别将淡紫拟青霉菌、哈茨木霉菌置于PD(土豆)液体培养基中25℃发酵培养3天，解淀粉芽孢杆菌置于牛肉膏蛋白胨培养基中25℃发酵培养3天，将三种菌体经离心冷冻干燥制成活菌制剂，

(2)将上述三种菌体的活菌制剂混合，然后加入水搅拌均匀，制成所述微生物菌种水剂部分；

所述中草药水剂部分的制备方法包括下列步骤：

(1)取大蒜压榨后滤渣，在所得汁液中加3-5倍水搅拌均匀，获得大蒜提取物稀释液，

(2)取鸡血藤、紫苏和苦参，加入3-5倍水淹没并浸泡4-8h后，加热煎煮，提取一次煎煮液；之后每次加入3-5倍水煎煮并提取煎煮液，共计提取3次，将三次提取的煎煮液合并，浓缩，获得鸡血藤提取物、紫苏提取物和苦参提取物混合浓缩液，

(3)将所述鸡血藤提取物、紫苏提取物和苦参提取物混合浓缩液加入所述大蒜提取物稀释液中并搅拌均匀获得中草药成分混合物，然后加水稀释，制成所述中草药水剂部分。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述中草药水剂部分的制备方法步骤(3)中，将所述中草药成分混合物用质量百分比浓度为5-15％的氯化钠水溶液稀释，制成所述中草药水剂部分。