CN109641070A - 用于放射性标记的构象限制的反式-环烯烃 - Google Patents

用于放射性标记的构象限制的反式-环烯烃 Download PDF

Info

Publication number
CN109641070A
CN109641070A CN201680081701.XA CN201680081701A CN109641070A CN 109641070 A CN109641070 A CN 109641070A CN 201680081701 A CN201680081701 A CN 201680081701A CN 109641070 A CN109641070 A CN 109641070A
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
compound
added
hours
tetrazine
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201680081701.XA
Other languages
English (en)
Inventor
约瑟夫·福克斯
李子博
刘雨
迈克尔·汤普森·泰勒
丹尼斯·斯瓦图内克
卡塔琳娜·罗尔芬
王梦哲
吴战宏
拉古·万纳马
史蒂芬·华莱士
贾森·W·秦
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
NAT INST FOR MEDICAL RES
University of Delaware
University of North Carolina System
Original Assignee
NAT INST FOR MEDICAL RES
University of Delaware
University of North Carolina System
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by NAT INST FOR MEDICAL RES, University of Delaware, University of North Carolina System filed Critical NAT INST FOR MEDICAL RES
Publication of CN109641070A publication Critical patent/CN109641070A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/082—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins the peptide being a RGD-containing peptide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C07B59/001—Acyclic or carbocyclic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C07B59/002—Heterocyclic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/63—Esters of sulfonic acids
    • C07C309/72—Esters of sulfonic acids having sulfur atoms of esterified sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C43/00—Ethers; Compounds having groups, groups or groups
    • C07C43/02—Ethers
    • C07C43/03—Ethers having all ether-oxygen atoms bound to acyclic carbon atoms
    • C07C43/14—Unsaturated ethers
    • C07C43/17—Unsaturated ethers containing halogen
    • C07C43/172—Unsaturated ethers containing halogen containing rings other than six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D225/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than seven members having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D225/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than seven members having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D225/02—Heterocyclic compounds containing rings of more than seven members having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/42—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms in positions 2 and 4
    • C07D311/44—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms in positions 2 and 4 with one hydrogen atom in position 3
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D313/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than six members having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D313/16—Eight-membered rings
    • C07D313/18—Eight-membered rings not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F1/00—Compounds containing elements of Groups 1 or 11 of the Periodic Table
    • C07F1/08—Copper compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F5/00—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/0803—Compounds with Si-C or Si-Si linkages
    • C07F7/0805—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising only Si, C or H atoms
    • C07F7/0807—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising only Si, C or H atoms comprising Si as a ring atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/0803—Compounds with Si-C or Si-Si linkages
    • C07F7/081—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising at least one atom selected from the elements N, O, halogen, S, Se or Te
    • C07F7/0812—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising at least one atom selected from the elements N, O, halogen, S, Se or Te comprising a heterocyclic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/0803—Compounds with Si-C or Si-Si linkages
    • C07F7/081—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising at least one atom selected from the elements N, O, halogen, S, Se or Te
    • C07F7/0812—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising at least one atom selected from the elements N, O, halogen, S, Se or Te comprising a heterocyclic ring
    • C07F7/0816—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising at least one atom selected from the elements N, O, halogen, S, Se or Te comprising a heterocyclic ring said ring comprising Si as a ring atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/14—All rings being cycloaliphatic
    • C07C2602/24—All rings being cycloaliphatic the ring system containing nine carbon atoms, e.g. perhydroindane
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/14—All rings being cycloaliphatic
    • C07C2602/26—All rings being cycloaliphatic the ring system containing ten carbon atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

适合用于在有此需要的对象中进行放射性标记的构象限制的反式‑环烯烃及其衍生物。

Description

用于放射性标记的构象限制的反式-环烯烃
本申请要求2015年12月15日提交的美国申请No.62/267,441的优先权，其全部内容出于所有目的通过引用并入本文。
发明背景
正电子发射断层显像(positron emission tomography，PET)是能够追踪体内放射性标记的生物分子的非侵入性成像方式。这种成像技术使用发射正电子的放射性核素，所述正电子与电子碰撞并产生两种可检测的γ射线。在PET中使用的常见放射性核素中，18F由于高正电子效率、高比放射性(specific radioactivity)和临床上有吸引力的半衰期(～110分钟)所以是最广泛使用的。这些特性可使对患者的毒性作用和辐射暴露最小化。然而，18F的短半衰期、氟化物的适度亲核性以及对于生物学和放射化学二者固有的低浓度使得将18F引入到复杂的生物分子中具有挑战性。因此，非常需要将18F高效地引入到生物大分子中的化合物和方法。
发明概述
本发明提供了适用于在有此需要的对象中进行放射性标记的构象限制的(conformationally strained)反式-环烯烃及其衍生物。
附图简述
图1显示了来源于通过静态microPET扫描进行的小动物PET图像的定量生物分布，其显示了荷有人U87MG肿瘤的小鼠(n＝5)中18F-15的定位。
图2A显示了描绘根据本发明的放射性标记的成像剂的肿瘤摄取的图像。
图2B显示了在图2A中所示的动物中获得的血液样品中的定量活性分布，表明成像探针与血清蛋白之间的相互作用。
发明详述
如本文中所用，含氟化合物的描述和结构表示应理解为适用于其中氟为18F的化合物和其中氟为19F的化合物二者，除非通过上下文或通过标识同位素的明确标记另外清楚指出。
本发明人现在公开了可用作例如PET成像中的放射性示踪剂的多种限制的反式-环烯烃和硅代-反式-环烯烃，以及这些化合物的衍生物。在其他用途中，这些化合物可与四嗪加合，从而提供了提供用于在体内使用的正交偶联反应的方式。尽管本文中明确描述的所有卤代化合物都是氟化化合物，但是技术人员将能够使用任何其他卤素制备类似物，并且所有这些化合物及其用途被认为是根据本发明的。因此，例如，可使用Cl、Br、I或At的任何同位素。例如，可使用124I和131I。
例如，本发明人现在公开了化合物9的18F形式，本文中称为18F-9，一种作为亲双烯体的具有极高反应性的新的放射性示踪剂。尽管本文中显示了化合物18F-9的顺式非对映体，但18F-9的结构图和对18F-9的提及应理解为适用于顺式(syn)和反式(anti)非对映体二者，除非上下文另外清楚指出。这同样适用于本文中讨论的所有其他化合物。
尽管化合物18F-9显示为在链中包含三个环氧乙烷重复单元，但该数目可替代地为1或2，或任意整数。通常来说，环氧乙烷重复单元的数目将为至少3、或至少5、10或20。该数目通常将为至多100、或至多50、40或30。或者，数目n可对应于任何聚环氧乙烷或聚乙二醇聚合物中的重复环氧乙烷单元的数目。即，该基团可以是聚环氧乙烷或聚乙二醇连接基团。环氧乙烷单元的这些相同数目和范围也适于作为对本文中公开的包含环氧乙烷单元的任何化合物的任选修饰。
化合物18F-9与四嗪迅速组合，并且可用于迅速组装用于PET成像的探针。评价了两种非对映体化合物5和4的Diels-Alder反应的动力学，并且将更高反应性的顺式-sTCO非对映体用于PET探针构建中的进一步研究。四嗪与18F-9的连接用于合成放射性标记的RGD肽，并且其在小鼠肿瘤模型中示出具有与在肝、肾和肌肉中相比的高肿瘤摄取水平。在注射之后4小时，肿瘤是PET扫描中最突出的图像，肿瘤摄取是其他主要器官的1.6-2.4倍。
如先前所述制备反式-非对映体(“反式-sTCO”)4(Taylor，M.T.；Blackman，M.L.；Dmitrenko，O.；Fox，J.M.J.Am.Chem.Soc.2011，133，9646-9649)，以及如方案1(A)所示制备顺式-非对映体(rel-1R，8S，9S，4E)-双环[6.1.0]壬-4-烯-9-基甲醇5(“顺式-sTCO”)。因此，使用本发明人先前描述的流动反应器，7的光异构化以81％产率得到顺式-sTCO 5。本发明人最初通过与NsCl或TsCl反应来活化顺式-sTCO 5的努力是不成功的，并且仅得到骨架重排产物。在实验之后，本发明人开发了通过用含有小PEG接头的双-甲苯磺酸酯(bis-tosylate)使醇5烷基化直接提供甲苯磺酸酯产物的合成。因此，该醇与KH和三乙二醇二甲苯磺酸酯的组合以28％产率得到sTCO甲苯磺酸酯8。为了产生HPLC标准品，用在无水THF中的TBAF处理8以76％产率得到19F-标记的衍生物9。如方案1(B)所示合成环状RGD的二苯基-s-四嗪缀合物。硝基苯基碳酸酯10依次与“小PEG”氨基酸偶联以得到11。随后与NHS偶联并与环肽RGDyK缀合以高产率得到12。
方案1(A)顺式-sTCO 5、标记前体8、冷标准品19F-9和放射性示踪剂18F-9的合成。(B)环状RGD-二苯基-s-四嗪缀合物12的合成。
使用停流动力学分析(stopped flow kinetic analysis)来测量四嗪衍生物11与sTCO的反式和顺式非对映体(分别为4和5)之间的Diels-Alder反应的速率。在利用13(sTCO反式-非对映体的小PEG衍生物)的早期研究中，发现水溶性二苯基-s-四嗪类似物14和二-2-吡啶基-s-四嗪类似物16以2.86×105M-1s-1和3.3×106M-1s-1的速率常数反应。后者是已经描述的生物正交反应的最快速率常数。对于本研究，本发明人使用停流分析来比较顺式-非对映体和反式-非对映体5和4与四嗪11在混合的有机/水性介质(25℃的55∶45MeOH∶水)中的相对速率。如所预期的，在MeOH∶水中的速率比在纯水介质中的测量值慢～9倍，但仍然极迅速。顺式-非对映体5与四嗪11的速率常数为k23.7×104(+/-0.1×103)M-1s-1，且反式-非对映体4以速率常数k23.3×104(+/-0.1×103)M-1s-1反应。因为顺式-非对映体反应性更高，所以选择其用于进一步开发。
放射化学
使用方案1中描述的方案产生18F标记的sTCO(18F-9)。通过在85℃下用乙腈中的18F-TBAF处理甲苯磺酸酯前体8(182mM)10分钟，本发明人能够以29.3+/-5.1％的分离放射化学产率获得放射性标记的18F-9，在HPLC纯化后为99％放射化学纯度。(其他18F来源也行，例如18F-KF/K222。)
这里，确定了反应浓度是重要的，因为在91mM下进行反应时仅以9.3+/-2.4％的分离产率得到18F-9。比活性测定为2.1+/-0.8Ci/μmol。通过与独立合成的19F-9标准品共注射确认产物特性。在与靶向分子进行反应之前，本发明人首先测试了18F-9的体外稳定性。在1×PBS中孵育后，放射性纯度在1小时和2小时时间点分别保持在97.5％和97.3％。该结果证明18F-9在水溶液中足够稳定以构建PET探针。还观察到18F-9在胎牛血清中稳定1小时，保留了74％的放射化学纯度。
方案2.18F-9与RGD-四嗪12缀合以产生作为异构体混合物的缀合物18F-15。冷标准品独立制备。
如方案2中所示，18F-9与RGD-四嗪12(700μM)缀合产生作为异构体混合物的缀合物18F-15。起始材料18F-9在初始测定(＜5分钟)时完全消耗。将12的浓度降低至33μM导致化学计量逆转，以及12的完全消耗以及观察到未反应的18F-9。这种当18F标记的底物过量使用时实现完全标记的能力说明了使用18F-9的生物正交反应的高效率和速率。
在环境反应条件下，获得91％的放射化学产率的18F-15，在HPLC纯化后纯度为99％。比活性测定为0.91+/-0.20Ci/μmol。利用19F-9的类似反应产生异构的“冷”Diels-Alder缀合物19F-15。LC-MS分析证实，来自缀合的两个主峰具有与19F-15的理论匹配的质谱。更迅速洗脱的小峰也具有正确的质量数据，并且可能对应于产物的胺缩醛(水合)形式。收集来自18F-15的放射-HPLC迹线的最慢洗脱峰，并研究体外稳定性。观察到加合物在PBS缓冲液中稳定2小时，保留了98.5％的放射化学纯度。还发现缀合物18F-15在胎牛血清中是稳定的，在孵育之后2小时和4小时分别具有96.7％和94.5％的纯度。
由于蛋白质18F标记的固有的低浓度和短时间尺度，所以四嗪-TCO连接的快速动力学和生物正交性提供了超过常规放射性标记方法的明显益处。在先前的工作中，本发明人发现为了在微摩浓度下获得迅速反应性需要反应性四嗪，但所得的Diels-Alder缀合物在体内仅具有中等稳定性。18F-9的优异反应性允许用更稳定的二苯基-s-四嗪实现迅速动力学(＞104M-1s-1)，得到具有改善的体内稳定性的Diels-Alder缀合物。此外，与使用先前描述的那些观察到的相比，这里描述的系统导致具有改善的血液循环和更高的肿瘤摄取水平的缀合物。
小动物PET成像
在尾静脉注射后的多个时间点，通过静态microPET扫描进行18F-15在荷有人U87MG肿瘤的小鼠(n＝5)中的定位。在注射3.7MBq(100μCi)的18F-15后，获得在不同时间点的选择的衰减校正的冠状图像。早在注射之后30分钟，观察到高的和持久的肿瘤累积，具有好的肿瘤-背景对比。来源于小动物PET图像的定量生物分布示于图1中，显示了在将18F-15注射到U87MG肿瘤模型之后0.5、1、2和4小时来自静态扫描的肿瘤和主要器官放射性累积定量。数据表示为平均值+/-SD。
包含小PEG间隔物导致生物分布曲线相对于先前构建的缺少PEG间隔物的基于TCO/四嗪的探针显著改善，并且该新构建体的血液循环与先前描述的构建体相比显著改善。注射之后0.5、1.0、2.0和4.0小时的肿瘤摄取分别为5.3+/-0.2％、6.9+/-0.5％、7.5+/-0.8％和8.9+/-0.5％ID/g。在注射之后4.0小时，肿瘤成为PET扫描中最亮的点，肿瘤与肝和肿瘤与肾的比值分别为1.6和2.4。鉴于这种基于小肽的探针改善的血液循环和高肿瘤摄取水平，本发明人预期基于18F-9的探针应该可广泛用于标记多种生物分子，包括肽、蛋白质、抗体、寡核苷酸和纳米粒。实际上，基于18F-9和二苯基-四嗪系统制备了另外的PET剂。参见方案3。如在图2A和图2B中所示，传统快速清除肽的血液循环显著提高，导致提高的或持续的肿瘤摄取。进一步的研究表明增强的血液循环是由与血清蛋白的结合/相互作用引起的。该系统还应适用于其他分子和生物制品(biologics)以用于开发长效治疗药物。
方案3。
18F-15的特异性通过阻断实验证实，其中放射性示踪剂与过量的cRGDyK共注射。RGD肽是公认的靶向分子。在存在非放射性标记的cRGDyK(200μg)的情况下，注射之后1小时肿瘤中的示踪剂摄取降至4.8+/-0.3％。如所预期的，应该比PEG化肽容易地清除的cRGDyK肽由于19F-15而未完全阻断信号。然而，在阻断cRGDyK存在下信号显著(P＜0.05)低于没有阻断剂时观察到的信号。
本发明人还用注射了18F-9的正常(不荷有肿瘤)裸鼠进行了microPET成像。成像数据表明该化合物在2小时中被胆囊、肾和肝迅速清除。本发明人还分析了通过将18F-9与11组合获得的化合物的清除率。该Diels-Alder缀合物和缺少RGD部分的18F-15的类似物在4小时后仍然保留在血液循环系统中。注射之后4小时血液摄取为2.4％ID/g。本发明人先前已报道了来源于反式-环辛烯1的18F标记的RGD探针。
这些缺少PEG化的探针被更迅速地清除。不希望受任何特定解释的束缚，本发明人相信这些结果表明整个PEG化的Diels-Alder部分在增强探针的循环时间中发挥作用。本发明人认为，19F-9的迅速清除和其PEG化的Diels-Alder缀合物的长循环寿命可证明对于在预靶向成像中的应用是有利的。
其他构象限制的反式-环烯烃
本发明还提供了具有顺式环稠合的构象限制的反式环辛烯结构，其具有表示为22和23的一般结构，包括但不限于一般结构24-26。本发明还提供了22-26的衍生物，其中放射性标记直接与结构连接，或者通过系链(tether)连接。在类型22-26结构中，顺式环连接使8元环采用更高反应性的“半椅式”构象。这与采用更低反应性的“冠式”构象的普通的反式-环辛烯不同。
本发明还提供了一般类型27和28的结构，其中通过在反式-环辛烯的骨架中包含杂原子引入了另外的烯属张力(olefinic strain)。这里，与杂原子的较短键向烯烃引入另外的角张力。本发明还提供了这些化合物的衍生物，其中放射性标记与结构直接连接，或者通过系链连接。
本发明还提供了类型29的结构，其中通过环尺寸减小为硅代-反式-环庚烯而升高了烯属张力。本发明还提供了这些化合物的衍生物，其中放射性标记与结构直接连接，或者通过系链连接。在结构24-29中，R是任何可缀合的官能团，包括OH、CH2OH或CO2H；其中R′是Me或者可缀合的官能团，包括OH、CH2OH或CO2H，并且其中R″是H或者可缀合的官能团，包括OH、CH2OH或CO2H。
本发明人还制备了以下配合物。
在实施例中公开了根据本发明的另外的化合物。
本发明还提供了以下化合物，其均可由技术人员通过在需要时适当地修改本文中公开的方法来制备。在以下化合物中，应用于环氧乙烷重复单元的数目n可以是1、2、3或任意整数。通常来说，环氧乙烷重复单元的数目将为至少3、或至少5、10或20。该数目将通常为至多100、或至多50、40或30。或者，数目n可对应于任何聚环氧乙烷或聚乙二醇聚合物中的重复环氧乙烷单元的数目。即，该基团可以是聚环氧乙烷或聚乙二醇连接基团。符号“LG”表示卤素或磺酸酯。下面显示的配合物中的符号M是任何金属的任何放射性或非放射性同位素。实例包括64Cu、67Cu、86Y、90Y、177Lu、Gd和Ln。R和R′各自独立地选自H和甲基。
刚刚上面最后一个化合物中的术语“异构体”是指二氢四嗪部分的异构体。
可将本文中公开的任何18F化合物注射到需要PET成像的对象中。
实施例
材料和方法
所有市售的分析级化学试剂均购自Aldrich(St.Louis，MO)，并且无需进一步纯化而使用。在SPD-M30A光电二极管阵列检测器(Shimadzu)和105S型单通道辐射检测器(Carroll&Ramsey Associates)上进行使用Gemini 5μC18柱(250×4.6mm)的分析型反相HPLC。用水/乙腈洗脱剂混合物以1mL/min进行放射性HPLC分析。对于其他HPLC分析，溶剂用0.1％三氟乙酸改性。
停流动力学分析
使用过量的适当sTCO非对映体(4或5)在伪一级条件下，且通过遵循使用SX 18MV-R停流分光光度计(Applied Photophysics Ltd.)在298nm处测量的归因于11的四嗪发色团的吸光度的指数衰减来测量二级速率常数。对于每次运行，将等体积的sTCO和PEG化四嗪11的45∶55的水∶甲醇溶液在停流装置中混合。用0.05mM的四嗪11和终浓度为0.245、0.49、0.98和1.47mM的顺式-非对映体5进行反应。类似地，用0.05mM的四嗪11和终浓度为0.25、0.50、1.00和1.50mM的反式-非对映体4进行反应。在1秒的时间内记录总共400个数据点，并且每个样品在298K下一式六份进行。使用Prism软件(v.6.00，GraphPad Software Inc.)通过数据点的非线性回归分析确定kobs。结果示于表1中。
放射化学
除非另有说明，否则使用以下方案进行放射性标记反应。将sTCO-甲苯磺酸酯8(9.1μmol)溶于MeCN(30μL)中，并随后使其与18F-TBAF(200mCi)在85℃下反应10分钟。通过添加水(500μL)淬灭反应。然后将混合物通过Sep-Pak柱(Sep-Pak Plus轻质氧化铝)，然后进行HPLC纯化。HPLC纯化后，包含期望产物的级分用10mL水稀释，捕获在C18Sep-Pak上，用10mL水洗涤，并用0.5mL EtOH洗脱。将一部分包含18F-9的溶液保留用于体外稳定性测试。然后将溶液级分(10mCi，估计为4.8nmol)与四嗪-RGD缀合物12的DMSO溶液(0.07μmol至3.3nmol)混合。在室温下摇动10秒后，将一部分反应混合物(3mCi)加载到HPLC上用于进一步分析。收集含有18F-15的HPLC洗脱剂，并使用旋转蒸发器除去有机溶剂。小心地将pH调节至7.5之后，在1×PBS中重构18F-15用于稳定性测试和小动物研究。
体外稳定性
将18F-9和18F-15各自在1×PBS缓冲液中于37℃下孵育。在1小时和2小时时间点取出溶液的等份试样(～25μCi)并加载到HPLC上进行分析。18F-9还在FBS中于37℃下孵育，并在1小时后，取出溶液的等份试样(～25μCi)并添加至等体积的TFA。类似地，18F-15也在FBS中于37℃下孵育，并在2小时和4小时时间点，取出溶液的等份试样(～25μCi)并添加至等体积的TFA。对于每个样品，将混合物以14000rpm离心5分钟。然后将上清液用1mL水稀释并加载到C18 Sep-Pak上。用1mL水洗涤后，用0.5mL乙腈对柱进行洗脱。合并水级分和乙腈级分并加载到HPLC上进行分析。
小动物PET成像
根据UNC机构动物护理和使用委员会(the UNC Institutional Animal Care andUse Committee)批准的方案进行动物操作。使用小动物PET扫描仪进行PET扫描和图像分析。使用2％异氟烷麻醉荷有人U87MG肿瘤的小鼠，并通过尾静脉注射3.7Mbq(100μCi)的18F-15。在注射之后0.5、1.0、2.0和4.0小时，获取静态发射扫描10分钟。向正常裸鼠注射3.7Mbq(100μCi)通过组合18F-9和11获得的Diels-Alder缀合物，或者在单独的实验中通过使用相同方案仅注射18F-9。使用2D有序子集期望最大化(OSEM)算法重建原始PET图像。没有进行背景校正。在衰减校正的冠状图像上手动地在肿瘤和其他器官上绘制感兴趣区域(region ofinterest，ROI)。基于组织密度为1g/mL的假设，通过将ROI处的每克剂量除以注射剂量将ROI转换为％ID/g。
统计分析
定量数据表示为平均值±SD。使用单因素ANOVA和t检验(Student’s t test)对平均值进行比较。P值＜0.05被认为是统计学上显著的。
合成方法
总体考虑：所有反应均在于真空下火焰干燥并在氮气下冷却的玻璃器皿中进行。所有市售试剂和溶剂均原样使用。(rel-1R，8S，9S，4Z)-双环[6.1.0]壬-4-烯-9-基甲醇和4-硝基苯基4-(6-苯基-1，2，4，5-四嗪-3-基)苄基碳酸酯均按照已知方法制备。通过在SiliCycle硅胶GF250μm板上进行的薄层色谱(TLC)监测反应，并用紫外(UV)光(254nm)和/或KMnO4染色进行可视化。使用正相SiliCycle硅胶(40-63D，)进行快速色谱。通过用EtSiCl3处理硅胶制备减活化硅胶。1H、13C和19F核磁共振(NMR)化学位移相对于CHCl3、CH2Cl2和MeOH以ppm报道(即1H NMRδ＝7.26和13C NMR＝77.0、1H NMR＝5.32和13C NMR＝54.0、1HNMR＝3.31和13C NMR＝49.1)。
(rel-1R，8S，9S，4E)-双环[6.1.0]壬-4-烯-9-基甲醇(5)
使用在1∶1醚/己烷(250mL)中的7(395mg，2.59mmol)、苯甲酸甲酯(705mg，5.18mmol)和十二烷(491mg，2.88mmol，用于GC监测的标准品)在250mL石英管中进行一般光异构化程序。用普通硅胶(2.5英寸)填充50gSNAP柱，并用10％银浸渍的二氧化硅(5.70g)填充剩余空间。将柱连接至泵并用1∶1醚/己烷(250mL)冲洗。在254nm下照射2.5小时，此时GC监测显示没有更多的起始材料。将柱用1∶1醚/己烷(250mL)冲洗并在空气流下干燥。将二氧化硅放入烧瓶中并在氢氧化铵(200mL)和二氯甲烷(200mL)中搅拌10分钟。将二氧化硅过滤并用另外的氢氧化铵(100mL)和二氯甲烷(100mL)洗涤。将相分离，并将水层再萃取三次。将合并的有机层用水洗涤两次，用Na2SO4干燥，过滤并通过旋转蒸发浓缩。通过柱色谱法进行纯化(25％，EtOAc∶己烷)以得到318mg(2.09mmol，81％)作为无色油状物的化合物5，其在-15℃下作为MeOH中的溶液储存。
1H NMR(600MHz，CD3OD)δ：5.88(ddd，J＝16.2，9.3，6.2Hz，1H)，5.16(dddd，J＝16.7，10.6，3.9，1.1Hz，1H)，3.50(d，J＝7.7Hz，2H)，2.31(dtd，J＝11.4，3.7，2.4Hz，1H)，2.28(ddd，J＝12.5，8.4，6.9Hz，1H)，2.21-2.15(m，1H)，2.13-2.09(m，1H)，1.96-1.86(m，2H)，1.20(dt，J＝9.1，7.7Hz，1H)，1.09(tdd，J＝12.9，11.2，7.1Hz，1H)，0.85-0.71(m，2H)，0.60(dtd，J＝13.0，8.8，4.6Hz，1H)，
(通过1H NMR在5.49、4.09、2.01、1.29、1.24和0.90ppm处检测到可归因于杂质的小峰)。
13C NMR(151MHz，CD3OD)δ139.4，132.3，59.5，35.3，34.8，28.6，28.3，21.7，20.2，19.2；HRMS(EI)[M+H]m/z：C10H16O计算值：152.1201；实测值：152.1181。
2-(2-(2-((顺式-(E)-双环[6.1.0]壬-4-烯-9-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)乙基4-甲基苯磺酸酯(8)
将三乙二醇双(对-甲苯磺酸酯)(972mg，2.12mmol)添加到火焰干燥的圆底烧瓶中，并溶解在无水THF(6.0mL，0.35M)和DMF(0.6mL，3.53M)中。添加5(100mg，0.66mmol)，然后添加氢化钾(210mg，石蜡中50％，2.63mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时，然后添加饱和NH4Cl水溶液，接着添加醚。将相分离，并且将水层再萃取三次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并通过旋转蒸发浓缩。通过柱色谱法(25-50％，EtOAc∶己烷)纯化，得到85mg(0.19mmol，30％)作为无色油状物的期望化合物8，其在-15℃下作为MeOH中的溶液储存。
1H NMR(600MHz，CD3OD)δ：7.80(d，J＝8.3Hz，2H)7.45(d，J＝8.4Hz，2H)，5.86(ddd，J＝16.2，9.3，6.3Hz，1H)，5.16(dddd，J＝16.8，10.6，3.9，1.1Hz，1H)，4.18-4.12(m，2H)，3.68-3.34(m，2H)，3.60-3.52(m，8H)，3.46-3.41(m，2H)，2.46(s，3H)，2.34-2.27(m，1H)，2.26-2.19(m，1H)，2.19-2.11(m，1H)，2.11-2.04(m，1H)，1.98-1.84(m，2H)，1.30-1.19(m，1H)，1.14-1.01(m，1H)，0.87-0.69(m，2H)0.65-0.55(m，1H)，
(通过1H NMR在4.63、4.09、2.01和1.24ppm处检测到可归因于杂质的小峰)；
13C APT NMR(100.6MHz，CD3OD)δ：146.5，139.4，134.6，132.4，131.2，129.2，73.1，71.7，71.7，71.6，71.0，69.9，69.1，35.5，34.8，28.8，28.4，21.7，20.3，19.3，19.2，
(通过13C在54.9ppm处检测到可归因于二氯甲烷的小峰)；HRMS(LIFDI-TOF)m/z：C23H34O68+的[M]+计算值438.2076；实测值438.2066。
顺式-(E)-9-((2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)甲基)双环[6.1.0]壬-4-烯(9)
将甲苯磺酸酯8(10mg，0.02mmol)添加到4打兰(dram)瓶中，并通过注射器添加TBAF(0.5mL，THF中1.0M)。将混合物加热至60℃保持3.5小时，并随后冷却至室温。将混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3水溶液洗涤并用Na2SO4干燥。过滤溶液并通过旋转蒸发浓缩。通过柱色谱法(25％，EtOAc∶己烷)纯化，得到5mg(0.02mmol，76％)作为无色油状物的9，其在-15℃下作为MeOH中的溶液储存。1H NMR(600MHz，CD3OD)δ：5.87(ddd，J＝16.2，9.3，6.2Hz，1H)，5.17(ddd，J＝14.0，10.6，3.8Hz，1H)，4.52(dt，JCF＝48Hz，JHH＝4.1Hz，2H)，3.72(dt，JCF＝30.1Hz，JHH＝4.0Hz，2H)，3.68-3.59(m，6H)，3.59-3.54(m，2H)，3.44(d，J＝7.5Hz，2H)，2.34-2.28(m，1H)，2.28-2.21(m，1H)，2.19-2.13(m，1H)，2.11-2.06(m，1H)，1.99-1/84(m，2H)，1.27-1.21(m，1H)，1.14-1.04(m，1H)，0.86-0.80(m，1H)，0.79-0.71(m，1H)，0.65-0.57(m，1H)，
(通过1H NMR还检测到可归因于顺式异构体(5.61ppm)和杂质(1.29、0.90ppm)的小峰)；
13C APT NMR(100.6MHz，MeOD)δ：139.4，132.4，84.2(d，JCF＝168Hz)，71.82，71.76，71.74(d，JCF＝20Hz)，71.65，71.0，69.1，35.5，34.8，28.8，28.4，20.3，19.4，19.3；19F NMR(376MHz，CD3OD)δ：-224.7(tt，J＝48.1，30.0Hz)；
HRMS(Orbitrap)m/z：C16H27FO3Na的[M+Na]+计算值309.18364；实测值309.18453。
3-氧代-1-(4-(6-苯基-1，2，4，5-四嗪-3-基)苯基)-2，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34，37，40-十三氧杂-4-氮杂四十三烷-43-酸(11)
将4-硝基苯基4-(6-苯基-1，2，4，5-四嗪-3-基)苄基碳酸酯(10)(43mg，0.10mmol)和PEG12-氨基酸(31mg，0.05mmol)溶解在无水二氯甲烷(4.0mL，0.01M)中。添加三乙胺(13.8μL)并将反应在室温下搅拌30小时。添加1N HCl(5mL)，并将水相用二氯甲烷(3×)萃取。将合并的有机物用Na2SO4干燥，过滤并通过旋转蒸发浓缩。通过柱色谱法使用减活化硅胶(2.50g，0-5％MeOH：DCM)纯化粗产物以得到40mg(0.04mmol，88％)作为紫色固体的11。
mp：39-40℃；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ：8.67-8.61(m，4H)，7.70-7.59(m，5H)，5.58(t，J＝5.8Hz，1H)，5.22(m，2H)，3.73(t，J＝5.8Hz，2H)，3.66-3.54(m，48H)，3.39(q，5.4Hz，2H)，2.60(bs，2H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ：173.3，164.1，163.8，156.5，141.8，132.9，131.8，131.4，129.5，128.6，128.2，128.1，70.8，70.7-70.5(19C′s)，70.4，70.3，70.1，66.7，66.0，41.1，35.1
(在54ppm处观察到归因于CH2Cl2的峰)；HRMS(LIFDI-TOF)m/z：C43H65N5O16Na的[M+Na]+计算值930.4324；实测值930.4336。
2，5-二氧代吡咯烷-1-基-3-氧代-1-(4-(6-苯基-1，2，4，5-四嗪-3-基)苯基)-2，7，10，13，16，19，22，25，28，31，34，37，40-十三氧杂-4-氮杂四十三烷-43-酸酯(11a)
将酸11(24mg，0.0264mmol)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)(5.0mg，0.0434mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCl)(8.0mg，0.0417mmol)添加至火焰干燥的圆底烧瓶。将混合物溶于无水二氯甲烷(2.0mL，0.02M)中并在室温下搅拌16小时。将溶液直接施加至减活化硅胶(2.50g)柱并用大量二氯甲烷洗涤，然后用5％MeOH：DCM将产物洗脱。使用HILIC(2.50g硅胶，5％H2O：MeOH)进一步纯化，得到19mg(0.02mmol，72％)作为紫色固体的11a。
mp：37-39℃；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ：8.67-8.60(m，4H)，7.70-7.59(m，5H)，5.54(bs，1H，NH)，5.22(s，2H)，3.83(t，J＝6.3Hz，2H)，3.67-3.52(m，48H)，3.39(m，2H)，2.88(t，J＝6.3Hz，2H)，2.84-2.76(bs，4H)；13C NMR(100MHz，CD2Cl2)δ：169.5，167.3，164.4，164.2，156.5，142.5，133.0，132.3，131.8，129.7，128.7，128.3，128.2，71.0，70.9-70.7(20C′s)，70.3，66.0，41.4，32.5，26.0；
HRMS(LIFDI-TOF)m/z：C47H68N6O18Na的[M+Na]+计算值1027.4488；实测值1027.4487，：C47H68N6O18K的[M+K]+计算值1043.4227，实测值1043.4200。
RGDyK-Tz(12)
将RGDyK(3.0mg，0.0048mmol)添加至4打兰瓶，然后添加TzPEG12NHS(11a)(10mg，0.0099mmol)在无水二甲基甲酰胺(400μL，0.01M)中的溶液。添加N，M二异丙基乙胺(3.0mg，0.02mmol)在无水二甲基甲酰胺(100μL，0.20M)中的溶液，并将反应在室温下搅拌18小时。添加H2O并通过冷冻干燥除去溶剂。通过RP HPLC纯化残余物以得到作为粉红色固体的7.2mg(12)(0.005mmol，99％)。HRMS(LIFDI-TOF)m/z[M+Na]+计算值C70H104N14O23Na1531.7296；实测1531.7279。
RGDyK-Tz-sTCOPEGF(15)
将四嗪-RGD缀合物(12)(0.3mg，0.0002mmol)溶解在甲醇(0.5mL)中，并滴加sTCOPEGF(9)(23μL的2.5mg/mL的MeOH溶液，0.06mg，0.0002mmol)。反应通过UV/Vis监测，并在1分钟内完成。通过反相HPLC(C-18柱，10％ACN+0.1％甲酸至100％ACN+0.1％甲酸)纯化产物(15)。在不同浓度下sTCO和11的停流动力学分析的一般程序
在45∶55的水∶甲醇中在伪一级条件下，通过遵循使用SX 18MV-R停流分光光度计(Applied Photophysics Ltd.)在298nm处测量的四嗪随时间的指数衰减对sTCO 4和5与PEG化四嗪11之间的反应进行测量。制备水∶甲醇(45∶55)和四嗪(0.1mM，在45∶55的水∶甲醇中)的溶液，sTCO浓度参见下表，并在测量前在分光光度计的注射器中恒温。通过停流装置将等体积的每一种混合(所得浓度如下表所示)。在1秒的时间内记录400个数据点，并且在298K下一式六份进行。使用Prism软件(v.6.00，GraphPad Software Inc.)通过数据点的非线性回归分析确定kobs。
表1
使用SX 18MV-R停流分光光度计在伪一级条件下测量的反式-环辛烯(sTCO 4和5)与PEG化四嗪11在25℃下在水∶甲醇(45∶55)中反应的速率常数。值由四次运行的平均值确定。
具有顺式稠合环戊烷环的构象限制的反式-环辛烯的合成和表征
将100mL的2颈圆底烧瓶在真空下火焰干燥，然后充入氮气。通过注射器将在约20mL无水醚中的环辛二烯(20mmol，2.1克)添加至烧瓶。然后在氮气下将锌-铜偶(30mmol，2.0克，1.5当量)添加至醚溶液。将混悬液在室温下搅拌。将三氯乙酰氯(25mmol，4.5克，1.25当量)和氯氧化磷(V)(25mmol，3.8克，1.25当量)溶解在约10mL无水醚中，并在1小时中通过另外的漏斗滴加到至搅拌的混悬液。添加后，将醚溶液温和回流。使反应进行过夜，然后通过真空过滤经硅藻土垫(celite pad)过滤。得到深棕色溶液。通过旋转蒸发器除去溶剂。将残余物首先用己烷萃取，然后用醚/己烷(3/1)萃取。合并有机溶液，并随后依次用水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。将得到的有机溶液用硫酸钠干燥。通过重力过滤除去干燥剂，并通过旋转蒸发器将溶液浓缩。获得黏稠的黄色液体。将该物质进行Kugelrohr蒸馏(0.15mmHg，130℃)以得到1.7克作为产物的浅黄色液体(42％)。
在该步骤中使用简化的重氮甲烷制备装置。向锥形瓶(B)中加入在约30mL醚中的二氯酮(dichloroketone)17(20mmol，2.2克)。将Diazald(60mmol，12.8g，3当量)在搅拌下溶于在真空过滤烧瓶中的约100mL甲醇中，直至形成澄清的黄色溶液。然后使氮气流通过整个系统。用最少量的水溶解氢氧化钾(200mmol，11.2克，10当量)，并通过注射器穿过橡胶隔片间隔地滴加至Diazald溶液。产生黄色重氮甲烷并通过氮气流载入到锥形瓶中。连续添加氢氧化钾溶液直至排出真空过滤烧瓶中的黄色，然后继续搅拌1小时。然后将少量冰乙酸添加至锥形瓶以淬灭任何未反应的重氮甲烷。
然后将锥形瓶中的醚溶液转移到分液漏斗中。依次用水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。将得到的有机溶液用硫酸钠干燥。通过重力过滤除去干燥剂，并通过旋转蒸发器将溶液浓缩。得到2.2克作为产物的浅黄色液体(92％)。
将二氯酮18(9.3mmol，2.2克)用约15mL冰乙酸溶解。将该溶液滴加至锌粉(47mmol，3.1克，5当量)在约15mL冰乙酸中的冷却至0℃的混悬液。一旦添加完成后，移除冰浴，并将反应混合物加热至70℃。在70℃反应3小时后，将反应混合物冷却至环境温度，然后用醚稀释。将反应混合物转移至分液漏斗中，并将其依次用水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。将得到的有机溶液用硫酸钠干燥。通过重力过滤除去干燥剂，并通过旋转蒸发器将溶液浓缩。通过硅胶色谱法使用己烷/乙酸乙酯(4/1)作为洗脱剂进一步纯化残余物。作为预期的酮产物19获得1.1克澄清无色液体(75％)。
将双环酮19(5.6mmol，0.92克)用100mL圆底烧瓶中的约20mL甲醇溶解。向溶液中添加硼氢化钠(23mmol，0.88克，4当量)。立即产生了大量气泡。使反应在环境温度下进行2小时，然后通过添加水淬灭。将反应混合物转移至分液漏斗，并用25mL二氯甲烷萃取3次。合并二氯甲烷溶液，并将其依次用水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。将得到的有机溶液用硫酸钠干燥。通过重力过滤除去干燥剂，并通过旋转蒸发器将溶液浓缩。通过硅胶色谱法使用己烷/乙酸乙酯(4/1)作为洗脱剂进一步纯化残余物。作为预期的醇产物4得到获得0.75克澄清无色液体(75％)，化合物20的NMR显示其包含10/1比例的顺式和反式非对映体。
使用Royzen，M.；Yap，G.P.；Fox，J.M.J.Am.Chem.Soc.2008，130，3760中描述的连续流动装置进行光异构化。使用100g Biotage SNAP柱(Biotage部件号FSK0-1107-0050)容纳硅胶和AgNO3浸渍的硅胶。将包含未改性硅胶床的SNAP柱用经AgNO3(1.7g，10mmol)浸渍的17g硅胶填满。将(Z)-2，3，3a，4，5，8，9，9a-八氢-1H-环戊二烯并[8]轮烯-2-醇20(1.1g，6.6mmol)和苯甲酸甲酯(1.8g，13mmol)置于石英烧瓶中并溶于400mL 1∶1的Et2O∶己烷中。将溶液以100mL/min的流量通过连续流动系统进行平衡，并同时用氮气脱气15分钟。然后在连续流动条件(100mL/min)下将石英烧瓶中的溶液照射(254nm)6小时，此时GC分析指示反应完成。用400mL 1∶1的Et2O/己烷冲洗SNAP柱，并随后用压缩空气干燥。将干燥的硅胶转移至1L的锥形瓶中。将浓NH4OH水溶液(400mL)和二氯甲烷(400mL)依次添加至烧瓶，并且过滤得到的两相混合物。将滤饼用另外的二氯甲烷(100mL)和氢氧化铵(100mL)洗涤。将滤液转移至分液漏斗中并进行分配。水层用二氯甲烷萃取两次。合并有机层，用水洗涤两次，然后用硫酸镁干燥，过滤，并使用旋转蒸发器浓缩。柱色谱法(1∶2Et2O∶己烷)得到0.74g作为无色油状物的21(67％)。化合物21在冷冻箱中储存后变成白色固体。
dTCO-Ts的合成：
在RT下，向KH(0.200g，5mmol)在无水THF/DMF(25mL/2.5mL)中的溶液添加双-peg甲苯磺酸酯(2.14g，4.67mmol)和dTCO-醇(0.200g，1.31mmol)。14小时后，将所得混合物用0℃的饱和NH4Cl(20mL)淬灭，并且将得到的溶液用乙醚(3×150mL)萃取，用水(2×150mL)洗涤，经过Na2SO4，浓缩，并使用在己烷中的0至70％丙酮作为洗脱剂通过柱色谱法进行纯化以得到澄清的dTCO-Ts(0.192g，31％)。
Oxo-TCO-Ts的合成：
在RT下，向KH(0.05g，1.22mmol)在无水THF/DMF(8mL/1mL)中的溶液添加双-peg甲苯磺酸酯(0.481g，1.05mmol)和Oxo-TCO-醇(0.05g，0.35mmol)。14小时后，将所得混合物用0℃的饱和NH4Cl(10mL)淬灭，并且将得到的溶液用乙醚(3×50mL)萃取，用水(2×50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，并使用0至70％在己烷中的丙酮作为洗脱剂通过柱色谱法进行纯化以得到作为澄清油状物的Oxo-TCO-Ts(0.06g，40％)。
19F标记的限制的反式-环辛烯的制备
dTCO-19F的合成：
在rt下将TABF(1M，在THF中)添加至含有dTCO-Ts(0.015g，0.0319mmol)的样品瓶。3小时后，将反应混合物用EtOAc稀释，并蒸发所有溶剂。向得到的残余物添加EtOAc和饱和NH4Cl。使两层分离，并且将有机层用水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并使用己烷中的0至100％EtOAc作为洗脱剂通过柱色谱法进行纯化以得到作为无色澄清油状物的dTCO-19F(0.09g，88.6％)。
Oxo-TCO-19F的合成：
在rt下将TABF(1M，在THF中)添加至含有dTCO-Ts(0.015mg，0.032mmol)的样品瓶。3小时后，将反应混合物用EtOAc稀释，并蒸发所有溶剂。向得到的残余物中添加EtOAc和饱和NH4Cl。使两层分离，并且将有机层用水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并通过使用己烷中的0至100％EtOAc作为洗脱剂通过柱色谱法进行纯化以得到作为无色澄清油状物的dTCO-19F(0.08g，90.5％)。18F类似物可类似地制备。
sTCO-DOTA的合成：
向DIPEA(0.034mL，0.196mmol)和DOTANHS(0.015mg，0.0196mmol)在DMF(1.5mL)中的溶液在1小时中滴加在DMF(1.5mL)中的(PEG)26二胺(0.024g，0.0196mmol)。搅拌14小时后，添加sTCO氨基甲酸酯(0.0062mg，0.0196)。将所得反应混合物再搅拌6小时。蒸发所有溶剂，并用H2O中的0至100％MeOH作为洗脱剂通过使用YamazenC18(7+14g，如下图所示)柱色谱法进行纯化以得到作为澄清油状物的sTCO-DOTA(0.0089g，28％)，并将其在-20℃下在甲醇中储存。
dTCO-DOTA的合成：
向DIPEA(0.034mL，0.196mmol)和DOTANHS(0.015mg，0.0196mmol)在DMF(1.5mL)中的溶液在1小时中滴加在DMF(1.5mL)中的(PEG)26二胺(0.024g，0.0196mmol)。搅拌14小时后，添加dTCO氨基甲酸酯(0.0068mg，0.0196)。将所得反应混合物再搅拌6小时。蒸发所有溶剂，并用H2O中的0至100％MeOH作为洗脱剂通过使用Yamazen C18(7+14g)柱色谱法进行纯化以得到作为澄清油状物的sTCO-DOTA(0.0079g，22％)，并将其在-20℃下在甲醇中储存。
diolTz-酸的合成：
向Peg12氨基酸(0.082g，0.13mmol)和三乙胺(0.18mL，1.3mmol)在二氯甲烷(4mL)中的溶液在2小时中添加diolTz-对-硝基苯基氨基甲酸酯(0.045g，0.13mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液。24小时后，添加二氯甲烷和1N HCl。将有机层分离，用MgSO4干燥，使用二氯甲烷中的2至10％甲醇用去活化(deactivated)二氧化硅进行纯化以得到作为粉红色固体的所需diolTz-酸(65mg，61.5％)。
diolTz-NHS的合成：
将N-羟基琥珀酰亚胺(0.0034g，0.029mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0054g，0.028mmol)添加至含有diolTz-酸(0.015mg，0.018)在二氯甲烷(2mL)中的溶液的烧瓶。搅拌24小时后，将所得溶液用二氯甲烷中的0至5％甲醇使用去活化二氧化硅直接进行纯化以得到作为粉红色油状物的diolTz-NHS(0.010，63％)。
mePhTz-酸的合成：
向mePhTz-NHS(0.032g，0.0956)和Peg12氨基酸(0.060g，0.0956)在DMF/DCM(4ml/2ml)中的溶液添加二异丙基乙胺(0.034mL，0.18)。14小时后，蒸发溶剂并将残余物重新溶解在DCM和1N HCl中。将两层分离，并将有机层用MgSO4干燥，浓缩，用二氯甲烷中的0至5％甲醇使用去活化二氧化硅进行纯化以得到作为粉红色固体的mePh-Tz-酸(0.072g，90％)。
mePhTz-NHS的合成：
将N-羟基琥珀酰亚胺(0.0093g，0.0817mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0148g，0.0778mmol)添加至含有四嗪酸(0.036mg，0.043)在DCM(2mL)中的溶液的烧瓶。搅拌14小时后，将所得溶液用二氯甲烷中的0至5％甲醇使用去活化二氧化硅直接进行纯化以得到作为粉红色油状物的mePhTz-NHS(0.035g，87％)。
mePhTz-马来酰亚胺的合成：
在氮气下，向mePhTz-NHS(0.037mg，0.039mmol)和N(2-氨基乙基马来酰亚胺TFA盐)在DMF(1mL)中的溶液添加DIPEA(0.0224mL，0.129mmol)。搅拌反应混合物24小时之后，蒸发所有溶剂，并用二氯甲烷中的1至5％甲醇使用去活化二氧化硅进行纯化以得到作为粉红色油状物的(0.006mg，18％)。
diolTz-NT的合成：
dioltzNHS(0.0021g，0.00230mmol)和神经降压素胺(0.001g，0.001153mmol)在DMF(0.5mL)中的溶液添加二异丙基乙胺(0.001mL，0.00230mmol)。48小时后，蒸发溶剂，并用0至100％甲醇∶水使用Yamagen C18柱进行纯化得到作为浅粉红色油状物的标题产物(0.009mg，41％)。4-(二(丁-3-烯-1-基)(甲基)甲硅烷基)丁腈
在氮气氛下向干燥的圆底烧瓶中添加Mg(1.24g，51.7mmol，3.00当量)和无水THF(125ml)。通过注射器将4-溴-1-丁烯(5.60mL，55.2mmol，3.21当量)逐滴引入烧瓶。将反应混合物在室温下搅拌。在判断Grignard试剂的形成完成后，添加HMPA(15.0mL，86.0mmol，5.00当量)，然后添加4-(二氯(甲基)甲硅烷基)丁腈(2.70ml，17.2mmol，1.00当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应后，通过旋转蒸发除去THF。添加饱和NH4Cl水溶液(80mL)和乙酸乙酯(80mL)，并将水层用乙酸乙酯萃取三次。合并有机物，用无水MgSO4干燥，过滤，并通过旋转蒸发浓缩。通过快速柱色谱法(1％乙醚/己烷)进行纯化得到作为无色油状物的标题化合物(2.14g，9.66mmol，56％产率)。
(Z)-Si-(3-氰基丙基)-Si-甲基-5-硅代-环庚烯
将4-(二(丁-3-烯-1-基)(甲基)甲硅烷基)丁腈(400mg，1.81mmol，1.00当量)溶于无水CH2Cl2(120ml)中。添加作为无水CH2Cl2(37mL)中的溶液的Grubbs第一代催化剂(74.3mg，0.0903mmol，0.0500当量)，并将该溶液加热至回流5小时。冷却至室温后，通过旋转蒸发浓缩反应混合物。通过快速柱色谱法(1％乙醚/己烷)进行纯化得到作为无色油状物的标题化合物(299mg，1.55mmol，85％产率)。
(Z)-Si-(4-氧代丁基)-Si-甲基-5-硅代环庚烯
在氮气氛下，向圆底烧瓶中加入(Z)-Si-(3-氰基丙基)-Si-甲基-5-硅代环庚烯(656mg，3.39mmol，1.00当量)在CH2Cl2(4.5mL)中的溶液。通过干冰/丙酮(-78℃)浴冷却烧瓶，并通过注射器缓慢添加DIBAL-H(4.1mL的在CH2Cl2中的1.0M溶液，4.1mmol，1.2当量)。然后用-40℃浴(干冰/乙腈)代替干冰/丙酮浴，并持续搅拌1小时。然后用冰浴(0℃)代替冷浴。在0℃下，依次滴加H2O(0.14mL)和15％NaOH(0.14mL)。添加另外的水(0.34mL)，并移除冰浴并将混合物在r.t下搅拌15分钟。添加一些无水硫酸镁并再搅拌15分钟。过滤混合物以移出固体，将固体用过量二氯甲烷冲洗。合并二氯甲烷溶液并浓缩。通过快速柱色谱法(15％乙醚/己烷，Rf＝0.48)进行纯化得到作为无色油状物的标题化合物(422mg，2.15mmol，63％产率)。
(Z)-Si-(4-羟丁基)-Si-甲基-5-硅代环庚烯：
向25mL圆底烧瓶中加入(Z)-Si-(4-氧代丁基)-Si-甲基-5-硅代环庚烯(422mg，2.15mmol，1.00当量)和甲醇(11mL)。通过冰浴(0℃)冷却烧瓶，并磁力搅拌混合物。将硼氢化钠(81.3mg，2.15mmol，1.00当量)以作为固体的小份缓慢添加至反应混合物。移除冰浴，并搅拌混合物，同时加热至r.t保持1小时。依次并小心地将水(3mL)和3M HCl(3mL)滴加至混合物。通过旋转蒸发除去甲醇，并将残余物用乙醚萃取三次。将合并的有机物用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过快速柱色谱法(5％至10％乙醚/己烷)进行纯化得到作为无色油状物的标题化合物(403mg，2.03mmol，95％产率)。
(E)-Si-(4-羟丁基)-Si-甲基-5-硅代环庚烯
将(Z)-Si-(4-羟基丁基)-Si-甲基-5-硅代环庚烯(100mg，0.510mmol，1.00当量)和苯甲酸甲酯(138mg，1.02mmol，2.00当量)置于石英烧瓶中并溶解在100mL已经通过三次冷冻/泵/解冻循环脱气的2∶3的Et2O∶己烷中。将十二烷(86mg，0.51mmol，1.0当量)添加至烧瓶以进行GC监测。然后在连续流动条件(100mL/min)下用N2鼓泡将石英烧瓶中的溶液照射(254nm)3小时，此时GC分析表明反应完成。用200mL 1∶4的Et2O/己烷冲洗SNAP柱，并随后用压缩空气干燥。然后用225mL的EtOH冲洗SNAP柱以得到(E)-Si-(4-羟基丁基)-Si-甲基-5-硅代环庚烯·AgNO3的乙醇溶液。通过旋转蒸发浓缩乙醇溶液，得到由反式-环庚烯·AgNO3配合物(通过NMR分析0.377mmol，74％产率)和游离AgNO3组成的棕褐色(tan)黏性油状物。向(E)-Si-(4-羟基丁基)-Si-甲基-5-硅代环庚烯·AgNO3(乙醇中51.0mg，0.19mmol，1.0当量)的溶液添加CH2Cl2(5mL)，然后添加饱和盐水(5mL)。用CH2Cl2(2×5mL)萃取水层。将有机物用无水MgSO4干燥并过滤以提供无银(E)-Si-(4-羟基丁基)-Si-甲基-5-硅代环庚烯的溶液。
按照Org.Syn.Coll.1993，8，377.中描述的方法制备(Z)-10，10-二氯双环[6.2.0]癸-4-烯-9-酮。通过在SiliCycle硅胶GF 250μm板上进行的薄层色谱(TLC)监测反应，并用紫外(UV)光(254nm)和/或对-茴香醛染色可视化。使用正相SiliCycle硅胶(40-63D，)进行快速色谱。
(Z)-双环[6.2.0]癸-4-烯-9-酮(30)
将锌粉(520mg，7.95mmol)溶液添加到火焰干燥的双颈圆底烧瓶中，并混悬在乙酸(4.0mL，2.0M)中。将烧瓶冷却至0℃并滴加17(450mg，2.10mmol)作为乙酸(4.0mL，0.5M)中的混悬液。添加完成后，移除冰浴，将反应加热至70℃保持2小时。将醚添加至烧瓶，并将溶液转移至含有冰水的分液漏斗。有机相用冷水萃取两次。然后合并有机层并用饱和NaHCO3水溶液洗涤三次并用盐水洗涤两次。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并通过旋转蒸发浓缩以得到300mg(1.99mmol，95％)的30，其无需进一步纯化。
(Z)-双环[6.2.0]癸-4-烯-9-醇(31)
将30(300mg，2.0mmol)添加到火焰干燥的圆底烧瓶中，并溶解在无水MeOH(4.0mL，0.5M)中。添加硼氢化钠(303mg，8.0mmol)并在r.t下搅拌反应物1小时。将反应冷却至0℃，用水淬灭并用二氯甲烷萃取三次。然后将有机相用饱和NaHCO3水溶液洗涤三次并用盐水洗涤两次。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并通过旋转蒸发浓缩。通过柱色谱法(1∶7，EtOAc∶己烷)进行纯化得到107mg(0.70mmol，36％)作为非对映体混合物的31。
(E)-双环[6.2.0]癸-4-烯-9-醇(4)
使用150mL石英管中的在2∶1的醚/己烷(100mL)中的3(50mg，0.33mmol)、苯甲酸甲酯(90mg，0.67mmol)和十二烷(85mg，0.50mmol，GC监测标准品)，按照J.Am.Chem.Soc.2008，130，3760中描述的一般的光异构化方法。用普通硅胶(2.5英寸)填充10gSNAP柱，并用10％银浸渍的二氧化硅(0.80g)填充剩余空间。将柱连接至泵并用2∶1醚/己烷(100mL)冲洗。在254nm下进行照射3小时，此时GC监测显示没有更多的起始材料。将柱用2∶1醚/己烷(100mL)冲洗并在空气流下干燥。将二氧化硅放入烧瓶中并在氢氧化铵(100mL)和二氯甲烷(100mL)中搅拌10分钟。过滤二氧化硅并用另外的氢氧化铵(50mL)和二氯甲烷(50mL)洗涤。将相分离，并将水层再萃取三次。将合并的有机层用水洗涤两次，用Na2SO4干燥，过滤并通过旋转蒸发浓缩。通过柱色谱法(25％，EtOAc∶己烷)进行纯化得到27mg(0.18mmol，54％)作为非对映体混合物的化合物4，其在-15℃下作为MeOH中的溶液储存。
虽然本文中参考一些具体实施方案举例说明并描述了本发明，但本发明并不旨在受限于所示的细节。相反，在不脱离本发明的情况下，可在权利要求的等价的范围内在细节上进行多种修改。

Claims (42)

1.根据任一以下结构的化合物
2.根据任一以下结构的化合物
3.根据任一以下结构的化合物
4.根据任一以下结构的化合物
5.根据任一以下结构的化合物
6.根据任一以下结构的化合物
7.根据任一以下结构的化合物
8.根据任一以下结构的化合物
9.根据任一以下结构的化合物
10.根据任一以下结构的化合物
11.根据任一以下结构的化合物
12.根据任一以下结构的化合物
13.根据任一以下结构的化合物
14.根据任一以下结构的化合物
15.根据任一以下结构的化合物
16.根据任一以下结构的化合物
17.根据以下结构的化合物
18.根据以下结构的化合物
19.根据任一以下结构的化合物
20.根据任一以下结构的化合物
21.根据任一以下结构的化合物
22.根据任一以下结构的化合物
23.根据任一以下结构的化合物
24.根据任一以下结构的化合物
25.根据任一以下结构的化合物
26.根据任一以下结构的化合物
27.根据任一以下结构的化合物
28.根据任一以下结构的化合物
29.根据任一以下结构的化合物
30.根据任一以下结构的化合物
31.根据任一以下结构的化合物
32.根据任一以下结构的化合物
33.根据以下结构的化合物
34.根据以下结构的化合物
35.根据任一以下结构的化合物
36.根据任一以下结构的化合物
37.根据以下结构的化合物
38.根据以下结构的化合物
39.根据以下结构的化合物
40.根据以下结构的化合物
41.根据以下结构的化合物
42.PET成像方法，其包括将根据权利要求3、4、7、8、11、12、14、16、18、20或41中任一项所述的18F化合物注射到需要所述成像的对象中。
CN201680081701.XA 2015-12-15 2016-12-14 用于放射性标记的构象限制的反式-环烯烃 Pending CN109641070A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562267441P 2015-12-15 2015-12-15
US62/267,441 2015-12-15
PCT/US2016/066504 WO2017106253A1 (en) 2015-12-15 2016-12-14 Conformationally strained trans-cycloalkenes for radiolabeling

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109641070A true CN109641070A (zh) 2019-04-16

Family

ID=59057546

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680081701.XA Pending CN109641070A (zh) 2015-12-15 2016-12-14 用于放射性标记的构象限制的反式-环烯烃

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20200188540A1 (zh)
EP (1) EP3389729A4 (zh)
CN (1) CN109641070A (zh)
WO (1) WO2017106253A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110818908A (zh) * 2019-08-29 2020-02-21 杭州市富阳区浙工大银湖创新创业研究院 一种用于检测氧化气体的金属有机骨架材料的制备方法

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11402376B2 (en) 2018-03-23 2022-08-02 University Of Wyoming Methods and devices for detection of biological materials using electric field assisted rapid analyte capture

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103221398A (zh) * 2010-07-23 2013-07-24 特拉华大学 用于快速构建放射性核素标记探针的四嗪-反式环辛烯连接反应

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5627569B2 (ja) * 2008-04-30 2014-11-19 シーメンス メディカル ソリューションズ ユーエスエー インコーポレイテッドＳｉｅｍｅｎｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ＵＳＡ，Ｉｎｃ． 新規基質に基づくｐｅｔ造影剤
EP2400992B1 (en) * 2009-02-27 2015-07-22 Genentech, Inc. Methods and compositions for protein labelling

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103221398A (zh) * 2010-07-23 2013-07-24 特拉华大学 用于快速构建放射性核素标记探针的四嗪-反式环辛烯连接反应

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHRISTOPH DENK等: ""Development of a 18F-Labeled Tetrazine with Favorable Pharmacokinetics for Bioorthogonal PET Imaging"", 《ANGEW. CHEM. INT. ED.》 *
MICHAEL T. TAYLOR，JOSEPH M. FOX等: ""Design and Synthesis of Highly Reactive Dienophiles for the Tetrazinetrans-Cyclooctene Ligation"", 《J. AM. CHEM. SOC.》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110818908A (zh) * 2019-08-29 2020-02-21 杭州市富阳区浙工大银湖创新创业研究院 一种用于检测氧化气体的金属有机骨架材料的制备方法
CN110818908B (zh) * 2019-08-29 2021-12-17 杭州市富阳区浙工大银湖创新创业研究院 一种用于检测氧化气体的金属有机骨架材料的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
US20200188540A1 (en) 2020-06-18
EP3389729A4 (en) 2019-12-11
WO2017106253A1 (en) 2017-06-22
EP3389729A1 (en) 2018-10-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1840531B (zh) 用于肿瘤成像和光动力学疗法的卟啉基化合物
EP2341944B1 (en) Conjugates of hexose and metal coordinating compounds for imaging purposes
JP2009505947A (ja) 画像化剤
AU2005328464B2 (en) Radioactive halogen-labeled phenyloxyaniline derivatives
CN109641070A (zh) 用于放射性标记的构象限制的反式-环烯烃
CN107522673B (zh) 用于生物正交反应的1,2,4,5-四嗪化合物及其制备方法与应用
CA2759000A1 (en) Labeled molecular imaging agents, methods of making and methods of use
Kung et al. In vivo imaging of vesicular monoamine transporter 2 in pancreas using an 18F epoxide derivative of tetrabenazine
Vala et al. Synthesis and in vivo Evaluation of Fluorine‐18 and Iodine‐123 Pyrazolo [4, 3‐e]‐1, 2, 4‐triazolo [1, 5‐c] pyrimidine Derivatives as PET and SPECT Radiotracers for Mapping A2A Receptors
Cao et al. Synthesis and Biological Evaluation of [18 F] FECNT-d 4 as a Novel PET Agent for Dopamine Transporter Imaging
Santschi et al. Synthesis of 2‐[18F] Fluoro‐2‐deoxyisosorbide 5‐mononitrate and Assessment of Its in vivo Biodistribution as Determined by Dynamic Positron Emission Tomography (PET)
Qiao et al. One-step preparation of [18F] FPBM for PET imaging of serotonin transporter (SERT) in the brain
JP7320850B2 (ja) 輸送タンパク質過剰発現関連疾患の陽電子放出断層撮映放射性トレーサー、蛍光映像診断及び光力学治療のための輸送タンパク質標的リガンド及びその製造方法
Ranyuk et al. A new approach for the synthesis of 18 F-radiolabelled phthalocyanines and porphyrins as potential bimodal/theranostic agents
WO2008083454A1 (en) Process for flavonoids radiolabeling and its application on in vivo diagnosis of brain malfunctions related to benzodiazepine receiving sites
JP2013542187A (ja) 新規放射性トレーサー
US20130178653A1 (en) Novel precursor of radiolabelled choline analog compounds
Kiesewetter et al. Synthesis and evaluation of an 18F analog of forskolin for imaging adenylyl cyclase
AU2013319747B2 (en) F-18 radiolabeled compounds for diagnosing and monitoring kidney function
Pulido et al. 4-N-Alkanoyl and 4-N-alkyl gemcitabine analogues with NOTA chelators for 68-gallium labelling
Lakshmi et al. (R)-N-Methyl-3-(3-125I-pyridin-2-yloxy)-3-phenylpropan-1-amine: a novel probe for norepinephrine transporters
Rohlfing The synthesis and development of F-18 labeling substrates for in vivo PET imaging studies
CN109438265B (zh) 一种与棕色脂肪组织具有亲和力的化合物及其制备方法和应用
Kramer et al. Fluorination of silyl prosthetic groups by fluorine mediated silyl ether linker cleavage: a concept study with conditions applicable in radiofluorination
Liu et al. Facile radiosynthesis of 18 F-labeled β-glutamic acid as a new PET tracer for imaging lung cancer

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20190416

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication