CN109601750A - 预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂，所述的添加剂包括百里香酚、香芹酚、丁香酚、苯甲酸、丁酸、二氧化硅和棕榈油。采用了本发明的预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂，抑制产气荚膜梭菌等有害菌，增加有益菌，维护肠道菌群平衡；减少球虫卵囊数；修复肠道损伤；提高抵抗力；协同增效，促生长、重修复、抗炎症、调免疫。

Description

预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及饲料添加剂领域，尤其涉及禽用饲料添加剂，具体是指一种预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂及其制备方法。

背景技术

由产气荚膜梭菌异常增殖引发的坏死性肠炎(NE)为全球家禽生产中影响肠道健康的最常见疾病之一，急性NE主要导致患病家禽急速死亡，死亡率高达50％；亚临床型NE主要导致生产性能下降、加工时废弃率上升等。全球每年因NE所致的养鸡业经济损失高达20亿美元(J.M.Diza Carrasco,2016)。产气荚膜梭菌是禽肠道的常在菌，只有在一些预置因素的影响下才会异常增殖而引起发病，这些预置因素包括日粮(如高非淀粉多糖、高蛋白日粮等)、微生物(如球虫等)、应激、免疫状态等。其中，球虫与产气荚膜梭菌互为预置因素，在临床上球虫感染总是与NE相伴的(蔡建平，2012)。

针对家禽NE，除了饲料营养、环境控制、饲养管理、疫苗预防等措施外，预防促生长用抗生素AGPs(Antibiotic growth promoters)是第一选择。AGPs自20世纪50年代开始在动物生产中应用，至今已有60多年的历史。有报道说，美国每年生产的抗生素约有45％用于饲用，而约80％家禽、75％猪、60％肉牛及75％奶牛都曾用过AGPs(杨波，2007)。据调查推算，中国每年生产抗生素原料约21万吨，其中9.7万吨用于畜牧养殖业，占年总产量的46.1％。但对AGPs应用的合理性，从一开始就争论不休，焦点是其对人体健康的危害和对环境的污染。随着长期超剂量不合理使用AGPs，不严格执行休药期，甚至使用违禁药物，耐药菌的产生、畜禽疾病难治、抗生素在畜产品和环境中残留等问题对公共健康构成了严重的威胁。当前，各国正在逐步采取严厉的手段限制AGPs的使用。

此外，针对NE的主要致病原产气荚膜梭菌和球虫的第二选择就是疫苗。针对产气荚膜梭菌的疫苗主要有类毒素苗和基因工程苗(如多肽苗、亚单位苗、核酸苗、活载体苗、基因缺失苗等)(乔艺然，2015)，类毒素苗应用较多，但免疫成本高，安全性、残留毒性、效能等都有不足。球虫疫苗主要是活卵囊苗和基因工程苗(亚单位苗、核酸苗等)，活苗在生产中应用更多，但在使用中除了要保证疫苗质量外，还要注意每只鸡的接种剂量即免疫均匀度。同时，强毒苗引入新场后不易清除，弱毒苗在鸡舍环境中毒力逐渐增强，安全隐患较大。

因此，现有技术中NE防治存在问题：(1)抗生素防治造成细菌耐药性与抗生素残留问题；(2)疫苗预防存在较大的安全隐患；(3)针对此问题的理论研究较多，成型产品较少，而且绿色、高效、无残留、稳定性好的产品几乎空白。

发明内容

本发明的目的是克服了上述现有技术的缺点，提供了一种预防禽坏死性肠炎、维护肠道健康、促生长、提高免疫力从而提升养殖效益的绿色饲料添加剂及其制备方法。

为了实现上述目的，本发明一方面提供了一种预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂，其具有如下构成：

所述的添加剂包括百里香酚、香芹酚、丁香酚、苯甲酸、丁酸、二氧化硅和棕榈油。

较佳地，所述的添加剂包括以下质量比的组分：

本发明还提供了一种权利要求1或2所述的预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂的制备方法，所述的制备方法包括步骤：

(1)将称量好的百里香酚、香芹酚、丁香酚、苯甲酸、丁酸置于熔解罐中50℃熔解，得到均一的第一混合物；

(2)用载体二氧化硅吸附所述的第一混合物，吸附混合5～10min，形成固体颗粒，即第二混合物；

(3)将壁材棕榈油80℃熔解后，对第二混合物进行包衣、凝固，冷却形成包衣膜；

(4)将包衣完的物料经16目过筛，筛下物即为所述的饲料添加剂。

采用了本发明的绿色禽用饲料添加剂及其制备方法，可以有效抑制产气荚膜梭菌等有害菌，增加有益菌，维护肠道菌群平衡；减少球虫卵囊数；修复肠道损伤；提高抵抗力，协同增效，促生长、重修复、抗炎症、调免疫、提高抵抗力，从而提升养殖效益。

附图说明

图1为本发明的饲料添加剂的制备方法的流程示意图。

图2～3为本发明的饲料添加剂在不同消化道的释放情况示意图。

图4为本发明的饲料添加剂的存储稳定性示意图。

图5为本发明的饲料添加剂对鸡源产气荚膜梭菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏菌的抑制效果示意图。

具体实施方式

为了能够更清楚地描述本发明的技术内容，下面结合具体实施例来进行进一步的描述。

本发明提供了一种预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂，所述的饲料添加剂包括百里香酚、香芹酚、丁香酚、苯甲酸、丁酸、二氧化硅和棕榈油。

其中，所述的饲料添加剂包括以下质量比的组分：

所述的饲料添加剂的制备过程包括步骤：

称量百里香酚、香芹酚、丁香酚、苯甲酸、丁酸，置于溶解罐中50℃熔解为液体组分，形成第一混合物；

再用载体二氧化硅吸附第一混合物，吸附混合5～10min，形成固体颗粒，即第二混合物；

将壁材棕榈油80℃熔解后，对固体颗粒进行包衣、凝固，在固体颗粒表面形成包衣膜。将包衣完的物料经16目过筛，筛下物即为所述的预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂。

其中，所述的饲料添加剂为白色颗粒。所述的饲料添加剂为具有缓释作用、能作用于整个消化道且重点作用于后肠道的饲料添加剂。

本发明还提供了一种饲料，所述的饲料包括所述的预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂。

以下通过实施例对本发明的产品进行进一步说明。

实施例1：

采用以下质量比的组分制备本发明的饲料添加剂：

百里香酚11％、香芹酚11％、丁香酚10％、苯甲酸8％、丁酸5％、二氧化硅25％、棕榈油30％。

将称量好的植物精油、有机酸，置于熔解罐中熔解，得到均一的第一混合物；用二氧化硅吸附第一混合物，形成固体颗粒，即第二混合物；将棕榈油熔解后，对第二混合物进行包衣、凝固，冷却形成包衣膜；将包衣完的物料经16目过筛，筛下物即为本发明产品的具体实施例。

实施例2：

上述实施例1中的产品在模拟家禽消化道环境中的释放情况：

如图2～3所示，经过该工艺处理后的产品在家禽消化道不同部位表现出了较好的缓释效果，在胃中释放率约15～20％，在肠道释放率约80～85％，能够达到缓释效果。

实施例3：

上述实施例1产品50℃下存放时的存储(热)稳定性：

如图4所示，本发明产品主成分含量与配方值的比值变化缓慢，在20周时仍然高于95％，说明产品在50℃条件下稳定性好。

实施例4：

上述实施例1产品的使用效果评估：

1)对产气荚膜梭菌等有害菌的体外抑制效果

图5显示了本发明产品对禽源产气荚膜梭菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏菌的抑菌圈直径，同时与恩拉霉素体外抑菌效果进行比较。从图4可知，本发明产品对禽源产气荚膜梭菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏菌均高度敏感(抑菌圈直径20mm以上)，恩拉霉素对产气荚膜梭菌中度敏感(抑菌圈直径15～20mm)。可见，本发明产品体外抑制产气荚膜梭菌的效果优于恩拉霉素。

2)动物试验一：

上述实施例1产品对肉鸡球虫、产气荚膜梭菌感染的影响

试验设计：将240只AA⁺肉公鸡随机分为3个处理组，包括基础日粮组、基础日粮+AGPs(80g/T 50％维吉尼亚霉素预混剂+500g/T 20％莫能菌素预混剂)组、基础日粮+产品(800g/T)组，每组8个重复，其中4个重复不攻毒，其余4个重复攻毒，每个重复10只鸡。

攻毒处理的鸡只在d 12分别灌服混合型球虫活疫苗(22000卵囊/mL，正常免疫的20倍量)1mL，d 21～23连续灌服新鲜产气荚膜梭菌培养液(1×10⁸cfu/mL)1mL/天，非攻毒处理的鸡只分别灌服等量的PBS缓冲液和培养基。球虫攻毒后第8天即d 20，收集各组的全部粪便，用麦克马斯特法进行卵囊计数。再从各组每个重复中随机选取2只鸡麻醉处死后采集盲肠及其内容物，-20℃保存，尽早匀浆并用胃蛋白酶消化，采用麦克马斯特法对匀浆中的卵囊进行计数。产气荚膜梭菌感染后第3、9、17天即d 26、32、40，从各组每个重复中随机选取2只鸡麻醉处死后采集盲肠食糜，-20℃保存，尽快用于细菌(包括产气荚膜梭菌、乳酸菌)计数。

试验结果：

A对生产性能的影响

结果表明：在d 1～21、d 22～42和d 1～42，本发明产品组料肉比均显著较基础日粮组低(P<0.05)，与AGPs组相近(P>0.05)；攻毒组平均采食量、平均体增重均较不攻毒组高，料肉比在前期相近，后期攻毒组较不攻毒组低。20倍球虫活疫苗攻毒情况下出现这种结果，推测本发明产品对球虫有作用，可以降低球虫发病风险、促进免疫效果。

B对球虫卵囊的影响

结果表明：球虫感染后第8天(d 20)，本发明产品组、AGPs组的粪便和盲肠食糜中球虫卵囊数均较基础日粮组显著下降(P<0.05)，且本发明产品组在卵囊减少方面较AGPs有明显优势。同时，不攻毒处理的鸡只卵囊排出量明显低于攻毒处理的，这一方面印证生产性能的结果，另一方面也暗示整个养殖环境中可能存在隐性球虫感染，因为不攻毒的各组均检测出卵囊数。

C对肠道菌群的影响

结果表明：产气荚膜梭菌感染后第9天(d 32)、第17天(d 40)，本发明产品组盲肠中乳酸菌数与产气荚膜梭菌数的比值(有益菌/有害菌)明显较AGPs组、基础日粮组高(P<0.05)，攻毒后第3天(d 26)此比值在三个组间无明显差异。从日龄来看，本发明产品组比值在攻毒后第3、9、17天呈增加趋势，AGPs组先减后增，基础日粮组在d 40才略有增加。可见，本发明产品可抑制产气荚膜梭菌、促进有益菌。

3)动物试验二：

上述实施例1产品不同添加水平对肉鸡坏死性肠炎(球虫、产气荚膜梭菌感染)的影响试验设计：将504只AA⁺肉公鸡随机分为6个处理组，包括阴性对照组(基础日粮，不攻毒)、阳性对照组(基础日粮，攻毒)、AGPs组【基础日粮+AGPs(200g/T 15％亚甲基水杨酸杆菌肽+500g/T 20％莫能菌素预混剂，攻毒】、200g/T产品组(基础日粮+200g/T产品，攻毒)、500g/T产品组(基础日粮+500g/T产品，攻毒)、800g/T产品组(基础日粮+800g/T产品，攻毒)，每组7个重复，每个重复12只鸡。在d 13，给攻毒组鸡只分别灌服1mL混合鸡球虫卵囊液(鸡巨型艾美耳球虫1.0×10⁴个/mL、鸡毒害艾美耳球虫2.0×10⁴个/mL)，不攻毒组灌服等量的PBS缓冲液。分别收集球虫感染后第5天(d 18)的粪便，用麦克马斯特法进行卵囊计数。在球虫感染后第5-8天即d 18～21，分别给攻毒组鸡只连续灌服1mL/天新鲜培养的产气荚膜梭菌菌液(10⁸cfu/mL)，不攻毒组灌服等量的培养基。在d 28，从各组每个重复中随机选取1只体重接近的健康鸡只称重后剖杀，观察十二指肠、空肠、回肠病变并记分，收集盲肠内容物以供细菌计数。

A对生产性能的影响

结果表明：在d 1～21，本发明产品组料肉比没有表现出明显优势，梯度之间200g/T较低。在d 22～42，本发明产品200g/T组料肉比最低(P<0.05)，且较抗生素组、阴性对照组低，500、800g/T产品组料肉比均较阳性对照组、阴性对照组低。全期来看料肉比，AGPs组料肉比最低，其次是阴性对照组，接着是本发明产品200、500、800g/T组，阳性对照组最高，且本发明产品200g/T组较阳性对照组差异显著(P<0.05)。可见，本发明产品可明显降低料肉比，尤其在后期阶段，200g/T也有明显效果。

B对肠道病变的影响

注：小肠总病变记分是综合十二指肠、空肠、回肠的病变记分计算而来。

结果表明：在产气荚膜梭菌攻毒后第7天(d 28)，本发明产品组肠道病变情况显著轻于阳性对照组(P<0.05)，随着添加量的增加，病变逐渐减少，尤其800g/T优于阴性对照组和AGPs组。在d 42，本发明500g/T产品组小肠病变记分最低，而AGPs组病变较高。可见，本发明产品可明显降低感染后的肠道损伤，效果优于AGPs。

C对球虫卵囊的影响

结果表明：在球虫感染后第5天(d 18)，本发明产品组粪便中球虫卵囊数较阳性对照组显著降低(P<0.05)，但高于APGs组。这说明，本发明产品可明显减少球虫卵囊数，从而降低坏死性肠炎发生率。

D对肠道菌群的影响

结果表明：在产气荚膜梭菌感染后第7天(d 28)，本发明产品组较阳性对照组显著降低盲肠中产气荚膜梭菌数量(P<0.05)，但梯度之间差异不显著(P>0.05)。对于盲肠中乳酸菌，本发明产品组较阳性对照组显著增加(P<0.05)，500g/T组高于AGPs组和阴性对照组，但均差异不显著(P>0.05)。可见，本发明产品可显著抑制产气荚膜梭菌，增加有益菌，200g/T也有效。

4)动物试验三：

上述实施例1产品对蛋鸡预防坏死性肠炎、提高生产性能的影响

试验设计：

试验地点江苏丰城某蛋鸡养殖场。该场由于养殖设备问题，青年鸡转入产蛋舍后10天左右出现球虫感染现象，继而引发坏死性肠炎。选择日龄相近的2栋蛋鸡(5.3万羽/栋)，以栋为单位，随机分为对照组和本发明产品组。试验从转群后(d 100)开始，对照组饲喂基础日粮，本发明产品组饲喂基础日粮+500g/T本发明产品。试验期为d 100～165日龄。观察鸡群、粪便等情况，记录鸡群产蛋率、死淘等。

A对鸡群、粪便的影响

据试验负责人反映，对照组在d 111出现料便、轻微血便，d 116稀便较多；解剖鸡只发现，有的小肠中后段胀气明显，肠管浆膜有出血斑点，肠壁变薄；d 125后仍有少量稀便。试验组在d 115零星出现料便、轻微血便现象，稀便少见；在d 120后未发现料便、血便、稀便情况，粪便成型度好。

B对产蛋率、死淘的影响

结果表明：本发明产品组在d 165平均产蛋率较对照组高3％，试验期间平均日死淘显著降低。可见，本发明产品可减轻球虫感染后的损伤，有效预防坏死性肠炎，提升养殖效益。

采用了本发明中的预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂及相应的饲料，产品中植物精油具有抑菌(尤其G⁺菌)、抑制球虫、抗炎症、提高免疫力等功效；苯甲酸具有较好的抑菌作用；丁酸具有较好的抑菌作用，同时也是肠上皮细胞的优质能量来源，具有修复肠粘膜、促进肠粘膜分泌抗菌肽的作用，还可与植物精油协同增效；具有缓释效果，能够减少球虫卵囊数，修复球虫感染后的肠道损伤，多水平、全方位抑制产气荚膜梭菌，提高免疫力，有效预防坏死性肠炎。

在此说明书中，本发明已参照其特定的实施例作了描述。但是，很显然仍可以作出各种修改和变换而不背离本发明的精神和范围。因此，说明书和附图应被认为是说明性的而非限制性的。

Claims (3)

1.一种预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂，其特征在于，所述的添加剂包括百里香酚、香芹酚、丁香酚、苯甲酸、丁酸、二氧化硅和棕榈油。

2.根据权利要求1所述的预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂，其特征在于，所述的添加剂包括以下质量比的组分：

3.一种权利要求1或2所述的预防禽坏死性肠炎的绿色饲料添加剂的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括步骤：

(1)将称量好的百里香酚、香芹酚、丁香酚、苯甲酸、丁酸，置于熔解罐中50℃熔解，得到均一的第一混合物；

(2)用载体二氧化硅吸附所述的第一混合物，吸附混合5～10min，形成固体颗粒，即第二混合物；

(3)将壁材棕榈油80℃熔解后，对第二混合物进行包衣、凝固，冷却形成包衣膜；

(4)将包衣完的物料经16目过筛，筛下物即为所述的饲料添加剂。