CN109486993A - 一种高蛋白大豆种质的选育方法 - Google Patents
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Abstract
一种高蛋白大豆种质的选育方法,它涉及一种农作物选育技术。本发明的目的是要解决现有的育种方法盲目性较大、实现育种目标较难的问题。方法:1.收集整理稳定可靠的大豆蛋白质含量QTL;2.大豆F2中基因型鉴定;3.大豆F2杂合单株籽粒蛋白质含量测定;4.进一步选择基因型杂合的高蛋白单株;5.筛选的高蛋白杂合单株的纯合;即完成一种高蛋白大豆种质的选育方法。本发明一种高蛋白大豆选育方法目标明确、选择效果好;经过多轮的基因型和表型选择后能显著选育高蛋白大豆新种质;选育的高蛋白大豆新种质,籽粒蛋白质含量比原始亲本蛋白质含量提高20%以上,籽粒蛋白质含量能达到54%以上。本发明可获得一种高蛋白大豆种质的选育方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种高蛋白大豆种质的选育方法,属于农业技术领域。
背景技术
蛋白质资源短缺是21世纪人们面临的全球性严重问题,大豆蛋白占据了全球蛋白消费的68%(http://www.soystats.com),提高大豆籽粒蛋白质含量具有重要意义。分子标记育种被认为是21世纪植物育种的基本方法。美国农业部网站上(https://www.soybase.org)公布了241个大豆蛋白质含量QTL,如何利用这些标记进行育种是研究的热点。
本发明提供了一种联合大豆籽粒蛋白表型和分子标记选育高蛋白大豆种质的方法,以提高大豆高蛋白育种的效率。
发明内容
本发明的目的提供一种高蛋白大豆种质的选育方法。
本发明采用如下技术方案
一种高蛋白大豆种质的选育方法,其步骤如下:
(1)收集整理稳定可靠的大豆蛋白质含量QTL
从文献、网站等收集大豆蛋白质含量QTL,整理出稳定可靠的位点及其紧密连锁的基于PCR扩增鉴定的分子标记(如SSR标记、Indel标记等)。
(2)大豆F2中基因型鉴定
提取大豆F2单株基因型(F2群体内单株数在100以上),鉴定大豆蛋白质含量QTL基因型(至少1个QTL位点),筛选出杂合单株。
(3)大豆F2杂合单株籽粒蛋白质含量测定
利用快速无损技术(近红外)快速测定筛选出的大豆F2单株籽粒蛋白质含量,进一步筛选中籽粒蛋白质含量较高的基因型杂合单株(10个单株左右)。
(4)进一步选择基因型杂合的高蛋白单株
重复步骤(2)和(3),直至筛选出的杂合单株籽粒蛋白质含量符合育种目标。
(5)筛选的高蛋白杂合单株的纯合
种植筛选出来的高蛋白杂合单株,选出基因型纯合的单株,同时测定籽粒蛋白质含量,选出籽粒蛋白质含量高、基因型纯合的大豆种质。
本发明具有如下有益效果:
(1)采用本发明,对收集整理的稳定蛋白质含量QTL进行选择,目标明确,选择效果好;
(2)采用本发明,经过多轮的基因型和表型选择后能显著选育高蛋白大豆新种质;
(3)采用本发明,选育的高蛋白大豆新种质,籽粒蛋白质含量比原始亲本蛋白质含量提高20%以上;
(4)采用本发明,选育的高蛋白大豆新种质,籽粒蛋白质含量能达到54%以上。
附图说明
图1.分子标记在F2群体中的扩增产物。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
(1)稳定可靠的大豆蛋白质含量QTL整理
结合重组自交系定位结果选取稳定可靠的大豆蛋白质含量QTL3个,分别位于A2(Gm08),B2(Gm14),L(Gm19)三条染色体上,并找到对应的紧密连锁标记Satt119,Satt020和Satt481。
(2)大豆杂交组合F2单株基因型鉴定
提取杂交组合F2单株叶片,提取DNA,鉴定单株在3个QTL位点上的基因型,选出在QTL位点上杂合的单株,即图1中含有2条清晰条带的单株。
(3)大豆F2杂合单株籽粒蛋白质含量测定
利用FOSS近红外1241快速无损测定大豆F2杂合单株,根据表型及育种规模,选择一定数量的高蛋白单株(10株)。
(4)进一步选择基因型杂合的高蛋白单株
种植选择出的高蛋白基因型杂合单株,对其衍生的后代进行基因型鉴定,选择基因型杂合单株,测定籽粒蛋白质含量,选择籽粒蛋白质含量高的基因型杂合单株,直到蛋白质含量符合育种预期,本例中选择出籽粒蛋白质含量达到52%的大豆种质。
(5)筛选的高蛋白杂合单株的纯合
种质选择出的高蛋白质基因型杂合大豆单株,在其衍生后代中选择基因型增效纯合单株,测定籽粒蛋白质含量,发现籽粒蛋白质含量最高单株能达到54%。继续种植优选单株,在2015年、2016年、2017年其籽粒蛋白质含量都在53%以上,选育出高蛋白大豆新种质。
Claims (4)
1.一种高蛋白大豆种质的选育方法,其特征在于一种高蛋白大豆种质的选育方法是按以下步骤完成的:
(1)收集整理稳定可靠的大豆蛋白质含量QTL
从文献、网站等收集大豆蛋白质含量QTL,整理出稳定可靠的位点及其紧密连锁的基于PCR扩增鉴定的分子标记(如SSR标记、Indel标记等);
(2)大豆F2中基因型鉴定
提取大豆F2单株基因型,鉴定大豆蛋白质含量QTL基因型,筛选出杂合单株;
(3)大豆F2杂合单株籽粒蛋白质含量测定
利用快速无损技术(近红外)快速测定筛选出的大豆F2单株籽粒蛋白质含量,进一步筛选中籽粒蛋白质含量较高的基因型杂合单株;
(4)进一步选择基因型杂合的高蛋白单株
重复步骤(2)和(3),直至筛选出的杂合单株籽粒蛋白质含量符合育种目标;
(5)筛选的高蛋白杂合单株的纯合
种植筛选出来的高蛋白杂合单株,选出基因型纯合的单株,同时测定籽粒蛋白质含量,选出籽粒蛋白质含量高、基因型纯合的大豆种质。
2.根据权利要求1所述的一种高蛋白大豆种质的选育方法,其特征在于步骤(2)中基因型鉴定出杂合单株。
3.根据权利要求1所述的一种高蛋白大豆种质的选育方法,其特征在于步骤(3)中利用快速无损技术鉴定杂合F2中籽粒蛋白质含量较高的单株。
4.根据权利要求1所述的一种高蛋白大豆种质的选育方法,其特征在于步骤(4)中重复步骤(2)和(3)的程序,直至选育符合育种目标的种质。
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