CN109401977A - 一种活性微藻营养修复液及其制备方法 - Google Patents

一种活性微藻营养修复液及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种活性微藻营养修复液，属于农业技术领域，其技术方案要点是，包含多种呈活体状态的微藻，所述微藻包括绿藻蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa）和固氮蓝藻水华鱼腥藻（Anabaena azotica），按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:（0.2‑5），本发明还公开了上述活性微藻营养修复液的制备方法，包括有以下步骤：S1，分别扩大培殖绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻，获得两种藻液；S2，将两种藻液混合获得活性微藻营养修复液，本发明的活性微藻营养修复液具有修复土壤、补充天然氮素、活化土壤微量元素、提高植物抗逆性、预防病虫害、提升农产品质量及产量的效果。

Description

一种活性微藻营养修复液及其制备方法
技术领域
本发明涉及农业技术领域，特别涉及一种活性微藻营养修复液及其制备方法。
背景技术
当土壤肥力水平不能达到植物生长所需养料时，需要对土壤进行施肥，化学肥料是目前广泛使用的肥料，但是，施用化学肥料带来的负面影响不容忽视：生产化学肥料的原料中含有Zn、Cu、Co和Cr等重金属，这些重金属跟随化学肥料被施入土壤，并造成土壤中重金属元素的富集，通过植物吸收进入植物体内，影响植物生长以及农产品等的品质；化学肥料会降低土壤微生物的数量和活性，由此降低土壤微生物对土壤中有机质的转化、矿物的分解以及有毒物质的降解；长期施用化学肥料会加剧土壤的酸化，加重土壤板结，抑制植物根系发育，严重降低植物抗逆性。
微藻是一类在陆地土壤及河流湖泊分布广泛、光合利用度高的自养植物，是在显微镜下才能辨别其形态的微小的藻类群体，不仅本身营养丰富，而且细胞代谢能够产生多糖、蛋白质等营养物质，在食品、医药、饲料等领域均具有较高的应用价值。
经扩大培殖制备出来的微藻，能够用于制备生物肥料，代替化学肥料，具有促进植物生长的作用。但是，目前添加进生物肥料的微藻通常呈死亡状态，仅能利用其本身组织中的营养物质，很大程度上限制了其作为肥料的价值。
发明内容
针对现有技术不足，本发明的目的之一在于提供一种活性微藻营养修复液，包含多种活性微藻细胞，具有修复土壤、补充天然氮素、活化土壤微量元素、提高植物抗逆性、预防病虫害、提升农产品质量及产量的效果。
本发明的目的一是通过以下技术方案得以实现的：
一种活性微藻营养修复液，包含多种呈活体状态的微藻，所述微藻包括绿藻蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)和固氮蓝藻水华鱼腥藻(Anabaena azotica)，按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:(0.2-5)。
较佳的，按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:(0.5-2)。
较佳的，按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:(0.8-1.2)。
绿藻蛋白核小球藻属于绿藻，其光合作用是其他植物的数十倍，摄取太阳能的力量非凡，只要是在有可见光源的状态下都可以进行光合作用，能够增加水体溶氧，降解水体氨氮、H2S、亚硝酸盐等。固氮蓝藻水华鱼腥藻属于固氮蓝藻，具有高效的固氮和分解功能，能固定大气中的分子态氮成为结合氮，并进一步合成蛋白质。
本发明的活性微藻营养修复液中，微藻均呈活体状态，且配比合理，绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻之间具有很好的兼容性和共生性，每lmL营养修复液中，微藻活性细胞的个数可达106以上，且生命力旺盛，营养修复液的保存期达18个月。
试验发现，本发明的活性微藻营养修复液施入土壤中后：
微藻包裹住植物根系，与植物根系形成共生互动的关系，从空气中固定氮素并供给植物根系。微藻不仅可以在植物根系表面生存、繁殖，还可以进入植物内部，在植物的根、茎、叶、果中生存，给植物提供丰富、均衡的天然营养素；
微藻将强大的生命注入土壤，微藻细胞大量繁殖，吸收二氧化碳，释放大量氧气，为土壤中的喜氧微生物创造了良好的生存环境，激活土壤中各类原住微生物群，健全土壤的微生态环境，使土壤生机勃勃，充满了活力；
微藻通过其光能有机自养属性繁殖发展、自生代谢，对土壤中的化学残留、重金属残留等污染物进行吸附、降解、转化、固化，能将极端环境中动植物及人类无法分解的有机物分解为无机物、水和二氧化氮，从而改变土壤的结构，调节土壤PH值，提升土壤有机质和肥力。微藻还可分解和溶解难溶性磷、钾，并将难溶性钙、镁或硫元素活化，变为植物可吸收的有效态；
微藻生命周期的生命活动所产生的生物刺激素为作物提供营养刺激生长，并可控制或抑制植物病原体的活动，增强农作物的抗逆能力，改变土壤中原有重金属元素的存在方式，阻断重金属通过植物根系进入植物体，为人类生产安全健康的食品。
此外，相比现有的化学肥料，本发明的营养修复液不含有任何化学成分：不会造成土壤中重金属元素的富集，有效降低了植物对重金属元素的吸收，进而提高植物生长以及农产品等的品质；不会降低土壤微生物的数量和活性，不影响土壤微生物对土壤中有机质的转化、矿物的分解以及有毒物质的降解；不会造成土壤的酸化、板结等现象。
综上，本发明的营养修复液作为一种营养丰富的生物肥料，具有良好兼容性和共生性，能够具有修复土壤、补充天然氮素、活化土壤微量元素、提高植物抗逆性、预防病虫害、提升农产品质量及产量。
本发明的目的之二在于提供一种上述活性微藻营养修复液的制备方法，包括有以下步骤：
S1，分别扩大培殖绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻，获得两种藻液；
S2，将两种藻液混合获得活性微藻营养修复液。
较佳的，步骤S1的扩大培殖所用的培养基溶液包括：2-6mg/L乙二胺四乙酸二钠、5-13mg/L柠檬酸、0.05-0.15mg/L FeSO4·7H2O、0.15-0.35g/L NaHCO3、0.03-0.1g/LCaCl2、0.05-0.2g/L MgSO4·7H2O、1-3.5g/LNaNO3、0.05-0.15g/L K2HPO4、0.2-1g/L KH2PO4、1.5-2.5mg/L MnCl2·4H2O、0.02-0.05mg/L ZnSO4·7H2O、0.05-0.1mg/L CuSO4·5H2O、0.02-0.05mg/L Na2MoO4·2H2O、2-4mg/L H3BO3。
通过采用上述方案，培养基溶液中的各组分能够为微藻提供营养元素，促进微藻的健康生长和快速繁殖，提高微藻的生命活性，进而提高营养修复液的功效。
较佳的，步骤S1的扩大培殖过程包括：选择和分离单个微藻细胞，将单个微藻细胞进行分级扩大培殖，每一级扩大培殖过程中，微藻细胞的数量≥106个/mL时，进入下一级扩大培殖过程。
通过采用上述方案，大量实验证明，在微藻培养过程中，当微藻活性细胞的生物密度为≥106个/mL时，较适合微藻的存活和继续更大的繁殖，以此作为分级扩大培养的标准，有利于提高微藻培养的效率和质量。
较佳的，步骤S1的扩大培殖过程包括：单个微藻细胞于15mL培养基溶液中培殖10-15天，获得15mL藻液→转接种到85mL培养基溶液中继续培殖10-15天，获得100mL藻液→转接种到0.9L培养基溶液中继续培殖10-15天，获得1L藻液→转接种到4L培养基溶液中继续培殖10-15天，获得5L藻液→转接种到13L培养基溶液中继续培殖10-15天，获得18L藻液→转接种到782L培养基溶液中继续培殖10-15天，获得800L藻液。
通过采用上述方案，经发明人实验证明，上述培养方式培殖获得的微藻的生物量适宜、微藻活性高、质量好，易于微藻培殖的产业化。
较佳的，步骤S1的扩大培殖过程中，光照强度为2300-2700lux。
较佳的，步骤S1的扩大培殖过程中，培殖温度为25-27℃。
通过采用上述方案，设置适宜的光照强度和培殖温度，能够进一步促进微藻的生长繁殖。
较佳的，步骤S1的扩大培殖过程中：向藻液里持续性通入净化空气，净化空气的压强为0.14-0.6Mpa；向藻液里间歇性通入CO2气体，CO2气体的压强为0.14-0.6Mpa，通气间隔3-5h，每次通20-50min。
通过采用上述方案，通入的气体不仅能够促进微藻细胞的生长繁殖，还能起到搅动藻液的作用，使得微藻在藻液中均匀分布，提高微藻生长繁殖的均匀性和一致性。
综上所述，本发明具有以下有益效果：
1、活性微藻营养修复液中的微藻均呈活体状态，能够进行细胞代谢等一系列的生命活动，具有修复土壤、补充天然氮素、活化土壤微量元素、提高植物抗逆性、预防病虫害、提升农产品质量及产量的效果；
2、本发明的营养修复液中，两种微藻之间能够具有很好的兼容性和共生性，每lmL营养修复液中，微藻活性细胞的个数可达106以上，且能够保持旺盛的生命力，营养修复液的保存期达18个月；
3、本发明的营养修复液的制备过程通过大量实验获得，培殖效率高，微藻活性高。
具体实施方式
以下对本发明作进一步详细说明。
藻母来源
以下实施例中的绿藻蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)和固氮蓝藻水华鱼腥藻(Anabaenaazotica)的藻母来源于中国科学院典型培养物保藏委员会淡水藻种库。
实施例1
一种活性微藻营养修复液，制备方法包括有以下步骤：
S1，分别扩大培殖绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻，获得两种藻液，其中，扩大培殖中，
两种藻液的扩大培殖过程均包括：显微镜下选择和分离单个微藻细胞→单个微藻细胞于15mL培养基溶液中培殖10天，获得15mL藻液→转接种到85mL培养基溶液中继续培殖10天，获得100mL藻液→转接种到0.9L培养基溶液中继续培殖10天，获得1L藻液→转接种到4L培养基溶液中继续培殖10天，获得5L藻液→转接种到13L培养基溶液中继续培殖10天，获得18L藻液→转接种到782L培养基溶液中继续培殖10天，获得800L藻液。上述每一级扩大培殖结束时，微藻活性细胞的数量均≥106个/mL，最终获得的藻液中的微藻活性细胞的数量≥106个/mL；
所用培养基溶液均包括：2mg/L乙二胺四乙酸二钠、5mg/L柠檬酸、0.05mg/LFeSO4·7H2O、0.15g/L NaHCO3、0.03g/L CaCl2、0.05g/L MgSO4·7H2O、1g/L NaNO3、0.05g/L K2HPO4、0.2g/LKH2PO4、1.5mg/L MnCl2·4H2O、0.02mg/L ZnSO4·7H2O、0.05mg/L CuSO4·5H2O、0.02mg/LNa2MoO4·2H2O、2mg/L H3BO3；
光照强度为2300lux，培殖温度为25℃；向藻液里持续性通入净化空气，净化空气的压强为0.14Mpa；向藻液里间歇性通入CO2气体，CO2气体的压强为0.14Mpa，通气间隔3h，每次通20min。
S2，将两种藻液混合获得活性微藻营养修复液，按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:0.2，添加无菌水至微藻活性细胞的数量为106个/mL。
实施例2
与实施例1的区别在于，步骤S1的扩大培殖中，
两种藻液的扩大培殖过程均包括：显微镜下选择和分离单个微藻细胞→单个微藻细胞于15mL培养基溶液中培殖12天，获得15mL藻液→转接种到85mL培养基溶液中继续培殖10天，获得100mL藻液→转接种到0.9L培养基溶液中继续培殖12天，获得1L藻液→转接种到4L培养基溶液中继续培殖12天，获得5L藻液→转接种到13L培养基溶液中继续培殖12天，获得18L藻液→转接种到782L培养基溶液中继续培殖12天，获得800L藻液。上述每一级扩大培殖结束时，微藻活性细胞的数量均≥106个/mL，最终获得的藻液中的微藻活性细胞的数量≥106个/mL；
扩大培殖中：光照强度为2500lux，培殖温度为26℃；向藻液里持续性通入净化空气，净化空气的压强为0.3Mpa；向藻液里间歇性通入CO2气体，CO2气体的压强为0.3Mpa，通气间隔4h，每次通35min。
实施例3
与实施例1的区别在于，步骤S1的扩大培殖中，
两种藻液的扩大培殖过程均包括：显微镜下选择和分离单个微藻细胞→单个微藻细胞于15mL培养基溶液中培殖15天，获得15mL藻液→转接种到85mL培养基溶液中继续培殖15天，获得100mL藻液→转接种到0.9L培养基溶液中继续培殖15天，获得1L藻液→转接种到4L培养基溶液中继续培殖15天，获得5L藻液→转接种到13L培养基溶液中继续培殖15天，获得18L藻液→转接种到782L培养基溶液中继续培殖15天，获得800L藻液。上述每一级扩大培殖结束时，微藻活性细胞的数量均≥106个/mL，最终获得的藻液中的微藻活性细胞的数量≥106个/mL；
扩大培殖中：光照强度为2700lux，培殖温度为27℃；向藻液里持续性通入净化空气，净化空气的压强为0.6Mpa；向藻液里间歇性通入CO2气体，CO2气体的压强为0.14-0.6Mpa，通气间隔5h，每次通50min。
实施例4
与实施例2的区别在于，步骤S1中，
所用培养基溶液均包括：4mg/L乙二胺四乙酸二钠、9mg/L柠檬酸、0.1mg/L FeSO4·7H2O、0.25g/L NaHCO3、0.07g/L CaCl2、0.12g/L MgSO4·7H2O、2g/L NaNO3、0.1g/L K2HPO4、0.6g/LKH2PO4、2mg/L MnCl2·4H2O、0.03mg/L ZnSO4·7H2O、0.07mg/L CuSO4·5H2O、0.03mg/LNa2MoO4·2H2O、3mg/L H3BO3。
实施例5
与实施例2的区别在于，步骤S1中，
所用培养基溶液均包括：6mg/L乙二胺四乙酸二钠、13mg/L柠檬酸、0.15mg/L FeSO4·7H2O、0.35g/L NaHCO3、0.1g/L CaCl2、0.2g/L MgSO4·7H2O、3.5g/L NaNO3、0.15g/L K2HPO4、1g/LKH2PO4、2.5mg/L MnCl2·4H2O、0.05mg/L ZnSO4·7H2O、0.1mg/L CuSO4·5H2O、0.05mg/LNa2MoO4·2H2O、4mg/L H3BO3。
实施例6
与实施例2的区别在于，步骤S1中，
所用培养基溶液为无菌水。
实施例7
与实施例4的区别在于，步骤S2中，
按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:0.5。
实施例8
与实施例4的区别在于，步骤S2中，
按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:0.8。
实施例9
与实施例4的区别在于，步骤S2中，
按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:1.2。
实施例10
与实施例4的区别在于，步骤S2中，
按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:2。
实施例11
与实施例4的区别在于，步骤S2中，
按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:5。
对比例1
常规氮肥：尿素。
活性微藻营养修复液中微藻活性细胞成活率及兼容性和共生性试验
将实施例1-11制得的11份活性微藻营养修复液于室温避光环境下保存10天、1个月、2个月、3个月、6个月，镜检11份活性微藻营养修复液，以镜检时微藻活性细胞数量与初始时微藻活性细胞数量之比计算微藻的成活率，镜检前摇匀，检测结果如表1所示。
表1活性微藻营养修复液中微藻活性细胞成活率检测结果
由表1可以看出：
(1)实施例1-5和实施例7-11制备的活性微藻营养修复液，6个月时，绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻的成活率仍能保持在93％以上；其中，实施例8和实施例9的活性微藻营养修复液的效果最为显著，6个月时，两种微藻的成活率均保持在97％，这说明，本发明的活性微藻营养修复液中，绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻均能长期保持生长活性，并且具有很好的兼容性和共生性，使得活性微藻营养修复液拥有较长保质期；
(2)对比实施例2和实施例6，实施例6对应的微藻成活率具有大幅降低，6个月时，实施例6对应的绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻的成活率分别降至82％和80％，说明，相比于采用无菌水，本发明提供的培养基溶液的组分配比合理，能够为微藻提供营养元素，促进微藻的健康生长和繁殖；对比实施例2、实施例4和实施例5，可以进一步看出，本发明提供的培养基的组分浓度对微藻的活性同样存在影响；
(3)对比实施例7-11，绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻的个体数量之比对成活率具有一定的影响，当上述比例在1:(0.8-1.2)时，成活率较高，这说明，该比例范围内的绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻，能够更好的互利共生，更具兼容性和共生性。
活性微藻营养修复液改良土壤和增产试验
土壤有效氮量有利于促进作物生长，与作物生长和作物产量关系密切，在施肥中意义较大。土壤碱解氮是指用碱提取法所测得的土壤氮素，常用作土壤有效氮量的评判指标。本次试验选取同一块棉花种植地的12个相同的区域，分别采用实施例1-11制备的活性微藻营养修复液和对比例1的尿素进行施肥，进行为期3年的对比试验，其中，活性微藻营养修复液的喷施量为400mL/亩，尿素按常规施用量施用。期间：取棉花根系区域0-20cm土壤，测定土壤碱解氮，以反映土壤氮素供应情况，检测结果如表2所示；计算采用实施例1-11制备的活性微藻营养修复液相对于采用对比例1中的尿素，棉花平均年增产百分比，结果如表3所示。
表2土壤碱解氮测试结果
表3棉花增产试验结果
表2和表3分析：
(1)由表2可以看出，实施例1-5和实施例7-11制备的活性微藻营养修复液，一方面，能够显著增加土壤中的碱解氮的含量，另一方面，使得土壤中碱解氮的增速呈现逐年增加的趋势，两方面的效果均明显优于对比例1的常规氮肥。由表3可以看出，实施例1-5和实施例7-11制备的活性微藻营养修复液能够显著增加棉花产量。上述两方面的功效主要得益于：一方面，活性微藻营养修复液具有高效的固氮和分解功能，能固定大气中的分子态氮成为结合氮，并进一步合成蛋白质，增加土壤或水体肥力，促进棉花生长，提高棉花产量；另一方面，活性微藻营养修复液中的各种微藻之间具有很好的兼容性和共生性，每lmL营养修复液中，微藻活性细胞的个数可达106以上，营养修复液的保存期达18个月，能够长期高效的为土壤注入营养物质。
(2)参见表2，对比实施例2和实施例6，实施例6对应的土壤中碱解氮增量较低。参见表3，对比实施例2和实施例6，实施例6对应的棉花增产百分比较低。这说明实施例2中的微藻的活性高，这是因为，相比于采用无菌水，本发明提供的培养基溶液的组分配比合理，能够为微藻提供营养元素，促进微藻的健康生长和繁殖，促进微藻的活性，进而提高微藻降低土壤碱解氮、增加棉花产量的功效；
(3)参见表2和表3，对比实施例7-11，绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻细胞的个体数量之比对土壤中碱解氮增量和棉花增产均具有一定的影响，当上述比例在1:(0.8-1.2)时，土壤中碱解氮增量较高、棉花增产更明显。这说明，该比例范围内的绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻，能够更好的互利共生，更具兼容性和共生性，能够更好的为土壤补充氮素，促进棉花产量的提升。
此外，发明人在多个棉花种植示范点进行了上述试验，均得出与上述试验相同的试验结论。各示范点也普遍反应，施用本发明的活性微藻营养修复液的试验区：棉花生长健壮，遇低温灾害后，棉株受害轻、恢复快，病虫害现象明显减少；土壤板结现象均得到显著改善。这进一步说明，本发明的活性微藻营养修复液在提高植株抗逆性、预防病虫害、改善土壤板结等方面，意义重大。
活性微藻营养修复液降低农作物中的硝酸盐试验
目前，施用尿素等氮肥是农业增产的主要手段之一，但是，也会使得土壤中富集硝酸盐，进而被农作物吸收，导致农作物中硝酸盐的富集。人体食用富集硝酸盐的农作物后，硝酸盐能在人体内还原成对人体有毒的亚硝酸盐，影响人体健康。
本试验选取番茄、黄瓜、菜花、小萝卜和油菜作为试验对象。针对上述每一种农作物：选取同一块种植地的12个相同的区域，对该12个区域均采用尿素按常规施用量施用，并且，对其中11个区域再分别采用实施例1-11制备的活性微藻营养修复液进行喷施，喷施量为400mL/亩；农作物成熟后，分别测定农作物中的硝酸盐含量，计算出采用实施例1-11制备的活性微藻营养修复液和尿素共同施肥的农作物相对于仅采用尿素施肥的农作物，硝酸盐含量降低百分比，计算结果如表4所示。
表4农作物硝酸盐含量降低百分比测定结果
项目 番茄 黄瓜 菜花 小萝卜 油菜
实施例1 36.3-38.4 45.2-48.1 18.2-20.3 17.2-21.1 44.5-47.8
实施例2 36.6-38.7 45.7-48.4 18.4-20.6 17.6-21.2 44.9-48.3
实施例3 36.8-38.8 45.9-48.5 18.6-20.8 17.9-21.3 45.1-48.4
实施例4 36.1-39.5 46.2-48.8 18.8-21.0 18.1-21.5 45.2-48.5
实施例5 36.5-38.7 45.5-48.3 18.3-20.7 17.7-21.2 45.0-48.1
实施例6 32.3-35.2 36.8-42.7 17.2-19.3 16.1-19.7 43.1-46.2
实施例7 37.3-39.2 46.1-48.9 18.8-21.1 18.1-21.5 45.2-48.6
实施例8 38.4-40.6 46.8-49.2 19.6-21.5 18.7-21.9 45.9-49.1
实施例9 38.2-40.5 46.6-49.1 19.5-21.5 18.6-21.9 45.7-48.9
实施例10 37.9-39.7 46.4-49.1 19.2-21.2 18.4-21.7 45.5-48.7
实施例11 37.7-39.5 46.3-49.0 19.1-21.2 18.3-21.6 45.4-48.8
由表4可以看出：
(1)上述每一种农作物施加实施例1-5和实施例7-11对应的活性微藻营养修复液后均表现出了明显的硝酸盐含量降低的情况，实施例8和实施例9对应的硝酸盐含量降低最显著，这说明本发明的活性微藻营养修复液能够有效降低农作物对硝酸盐的吸收，提高农作物的品质；
(2)对比实施例2和实施例6，实施例6对应的硝酸盐含量降低百分比较低，说明实施例2中的微藻的活性高，降低农作物吸收硝酸盐的功效更加显著，这是因为，相比于采用无菌水，本发明提供的培养基溶液的组分配比合理，能够为微藻提供营养元素，促进微藻的健康生长和繁殖，进而提高微藻的活性；
(3)对比实施例7-11，绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻的个体数量之比对各类农作物中硝酸盐含量降低量具有一定的影响，当上述比例在1:(0.8-1.2)时，农作物中硝酸盐含量降低量较为明显，这说明，该比例范围内的绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻，能够更好的互利共生，更具兼容性和共生性，能够更好的发挥降低农作物吸收硝酸盐的功效。
活性微藻营养修复液提高果蔬糖度试验
选取苹果、桃、猕猴桃、荔枝、草莓、甜菜、甘蔗、芒果、西瓜、哈密瓜、大枣、葡萄作为试验对象。针对上述每一种果蔬，选取同一块种植地的12个相同的区域，分别采用实施例1-11制备的活性微藻营养修复液和对比例1的尿素进行施肥，其中，活性微藻营养修复液的喷施量为400mL/亩，尿素按常规施用量施用。果蔬成熟后，分别测定糖度，计算出采用实施例1-11制备的活性微藻营养修复液相对于采用对比例1的尿素，各类果蔬的糖度增加值，计算结果如表5所示。
表5果蔬糖度增加测定结果
项目 苹果 桃 猕猴桃 荔枝 草莓 甜菜
实施例1 1.0-2.1 1.0-2.2 1.7-2.2 2.3-3.3 1.3-3.1 0.6-2.2
实施例2 1.1-2.1 1.1-2.3 1.8-2.3 2.3-3.4 1.3-3.2 0.6-2.3
实施例3 1.1-2.2 1.2-2.4 1.8-2.4 2.4-3.4 1.4-3.3 0.7-2.3
实施例4 1.2-2.3 1.3-2.4 1.9-2.5 2.5-3.5 1.5-3.5 0.9-2.4
实施例5 1.1-2.2 1.2-2.4 1.8-2.4 2.4-3.4 1.4-3.4 0.8-2.3
实施例6 0.7-1.9 0.6-1.8 1.2-1.7 1.8-2.8 0.9-2.5 0.3-1.8
实施例7 1.2-2.4 1.3-2.4 1.9-2.6 2.6-3.6 1.5-3.6 1.0-2.4
实施例8 1.4-2.6 1.5-2.7 2.2-2.8 2.8-3.8 1.7-3.8 1.2-2.6
实施例9 1.3-2.6 1.5-2.6 2.1-2.8 2.8-3.7 1.7-3.7 1.2-2.5
实施例10 1.3-2.5 1.4-2.5 2.0-2.7 2.7-3.7 1.6-3.7 1.1-2.5
实施例11 1.2-2.5 1.4-2.5 2.0-2.6 2.7-3.6 1.6-3.6 1.1-2.5
项目 甘蔗 芒果 西瓜 哈密瓜 大枣 葡萄
实施例1 0.9-1.2 1.3-2.2 1.1-2.1 1.1-2.0 1.9-2.2 1.0-1.4
实施例2 1.0-1.2 1.4-2.3 1.2-2.2 1.2-2.1 2.0-2.3 1.1-1.5
实施例3 1.0-1.3 1.5-2.4 1.3-2.3 1.3-2.1 2.1-2.4 1.2-1.6
实施例4 1.1-1.5 1.6-2.7 1.4-2.4 1.4-2.2 2.1-2.5 1.2-1.7
实施例5 1.1-1.4 1.5-2.6 1.4-2.3 1.3-2.1 2.1-2.4 1.2-1.6
实施例6 0.6-0.9 0.8-1.8 0.7-1.8 0.8-1.6 1.3-1.7 0.7-1.0
实施例7 1.2-1.6 1.6-2.8 1.5-2.5 1.5-2.3 2.2-2.6 1.3-1.7
实施例8 1.4-1.8 1.9-2.9 1.7-2.8 1.7-2.5 2.4-2.8 1.5-1.9
实施例9 1.4-1.7 1.8-2.9 1.7-2.7 1.7-2.4 2.4-2.7 1.5-1.8
实施例10 1.3-1.7 1.7-2.9 1.6-2.7 1.6-2.4 2.3-2.7 1.4-1.8
实施例11 1.3-1.6 1.7-2.8 1.6-2.6 1.6-2.3 2.2-2.7 1.4-1.7
由表5可以看出：
(1)实施例1-5和实施例7-11对应的各类果蔬均表现出了糖度增加的情况，实施例8和实施例9对应的糖度增加最显著，这主要得益于本发明制备的活性微藻营养修复液能够促进植物微量元素的转化吸收，促进光合作用，从而增加了糖类物质积累；
(2)对比实施例2和实施例6，实施例6对应的糖度增加量较低，说明实施例2中的微藻的活性高，这是因为，相比于采用无菌水，本发明提供的培养基溶液的组分配比合理，能够为微藻提供营养元素，促进微藻的健康生长和繁殖；
(3)对比实施例7-11，绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻的个体数量之比对各类果蔬中糖度增加量具有一定的影响，当上述比例在1:(0.8-1.2)时，各类果蔬的糖度增加量较为明显，这说明，该比例范围内的绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻，能够更好的互利共生，更具兼容性和共生性，能够更好的为植物提供营养物质。
上述具体实施例仅仅是对本发明的解释，其并不是对本发明的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (10)

1.一种活性微藻营养修复液，其特征在于：包含多种呈活体状态的微藻，所述微藻包括绿藻蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa）和固氮蓝藻水华鱼腥藻（Anabaenaazotica），按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:（0.2-5）。
2.根据权利要求1所述的活性微藻营养修复液，其特征在于：按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:（0.5-2）。
3.根据权利要求2所述的活性微藻营养修复液，其特征在于：按微藻细胞个体数量计，绿藻蛋白核小球藻:固氮蓝藻水华鱼腥藻为1:（0.8-1.2）。
4.一种权利要求1-3任一所述的活性微藻营养修复液的制备方法，其特征在于，包括有以下步骤：
S1，分别扩大培殖绿藻蛋白核小球藻和固氮蓝藻水华鱼腥藻，获得两种藻液；
S2，将两种藻液混合获得活性微藻营养修复液。
5.根据权利要求4所述的活性微藻营养修复液的制备方法，其特征在于，步骤S1的扩大培殖所用的培养基溶液包括如下浓度的组分：2-6mg/L乙二胺四乙酸二钠、5-13mg/L柠檬酸、0.05-0.15mg/L FeSO4•7H2O、0.15-0.35g/L NaHCO3、0.03-0.1g/L CaCl2、0.05-0.2g/LMgSO4•7H2O、1-3.5g/L NaNO3、0.05-0.15g/L K2HPO4、0.2-1g/L KH2PO4、1.5-2.5mg/L MnCl2•4H2O、0.02-0.05mg/L ZnSO4•7H2O、0.05-0.1mg/L CuSO4•5H2O、0.02-0.05mg/L Na2MoO4•2H2O、2-4mg/L H3BO3。
6.根据权利要求5所述的活性微藻营养修复液的制备方法，其特征在于，步骤S1的扩大培殖过程包括：选择和分离单个微藻细胞，将单个微藻细胞进行分级扩大培殖，每一级扩大培殖过程中，微藻细胞的数量≥106个/mL时，进入下一级扩大培殖过程。
7.根据权利要求6所述的活性微藻营养修复液的制备方法，其特征在于，步骤S1的扩大培殖过程包括：单个微藻细胞于15mL培养基溶液中培殖10-15天，获得15mL藻液→转接种到85mL培养基溶液中继续培殖10-15天，获得100mL藻液→转接种到0.9L培养基溶液中继续培殖10-15天，获得1L藻液→转接种到4L培养基溶液中继续培殖10-15天，获得5L藻液→转接种到13L培养基溶液中继续培殖10-15天，获得18L藻液→转接种到782L培养基溶液中继续培殖10-15天，获得800L藻液。
8.根据权利要求4-7任一所述的活性微藻营养修复液的制备方法，其特征在于：步骤S1的扩大培殖过程中，光照强度为2300-2700lux。
9.根据权利要求4-7任一所述的活性微藻营养修复液的制备方法，其特征在于：步骤S1的扩大培殖过程中，培殖温度为25-27℃。
10.根据权利要求4-7任一所述的活性微藻营养修复液的制备方法，其特征在于，步骤S1的扩大培殖过程中：向藻液里持续性通入净化空气，净化空气的压强为0.14-0.6Mpa；向藻液里间歇性通入CO2气体，CO2气体的压强为0.14-0.6Mpa，通气间隔3-5h，每次通20-50min。
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