CN109364261B - 一种基于框架核酸的可控经皮给药制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种基于框架核酸的可控经皮给药制剂，该可控经皮给药制剂包括DNA药物复合物，所述DNA药物复合物为连接在一起的框架核酸和药物分子，所述药物分子为可经皮给药的药物。本发明还涉及一种基于框架核酸的可控经皮给药制剂的制备方法，包括提供框架核酸，该框架核酸和药物分子偶联形成DNA药物复合物。本发明避免了通过侵入性针头注射实现框架核酸体内运输这一给药途径造成的框架核酸的快速分解和消化，导致目标位点的生物利用率低的问题。本发明通过精确控制框架核酸的形状及尺寸，解决了现有技术中经皮制剂形状尺寸及透皮深度不可控的问题，为经皮给药提供一种新的途径。

Description

一种基于框架核酸的可控经皮给药制剂及其制备方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于框架核酸的可控经皮给药制剂及其制备方法。
背景技术
经皮给药(Transdermal drug delivery，TDD)是指药物涂布或敷贴于皮肤表面的一种给药方法。与传统的口服和注射给药方法相比，经皮给药具有以下优点：①药物经透皮吸收后，能较长时间维持稳定的血药浓度，避免了传统给药中药物浓度的峰谷现象，减轻不良反应；②药物绕过胃肠道或肝脏途径直接代谢，避免了胃肠道刺激及肝脏首过效应；③患者可自主用药，也可随时停药，减轻注射用药痛苦，提高了患者的顺应性。因此，经皮给药具有良好的应用前景。
皮肤是人体的第一道防线，保护体内各种组织和器官免受物理性、机械性、化学性和病原微生物性的侵袭。皮肤由角质层(stratum corneum，SC)、表皮层、真皮层、及皮下组织组成。其中，角质层由于其亲脂性与低渗透性被认为是药物透皮的主要障碍，使得多数药物不能或者不易于透过，因此，如何使药物突破角质层，有效吸收并发挥作用，是经皮给药研究的主要目的。为使更多药物能用于透皮给药，一些药剂学、化学及物理手段被用于促进药物的透皮吸收。最常用的方法是使用各种类型透皮吸收促进剂或者使用具有良好透皮能力的物质作为药物载体。
此前的研究表明，部分微米或纳米材料，包括微乳、脂质体、树状聚合物、聚合物纳米粒子等，在不借助任何物理辅助处理条件时，也具有良好的透皮能力，可以载带药物到达表皮层，甚至真皮层，以至在体内有效发挥作用。透皮能力主要取决于其物理性质，包括尺寸、形貌、电荷及材料组成。譬如，聚合物纳米粒子由于带有正电荷，能促进顶部部分细胞层吸收，使得其透皮性受到限制。但是，目前所有的技术还不能够对纳米颗粒的形状和尺寸实现精确的控制，尤其在大规模生产上。即使有些技术可行(譬如ParticleReplication InNon-Wetting Templates(PRINT))，但所得到的产品并不适用于经皮给药。
DNA纳米技术是一种新兴技术，利用DNA碱基间互补配对杂交，通过设计将很多DNA链嵌套杂交在一起，自组装形成任意形状、尺寸、维度的复杂框架核酸(Framework nucleicacids，FNAs)。除结构尺寸可控外，框架核酸由于具有良好的生物相容性及稳定性，可被细胞摄取；含有多条DNA链可提供多个修饰位点，用于连接功能小分子，因此在药物运输上具有广阔前景。研究表明，框架核酸已用于细胞或动物模型中运载各种化学和生物药物分子。然而，迄今为止，基于框架核酸的体内运输主要通过侵入性针头注射来实现的。在这种环境中，除了免疫和肾脏清除之外，DNA结构还会经历快速分解和消化，导致目标位点的生物利用率低。这阻碍了框架核酸在纳米药物中的广泛应用。
发明内容
本发明提供一种基于框架核酸的可控经皮给药制剂及其制备方法，以解决侵入性针头注射实现框架核酸体内运输这一给药途径中造成的框架核酸易快速分解和消化，导致目标位点的生物利用率低的问题。此外，还解决现有技术中经皮制剂形状尺寸及透皮深度不可控的问题，为经皮给药提供一种新的途径。
根据本发明提供的一种基于框架核酸的可控经皮给药制剂，该可控经皮给药制剂包括DNA药物复合物，所述DNA药物复合物为连接在一起的框架核酸和药物分子，所述药物分子为可经皮给药的药物。
优选的，该框架核酸为一维线形结构。优选地，该框架核酸为棒状六螺旋结构。应该理解，该框架核酸还可以是其他的线形结构，例如三螺旋束、DNA纳米管。
优选的，该框架核酸为二维平面结构。优选地，该框架核酸为平面矩形结构或三角形结构。应该理解，该框架核酸还可以是其他的平面结构，例如圆形结构、星形、或环形结构等。
优选的，该框架核酸为三维立体结构。优选地，该框架核酸为四面体结构或长方体结构。应该理解，该框架核酸还可以是其他的立体结构，例如立方体结构、八面体、十二面体等多面体、球体结构或圆柱体结构等。
优选的，该框架核酸的分子量为10kDa-1GDa。
优选的，该框架核酸的分子量为81.9kDa-4711.9kDa。
优选的，该框架核酸的尺寸为2nm-1μm。
优选的，该框架核酸的尺寸为7-400nm。
优选的，该框架核酸的Dh尺寸为17nm-220nm。
优选的，该药物分子包括氮芥类药物、丝裂霉素、顺铂、蒽环类抗生素、放线菌素类抗生素和金属配合物。
优选的，该氮芥类药物包括氮芥、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥和环磷酸酰胺氮芥；所述丝裂霉素包括丝裂霉素A、丝裂霉素B和丝裂霉素C；所述蒽环类抗生素包括柔红霉素、阿霉素、表阿霉素、伊达比星、道诺霉素、诺加霉素、阿克拉霉素、戊柔比星或米托葱酮；所述放线菌素类抗生素包括放线菌素C、放线菌素D、更生霉素、橙色霉素和更新霉素；所述金属配合物包括金属卟啉配合物和Co(phen)2+2(ph＝林菲洛琳)。
优选的，该可控经皮给药制剂还包括保湿剂，所述保湿剂包括甘油或凡士林。
优选的，该框架核酸包括一维线形、二维平面及三维立体结构。
优选的，该药物分子和框架核酸通过碱基互补配对、共价连接、非共价连接、吸附中的一种或多种方法连接在一起。
本发明还提供一种基于框架核酸的可控经皮给药制剂的制备方法，包括提供框架核酸，该框架核酸和药物分子偶联形成DNA药物复合物。
优选的，该制备方法还包括将DNA药物复合物与保湿剂混合均匀，得到可控经皮给药制剂。
所述DNA药物复合物在可控经皮给药制剂内的质量百分比介于0.01-99％之间。
总之，本发明通过框架核酸和药物分子偶联形成DNA药物复合物后得到可控经皮给药制剂，避免了通过侵入性针头注射实现框架核酸体内运输这一给药途径造成的框架核酸的快速分解和消化，导致目标位点的生物利用率低的问题。所述框架核酸具有良好的稳定性、生物相容性及皮肤穿透能力，且其皮肤穿透能力及透皮深度对框架核酸形状和尺寸具有依赖性，如实施例4所证明。因此，通过精确控制框架核酸的形状及尺寸，解决了现有技术中经皮制剂形状尺寸及透皮深度不可控的问题，为经皮给药提供一种新的途径。
附图说明
图1为实施例1提供的八种框架核酸的尺寸测试结果示意图；
图2为框架核酸TH21、TH37、6H714的电泳分析图；
图3为框架核酸在AFM下微观形貌观察图，其中，a为TH337在AFM下微观形貌观察图，b为6H14498在AFM下微观形貌观察图，c为R13730在AFM下微观形貌观察图，d为B14498在AFM下微观形貌观察图，e为T14498在AFM下微观形貌观察图；
图4为孵育时间对TH21的细胞摄取行为的影响研究结果图；
图5为图4所示TH21在皮肤成纤维细胞中的摄取情况的共聚焦图像，其中，a为Cy5.5标记的TH21信号，b为Hoescht染色的细胞核信号，c为溶酶体染色信号，d为各通道信号叠加；
图6为8种框架核酸孵育24h后的细胞摄取情况定性分析结果图，其中，a为空白对照组共聚焦图像，b为Cy5.5标记的TH21细胞摄取情况的共聚焦图，c为Cy5.5标记的TH37细胞摄取情况的共聚焦图，d为Cy5.5标记的TH337细胞摄取情况的共聚焦图，e为Cy5.5标记的6H714细胞摄取情况的共聚焦图，f为Cy5.5标记的6H14498细胞摄取情况的共聚焦图，g为Cy5.5标记的R13730细胞摄取情况的共聚焦图，h为Cy5.5标记的B14498细胞摄取情况的共聚焦图，i为Cy5.5标记的T14498细胞摄取情况的共聚焦图；
图7为8种框架核酸孵育24h后的细胞摄取情况定量分析结果图；
图8为IVIS成像观察8种框架核酸处理后在小鼠皮肤中分布情况，其中a为TH21、TH37和6H714处理后在小鼠皮肤中的分布情况，b为TH337、6H14498和R13730处理后在小鼠皮肤中的分布情况，c为B14498、T14498和空白对照组处理后在小鼠皮肤中的分布情况；
图9为Cy5.5标记的各框架核酸结构的乳膏状制剂到达不同皮肤深度的情况；
图10为三组(TH’、TH、i-TH)Cy3和Cy5荧光信号强度；
图11为不同深度皮肤中TH'和TH的Cy5/Cy3荧光强度比值；
图12为TH21在人皮肤外植体中的渗透深度研究结果；
图13为三组样品(Ⅰ：DOX-Cy5.5-TH21，Ⅱ：Cy5.5-TH21，Ⅲ：TH21)的在聚丙烯凝胶电泳中迁移速率分析图；
图14为TH-DOX及游离DOX对细胞活性的抑制作用研究结果；
图15为NCR裸鼠TH-DOX及游离DOX作用24h后体内成像图；
图16为NCR裸鼠肿瘤区域TH-DOX及游离DOX荧光强度值；
图17为TH-DOX穿透皮肤到达皮下肿瘤状态组织学成像图，其中，a为Cy5.5标记的TH21信号，b为DOX信号，c为Hoescht染色信号，d为各通道信号叠加；
图18为不同深度皮肤中TH-DOX和游离DOX的Cy5.5荧光强度；
图19为不同深度皮肤中TH-DOX和游离DOX的DOX荧光强度；
图20为皮下肿瘤处TH-DOX和游离DOX的荧光强度。
具体实施方式
下面将结合本发明的具体实施方式，对本发明的技术方案进行详细的说明，但如下实施例仅是用以理解本发明，而不能限制本发明，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合，本发明可以由权利要求限定和覆盖的多种不同方式实施。
实施例1：框架核酸的制备
提供框架核酸：将DNA单链溶于缓冲溶液中进行组装。具体地，将DNA单链按一定比例混合，加入含Mg2+的合成缓冲液中，混合均匀，退火，自组装形成框架核酸。
框架核酸荧光标记：通过延伸相应位置的DNA单链，与修饰荧光分子的互补DNA单链室温孵育杂交即得。
在本实施例中提供8种不同结构、尺寸、维度的框架核酸，如表1所示。
表1 8种框架核酸及其相应荧光标记
Figure BDA0001854372140000061
实施例2：框架核酸的形貌和尺寸进行验证
(1)对结构进行尺寸测量
采用粒度仪Zetasizernano Z(Malvern)测量流体动力学直径(Dh)，至少重复测量3次。结果如图1所示，测得的四面体纳米结构：TH21、TH37和TH337的平均流体动力学直径(Dh)分别为～(大约为，下同)17nm、～44nm和～187nm(理论尺寸分别为：～7nm、～12nm、～100nm)。两种六螺旋棒状纳米结构：6H714和6H14498均有两个峰，分别对应宽度为～30nm和棒长度～66/220nm(理论尺寸分别为：宽度～6nm、棒长度～20nm/400nm)。其余较大的矩形或三角形纳米结构：R13730，B14498和T14498平均Dh相近，在140-170nm之间(理论尺寸分别为：～70×100nm、～6×40×60nm、～120nm边长)。
(2)对尺寸较小的纳米结构(TH21、TH37、6H714)进行电泳验证：采用8％聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)或1％琼脂糖凝胶电泳(AGE)分析，电泳在化学发光成像仪中观察。根据电泳条带位置验证目标结构，结果如图2所示。TH21迁移最远，6H714比TH37迁移距离稍远，可能与其结构呈棒状，阻力较小有关。
(3)对尺寸较大的纳米结构(TH337、6H14498、R13730、B14498、T14498)在AFM下进行形貌观察：将合适浓度的样品加在云母表面，使用Multi-modeNanoscopeIIIa原子力显微镜(AFM)在Tapping mode液相模式下进行扫描，所用液相针是OMCL-TR400PSA tip(Olympus)。结果如图3所示，各种纳米结构均符合所设计的形状和尺寸：TH337为三维四面体线框结构，棱长约120nm；6H14498为一维线形结构，长约400nm；R13730为平面矩形结构，尺寸约70×100nm；B14498为三维长方体结构，尺寸约6×40×60nm；T14498为平面三角形结构，边长约120nm。
实施例3：框架核酸的细胞摄取行为观察
(1)细胞培养及细胞活性检测：
正常的皮肤成纤维细胞(normal dermal fibroblast or NDF)(购自CellResearch Corporation Pte Ltd,Singapore)和永生化的角质形成细胞HaCaT(购自美国菌种保藏中心，ATCC)培养于含10％胎牛血清(PBS)、1％凝脂丝氨酸(PS)、4mM L-谷氨酰胺(L-glutamine)的DMEM培养基(4500mg/L)中，37℃，5％CO2，饱和湿度培养，每隔2-3天添加一次新鲜培养基。
将Alamarblue试剂加入培养基中，体积比为1:100，孵育8h后，进行荧光测量(570/585nm)以检测细胞活性。
(2)研究孵育时间对TH21DNA四面体纳米结构的细胞摄取行为的影响：
正常皮肤纤维细胞中加入荧光标记的TH21，终浓度为0.2μg/mL，分别在37℃孵育0h、2h、10h和24h，到达时间点后，除去培养基，PBS洗涤3次，在共聚焦荧光显微镜下成像。共聚焦荧光显微成像图中可以看到TH21在细胞内的分布。如图4所示，对细胞内TH21的荧光强度进行统计分析，结果显示，孵育6h和24h后，细胞内荧光强度分别增加了18和50倍。
对细胞核和溶酶体进行染色，共聚焦荧光显微成像结果如图5所示，尽管Cy5.5标记的TH21信号与溶酶体信号有些重叠，但大部分TH21信号并没有被溶酶体信号覆盖，这表明TH21经过质膜微囊介导的细胞内吞作用和巨胞饮作用后，成功地从溶酶体中逃脱。
(3)研究实施例1中8种不同框架核酸的细胞摄取情况：
各种框架核酸分别在正常皮肤纤维细胞中孵育24h后，除去培养基，PBS洗涤3次，在共聚焦荧光显微镜下成像(如图6所示)并对荧光强度进行定量分析(如图7所示)，可观察到大量TH21被细胞摄取，TH37和6H714也有较多被细胞摄取，其余结构亦有少量被细胞摄取。
实施例4：框架核酸在小鼠局部皮肤中的渗透性和结构完整性评估：
(1)经皮制剂制备、施用及测试方法如下：
对经皮制剂在小鼠局部皮肤中的渗透性和结构完整性进行评估。按照新加坡南洋理工大学动物使用与管理委员会(IACUCs：NTU#BN16098)规定的方法进行实验。体内实验使用的小鼠为6周大的NCR裸鼠(雄性，InVivos Pte.Ltd.,Singapore)。人体皮肤外植体来源于Cell Research Corporation Pte Ltd,Singapore。将经皮制剂均匀涂抹于小鼠背部局部皮肤表面后，覆盖Tegaderm TM透明敷料，作用24h后，擦去过量制剂。
在小动物活体成像系统
Figure BDA0001854372140000081
Spectrum CT(PerkinElmer，Singapore Pte Ltd)下观察框架核酸在皮肤中的分布情况，使用Living Image 4.0软件获取各个通道(Cy3:550/570nm，Cy5:650/670nm，Cy5.5:675/695nm)的ROI荧光读数。
取下皮肤组织，直接浸入OCT溶液中，然后将样品置于液氮中冷冻切片(15μm)，用Hoechst 33342对样品进行染色。置于激光共聚焦下进行荧光成像，并对皮肤内的荧光强度进行定量。
(2)框架核酸在小鼠局部皮肤中的渗透性评估：
分别将8种框架核酸制成相应乳膏状制剂，涂抹于小鼠背部局部皮肤表面，评估其透皮效果，如图8所示，IVIS成像显示了这8种框架核酸处理后皮肤中的荧光信号，结果表明TH21、TH37和6H614比其他5种框架核酸的信号更强，皮肤渗透性更好。
皮肤组织学分析结果如图9所示，在小鼠皮肤中，Dh尺寸小于100nm的三种框架核酸结构：TH21、TH37和6H714能穿透最深且有最大量保留，表现出明显的皮肤渗透性。其中，6H714(30nm/66nm)穿透到角质层下约275-300μm深度，TH37(44nm)和TH21(17nm)能到达角质层下约350-400μm处，而较大的框架核酸结构(>100nm)：TH337、6H14498、R13730、B14498和T14498表现出较小的皮肤渗透性，大部分留在表皮区域(距角质层约50-75μm)。这表明框架核酸的皮肤渗透能力与其结构尺寸有关，即可根据疾病发生部位，选择合适尺寸的框架核酸作为药物载体：当需要浅的皮肤渗透时，可使用较大尺寸的框架核酸作为缓释药物载体；当需要更深的皮肤渗透时，可使用较小尺寸的框架核酸作为缓释药物载体。应该理解，除本实施例中的8种框架核酸外，其他类似尺寸或更大或更小尺寸的框架核酸同样可以作为药物载体进行经皮给药。
(3)框架核酸在小鼠局部皮肤中结构完整性评估：
在透皮过程中，除了皮肤渗透能力之外，结构完整性对于TDD纳米载体也至关重要。因此，选取四面体TH21作为研究对象，评估其在透皮过程中结构的完整性。使用Cy3/Cy5荧光标记TH21，设计3组实验组：不含BHQ3淬灭剂的TH(持续荧光)、含BHQ3淬灭剂的TH’(荧光淬灭)、不完全组装的含BHQ3淬灭剂的i-TH’(缺少一边，模拟TH’分解，分解时产生荧光)。分别测量各组Cy3和Cy5的荧光强度。
由于TH’结构组装后，BHQ3淬灭剂与Cy5荧光分子靠近，与TH相比，Cy5荧光信号明显降低，而Cy3荧光信号强度基本相同。同时，i-TH'表现出与TH相近的Cy5荧光强度，实验结果如图10所示。因此，可以比较局部渗透后TH'与TH中Cy5/Cy3荧光信号强度，以此作为结构完整性的判断指标。
分别将TH’和TH的乳膏状制剂涂抹于小鼠背部局部皮肤表面，作用24h后，进行体内成像和皮肤组织学荧光成像并定量分析，实验结果如图11显示TH'Cy5/Cy3荧光强度小于TH，表明大部分四面体结构在其透皮过程中结构保持完整，TH21DNA四面体结构完整性较好。
实施例5：框架核酸在人皮肤外植体中的渗透性和生物兼容性评估：
经皮制剂在人皮肤外植体中的渗透性和生物兼容性评估：选取四面体TH21框架核酸结构作为研究对象，评估其在完整的人类皮肤外植体上的透皮效果及生物兼容性。将含TH21的乳膏状制剂涂抹于人皮肤外植体上，实验方法与实施例4中相同。透皮能力测试实验结果显示，在角质层下方约150μm处存在TH21信号，如图12所示，说明TH21至少能到达人皮肤真皮层1/3深度位置。此外，TH21渗透对皮肤形态几乎没有改变。因此，将框架核酸作为TDD纳米载体有着巨大潜力。
实施例6：框架核酸用作TDD载体，制备DNA药物复合物，实现药物透皮运输，应用于肿瘤治疗，包括如下步骤：
(1)DNA药物复合物经皮制剂的制备及验证：
由于经典抗肿瘤药物阿霉素DOX可以嵌入DNA双螺旋中，使用框架核酸作为载体进行运输具有天然的优势。选取四面体框架核酸TH21和DOX作为研究对象，将DOX转载到TH21中，形成TH-DOX，该TH-DOX具有药物缓释作用。过量的DOX(10μM)与TH21室温孵育1h，然后超滤除去未载带的DOX。
对TH-DOX进行验证
测量TH-DOX溶液在480nm和260nm处的光吸收，计算DOX与DNA含量。1nmol TH21含49.72nmolDox，即每个TH21可载带～50个DOX分子，这与之前报道的1nmol～9000nt DNA折纸载带1-9μmolDOX的载带量相符合。(Zhao,Y.X.,et al.ACS Nano 2012,6,8684-8691)。此外，采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进一步验证，如图13所示，比较三组样品(Ⅰ：DOX-Cy5.5-TH21，Ⅱ：Cy5.5-TH21，Ⅲ：TH21)条带迁移速率，DOX-Cy5.5-TH21迁移速率最慢，表明DOX转载成功。
将TH-Dox按实施例4中所述方法制成乳膏状经皮制剂。
(2)DNA药物复合物经皮制剂在肿瘤治疗中的应用：
首先，研究了TH-DOX对B16F10小鼠黑色素瘤细胞体外增殖抑制作用。实验分为两组DOX体系：对照组(Free DOX)和实验组(TH-DOX)，分别向B16F10小鼠黑色素瘤细胞中加入不同浓度的DOx体系，孵育72h，Alamarblue分析B16F10小鼠黑色素瘤细胞存活率，结果如图14所示，TH-DOX对B16F10小鼠黑色素瘤细胞的半抑制浓度(IC50)为33.63nM，比游离DOX(IC50：74.94nM)的抑制效果更明显。说明TH-DOX攻克癌细胞抗药性的效果更好，并且TH-DOX能够持续缓慢释放DOX，从而能提高药物的可利用性。
此外，研究了TH-Dox对B16F10小鼠黑色素瘤细胞体内肿瘤治疗效果。5μL 100μg/mL TH-DOX与
Figure BDA0001854372140000111
按质量比1：1均匀混合，制备TH-DOX制剂。同时，将等量游离DOX溶液与
Figure BDA0001854372140000112
按质量比1：1均匀混合，作为对照。将1×106B16F10小鼠黑色素瘤细胞注射到NCR裸鼠后腿部位，制备黑色素瘤模型，孵育一周使肿瘤直径达到>5-6mm。分别将TH-DOX制剂和游离DOX制剂局部均匀涂抹于肿瘤部位皮肤表面，作用24h后，除去过量制剂。进行体内成像，如图15所示。测量肿瘤区域的DOX和TH21含量，结果显示，TH21使DOX在肿瘤部位停留时间延长约3倍，如图16所示。组织学实验进一步表明，当TH21穿透皮肤到达皮下肿瘤时，促进DOX渗透到角质层下400-450μm，结果如图17所示。随着皮肤/肿瘤深度变化，DOX与TH21降低趋势相似，但DOX信号比TH21信号下降更快，结果如图18和图19所示。这表明在TH21穿透皮肤并进入肿瘤时，DOX被持续缓慢释放，而游离DOX主要局部释放到角质层下50-75μm，大部分保留在表皮层。且TH-DOX与游离DOX处理相比，达到皮下肿瘤的DOX量相差5.67倍，结果如图20所示。
以上所述的，仅为本发明的较佳实施例，并非用以限定本发明的范围，本发明的上述实施例还可以做出各种变化。即凡是依据本发明的权利要求书及说明书内容所作的简单、等效变化与修饰，皆落入本发明的权利要求保护范围。本发明未详尽描述的均为常规技术内容。

Claims (8)

1.一种基于框架核酸的可控经皮给药制剂，其特征在于，该可控经皮给药制剂包括DNA药物复合物，所述DNA药物复合物为连接在一起的框架核酸和药物分子，所述药物分子为可经皮给药的药物，所述框架核酸具有依赖于框架核酸的形状和尺寸的皮肤穿透能力，所述框架核酸选自21bp四面体、37bp四面体和714bp六螺旋。
2.根据权利要求1所述的可控经皮给药制剂，其特征在于，所述药物分子选自氮芥类药物、丝裂霉素、顺铂、蒽环类抗生素、放线菌素类抗生素和金属配合物。
3.根据权利要求2所述的可控经皮给药制剂，其特征在于，所述氮芥类药物选自氮芥、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥和环磷酸酰胺氮芥；所述丝裂霉素选自丝裂霉素Ａ、丝裂霉素Ｂ和丝裂霉素Ｃ；所述蒽环类抗生素选自柔红霉素、阿霉素、表阿霉素、伊达比星、道诺霉素、诺加霉素、阿克拉霉素、戊柔比星或米托葱酮；所述放线菌素类抗生素选自放线菌素Ｃ和放线菌素Ｄ；所述金属配合物选自金属卟啉配合物和Co（phen）2+2。
4.根据权利要求1所述的可控经皮给药制剂，其特征在于，所述可控经皮给药制剂还包括保湿剂，所述保湿剂选自甘油或凡士林。
5.根据权利要求1所述的可控经皮给药制剂，其特征在于，所述药物分子和框架核酸通过碱基互补配对、共价连接、非共价连接、吸附中的一种或多种方法连接在一起。
6.根据权利要求1-5任一项所述的可控经皮给药制剂的制备方法，其特征在于，包括：提供框架核酸，该框架核酸和药物分子偶联形成DNA药物复合物。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括将DNA药物复合物与保湿剂混合均匀，得到可控经皮给药制剂。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述DNA药物复合物在可控经皮给药制剂内的质量百分比介于0.01-99%之间。
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