CN109258424A - 一种蛇足石杉植株人工移植方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种蛇足石杉植株人工移植方法，该方法包括将蛇足石杉植株经柠檬酸溶液预处理，再在青苔基质中进行生根培养。本发明可显著提高蛇足石杉野生植株人工移栽成活率，简单易操作，可用于蛇足石杉野生植株的人工移栽。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，涉及多酚的生物合成，具体涉及一种蛇足石杉野生植株人工移植方法。
背景技术
蛇足石杉(Huperzia serrata(Thunb.)Trev.)为石松目(Lycopodiales)石杉科(Lycopodiaceae)石杉属(Lycopodium L.)多年生草本蕨类植物。蛇足石杉在民间主要用于治疗跌打肿痛、内伤出血、毒虫毒蛇咬伤、烧伤烫伤等病症。1927年我国科技工作者报道了从该植物中分离的石杉碱甲具有横纹肌松弛作用，之后的大量研究发现石杉碱甲是一种高效、低毒、可逆和高选择性的乙酰胆碱酯酶抑制剂。现在，被石杉碱甲及经作为治疗阿尔茨海默病(AD，Alzheimer disease)的药物，同时在美国被用做益智的营养保健品。
然而，蛇足石杉自然资源严重短缺。蛇足石杉生长缓慢，野生状态其的繁殖主要以孢子繁殖为主，孢子萌发周期长，萌发后属地下生配子体，需6-15年才能成熟。因此极大地限制了蛇足石杉野生资源的再生。蛇足石杉中的石杉碱甲含量又很低(0.007％)，再加上其全合成石杉碱甲步骤繁琐、价格昂贵且有副作用。目前，石杉碱甲的提取主要依赖于野生资源，提取率仅为0.006％-0.1％，因而大量的市场需求、受限的自然资源和自身生长繁殖的限制。因此，不论是石杉碱甲直接或者间接获得都是以蛇足石杉的原植物为原料，这种自然界有限的资源将处于灭绝的边缘。因此，对蛇足石杉的人工繁殖迫在眉睫。
很多研究者已经开始对其生殖繁殖进行研究。但是，蛇足石杉在原产地自然环境中生长良好，一旦被移植到另外的地方(比如实验室)，则成活率非常低，而且很快死亡。这导致研究人员很难在实验室人工控制的环境下对其进行深入的研究，至今蛇足石杉的繁殖过程仍然不为人所祥知。
在多年的研究基础之上，本发明摸索出一条蛇足石杉野生植株的人工移植方法，为蛇足石杉的异地栽培、实验室移植提供方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种蛇足石杉野生植株人工移植方法，可用于蛇足石杉野生植株的异地人工移栽。
为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案：
一种蛇足石杉植株人工移植方法，其特征在于，包括将蛇足石杉植株经柠檬酸溶液预处理，再在青苔基质中进行生根培养。
进一步地，所述的柠檬酸溶液的浓度为0.5-1.5g/L。
进一步地，所述的青苔基质具体为：用自来水浸湿青苔基质，再用孔雀绿溶液和吲哚丁酸溶液浇灌即得。
具体地，所述的孔雀绿溶液的浓度为20-80mg/L。
具体地，所述的吲哚丁酸溶液的浓度为0-4mg/L。
进一步地，所述的预处理包括用柠檬酸溶液清洗蛇足石杉植株的根部备用。
进一步地，所述的蛇足石杉植株生根培养具体是将预处理后的蛇足石杉植株转移到处理过的青苔基质中，然后放置于温室中进行生根培养。
更进一步地，所述的温室中进行生根培养温度为25±5℃，湿度为60％，时间为2个月。
进一步地，所述的蛇足石杉植株是指根茎叶俱全的蛇足石杉全株。
本发明进行蛇足石杉插条生根的方法，具有以下优点：
本发明通过对蛇足石杉野生植株的根部进行柠檬酸溶液清洗处理，再对培养基质进行孔雀绿和吲哚丁酸处理，通过将蛇足石杉野生植株在柠檬酸溶液中清洗，然后移栽到用孔雀绿溶液和吲哚丁酸溶液处理后的青苔基质中培养，使得蛇足石杉野生植株的移植成活率明显增加，且方法简单易行，为蛇足石杉野生植株的异地人工移栽提供新方法。
具体实施方式
蛇足石杉的主要分布区位于我国中亚热带和南亚热带所在的地理区域，幅员面积260×10％m2，实际分布生境总面积约39x107mP；性喜阴温，所适应的生态环境为中亚热带常绿國叶林和南亚热带季风常绿叶林及其次生生态系统。本发明中的蛇足石杉采集地主要集中于江西、云南、湖北、浙江等地，是指其蛇足石杉根茎叶俱全，无枯萎，无折断；
以下所述的MS液体培养基也称MS培养基。MS培养基是常用的基本培养基，是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基；
发明人也曾用盐酸、碳酸等无机酸对蛇足石杉全株的根部进行预处理，但对移植成活率未有影响，而当发明人利用柠檬酸预处理时，最终的结果是柠檬酸可提高移植成活率。
以下结合实施例2-10和对比例1对本发明作进一步的详细说明。
对比例1：
在野外采集生长良好的蛇足石杉全株(根茎叶俱全)，用水仔细将根部清洗干净，然后栽培到已用水浸湿至饱和状态的青苔基质中，放置于温室中培养，培养温度25±5℃，湿度60％，培养2个月后统计移植成活情况，成活率为32％。
实施例2：
在野外采集生长良好的蛇足石杉全株，将根用0.5g/L的柠檬酸溶液仔细清洗干净，然后栽培到已用水浸湿至饱和状态的青苔基质中，放置于温室中培养，培养温度25±5℃，湿度60％，培养2个月后移植成活率为45％。
实施例3：
1、蛇足石杉野生植株的处理
在野外采集生长良好的蛇足石杉全株，将根用含有0.5g/L柠檬酸的水仔细清洗备用。
2、培养基质的获得和移植
购买青苔基质，将其用自来水浸湿，1周后用含有20mg/L孔雀绿浇灌备用。
将经过1处理好的蛇足石杉野生植株移栽至处理过的青苔基质中，放置于温室中培养，培养温度25±5℃，湿度60％，培养2个月后统计移植成活率为56％。
实施例4：
1、蛇足石杉野生植株的处理
在野外采集生长良好的蛇足石杉全株，将根用含有1.0g/L柠檬酸的水仔细清洗备用。
2、培养基质的获得和移植
青苔基质处理同实施例3。
将经过1处理好的蛇足石杉野生植株移栽至处理过的青苔基质中，放置于温室中培养，培养温度25±5℃，湿度60％，培养2个月后统计移植成活率为63％。
实施例5：
1、蛇足石杉野生植株的处理
同实施例4。
2、培养基质的获得和移植
购买青苔基质，将其用自来水浸湿，1周后用含有40mg/L孔雀绿浇灌备用。
将经过1处理好的蛇足石杉野生植株移栽至处理过的青苔基质中，放置于温室中培养，培养温度25±5℃，湿度60％，培养2个月后统计移植成活率为76％。
实施例6：
1、蛇足石杉野生植株的处理
同实施例4。
2、培养基质的获得和移植
购买青苔基质，将其用自来水浸湿，1周后用含有60mg/L孔雀绿和4mg/L吲哚丁酸浇灌备用。
将经过1处理好的蛇足石杉野生植株移栽至处理过的青苔基质中，放置于温室中培养，培养温度25±5℃，湿度60％，培养2个月后统计移植成活率为77％。
实施例7：
1、蛇足石杉野生植株的处理
同实施例4。
2、培养基质的获得和移植
购买青苔基质，将其用自来水浸湿，1周后用含有60mg/L孔雀绿和2mg/L吲哚丁酸浇灌备用。
将经过1处理好的蛇足石杉野生植株移栽至处理过的青苔基质中，放置于温室中培养，培养温度25±5℃，湿度60％，培养2个月后统计移植成活率为88％。
实施例8：
1、蛇足石杉野生植株的处理
同实施例4。
2、培养基质的获得和移植
购买青苔基质，将其用自来水浸湿，1周后用含有80mg/L孔雀绿和2mg/L吲哚丁酸浇灌备用。
将经过1处理好的蛇足石杉野生植株移栽至处理过的青苔基质中，放置于温室中培养，培养温度25±5℃，湿度60％，培养2个月后统计移植成活率为80％。
实施例9：
1、蛇足石杉野生植株的处理
在野外采集生长良好的蛇足石杉全株，将根用含有1.5g/L柠檬酸的水仔细清洗备用。
2、培养基质的获得和移植
购买青苔基质，将其用自来水浸湿，1周后用含有40mg/L孔雀绿和2mg/L吲哚丁酸浇灌备用。
将经过1处理好的蛇足石杉野生植株移栽至处理过的青苔基质中，放置于温室中培养，培养温度25±5℃，湿度60％，培养2个月后统计移植成活率为70％。
实施例10：
1、蛇足石杉野生植株的处理
同实施例9。
2、培养基质的获得和移植
购买青苔基质，将其用自来水浸湿，1周后用含有60mg/L孔雀绿和2mg/L吲哚丁酸浇灌备用。
将经过1处理好的蛇足石杉野生植株移栽至处理过的青苔基质中，放置于温室中培养，培养温度25±5℃，湿度60％，培养2个月后统计移植成活率为79％。
Claims (9)
1.一种蛇足石杉植株人工移植方法，其特征在于，包括将蛇足石杉植株经柠檬酸溶液预处理，再在青苔基质中进行生根培养。
2.如权利要求1所述的蛇足石杉植株人工移植方法，其特征在于，所述的柠檬酸溶液的浓度为0.5-1.5g/L。
3.如权利要求1所述的蛇足石杉植株人工移植方法，其特征在于，所述的青苔基质具体为：用自来水浸湿青苔基质，再用孔雀绿溶液和吲哚丁酸溶液浇灌即得。
4.如权利要求3所述的蛇足石杉植株人工移植方法，其特征在于，所述的孔雀绿溶液的浓度为20-80mg/L。
5.如权利要求3所述的蛇足石杉植株人工移植方法，其特征在于，所述的吲哚丁酸溶液的浓度为0-4mg/L。
6.如权利要求1或2所述的蛇足石杉植株人工移植方法，其特征在于，所述的预处理包括用柠檬酸溶液清洗蛇足石杉植株的根部备用。
7.如权利要求1所述的蛇足石杉植株人工移植方法，其特征在于，所述的蛇足石杉植株生根培养具体是将预处理后的蛇足石杉植株转移到处理过的青苔基质中，然后放置于温室中进行生根培养。
8.如权利要求7所述的蛇足石杉植株人工移植方法，其特征在于，所述的温室中进行生根培养的温度为25±5℃，湿度为60％，时间为2个月。
9.如权利要求1-5所述的蛇足石杉植株人工移植方法，其特征在于，所述的蛇足石杉植株是指根茎叶俱全的蛇足石杉全株。
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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