CN109239365A - 一种血型血清学凝集强度判定能力验证方法、试剂盒及系统 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种血型血清学凝集强度判定能力验证方法、试剂盒及系统。所述方法为：评估者将标准凝集强度已知的8个不同浓度的血型抗体及含相应抗原的红细胞，例如抗A全血浆制品、Ac、说明书交付受试者；受试者按照说明书判断各样本与Ac的凝集强度，将方法和结果交付评估者；评估者根据受试者所使用的方法的类型、结果及标准凝集强度，综合判断得到受试者的血型血清学凝集强度判定能力。所述试剂盒包含8个不同浓度的血型抗体及含相应抗原的红细胞，如抗A全血浆制品、Ac及其说明书。所述系统包括所述试剂盒、评估端、受试端和验证平台。本发明能有效的评估免疫血液学等相关实验室或人员的血型血清学凝集强度判定能力。

Description

一种血型血清学凝集强度判定能力验证方法、试剂盒及系统

技术领域

本发明涉及血液检测领域，具体地说，涉及一种血型血清学凝集强度判定能力验证方法、试剂盒及系统。

背景技术

免疫血液学相关实验室或专业技术人员在血型血清学凝集强度判定方面应具备足够的能力，确保结果的准确度，以满足临床或科研的需求。目前市场上缺乏用于评估对不同血型血清学凝集强度判定能力的质控产品和方法。现有类似的质控产品，为行业、组织或实验室发放的“室间质控品”，由一个或几个人血液样本组成，所有的结果均是通过凝集强度判定阳性或者阴性，用于填报质评结果。这类室间质控品的不足之处，在于无法准确评估参与实验室对于实验判定结果的具体判定标准的能力。

血型血清学凝集强度判定结果，体现在血清抗体结果从强阳性到弱阳性到阴性应呈现一个线性的标准，因此实验室在判定结果时由于误差可能会造成结果在线性标准上进行左移或者右移，导致一些弱阳性填报为阴性结果等。误判的结果对总结的结论有误导的作用，所以凝集强度的判定对于整个血型血清学有非常重要的意义。

为了准确评估这种能力，本申请人经过广泛而深入的研究，提出了一种较为理想的方法，即制备出具有不同凝集强度的能力验证品以模拟前者，或人为按一定比例混合特定相应的抗原阳性的红细胞和抗体血清，制备出已知凝集强度的能力验证品。

《中国输血杂志》2015年4月第28卷第4期，刊出的论文“基层输血科自制室内质控品的方法与可行性探讨”，自制单独血浆与红细胞质控品，经亲和力、抗体效价检测、凝集强度和稳定性等验证后，按照自行设计的室内质控模式，进行ABO血型鉴定、RhD血型、交叉配血试验及不规则抗体筛查等试验，结果表明自制的室内质控品，其有效性、特异性、稳定性和可靠性，符合《ISO15189医学实验室认可准则》中对IQC的基本要求，可以有效控制输血差错事故的发生。《临床输血与检验》2016年8月第18卷第4期，刊出的论文“输血相容性检测室内质控品自制及应用探讨”，利用输血科现有血液样本资源自制室内质控品，具体选取A、B、O、AB型血液样本各10份，同型混合后离心，分离血浆备用；压积红细胞用生理盐水洗涤后与CPDA保养液等量混合备用；选取ABO同型Rh(D)阴性血液样本1～2份，经确认后，与CPDA保养液等量混合备用；IgG抗-D血清采用商品化试剂。各型血液的红细胞和血浆按照标准操作规程进行血清学验证试验，符合血清学反应格局，且质控红细胞与标准血清凝集强度达4+、质控血浆与相应红细胞凝集强度为2+，方作为室内质控品使用。室内质控品用于监测输血相容性检测结果的准确度，结果表明制备的室内质控品合格，能满足4～6周使用。专利文献CN107576807A，公开日2018.01.12，公开了一种血型检测试剂质控品及其制备方法和在血型检测中的应用，所述质控品包括6瓶ABO、RhD血型检测质控品、5瓶交叉配血质控品和4瓶不规则抗体筛检质控品，所述6瓶ABO、RhD血型检测质控品分别为：A1型RhD(+)红细胞、B型RhD(+)红细胞、A血清、B血清、O型RhD(+)红细胞及RhD(-)红细胞各1瓶；所述5瓶交叉配血质控品分别为AB型(+)红细胞、O型RhD(+)红细胞、RhD(-)红细胞、O血清、含IgG型抗D的AB血清各1瓶；所述4瓶不规则抗体筛检质控品分别为O血清及含IgG型抗D的AB血清各2瓶。所述血型检测试剂质控品用于确保血型检测的准确性、特异性、亲和力、稳定性，避免检测过程中因为检测本身不合格而使检测结果受到影响。

然而目前未见关于本发明的血型血清学凝集强度判定能力验证方法、试剂盒及系统。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种血型血清学凝集强度判定能力验证方法。

本发明的目的之一是，提供一种血型血清学凝集强度判定能力验证试剂盒。

本发明的另一的目的是，提供一种血型血清学凝集强度判定能力验证系统。

为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：

一种血型血清学凝集强度判定能力验证方法，包括以下步骤：

a)评估者将8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品、相应红细胞和说明书交付给受试者，所述说明书记载了要求受试者将8个不同浓度的血型抗体与相应红细胞进行反应并判定各反应的凝集强度；

b)受试者接收8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品、相应红细胞和说明书；

c)受试者按照说明书将8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞反应，并判断每个反应的凝集强度，将方法和结果反馈给评估者；

d)评估者根据受试者的凝集强度判定结果，结合8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞的标准凝集强度，同时将检测方法的类型纳入考虑因素，综合评估得出受试者的血型血清学凝集强度判定能力。

作为一个优选例，步骤a)所述的8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞反应的凝集强度在4+到阴性之间，最强为4+，最弱为阴性。

作为另一优选例，步骤a)所述的8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞反应的凝集强度对评估者来说是已知的。

作为另一优选例，步骤d)所述的检测方法的类型包括标准手工试管抗球蛋白法和柱凝集法。

作为另一优选例，所述的血型抗体选自ABO、P、MN、Lewis、Rh、Kidd和Duffy抗体中的任一种或几种。

作为另一优选例，步骤d)之后还包括步骤：评估者将同一受试者多次的血型血清学凝集强度判定能力进行比较；或还包括步骤：评估者将不同受试者的血型血清学凝集强度判定能力进行比较。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：

一种血型血清学凝集强度判定能力验证试剂盒，包含：

8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品；

相应红细胞；

说明书：记载了需要将8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞进行反应，并记录检测方法和结果；

其中8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品和相应红细胞反应的凝集强度在4+到阴性之间，最强为4+，最弱为阴性。

作为一个优选例，所述的8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品和相应红细胞反应的凝集强度对试剂盒提供者来说是已知的。

作为另一优选例，所述的血型抗体选自ABO、P、MN、Lewis、Rh、Kidd和Duffy抗体中的任一种或几种。

为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：

一种血型血清学凝集强度判定能力验证系统，包括：

如上任一所述的血型抗体效价检测能力验证试剂盒；

评估端和受试端：所述的评估端对受试端的血型血清学凝集强度判定能力进行验证；以及

验证平台；所述的验证平台包括：

试剂盒发放记录模块：用于记录评估端向受试端交付血型血清学凝集强度判定能力验证试剂盒的状态；

检测结果记录模块：用于上传和储存受试者的血型血清学凝集强度检测方法和结果；

检测结果分析模块：用于评估端根据检测结果记录模块的方法和结果，结合8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品和相应红细胞反应的标准凝集强度，将方法的类型纳入考虑因素，综合评估受试者的血型血清学凝集强度判定能力；

检测结果反馈模块：用于评估端将血型血清学凝集强度判定能力的结果反馈给受试者。

作为一个优选例，所述的血型血清学凝集强度判定能力验证系统还包括统计比较模块，用于比较同一受试者多次的血型血清学凝集强度判定能力，或不同受试者的血型血清学凝集强度判定能力。

作为另一优选例，所述的血型抗体选自ABO、P、MN、Lewis、Rh、Kidd和Duffy抗体中的任一种或几种。

本发明优点在于：

本发明提供了一种有效的验证或评估免疫血液学实验室或专业技术人员的血型血清学凝集强度判定能力的方法，其是利用形成不同定量的红细胞抗体，与一定数量的红细胞结合，达到凝集强度从4+到阴性的从强到弱的序列，用于验证受试者对于相对反应强度的判断能力。本发明还将检测方法的类型纳入了考虑因素，以综合评估实验室的血型血清学凝集强度判定能力。本发明有助于准确评估受试者对于实验判定结果的具体判定标准的能力，也有助于为单个参试实验室提供血型血清学凝集强度判定能力的客观准确的纵向比较，或为不同参试实验室提供血型血清学凝集强度判定能力的客观准确的横向比较。本发明为验证专业实验室对于血型血清学实验不同凝集强度的判定能力是否符合质量体系要求提供了一种更加有效的评估工具，适于在质量体系的建设中广泛推广应用。

附图说明

图1.本发明的血型血清学凝集强度判定能力验证方法的流程图。

图2.本发明的血型血清学凝集强度判定能力验证系统的结构示意图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

本申请发明人经过广泛而深入的研究，认识到目前的质控产品或质控方法均无法用于客观验证或评估免疫血液学相关实验室或专业技术人员的血型血清学凝集强度判定能力，因此提出应当制备出具有不同凝集强度的能力验证品来模拟强阳性到弱阳性到阴性应这样一个线性的标准，以此作为室间质控品，以实现对多个实验室凝集强度判定能力的验证或比较等。基于此完成了本发明。

实施例1

本发明制备不同凝集强度的红细胞的方法，是利用形成不同定量的红细胞抗体，与一定数量的红细胞结合，达到凝集强度从4+到阴性的从强到弱的序列，用于验证实验室对于相对反应强度的判断能力。通过分析参与实验室检测结果，可准确评估参与实验室对不同反应强度抗体的检测判断能力。

本发明已经在国内近200家实验室进行了试用研究，从反馈的结果分析，该方法可以有效评估实验室对凝集强度的判定能力，有着关键性意义。具体情况如下：

1、凝集强度判定标本制备

上海市血液中心使用了人源抗A和提供的Ac评估凝集强度判定结果。共有8个不同浓度的抗A，均为全血浆制品，未使用非血浆稀释剂。使最终凝集强度在4+到阴性之间，最强为4+，最弱为阴性结果。

2、上海市血液中心确定血型血清学凝集强度判定能力验证项目的参试实验室。

3、上海市血液中心将制备的8个不同浓度的抗A以及Ac和说明书邮寄给各参试实验室。

4、各参试实验室接收上海市血液中心寄送的样品和说明书，按照说明书要求判定8个不同浓度的抗A与Ac反应的凝集强度，将对各样本凝集强度判定的结果和使用的方法以答卷形式反馈给上海市血液中心。

5、上海市血液中心筛选出有效答卷。

6、上海市血液中心统计凝集强度，将4+，3+，2+，1+，±，阴性分别定义为4分、3分、2分、1分、0.5分、0分；稍强“s”和稍弱“w”在各个分值上分别加0.3分和减0.3分，并按此计算平均值。a-h分别表示8个依次从强到弱，用于凝集强度判定的8个样本。据此统计出所有单位对各样本判断的凝集强度的平均值，以及使用不同方法对各样本判断的凝集强度的平均值，见表1-3。结果表明，不同级别的采血单位实验室与不同级别的医院实验室在凝集强度的判断上存在差异；不同方法对凝集强度的判定具有一定的影响，使用柱凝集法相比于试管法得出的凝集强度更高。

表1：各单位有效答卷结果(有效答卷164家)

表2：所有试管法有效答卷结果及分类汇总(有效答卷84家)

表3：所有柱凝集法有效答卷结果及分类汇总(有效答卷80家)

7、上海市血液中心将单个参试实验室对8个样本凝集强度的判定结果与所有单位的平均值，或试管法的平均值，或柱凝集法的平均值之一进行比较，对该参试实验室血型血清学凝集强度判定能力进行验证；或者将实验方法的类型纳入考虑因素，将单个参试实验室对8个样本凝集强度的判定结果与所有单位的平均值进行比较，对该参试实验室血型血清学凝集强度判定能力进行验证。

实施例2

参见图1，图1是本发明的血型血清学凝集强度判定能力验证方法的流程图。包括以下步骤：

1、评估者将8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品以及相应红细胞、说明书交付给受试者，所述说明书记载了要求将8个不同浓度的血型抗体与相应红细胞进行反应并判定各反应的凝集强度。

2、受试者接收8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品以及相应红细胞、说明书。

3、受试者按照说明书将8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞反应，并判断每个反应的凝集强度，将检测方法和结果反馈给评估者。

4、评估者根据受试者的凝集强度判定结果，结合8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品的标准凝集强度，同时将检测方法的类型纳入考虑因素，综合评估受试者的血型血清学凝集强度判定能力。

其中，8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞反应的标准凝集强度在4+到阴性之间，最强为4+，最弱为阴性；所述的血型抗体选自ABO、P、MN、Lewis、Rh、Kidd和Duffy抗体中的任一种或几种；所述受试者可以是单位或个人；双方交付的方式可以是邮寄、快递、当面交付等；在对受试者的血型血清学凝集强度判定能力综合评估后，还可以对不同受试者的血型血清学凝集强度判定能力进行比较，或对同一受试者多次的血型血清学凝集强度判定能力进行比较。

实施例3

一种血型血清学凝集强度判定能力验证试剂盒，包含：

8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品；

相应红细胞；

说明书：记载了需要将8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞进行反应，并记录检测方法和结果。

其中8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品和相应红细胞反应的凝集强度在4+到阴性之间，最强为4+，最弱为阴性；且8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品和相应红细胞反应的凝集强度对于试剂盒提供者来说是已知的。

其中，所述的血型抗体选自ABO、P、MN、Lewis、Rh、Kidd和Duffy抗体中的任一种或几种。

实施例4

请参见图2，图2是本发明的血型抗体效价检测能力验证系统的结构示意图。所述的血型抗体效价检测能力验证系统包括：

血型抗体效价检测能力验证试剂盒：所述的血型血清学凝集强度判定能力验证试剂盒如实施例3所述。

评估端和受试端：所述的评估端对受试端的血型血清学凝集强度判定能力进行验证；

验证平台；所述的验证平台包括：

试剂盒发放记录模块：用于在评估端向受试端交付血型血清学凝集强度判定能力验证试剂盒后，记录试剂盒发放状态，如“已交付”、“未交付”，还可记录交付日期、交付方式、发放次数等；

检测结果记录模块：用于上传和储存受试者的血型血清学凝集强度检测方法和结果；

检测结果分析模块：用于评估端根据检测结果记录模块的方法和结果，结合8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品和相应红细胞反应的标准凝集强度，将方法的类型纳入考虑因素，综合评估受试者的血型血清学凝集强度判定能力，例如可根据公式对血型血清学凝集强度判定能力进行打分。

检测结果反馈模块：用于评估端将血型血清学凝集强度判定能力的结果反馈给受试者，还可记录和传送评估端给予受试端的指导建议。

所述的验证平台还可进一步包括统计比较模块，用于评估端根据不同受试者的血型血清学凝集强度判定能力对不同受试者的血型血清学凝集强度判定能力进行排序，或用于评估端对同一受试者的多次血型血清学凝集强度判定能力进行比较。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种血型血清学凝集强度判定能力验证方法，其特征在于，包括以下步骤：

a)评估者将8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品、相应红细胞和说明书交付给受试者，所述说明书记载了要求受试者将8个不同浓度的血型抗体与相应红细胞进行反应并判定各反应的凝集强度；

b)受试者接收8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品、相应红细胞和说明书；

c)受试者按照说明书将8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞反应，并判断每个反应的凝集强度，将方法和结果反馈给评估者；

d)评估者根据受试者的凝集强度判定结果，结合8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞的标准凝集强度，同时将检测方法的类型纳入考虑因素，综合评估得出受试者的血型血清学凝集强度判定能力。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤a)所述的8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞反应的凝集强度在4+到阴性之间，最强为4+，最弱为阴性。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤a)所述的8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞反应的凝集强度对评估者来说是已知的。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤d)所述的检测方法的类型包括标准手工试管抗球蛋白法和柱凝集法。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的血型抗体选自ABO、P、MN、Lewis、Rh、Kidd和Duffy抗体中的任一种或几种。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤d)之后还包括步骤：评估者将同一受试者多次的血型血清学凝集强度判定能力进行比较；或还包括步骤：评估者将不同受试者的血型血清学凝集强度判定能力进行比较。

7.一种血型血清学凝集强度判定能力验证试剂盒，其特征在于，包含：

8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品；

相应红细胞；

说明书：记载了需要将8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品与相应红细胞进行反应，并记录检测方法和结果；

其中8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品和相应红细胞反应的凝集强度在4+到阴性之间，最强为4+，最弱为阴性。

8.根据权利要求7所述的血型抗体效价检测能力验证试剂盒，其特征在于，所述的8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品和相应红细胞反应的凝集强度对试剂盒提供者来说是已知的。

9.一种血型血清学凝集强度判定能力验证系统，其特征在于，包括：

如权利要求7或8所述的血型抗体效价检测能力验证试剂盒；

评估端和受试端：所述的评估端对受试端的血型血清学凝集强度判定能力进行验证；以及

验证平台；所述的验证平台包括：

试剂盒发放记录模块：用于记录评估端向受试端交付血型血清学凝集强度判定能力验证试剂盒的状态；

检测结果记录模块：用于上传和储存受试者的血型血清学凝集强度检测方法和结果；

检测结果分析模块：用于评估端根据检测结果记录模块的方法和结果，结合8个不同浓度的含有血型抗体的全血浆制品和相应红细胞反应的标准凝集强度，将方法的类型纳入考虑因素，综合评估受试者的血型血清学凝集强度判定能力；

检测结果反馈模块：用于评估端将血型血清学凝集强度判定能力的结果反馈给受试者。

10.根据权利要求9所述的血型血清学凝集强度判定能力验证系统，其特征在于，所述的血型血清学凝集强度判定能力验证系统还包括统计比较模块，用于比较同一受试者多次的血型血清学凝集强度判定能力，或不同受试者的血型血清学凝集强度判定能力。