CN109170298A - 柚皮苷在改善畜禽肉质品质中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于含有氧作为杂环原子的杂环与糖化物基团共有一个杂环氧原子的化合物技术领域，具体涉及一种柚皮苷在改善畜禽肉质品质中的应用。柚皮苷用于畜禽养殖，能够改善畜禽肉质品质，提高肌肉中风味物质肌苷酸含量，能够提高肌肉中油酸、反油酸和顺‑11‑二十烯酸含量；能够提高肌肉中超氧化歧化酶SOD1和SOD2表达量；能够提高背肌中快速氧化型肌纤维MyHCⅡA和过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达量。

Description

柚皮苷在改善畜禽肉质品质中的应用
技术领域
本发明属于含有氧作为杂环原子的杂环与糖化物基团共有一个杂环氧原子的化合物技术领域，具体涉一种柚皮苷在改善畜禽肉质品质中的应用。
背景技术
柚子是芸香科植物柚的成熟果实，产于我国福建、江西、广东、广西等南方地区。柚子清香、酸甜、凉润，营养丰富，药用价值很高，是人们喜食的名贵水果，也是医学界公认的最具食疗效益的水果之一。我国是世界产柚大国，根据联合国粮食及农业组织(FAO)统计，2008年我国产柚子约为57万吨，且呈进一步快速增长态势(“柚皮苷的提取方法及其应用研究进展”，于宏伟等，湖北农业科学，2011年第50卷第8期，第1516-1518页，公开日2011年04月30日)。
柚皮苷(Naringin)又名柚苷、柑橘苷、异橙皮苷等，是植物的次生代谢产物，全称为4,5,7-三羟基-黄烷酮-7-鼠李糖葡萄糖苷(其结构式如下图所示)，分子式为C27H32O14
是一种二氢黄酮类化合物，含有多个芳香族羟基，主要存在于柚、橘、橙等柑橘类水果及其变种的外层果皮中(“柚皮苷的生物学功能及在畜禽生产中的应用”，吴泳江等，中国畜牧杂志，2017年第53卷第7期，第9-13页，公开日2017年12月31日；柚皮苷的提取方法及其应用研究进展”，于宏伟等，湖北农业科学，2011年第50卷第8期，第1516-1518页，公开日2011年04月30日)。研究表明，柚皮苷有广泛的生产活性，具有促进胃肠蠕动，解痉挛，抗氧化，抗肿瘤，抗菌，抗动脉粥样硬化，降血脂，镇静，镇痛，调节血糖，减少脂质合成，抗炎，抗过敏反应，对杂环胺类物质等致突变性的抑制作用，对某些毒物的拮抗作用，降胆固醇，镇痛，改善微循环和软骨组织细胞功能作用，降低毛细血管通过性和骨关节病变率、抗骨质疏松症等药理作用(“柚皮苷的药物代谢动力学研究概况与进展”，朱宏平等，中国临床药理学与治疗学，2013年18卷第11期，第1297-1303页，公开日2013年11月30日；“柚皮苷的生物学功能及在畜禽生产中的应用”，吴泳江等，中国畜牧杂志，2017年第53卷第7期，第9-13页，公开日2017年12月31日；“柚皮苷的生物活性研究进展”，金元宝等，中国现代医药杂志，2018年第20卷第3期，第92-96页，公开日2018年03月31日)，可广泛用于医学、食品科学、化妆品、化学等领域(柚皮苷的提取方法及其应用研究进展”，吴泳江等，湖北农业科学，2011年第50卷第8期，第1516-1518页，公开日2011年04月30日；“柚皮苷的生物活性研究进展”，金元宝等，中国现代医药杂志，2018年第20卷第3期，第92-96页，公开日2018年03月31日)。
目前，关于柚皮苷在畜禽养殖方面的报道较少。目前，有关柚皮苷对猪的生长发育和肉品品质方面的作用的相关研究目前尚属空白，无相关技术报道。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种柚皮苷在改善畜禽肉质品质中的应用。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
柚皮苷在改善畜禽肉质品质中的应用。
本发明中，所述畜禽包括单胃动物和反刍动物。单胃动物是相对于瘤胃而言的，是指具有一个胃腺的动物，包括猪、鸡、鸭、鹅等。反刍是指进食经过一段时间以后将在胃中半消化的食物返回嘴里再次咀嚼，反刍动物是有反刍消化方式的动物，包括牛、羊等。
发明人发现，柚皮苷能够改善畜禽肉质品质。
进一步，所述柚皮苷的用量为畜禽饲料质量的0.05-0.15％。
在本发明中，用量为畜禽饲料质量的0.05-0.15％的柚皮苷，能够进一步改善畜禽肉质品质。
进一步，所述柚皮苷的用量为畜禽饲料质量的0.15％。
在本发明中，用量为畜禽饲料质量的0.15％的柚皮苷，能够进一步改善畜禽肉质品质。
本发明的目的之二在于保护柚皮苷在调节肌肉中脂肪酸组成中的应用。
发明人发现，柚皮苷能够调节肌肉中脂肪酸组成。
本发明的目的之三在于保护柚皮苷在提高肌肉中油酸、反油酸和顺-11-二十烯酸含量中的应用。
发明人发现，柚皮苷能够提高肌肉中油酸、反油酸和顺-11-二十烯酸含量。
本发明的目的之四在于保护柚皮苷在提高肌肉抗氧化性能中的应用。
发明人发现，柚皮苷在提高肌肉抗氧化性能。
本发明的目的之五在于保护柚皮苷在提高肌肉中超氧化物歧化酶SOD1和SOD2表达量中的应用。
发明人发现，柚皮苷能够提高肌肉中超氧化歧化酶SOD1和SOD2表达量。
本发明的目的还在于保护柚皮苷在提高背肌中快速氧化型肌纤维MyHCⅡA和过氧化物酶体增殖物激活受体γ的mRNA表达量中的应用。
发明人发现，柚皮苷能够提高背肌中快速氧化型肌纤维MyHCⅡA和过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达量。
本发明的有益效果在于：
柚皮苷能够改善畜禽肉质品质。
柚皮苷能够调节肌肉中脂肪酸组成。
柚皮苷能够提高肌肉中油酸、反油酸和顺-11-二十烯酸含量。
柚皮苷能够提高肌肉抗氧化性能。
柚皮苷能够提高肌肉中超氧化歧化酶SOD1和SOD2表达量。
柚皮苷能够提高背肌中快速氧化型肌纤维MyHCⅡa和过氧化物酶体增殖物激活受体γ的mRNA表达量。
附图说明
图1为抗氧化相关基因表达量测试结果；
图2为背肌肌纤维类型表达量测试结果；
图3为背肌脂类代谢基因PPARγ、FATP1、FAS、ATGL和HSL表达量测试结果。
具体实施方式
所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说明，但并不是本发明的内容仅限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
以下柚皮苷购自西安昊轩生物科技有限公司，生产批号为HXHT18-03-27，纯度≥95％(由外包装获知)。
实施例1
(1)试验饲粮
本试验的基础饲粮按照重量份由以下组分组成：玉米72.97份，豆粕10.60份，小麦麸14.50份，石粉0.30份，磷酸氢钙0.20份，食盐0.30份，赖氨酸0.13份，预混料1份；其中，预混料按照如下比例配制而成：铜(CuSO4·5H2O)15mg、铁(FeSO4·7H2O)100mg，锌(ZnSO4·7H2O)100mg，锰(MnSO4·H2O)40mg，硒(Na2SeO3)0.3mg，碘(KI)0.3mg，多维0.3g，氯化胆碱1.0g，植酸酶0.1g，防霉剂0.5g。
(2)试验分组与设计
选用健康、体重为66.0kg±0.83kg的“约克夏×荣昌”生长育肥猪48头，随机分为2组(每组6个重复，每个重复4只)，对照组饲喂基础饲粮，实验组向基础饲粮中添加柚皮苷，具体用量为：每吨基础饲粮中添加1.5kg柚皮苷。
(3)性能检测
试验期为50天。试验期间，猪自由采食，自由饮水；实验组和对照组除是否添加柚皮苷不同外，其他管理方式完全相同。
试验期间，统计猪日增重、日采食量，按照公式料重比＝日采食量/日增重计算料重比，并通过SPSS 18.0软件进行统计分析，结果如表1所示；
试验结束，对猪进行屠宰，测定胴体重、屠宰率、胴体长、背膘厚、瘦肉率、板油重、眼肌面积，并通过SPSS 18.0软件进行统计分析，结果如表1所示；
其中，胴体重、屠宰率、胴体长、背膘厚、瘦肉率、板油重和眼肌面积的检测方法为：按照中华人民共和国农业行业标准《NY/T 825-2004瘦肉型猪胴体性能测定技术规程》进行胴体分割，劈半后保留左侧胴体称重，测定及计算胴体重、胴体直长、背膘厚、屠宰率、瘦肉率、板油重和眼肌面积，并通过SPSS 18.0软件进行统计分析；
取背最长肌测定肉色评分，pH45min，pH24h，亮度(L值)，红度(a值)，黄度(b值)，大理石纹，肌内脂肪含量，滴水损失，冻干水分含量，肌苷酸含量，并通过SPSS 18.0软件进行统计分析，结果如表2所示；
其中，肉色评分、pH45min、pH24h、亮度(L值)、红度(a值)、黄度(b值)、大理石纹、滴水损失和冻干水分含量按照中华人民共和国农业行业标准NY/T821-2004《猪肌肉品质测定技术规范》进行测定；
肌内脂肪含量用索氏抽提法进行测定，具体方法为：参考国家标准《GB/T14772—2008食品中粗脂肪的测定》中的规定操作，用乙醚提取待测样品中的脂肪，烘干后称量3次，直至质量恒定；
肌苷酸含量委托重庆市畜牧科学院畜牧科技研究中心测定；
同时，检测胴体肌肉正癸酸、月桂酸、正十三碳酸、豆蔻酸、棕榈酸、正十七碳酸、硬脂酸、花生酸、棕榈油酸、油酸、反油酸、亚油酸、α-亚麻酸、顺-11-二十烯酸、顺，顺-11,14-二十碳二烯酸、花生四烯酸、顺-13,16-二十二碳二烯酸、饱和脂肪酸SFA、不饱和脂肪酸UFA的含量，并通过SPSS 18.0软件进行统计分析，结果如表3所示；
其中，正癸酸含量、月桂酸含量、正十三碳酸含量、豆蔻酸含量、棕榈酸含量、正十七碳酸含量、硬脂酸含量、花生酸含量、棕榈油酸含量、油酸含量、反油酸含量、亚油酸含量、α-亚麻酸含量、顺-11-二十烯酸含量、顺，顺-11,14-二十碳二烯酸含量、花生四烯酸含量、顺-13,16-二十二碳二烯酸含量、饱和脂肪酸SFA含量和不饱和脂肪酸UFA含量的检测方法为：将样品加入到15ml离心管中，加入2ml 5％盐酸甲醇溶液、3ml氯仿-甲醇溶液(体积比1:1)和100微升十九烷酸甲酯内标，于85℃水浴锅中水浴1小时；水浴完成后，等温度降到室温，在离心管中加入1ml正己烷，震荡萃取2min后，静置1小时，等待分层；取上层清液100微升，用正己烷定容到1ml。用0.45微米滤膜过膜后在气相色谱质谱联用仪上测试。使用TG-5MS色谱柱测定，升温程序为80℃保持1min，以10℃/min的速率升温至200℃，继续以5℃/min的速率升温至250℃，最后以2℃/min的速率升到270℃，保持3min。进样口温度：290℃；载气流速：1.2ml/min，开阀时间1min；
同时，检测胴体肌肉中总抗氧化力T-AOC水平，超氧化物歧化酶SOD活性、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX活性，过氧化氢酶CAT活性，丙二醛MDA含量，并通过SPSS软件进行统计分析，结果如表4所示；检测胴体肌肉中超氧化物歧化酶基因SOD1和SOD2、谷胱甘肽过氧化物酶基因GSH1和GSH4，过氧化氢酶基因CAT表达量，结果如图1所示；
其中，总抗氧化力T-AOC水平、超氧化物歧化酶SOD活性、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX活性、过氧化氢酶CAT活性和丙二醛MDA含量的检测方法为：取出背肌样品1g，加入9mL预冷的生理盐水，在冰水浴中匀浆破碎2～3min，组织匀浆液2 000×g，4℃离心10min，取上清液分数管冻存备用。使用南京建成生物工程研究所的测定试剂盒测定肌肉样品匀浆液中总抗氧化力(T-AOC)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)以及过氧化氢酶(CAT)活性，以及丙二醛(MDA)含量，测定过程严格按照南京建成生物工程研究所生产的总抗氧化能力检测试剂盒(A015-2)、总超氧化物歧化酶测试盒(A001-1-1)、谷胱甘肽过氧化物酶测定试剂盒(A005)、过氧化氢酶测定试剂盒(A007-1-1)和丙二醛测定试剂盒(A003-1)操作说明进行。
并且，检测背肌肌肉中红肌纤维即MyHCⅠ型纤维表达量、糖酵解-氧化混合型纤维即MyHCⅡA型纤维表达量、白肌纤维即MyHC IIb型纤维表达量和中间型肌纤维MyHC IIx型纤维表达量；检测胴体背肌肌肉中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(简称PPARγ)、脂肪酸转运蛋白(简称FATP1)、脂肪酸合成酶(简称FAS)、脂肪甘油三酯脂肪酶(简称ATGL)和激素敏感脂酶(HSL)的表达量，结果如图2和图3所示，其中，图2为背肌肌纤维类型表达量测试结果，图3为背肌脂类代谢基因PPARγ、FATP1、FAS、ATGL和HSL表达量测试结果；
其中，SOD1和SOD2表达量、GSH1和GSH4表达量、CAT表达量、MyHC Ⅰ型纤维表达量、MyHC ⅡA型纤维表达量、MyHC IIb型纤维表达量、MyHC IIx型纤维表达量、PPARγ表达量、FATP1表达量、FAS相表达量、ATGL表达量和HSL表达量的检测方法为：用Trizol法提取背肌组织的总RNA，用反转录试剂盒PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser试剂盒(Takara)对总RNA进行反转录，然后使用GAPDH作为内参，用Premix Ex TaqTMII试剂盒(Takara)对目的基因进行荧光定量PCR反应，体系：模板2.0μL cDNA，10μL 2×SYBRPremix Ex Taq II，0.4μL ROX Reference Dye，上下游引物各0.8μL，加ddH2O使总体积为20μL；所有的反应设置3个重复。数据结果通过法进行相对定量的统计分析。
表1生长性能及胴体性状测试结果
备注：数据用Mean±SE表示。同行间数据无肩标字母表示差异不显著(P＞0.05)，肩标小写字母不同表示差异显著(P<0.05),肩标大写字母不同表示差异极显著(P<0.01)。
由表1可知，实验组和对照组生长性能和胴体性能差异不显著(P>0.05)。然而，与对照组相比，实验组的瘦肉率和眼肌面积分别提高了3.23％和8.90％。
表2肌肉肉质品质测试结果
由表2可知，实验组的pH45min和pH24h高于对照组,尤其是pH45min，与对照组相比，实验组pH45min得到了显著提高。而pH值是衡量机体糖酵解速率的重要指标，屠宰后pH值的迅速下降会产生PSE肉(即“水煮样肉”，主要特征为屠宰后肌肉水肿、变性、坏死)，pH值高的肌肉，嫩度也较高(“日粮AV添加剂量对秦安杂交阉牛牛肉品质及血清生化指标的影响”，李军涛，河南农业大学，2012年，第4页，公开日2012年12月31日；“屠宰生猪PSE肉的发生机理与防制”，刘秀萍等，辽宁畜牧兽医，2004年第10期，第25页，公开日2004年12月31日)。由此证明，柚皮苷能够提高畜禽嫩度。
由表2可知，与对照组相比，实验组的肌肉亮度和黄度分别降低了10.17％和30.54％。而亮度越低表示肉的品质越好；黄度越低，品质越好(“杜长大三元杂交猪与皮杜长大四元杂交猪胴体性状和肉质性状比较研究”，丁荣荣等，畜牧兽医学报，2016年第47卷第9期，第1795-1803页，公开日2016年12月31日；“三种肉用公牛与河西西杂母牛杂交后代的育肥效果及肉用品质分析”，付亚丽等，甘肃农业大学学报，2013年第4期，第6-10页，公开日2013年08月31日)。由此证明，柚皮苷能够降低肉质亮度和黄度，从而改善畜禽肉质品质。
由表2可知，与对照组相比，实验组大理石纹评分及肌内脂肪含量分提高了5.63％和9.92％。而肌内脂肪是影响肉嫩度和口感的主要因素，也是肌肉形成大理石纹的基础，肌内脂肪含量越高，肉质越嫩(“日粮AV添加剂量对秦安杂交阉牛牛肉品质及血清生化指标的影响”，李军涛，河南农业大学，2012年，第3页，公开日2012年12月31日)，口感越好(“肌内脂肪、脂肪酸与猪肉肉质三者关系研究进展”，韦克林等，中国畜牧兽医文摘，20112年第28卷第11期，第50-51及66页，公开日2012年12月31日)。由此证明，柚皮苷能够改善肉质嫩度和口感，从而改善畜禽肉质品质。
由表2可知，与对照组相比，实验组的滴水损失降低了10.91％。而滴水损失越小，贮藏损失越小，熟肉率越大，肌肉系水力越好(“日粮AV添加剂量对秦安杂交阉牛牛肉品质及血清生化指标的影响”，李军涛，河南农业大学，2012年，第6页，公开日2012年12月31日)。由此证明，柚皮苷能够减少肌肉滴水损失，提高肌肉系水力，从而进一步改善畜禽肉质品质。
由表2可知，与对照组相比，实验组的肌肉中肌苷酸含量提高了8.10％。而肌苷酸含量是决定肌肉质鲜味特性的主要物质(“肉类风味物质：肌苷酸”，罗桂芬等，中国家禽，2004年第26卷第3期，第41-43页，公开日2004年12月31日)。由此证明，柚皮苷能够显著提高肌肉中肌苷酸含量，提高肉质鲜味，从而进一步改善肌肉肉质品质。
综上，柚皮苷能够显著改善畜禽肉质品质。
表3肌肉脂肪酸含量测试结果
项目 对照组 实验组
C10:0(正癸酸)含量/％ 0.08±0.01 0.11±0.01
C12:0(月桂酸)含量/％ 0.08±0.01 0.07±0.01
C13:0(正十三碳酸)含量/％ 0.05±0.01 0.07±0.02
C14:0(豆蔻酸)含量/％ 1.25±0.06 1.23±0.05
C16:0(棕榈酸)含量/％ 23.38±0.42 23.68±0.48
C17:0(正十七碳酸)含量/％ 0.35±0.04 0.22±0.02
C18:0(硬脂酸)含量/％ 14.69±0.27 14.36±0.54
C20:0(花生酸)含量/％ 0.12±0.04 0.14±0.03
C16:1(棕榈油酸)含量/％ 2.24±0.14 2.44±0.06
C18:1n-9c(油酸)含量/％ 40.63±0.05 42.08±0.58
C18:1n-9t(反油酸)含量/％ 2.41±0.15 2.92±0.26
C18:2n-6(亚油酸)含量/％ 10.73±0.55<sup>a</sup> 8.71±0.29<sup>b</sup>
C18:3n-3(α-亚麻酸)含量/％ 0.36±0.03 0.32±0.02
C20:1n-9(顺-11-二十烯酸)含量/％ 0.56±0.03 0.75±0.03
C20:2(顺，顺-11,14-二十碳二烯酸)含量/％ 0.45±0.03 0.43±0.03
C20:4n-6(花生四烯酸)含量/％ 0.70±0.12 0.69±0.14
C22:2(顺-13,16-二十二碳二烯酸)含量/％ 1.90±0.19 1.25±0.19
饱和脂肪酸SFA总含量/％ 40.00±0.59 39.87±0.91
不饱和脂肪酸UFA总含量/％ 59.97±0.89 59.59±1.06
由表3可知，与对照组相比，试验组的亚油酸含量显著下降18.83％，但不饱和脂肪酸中的C18:1n-9c(油酸)、C18:1n-9t(反油酸)和C20:1n-9(顺-11-二十烯酸)含量有所上升，因此总的不饱和脂肪酸含量相近。由此证明，柚皮苷能够提高肌肉中油酸、反油酸和顺-11-二十烯酸含量，调节肌肉中脂肪酸组成。
表4抗氧化性能测试结果
项目 对照组 实验组
总抗氧化力T-AOC/(μmol/g) 14.80±0.23<sup>B</sup> 19.38±0.82<sup>A</sup>
超氧化物岐化酶SOD/(U/mg) 39.29±1.14<sup>B</sup> 47.60±1.82<sup>A</sup>
谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX/(U/mg) 3.58±0.37 3.15±0.63
过氧化氢酶CAT/(U/mg) 2.54±0.28 2.99±0.25
丙二醛MDA/(nmol/mg) 0.24±0.04 0.18±0.01
由表4可知，与对照组相比，实验组的T-AOC水平和SOD活性得到了极显著上升，而MDA含量下降了25％。由图1可知，与对照组相比，实验组SOD1和SOD2表达量得到了显著上升，而其他抗氧化酶基因表达量与对照组相近。由此证明，柚皮苷能明显提高猪肌肉的总体抗氧化水平。
由图2可知，与对照组相比，实验组的背肌中MYHCⅡA型纤维表达量得到了显著提高；而实验组其他肌纤维类型表达量与对照组相近。由此证明，柚皮苷能显著提高背肌中MYHCⅡA型纤维表达量。
由图3可知，与对照组相比，实验组的背肌中PPARγ的表达量得到了显著提高，但而实验组脂肪酸合成酶(FAS)、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)及激素敏感脂酶(HSL)表达量与对照组相近。由此证明，柚皮苷能显著提高背肌中PPARγ的表达量。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (8)

1.柚皮苷在改善畜禽肉质品质中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，柚皮苷的用量为畜禽饲料质量的0.05-0.15％。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，柚皮苷的用量为畜禽饲料质量的0.15％。
4.柚皮苷在调节肌肉中脂肪酸组成中的应用。
5.柚皮苷在提高肌肉中油酸、反油酸和顺-11-二十烯酸含量中的应用。
6.柚皮苷在提高肌肉抗氧化性能中的应用。
7.柚皮苷在提高肌肉中超氧化物歧化酶SOD1和SOD2表达量中的应用。
8.柚皮苷在提高背肌中快速氧化型肌纤维MyHCⅡA和过氧化物酶体增殖物激活受体γ的mRNA表达量中的应用。
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