CN108902055B - 一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，将雌雄太平洋纺锤水蚤暂养在处理过的海水中，利用起伏式温度‑光照刺激法进行产卵培养，直至休眠卵产生，收集休眠卵。有益效果为：本发明诱导方法利用起伏式温度‑光照刺激法进行产卵培养，该诱导方法完成高效率诱导产生休眠卵，加速休眠卵的形成，使休眠卵的最大形成效率提前出现，缩短培养时间，提高休眠卵的产率，且能提高成体的成活率和休眠卵的孵化率。
Description
技术领域
本发明涉及休眠卵的诱导技术领域，尤其是涉及一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法。
技术背景
在海洋生态系统中，浮游动物种群变化和生产力的高低，对于整个海洋生态系统结构、功能、以及生物资源的补充都具有十分重要的影响。海洋挠桡足类，隶属于节肢动物门（Arthropoda）、甲壳亚门（Crustacea）、桡足纲（Copepoda），为小型甲壳动物，体长<3mm，营浮游、底栖或寄生生活，分布于海洋、淡水或半咸水中，数量极大，种类繁多，既是中、上层经济鱼类的主要摄食对象，又是养殖鱼、虾类幼体的重要开口饵料之一，故在水生态系统食物网和水产养殖中具有重要意义。挠足类的数量变动不仅与渔业的丰歉直接相关，对渔业资源结构有间接的影响，而且，对浮游植物的数量变化有着重要的调控作用，从而影响甚至改变海洋生态系统物流和能流路径和流向。此外，挠足类作为生产力第二环节次级生产力中的重要组成部分，在初级生产和更高营养级之间起着承上启下的重要作用，在海洋生态系统中占有非常重要的位置。由于挠足类在整个海洋生态系统中重要作用，被列入当今一些国际重大研究计划的重点研究内容。
太平洋纺锤水蚤隶属于桡足纲、哲水蚤目、纺锤水蚤科、纺锤水蚤属，广泛分布于我国沿海、日本沿海、太平洋和印度洋。太平洋纺锤水蚤主要出现在冬春季，到春末夏初开始产休眠卵，休眠卵沉入海底被埋入海泥并间续孵化以补充种群。到了下一个冬季，休眠卵的生产停止，种群数量得到恢复。研究发现该节律性的休眠卵与温度光照有关。然而研究休眠卵的结构等课题则受限于一年之内只有一个季节才能在海区采集休眠卵，因此在实验室内诱导生产休眠卵是一个亟待解决的难题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用起伏式温度-光照刺激法进行产卵培养的诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，该诱导方法完成高效率诱导产生休眠卵，加速休眠卵的形成，使休眠卵的最大形成效率提前出现，缩短培养时间，提高休眠卵的产率，且能提高成体的成活率和休眠卵的孵化率。
本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：
一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，将雌雄太平洋纺锤水蚤暂养在处理过的海水中，利用起伏式温度-光照刺激法进行产卵培养，直至休眠卵产生，收集休眠卵。本发明首次利用起伏式温度-光照刺激法进行产卵培养，利用光照与温度联合刺激的措施完成高效率诱导产生休眠卵，提高休眠卵的产率。
作为优选，起伏式温度-光照刺激法的控制条件为：先在温度为18-22°C、光照强度1800-2000lux、明暗时间为12h:12h的条件下暂养时间为3-5d；然后在温度为24-27°C、光照强度为2500-3000lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；再在温度为18-22°C，光照强度为1800-2000lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；最后在温度为24-27°C、光照强度为2500-3000lux、明暗为16h:8h的条件下培养直至休眠卵产生。上述起伏式温度-光照刺激法的控制条件能加快太平洋纺锤水蚤发育成熟，缩短性成熟所需的时间且减少生殖量，同时起伏式温度-光照刺激法的控制条件能降低太平洋纺锤水蚤的摄食率，刺激了混交雌体的产生，使得产生两性生殖，同时缩短了产休眠卵的混交雌体的产卵间隔时间有关，从而加速了休眠卵的形成，使休眠卵的最大形成效率提前出现，缩短培养时间，提高休眠卵商品化生产的经济效益。
作为优选，海水深度为5-13cm。该海水深度利于光照强度的传播，使得海水中太平洋纺锤水蚤均能受到光照的刺激，同时有利于温度的调整，使得海水达到相同温度需要的时间短，有起伏式温度-光照刺激法发挥作用，提高休眠卵的产率。
作为优选，海水为经过预处理的天然海水。
进一步优选，海水的预处理步骤为：将天然海水用滤膜通过真空过滤泵筛去浮沙与杂物，灭菌后加入含有D-半胱氨酸的半胱氨酸和抗坏血酸钠，并且期间连续充气24-36h，最后调节海水的盐度至2.7-3.5%，即可。该步骤能够有效地对天然海水中进行灭菌处理，杀灭海水中的各种病原性微生物，使经过除杂、灭菌、充气、调配盐度后的海水更加适合太平洋纺锤水蚤的生长繁殖而达到生机旺盛的状态，为产卵做准备。
更一步优选，半胱氨酸中含有1.5-2.5%的D-半胱氨酸。本发明用特别配比的半胱氨酸能够和抗坏血酸钠发挥协同作用，能够中和灭菌过程用氧化剂或产生的具有氧化作用的物质，避免氧化剂的存在对太平洋纺锤水蚤及其休眠卵的影响，提高成体的成活率和休眠卵的孵化率，此外用特别配比的半胱氨酸能够和抗坏血酸钠预处理过的海水能够刺激太平洋纺锤水蚤对温度、光周期和氧含量的敏感度并将信息传递给卵粒，使得到的太平洋纺锤水蚤卵粒处于滞育状态而不管周围环境条件的变化，提高休眠卵的得率，且有助于脱离母体的卵粒迅速分散且漂浮于海水中，提高收集休眠卵的简易度。
更一步优选，半胱氨酸和抗坏血酸钠的添加量为0.34-0.38mg/L和0.05-0.12mg/L。
与现有技术相比，本发明的优点在于：1）本发明首次利用起伏式温度-光照刺激法进行产卵培养，利用光照与温度联合刺激的措施完成高效率诱导产生休眠卵，加速休眠卵的形成，使休眠卵的最大形成效率提前出现，缩短培养时间，提高休眠卵的产率，提高休眠卵商品化生产的经济效益；2）本发明用暂养水体能提高成体的成活率和休眠卵的孵化率，能够刺激太平洋纺锤水蚤对光周期和氧含量的敏感度并将信息传递给卵粒，使得到的太平洋纺锤水蚤卵粒处于滞育状态而不管周围环境条件的变化，提高休眠卵的得率。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
实施例1：
一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，将雌雄太平洋纺锤水蚤暂养在处理过的海水中，利用起伏式温度-光照刺激法进行产卵培养，直至休眠卵产生，收集休眠卵。该方法首次利用起伏式温度-光照刺激法进行产卵培养，利用光照与温度联合刺激的措施完成高效率诱导产生休眠卵，提高休眠卵的产率。
上述起伏式温度-光照刺激法的控制条件为：先在温度为18°C、光照强度1800lux、明暗时间为12h:12h的条件下暂养时间为3d；然后在温度为24°C、光照强度为2500lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；再在温度为18°C，光照强度为1800lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；最后在温度为24°C、光照强度为2500lux、明暗为16h:8h的条件下培养直至休眠卵产生。上述起伏式温度-光照刺激法的控制条件能加快太平洋纺锤水蚤发育成熟，缩短性成熟所需的时间且减少生殖量，同时起伏式温度-光照刺激法的控制条件能降低太平洋纺锤水蚤的摄食率，刺激了混交雌体的产生，使得产生两性生殖，同时缩短了产休眠卵的混交雌体的产卵间隔时间有关，从而加速了休眠卵的形成，使休眠卵的最大形成效率提前出现，缩短培养时间，提高休眠卵商品化生产的经济效益。
上述海水深度为5cm。该海水深度利于光照强度的传播，使得海水中太平洋纺锤水蚤均能受到光照的刺激，同时有利于温度的调整，使得海水达到相同温度需要的时间短，有起伏式温度-光照刺激法发挥作用，提高休眠卵的产率。
海水为经过预处理的天然海水，海水的预处理步骤为：将天然海水用滤膜通过真空过滤泵筛去浮沙与杂物，灭菌后加入含有D-半胱氨酸的半胱氨酸和抗坏血酸钠，半胱氨酸和抗坏血酸钠的添加量为0.34mg/L和0.05mg/L，并且期间连续充气24h，最后调节海水的盐度至2.7%，即可。该步骤能够有效地对天然海水中进行灭菌处理，杀灭海水中的各种病原性微生物，使经过除杂、灭菌、充气、调配盐度后的海水更加适合太平洋纺锤水蚤的生长繁殖而达到生机旺盛的状态，为产卵做准备。
其中，半胱氨酸中含有1.5%的D-半胱氨酸。本发明用特别配比的半胱氨酸能够和抗坏血酸钠发挥协同作用，能够中和灭菌过程用氧化剂或产生的具有氧化作用的物质，避免氧化剂的存在对太平洋纺锤水蚤及其休眠卵的影响，提高成体的成活率和休眠卵的孵化率，此外用特别配比的半胱氨酸能够和抗坏血酸钠预处理过的海水能够刺激太平洋纺锤水蚤对温度、光周期和氧含量的敏感度并将信息传递给卵粒，使得到的太平洋纺锤水蚤卵粒处于滞育状态而不管周围环境条件的变化，提高休眠卵的得率，且有助于脱离母体的卵粒迅速分散且漂浮于海水中，提高收集休眠卵的简易度。
实施例2：
一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，将雌雄太平洋纺锤水蚤暂养在处理过的海水中，海水深度为10cm，利用起伏式温度-光照刺激法进行产卵培养，先在温度为20°C、光照强度2000lux、明暗时间为12h:12h的条件下暂养时间为3d；然后在温度为25°C、光照强度为2800lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；再在温度为19°C，光照强度为2000lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；最后在温度为26°C、光照强度为2800lux、明暗为16h:8h的条件下培养，直至休眠卵产生，收集休眠卵。
海水为经过预处理的天然海水，海水的预处理步骤为：将天然海水用滤膜通过真空过滤泵筛去浮沙与杂物，灭菌后加入含有2.0%的D-半胱氨酸的半胱氨酸和抗坏血酸钠，半胱氨酸和抗坏血酸钠的添加量为0.36mg/L和0.08mg/L，并且期间连续充气30h，最后调节海水的盐度至3.1%，即可。
本实施例培养最后在温度为26°C、光照强度为2800lux、明暗为16h:8h的条件下培养2d后收集休眠卵，休眠卵:正常卵生产比例达85.1:14.9。说明本实施例方法能利用光照与温度联合刺激的措施完成高效率诱导产生休眠卵，提高休眠卵的产率。同时将太平洋纺锤水蚤暂养3d，成活率依次为100%（1d）、98.3%(2d)和96.7%（3d）。
实施例3：
一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，将雌雄太平洋纺锤水蚤暂养在处理过的海水中，海水深度为13cm，利用起伏式温度-光照刺激法进行产卵培养，先在温度为22°C、光照强度2000lux、明暗时间为12h:12h的条件下暂养时间为5d；然后在温度为27°C、光照强度为3000lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；再在温度为22°C，光照强度为2000lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；最后在温度为27°C、光照强度为3000lux、明暗为16h:8h的条件下培养，直至休眠卵产生，收集休眠卵。
海水为经过预处理的天然海水，海水的预处理步骤为：将天然海水用滤膜通过真空过滤泵筛去浮沙与杂物，灭菌后加入含有2.5%的D-半胱氨酸的半胱氨酸和抗坏血酸钠，半胱氨酸和抗坏血酸钠的添加量为0.38mg/L和0.12mg/L，并且期间连续充气36h，最后调节海水的盐度至3.5%，即可。
对比例1：
一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，将天然海水用滤膜通过真空过滤泵筛去浮沙与杂物，灭菌，并且期间连续充气24-36h，最后调节海水的盐度至2.7-3.5%，即得处理过的海水，备用；将雌雄太平洋纺锤水蚤暂养在处理过的海水中，海水深度为10cm，利用起伏式温度-光照刺激法进行产卵培养，先在温度为20°C、光照强度2000lux、明暗时间为12h:12h的条件下暂养时间为3d；然后在温度为25°C、光照强度为2800lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；再在温度为19°C，光照强度为2000lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；最后在温度为26°C、光照强度为2800lux、明暗为16h:8h的条件下培养2d，收集休眠卵。休眠卵:正常卵生产比例达72.4:27.6。同时将太平洋纺锤水蚤暂养3d，成活率依次为100%（1d）、95.5%(2d)和91.0%（3d）。通过对比例1和本发明实施例2的结果，可发现：天然海水处理过程中含有D-半胱氨酸的半胱氨酸能够和抗坏血酸钠发挥协同作用，能够提高太平洋纺锤水蚤成体的成活率和休眠卵的得率。
本发明操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，其特征在于：将雌雄太平洋纺锤水蚤暂养在预处理的海水中，利用起伏式温度-光照刺激法进行产卵培养，直至休眠卵产生，收集休眠卵；所述海水深度为5-13cm；所述起伏式温度-光照刺激法的控制条件为：先在温度为18-22°C、光照强度1800-2000lux、明暗时间为12h:12h的条件下暂养时间为3-5d；然后在温度为24-27°C、光照强度为2500-3000lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；再在温度为18-22°C，光照强度为1800-2000lux、明暗时间为16h:8h的条件下培养24h；最后在温度为24-27°C、光照强度为2500-3000lux、明暗为16h:8h的条件下培养直至休眠卵产生。
2.根据权利要求1所述的一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，其特征在于：所述海水为经过预处理的天然海水。
3.根据权利要求1所述的一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，其特征在于：所述海水的预处理步骤为：将天然海水用滤膜通过真空过滤泵筛去浮沙与杂物，灭菌后加入含有D-半胱氨酸的半胱氨酸和抗坏血酸钠，并且期间连续充气24-36h，最后调节海水的盐度至2.7-3.5%，即可。
4.根据权利要求3所述的一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，其特征在于：所述半胱氨酸中含有1.5-2.5%的D-半胱氨酸。
5.根据权利要求3所述的一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法，其特征在于：所述半胱氨酸和抗坏血酸钠的添加量为0.34-0.38mg/L和0.05-0.12mg/L。
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| CN201810737603.8A Active CN108902055B (zh) | 2018-07-06 | 2018-07-06 | 一种诱导太平洋纺锤水蚤产休眠卵的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105555131A (zh) * | 2014-07-31 | 2016-05-04 | 大峰Ls株式会社 | 灭菌养殖水的制备方法及利用其的流水式灭菌水鱼类养殖方法 |
| CN106577409A (zh) * | 2016-12-21 | 2017-04-26 | 厦门大学 | 一种诱导桡足类产生滞育卵的方法 |
-
2018
- 2018-07-06 CN CN201810737603.8A patent/CN108902055B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105555131A (zh) * | 2014-07-31 | 2016-05-04 | 大峰Ls株式会社 | 灭菌养殖水的制备方法及利用其的流水式灭菌水鱼类养殖方法 |
| CN106577409A (zh) * | 2016-12-21 | 2017-04-26 | 厦门大学 | 一种诱导桡足类产生滞育卵的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 河口近海桡足类休眠卵生态学研究进展;王庆等;《应用生态学报》;20150506;第26卷(第7期);第2220页7.1.1非生物因素 * |
| 海洋桡足类滞育卵在海水养殖业中的应用及其前景;刘光兴等;《青岛海洋大学学报》;20031230;第33卷(第6期);第902页倒数第1段，第903页第1段 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN108902055A (zh) | 2018-11-30 |
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