CN108872420B

CN108872420B - 一种检测溶解性有机氮的仪器及方法

Info

Publication number: CN108872420B
Application number: CN201810480719.8A
Authority: CN
Inventors: 张文俊; 黎雷
Original assignee: Tongji University
Current assignee: Tongji University
Priority date: 2018-05-18
Filing date: 2018-05-18
Publication date: 2019-06-11
Anticipated expiration: 2038-05-18
Also published as: CN108872420A

Abstract

本发明涉及检测溶解性有机氮的仪器及方法，包括通过管路顺序连接的末端注入阀、色谱柱、减压阀、加酸注入阀、加氧注入阀、酸氧反应螺旋管、UV消解器、缓冲溶液注入阀、缓冲溶液反应螺旋管、镉柱、显色剂注入阀、显色剂反应螺旋管、UV检测器，所述末端注入阀用于接收流动相与样品，所述UV检测器与用于数据处理的计算机连接。本发明利用尺寸排阻色谱柱分离出水样中的不同分子量组分，然后利用紫外和氧液进行氧化，将不同分子量区间内组分的DON氧化为硝酸盐氮。出水利用盐酸萘乙二胺分光光度法检测经过还原得到的亚硝酸盐氮含量，然后计算获得水样中的DON浓度。与现有技术相比，本发明可实现全过程自动化操作，误差小，分析时间短。

Description

一种检测溶解性有机氮的仪器及方法

技术领域

本发明涉及环境检测技术领域，尤其是涉及一种检测溶解性有机氮的仪器及方法。

背景技术

氮元素在自然界中主要是以氮气单质的形式存在于大气中，而在地壳土壤中的含量很少。大气中的氮主要由两种形式的“固氮作用”进入土壤中，一种是通过闪电等作用使大气中的氮气转化为含氮化合物，并随着降雨进入土壤中；另一种是通过微生物的“固氮作用”，也就是把大气中氮固定在植物体内，形成营养物质，便于植物的吸收和生长，消费者直接或间接以植物为食，将植物体内的有机氮转化为动物体内的有机氮，最后氮元素从动植物的遗骸或者排出物等形式进入土壤中。近年来，由于工业化和城市化的快速发展，工业大气污染和农业含氮化肥等的滥用现象越来越严重，大气污染物NO以及NO₂以及过量使用的氮肥增加了自然“固氮量”，破坏了地球的原本健康的“氮循环”，过量的氮元素随着降雨进入到土壤从而到达水体中，造成水体水质污染。

氮元素的主要存在形式是硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、氨氮以及有机氮，这些不同的存在形式的总和称为总氮。有机氮(DON)作为总氮的重要组成部分，种类繁多，有报道指出，饮用水水源中有机氮的比例较大，一般占总氮含量的30％，最高可达70％～80％。在饮用水处理中，DON是含氮消毒副产物的前体物，会增加水厂处理水含氮消毒副产物产生的风险。在供水管网中的DON会促进管网中细菌和微生物生长，会大大增加供水“二次污染”的几率。

目前国内外尚无关于DON浓度的精确、快速检测方法。哈尔滨工业大学张靓的硕士论文《基于渗析加电原理的有机氮浓度检测预处理方法研究》论述了目前国内外有关有DON浓度检测方法的不足，并且提出了渗析加电法检测DON浓度的方法。该方法对于DON浓度检测的准确性确有提高，但是耗费的检测时间较长，检测效率较低，检测过程中的操作复杂，这些不足也是目前国内外大部分检测DON浓度方法的通病。实验室检测DON浓度通常使用差值法，有总氮减去无机氮和总凯氏氮减去氨氮两种，但这两种方法需要多次检测相关浓度，多次测量累积的系统误差较大，对结果的影响也较大。这些检测DON浓度的方法已经不能满足对DON浓度快速、准确检测的要求。同样的，目前市场上大部分的仪器只能检测TN、氨氮浓度，对DON浓度的检测也都是基于和实验室检测类似的差值法，例如：德国的WTW的TN分析仪，该仪器对于DON浓度的检测，也是利用了上述差值法进行，检测的准确度不能保证。

以上提到的对DON浓度检测的不足给相关水环境污染问题的治理带来挑战，目前的水环境污染的治理亟需一种能够快速、准确的检测DON浓度的方法。有相关学者针对氮元素检测这一块提出了解决方法，比如专利号为2015101472555的专利公布了一种能同步检测TOC、TN和TP浓度的仪器和方法，另一项申请号为201610712720X的专利提出一种在线紫外消解总氮总磷总有机碳同步检测的仪器，以上两个专利均能实现对TN的检测，但是还是无法实现对DON浓度的快速、准确的检测。

总之，目前国内外在快速、准确的检测DON浓度的仪器和方法上还存在很大空白。

发明内容

本发明致力于解决上述提到的目前广泛存在的对DON浓度检测方面的不足，进而提供一种检测溶解性有机氮的仪器及方法。本发明的仪器能快速、准确地检测待测水样的DON浓度。另外，由于测量数据能够在电脑上以色谱图的形式显示并储存，当结合色谱柱的分子量的标准曲线时，可以分析出待测水样在不同的分子量分布区间内的组分的DON浓度。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种检测溶解性有机氮的仪器，包括通过管路顺序连接的末端注入阀、色谱柱、减压阀、加酸注入阀、加氧注入阀、酸氧反应螺旋管、UV消解器、缓冲溶液注入阀、缓冲溶液反应螺旋管、镉柱、显色剂注入阀、显色剂反应螺旋管、UV检测器，所述末端注入阀用于接收流动相与样品，所述UV检测器与用于数据处理的计算机连接。

所述末端注入阀与采样泵及样品瓶连接，所述末端注入阀还与流动相输液泵及流动相试剂瓶连接；

所述加酸注入阀与酸液注射泵及酸液瓶连接；

所述加氧注入阀与氧液注射泵及氧液瓶连接；

所述缓冲溶液注入阀与缓冲溶液注射泵及缓冲溶液试剂瓶连接；

所述显色剂注入阀与显色剂注射泵及显色剂试剂瓶连接。

所述UV消解器包括加热丝、透明石英螺旋管及UV灯，所述透明石英螺旋管通过管路连接在酸氧反应螺旋管与缓冲溶液注入阀之间，所述UV灯位于透明石英螺旋管的上方，所述加热丝位于透明石英螺旋管的下方。

所述色谱柱位于色谱柱柱温箱内。

所述UV检测器与废液桶连接。

采用上述仪器检测溶解性有机氮的方法，包括以下步骤：

样品经过采样泵采集到管路中，通过末端注入阀与由输液泵输送的流动相混合，然后经过色谱柱温箱内的液相色谱柱分离，样品中的组分按照分子量的不同依次流出，然后经过减压阀减压，将压力降低到约为1个大气压，分离出的样品不同分子量组分经过管路依次经过加酸注入阀和加氧注入阀，此时酸液管路的酸液注射泵会按照设定的量向加酸注入阀注入酸液，此时氧液管路的加氧注射泵会按照设定的量向加氧注入阀注入氧液，然后待测组分、流动相、酸液和氧液在酸氧反应螺旋管中充分反应；接着混合完全的待测组分经过管路进一步到达UV消解器中，在UV灯照射以及加热条件下会将DON氧化为硝酸盐氮，此后通过缓冲溶液注入阀向组分中加入缓冲溶液，然后经过镉柱还原，将硝酸盐氮还原为亚硝酸盐氮，然后通过显色剂注入阀加入显色剂，然后在显色剂反应螺旋管内进行混合反应，最后进入UV检测器中，在540nm处检测亚硝酸盐氮的量，并通过一定的换算关系表征DON浓度，检测完毕后，UV检测器出口废液以及CO₂电导检测器废液经过废液管排出到废液桶。

所述色谱柱采用液相尺寸排阻色谱柱，分子量区分的有效区间可以根据用户的需要自行设置，一般可以选择为500～800000Da。

所述流动相应根据色谱柱的要求进行选择，一般选择为磷酸盐缓冲溶液，离子强度为0.1～0.4M，pH为6.8±0.2。

所述流动相输液泵泵流速应保证每一个色谱峰出峰尖锐易区分，不发生拖尾现象，并且要在色谱柱允许的流速范围内，一般的可以选择为0.4～1.0mL/min。所述流动相输液泵压力要在色谱柱允许的压力范围内，一般可选择为1.8±0.2MPa。

所述色谱柱柱温箱带加热丝，柱温箱柱温应该根据样品的出峰情况进行调整，一方面要保证每一个色谱峰峰宽较窄，另一方面还要在色谱柱允许的温度范围内，一般的色谱峰的峰宽大致为4～10min，温度一般设置为30～60℃。

所述采样泵要将样品采集到管路中，经过末端注入阀和流动相混合。

所述采样泵选用微量注射泵，泵工作压力应高于1500psi，最高精度应小于0.1％，无脉冲式输送，输送均匀，从非常小到非常大的注射量均可精确分配。采样体积应该保证色谱峰出峰尖锐且易区分，可以根据色谱柱分离的效果进行选择，一般的设置在50～500uL。

所述酸液瓶用于装酸液，酸液应根据样品的不同选择，但是都要保证将IC全部酸化为CO₂，一般的可以选为15％～30％的磷酸。

所述氧液瓶用于装氧液，所述氧液应根据样品的不同选择，所述氧液要保证将TOC全部氧化为CO₂，一般的可以选为10％～20％的过硫酸铵溶液。

所述酸液注射泵与氧液注射泵应能按照一定的流速向主流路中注射入酸液和氧液，且不会对主流路的流速和压力产生影响。优选的是：微量注射泵，泵工作压力应高于1500psi，最高精度小于0.1％，无脉冲式输送，从非常小到非常大的注射量均可精确分配，加酸加氧管道和样品管道采用注入阀连接。酸氧注射泵流速应保证酸氧溶液过量，可根据样品以及酸氧溶液的浓度选择，一般的可以选择为1.0～4.0μL/min。

所述末端注入阀、加酸注入阀、加氧注入阀、缓冲溶液注入阀、显色剂注入阀都是满足能稳定的将一种液体缓慢，稳定的加入到另一种液体中混合，而且不会产生倒吸。优选的是：带截止板和缓冲垫的注入阀，截止板防止液体回流倒吸，缓存垫有助于将液体稳定缓慢注入到另一种液体中。

所述酸氧反应螺旋管设置在UV消解器和加氧注入阀之间，以保证IC充分酸化为CO₂，优选的是：采用不锈钢PEEK管螺旋而成。一方面成本降低；另一方面不锈钢PEEK管能有效的防止药剂腐蚀以及保证分离出来的待测组分不会在其中再次混合。

所述缓冲溶液试剂瓶用于装缓冲溶液，所述缓冲溶液采用氯化铵缓冲溶液，通过85.0g氯化铵和1.0g二水合乙二胺四乙酸二钠溶于800mL水中，定容到1000mL混匀即可。溶液的pH值优选为8.5。

所述显色剂制备如下，采用100mL磷酸溶于600mL水中，然后加入40g磺胺和1g的盐酸萘乙二胺，用水稀释到1000mL混匀即可，所述磷酸选用分析纯。

所述镉柱的目的是将氧化后的硝酸盐氮还原为亚硝酸盐氮，镉柱的还原效率应该高于98％，镉柱装填要方便，且不易损坏。

所述缓冲溶液反应螺旋管以及显色剂反应螺旋管优选的是：采用不锈钢PEEK管螺旋而成。一方面成本降低；另一方面不锈钢PEEK管能有效的防止药剂腐蚀以及保证分离出来的待测组分不会在其中再次混合。

所述缓冲溶液的量要根据实际水样来确定。所述显色剂注射泵的流速要保证加入的显色剂过量，一般的可以选择为1.0～4.0μL/min。

所述UV消解器包括透明石英反应螺旋管，UV灯以及加热丝。透明石英反应螺旋管提供足够反应的空间，在UV灯照射以及加热条件下，氧化剂产生的氧化活性物质过硫酸根自由基会将待测组分充分氧化。作为优选，UV灯波长为190nm，加热温度设置为(95±2℃)。

所述UV检测器满足在线检测吸光度的变化，配备有流通样品池，并将结果储存以及输出到计算机进行进一步分析。作为优选的是，所述UV检测器带PEEK管接头，能在线检测，利用软件自动绘制色谱图的紫外检测仪。

所述仪器内部样品管路材料为了避免样品腐蚀，优选的是不锈钢PEEK管。主流路的流速为流动相输液泵泵流速，可选择为0.4～1.0mL/min。压力液相色谱柱之前为1.8±0.2MPa，液相色谱柱之后通过减压阀压力为1bar，流态为自由流动。

本发明能检测待测水样在不同分子量分布区间内的组分的DON浓度。具体的检测原理是：

将样品经过尺寸排阻色谱柱，出水中样品组分按照选择色谱柱分离的范围内的分子量大小排布，然后检测不同分子量分布区间内的DON浓度。此发明利用经过尺寸排阻色谱分离的水样中的不同分子量组分按照分子量大小依次流出，根据相关膜滤实验研究，原水中绝大多数DON的分子量大于500g/mol，且分子量尺寸在原水中平均分布于三个孔径范围内(<1000Da，1000-10000Da，>10000Da)，其中95％以上的DON分子量都在100Da(相当于分子量100g/mol)以上。而无机氮中分子量最大的为硝酸根，仅有62g/mol。据此，根据对大量含氮标准样品进行反复实验，得到在某个确定的停留时间内，流出色谱柱的是DON，配合本发明对DON的检测，这样就方便快捷高效准确的确定了待测水样中的DON浓度。也就是说，本发明可以快速、准确检测待测水样在不同分子量分布区间内的组分的DON浓度，分析时间大大缩短，检测效率和准确度大大提高。

透明石英反应螺旋管提供反应空间，组分在其中充分混合螺旋前进，在UV灯的照射以及加热条件下，之前加入到其中的氧化剂会产生大量的氧化活性物质，快速氧化DON为硝酸盐氮(反应1)。

氧化后的混合液中加入缓冲溶液，利用镉柱还原装置，将硝酸盐氮还原为亚硝酸盐氮，然后加入显色剂，利用酸性介质下，亚硝酸盐氮与磺胺进行重氮化反应，然后与盐酸萘乙二胺偶联生成紫红色物质：

最后进入UV检测器中，利用亚硝酸盐氮在540nm紫外光下产生吸收，且吸收量符合比尔定律，通过光电感应器获得信号之后经过处理得到亚硝酸盐氮的量，根据一定的换算关系，进而进一步表征出DON浓度。

与现有的有机氮检测仪器不同的是，本发明利用水质分析常见的尺寸排阻色谱柱的分离即可以实现对DON浓度的快速、准确检测，弥补了目前对于DON浓度检测方法及仪器的不足。

与现有技术相比，本发明的技术特点以及优势如下：

1、针对性强。本发明仪器开创性的将污染水体样品通过色谱柱分离之后，检测不同分子量分布区间内的污染物组分的DON浓度，水质数据更加具有针对性，对以后的含氮消毒副产物的研究具有重要支撑意义。

2、准确性高。本发明仪器开创性的提出使用尺寸排阻色谱分离法测DON浓度的方法，此方法相较于传统的差值法，准确性大大提高。

3、简便性。本发明仪器开创性的提出使用尺寸排阻色谱分离法测DON浓度的方法，相较于国内外常见的渗析膜，离子交换柱，预浓缩以及催化还原法，操作简便，自动进行，大大提高了水质检测的效率。

附图说明

图1为实施例1中检测溶解性有机氮的仪器结构示意图；

图2为UV消解器结构示意图。

图中标号：1-流动相试剂瓶；2-流动相输液泵；3-末端注入阀；4-采样泵；5-样品瓶；6-色谱柱；7-色谱柱柱温箱；8-减压阀；9-加酸注入阀；10-酸液注射泵；11-酸液瓶；12-加氧注入阀；13-氧液注射泵；14-氧液瓶；15-酸氧反应螺旋管；16-UV消解器；17-缓冲溶液注射泵；18-缓冲溶液试剂瓶；19-缓冲溶液注入阀；20-缓冲溶液反应螺旋管；21-镉柱；22-显色剂注入阀；23-显色剂注射泵；24-显色剂试剂瓶；25-显色剂反应螺旋管；26-UV检测器；27-废液桶；28-计算机；29-加热丝；30-透明石英螺旋管；31-UV灯。

具体实施方式

参考图1，一种检测溶解性有机氮的仪器，包括通过管路顺序连接的末端注入阀3、色谱柱6、减压阀8、加酸注入阀9、加氧注入阀12、酸氧反应螺旋管15、UV消解器16、缓冲溶液注入阀19、缓冲溶液反应螺旋管20、镉柱21、显色剂注入阀22、显色剂反应螺旋管25、UV检测器26，所述末端注入阀3用于接收流动相与样品，所述UV检测器26与用于数据处理的计算机28连接。

其中，所述末端注入阀3与采样泵4及样品瓶5连接，所述末端注入阀3还与流动相输液泵2及流动相试剂瓶1连接；所述加酸注入阀9与酸液注射泵10及酸液瓶11连接；所述加氧注入阀12与氧液注射泵13及氧液瓶14连接；所述缓冲溶液注入阀19与缓冲溶液注射泵17及缓冲溶液试剂瓶18连接；所述显色剂注入阀22与显色剂注射泵23及显色剂试剂瓶24连接。所述色谱柱6位于色谱柱柱温箱7内。所述UV检测器26与废液桶27连接。

参考图2，所述UV消解器16包括加热丝29、透明石英螺旋管30及UV灯31，所述透明石英螺旋管30通过管路连接在酸氧反应螺旋管15与缓冲溶液注入阀19之间，所述UV灯31位于透明石英螺旋管30的上方，所述加热丝29位于透明石英螺旋管30的下方。

发明的技术路线如下：

本发明的技术路线如图1所示：首先，样品瓶5中的样品经过采样泵4的传输，到达管路中，并且由末端注入阀3注入到流动相管路中。流动相试剂瓶1中的流动相在流动相输液泵2的作用下，传输到主流路中，到达末端注入阀3后和样品混合。流动相携带着样品经过色谱柱柱温箱7中的色谱柱6分离。经过色谱柱6分离后，待测样品按照其组分分子量大小依次流出，并经过减压阀8，压力降低为一个大气压，流态为自由出流。随后待测组分在主流路中到达加酸注入阀9和加氧注入阀12，与经过酸液注射泵10和氧液注射泵13传输的酸液、氧液混合，进一步到达酸氧反应螺旋管15中。流动相，待测组分，酸液和氧液在酸氧反应螺旋15中充分混合反应，进一步到UV消解器16，UV消解器16的结构如图2所示：其中，待测组分，流动相，氧液以及酸液在UV灯31的照射和电热丝29加热条件下，在透明石英反应螺旋管30中将DON氧化为硝酸根离子。随后待测组分到达缓冲溶液注入阀19，此时和缓冲溶液注射泵17输送的缓冲溶液混合，到达缓冲溶液反应螺旋管20进一步混合之后进入镉柱21中，将氧化产生的硝酸盐氮还原为亚硝酸盐氮，之后在显色剂注入阀22处和显色剂注射泵23输送的显色剂混合，并在显色剂反应螺旋管25中进一步反应，产生紫红色物质，然后进入UV检测器26中，检测出亚硝酸盐氮的量并通过一定的换算关系得到DON浓度。出口废水汇合后收集入废液桶27中。UV检测器的数据由数据线传送至计算机28，进行进一步的储存和处理。

下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。

实施例

准备工作：

仪器开机，打开计算机28。将流动相进行20min的超声脱气处理，以消除流动相中的气泡，以免干扰检测结果。将样品过0.45μm膜，以去除颗粒杂质，以免造成仪器堵塞。设置好色谱柱柱温箱的温度。UV消解器16中，UV灯波长设置为190nm，加热温度设置为95℃。打开UV检测器26，检测波长设置为540nm。清空废液桶27。

操作步骤：

等准备工作结束后，打开流动相输液泵2，设置好流速以及压力。等计算机28基线稳定后(一般1～2h)，设置好采样泵的采样体积，酸氧注射泵、缓冲溶液注射泵、显色剂注射泵流速后打开采样泵4、酸液注射泵10、氧液注射泵13，缓冲溶液注射泵17、显色剂注射泵23。将样品经过末端注入阀3注射入流动相中，将酸液和氧液注射到流动相中，之后等待数据结果。

本实施例主要色谱条件区间如下：

采用牛血清蛋白作为DON浓度检测样品，

结果如下：DON浓度的检测：当UV检测器的检测光程为10mm时，本发明提供的方法对于DON浓度测定范围为0.12mg/L～10mg/L。

上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种检测溶解性有机氮的仪器，其特征在于，包括通过管路顺序连接的末端注入阀（3）、色谱柱（6）、减压阀（8）、加酸注入阀（9）、加氧注入阀（12）、酸氧反应螺旋管（15）、UV消解器（16）、缓冲溶液注入阀（19）、缓冲溶液反应螺旋管（20）、镉柱（21）、显色剂注入阀（22）、显色剂反应螺旋管（25）、UV检测器（26），所述末端注入阀（3）用于接收流动相与样品，所述UV检测器（26）与用于数据处理的计算机（28）连接，所述色谱柱（6）采用液相尺寸排阻色谱柱。

2.根据权利要求1所述的一种检测溶解性有机氮的仪器，其特征在于，所述末端注入阀（3）与采样泵（4）及样品瓶（5）连接，所述末端注入阀（3）还与流动相输液泵（2）及流动相试剂瓶（1）连接；

所述加酸注入阀（9）与酸液注射泵（10）及酸液瓶（11）连接；

所述加氧注入阀（12）与氧液注射泵（13）及氧液瓶（14）连接；

所述缓冲溶液注入阀（19）与缓冲溶液注射泵（17）及缓冲溶液试剂瓶（18）连接；

所述显色剂注入阀（22）与显色剂注射泵（23）及显色剂试剂瓶（24）连接。

3.根据权利要求1所述的一种检测溶解性有机氮的仪器，其特征在于，所述UV消解器（16）包括加热丝（29）、透明石英螺旋管（30）及UV灯（31），所述透明石英螺旋管（30）通过管路连接在酸氧反应螺旋管（15）与缓冲溶液注入阀（19）之间，所述UV灯（31）位于透明石英螺旋管（30）的上方，所述加热丝（29）位于透明石英螺旋管（30）的下方。

4.根据权利要求1所述的一种检测溶解性有机氮的仪器，其特征在于，所述色谱柱（6）位于色谱柱柱温箱（7）内。

5.根据权利要求1所述的一种检测溶解性有机氮的仪器，其特征在于，所述UV检测器（26）与废液桶（27）连接。

6.采用权利要求1所述仪器检测溶解性有机氮的方法，其特征在于，包括以下步骤：

样品采集到管路中，与流动相混合，然后经过色谱柱分离，样品中的组分按照分子量的不同依次流出，然后经过减压阀减压，分离出的样品不同分子量组分经过管路依次经过加酸注入阀和加氧注入阀，向加酸注入阀注入酸液，向加氧注入阀注入氧液，然后待测组分、流动相、酸液和氧液在酸氧反应螺旋管中充分反应；接着混合完全的待测组分经过管路进一步到达UV消解器中，会将DON氧化为硝酸盐氮，此后通过缓冲溶液注入阀加入缓冲溶液，然后经过镉柱还原，将硝酸盐氮还原为亚硝酸盐氮，然后通过显色剂注入阀加入显色剂，然后在显色剂反应螺旋管内进行混合反应，最后进入UV检测器中，在540nm处检测亚硝酸盐氮的量，并通过换算关系表征DON浓度。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述流动相选择为磷酸盐缓冲溶液，离子强度为0.1 ~ 0.4M，pH为6.8 ± 0.2，所述流动相输液泵泵流速选择为0.4 ~ 1.0 mL/min，所述流动相输液泵压力选择为1.8 ± 0.2 MPa，所述色谱柱维持温度为30 ~ 60 ℃，压力在色谱柱之前为1.8 ± 0.2 MPa，色谱柱之后通过减压阀压力为1 bar，流态为自由流动，所述UV消解器中，UV灯波长为190 nm，加热温度设置为95 ±2 ℃。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，采样泵选用微量注射泵，泵工作压力高于1500 psi，最高精度小于0.1%，采样体积在50 ~ 500 uL，所述酸液注射泵与氧液注射泵选择微量注射泵，泵工作压力高于1500 psi，最高精度小于 0.1%，无脉冲式输送，所述酸液注射泵与氧液注射泵流速选择为1.0 ~ 4.0 μL/min，所述显色剂注射泵的流速选择为1.0 ~4.0 μL/min。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述末端注入阀、加酸注入阀、加氧注入阀、缓冲溶液注入阀、显色剂注入阀都是满足：能稳定的将一种液体缓慢，稳定的加入到另一种液体中混合，而且不会产生倒吸。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述酸氧反应螺旋管、缓冲溶液反应螺旋管、显色剂反应螺旋管均采用不锈钢PEEK管螺旋而成，仪器内部样品管路选用不锈钢PEEK管。