CN108697749A - 用于预防和治疗植物或指甲感染的草药组合物和方法 - Google Patents

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Abstract

本申请公开了一种药物和/或植物检疫组合物，其包含白屈菜根(Chelidonium majus)的水提取物和可接受的药物或植物检疫赋形剂，用于预防或治疗植物感染和/或预防或治疗指甲感染。所述组合物可进一步包含美国香柏(Thuja occidentalis)叶的水提取物，以及约1至5％的至少一种天然酚类化合物。所述组合物在植物感染(霉菌、叶枯病真菌等)的治疗，植物的膨肿治疗，以及马铃薯(白粉病或普通赤霉病、丝核菌病等)的治疗中特别有效；其也可以提高作物产量：且不使用化学杀菌剂。所述组合物还可以快速治疗指甲的真菌感染。

Description

用于预防和治疗植物或指甲感染的草药组合物和方法
相关申请的交叉引用
本专利申请要求2016年2月8日向U.S.P.T.O.提交的题为“用于治疗指甲真菌或细菌感染的组合物和方法”的共同转让的美国专利申请号62/292,608，2016年2月10日向U.S.P.T.O.提交的题为“用于预防和治疗植物感染的草本植物检疫组合物和方法”的美国专利号62/293,479，以及2016年2月10日向美国专利局提交的题为“用于治疗指甲和皮肤感染的草药组合物”的美国专利号为62/293,519的优先权，其内容通过引用并入本文。
技术领域
本发明主要涉及用于预防和/或治疗植物感染或指甲感染的植物检疫和/或药物组合物和方法。特别地，所述植物检疫和/或药物组合物是草药组合物。
发明背景
植物感染治疗:
植物角质层由三种不同的物质(即蜡质、角质和果胶)组成，它们通常作为阻止许多化合物进入植物组织的屏障。某些化学佐剂(例如渗透增强组分)可以直接改性叶蜡质并增加叶表面的膜张力，以增强表皮渗透性。佐剂在植物上的叶面喷施与有效的杀真菌活性有关。
含水型杀虫剂的历史很短。20世纪70年代克服了杀虫剂的水溶解性，现在水被用作载体。而以前的杀虫剂配方并没有配制成使用水作为载体。许多昆虫、真菌和植物的蜡质表面使得大多数水基喷雾溶液难以渗透其目标。为了克服这种障碍，开发了佐剂。佐剂是添加到喷雾罐中以增强杀虫剂活性的成分，例如表面活性剂、展着剂、黏附剂、作物油、消泡材料、缓冲剂和相容剂。
表面活性剂是促进和加强液体的乳化、分散、铺展、润湿或其他表面改性性质的佐剂。已经认识到，没有佐剂的情况下，功效降低30-50％。
存在几种类型的配方以试图将活性剂递送穿过角质层：
微乳液杀虫剂是一种减少有机溶剂使用并提高杀虫剂液滴的润湿性、分散性和渗透能力的配方。微乳液定义为由适当比例的油相、水相、表面活性剂以及助表面活性剂组成的胶体分散体。
纳米乳剂也用于递送化学物质穿过角质层。该方法的功效基于纳米乳液液滴的小尺寸、乳液的大表面积、整个系统的低表面张力以及液滴的低界面张力。
表面活性剂是降低水的外表面层内的表面张力的佐剂。有四种不同类型的表面活性剂，但通常只有阴离子和非离子表面活性剂用于杀虫剂配方中。阴离子表面活性剂带负电，并增强发泡和其他扩散性能，而非离子表面活性剂在溶液中没有电荷并被用于破坏水表面张力。阳离子表面活性剂带正电荷，因为它们会破坏膜离子平衡并对植物造成伤害，因此不被使用。两性表面活性剂，取决于溶液的pH，将在水中形成正电荷或负电荷。这些都很少被使用。
渗透剂溶解或渗透叶片上的蜡质层，并允许其他化学物质与植物细胞或昆虫表皮组织连接，并进入表皮细胞之间的空间，有时称为“细胞自由空间”。渗透剂可含有石油副产品、作物油、复合醇和其他烃基材料。
增稠剂可用于减少喷雾的流动。它们可以由聚丙烯酰胺、聚乙烯聚合物、多糖(长链糖)或植物油组成。这些产品不仅有助于挥发性杀虫剂变得更不易挥发，还会使载体溶液变得更粘稠、更重。
乳化剂通过涂覆微小颗粒或液体分子组并防止它们与其他类似分子凝结而起作用。乳化剂允许油和水溶液混合。这些产品通常由制造商添加并通常与石油基杀虫剂混合，以帮助它们更容易与水混合。
展着剂和黏附剂。展着剂是允许杀虫剂表面张力以这样一种方式降低的化合物，从而使其易于在表面上扩散成非常薄的薄膜。与表面活性剂一样，展着剂和黏附剂可显著提高杀虫剂的效率。它们可以由脂肪酸、乳胶、脂肪醇、作物油如棉籽或无机油组成。黏附剂非常像增稠剂或油，因为其引起杀虫剂溶液粘附在叶片表面，以抵抗雨水、蒸发和径流。
油。有两种类型的油：来自大豆和其他作物的作物油，以及来自炼油厂的无机油。一些被用作窒息物，其覆盖昆虫并切断其空气供应。其他用作渗透剂以破坏几丁质层(例如鳞片)并导致昆虫死亡。还有一些像表面活性剂一样使用，在叶片上形成薄膜，破坏角质层，并使杀虫剂进入其目标。一些油与表面活性剂混合，以利用两种佐剂的性质。
烷基多葡糖苷是具有类似表面活性剂特性的改性糖分子，并可用作展着剂/黏附剂。
有机硅酸盐表面活性剂非常擅长提高杀虫剂的“耐遇水冲刷能力”。
它们还可以降低表面张力，并允许从微量营养素到杀菌剂的所有物质进入叶片气孔。
需要一种用于治疗植物感染的新的植物检疫组合物，其允许在植物中更好地渗透以治疗感染，同时最小化或避免使用可能对环境有害的化学杀虫剂。
指甲感染:
常用的方法是设计将渗透甲板以将抗真菌剂或抗细菌剂递送至感染部位的配方。常规治疗被施用至患者6至12个月，但由于真菌或其孢子仍然“隐藏”在包括指甲根在内的指甲组织内而疗效欠佳。
其他医学从业者可以使用溶解在酒精中的百里酚来治疗指甲的真菌或细菌感染。该配方每天一次或两次被施用于被感染的区域。其他基于植物的配方包括使用含有茶树油和/或百里酚的乳膏或软膏或酊剂(酒精)。
对于甲真菌病的治疗，过去的和现有的医学治疗是以局部抗真菌剂从指甲表面到甲板的渗透以及抗真菌药物通过甲床的扩散为基础。由于抗真菌药物的全身毒性和在感染部位达到有效剂量所需的剂量水平，很少使用口服抗真菌剂。医疗实践可包括抗真菌剂与局部尿素的组合；其中，尿素用于降解蛋白质(角蛋白是指甲的组成/结构的一部分)并增强抗真菌剂的渗透。
医学文献将甲真菌病定义为指甲的进行性真菌感染，如果不及时治疗可能导致指甲的破坏和变形。它主要由皮肤真菌引起，特别是红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)和须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes)(Ghannoum M.A.et al,J Am Acad Dermatol2000；Vol.43,Number 3:641-648)。当前，口服药物(例如特比萘芬和伊曲康唑)和局部药物(例如环吡酮、阿莫罗芬、艾菲康唑和tavaborole)均可用于治疗真菌类指甲感染。遗憾的是，这些药剂可引起全身毒性，例如肝毒性，以及引起药物-药物相互作用。在临床试验中已经证明局部配方的功效相对较低，并且这种较低的功效与较差的指甲渗透/渗透性以及与角蛋白的高结合有关。此外，最近批准的局部药物艾菲康唑和tavaborole具有低效和局部副作用的问题。根据目前的本领域的科学现状(参见Tabata Y.et al.,Antimicrob AgentsChemother.2015Dec 7；60(2):1035-9)，为了有效对抗甲真菌病，局部抗真菌剂应具有低分子量和对角蛋白的低亲和力。低分子量被认为是指甲渗透的重要因素。
尽管使用相对较小的分子以试图渗透甲板，但传统的以及现代的科学技术对临床上定义为轻度至中度甲真菌病的效果非常低。科学家们已经采用了一些方法，例如应用尿素(作为配方的一部分)来限制与指甲中角蛋白的结合，从而增加渗透。其他配方，如PenlacTM，使用漆配方来帮助增加渗透。其他方法包括研磨指甲表面以增加渗透。遗憾的是，传统的和现代的药物和天然药剂(如百里酚和茶树油)都未能显著治疗轻度至中度的指甲感染，并且完全不能治疗严重的指甲感染。例如，最近批准的药物JubliaTM在轻度至中度甲真菌病中具有17％的疗效(相对于安慰剂为3％)，并且没有用于治疗严重感染的批准药物或天然药物。
需要一种用于治疗指甲或皮肤感染的新药物组合物，其允许更好的指甲或皮肤渗透，同时最小化或避免副作用。
已经发现，相同的草药组合物可用于治疗植物感染或治疗指甲感染。
发明内容
通常通过用于预防或治疗叶片或根部真菌和细菌感染或用于治疗本申请公开的指甲感染的高效组合物来克服现有技术的缺点。
本发明首先涉及药物和/或植物检疫组合物，其包含白屈菜(Chelidoniummajus)的根的水提取物以及可接受的药物或植物检疫赋形剂，用于预防或治疗植物感染和/或预防或治疗指甲感染。
根据优选的实施方案，所述组合物可进一步包含约1至5％的至少一种天然酚类化合物。优选地，所述至少一种天然酚类化合物可包括酚酸、百里酚、香芹酚、丁香油酚、crassinervic酸、aduncumene、hostmaniane、gaudichaudanic酸、黄酮类化合物、单宁、二苯乙烯类化合物、姜黄素类化合物、香豆素、木脂素、奎宁或其混合物。
根据优选的实施方案，所述组合物可进一步包含美国香柏(Thuja occidentalis)的叶的水提取物。
根据优选的实施方案，所述组合物可进一步包含成膜表面活性剂，例如但不限于包含聚山梨醇酯型非离子表面活性剂的成膜表面活性剂。
根据一个优选的实施方案，所述组合物还可包含选自渗透剂、增稠剂、乳化剂、展着剂、黏附剂、作物油、无机油、烷基多葡糖苷和有机硅酸盐表面活性剂的添加剂。
根据优选的实施方案，所述组合物可进一步包含抗真菌化合物。优选地，抗真菌化合物选自两性霉素B、特比萘芬、tavaborole、环吡酮、灰黄霉素、唑类抗真菌剂、棘白菌素和氟胞嘧啶。更优选地，所述唑类抗真菌剂是酮康唑、氟康唑、伊曲康唑、泊沙康唑、伏立康唑或艾菲康唑；并且所述棘白菌素是阿尼芬净(anidulafungin)、卡泊芬净(caspofungin)或米卡芬净(micafungin)。
根据优选的实施方案，所述组合物可进一步包含抗菌化合物。优选地，所述抗菌化合物包括β-内酰胺抗生素、大环内酯类抗生素、林可酰胺、链阳性菌素、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类、四环素类、氯霉素、甲硝唑、替硝唑、呋喃妥因、糖肽类、脂糖肽类、恶唑烷酮、利福霉素、多肽和结核放线菌素或其混合物。
根据一个优选的实施方案，白屈菜的根的水提取物是白屈菜根的10：1的乙醇-水提取物，其中10是白屈菜根的量，1是乙醇-水的量。
本发明还涉及用于治疗植物感染的植物检疫组合物，其包含：
0.2至1wt.％的白屈菜的根提取物；
0至1wt.％的美国香柏的叶提取物；
0至0.5wt.％的百里酚；
0至0.5wt.％的香芹酚；以及
0至0.25wt.％的成膜表面活性剂。
本发明还涉及用于治疗指甲感染的药物组合物，其包含：
40至50wt.％的白屈菜的根提取物；
40至50wt.％的美国香柏的叶提取物；
0至5wt.％的柠檬桉(Eucalyptus citriodora)精油；
0至4wt.％的茶树油；
0至1wt.％的百里香(Thymus vulgaris)的花-叶；以及
0至10wt.％的成膜表面活性剂。
根据优选的实施方案，所述药物组合物可包含：
约44.6wt.％的白屈菜的根提取物；
约44.6wt.％的美国香柏的叶提取物；
约1.8wt.％的柠檬桉精油；
约2.7wt.％的茶树油；
约0.9wt.％的百里香花叶；以及
约5.36wt.％的聚山梨酸酯20。
本发明还涉及如本申请所定义的药物或植物检疫组合物用于预防或治疗植物感染或预防或治疗指甲感染的用途。
本发明还涉及一种预防和治疗植物细菌和真菌感染的方法，包括在植物上施用至少一次如本申请所定义的组合物的步骤。
本发明还涉及一种预防和治疗指甲感染的方法，包括以下步骤：
在待治疗的指甲上施用至少一次如本申请所定义的组合物；然后让所述组合物干燥，以便在指甲上形成薄膜。
本发明是一种高效的植物检疫或药物组合物，用于预防或治疗植物或指甲上的真菌和细菌感染。
优选地，植物检疫组合物用于叶面施用，例如待治疗植物的叶、茎、分枝(branch)、细枝(twig)、芽和/或花。
根据优选的实施方案，所述组合物可包含白屈菜的根的水提取物。
根据一个优选的实施方案，所述组合物可包含白屈菜根与美国香柏叶的水提取物。
根据优选的实施方案，所述组合物可包含白屈菜的根的水提取物：
含有或不含有美国香柏叶；
含有或不含有约1％至5％的天然酚类化合物；
含有或不含有成膜表面活性剂；和/或
含有或不含有下列成分中的至少一种：渗透剂、增稠剂、乳化剂、展着剂、黏附剂、作物油、无机油、烷基多葡糖苷和/或有机硅酸盐表面活性剂。
还公开了一种植物的植物检疫治疗方法，所述方法至少包括在植物上施用一次或数次本申请所定义的所述组合物的步骤。优选地，将所述组合物施用于待治疗植物的叶、茎、分枝、细枝、芽和/或花。
还公开了如本申请所定义的所述组合物用于植物的植物检疫治疗的用途。例如，所述组合物特别适用于治疗霉菌。其他感染也可以治疗。
精油中所发现的天然酚类化合物可用于避免油基损害植物。
天然酚类化合物被定义为含有一个或多个酚基的低分子量天然存在的有机化合物。它们由植物天然产生。这些包括：酚酸、百里酚、香芹酚、丁香油酚、crassinervic酸、aduncumene、hostmaniane、gaudichaudanic酸、黄酮类化合物、单宁、二苯乙烯类化合物、姜黄素类化合物、香豆素、木脂素、奎宁等。
所述组合物在植物感染(霉菌、叶枯病真菌等)的治疗，植物的膨肿治疗，以及马铃薯(白粉病或普通赤霉病、丝核菌病等)的治疗中特别有效；其也可以提高作物产量：且不使用化学杀菌剂。
所述组合物在治疗指甲的真菌感染方面也特别有效。
在理解将被描述或将在所附权利要求中被指出的说明性实施例之后，本发明的其他方面和优点将是显而易见的，并且本领域技术人员在实践中使用本发明时将想到本文未提及的各种优点。
附图简要描述
从以下参考附图的描述中，本发明的上述和其他方面、特征和优点将变得更加显而易见，其中：
图1A、1B和1C是被叶枯病真菌感染的番茄植株在使用根据优选实施方案的组合物进行治疗之前的照片(图1A和1B)以及治疗数周之后的照片(图1C)；
图2A和2B是被白粉病感染的番茄植株在使用根据优选实施方案的组合物进行治疗之前(图2A)的照片以及治疗数周之后的照片(图2B)；
图3A和3B是葫芦科植物在使用根据另一个优选实施方案的组合物进行治疗之前(图3A)以及治疗之后(图3B)的照片；
图4A、4B和4C是葫芦科植物在使用根据另一个优选实施方案的组合物进行治疗之前(图4A)，治疗一天后的照片(图4B)以及治疗两天后的照片(图4C)；
图5包括多张葫芦科植物在使用根据另一个优选实施方案的组合物进行治疗之前的照片以及治疗之后的照片；
图6是有关对英国黄瓜(English Cucumber)进行治疗的图表和照片；
图7是显示酸浆(Ground Cherry)作物产量增加的图表；
图8是显示药蜀葵根(Marshmallow(Althea))作物产量增加的图表；以及
图9是显示马铃薯感染的不同阶段的照片。
优选实施方案的详细描述
下文将描述新的药物和/或植物检疫组合物。尽管根据具体的说明性实施例对本发明进行了描述，但是应该理解，这里描述的实施例仅是示例性的，并且本发明的范围并不旨在被此限制。
除非另有说明，否则本文所用的％或wt.％表示重量％。当在本文中使用时，％是指与正在讨论的相或组合物的总重量百分比相比的wt.％。
“约”是指wt.％、时间或温度的值可在一定范围内变化，这取决于用于评估此类wt.％、时间或温度的方法或装置的误差范围。通常接受10％的误差范围。
本申请公开的药物和/或植物检疫组合物(下文称为“组合物”)包含白屈菜的根的水提取物和可接受的药物和/或植物检疫赋形剂或碱。根据一个优选的实施方案，白屈菜的根的水提取物是白屈菜根的10：1的乙醇-水提取物，其中10是白屈菜根的量，1是乙醇-水的量。
如本申请所公开的组合物可进一步包含白屈菜叶。
如本申请所公开的组合物可进一步包含约1至5％的天然酚类化合物。在精油中发现的天然酚类化合物可用于获得协同响应，同时避免会损害植物的油基。天然酚类化合物被定义为含有一个或多个酚基的低分子量、天然存在的有机化合物。它们由植物天然产生。这些有机化合物包括但不限于：酚酸、百里酚、香芹酚、丁香油酚、crassinervic酸、aduncumene、hostmaniane、gaudichaudanic酸、黄酮类化合物、单宁、二苯乙烯类化合物、姜黄素类化合物、香豆素、木脂素、奎宁等。
如本申请所公开的组合物可进一步包含成膜表面活性剂。
本申请所公开的组合物可进一步包含几种添加剂，例如但不限于渗透剂、增稠剂、乳化剂、展着剂和黏附剂、作物油和无机油、烷基多葡糖苷和/或有机硅酸盐表面活性剂。
植物感染治疗
休眠芽叶面施用；
组合物或配方可含有精油而不是天然酚类化合物，这取决于农业/园艺使用。在这些情况下，标准化(标准化为天然酚类化合物)精油取代通常在油中被发现的天然酚类化合物；例如，百里香的花叶精油取代百里酚化合物。切换到标准化精油是为了提供更好的休眠芽的涂层(成膜)。标准化精油可含有等量的酚类化合物。
土壤(有或没有肥料)施用的配方；
本发明还公开了一种用于预防或治疗真菌和细菌感染的高效的根(土壤施用)组合物，其包含白屈菜的根的水提取物，含有或不含有美国香柏叶，含有或不含有约1％至5％的天然酚类化合物，含有或不含有肥料成分，含有或不含有成膜表面活性剂、渗透剂、增稠剂、乳化剂、展着剂和黏附剂、作物油和无机油、烷基多葡糖苷和/或有机硅酸盐表面活性剂。
本发明基于水性草药提取物与从植物中获得的天然酚类化合物之间的协同活性。在精油中发现的天然酚类化合物用于获得协同响应，同时避免会损害植物的油基。
天然酚类化合物被定义为含有一个或多个酚基的低分子量、天然存在的有机化合物。这类化合物由植物天然产生。这类化合物包括：酚酸、百里酚、香芹酚、丁香油酚、crassinervic酸、aduncumene、hostmaniane、gaudichaudanic酸、黄酮类化合物、单宁、二苯乙烯类化合物、姜黄素类化合物、香豆素、木脂素、奎宁等。
还公开了一种植物的植物检疫治疗方法，包括将如本申请所定义的植物检疫组合物施用于植物上，例如植物的根、叶、茎、分枝、细枝、芽和/或花，的步骤。
如通过以下实施例证明的，在施用配方一天后并且仅一次施用配方后就可以看到治疗的功效。
已经在植物上测试了根据本发明优选实施方案的以下组合物。
用于被感染植物的配方：
表1：用于治疗植物的组合物的一般组成
表2：用于治疗植物的特定组分
制备方法：1000mL农业配方的制剂
步骤1：
金钟柏(Thuya)提取物：260克叶片干燥之后，在3倍于其体积的水中浸泡72小时；过滤并保留溶液。
步骤2：
根据表xx将白屈菜提取物(CELEXT07)加入喷雾罐或喷灌容器内的900mL水中并混合以溶解提取物粉末。
步骤3：根据表XX将金钟柏(Thuya)提取物、百里酚、香芹酚和/或表面活性剂加入步骤2的容器中。定容至1000mL。
示例1：用叶枯病真菌感染的番茄植株的叶面喷施
黄褐钉孢Passalora fulva(黄枝孢霉(Cladosporium fulvum))引起番茄叶霉病。叶片通常是植物感染的唯一部分，导致受感染的叶片枯萎和死亡，间接影响产量。在严重的情况下，花朵和果实也可以直接被感染，降低产量。
在第1、3和5天，对被感染的番茄植株进行叶面喷施治疗，所述叶面喷施包含白屈菜根的1：10(1份根相比10份水)提取物和0.25％表面活性剂如聚山梨醇酯20。
如通过比较图1A和1B以及图1C中呈现的照片所示，对番茄植株的单叶面施用显示在几天和一次施用后从感染中有效恢复。实地研究表明，感染并没有扩散到邻近的未感染植物，并且被感染的植物的生长是其在治疗后的证据。
示例2：被白粉病感染的番茄植株的叶面喷施
白粉病是一种叶组织疾病(见图2A)。由于疾病迅速发展，产量和果实质量降低，并且严重影响的叶片被杀死。这导致较少的产果量。
已经在第1天和第3天用叶面喷施治疗受感染的番茄植株，所述叶面喷施包含1％的白屈菜根10：1(10份根至1份水-乙醇)提取物，1％百里酚和0.25％表面活性剂如聚山梨醇酯20。对严重感染了白粉病季节性水培番茄植株进行两次喷施之后，与未喷施治疗的植物相比产生了显著的改善(参见图2B)。所有叶片上的孢子负荷量明显减少，并从幼叶中清除。后者尤其重要，因为植物能够继续生长以支持晚季的果实负载量。
示例3：被霉菌真菌感染的葫芦科植物的治疗。
图3A和3B显示了在3天的叶面喷施治疗，每天施用两次的结果，所述叶面喷施包含不含有表面活性剂的白屈菜根的1：10(1份根比10份水)提取物。
通过这项试验，注意到植物的活力和健康得到了恢复；植物开花并再次生产作物。真菌首先变成褐色然后死亡。在最后一次治疗的14天之后，其中一片受感染的叶片仍然存在绿色区域。如果真菌感染残存下来，叶片就会死亡并完全变成褐色。
图4A至4C显示了在3天叶面喷施治疗，每天施用两次的结果，所述叶面喷施包含含有0.25％表面活性剂(聚山梨醇酯20)的白屈菜根的1：10(1份根比10份水)提取物。
通过这项测试，注意到植物的活力和健康得到了恢复；植物开花并再次生产作物，叶片呈现漂亮的绿色。真菌首先变成褐色然后死亡。
示例4：被霉菌真菌感染的葫芦科植物的治疗。
使用含有0.25％表面活性剂(聚山梨醇酯20)的白屈菜根的1：10(1份根比10份水)提取物的试验。在治疗葫芦科植物的霉菌感染中，每天喷施一次，共喷施3天。
图5的照片显示了治疗的功效。
示例5：英国黄瓜
CELEXT07是一种专有的植物提取物，可单独使用或与藻类肥料结合使用，有助于提高作物产量和刺激植物生长。
植物药剂也可用于帮助预防和治疗真菌感染。
田间研究表明，植物生长剂并不会对植物的生长、开花和果实生长过程中造成损害。
CELEXT07在室温下易溶于水，含量为0.2％、0.5％和1％，含有或者不含藻类肥料，每升6毫升。
CELEXT07增加了温室种植英国黄瓜植物的作物生长。
用含有或不含0.5％CELEXT07的StimulagroTM的溶液每14天对植株进行治疗。
结果显示在图6中，并且显示治疗时黄瓜重量增加30％，总产量增加108％。此外，黄瓜明显更大。
示例6：增加作物产量和刺激植物生长
在酸浆上每两周施用CELEXT07与藻类肥料组合。
如图7所示，与基础藻类肥料治疗相比，向基础治疗中添加CELEXT07导致作物产量显著增加。
对在用黑色塑料膜覆盖的土壤块地上生长的两年生药蜀葵植株，每两周用CELEXT07进行叶面喷施。
对照组由两年生植株组成：不以增强生长的方法进行控制；并且一个比较组在植物周围的土壤上使用黑色塑料膜。
如图8所示，CELEXT07治疗的药蜀葵植株在统计学上比未治疗的植物更大和更长；包括使用黑色塑料膜生长的那些。此外，产量增加了24％。
示例7：对所有作物、观赏植物和草药的耐受性
为评估根据本发明的组合物的安全性和耐受性，开展了若干项研究。
其中一项研究涉及每两周将CELEXT07与藻类肥料结合施用。该配方作为土壤浸渍剂施用并喷施到在充足的阳光下在温室环境中生长的各种作物的叶片、花和果实上。
该研究于5月24日开始，并且在7次施用后没有任何受伤迹象显示对植物生长产生了负面影响。
对在户外种植的作物、观赏植物和草本植物开展了第二项研究。每周用逐步增加剂量的CELEXT07喷洒植物，随后用CELEXT07与其它抗微生物草药剂组合喷雾。该研究也于5月24日开始，迄今为止没有任何损伤或毒性迹象。CELEXT07使用加压喷雾罐进行施用，并在0.5％、1％和2％CELEXT07下进行测试。对于每种浓度，每周施用CELEXT07连续3或5周。
组合研究仍在进行中，其他药物与1％CELEXT07一起进行测试。迄今为止，也没有毒性或伤害的迹象。
示例8：膨肿(温室疾病)的治疗
膨肿是一种影响温室植物生长的生理疾病。膨肿是在被感染的植物的叶片、叶柄和茎的表面上形成的小的凸起状凸起。预防膨肿对于具有美学价值的作物或观赏植物是重要的。美学价值的任何降低都会降低其销量，因为消费者可能对购买看起来患病或受伤的植物犹豫不决。
除影响美学价值之外，膨肿也可以极大地改变植物的生理过程。随着叶片表面形成膨肿，随着植物慢慢失去可用于光合作用的叶面积，光合活性可能降低。
此外，由于叶脉和茎上的膨肿形成，植物中的水和养分运输也可能受到影响。在严重膨肿生长的情况下，可发生叶组织的逐渐衰老。
0.5％CELEXT07的使用阻止了温室种植的酸浆植物中的膨肿的发展。用含有或不含0.5％CELEXT07的StimulagroTM的溶液每14天对植物进行治疗。
示例9：马铃薯和马铃薯植物的治疗
主要目标：本研究的主要目的是证明该产品的双月施用可预防真菌感染的发展。
次要目标：本研究的主要目的是证明产品的双月施用不会损害叶片或阻碍生长，并且双月施用也可提高作物产量。
研究设计描述：本研究是一项平行组设计，比较了各种含有藻类肥料以及CELEXT07、含有和不含多酚(百里酚和香芹酚)的抗真菌配方。通过每两个月对土壤施用产品以浸透根部。所有组中被治疗的植物每两个月拍摄一次照片。在生长季节结束时采集马铃薯的重量和长度以及在马铃薯上的其他微生物的痂样标记数和数量。
分组：
多酚混合物＝1g/L百里酚(0.1％)加1g/4L香芹酚(0.1％)
已经处理了超过2400个马铃薯。用于评分的方法在“Potato Field Guide,Insects,Diseases and Defects,Publication 823,Eugenia Banks,2004,Ministry ofAgriculture and Food,Queens Printer for Ontario,Toronto,Ontario”中给出，也可在线获得：http://www.inspection.gc.ca/plants/potatoes/guidance-documents/pi-009/eng/1383933490053/1383934020925？chap＝0#cl
在10升水(每升6毫升)中稀释60毫升藻类制剂。针对A组至G组测试的产品含有每升6mL的藻类肥料。H组是假对照，不接受任何抗真菌产品和藻类肥料。其他组包含如下表所述的成分。
分组：
研究过程-双月治疗
每14天，将溶液施用于每株植物周围的土壤。每天检查所有组中的植物的受伤迹象，并且每两个月拍摄一次照片。在生长季节结束时采集了马铃薯的重量和长度。
记录出现以下每个观察结果的马铃薯的数量：
晚疫病的迹象；
赤霉病的迹象；
黑色皮屑的迹象；
没有异常迹象。
化合物：
CELEXT07是白屈菜根的10：1的乙醇-水提取物。10＝根数量；1＝乙醇-水的量。
结果：
白粉病或普通赤霉病
T＝痕量；0-1％的覆盖率
L＝轻微；1-5％的覆盖率
TL＝顶级轻微；1-5％的覆盖率(侧重于一侧)
M＝中等；5-10％
S＝重度；超过10％。
1.A组和H组：用藻类肥料进行治疗的效果与假处理组(sham)相当。
大约65％的马铃薯没有赤霉病。
2.E组是含藻类肥料的0.2％CELEXT07。添加0.2％CELEXT07导致多15％的没有赤霉病的马铃薯。添加0.5％CELEXT07导致90％的无赤霉病的马铃薯，即，产生多25％的无赤霉病马铃薯。从0.5％到1％(F组和G组)，没有额外的效果。
3.B组至D组是CELEXT07和两种多酚的添加物。所有3组中多酚均为固定剂量；只有CELEXT07的百分量的变化。我们观察到与#2相同的结果：0.5％和1％组之间没有差异，约90％没有赤霉病；即，效益提高25％。在0.2％时，发现有20％的效益。在较高的赤霉病症(M和S)情况下中，与多酚的组合似乎更有效果。
丝核菌病
T＝痕量；0-1％的覆盖率
L＝轻微；1-5％的覆盖率
TL＝顶级轻微；1-5％的覆盖率(侧重于一侧)
M＝中等；5-10％
S＝重度；超过10％。
4.用藻类肥料治疗使被感染的马铃薯的数量增加了20％。
5.在E、F和G组中用CELEXT07治疗具有显著益处。在这种情况下，观察到1％的提取物比0.2％的效果更高。与假处理组(sham)相比，我们观察到15、17和23％的效益。与藻类废料组相比，其效益更大。
6.对于含有多酚的CELEXT07，我们观察到类似的效益。
我们看到该配方具有明显的抗真菌预防和治疗效果。治疗表明它可以像手指或脚趾甲一样渗透蜡角质层。
对于番茄、葫芦和马铃薯的这些治疗实例，已经证明了根据本发明的组合物的抗真菌性质。
指甲感染
根据优选的实施方案，本申请公开的药物组合物包含在乙醇-水流体提取物中的植物精油的悬浮液，作为指甲的真菌和细菌感染的治疗。所述药物组合物优选是局部配方。
用于治疗指甲或皮肤真菌和细菌感染的所述药物组合物可包含白屈菜根的醇提取物(30-70％H2O：乙醇或甲醇)。优选与美国香柏叶的醇提取物(30-70％H2O：乙醇或甲醇)组合，更优选与约1％至5％的下列精油：柠檬桉、茶树油和百里香的花-叶的每一个组合，可选地，与成膜表面活性剂组合。
所述药物组合物包含草药天然酚类化合物，例如但不限于，天然酚类化合物是百里酚、香芹酚、丁香油酚、crassinervic酸、aduncumene、hostmaniane、gaudichaudanic酸等。
已经在植物或患有指甲感染的患者上测试了根据本发明优选实施方案的以下组合物：
制备方法：500mL人体指甲配方的制剂
步骤1：
金钟柏(Thuya)提取物：260克叶片干燥之后，在3倍于其体积的50％乙醇-水中浸渍72小时；过滤并保留溶液。
第2步：
白屈菜提取物(CELEXT07)：将50克10：1的提取物溶解在500毫升中
第3步：混合
223mL金钟柏(Thuya)提取物
223mL步骤2中的CELEXT07
柠檬桉精油：9毫升
茶树精油：13.5毫升
百里香的花/叶精油：5毫升
26.5克表面活性剂(聚山梨醇酯20)
还公开了制备如本申请所定义的配方的方法。该方法包括将植物在溶剂中浸渍24至72小时的步骤。
本发明可用作局部溶液或喷雾剂，用于施用至指甲或皮肤：刷子、计量剂量装置、贴片、绷带或喷雾剂，从而在治疗过的表面上形成薄膜。油膜涂层的亲脂性质保留在指甲或皮肤表面上，使活性分子能够渗透指甲或皮肤，用于治疗真菌指甲、粘膜和皮肤感染的局部治疗用途。
还公开了一种治疗指甲和/或皮肤感染的方法，包括每天至少一次将如本申请所定义的配方施用于待治疗的身体部位(指甲或皮肤)的步骤。
所述施用方法包括在指甲根部上方或附近局部注射少量的约10至500微升药物贮库配方。配方可优选含有约0.1至10μg/活性成分。
术语“药物贮库”在此被定义为注射保留在注射部位(在注射的指甲根附近或上方)的液体并在数周的时间内从该部位缓慢扩散。液体可能在该部位保持液态。
所述药物贮库配方可以由单独的天然酚类化合物作为单一疗法，或与其他天然酚类化合物组合，或与溶解在与组织生物相容的载体基质中的合成抗真菌或抗细菌药物组合。
与组织具有生物相容性的载体可以是：
持续释放药物贮库配方，以延长组合物的释放。
持续释放包括：配方技术，如微粒、微球和纳米球、传统储库和注射植入物；
悬浮液，
芝麻油溶液，
植物油溶液，
棉籽油溶液，或
聚合物植入物。
用于局部注射的载体基配方：
油基可注射溶液、可注射药物悬浮液、聚合物基微球(PLGA微球、PCL微球、聚酐微球、聚原酸酯微球以及聚烷基氰基丙烯酸酯微球)以及基于聚合物的原位形成。微球的形成包括使用乳酸和乙醇酸(PLGA)的均聚物和共聚物。使用脂质以包封抗真菌/抗细菌组合物所制备微粒包括由单个或多个磷脂和胆固醇双层组成的脂质体。
或者，一种常规的长效注射配方，其由作为悬浮液的含水溶剂中的亲脂性化合物或溶解在植物油中的亲脂性化合物组成。
可以使用用于受控药物递送的常规可生物降解聚合物：包括聚乳酸(PLA)、聚乙交酯(PGA)、聚(乳酸-羟基乙酸)(PLGA)、聚ε-己内酯(PCL)、聚葡糖酸酯、聚酸酐、聚原酸酯、聚(二氧环己酮)以及聚氰基丙烯酸烷酯。
患者使用该产品治疗脚趾甲的活动性感染。该产品在早晨施用一次。经过12周的治疗后，指甲的感染区域开始变暗，最终变成深褐色，患者开始观察到没有被感染的新的生长。随着新指甲的生长，通过频繁切割去除暗部区域。
虽然已经在上文中详细描述了本发明的说明性和当前优选的实施例，但是应该理解，本发明的概念可以以其他方式不同地实施和使用，并且所附权利要求旨在被解释为包括这样的变型，除非受现有技术的限制。
权利要求书(按照条约第19条的修改)
1.一种植物检疫组合物，其包括白屈菜(Chelidonium majus)的根的水提取物、成膜表面活性剂以及可接受的药物或植物检疫赋形剂，用于预防或治疗植物感染和/或预防或治疗指甲感染。
2.如权利要求1所述的植物检疫组合物，还包括约1至5％的至少一种天然酚类化合物。
3.如权利要求2的所述组合物，其中，所述至少一种天然酚类化合物包括酚酸、百里酚、香芹酚、丁香油酚、crassinervic酸、aduncumene、hostmaniane、gaudichaudanic酸、黄酮类化合物、单宁、二苯乙烯类化合物、姜黄素类化合物、香豆素、木脂素、奎宁或其混合物。
4.如权利要求1至3中任一项所述的植物检疫组合物，还包括美国香柏(Thujaoccidentalis)的叶的水提取物。
5.如权利要求1-4中任意一项所述的植物检疫组合物，其中，所述成膜表面活性剂包括聚山梨醇酯型非离子表面活性剂。
6.权利要求1至5中任一项所述的植物检疫组合物，还包括添加剂，所述添加剂选自渗透剂、增稠剂、乳化剂、展着剂、黏附剂、作物油、无机油、烷基多葡糖苷以及有机硅酸盐表面活性剂。
7.权利要求1至6中任一项所述的植物检疫组合物，还包括抗真菌化合物。
8.如权利要求7所述的植物检疫组合物，其中，所述抗真菌化合物选自两性霉素B、特比萘芬、tavaborole、环吡酮、灰黄霉素、唑类抗真菌剂、棘白菌素和氟胞嘧啶。
9.如权利要求8所述的植物检疫组合物，其中所述唑类抗真菌剂是酮康唑、氟康唑、伊曲康唑、泊沙康唑、伏立康唑或艾菲康唑；并且所述棘白菌素是阿尼芬净(anidulafungin)、卡泊芬净(caspofungin)或米卡芬净(micafungin)。
10.如权利要求1至9中任一项所述的植物检疫组合物，还包括抗菌化合物。
11.如权利要求10所述的植物检疫组合物，其中，所述抗菌化合物包括：β-内酰胺抗生素、大环内酯类抗生素、林可酰胺、链阳性菌素、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类、四环素类、氯霉素、甲硝唑、替硝唑、呋喃妥因、糖肽类、脂糖肽类、恶唑烷酮、利福霉素、多肽和结核放线菌素或其混合物。
12.如权利要求1至11中任一项所述的植物检疫组合物，其中，所述白屈菜根的水提取物是白屈菜根的10：1的乙醇-水提取物，其中，10是白屈菜根的量，1是乙醇-水的量。
13.一种用于治疗植物感染的植物检疫组合物，包括：
0.2至1wt.％的白屈菜的根的提取物；
0至1wt.％的美国香柏的叶的提取物；
0至0.5wt.％的百里酚；
0至0.5wt.％的香芹酚；以及
0至0.25wt.％的成膜表面活性剂。
14.根据权利要求1-13中任意一项所限定的植物检疫组合物用于预防和治疗植物感染的用途。
15.一种预防和治疗植物细菌和真菌感染的方法，包括在植物上施用至少一次如权利要求1-13中任一项所限定的植物检疫组合物的步骤，让所述植物检疫组合物在植物上形成薄膜。
16.一种用于治疗指甲感染的药物组合物，包括：
40至50wt.％的白屈菜的根提取物；
40至50wt.％的美国香柏的叶提取物；
0至5wt.％的柠檬桉(Eucalyptus citriodora)的精油；
0至4wt.％的茶树油；
0至1wt.％的百里香(Thymus vulgaris)的花叶；以及
0至10wt.％的成膜表面活性剂。
17.如权利要求16所述的药物组合物，包括：
约44.6wt.％的白屈菜的根的提取物；
约44.6wt.％的美国香柏的叶的提取物；
约1.8wt.％的柠檬桉精油；
约2.7wt.％的茶树油；
约0.9wt.％的百里香的花叶；以及
约5.36wt.％的聚山梨酸酯20。
18.如权利要求16或17所限定的药物组合物用于预防或治疗指甲感染的用途。
19.一种预防和治疗指甲感染的方法，包括以下步骤：
在待治疗的指甲上施用至少一次如权利要求16或17所述的药物组合物；以及
让所述组合物干燥，例如在指甲上形成薄膜。
说明或声明(按照条约第19条的修改)
本次修改的主要目的是将涉及第一发明的权利要求即植物检疫组合物，以及涉及第二发明的权利要求即药物组合物分开。因此，我们认为：
新的权利要求1-15涉及一种植物检疫组合物(新的权利要求1-13)，其用于治疗植物的用途(新的权利要求14)以及一种用于预防和治疗植物细菌和真菌感染的方法(新的权利要求15)；以及
新的权利要求16-19涉及用于治疗指甲感染的特定药物组合物(新的权利要求16和17)，用于治疗指甲感染的组合物的用途(新的权利要求18)以及一种用于治疗指甲感染的方法(新的权利要求19)。
因此，我们认为，新提交的权利要求1-15已符合PCT33(2)的规定。另外，本权利要求的修改也回复了书面意见第8页有关PCT第6条的意见。
申请人认为，根据PCT19(1)的规定，上述修改对说明书和附图没有影响。

Claims (19)

1.一种药物和/或植物检疫组合物，其包括白屈菜(Chelidonium majus)的根的水提取物以及可接受的药物或植物检疫赋形剂，用于预防或治疗植物感染和/或预防或治疗指甲感染。
2.如权利要求1所述的组合物，还包括约1至5％的至少一种天然酚类化合物的化合物。
3.如权利要求2的所述组合物，其中，所述至少一种天然酚类化合物包括酚酸、百里酚、香芹酚、丁香油酚、crassinervic酸、aduncumene、hostmaniane、gaudichaudanic酸、黄酮类化合物、单宁、二苯乙烯类化合物、姜黄素类化合物、香豆素、木脂素、奎宁或其混合物。
4.如权利要求1至3中任一项所述的组合物，还包括美国香柏(Thuja occidentalis)的叶的水提取物。
5.如权利要求1至4中任一项所述的组合物，还包括成膜表面活性剂。
6.如权利要求5所述的组合物，其中，所述成膜表面活性剂包括聚山梨醇酯型非离子表面活性剂。
7.如权利要求1至6中任一项所述的组合物，还包括添加剂，所述添加剂选自渗透剂、增稠剂、乳化剂、展着剂、黏附剂、作物油、无机油、烷基多葡糖苷以及有机硅酸盐表面活性剂。
8.权利要求1至7中任一项所述的组合物，还包括抗真菌化合物。
9.如权利要求8所述的组合物，其中，所述抗真菌化合物选自两性霉素B、特比萘芬、tavaborole、环吡酮、灰黄霉素、唑类抗真菌剂、棘白菌素和氟胞嘧啶。
10.如权利要求9所述的组合物，其中，所述唑类抗真菌剂是酮康唑、氟康唑、伊曲康唑、泊沙康唑、伏立康唑或艾菲康唑；并且所述棘白菌素是阿尼芬净(anidulafungin)、卡泊芬净(caspofungin)或米卡芬净(micafungin)。
11.如权利要求1至10中任一项所述的组合物，还包括抗菌化合物。
12.如权利要求11所述的组合物，其中，所述抗菌化合物包括：β-内酰胺抗生素、大环内酯类抗生素、林可酰胺、链阳性菌素、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类、四环素类、氯霉素、甲硝唑、替硝唑、呋喃妥因、糖肽类、脂糖肽类、恶唑烷酮、利福霉素、多肽和结核放线菌素或其混合物。
13.如权利要求1至12中任一项所述的组合物，其中，所述白屈菜的根的水提取物是白屈菜根的10：1的乙醇-水提取物，其中，10是白屈菜根的量，1是乙醇-水的量。
14.一种用于治疗植物感染的植物检疫组合物，包括：
0.2至1wt.％的白屈菜的根提取物；
0至1wt.％的美国香柏的叶提取物；
0至0.5wt.％的百里酚；
0至0.5wt.％的香芹酚；以及
0至0.25wt.％的成膜表面活性剂。
15.一种用于治疗指甲感染的药物组合物，包括：
40至50wt.％的白屈菜的根提取物；
40至50wt.％的美国香柏的叶提取物；
0至5wt.％的柠檬桉(Eucalyptus citriodora)的精油；
0至4wt.％的茶树油；
0至1wt.％的百里香(Thymus vulgaris)的花叶；以及
0至10wt.％的成膜表面活性剂。
16.如权利要求15所述的药物组合物，包括：
约44.6wt.％的白屈菜的根提取物；
约44.6wt.％的美国香柏叶的提取物；
约1.8wt.％的柠檬桉的精油；
约2.7wt.％的茶树油；
约0.9wt.％的百里香的花叶；以及
约5.36wt.％的聚山梨酸酯20。
17.如权利要求1-13中任一项所限定的药物或植物检疫组合物用于预防或治疗植物感染或预防或治疗指甲感染的用途。
18.一种预防和治疗植物细菌和真菌感染的方法，包括在植物上施用至少一次如权利要求1-14中任一项所限定的组合物的步骤。
19.一种预防和治疗指甲感染的方法，包括以下步骤：
在待治疗的指甲上施用至少一次如权利要求1-13以及15-16中任一项所述的组合物；以及
让组合物干燥，例如在指甲上形成薄膜。
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