CN108498802B - 用于治疗非小细胞肺癌的药物组合物及其制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于治疗非小细胞肺癌的药物组合物及其制剂，属于药物领域。其包括：免疫检查点抑制剂和巴利森苷类化合物。所述免疫检查点抑制剂和巴利森苷类化合物的重量比为1：0.1‑1。本发明还提供所述药物组合物的相关制剂及其应用。

Description

用于治疗非小细胞肺癌的药物组合物及其制剂

技术领域

本发明涉及一种用于治疗非小细胞肺癌的药物组合物及其制剂，属于药物领域。

背景技术

肺癌是一种常见的肺部恶性肿瘤，近年来的发病率和死亡率增长最快，对人类健康安全的威胁也越来越大。恶性肿瘤是危害人类生命健康的细胞性疾病，肿瘤细胞从生物体内正常细胞转化为恶性细胞，其形态、功能、代谢和增殖等都会发生变化，可以看作是细胞的异常分化导致其具有永生性。

肺癌按组织学分型可分为小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)两类，其中非小细胞肺癌约占85％。对于NSCLC来说，首选治疗方式是手术治疗，目前普遍采用低剂量螺旋CT扫描进行筛查，使肺癌的早期诊断成为可能，但是检测设备较为昂贵，不容易普及。而患者发现NSCLC时处于晚期较多，手术无法进行。

在很长一段时间里，晚期NSCLC患者只能接受"含铂类药物的化疗"，与支持治疗相比，虽然一定程度上增加了患者总生存期，但它的上限也仅限于20％的反应率和8-10个月的中位生存期。近年来，随着分子遗传学研究的不断进展，NSCLC被细分为各种不同的分子亚型，占据NSCLC总数50％以上的肺腺癌可以根据相关驱动基因突变进一步细分成更多的亚群，这些驱动基因包括EGFR，KRAS，HER2，PIK3CA，BRAF，MET基因突变和ALK，ROS1和RET基因重排，并由此诞生了各类分子靶向治疗药物。分子靶向治疗药物以其靶向性、安全性等优点在NSCLC治疗上取得了显著的疗效，有益于个体化治疗。然而与化疗药物相似，靶向治疗也存在耐药问题。临床上EGFR突变晚期NSCLC在EGFR-TKI-线治疗9-13个月后，通常会因TKI获得性耐药而出现疾病进展。

最近的癌症免疫治疗研究已经将大量努力集中在通过过继转移活化的效应细胞来增强抗肿瘤免疫力、针对相关抗原的免疫的方法，提供非特异性免疫刺激剂如细胞因子，或除去抗-癌症效应细胞的抑制剂。开发特异性免疫检查点抑制剂(immune checkpointinhibitor)的努力已经开始为治疗癌症提供新的免疫治疗方法。

免疫检查点(immunecheckpoint)是免疫系统中存在的一些抑制性信号通路，通过调节外周组织中免疫反应的持续性和强度避免组织损伤，并参与维持对于自身抗原的耐受。研究发现，肿瘤细胞正是利用免疫检查点的抑制性信号通路抑制T淋巴细胞活性，从而逃避体内免疫系统特别是T淋己细胞对肿瘤的杀伤效应。重要的免疫检查点(immunecheckpoint)分子主要有CTLA-4、PD-1、VISTA、LAG-3和TIM-3等。目前，CTLA-4抗体药物Ipilimumab为全人源IgG1抗体分子，Ipilimumab不直接杀伤肿瘤细胞，其与CTLA-4结合后抑制CTLA-4的功能，解除抗原特异性T淋巴细胞的免疫耐受和TCR信号的直接抑制作用，提高IL-2的表达，从而提高T效应细胞功能，降低Treg细胞对患者免疫系统的抑制。2011年被FDA批准用于黑色素瘤的治疗。PD-1/PD-L1通路抗体主要包括抗PD-1和PD-L1单抗，也有针对PD-L2的产品。抗PD-1抗体研究比较成熟的有BMS的Nivolumab和Merck的Pembrolizumab。Nivolumab为全人源IgG4抗体分子，Pembrolizumab为人源化IgG4抗体分子。它们与PD-1结合后抑制其与配体PD-L1和PD-L2的结合，促进T淋巴细胞增殖和细胞因子产生，解除PD-1系统对肿瘤活性T淋巴细胞免疫监视的抑制。在一项3期临床头对头比较Nivolumab和多西他赛治疗之前接受过治疗的，鳞状晚期非小细胞肺癌的疗效和安全性研究中，患者被随机分配接受每2周静脉内注射3mg/kg的Nivolumab治疗，或每3周静脉内注射75mg/kg的多西他赛治疗。与多西他赛组相比，Nivolumab组的OS改善更加显著，且有统计学差异。并且还有大量免疫检查点相关肿瘤免疫药物进行着相关临床试验，不断披露的数据表明免疫检查点抑制剂有成为治疗NSCLC一线药物的潜力。但是，对于NSCLC患者来说，NSCLC组织表达免疫检查相关靶点率过低，导致NSCLC对于相关药物响应率较差；另外当患者免疫力低下时，也会导致肿瘤免疫药物疗效大幅下降，这些缺点无疑会阻碍肿瘤免疫药物在NSCLC中的应用。

发明内容

本发明的第一方面是提供一种用于治疗NSCLC的药物组合物，其包括：免疫检查点抑制剂和巴利森苷类化合物。

在一个实施方案中，所述免疫检查点抑制剂包括：抗CTLA-4抗体、PD1阻断剂、抗PD1抗体、LAG-3抑制剂、PD-L1阻断剂、抗PD-L1抗体、B7-H3抑制剂、B7-H4抑制剂和/或TIM3抑制剂。

在进一步地实施方案中，所述免疫检查点抑制剂为抗PD1抗体。所述抗PD1抗体为派姆单抗(pembrolizumab)、纳武单抗(nivolumab)或阿特珠单抗(atezolizumab)。

在另一个实施方案中，所述巴利森苷类化合物选自Parishin、Parishin A或Parishin B。巴利森苷类化合物是分离自传统中药天麻。现有技术表明其具有镇静或抗衰老的作用。所述Parishin、Parishin B或Parishin C的结构式如下：

Parishin：R1＝R2＝R3＝R；

Parishin B：R1＝R2＝R，R3＝H；

Parishin C：R1＝R3＝R，R2＝H。

在又一个实施方案中，所述免疫检查点抑制剂和巴利森苷类化合物的重量比为1：0.1-1；进一步地，免疫检查点抑制剂和巴利森苷类化合物的重量比为1：0.2。

在具体地实施方案中，所述药物组合物其包括：免疫检查点抑制剂、巴利森苷类化合物和化疗药物。

在一个实施方案中，所述化疗药物选自：顺铂、紫杉醇或培美曲塞。

在另一个实施方案中，所述免疫检查点抑制剂、巴利森苷类化合物和化疗药物的重量比为1：0.1-1：0.1-1。

本发明的第二方面是提供一种药物制剂，其由所述药物组合物和药学上可接受的载体组成。进一步地，所述药物制剂为注射剂。

本发明的第三方面是提供所述药物组合物在制备治疗非小细胞肺癌药物中的应用。

在上述的医药用途中，对于本发明药物组合物的给药时间和给药次数需要根据病情的具体诊断结果而定，这在本领域技术人员掌握的技术范围之内。例如，将对小鼠或大鼠的治疗方案应用于人身上，所有药物对人的有效剂量可以通过该药物对小鼠的有效剂量进行换算，这对于本领域的普通技术人员来说是容易实现的。

本发明针对现有免疫检查点抑制剂对于NSCLC患者敏感度较低的缺点，结合我国药用植物的宝贵资源，筛选获得了一种可以产生协同作用的药物组合物，该组合物在治疗NSCLC方面，巴利森苷类化合物和免疫检查点抑制剂产生明显的协同作用。出人意料的是，本发明发现当药物组合物中添加化疗药物后，还会进一步提高药物组合物的治疗效果。

具体实施方式

还可进一步通过实施例来理解本发明，其中所述实施例说明了一些制备或使用方法。然而，要理解的是，这些实施例不限制本发明。现在已知的或进一步开发的本发明的变化被认为落入本文中描述的和以下要求保护的本发明范围之内。

实施例1派姆单抗和巴利森苷B组合物对NSCLC小鼠模型的影响

6-8周龄的雄性C57小鼠，体重18-22g，取对数生长期的非小细胞肺癌细胞系A549，用PBS调整细胞数为5×10⁷个/ml，对小鼠皮下右侧腹股沟区接种细胞悬液0.2ml；肿瘤接种6天左右，选肿瘤直径达5mm左右的造模成功的小鼠进行试验，随机分组，每组15只。给药组每周腹腔注射一次药物组合物，正常组和模型组注射等量生理盐水，连续给药4周，具体给药方案如下：

4周后处死部分小鼠获取瘤组织并进行相关检测，其余小鼠继续按照之前方案给药，计算各组生存期，具体结果如下：

1)给药4周后计算各给药组抑瘤率，抑瘤率＝(模型组平均瘤质量-给药组平均瘤质量)/模型组平均瘤质量×100％，结果如下：

	抑瘤率(％)
		给药组1	23.1
给药组2	9.4
		给药组3	38.3
给药组4	67.8
		给药组5	53.2
给药组6	52.6

2)肿瘤组织称重后，取肿瘤组织，采用流式细胞仪进行标记，分析肿瘤浸润细胞毒性CD8+T细胞产生IFN-γ和TNF-α的能力，结果如下：

	IFN-γ+CD8+(％)	TNF-α+CD8+(％)
			模型组	3.6±2.2	4.6±2.5
给药组1	6.3±2.4	7.1±2.9
			给药组2	4.4±1.7	5.2±2.4
给药组3	9.1±2.6**	10.4±2.7**
			给药组4	15.4±3.1**	17.2±2.8**
给药组5	11.2±2.1**	13.7±2.2**
			给药组6	12.5±2.3**	12.9±2.8**

3)各组生存期统计

	生存期(天)
		模型组	33.7±5.2
给药组1	39.1±5.4*
		给药组2	35.4±4.3
给药组3	46.9±5.7**
		给药组4	69.3±6.6**
给药组5	55.6±5.1**
		给药组6	53.7±5.3**

现有研究表明NSCLC细胞系A549是PD-L1表达率较低的细胞系(表达率低于15％)，因此一般来讲，其是研究免疫检查点抑制剂对非敏感肺癌作用的有效途径，上述结果也表明PD-1抑制剂派姆单抗对A549肺癌模型作用较弱，但是和巴利森苷B合用后，治疗效果大幅提高，产生了明显的协同作用。这种协同作用是部分通过提高派姆单抗对非敏感肿瘤细胞的敏感度来实现的。

实施例2派姆单抗和巴利森苷B组合物对NSCLC小鼠模型的影响

6-8周龄的雄性C57小鼠，体重18-22g，取对数生长期的非小细胞肺癌细胞系H1299，用PBS调整细胞数为5×10⁷个/ml，对小鼠皮下右侧腹股沟区接种细胞悬液0.2ml；肿瘤接种6天左右，选肿瘤直径达5mm左右的造模成功的小鼠进行试验，随机分组，每组15只。给药组每周腹腔注射一次药物组合物，正常组和模型组注射等量生理盐水，连续给药4周，具体给药方案如下：

4周后处死部分小鼠获取瘤组织并进行相关检测，其余小鼠继续按照之前方案给药，计算各组生存期，具体结果如下：

1)给药4周后计算各给药组抑瘤率，抑瘤率＝(模型组平均瘤质量-给药组平均瘤质量)/模型组平均瘤质量×100％，结果如下：

	抑瘤率(％)
		给药组1	59.2
给药组2	8.5
		给药组3	64.7
给药组4	80.3
		给药组5	68.4
给药组6	66.8

2)各组生存期统计

	生存期(天)
		模型组	35.9±4.7
给药组1	57.2±4.9*
		给药组2	37.1±4.4
给药组3	64.4±5.1**
		给药组4	89.8±5.6**
给药组5	71.6±4.8**
		给药组6	67.3±5.1**

H1299属于PD-L1表达率较高的NSCLC细胞系，因此理论上讲其对PD-1抑制剂会较为敏感，从上述结果可以看出，派姆单抗确实对H1299肺癌模型具有明显的治疗作用，而添加巴利森苷后这种治疗效果仍然存在着明显提升。

实施例3派姆单抗、巴利森苷B和培美曲塞组合物对NSCLC小鼠模型的影响

6-8周龄的雄性C57小鼠，体重18-22g，取对数生长期的非小细胞肺癌细胞系A549，用PBS调整细胞数为5×10⁷个/ml，对小鼠皮下右侧腹股沟区接种细胞悬液0.2ml；肿瘤接种6天左右，选肿瘤直径达5mm左右的造模成功的小鼠进行试验，随机分组，每组15只。给药组每周腹腔注射一次药物组合物，正常组和模型组注射等量生理盐水，连续给药4周，具体给药方案如下：

	派姆单抗	Parishin B	培美曲塞
				给药组1	5mg/kg	-	-
给药组2	-	5mg/kg	-
				给药组3	-	-	5mg/kg
给药组4	2.5mg/kg	0.5mg/kg	0.25mg/kg
				给药组5	2.5mg/kg	0.5mg/kg	0.5mg/kg
给药组6	2.5mg/kg	0.5mg/kg	1mg/kg

4周后处死部分小鼠获取瘤组织并进行相关检测，其余小鼠继续按照之前方案给药，计算各组生存期，具体结果如下：

1)给药4周后计算各给药组抑瘤率，抑瘤率＝(模型组平均瘤质量-给药组平均瘤质量)/模型组平均瘤质量×100％，结果如下：

	抑瘤率(％)
		给药组1	24.5
给药组2	8.7
		给药组3	49.2
给药组4	70.4
		给药组5	85.9
给药组6	77.1

2)肿瘤组织称重后，取肿瘤组织，采用流式细胞仪进行标记，分析肿瘤浸润细胞毒性CD8+T细胞产生IFN-γ和TNF-α的能力，结果如下：

	IFN-γ+CD8+(％)	TNF-α+CD8+(％)
			模型组	3.9±2.3	5.1±2.8
给药组1	7.2±2.9	8.3±3.9
			给药组2	4.8±2.7	4.9±2.1
给药组3	4.2±1.8	5.4±2.2
			给药组4	18.1±3.3**	20.6±2.5**
给药组5	22.3±2.7**	23.2±2.6**
			给药组6	19.8±2.9**	19.7±2.1**

3)各组生存期统计

	生存期(天)
		模型组	35.9±4.8
给药组1	39.1±5.5
		给药组2	37.6±5.1
给药组3	51.4±4.9**
		给药组4	72.2±5.8**
给药组5	91.9±5.7**
		给药组6	79.3±6.3**

本发明内容仅仅举例说明了要求保护的一些具体实施方案，其中一个或更多个技术方案中所记载的技术特征可以与任意的一个或多个技术方案相组合，这些经组合而得到的技术方案也在本申请保护范围内，就像这些经组合而得到的技术方案已经在本发明公开内容中具体记载一样。

Claims (6)

1.一种用于治疗NSCLC的药物组合物，包括：免疫检查点抑制剂和巴利森苷类化合物，其特征在于，所述免疫检查点抑制剂为抗PD1抗体，所述抗PD1抗体为派姆单抗(pembrolizumab)；所述巴利森苷类化合物为Parishin B；所述免疫检查点抑制剂和巴利森苷类化合物的重量比为1：0.1-1。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述免疫检查点抑制剂和巴利森苷类化合物的重量比为1：0.2。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括：免疫检查点抑制剂、巴利森苷类化合物和化疗药物。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述化疗药物选自：顺铂、紫杉醇或培美曲塞；所述免疫检查点抑制剂、巴利森苷类化合物和化疗药物的重量比为1：0.1-1：0.1-1。

5.一种药物制剂，其由权利要求1-4任一项所述药物组合物和药学上可接受的载体组成；所述药物制剂为注射剂。

6.权利要求1-4任一项所述药物组合物在制备治疗非小细胞肺癌药物中的应用。