CN108441413B - 一种微载体悬浮培养在线取样装置及操作方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种微载体悬浮培养在线取样装置，属于检测取样技术领域，包括生物反应器，所述生物反应器内设有到底管，所述到底管的一个端部伸出生物反应器，所述到底管位于生物反应器外的端部通过硅胶管依次连接有公母接头、在线取样器、第一呼吸器及反吹装置；所述在线取样器包括观察区，所述观察区为圆柱体状，观察区侧壁上对称地设有连接管，在线取样器通过所述连接管连入装置；还包括加压装置，所述加压装置设置在生物反应器顶部，加压装置与生物反应器间设有第二呼吸器；本发明还公开了该装置的操作方法，本发明的优点在于，方便快捷、无菌可控、在线观察、样品可重复使用，有效避免浪费。
Description
技术领域
本发明属于检测取样技术领域，具体涉及一种微载体悬浮培养在线取样装置及操作方法。
背景技术
悬浮培养技术在兽用疫苗行业快速兴起，尤其是微载体悬浮培养技术更是得到了广泛的应用。目前微载体悬浮培养过程中进行取样观察，一般都是取样后离线观察，时间长，多次操作极易造成污染，而且取出后的样品不能重新放回生物反应器继续培养，造成浪费。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于：现有微载体悬浮培养取样装置不能进行在线取样观察，样品不能重回生物反应器继续培养。
本发明采用以下技术方案解决上述技术问题：
一种微载体悬浮培养在线取样装置，包括生物反应器，所述生物反应器内设有到底管，所述到底管的一个端部伸出生物反应器，该端部通过硅胶管依次连接有公母接头、在线取样器、第一呼吸器及反吹装置；所述在线取样器包括观察区，所述观察区为圆柱体状，观察区侧壁上对称地设有连接管，在线取样器通过所述连接管连入装置；还包括加压装置，所述加压装置设置在生物反应器顶部，加压装置与生物反应器间设有第二呼吸器。
优选地，本发明所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，所述第一呼吸器及第二呼吸器相同，其包括壳体，所述壳体内设有滤芯。
优选地，本发明所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，所述滤芯的孔径为0.2um。
优选地，本发明所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，所述第一呼吸器为两个，并串联；所述第二呼吸器为两个，并串联。
优选地，本发明所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，优选地，本发明所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，所述加压装置为打气泵、注射器或空气压缩机。
优选地，本发明所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，所述反吹装置为打气泵、注射器或空气压缩机。
优选地，本发明所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，所述在线取样器为一体结构。
优选地，本发明所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，所述在线取样器由石英玻璃管一次性吹制而成。
本发明还提供了上述一种微载体悬浮培养在线取样装置的操作方法，包括以下步骤：
(1)将在线取样器硅化，并清洗干净；
(2)连接装置，从公母接头处断开，将整个装置分成第一部分和第二部分，并用洁净布分别包裹公、母接头；
(3)将第一部分、第二部分分别放置在灭菌柜内灭菌；
(4)在生物反应器内进行微载体细胞悬浮培养；
(5)采用无菌方法连接公母接头；
(6)采用加压装置向生物反应器内加压，使样品流入到底管，并进入在线取样器；
(7)将在线取样器置于显微镜下观察，结束后，由反吹装置将样品吹回生物反应器。
优选地，本发明所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置的操作方法，所述步骤(3)中灭菌操作的温度为121℃，时间为30分钟。
本发明技术有益效果：
本发明技术方案通过加压装置将样品打入在线取样器后即可在线观察，操作简单，无菌可控，取出的样品在观察结束后利用反吹装置反吹回生物培养器继续培养，避免浪费，样品可重复利用直至培养结束，该装置能够广泛应用于微载体悬浮培养。
附图说明
图1为本发明实施例所述一种微载体悬浮培养在线取样装置的结构示意图；
图2为在线取样器的结构示意图；
图3为呼吸器的结构示意图。
具体实施方式
为便于本领域技术人员理解本发明技术方案，现结合说明书附图对本发明技术方案做进一步的说明。
参阅图1，本实施例所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，包括生物反应器1，所述生物反应器1内自带有到底管2，所述到底管2沿生物反应器1的侧壁垂直地伸入到生物反应器1的底部，并弯折使到底管2的一个端部位于生物反应器1底的中间位置，到底管2的另一个端部伸出生物反应器1外，该端部通过硅胶管依次连接有公母接头3、在线取样器4、第一呼吸器5及反吹装置6；其中公母接头3包括公接头31和母接头32；如图2，所述在线取样器4包括观察区41，所述观察区41为圆柱体状，观察区41侧壁上对称地设有连接管42。还包括加压装置7，所述加压装置7设置在生物反应器1顶部，加压装置7与生物反应器1间设有第二呼吸器8，加压装置7、第二呼吸器8及生物反应器1间通过硅胶管连接。
该装置按如下方式组装：通过硅胶管依次连接到底管2、公母接头3、在线取样器4、第一呼吸器5及反吹装置6，当公接头31与到底管2位于生物反应器1外部的端部连接时，母接头32即通过硅胶管与在线取样器4的一个连接管42连接，公接头31与母接头32也可以交换位置；在线取样器4的另一个连接管42通过硅胶管与第一呼吸器5连接；加压装置7设置在生物反应器1的顶部，第二呼吸器8设置在加压装置7与生物反应器1间。
所述加压装置7的设置目的是为了向生物反应器8内加压，以便将样品挤入到底管2内，进而进入在线取样器4进行在线观察，因而只要可以起到加压作用的装置均可使用，例如打气泵、注射器或空气压缩机等。
所述反吹装置6的设置目的是为了将已经观察的样品重新吹入生物反应器1继续培养，以免浪费，因此有多种可以选择的装置，如打气泵、注射器或空气压缩机等。
如图1及图3，第一呼吸器5及第二呼吸器8为结构相同的除菌过滤器，其包括壳体91，所述壳体91内设有滤芯92；作为优选结构，所述滤芯92的孔径均为0.2um，以过滤掉进入装置内的气体中的细菌，作为进一步的改进，第一呼吸器5为两个，并串联；第二呼吸器8也设置两个，并串联。
所述在线取样器4可以是组合结构，也可以是一体结构，如采用石英玻璃管一次性吹制而成。
本实施例所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置的操作方法如下：
(1)采用常规方法将在线取样器4硅化，并清洗干净；
(2)连接装置，并从公母接头3处断开，将整个装置分成第一部分和第二部分，并用洁净布分别包裹公接头31及母接头32；
(3)将第一部分、第二部分分别放置在灭菌柜内，在121℃下，灭菌30分钟；
(4)将细胞消化好后，制成悬液，通过无菌管道加入到生物反应器1内，设定好培养参数开始进行微载体悬浮培养；
(5)采用常规无菌方法连接公接头31及母接头32；
(6)采用加压装置7向生物反应器1内加压，使样品流入到底管2，并进入在线取样器4；所取样品量不宜超过在线取样器4容积的1/3，同时还需注意控制在线取样器4，使得培养液不进入第一呼吸器5；
(7)将在线取样器4置于显微镜下观察，结束后，由反吹装置6将样品吹回生物反应器1内继续培养。
至此，一次取样观察结束，后续再进行取样观察时，只需要重复步骤(6)、(7)即可。
本发明技术方案在上面结合附图对发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种非实质性改进，或未经改进将发明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种微载体悬浮培养在线取样装置，包括生物反应器，所述生物反应器内设有到底管，所述到底管的一个端部伸出生物反应器，其特征在于，所述到底管位于生物反应器外的端部依次连接有公母接头、在线取样器、第一呼吸器及反吹装置；所述在线取样器包括观察区，所述观察区为圆柱体状，观察区侧壁上对称地设有连接管，在线取样器通过所述连接管连入装置；还包括加压装置，所述加压装置设置在生物反应器顶部，加压装置与生物反应器间设有第二呼吸器；
所述第一呼吸器及第二呼吸器相同，包括壳体，所述壳体内设有滤芯；
所述第一呼吸器为两个，并串联；所述第二呼吸器为两个，并串联。
2.根据权利要求1所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，其特征在于，所述加压装置为打气泵、注射器或空气压缩机。
3.根据权利要求1所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，其特征在于，所述反吹装置为打气泵、注射器或空气压缩机。
4.根据权利要求1-3任一项所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，其特征在于，所述在线取样器为一体结构。
5.根据权利要求4所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，其特征在于，所述在线取样器由石英玻璃管一次性吹制而成。
6.根据权利要求1所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，其特征在于，所述滤芯的孔径为0.2um。
7.一种微载体悬浮培养在线取样装置的操作方法，其基于权利要求1-6任一项所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置，包括以下步骤：
（1）将在线取样器硅化，并清洗干净；
（2）连接装置，并从公母接头处断开，将整个装置分为第一部分和第二部分，并分别用洁净布包裹公、母接头；
（3）将第一部分、第二部分分别放置在灭菌柜内灭菌；
（4）在生物反应器内进行微载体细胞悬浮培养；
（5）采用无菌方法连接公、母接头；
（6）采用加压装置向生物反应器内加压，使样品流入到底管，并进入在线取样器；
（7）将在线取样器置于显微镜下观察，结束后，由反吹装置将样品吹回生物反应器。
8.根据权利要求7所述的一种微载体悬浮培养在线取样装置的操作方法，其特征在于，所述步骤（3）中灭菌操作的温度为121℃，时间为30分钟。
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