CN108424845B - 一种易检的SNP/InDel分型检测系统及使用方法 - Google Patents

一种易检的SNP/InDel分型检测系统及使用方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种易检的SNP/InDel分型检测系统及使用方法,它包括多指标检测微流控SNP芯片、芯片覆膜仪、平板PCR仪、离心装置和微阵列芯片扫描仪;多指标检测微流控SNP芯片包括基片和盖片,基片的上表面具有一条以上主管道,每一主管道的两端均设有加样孔,在位于每一主管道一侧的基片上沿主管道的长度方向间隔设置多个反应孔,每一反应孔通过一连接通道与其对应侧的主管道的蜿蜒底端相连通;芯片覆膜仪用于将盖片密封覆盖于基片的上表面;离心装置用于对芯片进行离心处理;芯片热封仪用于对芯片进行热封处理;平板PCR仪用于将芯片放置于其内进行扩增反应;微阵列芯片扫描仪用于对芯片进行扫描,获取生物信息。

Description

一种易检的SNP/InDel分型检测系统及使用方法
技术领域
本发明涉及一种检测系统,特别涉及一种易检的SNP(Single NucleotidePolymorphisms,单核苷酸多态性)/InDel(insertion-deletion,插入缺失标记)分型检测系统及使用方法。
背景技术
传统DNA检测手段首先是手工提取样本中的DNA,然后在试管内或载玻片上进行一系列复杂的生化反应来完成的;接下来的扩增流程,需要手工加入PCR(Polymerase ChainReaction,聚合酶链式反应)混合液之后,再通过PCR仪来进行冲刷,萃取、过滤或是缠绕等方式;最后的检测步骤则需要借助体积庞大电泳仪以得到检测结果。因此如果能有一个系统将所有的操作均交设备快速地完成,不仅可以大大减少人工操作,规避误操作风险,而且可以大大提高基因检测的分析速度和检测通量。
SNP分子检测技术已经成为跨国种业巨头加快培育品种的一种利器,但是国内的分子育种技术刚刚起步,主要依赖于国外的检测技术平台进行SNP分子检测,使得检测成本高,不利于国内分子育种的发展。为了打破国外垄断现状,为了整体提升农作物品种权保护和精准育种的技术水平,迫切需求操作简单、价格亲民、定制灵活和延展性强的测试检测平台。
发明内容
针对上述问题,本发明的目的是提供一种易检的SNP/InDel分型检测系统及使用方法,该系统将生物样品的反应和检测等流程集成一体,实现高通量、灵活、精准的SNP分型检测,提高生物样品检测效率,降低成本。
为实现上述目的,本发明采用以下技术方案:一种易检的SNP/InDel分型检测系统,其特征在于,它包括:多指标检测微流控SNP芯片,所述多指标检测微流控SNP芯片包括基片和盖片,所述基片的上表面具有一条以上主管道,每一所述主管道呈上下蜿蜒的蛇形结构,每一所述主管道的两端均设有加样孔,两所述加样孔均与所述主管道相连通,在位于每一所述主管道一侧的基片上沿主管道的长度方向间隔设置多个反应孔,每一所述反应孔通过一连接通道与其对应侧的所述主管道的蜿蜒底端相连通;芯片覆膜仪,所述芯片覆膜仪用于将所述盖片密封覆盖于所述基片的上表面;离心装置,所述离心装置用于对点样、覆膜以及注试剂后的所述多指标检测微流控SNP芯片进行离心处理;芯片热封仪,所述芯片热封仪用于对离心处理后的所述多指标检测微流控SNP芯片进行热封处理;平板PCR仪,所述平板PCR仪用于将所述芯片热封仪处理后的所述多指标检测微流控SNP芯片放置于其内进行扩增反应;微阵列芯片扫描仪,所述微阵列芯片扫描仪用于对PCR扩增反应后的所述多指标检测微流控SNP芯片进行扫描,获取生物信息。
所述芯片覆膜仪包括壳体和设置在所述壳体中的芯片装载模块、加热压模刀模块以及直线运动驱动模块,所述壳体包括底座,所述芯片装载模块包括芯片盒,所述芯片盒上设置有开口,所述加热压模刀模块包括芯片压模和平行设置在所述芯片压模上方的压模转接板,在所述芯片压膜和压模转接板之间设置有四根压膜导向轴,所述芯片压模的下端设置有用于伸入所述开口进行覆膜操作的芯片模具刀,所述芯片压模的上表面还固定设置有加热块和用于固定所述加热块的压板,所述直线运动驱动模块的输出端与所述压模转接板连接。
所述芯片热封仪包括芯片装载感应模块、电机滑轨控制模块、气动控制模块、加热压膜刀模块、电源、气源和控制模块;所述芯片装载感应模块用于批量装载所述多指标检测微流控SNP芯片,并自动识别装载的所述多指标检测微流控SNP芯片的数量和位置;所述电机滑轨控制模块固定连接所述芯片装载感应模块,用于带动所述芯片装载感应模块进行运动实现对所述多指标检测微流控SNP芯片的定位;所述气动控制模块固定连接所述加热压膜刀模块,用于带动加热压膜刀模块进行运动,使得所述加热压膜刀模块正对所述多指标检测微流控SNP芯片;所述加热压膜刀模块用于对芯片压膜刀进行加热到预设温度,对所述多指标检测微流控SNP芯片均匀热封阻断操作,实现对所述多指标检测微流控SNP芯片的热封;所述电源用于为各模块进行供电;所述气源用于为所述气动控制模块提供工作气体;所述控制模块连接所述芯片装载感应模块、电机滑轨控制模块、气动控制模块和加热压膜刀模块,对各模块的工作过程进行控制。
所述芯片装载感应模块包括光电传感器、芯片盒底板和芯片盒盖板;所述芯片盒底板顶部间隔设置有若干个芯片装载槽,每一所述芯片装载槽的一端开设有用于放置所述光电传感器的U型口,所述光电传感器用于检测装载的所述多指标检测微流控SNP芯片信号并发送到所述控制模块,所述控制模块根据所述光电传感器的检测信号判断所述多指标检测微流控SNP芯片是否装载到位,核准装载微流控SNP芯片的数量;每一所述芯片装载槽的另一端开设有V型口,所述芯片盒底板的底部中心开设有用于与所述电机滑轨控制模块进行固定插设的U型槽;对应于所述U型口的位置,所述芯片盒底板的底部一侧还设置有用于电连接所述光电传感器的芯片装载检测板;对应于所述芯片装载槽的位置,所述芯片盒底板顶部还固定连接若干用于对微流控SNP芯片进行压设的所述芯片盒盖板。
所述离心装置采用台式多功能离心机,所述台式多功能离心机的水平转子上具有芯片适配器,将所述多指标检测微流控SNP芯片插入所述芯片适配器内,保持所述基片上的主管道朝向所述台式多功能离心机的中心,所述反应孔相比于所述主管道远离所述台式多功能离心机的中心。
还包括分型模块,所述分型模块包括分型软件,将所述微阵列芯片扫描仪的扫描结果输入所述分型软件进行最后的分型处理,得出检测结果。
所述基片上的主管道为四条,每条所述主管道沿其长度方向连通24个所述反应孔。
所述芯片装载槽的数量设置为四个,所述V型口的外端面设置为斜面结构。
本发明还提供了一种基于易检的SNP/InDel分型检测系统的使用方法,其包括以下步骤:
1)在多指标检测微流控SNP芯片的基片上的反应孔内进行点样,完成引物试剂注入;
2)将完成点样后的基片和盖片同时放入芯片覆膜仪内,芯片覆膜仪将盖片均匀覆盖于基片的上表面,在基片上形成多条密封的主管道,使用TIP头通过加样孔向主管道内注入待测样品,待检样品充满主管道完成加样后通过胶粘密封方式将加样孔密封;
3)将点样风干、覆膜、注入待检样品的芯片放置在离心装置上,同时,保持芯片的基片上的主管道朝向离心装置的离心中心,反应孔相比于主管道远离离心装置的离心中心,在离心装置的作用下,使充满主管道中的待检样本在离心力的作用下通过连接通道被均匀地分配到反应孔中;
4)将离心处理后的芯片放置在芯片热封仪内,通过热压的方式使连接管道上方的盖片局部变形与对应下方的基片融合,使得连接管道的局部或全部堵塞以达到物理隔离各个反应孔;
5)将热封后的芯片放置于平板PCR仪内进行扩增反应,即将芯片直接放置到平板PCR仪的样品基座内,盖上热盖,使目标芯片受力均匀,按实验需求设定温度参数和循环参数,启动运行,自动按设定参数进行PCR扩增过程;
6)完成扩增反应后,用微阵列芯片扫描仪对芯片进行扫描,获取生物信息。
所述步骤1)中引物试剂的注入以及所述步骤2)中待检样品的注入顺序可调换,所述多指标检测微流控SNP芯片中每个反应孔所需的样本试剂量为1μl。
本发明采用以上技术方案,其具有如下优点:1、本发明的系统包括多指标检测微流控SNP芯片、芯片覆膜仪、离心装置、芯片热封仪、平板PCR仪和微阵列芯片扫描仪,将待检样品的点样、覆膜、离心、热封、扩增反应以及结果扫描等一系列流程集为一体,能够实现待检样品高通量、灵活精准分型检测,提高生物样品检测效率,降低检测成本。2、本发明的芯片覆膜仪包括壳体和设置在所述壳体中的芯片装载模块、加热压模刀模块以及直线运动驱动模块,将芯片的基片和盖片放入芯片装载模块上,只要将芯片压模刀模块中的芯片模具刀加热至预设温度,在直线运动驱动模块提供覆膜压力下即可以将盖片覆在基片上,操作简单方便,覆膜工艺合理,能够有效提高样品检测效率。3、本发明的芯片热封仪包括芯片装载感应模块、电机滑轨控制模块、气动控制模块、加热压模刀模块、电源、气源和控制模块,各个模块相互配合完成对多指标检测微流控SNP芯片的热封处理,整个操作过程简单方便快捷,能够有效物理分离芯片的基片上的各反应孔,防止交叉感染,提高样品检测的准确性。4、本发明的多指标检测微流控SNP芯片的基片上设有四条主管道,每条主管道沿其长度方向连通24个反应孔,一次可实现多个位点的待检样本检测,具有典型的高通量、高效率性能的特点,同时,也适应最少1个位点的检测操作,应用灵活,提高整个系统的通用性。
附图说明
图1是本发明的多指标检测微流控SNP芯片的结构示意图;
图2是本发明的多指标检测微流控SNP芯片的另一结构示意图;
图3是本发明的芯片覆膜仪的结构示意图;
图4是本发明的芯片覆膜仪的内部结构示意图;
图5是本发明的芯片覆膜仪的加热压模刀模块的结构示意图;
图6是本发明的芯片覆膜仪的芯片装载模块的结构示意图;
图7是本发明的芯片热封仪的结构示意图;
图8是是本发明的芯片热封仪的芯片装载感应模块的结构示意图;
图9是本发明的芯片热封仪的芯片装载感应模块的芯片底盒板结构示意图;
图10是本发明的平板PCR仪的结构示意图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明进行详细的描述。
如图1~7、图10所示,本发明提供了一种易检的SNP/InDel分型检测系统,该系统包括多指标检测微流控SNP芯片1、芯片覆膜仪3、芯片热封仪5、平板PCR仪6、离心装置和微阵列芯片扫描仪。
如图1、图2所示,多指标检测微流控SNP芯片1包括基片10和盖片(图中未示出),基片10的上表面具有一条以上主管道11,每一主管道11呈上下蜿蜒的蛇形结构,每一主管道11的两端均设有加样孔12,两加样孔12均与主管道11相连通;在位于每一主管道11一侧的基片10上沿主管道11的长度方向间隔设置多个反应孔13,每一反应孔13通过一连接通道14与其对应侧的主管道11的蜿蜒底端相连通。
如图3~6所示,芯片覆膜仪3用于将盖片密封覆盖于基片10的上表面,其包括壳体31和设置在壳体31中的芯片装载模块32、加热压模刀模块33以及直线运动驱动模块34,壳体31包括底座311,芯片装载模块32包括芯片盒321,芯片盒321上设置有开口3211,加热压模刀模块33包括芯片压模331和平行设置在芯片压模331上方的压模转接板332,在芯片压膜331和压模转接板332之间设置有四根压膜导向轴333,芯片压模331的下端设置有用于伸入开口3211进行覆膜操作的芯片模具刀334,芯片压模331的上表面还固定设置有加热块335和用于固定加热块335的压板336,直线运动驱动模块34的输出端与压模转接板332连接。芯片覆膜仪3只需要将芯片模具刀334的温度达到预设温度后,在直线运动驱动模块34提供覆膜压力下即可以将盖片覆在基片10上,操作简单。
离心装置用于对点样、覆膜以及注试剂后的多指标检测微流控SNP芯片1进行离心处理,多指标检测微流控SNP芯片1放置在离心装置内,该多指标检测微流控SNP芯片1的基片10上的主管道11朝向离心装置的离心中心,基片10上的反应孔13相对于主管道11远离离心装置的中心位置。
如图7所示,芯片热封仪5包括芯片装载感应模块51、电机滑轨控制模块52、气动控制模块53、加热压膜刀模块54、电源、气源和控制模块;芯片装载感应模块51用于批量装载多指标检测微流控SNP芯片1,并自动识别装载的微流控SNP芯片数量和位置,电机滑轨控制模块52固定连接芯片装载感应模块51,用于带动芯片装载感应模块51进行运动实现对微流控SNP芯片的定位;气动控制模块53固定连接加热压膜刀模块54,用于带动加热压膜刀模块54进行运动,使得加热压膜刀模块54正对微流控SNP芯片;加热压膜刀模块54用于对芯片压膜刀进行加热到预设温度,对微流控SNP芯片均匀热封阻断操作,实现对微流控SNP芯片的热封;电源用于为便捷芯片热封仪进行供电;气源用于为气动控制模块53提供工作气体;控制模块连接芯片装载感应模块51、电机滑轨控制模块52、气动控制模块53和加热压膜刀模块54,对各模块的工作过程进行控制。芯片热封仪5用于对离心处理后的芯片进行热封处理,即利用芯片热封仪5对连接通道14上方的盖片进行热压,使其局部变形与对应下部的基片10融合,从而将连接管道14的局部或全部堵塞达到物理隔离各个反应孔13的目的,将前期已经物理分离的独立反应孔进行完全物理热封阻断,形成密闭的独立反应孔13。
如图10所示,平板PCR仪6用于将芯片热封仪5处理后的芯片放置于其内进行扩增反应,因芯片各反应孔13密封,互不干扰,从而防止在PCR试剂的挥发,阻断交叉感染,有效保证后面PCR反应结果可靠性。
微阵列芯片扫描仪用于对PCR扩增反应后的多指标检测微流控SNP芯片1进行扫描,获取生物信息。
进一步地,还包括分型模块,该分型模块包括分型软件,将微阵列芯片扫描仪的扫描结果输入分型软件进行最后的分型处理,得出检测结果。
进一步地,多指标检测微流控SNP芯片1的基片10上的主管道11为四条,每条主管道11沿其长度方向连通24个反应孔13,即形成96孔的多指标检测微流控SNP芯片1。
进一步地,离心装置可采用台式多功能离心机,台式多功能离心机的水平转子上具有芯片适配器,将多指标检测微流控SNP芯片1插入芯片适配器内,保持芯片的基片10上的主管道11朝向离心机的中心,反应孔13相比于主管道11远离离心机的中心,设定转速和时间,运行离心,被注入充满主管道11中的待检样本在离心力的作用下通过连接通道被快速均匀地分配到反应孔中,使每一个反应孔均充满待检样本,待检样本实现物理分离,为了避免气泡对实验检测的影响,待测样本不仅充满反应孔,而且有适量的溢出,适量溢出刚好充满连接管道,为下一步热封做好充分准备。该台式多功能离心机单次最多可同时对16个微流控芯片的离心,一次最多实现对1536个位点(即反应孔13)的待检样本实现离心注入,具有典型的高通量、高效率性能。也适应最少1个位点的检测操作,应用灵活。
进一步地,芯片装载感应模块51可以同时装载1~4块微流控SNP芯片,以此为例,不限于此,可以根据实际操作确定SNP芯片的装载数量,当芯片装载感应模块51同时装载4块微流控SNP芯片时,芯片热封仪5单次几十秒即可实现4块微流控芯片的物理热封阻断,最多可形成384个独立反应小孔样本室,则芯片处理通量每小时可达到300片4组,这样高通量、高效率的处理芯片,能够有效提高样品检测效率。
进一步地,如图8、图9所示,芯片装载感应模块51包括光电传感器511、芯片盒底板512和芯片盒盖板513;芯片盒底板512顶部间隔设置有若干个芯片装载槽514,芯片装载槽514的数量设置为四个,以此为例,但不限于此,每一芯片装载槽514的一端开设有用于放置光电传感器511的U型口515,光电传感器511用于检测装载微流控SNP芯片信号并发送到控制模块,控制模块根据光电传感器511检测信号判断微流控SNP芯片是否装载到位,核准装载微流控SNP芯片的数量。每一芯片装载槽514的另一端开设有V型口516,V型口516以及外端面设置为斜面结构,保证装载微流控SNP芯片手持空间和便于快速装载芯片,免去了繁杂的找准插口动作。芯片盒底板512的底部中心开设有用于与电机滑轨控制模块52进行固定插设的U型槽517,对应于U型口517的位置,芯片盒底板512的底部一侧还设置有用于电连接光电传感器511的芯片装载检测板518,对应于芯片装载槽514的位置,芯片盒底板512顶部还固定连接若干用于对微流控SNP芯片进行压设的芯片盒盖板513。
基于上述的一种易检的SNP/InDel分型检测系统,本发明还提供了一种易检的SNP/InDel分型检测系统的使用方法,其包括以下步骤:
1)在多指标检测微流控SNP芯片1的基片10上的反应孔13内进行点样,完成引物试剂注入;
2)将完成点样后的基片10和盖片同时放入芯片覆膜仪3内,芯片覆膜仪3将盖片均匀覆盖于基片10的上表面,在基片10上形成多条密封的主管道11,使用TIP头通过加样孔12向主管道11内注入待测样品,待检样品充满主管道11完成加样后通过胶粘密封方式将加样孔12密封;
3)将点样风干、覆膜、注入待检样品的芯片放置在离心装置上,同时,保持芯片的基片10上的主管道11朝向离心装置的离心中心,反应孔13相比于主管道11远离离心装置的离心中心,在离心装置的作用下,使充满主管道11中的待检样本在离心力的作用下通过连接通道14被均匀地分配到反应孔13中;
4)将离心处理后的芯片放置在芯片热封仪5内,通过热压的方式使连接管道14上方的盖片局部变形与对应下方的基片10融合,使得连接管道14的局部或全部堵塞以达到物理隔离各个反应孔13;
5)将热封后的芯片放置于平板PCR仪6内进行扩增反应,即将芯片直接放置到平板PCR仪6的样品基座内,盖上热盖,使目标芯片受力均匀,按实验需求设定温度参数和循环参数(即PCR扩增程序),启动运行,自动按设定参数进行PCR扩增过程;整个操作过程简单易行,在1.5小时内自动完成PCR扩增反应过程—升温、降温、保持循环往复的过程,芯片上直扩,省去常规扩增反应中多伦摆管开盖的繁琐操作。
6)完成扩增反应后,用微阵列芯片扫描仪对芯片进行扫描,获取生物信息。
进一步地,多指标检测微流控芯片能够适用于多样品的检测,同时,可根据实际需求,也适用于少样本甚至1个样本的检测,在少样品点样时,可以采用手动点样;如果是样本数量较多,该微流控芯片可以采用自动化点样仪进行快速点样;该微流控芯片中每个反应孔13所需的样本试剂量只需1μl,节约样本,大大节省了成本。
进一步地,在步骤1)中引物试剂的注入以及步骤2)中待检样品的注入顺序可调换。
本发明仅以上述实施例进行说明,各部件的结构、设置位置及其连接都是可以有所变化的。在本发明技术方案的基础上,凡根据本发明原理对个别部件进行的改进或等同变换,均不应排除在本发明的保护范围之外。

Claims (8)

1.一种易检的SNP/InDel分型检测系统,其特征在于,它包括:
多指标检测微流控SNP芯片,所述多指标检测微流控SNP芯片包括基片和盖片,所述基片的上表面具有一条以上主管道,每一所述主管道呈上下蜿蜒的蛇形结构,每一所述主管道的两端均设有加样孔,两所述加样孔均与所述主管道相连通,在位于每一所述主管道一侧的基片上沿主管道的长度方向间隔设置多个反应孔,每一所述反应孔通过一连接通道与其对应侧的所述主管道的蜿蜒底端相连通;
芯片覆膜仪,所述芯片覆膜仪用于将所述盖片密封覆盖于所述基片的上表面;
离心装置,所述离心装置用于对点样、覆膜以及注试剂后的所述多指标检测微流控SNP芯片进行离心处理;
芯片热封仪,所述芯片热封仪用于对离心处理后的所述多指标检测微流控SNP芯片进行热封处理;平板PCR仪,所述平板PCR仪用于将所述芯片热封仪处理后的所述多指标检测微流控SNP芯片放置于其内进行扩增反应;
微阵列芯片扫描仪,所述微阵列芯片扫描仪用于对PCR扩增反应后的所述多指标检测微流控SNP芯片进行扫描,获取生物信息;
所述芯片热封仪包括芯片装载感应模块、电机滑轨控制模块、气动控制模块、加热压膜刀模块、电源、气源和控制模块;所述芯片装载感应模块用于批量装载所述多指标检测微流控SNP芯片,并自动识别装载的所述多指标检测微流控SNP芯片的数量和位置;所述电机滑轨控制模块固定连接所述芯片装载感应模块,用于带动所述芯片装载感应模块进行运动实现对所述多指标检测微流控SNP芯片的定位;所述气动控制模块固定连接所述加热压膜刀模块,用于带动加热压膜刀模块进行运动,使得所述加热压膜刀模块正对所述多指标检测微流控SNP芯片;所述加热压膜刀模块用于对芯片压膜刀进行加热到预设温度,对所述多指标检测微流控SNP芯片均匀热封阻断操作,实现对所述多指标检测微流控SNP芯片的热封;所述电源用于为各模块进行供电;所述气源用于为所述气动控制模块提供工作气体;所述控制模块连接所述芯片装载感应模块、电机滑轨控制模块、气动控制模块和加热压膜刀模块,对各模块的工作过程进行控制;
所述芯片装载感应模块包括光电传感器、芯片盒底板和芯片盒盖板;所述芯片盒底板顶部间隔设置有若干个芯片装载槽,每一所述芯片装载槽的一端开设有用于放置所述光电传感器的U型口,所述光电传感器用于检测装载的所述多指标检测微流控SNP芯片信号并发送到所述控制模块,所述控制模块根据所述光电传感器的检测信号判断所述多指标检测微流控SNP芯片是否装载到位,核准装载微流控SNP芯片的数量;每一所述芯片装载槽的另一端开设有V型口,所述芯片盒底板的底部中心开设有用于与所述电机滑轨控制模块进行固定插设的U型槽;对应于所述U型口的位置,所述芯片盒底板的底部一侧还设置有用于电连接所述光电传感器的芯片装载检测板;对应于所述芯片装载槽的位置,所述芯片盒底板顶部还固定连接若干用于对微流控SNP芯片进行压设的所述芯片盒盖板。
2.如权利要求1所述的一种易检的SNP/InDel分型检测系统,其特征在于:所述芯片覆膜仪包括壳体和设置在所述壳体中的芯片装载模块、加热压模刀模块以及直线运动驱动模块,所述壳体包括底座,所述芯片装载模块包括芯片盒,所述芯片盒上设置有开口,所述加热压模刀模块包括芯片压模和平行设置在所述芯片压模上方的压模转接板,在所述芯片压膜和压模转接板之间设置有四根压膜导向轴,所述芯片压模的下端设置有用于伸入所述开口进行覆膜操作的芯片模具刀,所述芯片压模的上表面还固定设置有加热块和用于固定所述加热块的压板,所述直线运动驱动模块的输出端与所述压模转接板连接。
3.如权利要求1所述的一种易检的SNP/InDel分型检测系统,其特征在于:所述离心装置采用台式多功能离心机,所述台式多功能离心机的水平转子上具有芯片适配器,将所述多指标检测微流控SNP芯片插入所述芯片适配器内,保持所述基片上的主管道朝向所述台式多功能离心机的中心,所述反应孔相比于所述主管道远离所述台式多功能离心机的中心。
4.如权利要求1所述的一种易检的SNP/InDel分型检测系统,其特征在于:还包括分型模块,所述分型模块包括分型软件,将所述微阵列芯片扫描仪的扫描结果输入所述分型软件进行最后的分型处理,得出检测结果。
5.如权利要求1所述的一种易检的SNP/InDel分型检测系统,其特征在于:所述基片上的主管道为四条,每条所述主管道沿其长度方向连通24个所述反应孔。
6.如权利要求1所述的一种易检的SNP/InDel分型检测系统,其特征在于:所述芯片装载槽的数量设置为四个,所述V型口的外端面设置为斜面结构。
7.一种基于权利要求1至6任一项所述的易检的SNP/InDel分型检测系统的使用方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)在多指标检测微流控SNP芯片的基片上的反应孔内进行点样,完成引物试剂注入;
2)将完成点样后的基片和盖片同时放入芯片覆膜仪内,芯片覆膜仪将盖片均匀覆盖于基片的上表面,在基片上形成多条密封的主管道,使用TIP头通过加样孔向主管道内注入待测样品,待检样品充满主管道完成加样后通过胶粘密封方式将加样孔密封;
3)将点样风干、覆膜、注入待检样品的芯片放置在离心装置上,同时,保持芯片的基片上的主管道朝向离心装置的离心中心,反应孔相比于主管道远离离心装置的离心中心,在离心装置的作用下,使充满主管道中的待检样本在离心力的作用下通过连接通道被均匀地分配到反应孔中;
4)将离心处理后的芯片放置在芯片热封仪内,通过热压的方式使连接管道上方的盖片局部变形与对应下方的基片融合,使得连接管道的局部或全部堵塞以达到物理隔离各个反应孔;
5)将热封后的芯片放置于平板PCR仪内进行扩增反应,即将芯片直接放置到平板PCR仪的样品基座内,盖上热盖,使目标芯片受力均匀,按实验需求设定温度参数和循环参数,启动运行,自动按设定参数进行PCR扩增过程;
6)完成扩增反应后,用微阵列芯片扫描仪对芯片进行扫描,获取生物信息。
8.如权利要求7所述的一种易检的SNP/InDel分型检测系统的使用方法,其特征在于:所述步骤1)中引物试剂的注入以及所述步骤2)中待检样品的注入顺序可调换,所述多指标检测微流控SNP芯片中每个反应孔所需的样本试剂量为1μl。
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