CN108289477A - 增加饲料中脂溶性维生素吸收的方法 - Google Patents

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Abstract

本披露涉及通过增加脂肪消化率来增加来自动物饲料的脂溶性维生素的吸收的方法和组合物。

Description

增加饲料中脂溶性维生素吸收的方法
技术领域
本披露涉及通过增加脂肪消化率来增加来自动物饲料的脂溶性维生素的吸收的方法和组合物。
背景技术
维生素是健康动物饮食的必要组分。大多数维生素不能由动物合成，并且因此必须通过动物饲料摄取。很多动物不能通过单独的饮食获得足够水平的维生素，并且因此农民使用维生素预混物来补充动物饮食。这可能成本很贵并且需要另外的成分例如合成的抗氧化剂(例如乙氧喹啉或二叔丁基对甲酚(BHT))，以便改善维生素的储存稳定性(TheVitamins[维生素]，由Gerald F.Combs著)。因此，仍然需要发现动物从饲料中获得增加的维生素吸收的改善的方式。
发明内容
本发明的组合物和方法涉及用一种或多种酶处理动物来增加脂溶性维生素吸收的方法。
在一些实施例中，本发明是改善来自饲料的动物脂溶性维生素吸收的方法，该方法包括向动物给予淀粉酶或蛋白酶。可以通过肝脏中脂溶性维生素的水平来测量该方法。在一些实施例中，该脂溶性维生素是维生素A、E、D或K。
在一些实施例中，该方法进一步包括给予木聚糖酶。在一些实施例中，该动物是单胃动物，例如家禽、猪、鱼、贝类(shell fish)、人类或宠物。
在一些实施例中，该动物是反刍动物，例如牛、绵羊、山羊、骆驼、鹿、美洲驼、羚羊、羊驼或牛羚。
在一些实施例中，本发明是处于动物饲料或预混物的形式。在一些实施例中，该淀粉酶或蛋白酶在动物饲料或预混物中给予。在一些实施例中，该淀粉酶或蛋白酶按颗粒形式给予。在一些实施例中，该淀粉酶或蛋白酶按液体形式给予。
在一些实施例中，本发明是改善动物免疫功能、改善动物肉质、改善动物胃肠道健康、或减少动物生育障碍的方法，该方法包括向该动物给予木聚糖酶。在一些实施例中，该木聚糖酶按足以将肝脏维生素E水平增加10％的剂量给予。在一些实施例中，本发明是动物饲料，该动物饲料包含小于500％的推荐剂量的维生素E和木聚糖酶。在一些实施例中，本发明是动物饲料，该动物饲料包含小于500％的推荐剂量的维生素E、和淀粉酶或蛋白酶。
具体实施方式
已经显示，当喂养动物时，脂溶性维生素具有有益的效果。动物饲料工业利用维生素补充剂以便改善动物健康和肉的质量。可以在天然来源中发现这些维生素中的一些。例如，可以在草、三叶草、苜蓿、和包含植物油的其他天然来源中发现维生素E。动物典型地不能完全消化天然饲料来源(例如谷物)以释放饲料来源中的维生素。我们已经发现，在动物饲料补充剂中使用淀粉酶和/或蛋白酶可以增加动物中脂溶性维生素吸收的水平。我们已经进一步发现，在动物饲料补充剂中淀粉酶和/或蛋白酶与木聚糖酶的组合产生更大水平的脂溶性维生素吸收。
维生素E是描述基于生育酚或生育三烯酚的各种化合物的通用术语。α-生育酚是维生素E饲料补充剂中的活性物质。α-生育酚可以从天然来源获得，或从化学过程合成。化学合成的α-生育酚是八种立体异构体的外消旋混合物，并且不同于天然存在的α-生育酚(RRR-α-生育酚)。天然α-生育酚衍生自植物油，并且可以发现于诸如小麦胚芽油、草、三叶草、苜蓿、未压碎的油料种子、植物油、肝脏、和蛋等来源。
已经显示，维生素E具有各种生物学功能，包括但不限于生物学脂溶性抗氧化剂、免疫系统刺激剂、DNA合成的调节、抗毒素效应(自由基淬灭剂)、组织保护、生殖器官的正常发育、和基因表达的调节。在动物中，维生素E可以具有若干效应，包括但不限于改进的免疫应答、动物产品中组织和脂肪的稳定、和怀孕准备以及维持生殖器官的完整性和最佳功能。长期以来一直向动物喂养大量的维生素E用于改善免疫功能和肉质。在一些实施例中，给予维生素E可以改善动物胃肠道健康。在一些实施例中，给予维生素E可以改善动物脂肪消化率。
在维生素E缺乏的动物中，已经观察到诸如肌肉萎缩、生育障碍、和减少的免疫应答等效应。在反刍动物中，维生素E缺乏已经与羔羊僵硬病、胎盘滞留、和增加的乳腺炎有关。在猪中，维生素E缺乏已经与桑椹心病、母猪中的乳腺炎、子宫炎和无乳症(MMA)、香蕉病(banana disease)、和黄脂病有关。在家禽中，维生素E缺乏已经与肌肉萎缩症、脑软化症(疯雏症)、黄脂病、和减小的孵化率有关。在狗中，维生素E缺乏已经与肌肉变性、妊娠失败、和虚弱或死亡的幼崽。
I.定义
在详细地描述本发明的组合物和方法之前，为了清楚起见定义以下术语。未定义的术语和缩写应当符合本领域中所使用的常规含义。除非本文另有定义，否则本文所使用的全部科技术语都具有如本领域普通技术人员通常理解的相同含义。除非另有说明，本披露的实践涉及通常用于分子生物学、蛋白质工程和微生物学的常规技术。尽管与本文所述方法和材料类似或等同的任何方法和材料可用于本披露的实践中，但是本文描述了一些适合的方法和材料。把说明书作为一个整体参考时，以下即将定义的术语得以更全面地定义。
除非上下文另有明确指示，如本文所使用的，单数“一个/一种”(a/an)和“该/所述”(the)包括复数。除非另有说明，否则核酸序列从左至右以5'至3’方向书写；并且氨基酸序列从左向右以氨基至羧基方向书写。应当理解的是，在没有相反指示的情况下，本披露不限于本文所述的具体方法、方案和试剂。
在本说明书全文中给出的每一最大数值限度旨在包括每一较低数值限度，如同此类较低数值限度在本文中明确写出一样。在本说明书全文中给出的每一最小数值限度将包括每一较高数值限度，如同此类较高数值限度在本文中明确写出一样。在本说明书全文中给出的每一数值范围将包括落入此类较宽数值范围内的每一较窄数值范围，如同此类较窄数值范围在本文中全部明确写出一样。
如本文所使用的，关于数值，术语“约”是指数值的+/-0.5的范围，除非术语在上下文中另有具体定义。例如，短语“约6的pH值”是指pH值为从5.5至6.5，除非pH值另有具体定义。
如本文所使用的，术语“维生素A”包括不饱和营养有机化合物视黄醇、视黄醛、视黄酸、前维生素A类胡萝卜素、视黄酯、和β-胡萝卜素。已知维生素A具有附接至类异戊二烯链的β-紫罗兰酮环。
如本文所使用的，术语“维生素E”是指基于生育酚或生育三烯酚的一组化合物，并且包括α-生育酚。
如本文所使用的，术语“维生素D”是指拥有抗佝偻病活性的一组化合物，并且包括钙化醇(维生素D2)和胆钙化醇(维生素D3)。
如本文所使用的，术语“维生素K”包括亚硫酸氢钠甲萘醌和亚硫酸氢烟酰胺甲萘醌的形式。
如本文所使用的，“芽孢杆菌属”包括如本领域技术人员已知的“芽孢杆菌”属内的所有物种，包括但不限于：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、迟缓芽胞杆菌、短芽孢杆菌、嗜热脂肪芽胞杆菌、嗜碱芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌、耐盐芽孢杆菌(B.halodurans)、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、吉氏芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌。据认识，芽孢杆菌属继续经历分类学重组。因此，该属旨在包括已重新分类的物种，包括但不限于：例如嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)(现在称为“嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)”)或多粘芽孢杆菌(Bacilluspolymyxa)(现在是“多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)”)的此类生物体。在胁迫环境条件下的抗性内生孢子的产生被认为是芽孢杆菌属的定义性特性，尽管这个特征也适用于最近命名的脂环酸芽孢杆菌属、双芽孢杆菌属(Amphibacillus)、硫胺素芽孢杆菌属(Aneurinibacillus)、厌氧芽孢杆菌属(Anoxybacillus)、短芽孢杆菌属、线性杆菌属(Filobacillus)、薄壁芽孢杆菌属(Gracilibacillus)、喜盐芽孢杆菌属(Halobacillus)、类芽孢杆菌属、需盐芽孢杆菌属(Salibacillus)、耐热芽孢杆菌属(Thermobacillus)、脲芽胞杆菌属(Ureibacillus)和枝芽孢杆菌属(Virgibacillus)。
“蛋白质”或“多肽”包含氨基酸残基的聚合序列。术语“蛋白质”和“多肽”在本文中可互换地使用。贯穿本披露使用了遵照IUPAC-IUB生物化学术语联合委员会(JointCommission on Biochemical Nomenclature，JCBN)定义的氨基酸的单字母和3字母代码。单字母X是指二十个氨基酸中的任一个。还应当理解，由于遗传密码的简并性，多肽可以由多于一种核苷酸序列编码。突变可以由亲本氨基酸的单个字母代码命名，随后是位置编号，然后是变体氨基酸的单个字母代码。例如，将在位置87处的甘氨酸(G)突变为丝氨酸(S)表示为“G087S”或“G87S”。
术语“成熟”形式的蛋白质、多肽或肽是指没有信号肽序列和前肽序列的蛋白质、多肽或肽的功能形式。
术语“前体”形式的蛋白质或肽是指具有有效地连接到该蛋白质的氨基或羧基末端的原序列的成熟形式的蛋白质。前体还可以具有有效地连接到原序列的氨基末端的“信号”序列。前体还可以具有涉及翻译后活性的另外的多肽(例如，从其切割以留下成熟形式的蛋白质或肽的多肽)。
关于氨基酸序列或核酸序列，术语“野生型”表示氨基酸序列或核酸序列是天然的或天然存在的序列。如本文所使用的，术语“天然存在的”是指在自然界中发现的任何物质(例如蛋白质、氨基酸或核酸序列)。相反，术语“非天然存在”是指在自然界中没有发现的任何物质(例如，在实验室中生产的重组核酸和蛋白质序列、或野生型序列的修饰)。
术语“衍生自”和“获自”不仅是指由所讨论的生物体的菌株生产或可以由其生产的蛋白质，而且是指由从此类菌株分离的DNA序列编码并且在含有此类DNA序列的宿主生物体中生产的蛋白质。另外，该术语是指由合成的和/或cDNA来源的DNA序列编码并且具有所讨论的蛋白质的鉴定特征的蛋白质。举例来说，“来源于芽孢杆菌属的蛋白酶”是指具有由芽孢杆菌属天然生产的蛋白水解活性的那些酶，以及丝氨酸蛋白酶，如由芽孢杆菌属来源生产但是通过使用遗传工程技术由用编码丝氨酸蛋白酶的核酸转化的其他宿主细胞生产的那些。
在两个多核苷酸或多肽序列的上下文中，术语“同一性”是指在两个序列中的核酸或氨基酸在比对最大对应关系时相同，如使用以下描述的或本领域已知的序列比较或分析算法测量的。
如本文所使用的，“％同一性”或“百分比同一性”或“PID”是指蛋白质序列同一性。百分比同一性可以使用本领域已知的标准技术来确定。有用的算法包括BLAST算法(参见，Altschul等人，J Mol Biol[分子生物学杂志]，215:403-410，1990；以及Karlin和Altschul，Proc Natl Acad Sci USA[美国科学院院刊]，90:5873-5787，1993)。BLAST程序使用多个搜索参数，其中大部分设置为默认值。NCBI BLAST算法按照生物相似性找到最相关的序列，但是不推荐用于少于20个残基的查询序列(Altschul等人，Nucleic Acids Res[核酸研究]，25:3389-3402，1997；以及Schaffer等人，Nucleic Acids Res.[核酸研究]29:2994-3005，2001)。核酸序列搜索的示例性默认BLAST参数包括：相邻字长阈值＝11；E值截止值＝10；打分矩阵(Scoring Matrix)＝NUC.3.1(匹配＝1，错配＝-3)；空位开放(GapOpening)＝5；以及空位延伸＝2。氨基酸序列搜索的示例性默认BLAST参数包括：字长大小＝3；E值截止值＝10；打分矩阵＝BLOSUM62；空位开放＝11；以及空位延伸＝1。百分比(％)氨基酸序列同一性值由匹配相同残基的数值除以“参比”序列的残基总数(包括由程序为最佳/最大比对创建的任何空位)来确定。BLAST算法将“参比”序列称为“查询”序列。
如本文所使用的，“同源蛋白质”或“同源蛋白酶”是指在一级、二级和/或三级结构中具有不同相似性的蛋白质。当比对蛋白质时，蛋白质同源性可以是指线性氨基酸序列的相似性。蛋白质序列的同源搜索可以使用来自NCBI BLAST的BLASTP和PSI-BLAST使用阈值(E值截止值)0.001进行。(Altschul SF、Madde TL、Shaffer AA、Zhang J、Zhang Z、MillerW、Lipman DJ，Gapped BLAST and PSI BLAST a new generation of protein databasesearch programs[空位BLAST和PSI BLAST：新一代蛋白质数据库搜索程序]，NucleicAcids Res[核酸研究]1997年第1组；25(17):3389-402)。使用该信息，可以将蛋白质序列分组。可以使用氨基酸序列构建系统发生树。可以在例如Vector NTI Advance套件等程序中输入氨基酸序列，并且可以使用邻接(Neighbor Joining，NJ)法创建引导树(Saitou和Nei，Mol Biol Evol[分子生物学与进化]，4:406-425，1987)。可以使用针对序列距离的木村(Kimura)校正并且忽略具有空位的位置来计算树结构。程序例如AlignX可以在系统发生树上显示的分子名称之后的括号内显示计算的距离值。
了解分子之间的同源性可以揭示分子的进化历史以及它们的功能信息；如果新测序的蛋白质与已经表征的蛋白质同源，则存在新蛋白质的生物化学功能的强烈指示。两个实体之间最基本的关系是同源性；如果两个分子来源于共同的祖先，则它们被称为是同源的。同源分子或同系物可以分为两类，旁系同源物和直系同源物。旁系同源物是存在于一个物种内的同系物。旁系同源物在它们的详细生物化学功能上往往不同。直系同源物是存在于不同物种内并且具有非常相似或完全相同功能的同系物。蛋白质超家族是可以推断出共同祖先的蛋白质的最大分组(进化枝)。通常这个共同祖先是基于序列比对和机械相似性。典型地，超家族包含几个在该家族内显示序列相似性的蛋白质家族。基于MEROPS蛋白酶分类系统，术语“蛋白质宗族”通常用于蛋白酶超家族。
CLUSTAL W算法是序列比对算法的另一个实例(参见Thompson等人，NucleicAcids Res[核酸研究]，22:4673-4680，1994)。CLUSTAL W算法的默认参数包括：空位开放罚分＝10.0；空位延伸罚分＝0.05；蛋白质重量矩阵＝BLOSUM系列；DNA重量矩阵＝IUB；延迟发散序列％＝40；空位分隔距离＝8；DNA转换重量＝0.50；列表亲水残基＝GPSNDQEKR；使用负性矩阵＝关；切换特殊残基罚分＝开；切换亲水罚分＝开；以及切换结束空位分隔罚分＝关。在CLUSTAL算法中，包括在任一末端发生的缺失。例如，500个氨基酸的多肽的任一末端(或多肽内)具有5个氨基酸缺失的变体相对于“参比”多肽具有99％(495/500个相同残基×100)的百分比序列同一性。这样的变体将被与该多肽具有“至少99％的序列同一性”的变体所涵盖。
当核酸或多核苷酸至少部分或完全地与其他组分(包括但不限于例如其他蛋白质、核酸、细胞等)分离时，该核酸或多核苷酸是“分离的”。类似地，当多肽、蛋白质或肽至少部分或完全地与其他组分(包括但不限于例如其他蛋白质、核酸、细胞等)分离时，该多肽、蛋白质或肽是“分离的”。以摩尔计，在组合物中分离的种类比其他种类更丰富。例如，分离的种类可以包含存在的所有大分子种类的至少约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％、或约100％(以摩尔计)。优选地，将感兴趣的种类纯化至基本均一性(即，通过常规检测方法不能在组合物中检测到污染物种类)。可以分别使用本领域熟知的许多技术例如核酸或蛋白质样品的琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳，接着通过染色后可视化来确定纯度和均一性。如果需要，可以使用高分辨率技术例如高效液相色谱法(HPLC)或类似方法来纯化物质。
术语“纯化的”如应用于核酸或多肽时通常表示基本上不含其他组分的核酸或多肽，如通过本领域熟知的分析技术确定的(例如，纯化的多肽或多核苷酸在电泳凝胶、色谱洗脱液和/或经历密度梯度离心的介质中形成离散的带)。例如，在电泳凝胶中产生基本上一条带的核酸或多肽是“纯化的”。纯化的核酸或多肽是至少约50％纯的，通常是至少约约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％、约99.5％、约99.6％、约99.7％、约99.8％或更加纯的(例如，以摩尔计的重量百分比)。在相关意义上，当在应用纯化或富集技术之后存在一种分子的浓度的大幅度增加时，对于该分子而言组合物被富集了。术语“富集”是指化合物、多肽、细胞、核酸、氨基酸或其他特定物质或组分以高于起始组合物的相对或绝对浓度存在于组合物中。
II.增加脂溶性维生素吸收的方法
在一些实施例中，本发明是改善来自饲料的动物脂溶性维生素吸收的方法，该方法包括向动物给予淀粉酶或蛋白酶。在一些实施例中，该动物脂溶性维生素吸收通过肝脏中脂溶性维生素的水平来测量。例如，肝脏维生素E测定(例如在实例中显示的)可以用于评估肝脏维生素E含量。
在一些实施例中，改善的动物脂溶性维生素吸收是维生素A、E、D或K的改善的吸收。在一些实施例中，改善的吸收是维生素A的改善的吸收。在一些实施例中，改善的吸收是维生素E的改善的吸收。在一些实施例中，改善的吸收是维生素D的改善的吸收。在一些实施例中，改善的吸收是维生素K的改善的吸收。
在一些实施例中，本发明是改善来自饲料的动物脂溶性维生素吸收的方法，该方法包括向动物给予淀粉酶和蛋白酶。在一些实施例中，本发明进一步包括给予木聚糖酶。
在一些实施例中，该动物是单胃动物或反刍动物。在一些实施例中，该动物是单胃动物。单胃动物包括家禽(例如肉鸡、蛋鸡、肉鸡种鸡、火鸡、鸭、鹅、水禽)、猪(所有年龄类别)、鱼、贝类包括甲壳纲动物(例如虾)、人类、宠物(例如狗、猫)。在一些实施例中，该动物是反刍动物。反刍动物的实例包括牛(例如奶牛、水牛、野牛、牦牛)、绵羊、山羊、骆驼、鹿、美洲驼、羚羊、羊驼或牛羚。
在一些实施例中，本发明是改善动物免疫功能、动物肉质、或动物胃肠道健康、或减少动物生育障碍的方法，该方法包括向动物给予木聚糖酶。不受理论的约束，改善的动物免疫功能、动物肉质、或动物胃肠道健康、或减少的动物生育障碍归因于来自饲料的动物脂溶性维生素吸收增加，例如维生素E吸收增加。
在一些实施例中，本发明是改善动物免疫功能、动物肉质、或动物胃肠道健康、或减少动物生育障碍的方法，该方法包括向动物给予木聚糖酶并且进一步包括给予淀粉酶或蛋白酶。在一些实施例中，本发明是改善动物免疫功能、动物肉质、或动物胃肠道健康、或减少动物生育障碍的方法，该方法包括向动物给予木聚糖酶并且进一步包括给予淀粉酶和蛋白酶。
在一些实施例中，本发明进一步包括给予一种或多种另外的酶。在一些实施例中，一种或多种另外的酶选自下组，该组由以下组成：涉及蛋白质降解的那些，包括羧肽酶(优选地羧肽酶A、羧肽酶Y)、黑曲霉天冬氨酸蛋白酶(PEPAa、PEPAb、PEPAc和PEPAd)、弹性蛋白酶、氨基肽酶、胃蛋白酶或胃蛋白酶样蛋白酶、胰蛋白酶或胰蛋白酶样蛋白酶、酸性真菌蛋白酶和细菌蛋白酶(包括枯草杆菌蛋白酶及其变体)；以及涉及淀粉代谢、纤维降解、脂质代谢的那些；涉及糖原代谢的蛋白质或酶；降解其他污染物的酶；乙酸酯酶、淀粉酶、阿拉伯糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、外切和内切肽酶、过氧化氢酶、纤维素酶、几丁质酶、凝乳酶、角质酶、脱氧核糖核酸酶、差向异构酶、酯酶、甲酰胺酶、半乳糖苷酶(例如α或β-半乳糖苷酶)、外切葡聚糖酶、葡聚糖裂解酶、内切葡聚糖酶、葡糖淀粉酶、葡萄糖氧化酶、葡糖苷酶(例如α或β-葡糖苷酶)、葡萄糖醛酸酶、半纤维素酶、水解酶、转化酶、异构酶、漆酶、酚氧化酶、脂肪酶、裂解酶、甘露糖苷酶、氧化酶、氧化还原酶、果胶酶、果胶酸裂解酶、果胶乙酰酯酶、果胶解聚酶、肽酶、果胶甲基酯酶、果胶分解酶、过氧化物酶、酚氧化酶、植酸酶、聚半乳糖醛酸酶、鼠李糖-半乳糖醛酸酶、核糖核酸酶、奇异果甜蛋白、转移酶、转运蛋白、转谷氨酰胺酶、木聚糖酶、己糖氧化酶(D-己糖：(3/4-氧化还原酶，EC 1.1.3.5)、酸性磷酸酶和/或其他酶或其组合。这些包括例如调节组合物或饲料的粘度的酶。
在一些实施例中，本发明是改善动物免疫功能、动物肉质、或动物胃肠道健康、或减少动物生育障碍的方法，该方法包括向动物给予木聚糖酶，其中该木聚糖酶按足以将肝脏维生素E水平增加5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、100％或更多的剂量给予。例如，可以通过肝脏维生素E测定(例如在实例中显示的)测量增加的肝脏维生素E的水平。
在一些实施例中，本发明是改善动物免疫功能、动物肉质、或动物胃肠道健康、或减少动物生育障碍的方法，该方法包括向动物给予木聚糖酶并且另外给予淀粉酶或蛋白酶，其中木聚糖酶和淀粉酶或蛋白酶按足以将肝脏维生素E水平增加5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、100％或更多的剂量给予。在一些实施例中，该方法包括给予木聚糖酶、以及淀粉酶和蛋白酶二者。
在一些实施例中，本发明是改善动物免疫功能、动物肉质、或动物胃肠道健康、或减少动物生育障碍的方法，该方法包括向动物给予淀粉酶或蛋白酶，其中淀粉酶或蛋白酶按足以将肝脏维生素E水平增加5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、100％或更多的剂量给予。在一些实施例中，该方法包括给予淀粉酶和蛋白酶。
在一些实施例中，本发明是如在以上实施例中的任一个中所述的改善动物免疫功能、动物肉质、或动物胃肠道健康、或减少动物生育障碍的方法，该方法进一步包括给予一种或多种另外的酶。在一些实施例中，一种或多种另外的酶选自下组，该组由以下组成：涉及蛋白质降解的那些，包括羧肽酶(优选地羧肽酶A、羧肽酶Y)、黑曲霉天冬氨酸蛋白酶(PEPAa、PEPAb、PEPAc和PEPAd)、弹性蛋白酶、氨基肽酶、胃蛋白酶或胃蛋白酶样蛋白酶、胰蛋白酶或胰蛋白酶样蛋白酶、酸性真菌蛋白酶和细菌蛋白酶(包括枯草杆菌蛋白酶及其变体)；以及涉及淀粉代谢、纤维降解、脂质代谢的那些；涉及糖原代谢的蛋白质或酶；降解其他污染物的酶；乙酸酯酶、淀粉酶、阿拉伯糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、外切和内切肽酶、过氧化氢酶、纤维素酶、几丁质酶、凝乳酶、角质酶、脱氧核糖核酸酶、差向异构酶、酯酶、甲酰胺酶、半乳糖苷酶(例如α或β-半乳糖苷酶)、外切葡聚糖酶、葡聚糖裂解酶、内切葡聚糖酶、葡糖淀粉酶、葡萄糖氧化酶、葡糖苷酶(例如α或β-葡糖苷酶)、葡萄糖醛酸酶、半纤维素酶、水解酶、转化酶、异构酶、漆酶、酚氧化酶、脂肪酶、裂解酶、甘露糖苷酶、氧化酶、氧化还原酶、果胶酶、果胶酸裂解酶、果胶乙酰酯酶、果胶解聚酶、肽酶、果胶甲基酯酶、果胶分解酶、过氧化物酶、酚氧化酶、植酸酶、聚半乳糖醛酸酶、鼠李糖-半乳糖醛酸酶、核糖核酸酶、奇异果甜蛋白、转移酶、转运蛋白、转谷氨酰胺酶、木聚糖酶、己糖氧化酶(D-己糖：(3/4-氧化还原酶，EC 1.1.3.5)、酸性磷酸酶和/或其他酶或其组合。这些包括例如调节组合物或饲料的粘度的酶。
III.用于增加脂溶性维生素吸收的酶
淀粉酶
淀粉酶是向能够将淀粉水解为较短链的寡糖(例如麦芽糖)的一类酶给出的名称。那么，与从原始的淀粉分子转移相比，葡萄糖部分可以更容易地从麦芽糖转移到单甘油酯或糖基单甘油酯。术语淀粉酶包括α-淀粉酶(E.C.3.2.1.1)、形成G4的淀粉酶(E.C.3.2.1.60)、β-淀粉酶(E.C.3.2.1.2)和γ-淀粉酶(E.C.3.2.1.3)。在一个实施例中，优选地该淀粉酶是α-淀粉酶。α-淀粉酶分类为(E.C.3.2.1.1)。这些可以包括细菌或真菌来源的淀粉酶，包括化学修饰的或蛋白质工程化的突变体。在一个实施例中，优选地，该淀粉酶可以是淀粉酶(例如α-淀粉酶(来自地衣芽孢杆菌))和/或淀粉酶(例如α-淀粉酶(来自解淀粉芽孢杆菌)。在一个实施例中，α-淀粉酶可以是Axtra或Avizyme中的α-淀粉酶，二者都是来自丹尼斯科公司(Danisco A/S)的可商购的产品。在另一个实施例中，该淀粉酶可以是抗胃蛋白酶的α-淀粉酶，例如抗胃蛋白酶的木霉属(例如里氏木霉)α淀粉酶。在英国申请号1011513.7(其通过引用结合在此)和PCT/IB 2011/053018(其通过引用结合在此)教导了合适的抗胃蛋白酶的α-淀粉酶。
在一个优选的实施例中，用于本发明的淀粉酶可以是一种或多种以下商业产品中的一种或多种淀粉酶：
在一个实施例中，该淀粉酶可以是来自芽胞杆菌属的麦芽糖α-淀粉酶(参见EP120 693)。此淀粉酶是在商品名NovamylTM(诺和诺德公司(Novo Nordisk A/S)，丹麦)下可商购的。Novamyl在国际专利公布WO 91/104669中被详细描述。优选地，该淀粉酶是按以下范围存在于喂养料中：约50AU/kg至约10,000AU/kg饲料、更优选地约70AU/kg饲料至约7500AU/kg饲料、更优选地约70AU/kg饲料至约5000AU/kg饲料以及甚至更优选地约100AU/kg饲料至约2000AU/kg饲料。在一个实施例中，该淀粉酶是按以下量存在于喂养料中：多于约50AU/kg饲料、合适地多于约60AU/kg饲料、合适地多于约70AU/kg饲料、合适地多于约80AU/kg饲料、合适地多于约90AU/kg饲料、合适地多于约100AU/kg饲料。在一个实施例中，该淀粉酶是按以下量存在于喂养料中：小于约10,000AU/kg饲料、合适地小于约8000AU/kg饲料、合适地小于约7000AU/kg饲料、合适地小于约5000AU/kg饲料、合适地小于约4000AU/kg饲料、合适地小于约3000AU/kg饲料、合适地小于约2000AU/kg饲料。优选地，该淀粉酶是按以下范围存在于饲料添加剂组合物中：约10AU/kg至约200,000AU/g组合物、更优选地约30AU/g组合物至约100,000AU/g组合物、以及甚至更优选地约40AU/g组合物至约50,000AU/g组合物、以及甚至更优选地约50AU/g组合物至约20,000AU/g组合物。在一个实施例中，该淀粉酶是按以下量存在于饲料添加剂组合物中：多于约10AU/g组合物、合适地多于约20AU/g组合物、合适地多于约30AU/g组合物、合适地多于约40AU/g组合物、合适地多于约50AU/g组合物。在一个实施例中，该淀粉酶是按以下量存在于饲料添加剂组合物中：小于约200,000AU/g组合物、合适地小于约100,000AU/g组合物、合适地小于约50,000AU/g组合物、合适地小于约40,000AU/g组合物、合适地小于约30000AU/g组合物、合适地小于约20000AU/g组合物。
应当理解，一个淀粉酶单位(AU)是在pH 6.5和37℃下，每分钟从非水溶性交联淀粉聚合物底物释放1mmol的糖苷键的酶量(这在本文中可以称为确定1AU的测定法)。1TAU(α-淀粉酶活性)是在pH 8.0和40℃下，每分钟从麦芽庚糖苷底物释放(在过量α-葡糖苷酶存在下)0.20μmol的糖苷键(表示为对硝基苯酚当量)所需的酶量。这在本文中可以称为确定1TAU单位的测定法。在一个实施例中，合适地使用上述E.C.分类法将酶分类，并且当以本文教导的用于确定1AU的测定法测试时，E.C.分类法对具有所述活性的酶进行命名。
蛋白酶
如本文所使用的术语蛋白酶(protease)与肽酶或蛋白酶(proteinase)同义。可用于本发明的蛋白酶可以是枯草杆菌蛋白酶(E.C.3.4.21.62)或芽孢杆菌溶素(E.C.3.4.24.28)或碱性丝氨酸蛋白酶(E.C.3.4.21.x)或角蛋白酶(E.C.3.4.x.x)、或酸性真菌蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、或胰蛋白酶蛋白酶。在一些实施例中，根据本发明的蛋白酶是枯草杆菌蛋白酶。合适的蛋白酶包括动物、植物或微生物来源的蛋白酶。化学修饰的或蛋白工程化的突变体也是合适的。该蛋白酶可以是丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶，例如碱性微生物蛋白酶或胰蛋白酶样蛋白酶。碱性蛋白酶的实例是枯草杆菌蛋白酶，尤其是衍生自芽孢杆菌属的那些，例如枯草杆菌蛋白酶Novo、枯草杆菌蛋白酶Carlsberg、枯草杆菌蛋白酶309(参见例如，美国专利号6,287,841)、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168(参见例如，WO 89/06279)。胰蛋白酶样蛋白酶的实例是胰蛋白酶(例如猪或牛来源的)和镰孢霉属蛋白酶(参见例如，WO 89/06270和WO 94/25583)。有用的蛋白酶的实例还包括但不限于WO92/19729和WO 98/20115中描述的变体。
在一个优选的实施例中，用于本发明的蛋白酶可以是一种或多种以下商业产品中的一种或多种蛋白酶：
在一个实施例中，该蛋白酶可以是来自枯草芽孢杆菌的蛋白酶。在一个实施例中，该蛋白酶可以是可获得自诺维信公司(Novozymes A/S)的拟诺卡氏菌属蛋白酶。优选地，该蛋白酶是按以下范围存在于喂养料中：约1000U/kg至约20,000PU/kg饲料、更优选地约1500PU/kg饲料至约10000PU/kg饲料、更优选地约2000PU/kg饲料至约6000PU/kg饲料。在一个实施例中，该蛋白酶是按以下量存在于喂养料中：多于约1000PU/kg饲料、合适地多于约1500PU/kg饲料、合适地多于约2000PU/kg饲料。在一个实施例中，该蛋白酶是按以下量存在于喂养料中：小于约20,000PU/kg饲料、合适地小于约10000PU/kg饲料、合适地小于约7000PU/kg饲料、合适地小于约6000PU/kg饲料。优选地，该蛋白酶是按以下范围存在于饲料添加剂组合物中：约200PU/g至约400,000PU/g组合物、更优选地约300PU/g组合物至约200,000PU/g组合物、以及甚至更优选地约5000PU/g组合物至约100,000PU/g组合物、以及甚至更优选地约700PU/g组合物至约70,000PU/g组合物、以及甚至更优选地约1000PU/g组合物至约60,000PU/g组合物。在一个实施例中，该蛋白酶是按以下量存在于饲料添加剂组合物中：多于约200PU/g组合物、合适地多于约300PU/g组合物、合适地多于约400PU/g组合物、合适地多于约500PU/g组合物、合适地多于约750PU/g组合物、合适地多于约1000PU/g组合物。在一个实施例中，该蛋白酶是按以下量存在于饲料添加剂组合物中：小于约400,000PU/g组合物、合适地小于约200,000PU/g组合物、合适地小于约100,000PU/g组合物、合适地小于约80,000PU/g组合物、合适地小于约70000PU/g组合物、合适地小于约60000PU/g组合物。
应当理解，一个蛋白酶单位(PU)是在pH 7.5(40mM Na2PO4/乳酸缓冲液)和40℃下，一分钟内从底物(0.6％酪蛋白溶液)释放一微克酚类化合物(表示为酪氨酸等价物)的酶量。这可被称为确定1PU的测定法。在一个实施例中，合适地使用上述E.C.分类法将酶分类，并且当以本文教导的用于确定1PU的测定法测试时，E.C.分类法对具有所述活性的酶进行命名。
木聚糖酶
木聚糖酶是向直链多糖β-1,4-木聚糖降解为木糖从而分解半纤维素(植物细胞壁的主要组分之一)的一类酶给出的名称。可用于本发明的木聚糖酶可以是任何可商购的木聚糖酶。合适地，该木聚糖酶可以是内切-1,4-β-d-木聚糖酶(分类为E.C.3.2.1.8)或1,4β-木糖苷酶(分类为E.C.3.2.1.37)。在一个实施例中，优选地，木聚糖酶是内切木聚糖酶，例如内切-1,4-β-d-木聚糖酶。内切-1,4-β-d-木聚糖酶的分类是E.C.3.2.1.8。在此提到的所有E.C.酶分类涉及在国际生物化学与分子生物学联合会命名委员会的EnzymeNomenclature-Recommendations[酶命名法-推荐](1992)-ISBN 0-12-226164-3中提供的分类。合适地，用于本发明的木聚糖酶可以是来自芽胞杆菌属、木霉属、嗜热丝孢菌属、曲霉属和青霉属的木聚糖酶。在一个实施例中，木聚糖酶可以是Axtra或Avizyme中的木聚糖酶，二者都是来自丹尼斯科公司(Danisco A/S)的可商购的产品。在一个优选的实施例中，用于本发明的木聚糖酶可以是在一种或多种以下商业产品中的一种或多种木聚糖酶：
优选地，该木聚糖酶是按以下范围存在于喂养料中：约500XU/kg至约16,000XU/kg饲料、更优选地约750XU/kg饲料至约8000XU/kg饲料、以及甚至更优选地约1000XU/kg饲料至约4000XU/kg饲料。在一个实施例中，该木聚糖酶是按以下量存在于喂养料中：多于约500XU/kg饲料、合适地多于约600XU/kg饲料、合适地多于约700XU/kg饲料、合适地多于约800XU/kg饲料、合适地多于约900XU/kg饲料、合适地多于约1000XU/kg饲料。在一个实施例中，该木聚糖酶是按以下量存在于喂养料中：小于约16,000XU/kg饲料、合适地小于约8000XU/kg饲料、合适地小于约7000XU/kg饲料、合适地小于约6000XU/kg饲料、合适地小于约5000XU/kg饲料、合适地小于约4000XU/kg饲料。优选地，该木聚糖酶是按以下范围存在于饲料添加剂组合物中：约100XU/g至约320,000XU/g组合物、更优选地约300XU/g组合物至约160,000XU/g组合物、以及甚至更优选地约500XU/g组合物至约50,000XU/g组合物、以及甚至更优选地约500XU/g组合物至约40,000XU/g组合物。在一个实施例中，该木聚糖酶是按以下量存在于饲料添加剂组合物中：多于约100XU/g组合物、合适地多于约200XU/g组合物、合适地多于约300XU/g组合物、合适地多于约400XU/g组合物、合适地多于约500XU/g组合物。在一个实施例中，该木聚糖酶是按以下量存在于饲料添加剂组合物中：小于约320,000XU/g组合物、合适地小于约160,000XU/g组合物、合适地小于约50,000XU/g组合物、合适地小于约40,000XU/g组合物、合适地小于约30000XU/g组合物。
应当理解，一个木聚糖酶单位(XU)是在pH 5.3和50℃下，每分钟从燕麦木聚糖(oat-spelt-xylan)底物释0.5μmol的还原糖等价物(为木糖，通过二硝基水杨酸(DNS)测定-还原糖方法)的酶量。(Bailey,M.J.、Biely,P.和Poutanen,K.，Journal ofBiotechnology[生物技术杂志]，第23卷(3)，1992年5月，257-270)。在一个实施例中，合适地使用上述E.C.分类法将酶分类，并且当以本文教导的用于确定1XU的测定法测试时，E.C.分类法对具有所述活性的酶进行命名。
VI.饲料或喂养料
应当理解，所述饲料添加剂可以用于任何合适的动物。在一个优选的实施例中，该动物是单胃动物，例如，家禽、猪、鱼、贝类和甲壳纲动物(例如虾)、人类、宠物动物(例如猫或狗)。在可替代的优选的实施例中，该动物是选自以下的反刍动物，例如奶牛或其他牛、绵羊、山羊、骆驼、鹿、美洲驼、羚羊、羊驼或牛羚。
在一些实施例中，可以将本发明的酶配制为液体、干粉或颗粒。干粉或颗粒可通过本领域的技术人员已知的方式，例如在顶喷式流化床包覆器中、在Wurster型底喷式流化床中或者通过转鼓制粒(例如高剪切制粒)、挤出、锅式包衣或在微成分混合器中进行制备。
对于技术人员显而易见的是，根据本发明的食品或饲料添加剂还可以包含其他组分如稳定剂和/或增量剂和/或其他酶。优选地，根据本发明的食品或饲料添加剂将对以下温度的热处理是热稳定的：高达约70℃；高达约80℃；或高达约95℃。热处理可以进行长达约0.5分钟；长达约5分钟；长达约10分钟；长达约30分钟；长达约60分钟。术语“热稳定”意指加热至特定温度之前添加剂中存在/有活性的酶组分的至少约75％在冷却至室温之后仍存在/有活性。优选地，加热至特定温度之前添加剂中存在且有活性的酶组分的至少约80％在冷却至室温之后仍存在且有活性。
在一些实施例中，将食品或饲料添加剂均化以生产粉末。在可替代的优选的实施例中，将食品或饲料添加剂配制成颗粒，如WO 2007/044968中描述的(称为TPT颗粒)(通过引用结合在此)。
在一个实施例中，可以将饲料添加剂组合物配制成用于饲料组合物的颗粒，其包括：核心；活性剂；和至少一种包衣，在选自以下各项中的一种或多种的条件后，该颗粒的活性剂保留至少50％活性、至少60％活性、至少70％活性、至少80％活性：a)饲料制丸工艺，b)蒸汽加热的饲料预处理工艺，c)储存，d)作为未经制丸混合物中的成分储存，和e)作为包含至少一种选自如下的化合物的饲料基础混合物或饲料预混物中的成分储存：痕量矿物质、有机酸、还原糖、维生素、氯化胆碱、以及产生酸性或碱性饲料基础混合物或饲料预混物的化合物。
在另一个实施例中，当将食品或饲料添加剂配制成颗粒时，颗粒包括涂覆在蛋白质核心上的水合屏障盐。这样的盐包衣的优点在于使耐热性改善、使保藏稳定性改善和保护免受其他原本会不利影响该酶的食品或饲料添加剂的影响。
优选地，用于盐包衣的盐在20℃下具有小于0.25的水活度或大于60％的恒定湿度。优选地，盐包衣包含Na2S04。
制备食品或饲料添加剂的方法还可以包括将粉末制成粒料的另外步骤。粉末可以与本领域已知的其他组分进行混合。可强加力使粉末、或包含粉末的混合物通过模具，并将所得线料切成适宜的不同长度的粒料。
任选地，制粒步骤可包括在粒料形成之前进行的蒸汽处理或调理阶段。可将包含粉末的混合物置于调节器中，例如带有蒸汽注射的搅拌器。混合物在达到规定的温度(例如从60℃-100℃)的调节器中加热，典型的温度将是70℃、85℃、90℃或95℃。停留时间可以从几秒钟到几分钟甚至几小时变化。例如5秒钟、10秒钟、15秒钟、30秒钟、1分钟、2分钟、5分钟、10分钟、15分钟、30分钟和1小时。在另外的方面，提供了包含本发明的食品或饲料添加剂的食品或饲料材料。应当理解，本发明的食品或饲料添加剂适合用于添加至任何适当的食品或饲料材料。对技术人员显而易见的是，作为预防步骤，可将食品或饲料添加剂添加至任何食品或饲料材料种。如本文所使用的，术语饲料材料是指由动物消费的基础饲料材料。进一步应当理解，饲料材料可能包括，例如至少一种或多种未加工的谷物和/或加工过的植物和/或动物材料(例如大豆粉或骨粉)。在一些实施例中，饲料材料将包含如下组分中的一种或多种：a)谷类，例如小粒谷物(例如小麦、大麦、黑麦、燕麦及其组合)和/或大粒谷类(例如玉蜀黍或高粱)；b)来自谷类的副产物，例如玉米蛋白粉、干酒糟谷物可溶物(DistillersDried Grain Soluble)(DDGS)、小麦麸、粗小麦粉、次麦粉、米糠、稻壳、燕麦壳、棕榈仁和柑橘洛；c)青贮饲料(例如玉蜀黍青贮饲料)；d)获自以下来源的蛋白质：例如大豆、向日葵、花生、羽扇豆、豌豆、蚕豆、棉花、低芥酸菜籽、鱼粉、干血浆蛋白质、肉和骨粉、马铃薯蛋白、乳清、干椰肉、芝麻；e)获自植物和动物来源的油和脂肪；f)矿物质和维生素。
在一个实施例中，组合物处于适合消费的液体配制品中，优选地，此类液体消费品包含以下中的一种或多种：缓冲液、盐、山梨醇和/或甘油。
在另一个实施例中，可以通过将一种或多种酶施加(例如喷涂)于载体基材(例如碾碎的小麦)上来配制饲料添加剂组合物。
在一个实施例中，根据本发明的饲料添加剂组合物可以配制为预混物。仅作为示例，该预混物可包含一种或多种饲料组分，例如一种或多种矿物质和/或一种或多种维生素。
在一个实施例中，将可用于本发明的酶与至少一种生理学上可接受的载体一起配制，该载体选自以下各项中的至少一种：麦芽糖糊精、石灰石(碳酸钙)、环糊精、小麦或小麦组分、蔗糖、淀粉、Na2SO4、滑石、PVA、山梨醇、苯甲酸盐、山梨酸盐、甘油、蔗糖、丙二醇、1,3-丙二醇、葡萄糖、对羟基苯甲酸酯、氯化钠、柠檬酸盐、乙酸盐、磷酸盐、钙、偏亚硫酸氢盐、甲酸盐及其混合物。
如本文所使用的，术语喂养料是指已将一种或多种饲料添加剂加入其中的饲料材料。根据另一个方面，提供了包含本发明的饲料材料的喂养料。技术人员会认识到，不同的动物要求不同的喂养料，甚至同一种动物也可能要求不同的喂养料，这取决于饲养该动物的目的。
在一些实施例中，喂养料可以包含以下的饲料材料，该饲料材料包含玉蜀黍或玉米、小麦、大麦、黑小麦、黑麦、稻、木薯、高粱、草、三叶草、苜蓿和/或任何副产品，连同富含蛋白质的组分，如大豆粉、油菜籽粉、低芥酸菜籽粉、棉籽粉、向日葵籽粉、动物副产品粉及其混合物。在一些实施例中，喂养料可以包含动物脂肪和/或植物油。任选地，喂养料还可以含有另外的矿物质(例如钙)和/或另外的维生素。
在另一个方面，提供了用于生产喂养料的方法。喂养料典型地在饲料磨机中生产，在磨机中首先将原料研磨成合适的粒度，然后与适当的添加剂混合。然后，可以将喂养料生产成糊状或丸粒；后者通常涉及这样的方法，通过该方法将温度升高至目标水平，然后使饲料通过模具从而生产出特定大小的丸粒。让丸粒冷却。随后，可添加液体添加剂例如脂肪和酶。制备喂养料也可涉及另外的步骤，该步骤包括制粒之前的挤出或膨化，尤其是通过至少可包括使用蒸汽的适宜技术进行的挤出或膨化。
喂养料可以是用于任何合适的动物的喂养料。在一些实施例中，喂养料是用于家畜或农场动物。在一个实施例中，该动物是单胃动物，例如家禽(例如肉鸡、蛋鸡、肉鸡种鸡、火鸡、鸭、鹅、水禽)、猪(所有年龄类别)、鱼、贝类包括甲壳纲动物(例如虾)、人类、宠物(例如狗、猫)。在一些实施例中，该动物是反刍动物，例如牛(例如奶牛、水牛、野牛、牦牛)、绵羊、山羊、骆驼、鹿、美洲驼、羚羊、羊驼或牛羚。
喂养料可以包含按重量计至少0.0001％的饲料添加剂。合适地，喂养料可以包含按重量计至少0.0005％；至少0.0010％；至少0.0020％；至少0.0025％；至少0.0050％；至少0.0100％；至少0.020％；至少0.100％至少0.200％；至少0.250％；至少0.500％的饲料添加剂。
本发明的饲料添加剂组合物可以用作饲料，或者可用于制备饲料。本文所使用的术语“饲料”与“喂养料”同义。饲料可以是处于溶液或如固体的形式-取决于用途和/或应用模式和/或给予模式。当用作饲料(例如功能饲料)或用于制备饲料(例如功能饲料)时，本发明的组合物可以与以下中的一种或多种组合使用：营养上可接受的载体、营养上可接受的稀释剂、营养上可接受的赋形剂、营养上可接受的辅剂、营养活性成分。在优选的实施例中，将本发明的饲料添加剂组合物与饲料组分混合以形成喂养料。本文所使用的术语“饲料组分”意指喂养料的全部或部分。喂养料的部分可意指喂养料的一种成分或喂养料的一种以上(例如2种或3种或4种)成分。在一个实施例中，术语“饲料组分”涵盖预混物或预混物成分。优选地，饲料可以是草料或其预混物、复合饲料或其预混物。在一个实施例中，可将根据本发明的饲料添加剂组合物与复合饲料、复合饲料组分混合或将其混合至复合饲料的预混物或混合至草料、草料组分或草料的预混物中。本文所使用的术语秣料(fodder)是指提供给动物的任何食物(而不是动物必须自己觅食)。秣料涵盖已经切下的植物。术语秣料包括干草、秸秆、青贮饲料、压缩饲料和颗粒饲料、油和混合给养，并且也包括发芽谷物和豆类。秣料可获自选自以下的植物中的一种或多种：苜蓿(紫苜蓿)、大麦、百脉根、芸苔属、Chaumoellier、羽衣甘蓝、油菜籽(低芥酸菜籽)、芜菁甘蓝(瑞典甘蓝)、萝卜、三叶草、杂种三叶草、红三叶草、地下三叶草、白三叶草、草、燕麦草、羊茅草、绊根草、雀麦草、石南荒原草、草地早熟禾(来自天然混合的草原草地)、野茅、黑麦草、猫尾草、玉米(玉蜀黍)、粟、燕麦、高粱、大豆、树(用作树-干草的修剪下的树嫩枝)、小麦、和豆科植物。
已经提供了关于动物脂溶性维生素的最低要求的指南(参见Blum等人(2014)Vitamins in Animal Nutrition[动物营养中的维生素]；ISBN 978-2-9601289-2-5)。例如，关于维生素E，用于各种动物的指南如下：对于家禽：用于肥育初期(starter)肉鸡，40-60mg/Kg；用于生长-育肥(grower-finisher)肉鸡，20-30mg/Kg；用于肉鸡种鸡，30-50mg/Kg；用于蛋鸡，20-30mg/Kg；用于肥育初期火鸡，40-60mg/Kg；用于生长火鸡，30-50mg/Kg；用于育肥火鸡，30-40mg/Kg；用于火鸡种鸡，40-60mg/Kg；用于鸭/鹅、松鸡/鹌鹑，40-60mg/Kg。对于猪：用于预肥育初期小猪，80-150mg/Kg；用于肥育初期小猪，70-100mg/Kg；用于生长猪，60-80mg/Kg；用于育肥猪，40-60mg/Kg；用于母猪，60-80mg/Kg。对于反刍动物和马：用于奶牛，200-400mg/头/d；用于代乳品小牛，80-120mg/头/d；用于小母牛，100-150mg/头/d；用于肥育牛，200-300mg/头/d；用于奶牛，2000-3000mg/头/d；用于绵羊和山羊，50-80mg/头/d；用于马驹，1000-1200mg/头/d；用于休闲马，600-800mg/头/d；用于赛马和种马，1200-1500mg/头/d；此外，该指南建议：用于狗，100-250mg/Kg；用于猫，150-300mg/Kg；用于兔，40-60mg/Kg；以及用于鱼，100-400mg/Kg。
在一些实施例中，本发明是动物饲料或喂养料，其包含小于500％、400％、300％、200％、100％、90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、或10％的推荐的补充剂量的维生素E，以及有效剂量的木聚糖酶。在一些实施例中，有效剂量的木聚糖酶可有效将肝脏维生素E水平增加5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、100％或更多。在一些实施例中，动物饲料或喂养料进一步包含淀粉酶或蛋白酶。在一些实施例中，动物饲料或喂养料进一步包含淀粉酶和蛋白酶。例如可以在National Research Council guidelines[国家研究委员会指南]中找到推荐的剂量。
在一些实施例中，本发明是动物饲料或喂养料，其包含小于500％、400％、300％、200％、100％、90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、或10％的推荐的补充剂量的维生素E，以及有效剂量的淀粉酶或蛋白酶。在一些实施例中，有效剂量的淀粉酶或蛋白酶可有效将肝脏维生素E水平增加5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、100％或更多。在一些实施例中，动物饲料或喂养料进一步包含淀粉酶或蛋白酶。在一些实施例中，动物饲料或喂养料进一步包含淀粉酶和蛋白酶。
在任何以上饲料或喂养料实施例中，更低的建议补充剂量的维生素E是如Blum等人建议的更低剂量。
通过以下实施例进一步描述本发明，所述实施例不应理解为对本发明范围的限制。
实施例
实施例1：肉鸡中肝脏维生素E含量的测量
该研究评估了各种酶对肉鸡的维生素E利用的功效，所述肉鸡饲喂营养物减少的玉米-大豆基饮食。
将日龄雄性肉鸡分为八组，并且饲喂以下饮食中的一种：(PC是阳性对照，配制为符合商业推荐；NC是阴性对照；XAP是木聚糖酶、淀粉酶和蛋白酶的组合)：
1)PC
2)PC+XAP 50mg/MT
3)PC+XAP 100mg/MT
4)PC+木聚糖酶B
5)NC
6)NC+XAP 50mg/MT
7)NC+XAP 100mg/MT
8)NC+木聚糖酶B
从第1至21天提供饲料和水供随意摄取。根据动物科学研究单位标准操作程序(Animal Science Research Unit standard operation procedure)维持室温、通风和光照。每天监测这些鸡的不适或不佳体况的任何迹象。剔除显示不适迹象的任何鸡。每天检查进料器以确保饲料是时时可及的。每天检查并且清洁饮水器以确保鸡具有清洁水的连续供应。在前7天期间，育雏器和室温分别设置在32℃和29℃。此后，关闭育雏器中的供热，并且贯穿本实验将室温维持在29℃。贯穿本实验，灯始终打开。在第22天，使用二氧化碳处死每个处理中的所有鸡。使用标准AOAC方法和程序，测量肝脏维生素E水平的含量。结果显示在表1中。
表1.选择的营养物的维生素E含量
可以看出，在使用单独的木聚糖酶、或与淀粉酶和蛋白酶组合的木聚糖酶时，可以观察到肝脏维生素E水平的增加。

Claims (23)

1.一种改善来自饲料的动物脂溶性维生素吸收的方法，所述方法包括向所述动物给予淀粉酶或蛋白酶。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述动物脂溶性维生素吸收通过肝脏中脂溶性维生素的水平来测量。
3.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述脂溶性维生素是维生素A、E、D或K。
4.如权利要求3所述的方法，其中所述脂溶性维生素是维生素E。
5.如前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法进一步包括给予木聚糖酶。
6.如前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法进一步包括给予淀粉酶和蛋白酶。
7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述动物是单胃动物或反刍动物。
8.如权利要求7所述的方法，其中所述单胃动物是家禽、猪、鱼、贝类、人类或宠物。
9.如权利要求7所述的方法，其中所述反刍动物是牛、绵羊、山羊、骆驼、鹿、美洲驼、羚羊、羊驼或牛羚。
10.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述淀粉酶或蛋白酶在动物饲料或预混物中给予。
11.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述淀粉酶或蛋白酶按颗粒形式给予。
12.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述淀粉酶或蛋白酶按液体形式给予。
13.如权利要求5-12中任一项所述的方法，其中所述木聚糖酶在动物饲料或预混物中给予。
14.如权利要求5-13中任一项所述的方法，其中所述木聚糖酶按颗粒形式给予。
15.如权利要求5-13中任一项所述的方法，其中所述木聚糖酶按液体形式给予。
16.一种改善动物免疫功能、改善动物肉质、改善动物胃肠道健康、或减少动物生育障碍的方法，所述方法包括向所述动物给予木聚糖酶。
17.如权利要求17所述的方法，其中所述木聚糖酶按足以使肝脏维生素E水平增加10％的剂量给予。
18.如权利要求17或18所述的方法，所述方法进一步包括给予淀粉酶或蛋白酶。
19.一种动物饲料，所述动物饲料包含小于500％的推荐剂量的维生素E和木聚糖酶。
20.如权利要求20所述的动物饲料，所述动物饲料进一步包含淀粉酶或蛋白酶。
21.如权利要求20所述的动物饲料，所述动物饲料进一步包含淀粉酶和蛋白酶。
22.一种动物饲料，所述动物饲料包含小于500％的推荐剂量的维生素E、和淀粉酶或蛋白酶。
23.如权利要求23所述的动物饲料，所述动物饲料包含淀粉酶和蛋白酶。
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