CN108129551B - 具有皮肤美白效果的肽及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及具有皮肤美白效果的肽及其用途。本发明具体而言涉及一种具有皮肤美白效果的精华液，其包含如下的肽：Val‑Lys‑Ser‑Arg‑Glu‑Arg‑Asp‑Gln(VKSRERDQ)(SEQ ID NO:1)和/或His‑Gly‑His‑Pro‑Asp‑Gln‑Ala‑Pro‑Phe(HGHPDQAPF)(SEQ ID NO:2)。本发明的精华液还包含如下的组分：谷胱甘肽、1，3‑丙二醇、玫瑰提取物、光果甘草提取物、桑叶提取物、银耳提取物、葡聚糖、透明质酸钠、芦荟提取物、植物多糖和月桂酰精氨酸乙酯。本发明的精华液具有明显的美白效果。

Description

具有皮肤美白效果的肽及其用途
技术领域
本发明涉及具有皮肤美白效果的精华液，所述精华液包含具有美白功效的非天然肽。本发明还涉及所述的非天然肽在化妆品或个人护理组合物中的应用。
发明背景
在化妆品领域，多种天然和合成肽都广泛用其中。通常，化妆品中包含肽是利用它们的功能活性，例如对酶的抑制，抗病毒和抗细菌等活性。
例如，美国专利6,777,389描述了化妆组合物，其包含与内源性弹性蛋白的各部分对应或同源的肽，包括缬氨酸-缬氨酸-脯氨酸-谷酰胺、缬氨酸-丙氨酸-丙氨酸-精氨酸-脯氨酸-甘氨酸、亮氨酸-甘氨酸-丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸-丙氨酸-甘氨酸和缬氨酸-甘氨酸-缬氨酸-羟基脯氨酸-甘氨酸，以及它们增强遭受与弹性蛋白不足有关的问题的皮肤外观的应用。
US6,372,717公开了化妆组合物，其包含Tyr-Arg肽的合成性亲脂衍生物，包括N-乙酰基-L-Tyr-L-Arg-O-鲸蜡基，用于缓解刺激，轻度疼痛，热、冷的效应，皮肤上的摩擦或机械性攻击的感觉。
US6,245,342公开了包含来源于α-MSH(促黑激素)的His-Phe-Arg-Trp的肽的化妆组合物的应用。据称该化妆组合物具有刺激黑素原生成和抗炎性质。
US6,358,929描述了包含序列赖氨酸-脯氨酸-缬氨酸的肽作为添加剂在预防或减少与接触性过敏反应有关的不耐受反应的化妆组合物中的应用。
US6,235,291描述了肽(TyrD-Phe Phe D-His Leu-Met NH2)和肽(D-NicLys Pro3-Pal Pro D-Cl2 Phe Asn D-TrpPhe D-Trp Leu Nle NH2)作为P物质拮抗剂在治疗敏感性皮肤的化妆品中的应用。
US6,235,291涉及具有对抗细菌、霉菌和/或病毒活性的肽(Gly Ile Gly Asp ProVal Thr Cys Leu Lys Ser Gly Ala Ile Cys His Pro Val Phe Cys Pro Arg Arg TyrLys Gln Ile Gly Thr Cys Gly Leu Pro Gly Thr Thr Cys Cys Lys Lys Pro)的应用和它在化妆组合物中的应用。
多种美容手段可令肤色更美白或色调均匀。一种常见的手段是将防晒遮光剂或防晒隔离剂引入美容组合物中。防晒遮光剂通常为有机化合物，它们的作用是经由吸收指定波长范围的太阳紫外辐射从而使该紫外辐射无法到达皮肤表面。紫外辐射据信是皮肤着色或晒黑的原因，倘若晒黑不均匀，消费者不喜欢这种晒黑。防晒隔离剂通常为无机化合物，它们的作用是作为物理屏障以防各种太阳幅射(既包括紫外线又包括可见光)。
另一种常见的手段是将皮肤美白剂引入美容组合物中。皮肤美白剂通常为分子或组合物，它们改变皮肤中经由皮肤中生化转化实现的黑素形成，由此改变皮肤的颜色和表观。在人类皮肤中，黑素色素的形成起源于L-酪氨酸这一氨基酸的聚合，途经一组酶催化的和自发的化学反应。这特别涉及在黑素细胞的黑素小体隔间内存在的酪氨酸酶的作用。黑素小体内容物从该黑素细胞传递至多个周边角质细胞。整个过程受多种激素的影响，在这些激素中促黑激素(MSH)已得以充分的研究。
例如，JP2001002527(Lion)公开了皮肤外用制剂，其包括基于组合物总重为0.000001-30wt％的针对黑素细胞的细胞粘着重排剂，例如包括精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(RGD)序列在内的肽、包括酪氨酸-异亮氨酸-甘氨酸-丝氨酸-精氨酸这一氨基酸序列在内的肽、3-脱氮腺苷、甲酰胺衍生物、肌醇多胺、水杨酸和三萜酸的衍生物、乳糖等。
另外，美国专利5,126,327公开了促黑激素抑制剂，其在分子中具有下式氨基酸序列：-His-Ser-Arg-Trp-，-Trp-Arg-Ser-His-，-Leu-Ala-Cys-Ala-Arg-，其中His、Ser、Arg、Trp、Leu、Ala和Cys分别代表L-或D-组氨酸、丝氨酸、精氨酸、色氨酸、亮氨酸、丙氨酸和半胱氨酸残基。其公开了促黑激素抑制剂和含有该抑制剂的皮肤外用制剂，该抑制剂预防或治疗由黑素细胞功能增强所致过多黑素产生所引起的黄褐斑和雀斑症状。
发明简述
为开发具有皮肤美白效果的新型肽，本发明人进行了坚持不懈的研究并筛选了肽文库。最终，本发明人已发现具有优良的皮肤美白功效的新型肽，最终实现本发明的目的。
本发明提供了一种具有美白效果的精华液，其包含SEQ ID NO：1的肽，其中所述肽的序列如下：Val-Lys-Ser-Arg-Glu-Arg-Asp-Gln(VKSRERDQ)(SEQ ID NO:1)。
本发明还提供了一种具有美白效果的精华液，其包含SEQ ID NO：1的肽，其中所述肽的序列如下：His-Gly-His-Pro-Asp-Gln-Ala-Pro-Phe(HGHPDQAPF)(SEQ ID NO:2)。
本发明还提供了一种具有美白效果的精华液，其包含SEQ ID NO：1的肽和SEQ IDNO：2的肽。
优选地，本发明的精华液还包含如下的组分：谷胱甘肽、1，3-丙二醇、玫瑰提取物、光果甘草提取物、桑叶提取物、银耳提取物、葡聚糖、透明质酸钠、芦荟提取物、植物多糖和月桂酰精氨酸乙酯。
优选地，本发明的精华液包含SEQ ID NO：1的肽、谷胱甘肽、1，3-丙二醇、玫瑰提取物、光果甘草提取物、桑叶提取物、银耳提取物、葡聚糖、透明质酸钠、芦荟提取物、植物多糖和月桂酰精氨酸乙酯。
优选地本发明的精华液包含SEQ ID NO：2的肽、谷胱甘肽、1，3-丙二醇、玫瑰提取物、光果甘草提取物、桑叶提取物、银耳提取物、葡聚糖、透明质酸钠、芦荟提取物、植物多糖和月桂酰精氨酸乙酯。
优选地本发明的精华液包含SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的肽组合、谷胱甘肽、1，3-丙二醇、玫瑰提取物、光果甘草提取物、桑叶提取物、银耳提取物、葡聚糖、透明质酸钠、芦荟提取物、植物多糖和月桂酰精氨酸乙酯。
优选地，在本发明的上述精华液中，以重量％计，SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的肽的含量分别在0.0005-0.001,谷胱甘肽2.0-4.0,1，3-丙二醇4.0-6.0,玫瑰提取物0.5-2.5,光果甘草提取物2.0-4.0,桑叶提取物3.0-6.0,银耳提取物2.0-6.0,葡聚糖3.0-7.0,透明质酸钠1.5-3.5,芦荟提取物2.0-4.0,植物多糖0.4-0.8,月桂酰精氨酸乙酯0.3-0.6。
优选地，本发明的精华液中，以重量％计，SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的肽的含量分别为0.0005,谷胱甘肽3.0,1，3-丙二醇5.0,玫瑰提取物1.5,光果甘草提取物3.0,桑叶提取物5.0,银耳提取物4.0,葡聚糖5.0,透明质酸钠2.5,芦荟提取物3.0,植物多糖0.6,月桂酰精氨酸乙酯0.5。
本发明的一个目的为提供具有皮肤美白效果的肽。
本发明的另一个目的为提供一种用于皮肤美白的组合物。
本发明的又一个目的为提供一种用皮肤美白的方法。
为实现本发明的目的，本发明的第一方面，提供了肽，其选自如下肽：
(i)肽，其包含或由如下的氨基酸残基组成：
Val-Lys-Ser-Arg-Glu-Arg-Asp-Gln(VKSRERDQ)(SEQ ID NO:1)；或
(ii)肽，其包含或由如下的氨基于酸残基组成：
His-Gly-His-Pro-Asp-Gln-Ala-Pro-Phe(HGHPDQAPF)(SEQ ID NO:2)。
根据本发明的优选的方面，提供了肽的组合，其包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的肽组合。
本发明提供了皮肤美白组合物，其包含本发明的SEQ ID NO:1的肽以及美容上可接受的载体。优选地，所述美白组合物是精华液的形式。
根据本发明的优选的方面，提供了皮肤美白组合物，其包含本发明的SEQ ID NO:1和SEQ ID NO：2的肽组合以及美容上可接受的载体。
另外，本发明提供了本发明的SEQ ID NO:1的肽用于皮肤美白的用途。
根据本发明的优选方面，提供了本发明的SEQ ID NO:1和SEQ ID NO：2的肽组合用于皮肤美白的用途。
在阅读了下面的本发明的详细描述，包括示例性的实施方案和实施方案后，本发明这些和其他方面对于本领域技术人员将变得显而易见。
详细描述
在本发明中要求保护两个肽，亦即具有SEQ ID NO:1的肽(i)或具有SEQ ID NO:2的肽(ii)。这两个新肽与α-MSH(α-促黑激素)结合以致抑制α-MSH结合到MC1R上。当这些肽用于皮肤美白组合物时，该抑制提供皮肤美白方面的益处。这两个肽经使用噬菌体展示(PD)技术鉴别出来，噬菌体展示(PD)技术是生物技术领域中用以鉴别特异地结合靶分子的肽的方法。从极多的可能肽中，首先鉴别出四个个独特的肽作为潜在的α-MSH结合物。从这四个肽中，发现有两个肽就α-MSH结合物而言有极强的结合性，选择这两个肽用于功能益处研究。然后在黑素含量试验中测试这些肽减少黑素含量的功效亦即潜能。
不仅证实了这两个肽各自能减少黑素含量，而且还注意到它们在一起使用时协同相互作用。
当在本文中使用时，除非另有特殊定义所有术语都意欲具有它们在本领域的一般含义。术语“氨基酸”意欲包括天然存在的氨基酸以及非天然存在的氨基酸，广义地包括所有具有一个羧基和至少一个能形成肽键的伯或仲胺基的小分子。术语“肽”意欲包括所有具有至少一个肽键的分子，因此包括二肽、三肽、寡肽和最多具有约20个氨基酸残基的多肽。术语“肽”也包括具有一个或多个连接基、间隔基或末端基的、不是氨基酸的结构。
本发明的肽是在美容上可接受的载体中提供的。载体可以是疏水的或亲水的。适当的疏水载体包括例如，化妆品中常用蜡样非离子物质，例如脂肪醇和脂肪酸的酯和醚，碳链长度为C4到C22，优选C8到C18，最优选C12到C18。
脂肪性疏水载体的例子包括肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、棕榈酸辛酯、羊毛酸异丙酯、乙酰化羊毛脂醇、C12-C15醇的苯甲酸酯、辛酸鲸蜡酯、棕榈酸鲸蜡酯、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、乳酸肉豆蔻酯、醋酸鲸蜡酯、二辛酸/癸酸丙二醇酯、油酸癸酯、乙酰化羊毛脂、庚酸硬脂酸酯、苹果酸二异硬脂酸酯、羟基硬脂酸辛酯、羟基硬脂酸辛酯、异硬脂酸异丙酯等等。
适当的亲水载体溶液可以是，例如二醇和化妆品中常用的烷氧基化的二醇，包括乙二醇、二乙二醇、三乙二醇、丙二醇、二丙二醇等等。
皮肤美白组合物可以配制成精华液、营养液、营养霜、乳膏、化妆水、浆液、喷雾剂、棒剂和本领域技术人员已知的其他形式。精华液和营养液是当前优选的产品形式。最优选地，本发明的皮肤美白组合物被配制成营养液的形式。
在美容上可接受的载体中，肽的浓度范围可以是1μM到200μM，优选10ppb到150μM，更优选20μM到100μM，最优选36μM到50μM。
皮肤美白组合物典型地包含上述的载体溶液，其水平为约0.01％到约90％重量，优选约0.1％到约50％重量，更优选约0.1％到约20％重量，最优选约1％到约10％重量。
如本文所使用的，“包含”与“包括”、“含有”或“特征在于”同义，并且是包括在内的或开放性的，并且不排除另外的未陈述的元件或方法步骤。术语“包含”在本文中的任何表述，特别是在描述本发明的方法、用途或产品时，应理解为包括基本上由所述组分或元件或步骤组成和由所述组分或元件或步骤组成的那些产品、方法和用途。本文示例性描述的本发明适当地可以在不存在本文未具体公开的任何一种或多种元件、一种或多种限制的情况下进行实践。
本发明的皮肤美白产品中所包含的涉及该皮肤美白产品的说明书可以含有如下内容：作用与功效(例如皮肤美白)、施用方法(例如均匀涂抹至皮肤，例如脸部和颈部)以及可能产生的副作用等等。
本文已采用的术语和表述用作描述性而不是限制性术语，并且在此种术语和表述的使用中不预期排除所示和所述特征或其部分的任何等价物，但应认识到各种修饰在请求保护的本发明的范围内是可能的。因此，应当理解尽管本发明已通过优选实施方案和任选特征具体公开，但本领域技术人员可以采用本文公开的概念的修饰和变化，并且此类修饰和变化被视为在如由附加权利要求定义的本发明的范围内。
为更清楚地说明本发明，现结合如下实施例进行详细说明，但这些实施例仅仅是对本发明的示例性描述，并不能解释为对本申请的限制。
实施例
下面的实施例是用于以非限制性的方式说明本发明。
实施例1：本发明肽的皮肤美白效果的分析
用各种浓度的SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2的肽处理细胞，然后测量在黑素生成抑制中的活性。在37℃下5％CO2气氛中在补充有10％FBS的DMEM中培养小鼠黑素细胞。将细胞接种在24孔板(1X105细胞/孔)的各孔中并且证实其附着。用各个测试组培育细胞3天：(a)仅用溶剂，作为阴性对照；(b)用20μg/mlα-MSH，作为阳性对照；(c)用20μg/mlα-MSH加1、10、100和150μg/ml肽。离心之后，去除培养基并且肉眼观察黑素生成的水平。
结果表明，肽以浓度依赖方式对黑素生成具有抑制效果。相比于α-MSH处理组，在本发明的肽处理组中的培养基的颜色变得透明，并且观察到细胞数极小变化或无变化，表明发生对黑素生成的抑制效果。
为了分析黑素的释放量，在490nm下测量培养基的吸光度值。结果表明，相比于阴性对照组和阳性对照组，本发明的肽处理组中黑素的释放量均明显减少。这些结果表明，不管黑素生成诱发因子是否作用于皮肤上，本发明的肽均可以通过抑制黑素生成而亮白肤色。
实施例2：协同作用
包含1X105小鼠表皮角质细胞和5X104深着色的小鼠表皮黑素细胞的2:1比例混合物在24孔细胞培养板中每孔接种，以建立共培养系统。温育过夜后，细胞用包含本发明肽的新鲜培养基处理，处理后温育72小时。然后移除培养基，替换为80μl二甲基亚砜(DMSO)。培养板进一步在65℃用DMSO温育1小时，之后研磨孔内容物，将同一样品用于黑素含量试验(在450nm在板读数器中读数)和蛋白质评估(BiCinchoninic Acid法)。黑素含量降低百分率是相对于未经处理的对照而言的。结果示于下表1。
表1
Figure BDA0001256953560000071
从表1的数据可以看出，本发明的两种肽间协同相互作用由此赋予加强的皮肤美白效果。
实施例3：精华液的配制
成分 含量(重量％)
本发明的肽(SEQ ID NO：1) 0.001
谷胱甘肽 3.0
1，3-丙二醇 5.0
玫瑰提取物 1.5
光果甘草提取物 3.0
桑叶提取物 5.0
银耳提取物 4.0
葡聚糖 5.0
透明质酸钠 2.5
芦荟提取物 3.0
植物多糖 0.6
月桂酰精氨酸乙酯 0.5
纯化水 残余量
总计 100
将葡聚糖溶于纯化水中并加入1，3-丙二醇，搅拌均匀后加入其他组分后搅拌并调制成精华液。
实施例4：精华液的配制
Figure BDA0001256953560000081
Figure BDA0001256953560000091
将葡聚糖溶于纯化水中并加入1，3-丙二醇，搅拌均匀后加入其他组分后搅拌并调制成精华液。
实施例5：精华液的配制
Figure BDA0001256953560000092
将葡聚糖溶于纯化水中并加入1，3-丙二醇，搅拌均匀后加入其他组分后搅拌并调制成精华液。
实施例6
Figure BDA0001256953560000093
Figure BDA0001256953560000101
将葡聚糖溶于纯化水中并加入1，3-丙二醇，搅拌均匀后加入其他组分后搅拌并调制成精华液。
实施例7
成分 含量(重量％)
本发明的肽(SEQ ID NO：2) 0.001
谷胱甘肽 3.0
1，3-丙二醇 5.0
玫瑰提取物 1.5
光果甘草提取物 3.0
桑叶提取物 5.0
银耳提取物 4.0
葡聚糖 5.0
透明质酸钠 2.5
芦荟提取物 3.0
植物多糖 0.6
月桂酰精氨酸乙酯 0.5
纯化水 残余量
总计 100
将葡聚糖溶于纯化水中并加入1，3-丙二醇，搅拌均匀后加入其他组分后搅拌并调制成精华液。
实施例8
成分 含量(重量％)
本发明的肽(SEQ ID NO：1和2) 等量，各0.0005
谷胱甘肽 3.0
1，3-丙二醇 5.0
玫瑰提取物 1.5
光果甘草提取物 3.0
桑叶提取物 5.0
银耳提取物 4.0
葡聚糖 5.0
透明质酸钠 2.5
芦荟提取物 3.0
植物多糖 0.6
月桂酰精氨酸乙酯 0.5
纯化水 残余量
总计 100
将葡聚糖溶于纯化水中并加入1，3-丙二醇，搅拌均匀后加入其他组分后搅拌并调制成精华液。
实施例9
按照实施例3、4、5、6、7和8所示的配方，调制精华液形式的皮肤外用组合物，并市购美白精华液作为对比实施例。对于各皮肤外用组合物，分别让10名30-35岁的女性在脸部按照下述标准评价涂布制剂时的使用感。其中每位受试者脸的一侧是实验部位，另一侧为对照部位。
5分：皮肤表面光滑、紧致，美白效果突出；
4分：皮肤表面光滑，美白效果可见；
3分：没有可见的变化；
2分：皮肤表面略有粗涩的感觉，没有美白效果；
1分：皮肤表面有粗涩的感觉，没有美白效果。
算出上述评价结果的平均分，结果表明，实施例3、4、6、7和8的平均分均在4.4分以上，对照样品的平均分为3.0分。实施例8的效果最突出，平均分为4.8。已经通过上述优选实施方案的描述对本发明进行了说明，但是应当理解的是，技术人员可以对这些实施方案做出改变和变更，而不脱离如下列权利要求所表达的本发明的精神或范围。
Figure IDA0001472625210000011

Claims (9)

1.具有美白效果的精华液，其包含SEQ ID NO：1和/或SEQ ID NO：2的肽。
2.根据权利要求1所述的精华液，其还包含谷胱甘肽、1，3-丙二醇、玫瑰提取物、光果甘草提取物、桑叶提取物、银耳提取物、葡聚糖、透明质酸钠、芦荟提取物、植物多糖和月桂酰精氨酸乙酯。
3.根据权利要求1或2所述的精华液，其中以重量％计，SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的肽的含量分别在0.0005-0.001,谷胱甘肽2.0-4.0,1，3-丙二醇4.0-6.0,玫瑰提取物0.5-2.5,光果甘草提取物2.0-4.0,桑叶提取物3.0-6.0,银耳提取物2.0-6.0,葡聚糖3.0-7.0,透明质酸钠1.5-3.5,芦荟提取物2.0-4.0,植物多糖0.4-0.8,以及月桂酰精氨酸乙酯0.3-0.6。
4.根据权利要求3所述的精华液，其中以重量％计，SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的肽的含量分别为0.0005,谷胱甘肽3.0,1，3-丙二醇5.0,玫瑰提取物1.5,光果甘草提取物3.0,桑叶提取物5.0,银耳提取物4.0,葡聚糖5.0,透明质酸钠2.5,芦荟提取物3.0,植物多糖0.6,月桂酰精氨酸乙酯0.5。
5.肽，其由SEQ ID NO：2的氨基酸序列组成。
6.肽的组合，其包含SEQ ID NO：1的肽和SEQ ID NO：2的肽。
7.SEQ ID NO：1的肽和/或SEQ ID NO：2的肽在制备用于皮肤美白的组合物中的用途。
8.根据权利要求7所述的用途，其中所述组合物是精华液的形式。
9.根据权利要求8所述的用途，其中所述用于皮肤美白的组合物被包装为市售的美容产品。
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