CN108103123A - 一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于农副产品精深加工领域,具体是涉及了一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,包括:培养得到木醋杆菌种子培养液,浸米水培养基中添加适量包括木醋杆菌种子培养液的混合增效因子发酵细菌纤维素。本发明可更加环保的增加浸米水的附加值,解决目前浸米水难处理的问题,变废为宝,进一步提升浸米水的应用价值。

Description

一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法
技术领域
本发明属于农副产品精深加工领域,具体是涉及了一种利用浸米水制备细菌纤维素以提高浸米水利用率和附加值的方法。
背景技术
细菌纤维素(Bacterial Cellulose,BC)是由微生物产生的纤维素的统称,由葡萄糖分子以β-1,4-糖苷键聚合而成,其区别于植物纤维的主要特点是具有高持水力、高结晶度、高弹性模量、良好的生物相容性和机械性能等。由于 BC不含热量、咀嚼性好,目前主要用作食品配料(称为纳塔)添加在罐头、果冻、火腿肠等食品中。此外,BC也可作为新型材料基质用于医药、化工、光电等领域。目前,生产BC的主要原料是自然发酵的椰子水,产量为10-12 g/L。但我国椰子年产量只占全世界的0.04%,生产原料不足制约了我国BC产业的发展,而BC需求量还在逐年增加。
浸米水是黄酒酿造过程中的主要副产物之一,其中含有丰富的淀粉、蛋白质、糖类、有机酸、氨基酸等营养物质。我国黄酒年产量200万吨左右,生产 1吨黄酒一般会产生大约0.65吨浸米水。浸米水的化学需氧量CODcr一般在 20000mg/L-30000mg/L,生物需氧量BOD5为18000mg/L左右。因此,要将浸米水处理后排放,必须要在污水处理设备、设备运行和维护方面投入大量资金。目前,关于浸米水的循环利用的研究主要集中在以下几方面:1)通过澄清处理后用于循环浸米[1];2)用于黄酒酿造的投料用水[2-4];3)提取乳酸[5]; 4)用于酿造白酒[5-6]。但是,浸米水回用黄酒酿造容易引起黄酒品质不稳定、生物胺等有害物质的大量积累,乳酸提取成本高,限制了以上研究的应用。虽然有研究从酒糟浸出液中筛选产细菌纤维素菌株[7],但以浸米水为原料生产细菌纤维素的研究尚未见报道。
根据国家科技发展纲要指南,节能减排是今后相当长一个时期的科技发展重点。因此,如何有效地处理大量的浸米水是关系到黄酒企业能否可持续发展的重大问题。
发明内容
针对现有技术存在的以上问题,本发明目的是提供一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,以期提高浸米水的利用率,提高浸米水的附加值,解决目前浸米水难处理的问题,变废为宝,进一步提升浸米水的应用价值。
为实现本发明的发明目的,发明人提供如下技术方案:
一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,包括:
(1)发酵种子培养,按如下方法操作:
木醋杆菌(Gluconacetobacter xylinus)经固体培养基活化后,接种于液体 HS培养基中,静置培养,得到木醋杆菌种子培养液,
(2)浸米水培养基中添加适量混合增效因子发酵细菌纤维素(BacterialCellulose,简称BC),按如下方法操作:
浸米水复配碳源、氮源和无机盐,灭菌、降温后,按浸米水体积计添加 0.05-2.0%乳酸、0.05-2.5%乙酸和0.5-4.0%乙醇,然后接种木醋杆菌种子培养液,接种量6-20%,于温度28-35℃下静置培养7-10天,获得BC。测定所得BC 的产量。
本发明的内容分为两部分,一部分为BC发酵菌株种子培养,一部分为浸米水培养基中添加适量混合增效因子发酵BC。发明人研究发明,通过向浸米水中添加适量的混合增效因子,可大幅提高以浸米水为原料生产BC的产量,有效提高浸米水的利用率。
作为优选方案,根据本发明所述的一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,其中所述的步骤(1)中木醋杆菌的固体培养基组成包括:葡萄糖2%、酵母浸提物0.5%、(NH4)2SO4 1%、柠檬酸0.2%和琼脂1.8%。
作为优选方案,根据本发明所述的一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,其中所述的步骤(1)中液体HS培养基组成包括:葡萄糖2%、酵母浸提物0.5%、蛋白胨0.5%、Na2HPO4·12H2O 0.675%和柠檬酸0.115%。
作为优选方案,根据本发明所述的一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,其中所述的步骤(1)中木醋杆菌经固体培养基活化后,取含有106个 /mL的菌悬液3-10mL接种于50mL液体HS培养基中,于温度28-35℃下静置培养 48-96h。
作为优选方案,根据本发明所述的一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,其中所述的步骤(2)中浸米水复配碳源、氮源和无机盐,灭菌、降温后添加适量乳酸、乙酸和乙醇,同时符合以下要求后接种木醋杆菌发酵BC:浸米水培养基的pH为2.5-4.0,乳酸、乙酸和乙醇浓度10.0-35.0g/L、5.0-30g/L和 2.0-35.0g/L。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
(1)本发明通过混合添加适量有机酸和醇,将浸米水培养基调整到适合发酵生产BC的条件,大幅提高以浸米水为原料生产BC的产量。
(2)本发明通过比较添加不同浓度有机酸和醇条件下BC的产量,得出不同有机酸和醇对BC合成的影响显著性,为以其它原料生产BC时培养基优化、提高BC产量提供基础。
(3)本发明可通过测定不同批次浸米水中各增效因子浓度及浸米水的 pH,即可判断该批次浸米水是否适合生产BC,并将不适合生产BC的浸米水调整到适合生产BC的条件。
(4)本发明利用浸米水生产BC,与常规的污水处理方法(沉淀、好氧和厌氧处理后排放)相比,操作简单,不用增加昂贵的设备和大量的动力消耗,后期产品处理简单,实际操作性和市场前景良好。
具体实施方式
下面结合实施例,更具体地说明本发明的内容。应当理解,本发明的实施并不局限于下面的实施例,对本发明所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本发明保护范围。
在本发明中,若非特指,所有的份、百分比均为体积或重量单位,所有的设备和原料等均可从市场购得或是本行业常用的。若无特别指明,实施例采用的方法为本领域通用技术。
主要原材料说明:
木醋杆菌(Gluconacetobacter xylinus),海南亿德食品有限公司赠送,保存于实验室-80℃冰箱中。
浸米水,取自浙江塔牌绍兴酒有限公司。将浸米水用120目滤布过滤后取上清,用于配制培养基。
椰子水:超市购买椰子,破壳取水于烧杯中、封口,于25-35℃静置3-5 天,120目滤布过滤,上清用于配制椰子水发酵培养基。
实施例中BC产量计算按下述方法进行:
发酵结束后所得的BC,先用自来水清洗数次除去BC膜表面培养基及杂质,然后用0.1mol/L NaOH溶液于80℃水浴浸泡2h,再用自来水冲洗,直至冲洗水透明且pH稳定,将清洗过的BC于105℃下烘干,称重。BC产量用每升培养基发酵所得BC的干重计,即g/L。
实施例1
一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,包括:
(1)发酵菌株种子培养
木醋杆菌(Gluconacetobacter xylinus)经固体培养基(葡萄糖2%,酵母浸提物0.5%,(NH4)2SO4 1%,柠檬酸0.2%,琼脂1.8%)活化后,取含有106个 /mL的菌悬液10mL接种于50mL液体HS培养基(葡萄糖2%,酵母浸提物 0.5%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4·12H2O0.675%,柠檬酸0.115%)中,于温度 28℃下静置培养96h,得到木醋杆菌种子培养液,
(2)浸米水中添加混合增效因子发酵生产BC
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,按浸米水体积分数添加0.05%乳酸、0.15%乙酸和2.5%乙醇,然后接种木醋杆菌种子培养液,接种量以浸米水体积计为 6%,于30℃静置培养7天后,测定所得BC的产量为9.4g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为3.2,乳酸、乙酸和乙醇浓度11.3g/L、6.7g/L和22.2g/L。
实施例2
一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,包括:
(1)发酵菌株种子培养
木醋杆菌(Gluconacetobacter xylinus)经固体培养基(葡萄糖2%,酵母浸提物0.5%,(NH4)2SO4 1%,柠檬酸0.2%,琼脂1.8%)活化后,取含有106个 /mL的菌悬液3mL接种于50mL液体HS培养基(葡萄糖2%,酵母浸提物 0.5%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4·12H2O0.675%,柠檬酸0.115%)中,于温度 35℃下静置培养48h,得到木醋杆菌种子培养液,
(2)浸米水中添加混合增效因子发酵生产BC
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,按浸米水体积分数添加0.2%乳酸、0.2%乙酸和3.0%乙醇,然后接种木醋杆菌种子培养液,接种量以浸米水体积计为 15%,于30℃静置培养10天后,测定所得BC的产量为8.6g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为3.0,乳酸、乙酸和乙醇浓度12.8g/L、7.3g/L和 26.3g/L。
实施例3
一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,包括:
(1)发酵菌株种子培养
木醋杆菌(Gluconacetobacter xylinus)经固体培养基(葡萄糖2%,酵母浸提物0.5%,(NH4)2SO4 1%,柠檬酸0.2%,琼脂1.8%)活化后,取含有106个/mL的菌悬液8mL接种于50mL液体HS培养基(葡萄糖2%,酵母浸提物 0.5%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4·12H2O0.675%,柠檬酸0.115%)中,于温度 30℃下静置培养60h,得到木醋杆菌种子培养液,
(2)浸米水中添加混合增效因子发酵生产BC
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,按浸米水体积添加0.05%乳酸、0.05%乙酸和0.5%乙醇,然后接种木醋杆菌种子培养液,接种量以浸米水体积计为10%,于30℃静置培养8天后,测定所得BC的产量为4.1g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为3.8,乳酸、乙酸和乙醇浓度11.2g/L、5.7g/L和6.6g/L。
比较例1:
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,接种木醋杆菌种子培养液(6-15%),于 30℃静置培养7-10天后,所得BC的产量为2.1g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为4.0,乳酸、乙酸和乙醇浓度10.7g/L、5.1g/L和2.1g/L。
实施例1与比较例1相比可以看出,添加适量混合增效因子的浸米水培养基中BC产量比不添加时提高3.48倍。
比较例2:
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,添加0.15%乙酸,然后接种木醋杆菌种子培养液(6-15%),于30℃静置培养7-10天后,所得BC的产量为6.3g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为3.4,乳酸、乙酸和乙醇浓度10.3g/L、 6.8g/L和2.1g/L。
实施例1与比较例2相比可以看出,添加0.05%乳酸、0.15%乙酸和2.5%乙醇条件下BC产量比单独添加0.15%乙酸时提高49.2%。
比较例3:
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,添加0.05%乳酸,然后接种木醋杆菌种子培养液(6-15%),于30℃静置培养7-10天后,所得BC的产量为5.4g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为3.8,乳酸、乙酸和乙醇浓度11.4g/L、 5.3g/L和2.2g/L。
实施例1与比较例3相比可以看出,添加0.05%乳酸、0.15%乙酸和2.5%乙醇条件下BC产量比单独添加0.05%乳酸时提高74.1%。
比较例4:
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,添加2.5%乙醇,然后接种木醋杆菌种子培养液(6-15%),于30℃静置培养7-10天后,所得BC的产量为7.8g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为4.0,乳酸、乙酸和乙醇浓度10.1g/L、 5.2g/L和22.4g/L。
实施例1与比较例4相比可以看出,添加0.05%乳酸、0.15%乙酸和2.5%乙醇条件下BC产量比单独添加2.5%乙醇时提高20.5%。
比较例5:
椰子水中加入蔗糖3%,蛋白胨0.3%,(NH4)2SO4 0.3%,KH2PO4 0.4%, pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,接种木醋杆菌种子培养液 (6-15%),于30℃静置培养7-10天后,所得BC的产量为11.2g/L(干重)。椰子水培养基初始pH和总酸度分别为3.5和10.8g/L(乳酸计))。
实施例1与比较例5相比可以看出,优化后的浸米水培养基中BC产量比工业化BC产量(椰子水培养基)低16.1%,但浸米水为黄酒产业无法回收利用的副产物,因此,具有一定的实际应用价值。
比较例6:
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,添加0.05%乙酸和0.15%乳酸,然后接种木醋杆菌种子培养液(6-15%),于30℃静置培养7-10天后,所得BC的产量为6.8g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为3.1,乳酸、乙酸和乙醇浓度11.8g/L、6.8g/L和2.0g/L。
实施例1与比较例6相比可以看出,添加0.05%乳酸、0.15%乙酸和2.5%乙醇条件下BC产量比添加0.05%乳酸和0.15%乙酸条件下提高38.2%。
比较例7:
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,添加0.05%乳酸和2.5%乙醇,然后接种木醋杆菌种子培养液(6-15%),于30℃静置培养7-10天后,所得BC的产量为 8.0g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为3.8,乳酸、乙酸和乙醇浓度 11.6g/L、5.2g/L和22.3g/L。
实施例1与比较例7相比可以看出,添加0.05%乳酸、0.15%乙酸和2.5%乙醇条件下BC产量比添加0.05%乳酸和2.5%乙醇条件下提高17.5%。
比较例8:
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,添加0.15%乙酸和2.5%乙醇,然后接种木醋杆菌种子培养液(6-15%),于30℃静置培养7-10天后,所得BC的产量为 8.2g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为3.4,乳酸、乙酸和乙醇浓度 10.2g/L、6.6g/L和22.1g/L。
实施例1与比较例8相比可以看出,添加0.05%乳酸、0.15%乙酸和2.5%乙醇条件下BC产量比添加0.15%乙酸和2.5%乙醇条件下提高14.6%。
实施例4
一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,包括:
(1)发酵菌株种子培养
木醋杆菌(Gluconacetobacter xylinus)经固体培养基(葡萄糖2%,酵母浸提物0.5%,(NH4)2SO4 1%,柠檬酸0.2%,琼脂1.8%)活化后,取含有106个 /mL的菌悬液10mL接种于50mL液体HS培养基(葡萄糖2%,酵母浸提物 0.5%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4·12H2O0.675%,柠檬酸0.115%)中,于温度 30℃下静置培养66h,
(2)浸米水中添加混合增效因子发酵生产BC
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,按浸米水体积计添加1.0%乳酸、1.0%乙酸和3.0%乙醇,然后按浸米水体积计接种木醋杆菌种子培养液10%,于30℃静置培养8天后,测定所得BC的产量为6.4g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为2.7,乳酸、乙酸和乙醇浓度22.1g/L、14.9g/L和26.2g/L。
实施例4与实施例1相比可以看出,增加乳酸、乙酸和乙醇添加量并没有增加BC的产量。
实施例4与比较例1相比可看出,添加1.0%乳酸、1.5%乙酸和3.0%乙醇条件下BC产量比不添加任何物质提高2.05倍。
实施例5
一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,包括:
(1)发酵菌株种子培养
木醋杆菌(Gluconacetobacter xylinus)经固体培养基(葡萄糖2%,酵母浸提物0.5%,(NH4)2SO4 1%,柠檬酸0.2%,琼脂1.8%)活化后,取含有106个 /mL的菌悬液6mL接种于50mL液体HS培养基(葡萄糖2%,酵母浸提物 0.5%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4·12H2O0.675%,柠檬酸0.115%)中,于温度 35℃下静置培养48h,
(2)浸米水中添加混合增效因子发酵生产BC
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,按浸米水体积计添加2.0%乳酸、2.5%乙酸和4.0%乙醇,然后按浸米水体积计接种木醋杆菌种子培养液15%,于30℃静置培养10天后,测定所得BC的产量为5.6g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为2.5,乳酸、乙酸和乙醇浓度34.4g/L、29.7g/L和34.3g/L。
实施例5与实施例1和实施例4相比可以看出,增加乳酸、乙酸和乙醇添加量并没有增加BC的产量。
实施例5与比较例1相比可看出,添加2.0%乳酸、2.5%乙酸和4.0%乙醇条件下BC产量比不添加任何物质提高1.67倍。
比较例9:
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,添加2.5%乙酸,然后接种木醋杆菌种子培养液(6-15%),于30℃静置培养7-10天后,所得BC的产量为4.8g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为2.7,乳酸、乙酸和乙醇浓度10.1g/L、 30.2g/L和2.4g/L。
实施例5与比较例9相比可以看出,添加2.0%乳酸、2.5%乙酸和4.0%乙醇条件下BC产量比单独添加2.5%乙酸提高16.7%。
比较例9与比较例2相比可看出,增加乙酸添加量并没有增加BC产量,反而引起BC产量下降。
比较例10:
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,添加2.0%乳酸,然后接种木醋杆菌种子培养液(6-15%),于30℃静置培养7-10天后,所得BC的产量为3.7g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为2.8,乳酸、乙酸和乙醇浓度34.7g/L、 5.4g/L和2.3g/L。
实施例5与比较例10相比可以看出,添加2.0%乳酸、2.5%乙酸和4.0%乙醇条件下BC产量比单独添加2.0%乳酸提高51.4%。
比较例10与比较例3相比可看出,单独增加乳酸添加量不能进一步促进 BC合成,反而引起BC产量下降。
比较例11:
浸米水中加入蔗糖3%,酵母浸提物0.5%,NH4SO4 0.3%,柠檬酸0.2%,蛋白胨0.5%,Na2HPO4 0.2%,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.2%,pH自然,115℃灭菌20min。待培养基降到室温后,添加4.0%乙醇,然后接种木醋杆菌种子培养液(6-15%),于30℃静置培养7-10天后,所得BC的产量为7.1g/L(干重)。浸米水发酵培养基的初始pH为3.9,乳酸、乙酸和乙醇浓度10.3g/L、 5.5g/L和34.6g/L。
实施例5与比较例11相比可以看出,乳酸和乙酸添加量过多会引起BC产量下降。(添加2.0%乳酸、2.5%乙酸和4.0%乙醇条件下BC产量比单独添加 4.0%乙醇降低21.1%。)
比较例11与比较例4相比可看出,单独增加乙醇添加量不能进一步促进BC 合成,反而引起BC产量下降。
参考文献
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[7]王雪奇,应以坚,金亚倩.黄酒等食品中产细菌纤维素菌的筛选与鉴定.轻工科技,2015,11:6-8。

Claims (5)

1.一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,其特征在于包括:
(1)发酵种子培养,按如下方法操作:
木醋杆菌经固体培养基活化后,接种于液体HS培养基中,静置培养,得到木醋杆菌种子培养液,
(2)浸米水培养基中添加混合增效因子发酵细菌纤维素,按如下方法操作:
浸米水复配碳源、氮源和无机盐,灭菌、降温后,按浸米水体积计添加0.05-2.0%乳酸、0.05-2.5%乙酸和0.5-4.0%乙醇,然后接种木醋杆菌种子培养液,接种量6-20%,于温度28-35℃下静置培养7-10天,获得细菌纤维素。
2.根据权利要求1所述的一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,其特征在于,所述的步骤(1)中木醋杆菌的固体培养基组成包括:葡萄糖2%、酵母浸提物0.5%、(NH4)2SO41%、柠檬酸0.2%和琼脂1.8%。
3.根据权利要求1所述的一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,其特征在于,所述的步骤(1)中液体HS培养基组成包括:葡萄糖2%、酵母浸提物0.5%、蛋白胨0.5%、Na2HPO4·12H2O 0.675%和柠檬酸0.115%。
4.根据权利要求1所述的一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,其特征在于,所述的步骤(1)中木醋杆菌经固体培养基活化后,取含有106个/mL的菌悬液3-10mL接种于50mL液体HS培养基中,于温度28-35℃下静置培养48-96h。
5.根据权利要求1所述的一种以浸米水为原料生产细菌纤维素的方法,其特征在于,所述的步骤(2)中浸米水复配碳源、氮源和无机盐,灭菌、降温后添加适量乳酸、乙酸和乙醇,同时符合以下要求后接种木醋杆菌发酵细菌纤维素:浸米水培养基的pH为2.5-4.0,乳酸、乙酸和乙醇浓度分别为10.0-35.0g/L、5.0-30g/L和2.0-35.0g/L。
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