CN108102955A - 用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂及其制备方法 - Google Patents

用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂及其制备方法，该复合微生物菌剂主要由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌、酶制剂和生物促生剂组成；其中，四种微生物分别经过发酵培养后，发酵液按照1～3:1～3:1～3:1～3的比例混合，通过离心收集菌剂，添加海藻糖、甘油和β～环糊精冷冻干燥获得微生物菌剂。微生物菌剂与酶制剂和生物促生剂复配后获得复合微生物菌剂。本发明的复合微生物菌剂具有高效快速澄清黑臭水的作用，生产成本低廉，使用操作简单，具有广阔的应用前景。

Description

用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及污水处理领域，尤其涉及一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂及其制备方法。
背景技术
随着经济快速发展和城镇人口的增多，大部分工业废水和生活污水未经有效处理直接排入河道或者湖泊。随着流入河道和湖泊的有机污染物不断增加，超出了河道和湖泊的自净能力，导致水生态发生变化，最终导致水体发生季节性或者终年黑臭的现象。
黑臭水体主要是由有机污泥的沉积和微生物厌氧发酵形成的。当有大量有机污染物进入水体，水中溶解氧被好氧微生物耗尽后，水体转入缺氧状态，厌氧微生物大量繁殖，有机物被厌氧微生物分解为氨氮、腐殖质、硫化氢、甲烷和硫醇等物质，致使水体发黑发臭。在缺氧和厌氧条件下，水中的铁、锰等金属离子与水中的硫离子形成硫化亚铁和硫化锰等化合物。悬浮颗粒媳妇硫化亚铁、硫化锰等致使水体变黑。住建部和环境保护部联合发布的黑臭水体整治信息，截至到目前，全国认证的黑臭水体有2100个，其中治理完成794个，治理中656个，方案制定中的642个。
目前黑臭水体主要以“截污控源、内源治理、生态修复”作为主要治理措施，从河内、岸上两方面齐抓共管。主要采取的措施有，修建截污管线，将入河污水收集，进入污水处理厂处理；清淤，解决内源污染问题；利用微生物、水生植物去除水体污染物，改善生态环境和景观；加大再生水利用，在有条件区域同步铺设再生水管线，引再生水补充河道，提高水体流动性；在有条件的情况下引入清水；加强河岸整治、垃圾清理等。截污控源和内源治理后，如何有效的进行水生态修复并长期维持水体生态环境平衡。未来黑臭水体的治将集中在水体的生态修复和维持水生态平衡，防止治理后的水体二次发生黑臭现象。
目前，内源治理方式主要是清淤。在不具备清淤条件的水体，只能采用投加化学药剂、吸附剂、微生物复合菌剂的方式，使水体澄清，消除黑臭。化学药剂虽然效果显著，但容易引入高浓度化学物质，导致二次污染。吸附剂主要是吸附污染物，对污染物的浓度降低没有作用。微生物是生物圈重要的生产者和有机物的主要分解者，它们的活动是自然界物质正常循环的基础。但由于黑臭水体的特殊性，目前的微生物菌剂并不适用于对黑臭水体的进行治理，因此如何提供一种适用于黑臭水体的高效微生物复合菌剂是需要解决的问题。
发明内容
基于现有技术所存在的问题，本发明的目的是提供一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂及其制备方法，能高效处理黑臭水体治理与修复。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
本发明实施方式提供一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，该复合微生物菌剂是以枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌、纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂为原料，通过以下方式制成的复合微生物菌剂，包括：将原料中的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和沼泽红假单胞菌分别经过发酵培养后得到四种发酵液，再将四种发酵液混合后形成混合发酵液，通过对混合发酵液离心收集菌体后，添加海藻糖、甘油和β-环糊精，之后经过冷冻干燥获得微生物菌剂，将得到的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂进行复配得到该复合微生物菌剂。
本发明实施方式还提供一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂的制备方法，用于制备本发明所述的复合微生物菌剂，包括以下步骤：
以枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌、纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂为原料；
将上述原料中的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和沼泽红假单胞菌分别经过发酵培养后得到四种发酵液，再将四种发酵液混合后形成混合发酵液，通过对混合发酵液离心收集菌体后，添加海藻糖、甘油和β-环糊精，之后经过冷冻干燥获得微生物菌剂，将得到的所述微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂进行复配即得到该复合微生物菌剂。
由上述本发明提供的技术方案可以看出，本发明实施例提供的用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂及其制备方法，其有益效果为：
该复合微生物菌剂中的四种微生物对各种水质具有较强的适应性，可以快速利用水中的有机物和氨氮。添加纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶有助于将大分子有机物分解为小分子物质，使微生物易于利用。生物促生剂的添加可以加速添加微生物的生长繁殖，同时可以激活水体土著微生物。该复合微生物菌剂通过各组分的协同作用，对黑臭水体澄清，降低水体富营养，提升水质具有一定的作用。通过投加本发明的复合微生物菌剂的方式治理黑臭水体，与化学药剂相比具有环境友好性。同时，具有投加量少，操作简单、成本低廉等优势。
具体实施方式
下面结合本发明的具体内容，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明的保护范围。本发明实施例中未作详细描述的内容属于本领域专业技术人员公知的现有技术。
本发明实施例提供一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，主要用于黑出水体治理及水体修复，该复合微生物菌剂是以枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌、纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂为原料，通过以下方式制成的复合微生物菌剂，包括：将原料中的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和沼泽红假单胞菌分别经过发酵培养后得到四种发酵液，再将四种发酵液混合后形成混合发酵液，通过对混合发酵液离心收集菌体后，添加海藻糖、甘油和β-环糊精，之后经过冷冻干燥获得微生物菌剂，将得到的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂进行复配得到该复合微生物菌剂。
上述复合微生物菌剂中，将四种发酵液混合形成混合发酵液为：
将枯草芽孢杆菌的发酵液、地衣芽孢杆菌的发酵液、产朊假丝酵母的发酵液和沼泽红假单胞菌的发酵液按照1～3：1～3：1～3：1～3的重量组成比例混合形成混合发酵液。
上述复合微生物菌剂中，添加的海藻糖、甘油和β-环糊精的重量分别为收集菌体重量的1％～10％、1％～10％、5％～20％；
所述纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶的酶活性分别为5000～20000U/g、50000～150000U/g、50000～100000U/g和10000～50000U/g。
上述复合微生物菌剂中，将得到的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂进行复配为：
将得到的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂按照50～100:5～10:5～10:5～10:5～10:5～10的重量比例进行复配。
上述复合微生物菌剂中，将原料中的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和沼泽红假单胞菌分别经过发酵培养后得到四种发酵液中，
将四种微生物分别接种于种子培养基中进行培养制备四种种子液，将四种种子液分别经过培养后接种于发酵培养基中，经过发酵培养获得四种高浓度菌液即为四种发酵液；
其中，对枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌发酵培养采用的培养基分别为LB培养基、LB培养基、YPD培养基和RCVBN培养基；
枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌的培养温度分别为35～40℃、35～40℃、28～32℃、25～32℃，种子培养时间分别为6～18h、6～18h、6～18h、12～36h，发酵培养时间分别为20～40h、20～40h、40～60h、100～150h；
枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌的接种比例(体积比)分别为3～8％，3～8％，3～8％，10～30％。
上述冷冻干燥获得微生物菌剂的冷冻时间为24小时，获得的微生物菌剂的活菌数为1～5*10^9cfu/g。
本发明实施例还提供一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂的制备方法，用于制备上述的复合微生物菌剂，包括以下步骤：
以枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌、纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂为原料；
将上述原料中的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和沼泽红假单胞菌分别经过发酵培养后得到四种发酵液，再将四种发酵液混合后形成混合发酵液，通过对混合发酵液离心收集菌体后，添加海藻糖、甘油和β-环糊精，之后经过冷冻干燥获得微生物菌剂，将得到的所述微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂进行复配即得到该复合微生物菌剂。
上述制备方法中，将四种发酵液混合形成混合发酵液为：
将枯草芽孢杆菌的发酵液、地衣芽孢杆菌的发酵液、产朊假丝酵母的发酵液和沼泽红假单胞菌的发酵液按照1～3：1～3：1～3：1～3的重量组成比例混合形成混合发酵液；
上述方法中，添加的海藻糖、甘油和β-环糊精的重量分别为收集菌体重量的1％～10％、1％～10％、5％～20％；
所述方法中，将得到的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂进行复配为：将得到的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂按照50～100:5～10:5～10:5～10:5～10:5～10的重量比例进行复配；
上述方法中，纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶的酶活性分别为5000～20000U/g、50000～150000U/g、50000～100000U/g和10000～50000U/g。
上述制备方法中，将原料中的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和沼泽红假单胞菌分别经过发酵培养后得到四种发酵液中，是将四种微生物分别接种于种子培养基中进行培养制备四种种子液，将四种种子液分别经过培养后接种于发酵培养基中，经过发酵培养获得四种高浓度菌液即为四种发酵液；
其中，对枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌发酵培养采用的培养基分别为LB培养基、LB培养基、YPD培养基和RCVBN培养基；
枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌的培养温度分别为35～40℃、35～40℃、28～32℃、25～32℃，种子培养时间分别为6～18h、6～18h、6～18h、12～36h，发酵培养时间分别为20～40h、20～40h、40～60h、100～150h；
枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌的接种比例(体积比)分别为3～8％，3～8％，3～8％，10～30％。
上述制备方法中，冷冻干燥获得微生物菌剂的冷冻时间为24至36小时，获得的微生物菌剂的活菌数为1～5*10^9cfu/g。
下面对本发明实施例具体作进一步地详细描述。
本实施例的复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌、纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂组成。
该复合微生物菌剂的制备方法为：取在斜面或平板活化后的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌分别接种于LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基中，分别在35～40℃、35～40℃、28～32℃、25～32℃培养6～18h、6～18h、6～18h、12～36h获得种子液。
种子液分别按照3～8％，3～8％，3～8％，10～30％的接种比例(体积比)接种至发酵培养基(LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基)中，分别在35～40℃、35～40℃、28～32℃、25～32℃培养20～40h、20～40h、40～60h、100～150h后获得高浓度的四种菌液；
将四种菌液按照1～3:1～3:1～3:1～3的比例混合，通过离心收集菌体，按照菌体重量添加1％～10％的海藻糖、1％～10％的甘油、5％～20％的β-环糊精，进行冷冻干燥24h～36h即可获得菌粉。获得的菌粉活菌数在1～5*10^9cfu/g。
微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂按照50～100:5～10:5～10:5～10:5～10:5～10的比例进行复配，即获得复合微生物菌剂。
实施例1
本实施例提供一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，其制备方法如下：
将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌分别接种于LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基斜面培养基中，分别在35℃、35℃、28℃、25℃下培养20h、20h、40h、100h后用于发酵培养；
将活化后的斜面菌株分别接种于种子培养基(LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基)，在35℃、35℃、28℃、25℃培养6h、6h、6h、12h获得种子液；
种子液分别按照3％、3％、3％、10％的接种比例(体积比)接种至发酵培养基(LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基)中，在35℃、35℃、28℃、25℃培养20h、20h、40h、100h后获得高浓度的四种菌液；
将四种菌液按照1:1:1:1的重量比例混合，通过离心收集菌体，按照菌体重量添加1％的海藻糖、1％的甘油、5％的β-环糊精，进行冷冻干燥24h获得菌粉即为微生物菌剂，获得的菌粉活菌数为1.2*10^9cfu/g；
将上述的微生物菌剂(即菌粉)与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂按照100:5:5:5:5:5的重量比例进行复配，获得复合微生物菌剂。
将本实施例获得的复合微生物菌剂应用于黑臭水体治理。在200L水箱中取黑臭河道水175L放置其中，底泥厚度5cm，初始水质COD 216mg/L、氨氮42mg/L、透明度5cm、溶解氧0.15mg/L。按照万分之一(w/v)的添加量将菌剂投入水中，于曝气(30L/min)条件下处理10天，以相同曝气量不加菌剂作为对照。10天后经测定COD 78mg/L、氨氮12mg/L、透明度41cm、溶解氧2.8mg/L。
实施例2
本实施例提供一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，其制备方法如下：
将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌分别接种于LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基斜面培养基中，分别在40℃、40℃、32℃、32℃下培养40h、40h、60h、150h后用于发酵培养；
将活化后的斜面菌株分别接种于种子培养基(LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基)，在40℃、40℃、32℃、32℃培养18h、18h、18h、36h获得种子液；
种子液分别按照8％，8％，8％，30％的接种比例(体积比)接种至发酵培养基(LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基)中，在37℃、37℃、30℃、30℃培养40h、40h、60h、150h后获得高浓度的四种菌液；
四种菌液按照1:1:1:1的重量比例混合，通过离心收集菌体，按照菌体重量添加10％的海藻糖、10％的甘油、20％的β-环糊精，进行冷冻干燥36h获得菌粉即为微生物菌剂，获得的菌粉活菌数在3.8*10^9cfu/g；
将上述制得的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂按照100:5:5:5:5:5的比例进行复配，获得复合微生物菌剂。
将本实施例获得的复合微生物菌剂应用于黑臭水体治理。在200L水箱中取黑臭河道水175L放置其中，底泥厚度5cm，初始水质COD 195mg/L、氨氮39.4mg/L、透明度5cm、溶解氧0.22mg/L。按照万分之一(w/v)的添加量将菌剂投入水中，于曝气(30L/min)条件下处理10天，以相同曝气量不加菌剂作为对照。10天后经测定COD 90.4mg/L、氨氮15.2mg/L、透明度38cm、溶解氧1.9mg/L
实施例3
本实施例提供一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，其制备方法如下：
将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌分别接种于LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基斜面培养基中，分别在37℃、37℃、30℃、30℃下培养24h、24h、48h、120h后用于发酵培养；
将活化后的斜面菌株分别接种于种子培养基(LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基)，在37℃、37℃、30℃、30℃培养12h、12h、12h、24h获得种子液；
种子液分别按照5％，5％，5％，20％的接种比例(体积比)接种至发酵培养基(LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基)中，在37℃、37℃、30℃、30℃培养36h、36h、60h、120h后获得高浓度的四种菌液。
将菌液按照3:3:1:3的重量比例混合，通过离心收集菌体，按照菌体重量添加5％的海藻糖、5％的甘油、10％的β-环糊精，进行冷冻干燥24h获得菌粉即为微生物菌剂，获得的菌粉活菌数在4.8*10^9cfu/g；
将上述制得的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂按照100:10:10:10:10:5的比例进行复配，获得复合微生物菌剂。
将本实施例获得的复合微生物菌剂应用于黑臭水体治理。在200L水箱中取黑臭河道水175L放置其中，底泥厚度5cm，初始水质COD 203mg/L、氨氮40.5mg/L、透明度6cm、溶解氧0.24mg/L。按照万分之一(w/v)的添加量将菌剂投入水中，于曝气(30L/min)条件下处理10天，以相同曝气量不加菌剂作为对照。10天后经测定COD 38mg/L、氨氮7.4mg/L、透明度48cm、溶解氧3.7mg/L。
实施例4
本实施例提供一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，其制备方法如下：
将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌分别接种于LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基斜面培养基中，分别在37℃、37℃、30℃、30℃下培养24h、24h、48h、120h后用于发酵培养；
将活化后的斜面菌株分别接种于种子培养基(LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基)，在37℃、37℃、30℃、30℃培养12h、12h、12h、24h获得种子液；
种子液分别按照5％、5％、5％、20％的接种比例(体积比)接种至发酵培养基(LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基)中，在37℃、37℃、30℃、30℃培养36h、36h、60h、120h后获得高浓度的四种菌液；
将四种菌液按照1：1：1：1的重量比例混合，通过离心收集菌体，按照菌体重量添加5％的海藻糖、5％的甘油、10％的β-环糊精，进行冷冻干燥24h获得菌粉即为微生物菌剂，获得的菌粉活菌数在4.6*10^9cfu/g；
将上述制得的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂按照100:10:10:10:10:10的比例进行复配，获得复合微生物菌剂。
将本实施例获得的复合微生物菌剂应用于黑臭水体治理。在200L水箱中取黑臭河道水175L放置其中，底泥厚度5cm，初始水质COD 198mg/L、氨氮40.8mg/L、透明度4cm、溶解氧0.37mg/L。按照万分之一(w/v)的添加量将菌剂投入水中，于曝气(30L/min)条件下处理10天，以相同曝气量不加菌剂作为对照。10天后经测定COD 48mg/L、氨氮5.2mg/L、透明度51cm、溶解氧3.4mg/L。
实施例5
本实施例提供一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，其制备方法如下：
将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌分别接种于LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基斜面培养基中，分别在37℃、37℃、30℃、30℃下培养24h、24h、48h、120h后用于发酵培养；
将活化后的斜面菌株分别接种于种子培养基(LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基)，在37℃、37℃、30℃、30℃培养12h、12h、12h、24h获得种子液；
种子液分别按照5％，5％，5％，20％的接种比例(体积比)接种至发酵培养基(LB培养基、LB培养基、YPD培养基、RCVBN培养基)中，在37℃、37℃、30℃、30℃培养36h、36h、60h、120h后获得高浓度的四种菌液；
将四种菌液按照1:1:1:1的重量比例混合，通过离心收集菌体，按照菌体的重量添加5％的海藻糖、5％的甘油、10％的β-环糊精，进行冷冻干燥24h获得菌粉即为微生物菌剂，获得的菌粉活菌数为4.6*10^9cfu/g；
将上述制得的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂按照100:5:5:5:5:5的重量比例进行复配，即获得复合微生物菌剂。
将本实施例获得的复合微生物菌剂应用于黑臭水体治理。在200L水箱中取黑臭河道水175L放置其中，底泥厚度5cm，初始水质COD 183mg/L、氨氮43.5mg/L、透明度5cm、溶解氧0.27mg/L。按照万分之一(w/v)的添加量将菌剂投入水中，于曝气(30L/min)条件下处理10天，以相同曝气不加菌剂作为对照。10天后经测定COD 51mg/L、氨氮6.9mg/L、透明度47cm、溶解氧3.8mg/L。
通过上述实施例发现，复合微生物菌剂对黑臭水体澄清，降低水体富营养，提升水质具有一定的作用。通过投加本发明的复合微生物菌剂的方式治理黑臭水体，与化学药剂相比具有环境友好性。同时，具有投加量少，操作简单、成本低廉等优势。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书的保护范围为准。

Claims (10)

1.一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，其特征在于，该复合微生物菌剂是以枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌、纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂为原料，通过以下方式制成的复合微生物菌剂，包括：将原料中的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和沼泽红假单胞菌分别经过发酵培养后得到四种发酵液，再将四种发酵液混合后形成混合发酵液，通过对混合发酵液离心收集菌体后，添加海藻糖、甘油和β-环糊精，之后经过冷冻干燥获得微生物菌剂，将得到的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂进行复配得到该复合微生物菌剂。
2.根据权利要求1所述的用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，其特征在于，所述将四种发酵液混合形成混合发酵液为：
将枯草芽孢杆菌的发酵液、地衣芽孢杆菌的发酵液、产朊假丝酵母的发酵液和沼泽红假单胞菌的发酵液按照1～3：1～3：1～3：1～3的重量组成比例混合形成混合发酵液。
3.根据权利要求1或2所述的用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，其特征在于，所述添加的海藻糖、甘油和β-环糊精的重量分别为收集菌体重量的1％～10％、1％～10％、5％～20％；
所述纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶的酶活性分别为5000～20000U/g、50000～150000U/g、50000～100000U/g和10000～50000U/g。
4.根据权利要求1或2所述的用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，其特征在于，所述将得到的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂进行复配为：
将得到的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂按照50～100:5～10:5～10:5～10:5～10:5～10的重量比例进行复配。
5.根据权利要求1或2所述的用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，其特征在于，所述将原料中的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和沼泽红假单胞菌分别经过发酵培养后得到四种发酵液中，
将四种微生物分别接种于种子培养基中进行培养制备四种种子液，将四种种子液分别经过培养后接种于发酵培养基中，经过发酵培养获得四种高浓度菌液即为四种发酵液；
其中，对枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌发酵培养采用的培养基分别为LB培养基、LB培养基、YPD培养基和RCVBN培养基；
枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌的培养温度分别为35～40℃、35～40℃、28～32℃、25～32℃，种子培养时间分别为6～18h、6～18h、6～18h、12～36h，发酵培养时间分别为20～40h、20～40h、40～60h、100～150h；
枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌的接种体积比分别为3～8％，3～8％，3～8％，10～30％。
6.根据权利要求1或2所述的用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂，其特征在于，所述冷冻干燥获得微生物菌剂的冷冻时间为24至36小时，获得的微生物菌剂的活菌数为1～5*10^9cfu/g。
7.一种用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，用于制备权利要求1至6任一项所述的复合微生物菌剂，包括以下步骤：
以枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌、纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂为原料；
将上述原料中的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和沼泽红假单胞菌分别经过发酵培养后得到四种发酵液，再将四种发酵液混合后形成混合发酵液，通过对混合发酵液离心收集菌体后，添加海藻糖、甘油和β-环糊精，之后经过冷冻干燥获得微生物菌剂，将得到的所述微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂进行复配即得到该复合微生物菌剂。
8.根据权利要求7所述的用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述方法中，将四种发酵液混合形成混合发酵液为：
将枯草芽孢杆菌的发酵液、地衣芽孢杆菌的发酵液、产朊假丝酵母的发酵液和沼泽红假单胞菌的发酵液按照1～3：1～3：1～3：1～3的重量组成比例混合形成混合发酵液；
所述方法中，添加的海藻糖、甘油和β-环糊精的重量分别为收集菌体重量的1％～10％、1％～10％、5％～20％；
所述方法中，将得到的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂进行复配为：将得到的微生物菌剂与纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和生物促生剂按照50～100:5～10:5～10:5～10:5～10:5～10的重量比例进行复配；
所述方法中，纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶的酶活性分别为5000～20000U/g、50000～150000U/g、50000～100000U/g和10000～50000U/g。
9.根据权利要求7或8所述的用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述方法中，将原料中的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和沼泽红假单胞菌分别经过发酵培养后得到四种发酵液中，是将四种微生物分别接种于种子培养基中进行培养制备四种种子液，将四种种子液分别经过培养后接种于发酵培养基中，经过发酵培养获得四种高浓度菌液即为四种发酵液；
其中，对枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌发酵培养采用的培养基分别为LB培养基、LB培养基、YPD培养基和RCVBN培养基；
枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌的培养温度分别为35～40℃、35～40℃、28～32℃、25～32℃，种子培养时间分别为6～18h、6～18h、6～18h、12～36h，发酵培养时间分别为20～40h、20～40h、40～60h、100～150h；
枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌的接种体积比分别为3～8％，3～8％，3～8％，10～30％。
10.根据权利要求7或8所述的用于黑臭水体治理的高效复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述方法中，冷冻干燥获得微生物菌剂的冷冻时间为24至36小时，获得的微生物菌剂的活菌数为1～5*10^9cfu/g。
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