CN108101920B - 氨基喹唑啉类衍生物的盐及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种氨基喹唑啉类衍生物的盐及其用途，其中，所述化合物的盐可以为晶型、部分晶型、多晶型、无定形、水合物或溶剂化物形式。本发明还涉及包含所述盐或它们的组合的药物组合物，以及所述盐或所述药物组合物在制备用于预防或治疗增殖性疾病、动脉粥样硬化或肺纤维化的药物中的用途。

Description

氨基喹唑啉类衍生物的盐及其用途

技术领域

本发明属于药物领域，涉及氨基喹唑啉类衍生物的盐及其用途，具体涉及(E)-N-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(甲氧基-D₃)-喹唑啉-6-基)-4-((4aR,7aS)-四氢-2H-[1,4]二恶烷并[2,3-c]吡咯-6(3H)-基)丁-2-烯酰胺(式(I)所示化合物)的盐及其用途，进一步涉及包含所述的盐的药物组合物。所述的盐或所述药物组合物用于预防或治疗增殖性疾病、动脉粥样硬化或肺纤维化。本发明化合物的盐可以为晶型、部分晶型、多晶型、无定形、水合物或溶剂化物形式。

背景技术

蛋白激酶(PKs)代表了一大类在细胞功能的控制和各种细胞病变的调控中起重要作用的蛋白质，可以分成两类：蛋白酪氨酸激酶(PTKs)和丝氨酸-苏氨酸激酶(STKs)。蛋白酪氨酸激酶是一类将磷酸基团从ATP催化转移到蛋白质底物上的酪氨酸残基的酶，其在正常细胞生长中起作用。许多生长因子受体蛋白通过酪氨酸激酶起作用，并且通过该过程影响信号通路的传导，进而调节细胞生长。然而，在某些条件下，这些受体或者突变或者过量表达，变得异常，引起细胞繁殖不受控制，导致肿瘤生长，最终引发熟知的疾病--癌。生长因子受体蛋白酪氨酸激酶抑制剂通过抑制上述磷酸化过程，起到治疗癌和其他特征为非控制的或细胞异常生长的疾病。

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种受体型酪氨酸激酶，广泛分布于人体各组织的细胞膜上，是鸟类成红细胞白血病病毒(avianerythroblastic leukemia viral,v-erb-b)致癌基因同源体。人EGFR/HER1/ErbB-1与HER-2(human epidermal growth factor receptor-2)/ErbB-2/Teu/p185，HER3/ErbB-3，HER4/ErbB-4等被归于HER/ErbB家族，同属于蛋白酪氨酸激酶(PTKs)。它们均为单一多肽链，分别由位于不同染色体上的基因所编码。EGFR等在上皮来源的肿瘤，如头颈部鳞状细胞癌、乳腺癌、直肠癌、卵巢癌、前列腺癌、非小细胞肺癌等多种肿瘤中都过表达，它们的表达与癌细胞增殖、转移等现象相关。Pan-HER酪氨酸激酶抑制剂通过与ATP竞争性结合胞内激酶催化位点，阻断分子内酪氨酸的自身磷酸化，阻断酪氨酸激酶活化，抑制HER-2家族激活，从而抑制细胞周期进程、加速细胞凋亡而发挥治疗作用。

EGFR与配体结合后，与HER家族亚型形成二聚体，然后与ATP结合激活EGFR自身酪氨酸激酶活性，使细胞内激酶区的数个酪氨酸位点发生自身磷酸化。Pan-HER酪氨酸激酶抑制剂通过同时作用于EGFR、HER2/4，抑制HER家族激活，起到良好的抑制肿瘤生长的作用。

研究表明，Pan-HER酪氨酸激酶不可逆抑制剂除了有效抑制EGFR外，还对HER2/4具有抑制作用，这种对HER/ErbB家族均有不可逆抑制作用的药物除提高了药物活性外，还减少了耐药性的产生，对Erlotinib耐药的H1975细胞系具有显著抑制作用。

目前上市的药物包括选择性EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼(Gefitinb,Iressa,ZD1839)、埃罗替尼(Erlotinib,Tarceva,OSI-774)以及EGFR/HER2双重抑制剂拉帕替尼(Lapatiniba,Tykerb,GW572016)等。这三个药物均为可逆性EGF受体酪氨酸磷酰化激酶抑制剂。研究发现，某些肿瘤初始对其产生良好的治疗反应，然而治疗几个月后又出现疾病进展，产生天然或继发性耐药。例如，服用吉非替尼或厄洛替尼的患者中约有一半产生耐药性，使治疗无法达到预期的效果。而研究表明，选择性EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性的产生与EGFR的突变有关。

EGFR基因的突变多位于酪氨酸激酶区域(Tyrosine kinase coding domain,TK,18-21外显子)，主要是对药物敏感的19外显子的缺失突变和21外显子的点突变，还有少数发生18外显子的点突变和20外显子的插入突变。T790M突变是EGFR 20外显子中的一个点突变，是目前较为认可的耐药机制之一，其主要机制是苏氨酸残基790区域发生二次突变，转变为甲硫氨酸(T790M)，导致EGFR结构发生变化，阻碍了EGFR与其抑制剂的结合或大大增加了EGFR与ATP的亲和力，使ATP亲和力恢复到EGFR野生水平，从而导致耐药。进一步的研究表明，治疗前的EGFR突变型肿瘤样本中同样含有T790M突变，说明T790M突变不只与耐药性相关，其本身也可能具有致癌潜能。

不可逆抑制剂可与EGFR酪氨酸激酶以共价键结合，这样，药物就能作用到表皮生长因子信号转导通路的整个环节，并提高药物的阻断效率。许多临床研究表明，目前开发中的不可逆抑制剂可对抗T790M突变，克服了T790M引起的耐药；同时，已上市的药物阿法替尼(Afatinib,BIBW 2992)以及正在临床开发阶段的一些不可逆抑制剂(例如Dacomitinib,PF00299804)，可以抑制EGFR受体家族的多个成员，特别是针对EGFR和HER-2的作用，可能通过阻断由同二聚体和异二聚体激活的协同信号通路而增强抑制效果(Oncologist,2009,14(11):1116-1130)。

专利WO 2014177038和CN 104119350公开了具有受体酪氨酸激酶抑制活性的氨基喹唑啉类衍生物，其中，化合物(E)-N-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(甲氧基-D₃)-喹唑啉-6-基)-4-((4aR,7aS)-四氢-2H-[1,4]二恶烷并[2,3-c]吡咯-6(3H)-基)丁-2-烯酰胺(式(I)所示化合物)能有效地预防或治疗增殖性疾病、动脉粥样硬化或肺纤维化。

药物多晶型是药物研发中的常见现象，是影响药物质量的重要因素。同一药物的不同晶型在外观、溶解度、熔点、溶出度、生物有效性等方面可能会有显著不同，也会对药物的稳定性、生物利用度及疗效产生不同的影响。因此，在药物研发中，应全面考虑药物的多晶型问题。

无定形是物质多晶型现象中的一种形式，是一种非晶型状态。无定形药物的各种理化性质及临床药效特征常有别于一般的晶型药物。因此，在固体药物的多晶型研究中，对无定形物质的深入探讨同样有着重要意义。

发明内容

氨基喹唑啉类衍生物(E)-N-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(甲氧基-D₃)-喹唑啉-6-基)-4-((4aR,7aS)-四氢-2H-[1,4]二恶烷并[2,3-c]吡咯-6(3H)-基)丁-2-烯酰胺(式(I)所示化合物)为棕黄色固体，为了改善化合物的稳定性和生物利用度，本发明对式(I)所示化合物的盐、及其盐的晶型进行了研究，进而提出了式(I)所示化合物的药学上可接受的酸加成盐及其组合物，具有较好的生物活性、较小的毒性和较好的稳定性，从而具有更优良的成药性。

具体而言，本发明涉及式(I)所示化合物的酸加成盐及其药物组合物，以及所述化合物的盐或所示药物组合物在制备用于治疗或预防增殖性疾病、动脉粥样硬化或肺纤维化的药物中的用途。本发明的酸加成盐可以为晶型、部分晶型、多晶型、无定形、水合物或溶剂化物形式。

一方面，本发明提供了一种式(I)所示化合物的药学上可接受的酸加成盐，

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为无机酸盐或有机酸盐，其中，所述的无机酸盐为盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、焦硫酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、高氯酸盐、过硫酸盐、半硫酸盐、重硫酸盐、硫氰酸盐、磷酸盐、焦磷酸盐、偏磷酸盐或它们的任意组合；

所述的有机酸盐为甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、苯甲酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、丙酮酸盐、乙磺酸盐、丙磺酸盐、柠檬酸盐、4-硝基苯甲酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、L-苹果酸盐、丙炔酸盐、2-丁炔酸盐、乙烯基乙酸盐、酒石酸盐、L-酒石酸盐、富马酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、双羟萘酸盐、水杨酸盐、半乳糖二酸盐、葡庚糖酸盐、扁桃酸盐、1,2-乙烷基二磺酸盐、萘磺酸盐、草酸盐、三氟乙酸盐、三氟甲磺酸盐、己二酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、己炔-1,6-二酸盐、羟基乙酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、异抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、谷氨酸盐、2-苯氧基苯甲酸盐、2-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸盐、乙酰乙酸盐、2-羟基乙磺酸盐、硼酸盐、氯代苯甲酸盐、樟脑酸盐、衣康酸盐、左旋樟脑磺酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、氨基磺酸盐、乳糖醛酸盐、半乳糖醛酸盐、环戊基丙酸盐、十二烷基硫酸盐、丙烯酸盐、环戊烷丙酸盐、甘油磷酸盐、甲氧基苯甲酸盐、二葡萄糖酸盐、葡萄糖酸盐、庚酸盐、己酸盐、三甲基乙酸盐、葡糖醛酸盐、月桂酸盐、邻苯二甲酸盐、月桂基硫酸盐、2-乙酰氧基苯甲酸盐、烟酸盐、肉桂酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、苯二甲酸盐、戊二酸盐、羟基马来酸盐、羟基苯甲酸盐、苯乙酸盐、3-羟基-2-萘甲酸盐、3-苯基丙酸盐、异丁酸盐、新戊酸盐、苦味酸盐、硬脂酸盐、2,2-二氯乙酸盐、酰化氨基酸盐、海藻酸盐、4-乙酰氨基苯磺酸盐、葵酸盐、胆酸盐、辛酸盐、壬酸盐、环拉酸盐、酞酸盐、盐酸半胱氨酸盐、山梨酸盐、帕莫酸盐、粘酸盐、盐酸甘氨酸盐、萘二磺酸盐、二甲苯磺酸盐、二盐酸胱氨酸盐、十一酸盐、聚乙烯磺酸盐、磺基水杨酸盐、苯基丁酸盐、4-羟基丁酸盐、聚乙烯硫酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、戊酸盐或它们的任意组合。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为式(I)所示化合物的丁二酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、L-苹果酸盐、柠檬酸盐、L-酒石酸盐、富马酸盐、磷酸盐或硫酸盐。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为丁二酸盐晶型A，其中，所述丁二酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：14.51±0.2°,16.54±0.2°,18.93±0.2°,19.52±0.2°,30.94±0.2°。

在另一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为丁二酸盐晶型A，其中，所述丁二酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：14.51±0.2°,16.54±0.2°,18.56±0.2°,18.93±0.2°,19.52±0.2°,21.12±0.2°,22.12±0.2°,23.21±0.2°,23.78±0.2°。

还在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为丁二酸盐晶型A，其中，所述丁二酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：5.52±0.2°,10.70±0.2°,11.11±0.2°,13.24±0.2°,14.51±0.2°,15.44±0.2°,16.04±0.2°,16.54±0.2°,17.11±0.2°,17.28±0.2°,17.49±0.2°,18.36±0.2°,18.56±0.2°,18.93±0.2°,19.52±0.2°,19.94±0.2°,20.73±0.2°,21.12±0.2°,21.40±0.2°,21.64±0.2°,22.12±0.2°,23.21±0.2°,23.58±0.2°,23.78±0.2°,24.47±0.2°,24.94±0.2°,25.40±0.2°,25.73±0.2°,26.40±0.2°,26.67±0.2°,27.04±0.2°,27.37±0.2°,27.76±0.2°,28.24±0.2°,28.56±0.2°,29.11±0.2°,29.43±0.2°,29.80±0.2°,30.27±0.2°,30.94±0.2°,31.65±0.2°,32.45±0.2°,33.41±0.2°,33.58±0.2°,34.81±0.2°,35.65±0.2°,36.05±0.2°,36.56±0.2°,37.49±0.2°,38.80±0.2°。

再在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为丁二酸盐晶型A，其具有基本上如图1所示的X射线粉末衍射图。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为丁二酸盐晶型B，其中，所述丁二酸盐晶型B的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：18.58±0.2°,19.16±0.2°,20.20±0.2°,20.57±0.2°,25.34±0.2°,26.38±0.2°；或所述丁二酸盐晶型B的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：15.11±0.2°,17.07±0.2°,18.58±0.2°,18.89±0.2°,19.16±0.2°,20.20±0.2°,20.57±0.2°,25.34±0.2°,26.38±0.2°,28.35±0.2°。

在另一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为丁二酸盐晶型B，其中，所述丁二酸盐晶型B的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：5.01±0.2°,7.01±0.2°,9.89±0.2°,10.28±0.2°,11.11±0.2°,13.09±0.2°,13.36±0.2°,13.99±0.2°,14.52±0.2°,15.11±0.2°,15.70±0.2°,17.07±0.2°,18.58±0.2°,18.89±0.2°,19.16±0.2°,20.20±0.2°,20.57±0.2°,22.80±0.2°,23.29±0.2°,23.72±0.2°,24.40±0.2°,24.52±0.2°,25.34±0.2°,26.38±0.2°,27.07±0.2°,27.62±0.2°,28.35±0.2°,28.94±0.2°,29.38±0.2°,29.77±0.2°,31.02±0.2°,31.72±0.2°,32.76±0.2°,33.55±0.2°,33.98±0.2°,35.03±0.2°,36.23±0.2°,36.76±0.2°,37.50±0.2°,38.28±0.2°,39.45±0.2°。

在另一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为丁二酸盐晶型B，其中，所述丁二酸盐晶型B具有基本上如图2所示的X射线粉末衍射图。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为丁二酸盐无定形，其特征在于，所述丁二酸盐无定形具有基本上如图3所示的X射线粉末衍射图。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为对甲苯磺酸盐无定形，其特征在于，所述对甲苯磺酸盐无定形具有基本上如图4所示的X射线粉末衍射图。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为苯磺酸盐无定形，其特征在于，所述苯磺酸盐无定形具有基本上如图5所示的X射线粉末衍射图。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为L-苹果酸盐无定形，其特征在于，所述L-苹果酸盐无定形具有基本上如图6所示的X射线粉末衍射图。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为柠檬酸盐无定形，其特征在于，所述柠檬酸盐无定形具有基本上如图7所示的X射线粉末衍射图。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为L-酒石酸盐晶型A，其中，所述L-酒石酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：18.01±0.2°,25.11±0.2°,27.73±0.2°；或所述L-酒石酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：14.39±0.2°,18.01±0.2°,20.55±0.2°,22.27±0.2°,25.11±0.2°,26.00±0.2°,27.73±0.2°,30.16±0.2°,31.03±0.2°。

在另一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为L-酒石酸盐晶型A，其中，所述L-酒石酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：5.90±0.2°,7.97±0.2°,14.39±0.2°,15.68±0.2°,18.01±0.2°,20.55±0.2°,22.27±0.2°,23.56±0.2°,25.11±0.2°,26.00±0.2°,27.15±0.2°,27.73±0.2°,28.94±0.2°,30.16±0.2°,31.03±0.2°,32.50±0.2°,33.88±0.2°,36.36±0.2°,37.65±0.2°,38.35±0.2°；或所述L-酒石酸盐晶型A具有基本上如图8所示的X射线粉末衍射图。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为L-酒石酸盐无定形，其中，所述L-酒石酸盐无定形具有基本上如图9所示的X射线粉末衍射图。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为富马酸盐晶型A，其中，所述富马酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：19.61±0.2°,23.45±0.2°,24.97±0.2°,25.72±0.2°；或所述富马酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：13.79±0.2°,16.23±0.2°,16.61±0.2°,19.61±0.2°,20.90±0.2°,23.45±0.2°,24.97±0.2°,25.72±0.2°,30.09±0.2°。

在另一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为富马酸盐晶型A，其中，所述富马酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：5.12±0.2°,7.02±0.2°,9.93±0.2°,10.58±0.2°,11.64±0.2°,12.94±0.2°,13.79±0.2°,14.70±0.2°,15.20±0.2°,16.23±0.2°,16.61±0.2°,17.13±0.2°,17.98±0.2°,19.61±0.2°,20.90±0.2°,21.73±0.2°,22.82±0.2°,23.45±0.2°,24.97±0.2°,25.72±0.2°,26.92±0.2°,27.80±0.2°,28.82±0.2°,30.09±0.2°,31.11±0.2°,32.23±0.2°,32.86±0.2°,35.05±0.2°,38.50±0.2°,38.90±0.2°,39.97±0.2°。

在另一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为富马酸盐晶型A，其具有基本上如图10所示的X射线粉末衍射图。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为磷酸盐晶型A，其中，所述磷酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：13.50±0.2°,21.47±0.2°,23.97±0.2°；或所述磷酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：13.50±0.2°,20.08±0.2°,21.47±0.2°,22.28±0.2°,23.97±0.2°。

在另一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为磷酸盐晶型A，其中，所述磷酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：10.72±0.2°,13.50±0.2°,14.19±0.2°,16.08±0.2°,17.52±0.2°,19.14±0.2°,19.79±0.2°,20.08±0.2°,21.47±0.2°,22.28±0.2°,23.10±0.2°,23.97±0.2°,26.71±0.2°,29.70±0.2°,32.44±0.2°,33.50±0.2°,35.26±0.2°,37.22±0.2°,38.03±0.2°；或所述磷酸盐晶型A具有基本上如图11所示的X射线粉末衍射图。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为硫酸盐晶型A，其中，所述硫酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：13.39±0.2°,19.30±0.2°,20.13±0.2°,20.77±0.2°,25.58±0.2°。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为硫酸盐晶型A，其中，所述硫酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：5.46±0.2°,13.39±0.2°,13.95±0.2°,16.97±0.2°,19.30±0.2°,20.13±0.2°,20.77±0.2°,21.54±0.2°,21.74±0.2°,25.58±0.2°。

在另一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为硫酸盐晶型A，其中，所述硫酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：5.46±0.2°,6.67±0.2°,8.15±0.2°,8.63±0.2°,10.85±0.2°,13.39±0.2°,13.95±0.2°,14.42±0.2°,14.84±0.2°,15.12±0.2°,15.53±0.2°,16.13±0.2°,16.97±0.2°,17.22±0.2°,17.62±0.2°,17.87±0.2°,19.09±0.2°,19.30±0.2°,20.13±0.2°,20.77±0.2°,21.54±0.2°,21.74±0.2°,22.15±0.2°,22.75±0.2°,23.33±0.2°,23.97±0.2°,24.55±0.2°,25.05±0.2°,25.34±0.2°,25.58±0.2°,25.93±0.2°,26.39±0.2°,26.91±0.2°,27.53±0.2°,28.50±0.2°,29.28±0.2°,30.08±0.2°,35.59±0.2°,36.30±0.2°,38.23±0.2°。

在一些实施例中，本发明所述的酸加成盐为硫酸盐晶型A，其具有基本上如图12所示的X射线粉末衍射图。

另一方面，本发明还提供一种药物组合物，其包含式(I)化合物的任意一种酸加成盐或它们的组合；所述药物组合物进一步包含药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、辅剂或它们的组合。

又一方面，本发明还设计所述(I)化合物的酸加成盐或所述药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防、治疗或减轻患者增殖性疾病或动脉粥样硬化、肺纤维化。

在一些实施例中，本发明所述的增殖性疾病是转移癌、结肠癌、胃腺癌、膀胱癌、乳腺癌、肾癌、肝癌、肺癌、甲状腺癌、头颈癌、前列腺癌、胰腺癌、中枢神经系统癌症、恶性胶质瘤或骨髓增生病。

再一方面，本发明涉及预防、治疗或减轻患者增殖性疾病或动脉粥样硬化、肺纤维化的方法，包括使用本发明所述的酸加成盐或所述的药物组合物药学上可接受的有效剂量对患者进行给药。

另一方面，本发明涉及使用所述(I)化合物的酸加成盐或所述药物组合物调节蛋白激酶活性的方法。在一些实施例中，本发明涉及使用所述(I)化合物的酸加成盐或所述药物组合物抑制蛋白激酶活性的方法。

在一些实施中，本发明所述的蛋白激酶为受体酪氨酸激酶。在另一些实施例中，本发明所述的受体酪氨酸激酶为EGFR、EGFR T790M、HER-2或它们的任意组合。

还一方面，本发明还涉及式(I)所示化合物的酸加成盐及其晶型的制备方法。

本发明所述的无定形可以通过喷雾干燥的方法制备得到。本发明所述的喷雾干燥制备无定形的产率受仪器进风口温度、出风口温度、喷雾过程中体系压力等因素的影响，而进风口温度、出风口温度、喷雾过程中体系压力等与仪器的型号、所使用的溶剂等因素相关。

本发明所述的盐的制备方法中所使用的溶剂没有特别限制，任何在程度上能溶解起始原料并且不影响其性质的溶剂均包含在本发明中。另外，本领域的许多类似改动，等同替换，或等同于本发明所描述的溶剂，溶剂组合，及溶剂组合的不同比例，均视为本发明的包含范围。本发明给出了各反应步骤所使用的较佳的溶剂。

本发明所述的盐的制备实验将在实施例部分进行了详细描述。同时，本发明提供了所述盐的活性测试实验(如药代动力学实验)、溶解度实验、稳定性实验和引湿性实验等。由实验结果可知，本发明所述的盐具有较好生物活性，且溶解性好，稳定性高，适合制药用途。

其中，关于引湿性特征描述与引湿性增重的界定(中国药典2015年版四部指导原则9103药物引湿性试验指导原则，实验条件：25℃±1℃，80％±2％相对湿度)如下表所述：

引湿性特征描述与引湿性增重的界定

本发明所述的盐不易受高湿度影响而潮解，方便药物的长期贮存放置。

定义和一般术语

除非另有说明，本发明使用的所有技术和科学术语与本发明所属领域的普通技术人员所通常理解的具有相同含义。本发明涉及的所有专利和公开出版物通过引用方式整体并入本发明。尽管在本发明的实践或者测试中可以使用与本发明所述相似或者相同的任何方法和物质，但是本发明中描述的是优选的方法、设备和物质。

“药学上可接受的酸加成盐”是指本发明式(I)所示化合物与药学上可接受的无毒的酸形成的盐，包括但不限于本发明所述的各种有机酸盐和无机酸盐。

“式(I)所示化合物的酸加成盐”是指式(I)所示化合物(游离碱)与各种适合的有机酸或无机酸反应形成的盐，包括但不限于本发明所述的盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、焦硫酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、高氯酸盐、过硫酸盐、半硫酸盐、重硫酸盐、硫氰酸盐、磷酸盐、焦磷酸盐、偏磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、苯甲酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、丙酮酸盐、乙磺酸盐、丙磺酸盐、柠檬酸盐、4-硝基苯甲酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、苹果酸盐、丙炔酸盐、2-丁炔酸盐、乙烯基乙酸盐、酒石酸盐、L-酒石酸盐、富马酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、双羟萘酸盐、水杨酸盐、半乳糖二酸盐、葡庚糖酸盐、扁桃酸盐、1,2-乙烷基二磺酸盐、萘磺酸盐、草酸盐、三氟乙酸盐、三氟甲磺酸盐、己二酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、己炔-1,6-二酸盐、羟基乙酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、异抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、谷氨酸盐、2-苯氧基苯甲酸盐、2-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸盐、乙酰乙酸盐、2-羟基乙磺酸盐、硼酸盐、氯代苯甲酸盐、樟脑酸盐、衣康酸盐、左旋樟脑磺酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、氨基磺酸盐、乳糖醛酸盐、半乳糖醛酸盐、环戊基丙酸盐、十二烷基硫酸盐、丙烯酸盐、环戊烷丙酸盐、甘油磷酸盐、甲氧基苯甲酸盐、二葡萄糖酸盐、葡萄糖酸盐、庚酸盐、己酸盐、三甲基乙酸盐、葡糖醛酸盐、月桂酸盐、邻苯二甲酸盐、月桂基硫酸盐、2-乙酰氧基苯甲酸盐、烟酸盐、肉桂酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、苯二甲酸盐、戊二酸盐、羟基马来酸盐、羟基苯甲酸盐、苯乙酸盐、3-羟基-2-萘甲酸盐、3-苯基丙酸盐、异丁酸盐、新戊酸盐、苦味酸盐、硬脂酸盐、2,2-二氯乙酸盐、酰化氨基酸盐、海藻酸盐、4-乙酰氨基苯磺酸盐、葵酸盐、胆酸盐、辛酸盐、壬酸盐、环拉酸盐、酞酸盐、盐酸半胱氨酸盐、山梨酸盐、帕莫酸盐、粘酸盐、盐酸甘氨酸盐、萘二磺酸盐、二甲苯磺酸盐、二盐酸胱氨酸盐、十一酸盐、聚乙烯磺酸盐、磺基水杨酸盐、苯基丁酸盐、4-羟基丁酸盐、聚乙烯硫酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、戊酸盐等。其中，所述的“式(I)所示化合物的酸加成盐”包括该盐的无定形形式、结晶形式、溶剂化物、水合物，还包括该盐的多晶型形式。例如，式(I)所示化合物的盐酸盐包括该类盐的无定形形式、各种结晶形式、各种溶剂化物、各种水合物，还包括该类盐的多晶型形式。

“晶型”或“结晶形式”是指具有高度规则化学结构的固体，包括，但不限于，单组分或者多组分晶体，和/或化合物的多晶型物、溶剂化物、水合物、包合物、共晶、盐、盐的溶剂化物、盐的水合物。物质的结晶形式可通过本领域已知的许多方法得到。这种方法包括，但不限于，熔体结晶、熔体冷却、溶剂结晶、在限定的空间中结晶，例如，在纳米孔或者毛细管中，在表面或者模板上结晶，例如，在聚合物上，在添加剂如共结晶反分子的存在下结晶、去溶剂、脱水、快速蒸发、快速冷却、缓慢冷却、蒸气扩散、升华、反应结晶、反溶剂添加、研磨和溶剂滴研磨等。

“无定形”或“无定形形式”是指物质的质点(分子、原子、离子)在三维空间排列无周期性时形成的物质，其特征是具有漫射的不具尖峰的X射线粉末衍射图。无定形是固体物质的一种特殊的物理形式，其局部有序的结构特征，提示其与晶型物质有着千丝万缕的联系。物质的无定形形式可通过本领域已知的许多方法得到。这种方法包括，但不限于，骤冷法、反溶剂絮凝法、球磨法、喷雾干燥法、冷冻干燥法、湿法制粒法和固体分散体技术等等。

“溶剂”是指一种物质(典型地是一种液体)，该物质能够完全地或部分地溶解另一种物质(典型地是一种固体)。用于本发明实施的溶剂包括但并不限于，水、乙酸、丙酮、乙腈、苯、氯仿、四氯化碳、二氯甲烷、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、乙醇、乙酸乙酯、丁醇、叔丁醇、N,N-二甲基乙酰胺、N,N-二甲基甲酰胺、甲酰胺、蚁酸、庚烷、己烷、异丙醇、甲醇、甲基乙基酮、l-甲基-2-吡咯烷酮、均三甲苯、硝基甲烷、聚乙二醇、丙醇、2-丙酮、吡啶、四氢呋喃、甲苯、二甲苯、它们的混合物等等。

“反溶剂”是指促进产物(或产物前体)从溶剂中沉淀的流体。反溶剂可以包括冷气体、或通过化学反应促进沉淀的流体、或降低产物在溶剂中的溶解度的流体；其可以是与溶剂相同的液体但是处于不同温度，或者它可以是与溶剂不同的液体。

“溶剂化物”是指在表面、在晶格中或者在表面上和在晶格中具有溶剂的化合物，所述溶剂可以是水、乙酸、丙酮、乙腈、苯、氯仿、四氯化碳、二氯甲烷、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、乙醇、乙酸乙酯、丁醇、叔丁醇、N,N-二甲基乙酰胺、N,N-二甲基甲酰胺、甲酰胺、蚁酸、庚烷、己烷、异丙醇、甲醇、甲基乙基酮、甲基吡咯烷酮、均三甲苯、硝基甲烷、聚乙二醇、丙醇、吡啶、四氢呋喃、甲苯、二甲苯以及它们的混合物等等。溶剂化物的一个具体例子是水合物，其中在表面上、在晶格中或者在表面上和在晶格中的溶剂是水。在物质的表面上、在晶格中或者在表面上和在晶格中，水合物可以具有或者不具有除了水以外的其它溶剂。

晶型或无定形可以通过多种技术手段进行鉴别，例如X射线粉末衍射(XRPD)、红外吸收光谱法(IR)、熔点法、差示扫描量热法(DSC)、热重分析法(TGA)、核磁共振法、拉曼光谱、X射线单晶衍射、溶解量热法、扫描电子显微镜(SEM)、定量分析、溶解度和溶解速度等等。

X射线粉末衍射(XRPD)可检测晶型的变化、结晶度、晶构状态等信息，是鉴别晶型的常用手段。XRPD图谱的峰位置主要取决于晶型的结构，对实验细节相对不敏感，而其相对峰高取决于与样品制备和仪器几何形状有关的许多因素。因此，在一些实施方案中，本发明的晶型的特征在于具有某些峰位置的XRPD图，其基本上如本发明附图中提供的XRPD图所示。同时，XRPD图谱的2θ的量度可以有实验误差，不同仪器以及不同样品之间，XRPD图谱的2θ的量度可能会略有差别，因此所述2θ的数值不能视为绝对的。根据本试验所用仪器状况，衍射峰存在±0.2°的误差容限。

差示扫描量热(DSC)是在程序控制下，通过不断加热或降温，测量样品与惰性参比物(常用α-Al₂O₃)之间的能量差随温度变化的一种技术。DSC曲线的熔化峰高取决于与样品制备和仪器几何形状有关的许多因素，而峰位置对实验细节相对不敏感。因此，在一些实施方案中，本发明所述晶型的特征在于具有特征峰位置的DSC图，其基本上如本发明附图中提供的DSC图所示。同时，DSC图谱可以有实验误差，不同仪器以及不同样品之间，DSC图谱的峰位置和峰值可能会略有差别，因此所述DSC吸热峰的峰位置或峰值的数值不能视为绝对的。根据本试验所用仪器状况，熔化峰存在±3°的误差容限。

在本发明的上下文中，X-射线粉末衍射图中的2θ值均以度(°)为单位。

术语“基本上如图所示”是指X-射线粉末衍射图或DSC图或拉曼光谱图或红外光谱图中至少50％，或至少60％，或至少70％，或至少80％，或至少90％，或至少95％，或至少99％的峰显示在其图中。

当提及谱图或/和出现在图中的数据时，“峰”指本领域技术人员能够识别的不会归属于背景噪音的一个特征。

本发明涉及所述的(E)-N-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(甲氧基-D₃)-喹唑啉-6-基)-4-((4aR,7aS)-四氢-2H-[1,4]二恶烷并[2,3-c]吡咯-6(3H)-基)丁-2-烯酰胺的酸加成盐的各种新晶型，它们以基本上纯净的结晶形态存在。

本发明还涉及所述的(E)-N-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(甲氧基-D₃)-喹唑啉-6-基)-4-((4aR,7aS)-四氢-2H-[1,4]二恶烷并[2,3-c]吡咯-6(3H)-基)丁-2-烯酰胺的各种酸加成盐的无定形，所述无定形可以通过喷雾干燥制备，还可以通过其他方法制备。

“基本上纯净的”是指一种晶型基本上不含另外一种或多种晶型，即晶型的纯度至少80％，或至少85％，或至少90％，或至少93％，或至少95％，或至少98％，或至少99％，或至少99.5％，或至少99.6％，或至少99.7％，或至少99.8％，或至少99.9％，或晶型中含有其它晶型，所述其它晶型在晶型的总体积或总重量中的百分比少于20％，或少于10％，或少于5％，或少于3％，或少于1％，或少于0.5％，或少于0.1％，或少于0.01％。

“基本上不含”是指一种或多种其它晶型在晶型的总体积或总重量中的百分比少于20％，或少于10％，或少于5％，或少于4％，或少于3％，或少于2％，或少于1％，或少于0.5％，或少于0.1％，或少于0.01％。

“相对强度”是指X-射线粉末衍射图(XRPD)的所有衍射峰中第一强峰的强度为100％时，其它峰的强度与第一强峰的强度的比值。

在本发明的上下文中，当使用或者无论是否使用“大约”或“约”等字眼时，表示在给定的值或范围的10％以内，适当地在5％以内，特别是在1％以内。或者，对于本领域普通技术人员而言，术语“大约”或“约”表示在平均值的可接受的标准误差范围内。每当公开一个具有N值的数字时，任何具有N+/-1％，N+/-2％，N+/-3％，N+/-5％，N+/-7％，N+/-8％或N+/-10％值以内的数字会被明确地公开，其中“+/-”是指加或减。

除非其他方面表明，本发明与式(I)所示化合物成盐的有机酸包括所有的同分异构形式(如对映异构，非对映异构，和几何异构(或构象异构))：例如含有不对称中心的R、S构型，双键的(Z)、(E)异构体，和(Z)、(E)的构象异构体。因此，本发明与式(I)所示化合物成盐的有机酸的单个立体化学异构体或其对映异构体，非对映异构体，或几何异构体(或构象异构体)的混合物与式(I)所示化合物形成的盐都属于本发明的范围。

本发明中立体化学的定义和惯例的使用通常参考以下文献：S.P.Parker,Ed.,McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,NewYork；and Eliel,E.and Wilen,S.,"Stereochemistry of Organic Compounds",JohnWiley&Sons,Inc.,New York,1994.与式(I)所示化合物成盐的有机酸可以包含不对称中心或手性中心，因此存在不同的立体异构体。与式(I)所示化合物成盐的有机酸所有的立体异构形式，包括但绝不限于，非对映异构体，对映异构体，阻转异构体，和它们的混合物，如外消旋混合物，组成了本发明的一部分。很多有机化合物都以光学活性形式存在，即它们有能力旋转平面偏振光的平面。在描述光学活性化合物时，前缀D、L或R、S用来表示分子手性中心的绝对构型。前缀d、l或(+)、(-)用来命名化合物平面偏振光旋转的符号，(-)或l是指化合物是左旋的，前缀(+)或d是指化合物是右旋的。这些立体异构体的化学结构是相同的，但是它们的立体结构不一样。特定的立体异构体可以是对映体，异构体的混合物通常称为对映异构体混合物。50:50的对映体混合物被称为外消旋混合物或外消旋体，这可能导致化学反应过程中没有立体选择性或立体定向性。术语“外消旋混合物”和“外消旋体”是指等摩尔的两个对映异构体的混合物，缺乏光学活性。

本发明化合物的酸加成盐的组合物，制剂，给药和用途

本发明的药物组合物的特点包括式(I)所示化合物的酸加成盐和药学上可接受的载体，辅剂，或赋形剂。本发明的组合物中(I)所示化合物的酸加成盐的量能有效地可探测地治疗或减轻患者增殖性疾病或动脉粥样硬化、肺纤维化。

像本发明所描述的，本发明药学上可接受的组合物进一步包含药学上可接受的载体，辅剂，或赋形剂，这些像本发明所应用的，包括任何溶剂，稀释剂，或其他液体赋形剂，分散剂或悬浮剂，表面活性剂，等渗剂，增稠剂，乳化剂，防腐剂，固体粘合剂或润滑剂，等等，适合于特有的目标剂型。如以下文献所描述的：In Remington:The Science and Practiceof Pharmacy,21st edition,2005,ed.D.B.Troy,Lippincott Williams&Wilkins,Philadelphia,and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology,eds.J.Swarbrickand J.C.Boylan,1988-1999,Marcel Dekker,New York,综合此处文献的内容，表明不同的载体可应用于药学上可接受的组合物的制剂和它们公知的制备方法。除了任何常规的载体媒介与本发明式(I)所示化合物的酸加成盐不相容的范围，例如所产生的任何不良的生物效应或与药学上可接受的组合物的任何其他组分以有害的方式产生的相互作用，它们的用途也是本发明所考虑的范围。

可作为药学上可接受载体的物质包括，但并不限于，离子交换剂；铝；硬脂酸铝；卵磷脂；血清蛋白，如人血清蛋白；缓冲物质如磷酸盐；甘氨酸；山梨酸；山梨酸钾；饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物；水；盐或电解质，如硫酸鱼精蛋白，磷酸氢二钠，磷酸氢钾，氯化钠，锌盐；胶体硅；三硅酸镁；聚乙烯吡咯烷酮；聚丙烯酸脂；蜡；聚乙烯-聚氧丙烯-阻断聚合体；羊毛脂；糖，如乳糖，葡萄糖和蔗糖；淀粉如玉米淀粉和土豆淀粉；纤维素和它的衍生物如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素和乙酸纤维素；树胶粉；麦芽；明胶；滑石粉；辅料如可可豆脂和栓剂蜡状物；油如花生油，棉子油，红花油，麻油，橄榄油，玉米油和豆油；二醇类化合物，如丙二醇和聚乙二醇；酯类如乙基油酸酯和乙基月桂酸酯；琼脂；缓冲剂如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原的水；等渗盐；林格(氏)溶液；乙醇；磷酸缓冲溶液；和其他无毒的合适的润滑剂如月桂硫酸钠和硬脂酸镁；着色剂；释放剂；包衣衣料；甜味剂；调味剂；香料；防腐剂和抗氧化剂。

本发明的药物组合物可以是口服给药，注射给药，喷雾吸入法给药，局部给药，经直肠给药，经鼻给药，含服给药，阴道给药或通过植入性药盒给药。可以是胶囊，片剂，丸剂，粉剂，粒剂和水制悬浮液或溶液。

口服给药可以用如下形式：片剂、丸剂、胶囊、可分散的粉末、颗粒或悬浮液、糖浆、和酏剂，或以外用方式给药：软膏剂、凝胶、含药胶布等，或者以无菌可注射溶液或悬浮液形式进行非肠胃给药。

本发明药物组合物也可肠胃外或腹腔内给药。也可在适当混合有表面活性剂(如羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮)的水中制备式(I)所示化合物的酸加成盐的溶液或悬浮液。还可在甘油、液体、聚乙二醇及其在油中的混合物中制备分散液。在常规储存和使用条件下，这些制剂中含有防腐剂以防止微生物生长。

适于注射的药物形式包括：无菌水溶液或分散液和无菌粉(用于临时制备无菌注射溶液或分散液)。在所有情况下，这些形式必须是无菌的且必须是流体以易于注射器排出流体。在制造和储存条件下必须是稳定的，且必须能防止微生物(如细菌和真菌)的污染影响。载体可以是溶剂或分散介质，其中含有如水、醇(如甘油、丙二醇和液态聚乙二醇)、它们的适当混合物和植物油。

本发明式(I)所示化合物的酸加成盐或本发明的药物组合物可以以局部方式施用，而不以系统方式施用。例如通常以稀释制剂或持续释放制剂的形式直接注射至器官内。此外，含有本发明式(I)所示化合物的酸加成盐的药物组合物可以在靶向药物传递系统中使用，例如在用器官特异性抗体包衣的脂质体重递送。所述脂质体将靶向所述器官并被该器官选择性摄取。此外，含有本发明式(I)所示化合物的酸加成盐的组合物可以以快速释放制剂、延时释放制剂或即时释放制剂的形式提供。

对于吸入施用，本发明式(I)所示化合物的酸加成盐可以是气溶胶、气雾剂或粉末形式。本发明式(I)所示化合物的酸加成盐的药物组合物可以方便地以气溶胶喷雾剂形式递送，所述气溶胶喷雾剂可以装在压力容器或雾化器中，使用合适的抛射剂例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它合适的气体。在压力气溶胶的情况下，剂量单位可以通过阀门进行确定以递送计量量。例如，以胶囊剂和药筒为例，用于吸入器或吹药器的明胶可以制备为含有所述酸加成盐与适当粉末基质例如乳糖或淀粉的粉末混合物。

本发明式(I)所示化合物的酸加成盐还可以制备为直肠组合物例如灌肠剂、直肠凝胶剂、直肠泡沫剂、直肠气溶胶、栓剂、凝胶栓剂(jelly suppository)或保留灌肠剂(retention enma)，其中含有常规的栓剂基质例如可可脂或其他甘油酯以及合成聚合物例如聚乙烯吡咯烷酮、PEG等。在组合物的栓剂形式中，低熔点蜡例如但不限于脂肪酸甘油酯任选与可可脂的混合物首先被熔化。

本发明式(I)所示化合物的酸加成盐可以以仅有的药学试剂或结合一个或多个其他附加治疗(药学的)剂来给药，其中联合用药引起可接受的不良反应，这对于高增生性疾病如癌症的治疗具有特殊的意义。在这种情况下，本发明式(I)所示化合物的酸加成盐可以结合已知的细胞毒素剂，单个转导抑制剂或其他抗癌试剂，以及它们的混合物或组合来使用。像本发明所使用的，附加治疗剂正常给药治疗特殊的疾病，就是已知的“合适地治疗疾病”。本发明所使用的“附加治疗剂”包括化学治疗药物或其他抗增殖的药物可以结合本发明式(I)所示化合物的酸加成盐治疗增殖性疾病或癌症。

化学治疗药物或其他抗增殖药物包括组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂，包括但并不限于，SAHA，MS-275，MGO103，以及那些以下专利所描述的化合物：WO 2006/010264,WO03/024448,WO 2004/069823,US 2006/0058298,US 2005/0288282,WO 00/71703,WO 01/38322,WO 01/70675,WO 03/006652,WO 2004/035525,WO2005/030705,WO 2005/092899,和脱甲基化试剂包括，但并不限于，5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-aza-dC)、阿扎胞苷(Vidaza)、地西他滨(Decitabine)和以下文献所描述的化合物：US 6,268137,US 5,578,716,US5,919,772,US 6,054,439,US 6,184,211，US 6,020,318,US 6,066,625,US 6,506,735,US 6,221,849,US 6,953,783,US 11/393,380。

另外一些实施例是，化学治疗药物或其他抗增殖药物可以结合本发明式(I)所示化合物的酸加成盐治疗增殖性疾病和癌症。已知的化学治疗药物包括，但并不限于，其他疗法或抗癌剂可以联合本发明的抗癌剂使用，包括外科，放射疗法(少许例子如γ辐射，中子束放射疗法，电子束放射疗法，质子疗法，近距离放射疗法和系统放射性同位素疗法)，内分泌疗法，紫杉烷类(紫杉醇，多西紫杉醇等等)，铂的衍生物，生物反应调节剂(干扰素，白细胞间素，肿瘤坏死因子(TNF)，TRAIL受体靶向作用和媒介物)，过热和冷冻疗法，稀释任何不良反应的试剂(如止吐药)，和其他认可的化学治疗药物，包括但并不限于，烷化药物(氮芥，苯丁酸氮芥，环磷酰胺，苯丙氨酸氮芥，异环磷酰胺)，抗代谢物(甲氨蝶呤，培美曲塞(Pemetrexed)等等)，嘌呤拮抗剂和嘧啶拮抗剂(6-巯嘌呤(6-Mercaptopurine)，5-氟尿嘧啶，Cytarabile，吉西他滨(Gemcitabine))，纺锤体抑制剂(长春碱，长春新碱，长春瑞滨，紫杉醇)，鬼臼毒素(依托泊苷，伊立替康(Irinotecan)，托泊替康(Topotecan))，抗生素(多柔比星(Doxorubicin)，博莱霉素(Bleomycin)，丝裂霉素(Mitomycin))，亚硝基脲(卡莫司汀(Carmustine)，洛莫司汀(Lomustine))，无机离子(顺铂，卡铂)，细胞分裂周期抑制剂(KSP通过有丝分裂驱动蛋白抑制剂，CENP-E和CDK抑制剂)，酵素(天门冬酰胺酶)，荷尔蒙(它莫昔芬(Tamoxifen)，亮丙瑞林(Leuprolide)，氟他胺(Flutamide)，甲地孕酮(Megestrol))，格列卫(Gleevec)，阿霉素(Adriamycin)，地塞米松(Dexamethasone)，和环磷酰胺。抗血管生成因子(阿瓦斯丁(Avastin)及其他)，激酶抑制剂(伊马替尼(Imatinib)，舒尼替尼(Sutent)，索拉非尼(Nexavar)，西妥昔单抗(Erbitux)，赫赛汀(Herceptin)，它赛瓦(Tarceva)，易瑞沙(Iressa)及其他)。药物抑制或激活癌症的途径如mTOR，HIF(缺氧诱导因子)途径及其他。癌症治疗较广泛的论坛见http://www.nci.nih.gov/，FAD认可的肿瘤学药物清单见http://www.fda.gov/cder/cancer/druglist-rame.htm，和默克手册，第十八版.2006，所有的内容都是结合了参考文献。

另外一些实施例是，本发明式(I)所示化合物的酸加成盐可以结合细胞毒素抗癌剂。这样的抗癌剂可以在第十三版默克索引(2001)里找到。这些抗癌剂包括，但绝不限于，门冬酰胺酶(Asparaginase)，博来霉素(Bleomycin)，卡铂，卡莫司汀(Carmustine)，苯丁酸氮芥(Chlorambucil)，顺铂，L-天冬酰胺酶(Colaspase)，环磷酰胺，阿糖胞苷(Cytarabine)，达卡巴嗪(Dacarbazine)，放线菌素D(Dactinomycin)，柔红霉素(Daunorubicin)，阿霉素(多柔比星)，表柔比星(Epirubicin)，依托泊苷(Etoposide)，5-氟脲嘧啶，六甲基三聚氰胺，羟基脲，异环磷酰胺，伊立替康，亚叶酸，环己亚硝脲，氮芥，6-巯基嘌呤，美司钠(Mesna)，甲氨蝶呤(Methotrexate)，丝裂霉素C(Mitomycin C)，米托蒽醌(Mitoxantrone)，泼尼松龙(Prednisolone)，泼尼松(Prednisone)，丙卡巴肼(Procarbazine)，雷洛昔芬(Raloxifen)，链唑霉素(Streptozocin)，他莫昔芬(Tamoxifen)，硫鸟嘌呤(Thioguanine)，托泊替康，长春碱，长春新碱，长春地辛。

与本发明式(I)所示化合物的酸加成盐联合用药的其他合适的细胞毒类药物包括，但并不限于，这些公认地应用于肿瘤性疾病治疗的化合物，如以下文献中所描述的：Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics(Ninth Edition,1996,McGraw-Hill.)；这些抗癌剂包括，但绝不限于，氨鲁米特(Aminoglutethimide)，L-门冬酰胺酶，硫唑嘌呤，5-氮杂胞苷，克拉屈滨(Cladribine)，白消安(Busulfan)，己烯雌酚，2'，2'-二氟去氧胞二磷胆碱，多西紫杉醇，赤羟基壬烷基腺嘌呤(Erythrohydroxynonyladenine)，乙炔雌二醇，5-氟尿嘧啶脱氧核苷，5-氟脱氧尿苷单磷酸，磷酸氟达拉滨(Fludarabine phosphate)，氟甲睾酮(Fluoxymesterone)，氟他胺(Flutamide)，己酸羟孕酮，伊达比星(Idarubicin)，干扰素，醋酸甲羟孕酮，醋酸甲地孕酮，美法仑(Melphalan)，米托坦(Mitotane)，紫杉醇，喷司他丁(Pentostatin)，N-磷酸乙酰基-L-天冬氨酸(PALA)，普卡霉素(Plicamycin)，甲基环己亚硝脲(Semustine)，替尼泊苷(Teniposide)，丙酸睾丸酮，塞替派(Thiotepa)，三甲基三聚氰胺，尿核苷和长春瑞滨。

其他合适的与本发明式(I)所示化合物的酸加成盐联合应用的细胞毒素类抗癌剂包括新发现的细胞毒素物质，其中包括，但并不限于，奥沙利铂(Oxaliplatin)，吉西他滨(Gemcitabine)，卡培他滨(Capecitabine)，大环内酯类抗肿瘤药及其天然或合成的衍生物，替莫唑胺(Temozolomide)(Quinn et al.,J.Clin.Oncology,2003,21(4),646-651)，托西莫单抗(Bexxar)，Trabedectin(Vidal et al.,Proceedings of the American Societyfor Clinical Oncology,2004,23,abstract 3181)，和驱动蛋白纺锤体蛋白抑制剂Eg5(Wood et al.,Curr.Opin.Pharmacol.2001,1,370-377)。

另外一些实施例是，本发明式(I)所示化合物的酸加成盐可以结合其他信号转导抑制剂。有趣的是信号转导抑制剂把EGFR家族作为目标，如EGFR，HER-2和HER-4(Raymondet al.,Drugs,2000,60(Suppl.l),15-23；Harari et al.,Oncogene,2000,19(53),6102-6114)和它们各自的配体。这样的试剂包括，但绝不限于，抗体疗法如赫赛汀(曲妥单抗)，西妥昔单抗(Erbitux)，和帕妥珠单抗(Pertuzumab)。这样的疗法也包括，但绝不限于，小分子激酶抑制剂如易瑞沙(Gefitinib)，它赛瓦(Erlotinib)，Tykerb(Lapatinib)，CANERTINIB(CI1033)，AEE788(Traxler et al.,Cancer Research,2004,64,4931-4941)。

另外一些实施例是，本发明式(I)所示化合物的酸加成盐结合其他信号转导抑制剂靶向作用于分裂激酶领域家族的受体激酶(VEGFR,FGFR,PDGFR,flt-3,c-kit,c-fins,等等)，和它们各自的配体。这样的试剂包括，但并不限于，抗体如贝伐单抗(Avastin)。这样的试剂包括，但绝不限于，小分子抑制剂如Gleevec/Imanitib，Sprycel(Dasatinib)，Tasigna/Nilotinib，Nexavar(Vandetanib)，Vatalanib(PTK787/ZK222584)(Wood et al.,Cancer Res.2000,60(8),2178-2189),Telatinib/BAY-57-9352,BMS-690514,BMS-540215,Axitinib/AG-013736,Motesanib/AMG706,Sutent/Sunitinib/SU-11248,ZD-6474(Hennequin et al.,92nd AACR Meeting,New Orleans,Mar.24-28,2001,abstract3152),KRN-951(Taguchi et al.,95th AACR Meeting,Orlando,FIa,2004,abstract2575),CP-547,632(Beebe et al.,Cancer Res.2003,63,7301-7309),CP-673,451(Roberts et al.,Proceedings of the American Association of Cancer Research,2004,45,abstract 3989),CHIR-258(Lee et al.,Proceedings of the AmericanAssociation of Cancer Research,2004,45,abstract 2130),MLN-518(Shen et al.,Blood,2003,102,11,abstract 476)。

另外一些实施例是，本发明式(I)所示化合物的酸加成盐可以结合组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。这样的试剂包括，但绝不限于，辛二酰苯胺氧肟酸(SAHA)，LAQ-824(Ottmannet al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology,2004,23,abstract 3024),LBH-589(Beck et al.,Proceedings of the American Society forClinical Oncology,2004,23,abstract 3025),MS-275(Ryan et al.,Proceedings ofthe American Association of Cancer Research,2004,45,abstract 2452),FR-901228(Piekarz et al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology,2004,23,abstract 3028)和MGCDOI 03(US 6,897,220)。

另外一些实施例是，本发明式(I)所示化合物的酸加成盐可以结合其他抗癌剂如蛋白酶体抑制剂和m-TOR抑制剂。这些包括，但绝不限于，硼替佐米(Bortezomib)(Mackayet al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology,2004,23,Abstract 3109),和CCI-779(Wu et al.,Proceedings of the American Association ofCancer Research,2004,45,abstract 3849)。本发明式(I)所示化合物的酸加成盐还可以结合其他抗癌剂如拓扑异构酶抑制剂，包括但绝不限于喜树碱。

可以根据常规方式用一种或多种生理学可接受的载体制备药物组合物，其中包括可帮助将式(I)所示化合物的酸加成盐加工为可药用制剂。所选择的施用途径决定适当的剂型。任何熟知的技术、载体和赋形剂都可以根据现有技术中的理解适当的使用。含有本发明式(I)所示化合物的酸加成盐的药物组合物可以根据常规方法制备，例如通过常规的混合、溶解、制粒、制锭、研磨、乳化、包囊、包封或压制过程制备。含有本发明式(I)所示化合物的酸加成盐的药物组合物可以以治疗有效量的药物组合物形式、以本领域已知的常规形式和途径施用，包括但不限于：静脉内、口服、经直肠、气雾剂、非胃肠途径、经眼、经肺、透皮、经阴道、经耳、经鼻和局部施用。

药物组合物将包含至少一种可药用载体、稀释剂或赋形剂和式(I)所示化合物的酸加成盐为活性成分。此外，药物组合物还可包括其它医学或药学活性剂、载体、辅剂、例如防腐剂、稳定剂、湿润剂或乳化剂、溶解促进剂、调节渗透压的盐或缓冲剂。此外，药物组合物还可含有其它有治疗价值的物质。

含有本发明式(I)所示化合物的酸加成盐的组合物的制备方法包括将式(I)所示化合物的酸加成盐与一种或多种惰性的可药用赋形剂或载体一起制备为固体、半固体或液体形式。固体组合物包括但不限于散剂、片剂、可分散颗粒剂、胶囊剂、扁囊剂和栓剂。液体组合物包括其中溶解有式(I)所示化合物的酸加成盐的溶液剂、含有式(I)所示化合物的酸加成盐的乳剂、含有包含本文公开式(I)所示化合物的酸加成盐的脂质体、胶团或纳米粒子的溶液剂。半固体组合物包括但不限于凝胶剂、混悬剂和乳膏剂。组合物可以是液体溶液剂或混悬剂形式、适合于在使用前溶解或悬浮在液体中的固体形式或乳剂形式。这些组合物还可以含有少量无毒的辅剂，例如湿润剂或乳化剂、pH缓冲剂等。

本发明式(I)所示化合物的酸加成盐优选地按制剂配方制备成剂量单位型以减轻给药量和剂量的均匀性。术语“剂量单位型”在此处是指患者得到适当治疗所需药物的物理分散单位。然而，应了解本发明式(I)所示化合物的酸加成盐或本发明的药物组合物每日总的用法将通过主治医生根据可靠的医学范围判断来确定。具体的有效剂量水平对于任何一个特殊的患者或有机体将取决于许多因素包括被治疗的病症和病症的严重性，具体式(I)所示化合物的酸加成盐的活性，所用的具体组合物，患者的年龄、体重、健康状况、性别和饮食习惯，给药时间，给药途径和所用具体式(I)所示化合物的酸加成盐的排泄速率，治疗的持续时间，药物应用于联合用药或与有特效的化合物联用，以及其他一些药学领域公知的因素。

所用的活性成分的有效剂量可随所用的式(I)所示化合物的酸加成盐、给药的模式和待治疗的疾病的严重程度而变化。然而，通常当本发明式(I)所示化合物的酸加成盐每天以约0.25-1000mg/kg动物体重的剂量给予时，能得到令人满意的效果，较佳地每天以2-4次分开的剂量给予，或以缓释形式给药。对大部分大型哺乳动物而言，每天的总剂量约为1-100mg/kg，较佳地约为2-80mg/kg。适用于内服的剂量形式，包含与固态或液态药学上可接受的载体密切混合的约0.25-500mg的活性化合物。可调节此剂量方案以提供最佳治疗应答。另外，由于治疗状况的不同，可每天给予若干次分开的剂量，或将剂量按比例减少。

本发明涉及的式(I)所示化合物的酸加成盐或药物组合物能有效用于预防、治疗或减轻患者组织或器官增殖性疾病或动脉粥样硬化、肺纤维化，特别是能有效治疗转移癌、结肠癌、胃腺癌、膀胱癌、乳腺癌、肾癌、肝癌、肺癌、甲状腺癌、头颈癌、前列腺癌、胰腺癌、中枢神经系统癌症、恶性胶质瘤或骨髓增生病。

附图说明

图1为按照实施例1方法制备得到的式(I)所示化合物的丁二酸盐晶型A的X射线粉末衍射(XRPD)图。

图2为按照实施例2方法制备得到的式(I)所示化合物的丁二酸盐晶型B的X射线粉末衍射(XRPD)图。

图3为按照实施例3方法制备得到的式(I)所示化合物的丁二酸盐无定形的X射线粉末衍射(XRPD)图。

图4为按照实施例4方法制备得到的式(I)所示化合物的对甲苯磺酸盐无定形的X射线粉末衍射(XRPD)图。

图5为按照实施例5方法制备得到的式(I)所示化合物的苯磺酸盐无定形的X射线粉末衍射(XRPD)图。

图6为按照实施例6方法制备得到的式(I)所示化合物的L-苹果酸盐无定形的X射线粉末衍射(XRPD)图。

图7为按照实施例7方法制备得到的式(I)所示化合物的柠檬酸盐无定形的X射线粉末衍射(XRPD)图。

图8为按照实施例8方法制备得到的式(I)所示化合物的L-酒石酸盐晶型A的X射线粉末衍射(XRPD)图。

图9为按照实施例9方法制备得到的式(I)所示化合物的L-酒石酸盐无定形的X射线粉末衍射(XRPD)图。

图10为按照实施例10方法制备得到的式(I)所示化合物的富马酸盐晶型A的X射线粉末衍射(XRPD)图。

图11为按照实施例11方法制备得到的式(I)所示化合物的磷酸盐晶型A的X射线粉末衍射(XRPD)图。

图12为按照实施例12方法制备得到的式(I)所示化合物的硫酸盐晶型A的X射线粉末衍射(XRPD)图。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。

本发明所用X射线粉末衍射分析方法为：Empyrean衍射仪，使用Cu-Kα辐射(45KV,40mA)获得X射线粉末衍射图。在单晶硅样品架上将粉末状样品制备成薄层，放在旋转样品台上，在3°-40°的范围内以0.0167°步长进行分析。使用Data Collector软件收集数据，HighScore Plus软件处理数据，Data Viewer软件读取数据。

本发明所用差示扫描量热(DSC)分析方法为：使用带有热分析控制器的TA Q2000模件进行差示扫描量热。收集数据并使用TA Instruments Thermal Solutions软件进行分析。将约1-5mg样品准确地称重到带有盖子的特制铝坩埚中，使用10℃/分钟的线形加热装置，从室温至大约300℃进行样品分析。在使用期间，将DSC小室用干燥氮气吹扫。

本发明的溶解度采用Aglient 1200高效液相色谱仪DAD/VWD检测器测定，色谱柱型号为Agilent XDB-C18(4.6×50mm，5μm)。检测波长为266nm，流速为1.0mL/min，柱温为35℃，流动相A：乙腈-0.01M醋酸铵＝10：90(V：V)分析方法：乙腈-流动相A＝70：30(V：V)，运行时间：10分钟。

本发明的稳定性试验及加速试验有关物质采用Agilent 1200高效液相色谱仪VWD检测器测定，色谱柱型号为ZORBAX Extend-C18(4.6*150,5um)。检测波长为250nm，流速为1.0mL/min，柱温为40℃，流动相为10mM KH₂PO₄(pH＝7.5)-乙腈(v/v＝55/45)。

本发明引湿性采用英国Surface Measurement Systems公司DVSINT-Std型动态水分与气体吸附分析仪测定，湿度测试范围：0％-95％，气流：200mL/min，温度：25°，测试点：每升5％湿度取一个测试点。

具体实施方法

式(I)所示化合物(E)-N-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(甲氧基-D₃)-喹唑啉-6-基)-4-((4aR,7aS)-四氢-2H-[1,4]二恶烷并[2,3-c]吡咯-6(3H)-基)丁-2-烯酰胺的具体合成方法参照专利CN 104119350A中的实施例20。以下将举例介绍式(I)所示化合物的酸加成盐的制备，实施例中所述游离碱为式(I)所示化合物，即(E)-N-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(甲氧基-D₃)-喹唑啉-6-基)-4-((4aR,7aS)-四氢-2H-[1,4]二恶烷并[2,3-c]吡咯-6(3H)-基)丁-2-烯酰胺。

实施例

实施例1式(I)所示化合物的丁二酸盐晶型A

1.题述丁二酸盐晶型A的制备

将游离碱(0.259g,0.501mmol)加入到甲醇(2.0mL)和乙酸异丙酯(4.0mL)的混合溶液中，升温至70℃，滴加丁二酸(0.142g,1.20mmol)的乙酸异丙酯溶液(1.0mL)，滴毕将反应自然冷却至室温，过夜，抽滤，滤饼用少量乙酸异丙酯洗涤，室温真空干燥，得到类白色固体(0.179g,56.26％)。

2.题述丁二酸盐晶型A的鉴定

(1)通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：使用Cu-Kα辐射，具有下列以角度2θ表示的特征峰：5.52°,10.70°,11.11°,13.24°,14.51°,15.44°,16.04°,16.54°,17.11°,17.28°,17.49°,18.36°,18.56°,18.93°,19.52°,19.94°,20.73°,21.12°,21.40°,21.64°,22.12°,23.21°,23.58°,23.78°,24.47°,24.94°,25.40°,25.73°,26.40°,26.67°,27.04°,27.37°,27.76°,28.24°,28.56°,29.11°,29.43°,29.80°,30.27°,30.94°,31.65°,32.45°,33.41°,33.58°,34.81°,35.65°,36.05°,36.56°,37.49°和38.80°,存在±0.2°的误差容限。本实施例方法制备得到的丁二酸盐晶型A的X射线粉末衍射图基本上如图1所示。

(2)通过TA Q2000差示扫描量热(DSC)分析鉴定：扫描速度为10℃/分钟，包含164.19℃的吸热峰，存在±3℃的误差容限。

实施例2式(I)所示化合物的丁二酸盐晶型B

1.题述丁二酸盐晶型B的制备

将游离碱(0.516g,0.998mmol)加入到乙醇(30.0mL)中，加热回流，趁热过滤，滤液继续回流并加入丁二酸(0.248g,2.10mmol)，保温2.5小时，将反应自然冷却至室温，然后在-15℃条件下冷却析晶，抽滤，滤饼室温真空干燥，得到淡黄色固体(0.17g,26.82％)。

2.题述丁二酸盐晶型B的鉴定

(1)通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：使用Cu-Kα辐射，具有下列以角度2θ表示的特征峰：5.01°,7.01°,9.89°,10.28°,11.11°,13.09°,13.36°,13.99°,14.52°,15.11°,15.70°,17.07°,18.58°,18.89°,19.16°,20.20°,20.57°,22.80°,23.29°,23.72°,24.40°,24.52°,25.34°,26.38°,27.07°,27.62°,28.35°,28.94°,29.38°,29.77°,31.02°,31.72°,32.76°,33.55°,33.98°,35.03°,36.23°,36.76°,37.50°,38.28°和39.45°,存在±0.2°的误差容限。本实施例方法制备得到的丁二酸盐晶型B的X射线粉末衍射图基本上如图2所示。

(2)通过TA Q2000差示扫描量热(DSC)分析鉴定：扫描速度为10℃/分钟，包含139.28℃的吸热峰，存在±3℃的误差容限。

实施例3式(I)所示化合物的丁二酸盐无定形

1.题述丁二酸盐无定形的制备

将游离碱(5.17g,10.0mmol)加入到无水乙醇(180.0mL)中，加热回流溶解，抽滤，滤液继续回流，并向滤液中滴加丁二酸(1.18g,10.0mmol)的乙醇溶液(20.0mL)，保温4小时，将上述反应液置于喷雾干燥机的进样口，喷雾干燥，得到类白色固体(3.086g,48.6％)。

2.题述丁二酸盐无定形的鉴定

通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：其X射线粉末衍射基本上如图3所示。

实施例4式(I)所示化合物的对甲苯磺酸盐无定形

1.题述对甲苯磺酸盐无定形的制备

将游离碱(0.145g,0.28mmol)加入到甲醇(6.0mL)中，然后加入自制的对甲苯磺酸(0.114g,0.596mmol)甲醇溶液(1.5mL)，室温反应2小时，减压除去溶剂，固体室温真空干燥，得到淡黄色固体粉末(0.159g,96.10％)。

2.题述对甲苯磺酸盐无定形的鉴定

(1)通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：其X射线粉末衍射基本上如图4所示。实施例5式(I)所示化合物的苯磺酸盐无定形

1.题述苯磺酸盐无定形的制备

将游离碱(0.095g,0.184mmol)加入到乙腈(2.0mL)中，然后加入自制苯磺酸(0.059g,0.373mmol)水溶液(0.5mL)，60℃反应3.5小时，将反应自然冷却至室温，用0.22μm滤膜过滤，滤液减压除去溶剂，固体室温真空干燥，得到淡黄色固体(0.08g,52.25％)。

2.题述苯磺酸盐无定形的鉴定

通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：其X射线粉末衍射基本上如图5所示。

实施例6式(I)所示化合物的L-苹果酸盐无定形

1.题述L-苹果酸盐无定形的制备

将游离碱(300mg,0.58mmol)加入到异丙醇(3.0mL)中，加热回流，然后加入自制的L-苹果酸(163mg,1.22mmol)水溶液(1.0mL)，保温30分钟，冷却至室温，将溶剂减压蒸干，室温真空干燥，得到淡黄色固体(449mg,98.5％)。

2.题述L-苹果酸盐无定形的鉴定

通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：其X射线粉末衍射基本上如图6所示。

实施例7式(I)所示化合物的柠檬酸盐无定形

1.题述柠檬酸盐无定形的制备

将游离碱(300mg,0.58mmol)分散于异丙醇(4.0mL)中，加热回流，然后滴加自制的柠檬酸(214mg,1.11mmol)水溶液(2.0mL)，反应30分钟，加压除去溶剂，残留物室温真空干燥，得到淡黄色固体(350mg,收率69.6％)。

2.题述柠檬酸酸盐无定形的鉴定

通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：其X射线粉末衍射基本上如图7所示。

实施例8式(I)所示化合物的L-酒石酸盐晶型A

1.题述L-酒石酸盐晶型A的制备

将游离碱(600mg,1.16mmol)分散于乙腈(21.0mL)中，加热回流，然后加入L-酒石酸(384mg,2.56mmol)水溶液(6.0mL)，反应3小时，缓慢冷却至室温，过滤，滤饼用乙腈洗涤，50℃真空干燥3小时，得到淡黄色固体(657mg,收率69.3％)。

2.题述L-酒石酸盐晶型A的鉴定

(1)通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：使用Cu-Kα辐射，具有下列以角度2θ表示的特征峰：5.90°,7.97°,14.39°,15.68°,18.01°,20.55°,22.27°,23.56°,25.11°,26.00°,27.15°,27.73°,28.94°,30.16°,31.03°,32.50°,33.88°,36.36°,37.65°和38.35°，存在±0.2°的误差容限。本实施例方法制备得到的L-酒石酸盐晶型A的X射线粉末衍射图如图8所示。

(2)通过TA Q2000差示扫描量热(DSC)分析鉴定：扫描速度为10℃/分钟，包含99.86℃的吸热峰，存在±3℃的误差容限。

实施例9式(I)所示化合物的L-酒石酸盐无定形

1.题述L-酒石酸盐无定形的制备

将游离碱(300mg,0.58mmol)分散于乙醇(11.0mL)中，加热回流，然后加入L-酒石酸(185mg,1.23mmol)的乙醇(3.0mL)溶液，反应1小时，过滤，滤液保温，然后逐渐冷却至室温析晶，静置后移除大部分上清液，将剩余的浆液减压蒸干，得到淡黄色固体(210mg,44.3％)。

2.题述L-酒石酸盐无定形的鉴定

通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：其X射线粉末衍射基本上如图9所示。

实施例10式(I)所示化合物的富马酸盐晶型A

1.题述富马酸盐晶型A的制备

将游离碱(500mg,0.967mmol)分散于乙腈(15.5mL)中，加热回流，然后加入富马酸(230mg,1.98mmol)的水(2.5mL)和乙腈(2.0mL)的混合溶液，反应6小时，将反应自然冷却至室温，搅拌析晶16小时，过滤，滤饼用乙腈洗涤，50℃真空干燥3小时，得到淡黄色固体(330mg,47.4％)。

2.题述富马酸盐晶型A的鉴定

(1)通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：使用Cu-Kα辐射，具有下列以角度2θ表示的特征峰：5.12°,7.02°,9.93°,10.58°,11.64°,12.94°,13.79°,14.70°,15.20°,16.23°,16.61°,17.13°,17.98°,19.61°,20.90°,21.73°,22.82°,23.45°,24.97°,25.72°,26.92°,27.80°,28.82°,30.09°,31.11°,32.23°,32.86°,35.05°,38.50°,38.90°和39.97°,存在±0.2°的误差容限。本实施例方法制备得到的富马酸盐晶型A的X射线粉末衍射图如图10所示。

(2)通过TA Q2000差示扫描量热(DSC)分析鉴定：扫描速度为10℃/分钟，包含121.33℃的吸热峰，存在±3℃的误差容限。

实施例11式(I)所示化合物的磷酸盐晶型A

1.题述磷酸盐晶型A的制备

将游离碱(0.095g,0.184mmol)加入到乙腈(2.0mL)中，升温至60℃，加入磷酸(0.043g,0.378mmol)，保温2.0小时，将反应自然冷却至室温，过滤，滤液用乙腈(2.0mL×2)洗涤，室温真空干燥，得到白色固体粉末(0.076g,58.01％)。

2.题述磷酸盐晶型A的鉴定

(1)通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：使用Cu-Kα辐射，具有下列以角度2θ表示的特征峰：10.72°,13.50°,14.19°,16.08°,17.52°,19.14°,19.79°,20.08°,21.47°,22.28°,23.10°,23.97°,26.71°,29.70°,32.44°,33.50°,35.26°,37.22°和38.03°,存在±0.2°的误差容限。本实施例方法制备得到的磷酸盐晶型A的X射线粉末衍射图如图11所示。

(2)通过TA Q2000差示扫描量热(DSC)分析鉴定：扫描速度为10℃/分钟，包含172.45℃的吸热峰，存在±3℃的误差容限。

实施例12式(I)所示化合物的硫酸盐晶型A

1.题述硫酸盐晶型A的制备

将游离碱(0.305g，0.58mmol)溶于乙酸异丙酯(9.0mL)中，在70℃滴加硫酸(0.12g，1.20mmol)的乙醇(1.0mL)溶液，滴毕，缓慢降温至室温并搅拌6.5小时，过滤，滤饼用乙醇(2.0mL)洗涤后，50℃真空干燥12小时，得到类白色固体(0.375g，91.9％)。

2.题述硫酸盐晶型A的鉴定

(1)通过Empyrean X射线粉末衍射(XRPD)分析鉴定：使用Cu-Kα辐射，具有下列以角度2θ表示的特征峰：5.46°,6.67°,8.15°,8.63°,10.85°,13.39°,13.95°,14.42°,14.84°,15.12°,15.53°,16.13°,16.97°,17.22°,17.62°,17.87°,19.09°,19.30°,20.13°,20.77°,21.54°,21.74°,22.15°,22.75°,23.33°,23.97°,24.55°,25.05°,25.34°,25.58°,25.93°,26.39°,26.91°,27.53°,28.50°,29.28°,30.08°,35.59°,36.30°和38.23°存在±0.2°的误差容限。本实施例方法制备得到的硫酸盐晶型A的X射线粉末衍射图如图12所示。

(2)通过TA Q2000差示扫描量热(DSC)分析鉴定：扫描速度为10℃/分钟，包含127.41℃的吸热峰，存在±3℃的误差容限。

实施例13本发明所述盐的药代动力学实验

本发明所述式(I)所示化合物((E)-N-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(甲氧基-D₃)-喹唑啉-6-基)-4-((4aR,7aS)-四氢-2H-[1,4]二恶烷并[2,3-c]吡咯-6(3H)-基)丁-2-烯酰胺)、不同盐的晶型分别灌装胶囊，用于口服给药。

取6-10kg雄性Beagle犬随机分组，每组3只，一组口服给予式(I)所示化合物，其它组分别口服给予不同的盐，给药剂量均为5mg/kg。给药后按时间点0.25,0.5,1.0,2.0,4.0,6.0,8.0,12和24h采血。根据样品浓度建立合适范围的标准曲线，使用Agilent 6430型LC-MS/MS，在MRM模式下测定血浆样品中供试样品的浓度，并进行定量分析。根据药物浓度-时间曲线，采用WinNonLin 6.3软件非房室模型法计算药动学参数。实验结果如表1所示。

表1本发明所述盐的药代动力学数据

实验结论：由表1可知，与游离状态的(E)-N-(4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-(甲氧基-D₃)-喹唑啉-6-基)-4-((4aR,7aS)-四氢-2H-[1,4]二恶烷并[2,3-c]吡咯-6(3H)-基)丁-2-烯酰胺相比，本发明按照实施例1制备得到的式(I)所示化合物的丁二酸盐晶型A在比格犬体内的暴露量较大。

实施例14本发明所述盐的溶解度实验

往30mL西林瓶中加入不同pH缓冲盐(15mL)，边振荡边加入样品，直至样品停止溶解，析出，在37℃条件下恒温水浴振摇24h，振摇速度120rpm。振摇结束后，将样品经水系微孔滤膜(0.45μm，Φ13mm)过滤，弃去初滤液，用乙腈适量稀释样品，采用HPLC检测，通过外标一点法计算样品浓度。

实验结果表明，本发明所述的盐均具有较好的溶解度，特别是在酸性条件下溶解度均较高。

实施例15本发明所述盐的稳定性实验

(1)高温实验：取适量的根据实施例1方法制备得到的丁二酸盐晶型A供试样品放入扁形称量瓶中，摊成≤5mm厚的薄层，60℃温度下放置10天，于第5、10天取样，观察样品颜色变化，HPLC检测样品纯度。实验结果见表2。

(2)高湿实验：取适量的根据实施例1方法制备得到的丁二酸盐晶型A供试样品放入扁形称量瓶中，摊成≤5mm厚的薄层，25℃、RH 90％±5％条件下放置10天，于第5、10天取样，观察样品颜色变化，HPLC检测样品纯度。实验结果见表2。

表2本发明所述丁二酸盐晶型A的高温高湿实验

实验结论：由表2实验结果可知，在高温(60℃)、高湿(25℃,RH 90％±5％)条件下，本发明所述丁二酸盐晶型A的外观和纯度均无明显变化，稳定性效果好，适合制药用途。

实施例16本发明所述盐的引湿性实验

取供试品适量，采用动态水分吸附仪测试其引湿性。实验结果证明，本发明所述的盐不易受高湿度影响而潮解。

以上所述内容仅为本发明构思下的基本说明，而依据本发明的技术方案所作的任何等效变换，均应属于本发明的保护范围。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (7)

1.一种式(I)所示化合物的药学上可接受的酸加成盐，

其中，所述酸加成盐为丁二酸盐晶型A，所述丁二酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：14.51±0.2°,16.54±0.2°,18.93±0.2°,19.52±0.2°,30.94±0.2°。

2.根据权利要求1所述的酸加成盐，其特征在于，所述丁二酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：14.51±0.2°,16.54±0.2°,18.56±0.2°,18.93±0.2°,19.52±0.2°,21.12±0.2°,22.12±0.2°,23.21±0.2°,23.78±0.2°。

3.根据权利要求1所述的酸加成盐，其特征在于，所述丁二酸盐晶型A的X射线粉末衍射图谱在下列2θ角处具有衍射峰：5.52±0.2°,10.70±0.2°,11.11±0.2°,13.24±0.2°,14.51±0.2°,15.44±0.2°,16.04±0.2°,16.54±0.2°,17.11±0.2°,17.28±0.2°,17.49±0.2°,18.36±0.2°,18.56±0.2°,18.93±0.2°,19.52±0.2°,19.94±0.2°,20.73±0.2°,21.12±0.2°,21.40±0.2°,21.64±0.2°,22.12±0.2°,23.21±0.2°,23.58±0.2°,23.78±0.2°,24.47±0.2°,24.94±0.2°,25.40±0.2°,25.73±0.2°,26.40±0.2°,26.67±0.2°,27.04±0.2°,27.37±0.2°,27.76±0.2°,28.24±0.2°,28.56±0.2°,29.11±0.2°,29.43±0.2°,29.80±0.2°,30.27±0.2°,30.94±0.2°,31.65±0.2°,32.45±0.2°,33.41±0.2°,33.58±0.2°,34.81±0.2°,35.65±0.2°,36.05±0.2°,36.56±0.2°,37.49±0.2°,38.80±0.2°。

4.根据权利要求1所述的酸加成盐，其特征在于，所述丁二酸盐晶型A具有基本上如图1所示的X射线粉末衍射图。

5.一种药物组合物，包含权利要求1-4任意一项所述的酸加成盐或其组合；其进一步包含药学上可接受的辅剂。

6.权利要求1-4任意一项所述的酸加成盐或其组合或权利要求5所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防、治疗或减轻患者增殖性疾病或动脉粥样硬化、肺纤维化。

7.根据权利要求6所述的用途，其中，所述的增殖性疾病是转移癌、结肠癌、胃腺癌、膀胱癌、乳腺癌、肾癌、肝癌、肺癌、甲状腺癌、头颈癌、前列腺癌、胰腺癌、中枢神经系统癌症、恶性胶质瘤或骨髓增生病。

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