CN108026564B - 用于测定真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及用于测定真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的方法。

Description

用于测定真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的方法
本发明涉及测定真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的方法。
自20世纪80年代以来，真菌被认为是在人类中的病理学状况的主要来源。
由各种不同的酵母物种引起的侵入性念珠菌病是美国医院内血液感染的第四大原因，并且与大约40％的死亡率相关联。这些败血病主要与免疫抑制、手术动作或侵入性动作有关。
对于抗真菌分子具有抗性的菌株(尤其是在假丝酵母属物种(Candida spp.)酵母中)出现的增加导致增长的临床失败。抗性分离物的准确且快速的表征已成为大的担忧之一，以便在感染开始后尽可能快速地按照菌株的表型来调整治疗。
目前可用的对于抗真菌剂的敏感度的测试基于对在抗真菌剂存在下真菌生长的抑制进行评价，并且使得能够测定最小抑制浓度(MIC)。
然后，该值可以相对于由临床和实验室标准学会(Clinical and LaboratoryStandards Institute，CLSI)和欧洲抗微生物易感性测试委员会(European Committee onAntimicrobial Susceptibility Testing，EUCAST)所定义的临床阈值(临床转折点，CBP)而言来进行阐释。这些临床阈值使得能够建立真菌菌株的敏感表型、抗性表型或中间表型，并因此预测患者对于抗真菌治疗的应答，以便根据感染性菌株的表型来调整抗真菌治疗。
用于测定MIC的CLSI或EUCAST参考方法基于微量稀释，并因而不适合于常规临床实践。
更易于实施的其他测试已被开发出来，并且被商业化以用于医学用途。
FungitestTM(Biorad)是在以两种不同浓度的六种抗真菌剂(两性霉素B、氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑和咪康唑)存在下，从细胞悬浮液开始进行的用于测定酵母菌株的敏感度的方法。它以包含具有所述抗真菌剂的孔的微量培养板的形式存在。它使得能够在将微量培养板温育48至72小时并使其与氧化还原指示剂相接触后通过比色读取来测定所述菌株的敏感度。
Sensititre Yeast
Figure BDA0001596091850000021
(Trek Diagnostics Systems)是用于酵母菌株(也包括假丝酵母属(Candida)、隐球酵母属(Cryptococcus)和曲霉属(Aspergillus)物种)的敏感度的体外诊断并且为了伏立康唑、卡泊芬净、阿尼芬净和米卡芬净而开发的方法。该方法以包含孔的微量培养板的形式存在，并且使得能够从微量稀释开始并在根据物种将微量培养板温育24至72小时后借助于比色指示剂来测定MIC。
Figure BDA0001596091850000022
(Biomérieux)是为了包括抗生素、抗真菌剂、抗分枝杆菌剂、抗微生物剂的多于100种参考分子而开发的用于测定微生物(细菌、真菌)的MIC的方法。它以包含预先确定的15种抗真菌剂或抗生素浓度的指数梯度(其被施加在经接种的琼脂平皿上)的小条带的形式存在。在大约24小时的温育后，通过读取在小条带上所指出的并且相应于抑制椭圆的边缘的值来目视测定MIC的值。抑制椭圆与小条带之间的该交叉点指明了受试分子抑制微生物生长时所处的浓度。
Figure BDA0001596091850000023
方法由于其实施的简单性而在常规上是最多使用的。
Vitek 2(Biomérieux)是用于细菌或酵母的鉴定和抗菌素效能检定的自动化系统，其从在液体培养基中的接种物开始并且使用包含各种不同比色测试的反应孔的平板。它使得能够在3至7小时的时间内同时鉴定微生物和测定相关于一种或多种抗真菌剂或抗生素的该微生物的MIC(Ling等人,2003,Evaluation of the VITEK 2 System for RapidDirect Identification and Susceptibility Testing of Gram-Negative Bacillifrom Positive Blood Cultures)。
还开发了使用流式细胞术和细胞生存力染料的方法，其主要用于假丝酵母属物种。这些方法显示出了与CLSI和EUCAST参考方法的良好相关性，但仅对于几种特定的“抗真菌剂-物种”对。
已通过例如麦角固醇合成的定量而创立了化学测试。
大多数商业化的敏感度测试基于用于测定给定菌株的MIC的比色测试或生长测试。
结果的目视阐释可以是错误的来源，其中知晓在唑类存在下生长的延缓效应也可以使测试的阐释出错并且相应于在抑制区中的最小生长。
所有现有的测试都具有缺点，其中最大的缺点是测试的反应时间(至少24小时)和结果读取的主观性。
因此，由于各种不同真菌物种的抗性的增加的发展，需要制定使得能够测定真菌菌株对于抗真菌剂的表型的更快速且更可靠的新型测试，以便在感染开始后尽可能快速地调整治疗。
在通常用于构成治疗基础的抗真菌剂之中，尤其选中棘白菌素类的类别，其包括米卡芬净、卡泊芬净和阿尼芬净。该抗真菌剂类别直接作用于真菌的壁。它们通过结合至β-1,3-葡聚糖合酶来抑制细胞壁的β-1,3-葡聚糖的合成，所述β-1,3-葡聚糖合酶是与膜相结合并且由调节亚基(Rho)和催化亚基(Fks)组成的酶，因而对于其的抑制导致壁形成的抑制。
棘白菌素类的主要备选物为具有抑制在细胞膜中存在的固醇类合成的作用的抗真菌剂。在它们之中，选中唑类或唑类抗真菌剂的类别，其尤其包括氟康唑、泊沙康唑、伏立康唑和伊曲康唑，它们是最常使用的。唑类抗真菌剂靶向细胞色素P450-Erg11p(也称为Cyp51p)，其牵涉麦角固醇(其是真菌膜的主要组分)的生物合成途径。麦角固醇合成途径的阻断导致有毒性的甲基化固醇的产生和在细胞膜中的损害。唑类已显示，它们导致作为补偿现象的壁蛋白质产生的增加，这暗示唑类不仅是细胞膜的抑制剂，而且还是细胞壁的抑制剂。
基本上由两性霉素B所代表的多烯类具有强的毒性。还使用嘧啶类作为抗真菌剂，但是由于对于嘧啶类似物的抗性的发展而往往与另一类别的抗真菌剂相组合地进行使用。
因此，唑类和棘白菌素类的作用机制牵涉细胞膜和/或细胞壁。一些胁迫反应的信号传导途径，例如PKC(蛋白激酶C)途径、HOG(高摩尔渗透压浓度甘油)途径、MAPK(MAP激酶)途径和钙依赖磷酸酶途径，响应于壁胁迫而被激活，并且协调几丁质合成的增加以便补偿对于细胞壁和/或细胞膜所引起的损害。
在Costa de Oliveira等人的出版物(2013)中，作者观察到某些具有在高卡泊芬净浓度(大于MIC)下进行生长的能力的酵母物种在其细胞壁中也具有高数量的几丁质。
Walker等人(2013)已描述了在棘白菌素类存在下真菌反常生长的效应，其在当用卡泊芬净进行处理时最经常地突然发生。因此，它们已显示，在低浓度下和在非常高的浓度下抑制了白假丝酵母(C.albicans)的生长，但在中等浓度下观察到生长。
本发明的方面之一是提供用于测定真菌菌株的敏感性程度的可靠测试。
本发明的另一个方面是提供用于测定真菌菌株的敏感性程度的可靠测试，其反应时间少于48小时，甚至24小时，和更特别地6.5小时。
本发明的另一个方面是提供用于测定真菌菌株的敏感性程度的可靠测试，其阐释是客观的，不经受延缓效应。
本发明的另一个方面是提供在临床上可使用的用于测定真菌菌株敏感性程度的可靠测试。
本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，所述变化相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言来进行测定。
发明人已发现，几丁质含量的可能变化使得能够测定真菌菌株相关于抗真菌剂的敏感性程度。
用于测定敏感性程度的几丁质含量的可能变化意味着，几丁质含量可以变化，即增加或减少，但该变化是可能的，这意味着根据条件可以存在有几丁质含量的变化或者不存在变化。
因此，他们已证明，在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下相同细胞群而言的变化或变化的不存在，对于测定该真菌菌株相关于该抗真菌剂的敏感性程度来说是有重要意义的。
真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度相应于该抗真菌剂杀死该菌株或充分抑制该菌株生长的能力。
术语“抗真菌剂”是指任何使得能够对抗真菌的分子。抗真菌剂也可以由术语“抗霉菌剂”来称呼。
本发明涉及测定真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度，这意味着所述菌株的敏感度对于确定的单种抗真菌剂而不是对于抗真菌剂的混合物来进行测定。
在真菌中，几丁质是围绕并保护真菌细胞面对环境的壁的一种基本组成成分。几丁质在真菌中还参与细胞壁的刚性。几丁质是碳水化合物家族的具有式(C8H13NO5)n的含氮多糖，其来自于通过β-1,4类型的糖苷键相互连接的N-乙酰葡糖胺的聚合，并且由多种酶(几丁质合酶(CHS))来合成。
术语“真菌”意指不动的并且通过吸收有机分子而直接在环境中吸取营养的多细胞或单细胞真核生物。作为特点，真菌细胞呈现出存在包封有几丁质的壁和不存在叶绿素和/或质体，因为这些生物对于碳来说是异养的。术语“真菌”意指真菌界(Fungi)。
表述“真菌菌株的细胞群”限定了均质的细胞集群，即其在基因型和表型水平上具有均质性。
表述“抗真菌剂不存在”意味着，真菌菌株的细胞群在受试抗真菌剂不存在的情况下处于测定所述真菌菌株的敏感性程度的情形中，但也完全不存在该抗真菌剂类别的任何其他分子。
“在真菌细胞群中的几丁质含量”是指在确定的真菌细胞群中通过下面所阐明的方法而评估的平均数量。
敏感性程度评价了抗真菌剂的效力，即在模拟体内条件的实验室条件下抗真菌剂抑制真菌增殖或杀死真菌的能力。
留选了三个分类类别用于阐释体外敏感性程度：敏感的、抗性的和中间的。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述敏感性程度相应于所述真菌菌株对于抗真菌剂的要么敏感表型、要么抗性表型、要么中间表型。
·被分类为敏感的菌株是这样的那些菌株，对于它们来说，在用在由法国保健产品卫生安全局(Agence
Figure BDA0001596091850000061
de Sécurité Sanitaire des Produits de Santé，AFSSAPS)编撰的产品特征概要(summary of product characteristics，SmPC)中所推荐的施用剂量通过全身途径进行治疗的情况下，治疗成功的概率是高的(90％)。
·被分类为抗性的菌株是这样的那些菌株，对于它们来说，无论治疗类型和所使用的抗真菌剂的剂量为何，都存在高的治疗失败的概率(40％)。
·被分类为中间的菌株是这样的那些菌株，对于它们来说，治疗成功是无法预测的。这些菌株构成异质的集群，对于其来说，在体外获得的结果不可预测治疗成功。这是因为，这些菌株：
-可以具有抗性机制，该抗性机制的表现在体外是低的，因此将其归类在敏感分类类别中。然而，在体内，这些菌株中的一部分显现出对于治疗具有抗性并导致治疗失败；
-可以具有抗性机制，该抗性机制的表现不足以说明被归类在抗性分类类别中的理由，但是对于在某些条件(高的局部浓度或增加的施用剂量)下期望治疗效果来说是足够低的。
所述真菌为可以是多细胞的或单细胞的生物。
在一个特别的情况下，所述真菌可以是单细胞的，在该情况下其营养器官由单个细胞构成。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述真菌为单细胞真菌。
其他真菌是多细胞的，并且在该情况下其多细胞营养器官类似于细丝(称为菌丝)，据此丝状真菌的名称用于称呼多细胞真菌。这些菌丝可以或多或少地分支并相互交错。全体菌丝构成菌丝体。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述真菌为多细胞真菌。
为了测定真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度，除了几丁质含量的可能变化之外，还可以考虑所述真菌菌株的生长参数。
在测定单细胞真菌菌株的敏感性程度的情况下，所述菌株的细胞构成了将会从其开始来测定敏感性程度的活材料。
因此，在单细胞真菌菌株的情况下，所述菌株的生长通过在培养基中所述真菌菌株的细胞数目的定量来进行评价。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株(所述真菌为单细胞真菌)的细胞群中的几丁质含量的可能变化和所述真菌菌株的细胞群的细胞数目的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，所述细胞数目的变化相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的细胞数目而言来进行测定。
在测定多细胞真菌菌株的敏感性程度的情况下，所述菌株的分生孢子构成了将会从其开始来测定敏感性程度的活材料。
因此，在多细胞真菌菌株的情况下，所述菌株的生长通过由所述真菌菌株的细胞所发出的萌发营养菌丝的长度的定量来进行评价。
在多细胞真菌菌株的情况下，所述菌株的生长通过由分生孢子所发出的萌发营养菌丝的长度的定量来进行评价。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株(所述真菌为多细胞真菌)的细胞群中的几丁质含量的可能变化和在所述真菌菌株的所述细胞群中的萌发营养菌丝长度的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，所述萌发营养菌丝长度的变化相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言来进行测定。
“萌发营养菌丝”是指在孢子萌发期间由孢子所发出的初级营养菌丝。
真菌以称为分生孢子的细胞的形式进行繁殖和散布。术语“分生孢子”意指确保真菌的无性增殖并且不能够自主移动的孢子。
在单细胞或多细胞真菌菌株的情况下，单独使用几丁质含量的可能变化足以确定所述菌株对于抗真菌剂的抗性表型，于在所述抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的情况下。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，其中所述真菌菌株对于抗真菌剂的抗性表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加来确定。
表述“小于10％的几丁质含量的增加”意味着，在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群而言观察到几丁质含量的增加，并且该增加可以采取大于0且严格地小于10％的任何值。
表述“不存在几丁质含量的增加”意味着，在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群而言不增加，即它可以要么是不变的，要么减少。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，其中所述真菌菌株对于抗真菌剂的抗性表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量来确定。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，其中所述真菌菌株对于抗真菌剂的抗性表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量来确定。
在单细胞或多细胞真菌菌株的情况下，单独使用几丁质含量的可能变化足以确定所述菌株对于抗真菌剂的中间表型，于在所述抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言10％至小于20％的值的几丁质含量的增加的情况下。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，其中所述真菌菌株对于抗真菌剂的中间表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言10％至小于20％的值的几丁质含量的增加来确定。
表述“10％至小于20％的值的几丁质含量的增加”意味着，观察到几丁质含量的增加，并且该增加可以采取10％的值或者大于10％且严格地小于20％的任何其他值。
在单细胞或多细胞真菌菌株的情况下，单独使用几丁质含量的可能变化足以确定所述菌株对于抗真菌剂的敏感性程度不相应于抗性表型但相应于敏感表型或中间表型，于在所述抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，其中所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感表型或中间表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加来确定。
表述“大于或等于20％的几丁质含量的增加”意味着，在真菌菌株的细胞群中相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群而言观察到几丁质含量的增加，并且该增加可以采取20％的值或者大于20％的任何其他值。
然而，单独使用几丁质含量的可能变化不足以确定所述菌株对于抗真菌剂的敏感性程度相应于敏感表型还是中间表型，于在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下。
在单细胞真菌菌株的情况下，使用在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群而言的与细胞数目的可能变化相联合的几丁质含量的可能变化，使得能够确定所述菌株对于所述抗真菌剂的中间表型或敏感表型，在大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下。
更特别地，在单细胞真菌菌株的情况下，使用在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群而言的与细胞数目的变化相联合的几丁质含量的可能变化，使得能够确定对于所述抗真菌剂的敏感表型，在大于或等于20％的几丁质含量的增加和至少0.3log的细胞数目的减少的情况下。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，所述真菌为单细胞真菌，其中所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加，和通过测定在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的所述细胞群中的细胞数目的变化(所述变化为相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少)来确定。
表述“至少0.3log的细胞数目的减少”意味着，在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中相对于在所述抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群而言观察到细胞数目的减少，并且该减少可以采取0.3log的值或者大于0.3log的任何值。
在单细胞真菌菌株的情况下，使用在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群而言的与细胞数目的可能变化相联合的几丁质含量的可能变化，使得能够确定对于所述抗真菌剂的中间表型，在大于或等于20％的几丁质含量的增加和小于0.3log的细胞数目的减少或不变的细胞数目的情况下。在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群而言的细胞数目的可能变化意味着，细胞数目可以变化，即增加或减少。该变化是可能的，这意味着可以存在有细胞数目的变化，即增加或减少，或者不存在变化，在该情况下，细胞数目是不变的。
表述“小于0.3log的细胞数目的减少”意味着，在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中相对于在所述抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群而言观察到细胞数目的减少，并且该减少可以采取严格地小于0.3log的正值。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，所述真菌为单细胞真菌，其中所述真菌菌株对于抗真菌剂的中间表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加，和通过在所述细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言的可能变化(所述可能变化为相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的细胞数目而言小于0.3log的细胞数目的减少或者不变的细胞数目)来确定。
在多细胞真菌菌株的情况下，单独使用几丁质含量的可能变化足以确定所述菌株对于所述抗真菌剂的抗性表型，于在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者不存在几丁质含量的增加的情况下。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，所述真菌为多细胞真菌，其中所述真菌菌株对于抗真菌剂的抗性表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者不存在几丁质含量的增加来确定。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，所述真菌为多细胞真菌，其中所述真菌菌株对于所述抗真菌剂的抗性表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量来确定。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，所述真菌为多细胞真菌，其中所述真菌菌株对于所述抗真菌剂的抗性表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量来确定。
在多细胞真菌菌株的情况下，单独使用几丁质含量的可能变化足以确定所述菌株对于抗真菌剂的敏感性程度相应于中间表型，于在所述抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言10％至小于20％的值的几丁质含量的增加的情况下。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，所述真菌为多细胞真菌，其中所述真菌菌株对于抗真菌剂的中间表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言10％至小于20％的值的几丁质含量的增加来确定。
在多细胞真菌菌株的情况下，使用在抗真菌剂存在下在真菌菌株的细胞群中相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群而言与由所述真菌菌株的细胞所发出的萌发营养菌丝的长度的可能变化相联合的几丁质含量的可能变化，使得能够确定所述菌株对于所述抗真菌剂的中间表型或敏感表型，在大于或等于20％的几丁质含量的增加和所述菌丝的长度的减少或者所述菌丝的不变的长度的情况下。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的用途，所述真菌为多细胞真菌，其中所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感表型或中间表型通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加，和通过在所述细胞群中的萌发营养菌丝的长度相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的所述菌丝的长度而言的可能变化(所述可能变化为相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝的长度而言所述菌丝的长度的减少或者所述菌丝的不变的长度)来确定。
在单细胞和多细胞真菌中，几丁质是细胞壁的组成成分。因此，通过下面的技术来在真菌细胞的壁中测定几丁质含量。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中在所述真菌细胞的壁中测定几丁质含量的可能变化。
在所述真菌菌株的所述细胞群中表现出几丁质含量增加的细胞的最小阈值为至少10％。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，所述真菌为单细胞真菌，其中在所述真菌菌株的所述细胞群中表现出几丁质含量增加的细胞的最小阈值为至少10％。
表述“至少10％的几丁质含量的增加”意味着，在真菌菌株的细胞群中相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群而言观察到几丁质含量的增加，并且该增加可以采取10％的值或者大于10％的任何其他值。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中在所述真菌菌株的所述细胞群中表现出几丁质含量增加的细胞的最小阈值为至少10％，尤其是20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％和100％。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的细胞数目的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中在所述真菌菌株的所述细胞群中细胞数目减少的最小阈值为至少0.3log，尤其是0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3。
所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度通过在液体培养基中在抗真菌剂的浓度梯度存在下培养的所述真菌菌株相对于在其培养基中在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株而言细胞的几丁质含量的可能变化来进行测定。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述几丁质含量的可能变化在抗真菌剂的浓度梯度存在下进行测定。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中抗真菌剂的浓度梯度为0.0009至130μg/ml。
在真菌菌株的细胞中的几丁质含量可以通过各种不同的技术例如化学含量测定或荧光测量来进行测量。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述几丁质含量的可能变化通过荧光来进行测定。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述几丁质含量的可能变化通过荧光显微术方法来进行测定。
在单细胞或多细胞真菌菌株的细胞中的几丁质含量通过荧光显微术方法来进行测量，例如测量总荧光量的荧光显微术方法或测量“总荧光量/细胞”的高图像内容自动显微术(high-content analysis，HCA)方法。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述荧光显微术方法为高图像内容自动显微术(HCA)。
在单细胞或多细胞真菌中，借助于荧光标记物通过荧光显微术方法在单细胞或多细胞真菌细胞的壁中进行几丁质的测量。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述几丁质含量的可能变化借助于荧光标记物来进行测定。
更特别地，用于通过HCA这一显微术方法来测量在单细胞或多细胞真菌细胞的壁中的几丁质的荧光标记物为钙荧光白(Calcofluor White)。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述荧光标记物为钙荧光白。
测定单细胞或多细胞真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度。所述抗真菌剂可以具有各种不同的作用方式。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述抗真菌剂通过对于β-葡聚糖或甘露糖蛋白的作用而直接地作用于细胞壁或者通过对于细胞膜或对于真菌细胞的任何其他组成成分的作用而间接地作用于细胞壁。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述抗真菌剂选自包括下列各项或由下列各项组成的组：唑类抗真菌剂或其他抑制麦角固醇合成的分子例如烯丙胺类(其中包括特比萘芬或吗啉类)，或者棘白菌素类。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中抗真菌剂的组没有多烯类例如两性霉素B和制霉菌素并且没有对于几丁质具有直接作用的抗真菌剂。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述唑类抗真菌剂选自迄今包括下列各项或由下列各项组成的组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑和艾莎康唑(isavuconazole)。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述棘白菌素类选自迄今包括下列各项或由下列各项组成的组：阿尼芬净、卡泊芬净和米卡芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述抗真菌剂选自没有多烯类例如两性霉素B和制霉菌素且没有对于几丁质具有直接作用的抗真菌剂的抗真菌剂的组，更特别地：
-选自包括下列各项或由下列各项组成的组：唑类抗真菌剂例如氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑和艾莎康唑，或其他抑制麦角固醇合成的分子例如烯丙胺类，其中包括特比萘芬或吗啉类；或者
-选自棘白菌素类，所述棘白菌素更特别地选自包括下列各项或由下列各项组成的组：阿尼芬净、卡泊芬净和米卡芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中抗真菌剂的组另外还包括多烯类例如两性霉素B和制霉菌素并且没有对于几丁质具有直接作用的抗真菌剂。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中待测试的抗真菌剂选自由下列各项组成的组：氟康唑、泊沙康唑、伏立康唑、伊曲康唑、艾莎康唑(关于唑类类别)；卡泊芬净、米卡芬净和阿尼芬净(关于棘白菌素类类别)；和制霉菌素和两性霉素B(关于多烯类类别)，所述组没有对于几丁质具有直接作用的抗真菌剂。
在一个特别的实施方案中，对于单细胞真菌测定对于抗真菌剂的敏感性程度。
所述单细胞真菌主要由酵母代表。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述真菌为酵母。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述酵母的细胞群选自包括下列属或由下列属组成的组：假丝酵母属(Candida)、隐球酵母属(Cryptococcus)、糖酵母属(Saccharomyces)、丝孢酵母属(Trichosporon)、红酵母属(Rhodotorula)、鳞斑霉属(Malassezia)。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述酵母的细胞群是假丝酵母属的酵母的细胞群。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述假丝酵母属的酵母选自包括下列物种或由下列物种组成的组：白假丝酵母(Candida albicans)、光滑假丝酵母(C.glabrata)、热带假丝酵母(C.tropicalis)、近平滑假丝酵母(C.parapsilosis)、克鲁斯假丝酵母(C.krusei)、都柏林假丝酵母(C.dubliniensis)、乳酒假丝酵母(C.kefyr)、葡萄牙假丝酵母(C.lusitaniae)、涎沫假丝酵母(C.zeylanoides)、皱落假丝酵母(C.rugosa)、平常假丝酵母(C.inconspicua)、挪威假丝酵母(C.norvegensis)、季氏假丝酵母(C.guilliermondii)、产朊假丝酵母(C.utilis)。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述真菌选自包括下列属或由下列属组成的组：曲霉属(Aspergillus)、镰孢属(Fusarium)、丝孢菌属(Scedosporium)、横梗霉属(Lichteimia)、根霉属(Rhizopus)、根毛霉属(Rhizomucor)、毛霉属(Mucor)、拟青霉属(Paecylomyces)、地霉属(Geotrichum)。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述真菌是曲霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述曲霉属的真菌选自包括下列物种或由下列物种组成的组：烟曲霉(A.fumigatus)、黄曲霉(A.flavus)、构巢曲霉(A.nidulans)、土曲霉(A.terreus)、杂色曲霉(A.versicolor)、黑曲霉(A.niger)。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述真菌是镰孢属的真菌，和尤其属于下列物种之一：腐皮镰孢(Fusarium solani)、尖镰孢(Fusariumoxysporum)。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述真菌是丝孢菌属的真菌，和尤其属于下列物种之一：尖端丝孢菌(Scedosporium apiospermum)、多育丝孢菌(Scedosporium prolificans)。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述真菌是毛霉目(Mucorales)的真菌，和尤其属于下列属之一：毛霉属、横梗霉属、根霉属、根毛霉属。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述毛霉目的真菌选自包括下列物种或由下列物种组成的组：伞房横梗霉(Lichteimia corymbifera)、米根霉(Rhizopus oryzae)、微小根毛霉(Rhizomucor pusillus)、总状毛霉(Mucorracemosa)。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述真菌是地霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述真菌是拟青霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于在真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化用于测定所述真菌菌株对于抗真菌剂的敏感性程度的用途，其中所述真菌选自包括下列属和物种或由下列属和物种组成的组：曲霉属、镰孢属、丝孢菌属、横梗霉属、根霉属、根毛霉属、毛霉属、地霉属、拟青霉属；烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、构巢曲霉、土曲霉、腐皮镰孢、尖镰孢、尖端丝孢菌、多育丝孢菌、伞房横梗霉、米根霉、微小根毛霉、总状毛霉。
本发明的目标还在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法。
在一个特别的实施方案中，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于敏感表型、抗性表型或中间表型的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为多细胞真菌，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤，和测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的所述细胞群中的细胞数目的可能变化的步骤，所述细胞数目的变化相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的细胞数目而言来进行测定。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为多细胞真菌，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤，和测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌细胞群中的萌发营养菌丝长度的可能变化，所述萌发营养菌丝长度的可能变化相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度而言来进行测定。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤，所述可能变化为小于10％的几丁质含量的增加或者不存在几丁质含量的增加。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤，所述可能变化为小于10％的几丁质含量的增加或者几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤，所述可能变化为小于10％的几丁质含量的增加或者小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于中间表型的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的变化的步骤，所述变化为10％至小于20％的值的几丁质含量的增加。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌细胞群对于抗真菌剂的相应于敏感表型或中间表型的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的变化的步骤，所述变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株(所述真菌为单细胞真菌)的细胞群对于抗真菌剂的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的变化的步骤，所述变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加，和测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的所述细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的细胞数目而言的变化的步骤，所述变化为至少0.3log的细胞数目的减少。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株(所述真菌为单细胞真菌)的细胞群对于抗真菌剂的相应于中间表型的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的变化的步骤，所述变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加，和测定在所述抗真菌剂存在下所述真菌菌株的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言的可能变化的步骤，所述可能变化为小于0.3log的细胞数目的减少或者不变的细胞数目。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株(所述真菌为多细胞真菌)的细胞群对于抗真菌剂的相应于敏感表型或中间表型的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的变化的步骤，所述变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加，和测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的所述细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤，所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的减少或者所述菌丝的不变的长度。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的增加的步骤，所述增加为至少20％，尤其是20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％和100％。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括在所述抗真菌剂的浓度梯度存在下进行的测定几丁质含量的可能变化的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂的浓度梯度为0.0009至130μg/ml、0.0009至1μg/ml、0.0009至5μg/ml、0.0009至8μg/ml或0.0009至16μg/ml。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化通过荧光方法来进行测定。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述荧光方法为荧光显微术方法。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述荧光显微术方法为高图像内容自动显微术(HCA)。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括对所述真菌菌株的细胞进行荧光标记的步骤，其使得能够测定几丁质含量的可能变化。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括借助于钙荧光白来进行的对所述真菌菌株的细胞进行荧光标记的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化通过相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言来进行测定，并且其中所述抗真菌剂通过对于β-葡聚糖或甘露糖蛋白的作用而直接地作用于细胞壁或者通过对于细胞膜或对于真菌细胞的任何其他组成成分的作用而间接地作用于细胞壁。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂选自包括下列各项的组：唑类抗真菌剂或其他抑制麦角固醇合成的分子例如烯丙胺类(其中包括特比萘芬或吗啉类)，或者棘白菌素类。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂选自没有多烯类例如两性霉素B和制霉菌素并且没有对于几丁质具有直接作用的抗真菌剂的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为从包括下列各项的组中选择的唑类抗真菌剂：伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑和艾莎康唑。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为从包括阿尼芬净、卡泊芬净、米卡芬净的组中选择的棘白菌素。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂选自没有多烯类例如两性霉素B和制霉菌素且没有对于几丁质具有直接作用的抗真菌剂的抗真菌剂的组，更特别地：
-选自包括下列各项或由下列各项组成的组：唑类抗真菌剂例如氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑和艾莎康唑，或其他抑制麦角固醇合成的分子例如烯丙胺类，其中包括特比萘芬或吗啉类；或者
-选自棘白菌素类，所述棘白菌素更特别地选自包括下列各项或由下列各项组成的组：阿尼芬净、卡泊芬净和米卡芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为多细胞真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌选自包括下列各项的组：曲霉属、镰孢属、丝孢菌属、横梗霉属、根霉属、毛霉属、拟青霉属、根毛霉属、地霉属。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌是曲霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述曲霉属的真菌选自包括下列各项的组：烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为曲霉属的真菌，其选自包括下列物种的组：烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉；并且所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、艾莎康唑、米卡芬净、阿尼芬净、卡泊芬净、两性霉素B和制霉菌素。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伏立康唑，并且其中所述曲霉属的真菌选自包括下列物种的组：烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为泊沙康唑，并且其中所述曲霉属的真菌选自包括下列物种的组：烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伊曲康唑，并且其中所述曲霉属的真菌选自包括下列物种的组：烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为艾莎康唑，并且其中所述曲霉属的真菌选自包括下列物种的组：烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为米卡芬净，并且其中所述曲霉属的真菌选自包括下列物种的组：烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为阿尼芬净，并且其中所述曲霉属的真菌选自包括下列物种的组：烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为卡泊芬净，并且其中所述曲霉属的真菌选自包括下列物种的组：烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为两性霉素B，并且其中所述曲霉属的真菌选自包括下列物种的组：烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为制霉菌素，并且其中所述曲霉属的真菌选自包括下列物种的组：烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为烟曲霉这一物种的真菌，并且所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、艾莎康唑、米卡芬净、阿尼芬净、卡泊芬净、两性霉素B和制霉菌素。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为黄曲霉这一物种的真菌，并且所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、艾莎康唑、米卡芬净、阿尼芬净、卡泊芬净、两性霉素B和制霉菌素。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为构巢曲霉这一物种的真菌，并且所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、艾莎康唑、米卡芬净、阿尼芬净、卡泊芬净、两性霉素B和制霉菌素。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为土曲霉这一物种的真菌，并且所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、艾莎康唑、米卡芬净、阿尼芬净、卡泊芬净、两性霉素B和制霉菌素。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为杂色曲霉这一物种的真菌，并且所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、艾莎康唑、米卡芬净、阿尼芬净、卡泊芬净、两性霉素B和制霉菌素。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为黑曲霉这一物种的真菌，并且所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、艾莎康唑、米卡芬净、阿尼芬净、卡泊芬净、两性霉素B和制霉菌素。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为镰孢属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为镰孢属的真菌，其选自包括下列物种的组：腐皮镰孢、尖镰孢。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为镰孢属的真菌，其选自包括下列物种的组：腐皮镰孢、尖镰孢；并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、艾莎康唑、两性霉素B和制霉菌素。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伏立康唑，并且其中所述真菌为镰孢属的真菌，其选自包括下列物种的组：腐皮镰孢、尖镰孢。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为艾莎康唑，并且其中所述真菌为镰孢属的真菌，其选自包括下列物种的组：腐皮镰孢、尖镰孢。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为两性霉素B，并且其中所述真菌为镰孢属的真菌，其选自包括下列物种的组：腐皮镰孢、尖镰孢。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为制霉菌素，并且其中所述真菌为镰孢属的真菌，其选自包括下列物种的组：腐皮镰孢、尖镰孢。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为腐皮镰孢这一物种的真菌，并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、艾莎康唑、两性霉素B和制霉菌素。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为尖镰孢这一物种的真菌，并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、艾莎康唑、两性霉素B和制霉菌素。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为丝孢菌属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为丝孢菌属的真菌，其选自包括下列物种的组：尖端丝孢菌、多育丝孢菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为丝孢菌属的真菌，其选自包括下列物种的组：尖端丝孢菌、多育丝孢菌；并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑和两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伏立康唑，并且其中所述真菌为丝孢菌属的真菌，其选自包括下列物种的组：尖端丝孢菌、多育丝孢菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为泊沙康唑，并且其中所述真菌为丝孢菌属的真菌，其选自包括下列物种的组：尖端丝孢菌、多育丝孢菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为艾莎康唑，并且其中所述真菌为丝孢菌属的真菌，其选自包括下列物种的组：尖端丝孢菌、多育丝孢菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为两性霉素B，并且其中所述真菌为丝孢菌属的真菌，其选自包括下列物种的组：尖端丝孢菌、多育丝孢菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为尖端丝孢菌这一物种的真菌，并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑、两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为多育丝孢菌这一物种的真菌，并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑、两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为毛霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为毛霉属的真菌，其选自包括总状毛霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为毛霉属的真菌，其选自包括总状毛霉这一物种的组；并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑和两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伏立康唑，并且所述真菌为毛霉属的真菌，其选自包括总状毛霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为泊沙康唑，并且所述真菌为毛霉属的真菌，其选自包括总状毛霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为艾莎康唑，并且所述真菌为毛霉属的真菌，其选自包括总状毛霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为两性霉素B，并且所述真菌为毛霉属的真菌，其选自包括总状毛霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为总状毛霉这一物种的真菌，并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑和两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为横梗霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为横梗霉属的真菌，其选自包括伞房横梗霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为横梗霉属的真菌，其选自包括伞房横梗霉这一物种的组；并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑和两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伏立康唑，并且其中所述真菌为横梗霉属的真菌，其选自包括伞房横梗霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为泊沙康唑，并且其中所述真菌为横梗霉属的真菌，其选自包括伞房横梗霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为艾莎康唑，并且其中所述真菌为横梗霉属的真菌，其选自包括伞房横梗霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为两性霉素B，并且其中所述真菌为横梗霉属的真菌，其选自包括伞房横梗霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为伞房横梗霉这一物种的真菌，并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑和两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为根霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为根霉属的真菌，其选自包括米根霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为根霉属的真菌，其选自包括米根霉这一物种的组；并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑和两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伏立康唑，并且其中所述真菌为根霉属的真菌，其选自包括米根霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为泊沙康唑，并且其中所述真菌为根霉属的真菌，其选自包括米根霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为艾莎康唑，并且其中所述真菌为根霉属的真菌，其选自包括米根霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为两性霉素B，并且其中所述真菌为根霉属的真菌，其选自包括米根霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为米根霉这一物种的真菌，并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑和两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为根毛霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为根毛霉属的真菌，其选自包括微小根毛霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为根毛霉属的真菌，其选自包括微小根毛霉这一物种的组；并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑和两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伏立康唑，并且其中所述真菌为根毛霉属的真菌，其选自包括微小根毛霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为泊沙康唑，并且其中所述真菌为根毛霉属的真菌，其选自包括微小根毛霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为艾莎康唑，并且其中所述真菌为根毛霉属的真菌，其选自包括微小根毛霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为两性霉素B，并且其中所述真菌为根毛霉属的真菌，其选自包括微小根毛霉这一物种的组。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为微小根毛霉这一物种的真菌，并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑和两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为地霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为地霉属的真菌，并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑和两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为氟康唑，并且其中所述真菌为地霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伏立康唑，并且其中所述真菌为地霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为泊沙康唑，并且其中所述真菌为地霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为艾莎康唑，并且其中所述真菌为地霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为两性霉素B，并且其中所述真菌为地霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为拟青霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为拟青霉属的真菌，并且其中所述抗真菌剂选自下组：伏立康唑、泊沙康唑、艾莎康唑和两性霉素B。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伏立康唑，并且其中所述真菌为拟青霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为泊沙康唑，并且其中所述真菌为拟青霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为艾莎康唑，并且其中所述真菌为拟青霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为两性霉素B，并且其中所述真菌为拟青霉属的真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为单细胞真菌。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为酵母。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为从下组中选择的酵母：假丝酵母属、隐球酵母属、糖酵母属、丝孢酵母属、红酵母属、鳞斑霉属。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为假丝酵母属的酵母。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为假丝酵母属的酵母，其选自包括下列物种的组：白假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、克鲁斯假丝酵母、都柏林假丝酵母、乳酒假丝酵母、葡萄牙假丝酵母、涎沫假丝酵母、皱落假丝酵母、平常假丝酵母、挪威假丝酵母、季氏假丝酵母、产朊假丝酵母。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为假丝酵母属的酵母，其选自包括下列物种的组：白假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、克鲁斯假丝酵母；并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为假丝酵母属的酵母菌株，其选自包括下列菌株的组：白假丝酵母的SC5314、DSY296、TOP，光滑假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000371
2001、Tg5，热带假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000372
7349、13/5，近平滑假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000373
22019、8/21，克鲁斯假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000374
6258、GRE32；并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为白假丝酵母这一物种的酵母，并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为白假丝酵母这一物种的酵母菌株，其选自下组：SC5314、DSY296、TOP；并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为光滑假丝酵母这一物种的酵母，并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为光滑假丝酵母这一物种的酵母菌株，其选自下组：
Figure BDA0001596091850000375
2001、Tg5；并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为热带假丝酵母这一物种的酵母，并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为热带假丝酵母这一物种的酵母菌株，其选自下组：
Figure BDA0001596091850000381
7349、13/5；并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为近平滑假丝酵母这一物种的酵母，并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为近平滑假丝酵母这一物种的酵母菌株，其选自下组：
Figure BDA0001596091850000382
22019、8/21；并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为克鲁斯假丝酵母这一物种的酵母，并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述真菌为克鲁斯假丝酵母这一物种的酵母菌株，其选自下组：
Figure BDA0001596091850000383
6258、GRE32；并且其中所述抗真菌剂选自下组：氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、米卡芬净、阿尼芬净。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为氟康唑，并且其中所述真菌为假丝酵母属的酵母，其选自包括下列物种的组：白假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、克鲁斯假丝酵母。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为氟康唑，并且其中所述真菌为假丝酵母属的酵母菌株，其选自包括下列菌株的组：白假丝酵母的SC5314、DSY296、TOP，光滑假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000391
2001、Tg5，热带假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000392
7349、13/5，近平滑假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000393
22019、8/21，克鲁斯假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000394
6258、GRE32。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伏立康唑，并且其中所述真菌为假丝酵母属的酵母，其选自包括下列物种的组：白假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、克鲁斯假丝酵母。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为伏立康唑，并且其中所述真菌为假丝酵母属的酵母菌株，其选自包括下列菌株的组：白假丝酵母的SC5314、DSY296、TOP，光滑假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000395
2001、Tg5，热带假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000396
7349、13/5，近平滑假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000397
22019、8/21，克鲁斯假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000398
6258、GRE32。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为泊沙康唑，并且其中所述真菌为假丝酵母属的酵母，其选自包括下列物种的组：白假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、克鲁斯假丝酵母。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为泊沙康唑，并且其中所述真菌为假丝酵母属的酵母菌株，其选自包括下列菌株的组：白假丝酵母的SC5314、DSY296、TOP，光滑假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000401
2001、Tg5，热带假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000402
7349、13/5，近平滑假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000403
22019、8/21，克鲁斯假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000404
6258、GRE32。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为米卡芬净，并且其中所述真菌为假丝酵母属的酵母，其选自包括下列物种的组：白假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、克鲁斯假丝酵母。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为米卡芬净，并且其中所述真菌为假丝酵母属的酵母菌株，其选自包括下列菌株的组：白假丝酵母的SC5314、DSY296、TOP，光滑假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000405
2001、Tg5，热带假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000406
7349、13/5，近平滑假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000407
22019、8/21，克鲁斯假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000408
6258、GRE32。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为阿尼芬净，并且其中所述真菌为假丝酵母属的酵母，其选自包括下列物种的组：白假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、克鲁斯假丝酵母。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述抗真菌剂为阿尼芬净，并且其中所述真菌为假丝酵母属的酵母菌株，其选自包括下列菌株的组：白假丝酵母的SC5314、DSY296、TOP，光滑假丝酵母的
Figure BDA0001596091850000409
2001、Tg5，热带假丝酵母的
Figure BDA00015960918500004010
7349、13/5，近平滑假丝酵母的
Figure BDA00015960918500004011
22019、8/21，克鲁斯假丝酵母的
Figure BDA00015960918500004012
6258、GRE32。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法在测定几丁质含量的可能变化的步骤之前包括使所述抗真菌剂与所述真菌菌株的细胞相接触的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述接触步骤具有少于或等于48小时的持续时间。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述接触步骤具有少于或等于24小时的持续时间。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述接触步骤具有至少6.5小时。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述接触步骤具有6.5小时至24小时的持续时间。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述接触步骤具有6.5小时至24小时的持续时间，尤其是6.5小时至8小时、6.5小时至10小时、6.5小时至12小时、6.5小时至14小时、6.5小时至16小时、6.5小时至18小时、6.5小时至20小时、6.5小时至22小时的持续时间。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述接触步骤具有6.5小时的持续时间。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述接触步骤具有24小时的持续时间。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述接触步骤在30至35℃的温度下进行。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述接触步骤在30至35℃的温度，尤其是30℃至31℃、30℃至32℃、30℃至33℃、30℃至34℃的温度下进行。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述接触步骤在30℃的温度下进行。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述接触步骤在35℃的温度下进行。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括用荧光标记物对所述真菌菌株的细胞进行标记的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括用荧光标记物对所述真菌菌株的细胞进行标记的步骤，所述步骤在使所述抗真菌剂与所述真菌菌株的细胞相接触的步骤之前、期间或之后进行。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括用荧光标记物对所述真菌菌株的细胞进行标记的步骤，所述步骤在使所述抗真菌剂与所述真菌菌株的细胞相接触的步骤之前进行。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括用荧光标记物对所述真菌菌株的细胞进行标记的步骤，所述步骤与使所述抗真菌剂与所述真菌菌株的细胞相接触的步骤同时进行。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括用荧光标记物对所述真菌菌株的细胞进行标记的步骤，所述步骤在使所述抗真菌剂与所述真菌菌株的细胞相接触的步骤之后进行。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括使所述抗真菌剂与所述真菌菌株的细胞相接触的步骤，和用荧光标记物对所述真菌菌株的细胞进行标记的步骤，所述标记物为钙荧光白。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括通过用荧光显微术对在所述真菌菌株的细胞中的几丁质含量进行定量来测定几丁质含量的可能变化的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株(所述真菌为单细胞真菌)的细胞群对于抗真菌剂的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括通过用荧光显微术对几丁质含量进行定量来测定几丁质含量的变化的步骤，所述变化为在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加，随后为测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的细胞数目而言的可能变化的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株(所述真菌为单细胞真菌)的细胞群对于抗真菌剂的相应于中间表型的敏感性程度的方法，所述方法包括通过用荧光显微术对几丁质含量进行定量来测定几丁质含量的变化的步骤，所述变化为在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加，随后为测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的细胞数目而言的可能变化的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株(所述真菌为多细胞真菌)的细胞群对于抗真菌剂的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括通过用荧光显微术对几丁质含量进行定量来测定几丁质含量的变化的步骤，所述变化为在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加，随后为测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的所述细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株(所述真菌为多细胞真菌)的细胞群对于抗真菌剂的相应于中间表型的敏感性程度的方法，所述方法包括通过用荧光显微术对几丁质含量进行定量来测定几丁质含量的变化的步骤，所述变化为在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加，随后为测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的所述细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞或多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者不存在增加时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞或多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.对在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者不存在增加时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述细胞数目的可能变化为小于0.3log的细胞数的减少或者不变的细胞数目时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述细胞数目的变化为至少0.3log的减少时，推断所述真菌菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.对在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述细胞数目的可能变化为小于0.3log的细胞数的减少或者不变的细胞数目时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述细胞数目的变化为至少0.3log的减少时，推断所述真菌菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为不存在增加或者小于10％的增加时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的减少或者所述菌丝的不变的长度时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的减少或者所述菌丝的不变的长度时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述使所述真菌菌株的细胞与0.0009至130μg/ml的一系列浓度的所述抗真菌剂相接触的步骤在30至35℃的温度下进行少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与所述抗真菌剂的混合物。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中向在接触步骤后获得的所述真菌菌株的细胞与所述抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物的步骤借助于钙荧光白来进行，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与所述抗真菌剂的混合物。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞或多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者不存在增加时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞或多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述菌株为抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.对在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者不存在几丁质含量的增加时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述细胞数目的可能变化为小于0.3log的细胞数的减少或者不变的细胞数目时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述细胞数目的变化为至少0.3log的减少时，推断所述真菌菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.对在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述细胞数目的可能变化为小于0.3log的细胞数的减少或者不变的细胞数目时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述细胞数目的变化为至少0.3log的减少时，推断所述真菌菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者不存在增加时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的减少或者所述菌丝的不变的长度时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的减少或者所述菌丝的不变的长度时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞或多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞或多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞或多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞或多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于中间表型的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言10％至小于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；或者
e.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加的步骤；接着为
f.对在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
g.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言小于0.3log的细胞数目的减少或者不变的细胞数目的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于中间表型的敏感性程度的方法，所述真菌为多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言在10％和小于20％的值之间的几丁质含量的增加的步骤；或者
e.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加的步骤；接着为
f.测量在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
g.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言萌发营养菌丝长度的减少或者所述菌丝的不变的长度的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于中间表型的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言10％至小于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；或者
e.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加的步骤；接着为
f.在上述对几丁质含量进行定量的步骤后，对在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
g.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言小于0.3log的细胞数目的减少或者不变的细胞数目的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于中间表型的敏感性程度的方法，所述真菌为多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言在10％和小于20％的值之间的几丁质含量的增加的步骤；或者
e.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加的步骤；接着为
f.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
g.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言萌发营养菌丝长度的减少或者所述菌丝的不变的长度的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述真菌为多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的浓度的抗真菌剂相接触，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物，从而获得经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.测量在经荧光标记物标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言萌发营养菌丝长度的减少或者所述菌丝的不变的长度的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言至少20％的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述真菌为多细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度而言萌发营养菌丝长度的减少或者所述菌丝的不变的长度的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定白假丝酵母SC5314菌株的细胞群对于氟康唑的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与从0.015至16μg/ml，更特别地从0.015至0.031μg/ml、从0.015至0.062μg/ml、从0.015至0.125μg/ml、从0.015至0.25μg/ml、从0.015至0.5μg/ml、从0.015至1μg/ml、从0.015至2μg/ml、从0.015至4μg/ml、从0.015至8μg/ml、从0.015至16μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；
e.在上述对几丁质含量进行定量的步骤后，对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与氟康唑的混合物中的细胞进行计数的步骤；
f.测定依照氟康唑浓度，在所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群中的细胞数目相对于在氟康唑不存在下在所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定白假丝酵母SC5314菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与从0.004至5μg/ml，更特别地从0.004至0.009μg/ml、从0.004至0.019μg/ml、从0.004至0.039μg/ml、从0.004至0.078μg/ml、从0.004至0.156μg/ml、从0.004至0.312μg/ml、从0.004至0.0625μg/ml、从0.004至1.25μg/ml、从0.004至2.5μg/ml、从0.004至5μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与伏立康唑的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照伏立康唑浓度，在所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群中的细胞数目相对于在伏立康唑不存在下在所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定白假丝酵母SC5314菌株的细胞群对于米卡芬净的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与从0.0009至1μg/ml，更特别地从0.0009至0.0019μg/ml、从0.0009至0.0039μg/ml、从0.0009至0.007μg/ml、从0.0009至0.015μg/ml、从0.0009至0.031μg/ml、从0.0009至0.062μg/ml、从0.0009至0.125μg/ml、从0.0009至0.25μg/ml、从0.0009至0.5μg/ml、从0.0009至1μg/ml变化的米卡芬净的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与米卡芬净的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照米卡芬净浓度，在所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞与米卡芬净的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照米卡芬净浓度，在所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群中的细胞数目相对于在米卡芬净不存在下在所述白假丝酵母SC5314菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定白假丝酵母DSY296菌株的细胞群对于氟康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与从0.015至16μg/ml，更特别地从0.015至0.031μg/ml、从0.015至0.062μg/ml、从0.015至0.125μg/ml、从0.015至0.25μg/ml、从0.015至0.5μg/ml、从0.015至1μg/ml、从0.015至2μg/ml、从0.015至4μg/ml、从0.015至8μg/ml、从0.015至16μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定白假丝酵母DSY296菌株的细胞群对于氟康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与从0.015至16μg/ml，更特别地从0.015至0.031μg/ml、从0.015至0.062μg/ml、从0.015至0.125μg/ml、从0.015至0.25μg/ml、从0.015至0.5μg/ml、从0.015至1μg/ml、从0.015至2μg/ml、从0.015至4μg/ml、从0.015至8μg/ml、从0.015至16μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定白假丝酵母DSY296菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与从0.004至5μg/ml，更特别地从0.004至0.009μg/ml、从0.004至0.019μg/ml、从0.004至0.039μg/ml、从0.004至0.078μg/ml、从0.004至0.156μg/ml、从0.004至0.312μg/ml、从0.004至0.0625μg/ml、从0.004至1.25μg/ml、从0.004至2.5μg/ml、从0.004至5μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定白假丝酵母DSY296菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与从0.004至5μg/ml，更特别地从0.004至0.009μg/ml、从0.004至0.019μg/ml、从0.004至0.039μg/ml、从0.004至0.078μg/ml、从0.004至0.156μg/ml、从0.004至0.312μg/ml、从0.004至0.0625μg/ml、从0.004至1.25μg/ml、从0.004至2.5μg/ml、从0.004至5μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述白假丝酵母DSY296菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定白假丝酵母TOP菌株的细胞群对于米卡芬净的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述白假丝酵母TOP菌株的细胞与从0.0009至1μg/ml，更特别地从0.0009至0.0019μg/ml、从0.0009至0.0039μg/ml、从0.0009至0.007μg/ml、从0.0009至0.015μg/ml、从0.0009至0.031μg/ml、从0.0009至0.062μg/ml、从0.0009至0.125μg/ml、从0.0009至0.25μg/ml、从0.0009至0.5μg/ml、从0.0009至1μg/ml变化的米卡芬净的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述白假丝酵母TOP菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述白假丝酵母TOP菌株的细胞与米卡芬净的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母TOP菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述白假丝酵母TOP菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母TOP菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照米卡芬净浓度，在所述白假丝酵母TOP菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下所述白假丝酵母TOP菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定白假丝酵母TOP菌株的细胞群对于米卡芬净的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述白假丝酵母TOP菌株的细胞与从0.0009至1μg/ml，更特别地从0.0009至0.0019μg/ml、从0.0009至0.0039μg/ml、从0.0009至0.007μg/ml、从0.0009至0.015μg/ml、从0.0009至0.031μg/ml、从0.0009至0.062μg/ml、从0.0009至0.125μg/ml、从0.0009至0.25μg/ml、从0.0009至0.5μg/ml、从0.0009至1μg/ml变化的米卡芬净的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述白假丝酵母TOP菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述白假丝酵母TOP菌株的细胞与米卡芬净的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母TOP菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述白假丝酵母TOP菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述白假丝酵母TOP菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照米卡芬净浓度，在所述白假丝酵母TOP菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下所述白假丝酵母TOP菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000731
2001菌株的细胞群对于氟康唑的相应于中间表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000732
2001菌株的细胞与从0.125至128μg/ml，更特别地从0.125至0.250μg/ml、从0.125至0.5μg/ml、从0.125至1μg/ml、从0.125至2μg/ml、从0.125至4μg/ml、从0.125至8μg/ml、从0.125至16μg/ml、从0.125至32μg/ml、从0.125至64μg/ml、从0.125至128μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在35℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000733
2001菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000734
2001菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000735
2001菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000736
2001菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000737
2001菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000738
2001菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000739
2001菌株的细胞群的几丁质含量而言10％至小于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；或者
e.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500007310
2001菌株的细胞与氟康唑的混合物中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述光滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500007311
2001菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加的步骤；接着为
f.在上述对几丁质含量进行定量的步骤后，对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000741
2001菌株的细胞与氟康唑的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
g.测定依照氟康唑浓度，在所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000742
2001菌株的细胞群中的细胞数目相对于在氟康唑不存在下在所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000743
2001菌株的细胞群中的细胞数目而言小于0.3log的细胞数目的减少或者不变的细胞数目的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000744
2001菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000745
2001菌株的细胞与从0.007至8μg/ml，更特别地从0.007至0.015μg/ml、从0.007至0.031μg/ml、从0.007至0.062μg/ml、从0.007至0.125μg/ml、从0.007至0.25μg/ml、从0.007至0.5μg/ml、从0.007至1μg/ml、从0.007至2μg/ml、从0.007至4μg/ml、从0.007至8μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在35℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000746
2001菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000747
2001菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000748
2001菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000749
2001菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500007410
2001菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述光滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500007411
2001菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述光滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500007412
2001菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000751
2001菌株的细胞与伏立康唑的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照伏立康唑浓度，在所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000752
2001菌株的细胞群中的细胞数目相对于在伏立康唑不存在下在所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000753
2001菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000754
2001菌株的细胞群对于米卡芬净的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000755
2001菌株的细胞与从0.0009至1μg/ml，更特别地从0.0009至0.0019μg/ml、从0.0009至0.0039μg/ml、从0.0009至0.007μg/ml、从0.0009至0.015μg/ml、从0.0009至0.031μg/ml、从0.0009至0.062μg/ml、从0.0009至0.125μg/ml、从0.0009至0.25μg/ml、从0.0009至0.5μg/ml、从0.0009至1μg/ml变化的米卡芬净的浓度梯度在35℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000756
2001菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000757
2001菌株的细胞与米卡芬净的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000758
2001菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000759
2001菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500007510
2001菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照米卡芬净浓度，在所述光滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500007511
2001菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000761
2001菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000762
2001菌株的细胞与米卡芬净的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照米卡芬净浓度，在所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000763
2001菌株的细胞群中的细胞数目相对于在米卡芬净不存在下在所述光滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000764
2001菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群对于氟康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与从0至128μg/ml，更特别地从0至0.125μg/ml，从0至0.250μg/ml，从0至0.5μg/ml，从0至1μg/ml，从0至2μg/ml，从0至4μg/ml，从0至8μg/ml，从0至16μg/ml，从0至32μg/ml，从0至64μg/ml，从0至128μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在35℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群对于氟康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与从0至128μg/ml，更特别地从0至0.125μg/ml，从0至0.250μg/ml，从0至0.5μg/ml，从0至1μg/ml，从0至2μg/ml，从0至4μg/ml，从0至8μg/ml，从0至16μg/ml，从0至32μg/ml，从0至64μg/ml，从0至128μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在35℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与从0.007至8μg/ml，更特别地从0.007至0.015μg/ml、从0.007至0.031μg/ml、从0.007至0.062μg/ml、从0.007至0.125μg/ml、从0.007至0.25μg/ml、从0.007至0.5μg/ml、从0.007至1μg/ml、从0.007至2μg/ml、从0.007至4μg/ml、从0.007至8μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在35℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与从0.007至8μg/ml，更特别地从0.007至0.015μg/ml、从0.007至0.031μg/ml、从0.007至0.062μg/ml、从0.007至0.125μg/ml、从0.007至0.25μg/ml、从0.007至0.5μg/ml、从0.007至1μg/ml、从0.007至2μg/ml、从0.007至4μg/ml、从0.007至8μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在35℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群对于米卡芬净的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与从0.0009至1μg/ml，更特别地从0.0009至0.0019μg/ml、从0.0009至0.0039μg/ml、从0.0009至0.007μg/ml、从0.0009至0.015μg/ml、从0.0009至0.031μg/ml、从0.0009至0.062μg/ml、从0.0009至0.125μg/ml、从0.0009至0.25μg/ml、从0.0009至0.5μg/ml、从0.0009至1μg/ml变化的米卡芬净的浓度梯度在35℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与米卡芬净的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照米卡芬净浓度，在所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群对于米卡芬净的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与从0.0009至1μg/ml，更特别地从0.0009至0.0019μg/ml、从0.0009至0.0039μg/ml、从0.0009至0.007μg/ml、从0.0009至0.015μg/ml、从0.0009至0.031μg/ml、从0.0009至0.062μg/ml、从0.0009至0.125μg/ml、从0.0009至0.25μg/ml、从0.0009至0.5μg/ml、从0.0009至1μg/ml变化的米卡芬净的浓度梯度在35℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与米卡芬净的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照米卡芬净浓度，在所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下所述光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000801
7349菌株的细胞群对于氟康唑的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000811
7349菌株的细胞与从0.015至16μg/ml，更特别地从0.015至0.031μg/ml、从0.015至0.062μg/ml、从0.015至0.125μg/ml、从0.015至0.25μg/ml、从0.015至0.5μg/ml、从0.015至1μg/ml、从0.015至2μg/ml、从0.015至4μg/ml、从0.015至8μg/ml、从0.015至16μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触24小时的持续时间，从而获得所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000812
7349菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000813
7349菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000814
7349菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000815
7349菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000816
7349菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000817
7349菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000818
7349菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000819
7349菌株的细胞与氟康唑的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照氟康唑浓度，在所述热带假丝酵母
Figure BDA00015960918500008110
7349菌株的细胞群中的细胞数目相对于在氟康唑不存在下在所述热带假丝酵母
Figure BDA00015960918500008111
7349菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000821
7349菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000822
7349菌株的细胞与从0.004至5μg/ml，更特别地从0.004至0.009μg/ml、从0.004至0.019μg/ml、从0.004至0.039μg/ml、从0.004至0.078μg/ml、从0.004至0.156μg/ml、从0.004至0.312μg/ml、从0.004至0.0625μg/ml、从0.004至1.25μg/ml、从0.004至2.5μg/ml、从0.004至5μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000823
7349菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000824
7349菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000825
7349菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000826
7349菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000827
7349菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000828
7349菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000829
7349菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA00015960918500008210
7349菌株的细胞与伏立康唑的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照伏立康唑浓度，在所述热带假丝酵母
Figure BDA00015960918500008211
7349菌株的细胞群中的细胞数目相对于在伏立康唑不存在下在所述热带假丝酵母
Figure BDA00015960918500008212
7349菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3 log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000831
7349菌株的细胞群对于米卡芬净的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000832
7349菌株的细胞与从0.0009至1μg/ml，更特别地从0.0009至0.0019μg/ml、从0.0009至0.0039μg/ml、从0.0009至0.007μg/ml、从0.0009至0.015μg/ml、从0.0009至0.031μg/ml、从0.0009至0.062μg/ml、从0.0009至0.125μg/ml、从0.0009至0.25μg/ml、从0.0009至0.5μg/ml、从0.0009至1μg/ml变化的米卡芬净的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000833
7349菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000834
7349菌株的细胞与米卡芬净的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000835
7349菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000836
7349菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000838
7349菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照米卡芬净浓度，在所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000837
7349菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000839
7349菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母
Figure BDA00015960918500008310
7349菌株的细胞与米卡芬净的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照米卡芬净浓度，在所述热带假丝酵母
Figure BDA00015960918500008311
7349菌株的细胞群中的细胞数目相对于在米卡芬净不存在下在所述热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850000841
7349菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定热带假丝酵母13/5菌株的细胞群对于米卡芬净的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞与从0.0009至1μg/ml，更特别地从0.0009至0.0019μg/ml、从0.0009至0.0039μg/ml、从0.0009至0.007μg/ml、从0.0009至0.015μg/ml、从0.0009至0.031μg/ml、从0.0009至0.062μg/ml、从0.0009至0.125μg/ml、从0.0009至0.25μg/ml、从0.0009至0.5μg/ml、从0.0009至1μg/ml变化的米卡芬净的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞与米卡芬净的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照米卡芬净浓度，在所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定热带假丝酵母13/5菌株的细胞群对于米卡芬净的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞与从0.0009至1μg/ml，更特别地从0.0009至0.0019μg/ml、从0.0009至0.0039μg/ml、从0.0009至0.007μg/ml、从0.0009至0.015μg/ml、从0.0009至0.031μg/ml、从0.0009至0.062μg/ml、从0.0009至0.125μg/ml、从0.0009至0.25μg/ml、从0.0009至0.5μg/ml、从0.0009至1μg/ml变化的米卡芬净的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞与米卡芬净的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照米卡芬净浓度，在所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下所述热带假丝酵母13/5菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000851
22019菌株的细胞群对于氟康唑的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000852
22019菌株的细胞与从0.015至16μg/ml，更特别地从0.015至0.031μg/ml、从0.015至0.062μg/ml、从0.015至0.125μg/ml、从0.015至0.25μg/ml、从0.015至0.5μg/ml、从0.015至1μg/ml、从0.015至2μg/ml、从0.015至4μg/ml、从0.015至8μg/ml、从0.015至16μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000853
22019菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000854
22019菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000861
22019菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000862
22019菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000863
22019菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000864
22019菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000865
22019菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000866
22019菌株的细胞与氟康唑的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照氟康唑浓度，在所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000867
22019菌株的细胞群中的细胞数目相对于在氟康唑不存在下在所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000868
22019菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000869
22019菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌近平滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500008610
22019菌株的细胞与从0.004至5μg/ml，更特别地从0.004至0.009μg/ml、从0.004至0.019μg/ml、从0.004至0.039μg/ml、从0.004至0.078μg/ml、从0.004至0.156μg/ml、从0.004至0.312μg/ml、从0.004至0.0625μg/ml、从0.004至1.25μg/ml、从0.004至2.5μg/ml、从0.004至5μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述近平滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500008611
22019菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000871
22019菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000872
22019菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000873
22019菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000874
22019菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000875
22019菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000876
22019菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000877
22019菌株的细胞与伏立康唑的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照伏立康唑浓度，在所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000878
22019菌株的细胞群中的细胞数目相对于在伏立康唑不存在下在所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000879
22019菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定近平滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500008710
22019菌株的细胞群对于米卡芬净的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌近平滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500008711
22019菌株的细胞与从0.0009至1μg/ml，更特别地从0.0009至0.0019μg/ml、从0.0009至0.0039μg/ml、从0.0009至0.007μg/ml、从0.0009至0.015μg/ml、从0.0009至0.031μg/ml、从0.0009至0.062μg/ml、从0.0009至0.125μg/ml、从0.0009至0.25μg/ml、从0.0009至0.5μg/ml、从0.0009至1μg/ml变化的米卡芬净的浓度梯度在30℃的温度下相接触24小时的持续时间，从而获得所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000881
22019菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000882
22019菌株的细胞与米卡芬净的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000883
22019菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000884
22019菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000885
22019菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照米卡芬净浓度，在所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000886
22019菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000887
22019菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000888
22019菌株的细胞与米卡芬净的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照米卡芬净浓度，在所述近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850000889
22019菌株的细胞群中的细胞数目相对于在米卡芬净不存在下在所述近平滑假丝酵母
Figure BDA00015960918500008810
22019菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群对于氟康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与从0.015至16μg/ml，更特别地从0.015至0.031μg/ml、从0.015至0.062μg/ml、从0.015至0.125μg/ml、从0.015至0.25μg/ml、从0.015至0.5μg/ml、从0.015至1μg/ml、从0.015至2μg/ml、从0.015至4μg/ml、从0.015至8μg/ml、从0.015至16μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群对于氟康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与从0.015至16μg/ml，更特别地从0.015至0.031μg/ml、从0.015至0.062μg/ml、从0.015至0.125μg/ml、从0.015至0.25μg/ml、从0.015至0.5μg/ml、从0.015至1μg/ml、从0.015至2μg/ml、从0.015至4μg/ml、从0.015至8μg/ml、从0.015至16μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与从0.004至5μg/ml，更特别地从0.004至0.009μg/ml、从0.004至0.019μg/ml、从0.004至0.039μg/ml、从0.004至0.078μg/ml、从0.004至0.156μg/ml、从0.004至0.312μg/ml、从0.004至0.0625μg/ml、从0.004至1.25μg/ml、从0.004至2.5μg/ml、从0.004至5μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与从0.004至5μg/ml，更特别地从0.004至0.009μg/ml、从0.004至0.019μg/ml、从0.004至0.039μg/ml、从0.004至0.078μg/ml、从0.004至0.156μg/ml、从0.004至0.312μg/ml、从0.004至0.0625μg/ml、从0.004至1.25μg/ml、从0.004至2.5μg/ml、从0.004至5μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000911
6258菌株的细胞群对于氟康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000912
6258菌株的细胞与从0.125至128μg/ml，更特别地从0.125至0.250μg/ml、从0.125至0.5μg/ml、从0.125至1μg/ml、从0.125至2μg/ml、从0.125至4μg/ml、从0.125至8μg/ml、从0.125至16μg/ml、从0.125至32μg/ml、从0.125至64μg/ml、从0.125至128μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000921
6258菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000922
6258菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000923
6258菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000924
6258菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000925
6258菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000926
6258菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000927
6258菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000928
6258菌株的细胞群对于氟康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000929
6258菌株的细胞与从0.125至128μg/ml，更特别地从0.125至0.250μg/ml、从0.125至0.5μg/ml、从0.125至1μg/ml、从0.125至2μg/ml、从0.125至4μg/ml、从0.125至8μg/ml、从0.125至16μg/ml、从0.125至32μg/ml、从0.125至64μg/ml、从0.125至128μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA00015960918500009210
6258菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA00015960918500009211
6258菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000931
6258菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000932
6258菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000933
6258菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000934
6258菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000935
6258菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000936
6258菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于中间表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000937
6258菌株的细胞与从0.007至8μg/ml，更特别地从0.007至0.015μg/ml、从0.007至0.031μg/ml、从0.007至0.062μg/ml、从0.007至0.125μg/ml、从0.007至0.25μg/ml、从0.007至0.5μg/ml、从0.007至1μg/ml、从0.007至2μg/ml、从0.007至4μg/ml、从0.007至8μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触24小时的持续时间，从而获得所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000938
6258菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000939
6258菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA00015960918500009310
6258菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA00015960918500009311
6258菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000941
6258菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000942
6258菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000943
6258菌株的细胞群的几丁质含量而言10％至小于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；或者
e.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000944
6258菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000945
6258菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000946
6258菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加的步骤；接着为
f.在上述对几丁质含量进行定量的步骤后，对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000947
6258菌株的细胞与伏立康唑的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
g.测定依照伏立康唑浓度，在所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000948
6258菌株的细胞群中的细胞数目相对于在伏立康唑不存在下在所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000949
6258菌株的细胞群中的细胞数目而言小于0.3log的细胞数目的减少或者不变的细胞数目的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定克鲁斯假丝酵母
Figure BDA00015960918500009410
6258菌株的细胞群对于米卡芬净的相应于敏感表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA00015960918500009411
6258菌株的细胞与从0.0009至1μg/ml，更特别地从0.0009至0.0019μg/ml、从0.0009至0.0039μg/ml、从0.0009至0.007μg/ml、从0.0009至0.015μg/ml、从0.0009至0.031μg/ml、从0.0009至0.062μg/ml、从0.0009至0.125μg/ml、从0.0009至0.25μg/ml、从0.0009至0.5μg/ml、从0.0009至1μg/ml变化的米卡芬净的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA00015960918500009412
6258菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000951
6258菌株的细胞与米卡芬净的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000952
6258菌株的细胞与米卡芬净的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000953
6258菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000954
6258菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照米卡芬净浓度，在所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000955
6258菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000956
6258菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；接着为
e.对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000957
6258菌株的细胞与米卡芬净的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f.测定依照米卡芬净浓度，在所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000958
6258菌株的细胞群中的细胞数目相对于在米卡芬净不存在下在所述克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850000959
6258菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群对于氟康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与从0.125至128μg/ml，更特别地从0.125至0.250μg/ml、从0.125至0.5μg/ml、从0.125至1μg/ml、从0.125至2μg/ml、从0.125至4μg/ml、从0.125至8μg/ml、从0.125至16μg/ml、从0.125至32μg/ml、从0.125至64μg/ml、从0.125至128μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群的几丁质含量而言不存在几丁质含量的增加或者小于10％的几丁质含量的增加的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群对于氟康唑的相应于抗性表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与从0.125至128μg/ml，更特别地从0.125至0.250μg/ml、从0.125至0.5μg/ml、从0.125至1μg/ml、从0.125至2μg/ml、从0.125至4μg/ml、从0.125至8μg/ml、从0.125至16μg/ml、从0.125至32μg/ml、从0.125至64μg/ml、从0.125至128μg/ml变化的氟康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与氟康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与氟康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与氟康唑的混合物中，依照氟康唑浓度，在所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10％的几丁质含量的增加或者尤其小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群对于伏立康唑的相应于中间表型的敏感性程度的方法，所述方法包括下列步骤：
a.使所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与从0.007至8μg/ml，更特别地从0.007至0.015μg/ml、从0.007至0.031μg/ml、从0.007至0.062μg/ml、从0.007至0.125μg/ml、从0.007至0.25μg/ml、从0.007至0.5μg/ml、从0.007至1μg/ml、从0.007至2μg/ml、从0.007至4μg/ml、从0.007至8μg/ml变化的伏立康唑的浓度梯度在30℃的温度下相接触24小时的持续时间，从而获得所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与伏立康唑的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与伏立康唑的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群的几丁质含量而言10％至小于20％的值的几丁质含量的增加的步骤；或者
e.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与伏立康唑的混合物中，依照伏立康唑浓度，在所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加的步骤；接着为
f.在上述对几丁质含量进行定量的步骤后，对在经荧光标记物钙荧光白标记的所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞与伏立康唑的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
g.测定依照伏立康唑浓度，在所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群中的细胞数目相对于在伏立康唑不存在下在所述克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群中的细胞数目而言小于0.3log的细胞数目的减少或者不变的细胞数目的步骤。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为曲霉属(包括烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉这些物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、伊曲康唑、艾莎康唑、两性霉素B和制霉菌素，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为曲霉属(包括烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉这些物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自米卡芬净、阿尼芬净和卡泊芬净，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0017至2μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为镰孢属(包括腐皮镰孢、尖镰孢这些物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自伏立康唑、艾莎康唑、两性霉素B和制霉菌素，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为丝孢菌属(包括尖端丝孢菌、多育丝孢菌这些物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为毛霉属(包括总状毛霉这一物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为横梗霉属(包括伞房横梗霉这一物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为根霉属(包括米根霉这一物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为根毛霉属(包括微小根毛霉这一物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为地霉属的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自氟康唑、泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为拟青霉属的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有敏感表型或中间表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为曲霉属(包括烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉这些物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、伊曲康唑、艾莎康唑、两性霉素B和制霉菌素，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至125μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为曲霉属(包括烟曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、土曲霉、杂色曲霉、黑曲霉这些物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自米卡芬净、阿尼芬净和卡泊芬净，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.0017至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为镰孢属(包括腐皮镰孢和尖镰孢这些物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自伏立康唑、艾莎康唑、两性霉素B和制霉菌素，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至125μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为丝孢菌属(包括尖端丝孢菌和多育丝孢菌这些物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至125μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为毛霉属(包括总状毛霉这一物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至125μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为横梗霉属(包括伞房横梗霉这一物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至125μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为根霉属(包括米根霉这一物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为根毛霉属(包括微小根毛霉这一物种)的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至125μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为地霉属的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自氟康唑、泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至125μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感度或抗性的方法，所述真菌为拟青霉属的多细胞真菌，所述抗真菌剂选自泊沙康唑、伏立康唑、艾莎康唑和两性霉素B，所述方法包括下列步骤：
a.使所述真菌菌株的细胞与从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，尤其是6.5小时至24小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20％的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e.测量在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发营养菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的萌发营养菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的萌发营养菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定多细胞真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述抗真菌剂选自氟康唑、泊沙康唑、伏立康唑、伊曲康唑、艾莎康唑以及两性霉素B和制霉菌素，所述方法包括下列步骤：
a.使所述菌株的细胞与从0.007至8μg/ml，更特别地从0.007至0.015μg/ml、从0.007至0.031μg/ml、从0.007至0.062μg/ml、从0.007至0.125μg/ml、从0.007至0.25μg/ml、从0.007至0.5μg/ml、从0.007至1μg/ml、从0.007至2μg/ml、从0.007至4μg/ml、从0.007至8μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述菌株的细胞与所述抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述菌株的细胞与所述抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述菌株的细胞与所述抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；接着为
e.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述菌株的细胞群中的萌发菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下在所述菌株的细胞群中的萌发菌丝长度而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
根据一个特别的实施方案，本发明的目标在于用于测定多细胞真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述抗真菌剂选自米卡芬净、阿尼芬净和卡泊芬净，所述方法包括下列步骤：
a.使所述菌株的细胞与从0.0017至2μg/ml，更特别地从0.0017至0.003μg/ml，从0.0017至0.007μg/ml，从0.0017至0.015μg/ml，从0.0017至0.031μg/ml，从0.0017至0.062μg/ml，从0.0017至0.125μg/ml，从0.0017至0.25μg/ml，从0.0017至0.5μg/ml，从0.0017至1μg/ml，从0.0017至2μg/ml变化的抗真菌剂的浓度梯度在30℃的温度下相接触6.5小时的持续时间，从而获得所述菌株的细胞与所述抗真菌剂的混合物的步骤；
b.向前面获得的所述菌株的细胞与所述抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经荧光标记物钙荧光白标记的所述菌株的细胞与所述抗真菌剂的混合物的步骤；
c.通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述菌株的细胞与米卡芬净的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述菌株的细胞群的几丁质含量而言的变化的步骤；接着为
e.测定在经荧光标记物钙荧光白标记的所述菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的萌发菌丝长度的步骤；然后
f.测定依照抗真菌剂浓度，在所述菌株的细胞群中的萌发菌丝长度相对于在抗真菌剂不存在下在所述菌株的细胞群中的萌发菌丝长度而言的变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的可能变化为小于10％的增加或者尤其小于20％的减少或者不变的含量时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10％至小于20％的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的小于10％的减少或者不变的萌发菌丝长度时，所述菌株具有中间表型。
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20％的值的增加并且上述步骤f的所述萌发营养菌丝长度的可能变化为所述菌丝的长度的至少10％的减少时，所述菌株具有敏感表型。
附图
图1：该图显示了氟康唑对于白假丝酵母SC5314菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照氟康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照氟康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图2：该图显示了伏立康唑对于白假丝酵母SC5314菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照伏立康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图3：该图显示了氟康唑对于白假丝酵母DSY296菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照氟康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照氟康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图4：该图显示了伏立康唑对于白假丝酵母DSY296菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照伏立康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图5：该图显示了米卡芬净对于白假丝酵母TOP菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照米卡芬净浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照米卡芬净浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图6：该图显示了氟康唑对于光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照氟康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照氟康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图7：该图显示了伏立康唑对于光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照伏立康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图8：该图显示了氟康唑对于热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001231
7349菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照氟康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照氟康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图9：该图显示了伏立康唑对于热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001232
7349菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照伏立康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图10：该图显示了米卡芬净对于热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001233
7349菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照米卡芬净浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照米卡芬净浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图11：该图显示了米卡芬净对于热带假丝酵母13/5菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照米卡芬净浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照米卡芬净浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图12：该图显示了氟康唑对于近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001241
22019菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照氟康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照氟康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图13：该图显示了伏立康唑对于近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001242
22019菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照伏立康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图14：该图显示了米卡芬净对于近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001243
22019菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照米卡芬净浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照米卡芬净浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图15：该图显示了氟康唑对于近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照氟康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照氟康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图16：该图显示了伏立康唑对于近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照伏立康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图17：该图显示了氟康唑对于克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001244
6258菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照氟康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照氟康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图18：该图显示了伏立康唑对于克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001251
6258菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照伏立康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图19：该图显示了氟康唑对于克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照氟康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照氟康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
图20：该图显示了伏立康唑对于克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞的效应。实线曲线表示依照伏立康唑浓度的在细胞壁中的几丁质含量的变化(对数刻度)。虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的在培养基中的细胞数目的变化(对数刻度)。
实施例
A-单细胞真菌的实施例
I-在抗真菌剂存在下的真菌培养
事先将假丝酵母菌株在30℃下在酵母提取物-蛋白胨-右旋糖(YPD)培养基(1％的细菌用蛋白胨、0.5％的酵母提取物、2％的葡萄糖、1.5％的琼脂)中温育过夜。
然后，从YPD培养基平皿中取出酵母菌落并且将其悬浮在具有0.9％NaCl的盐水溶液中，其中细胞浓度通过使用Kova Slide计数玻片经由光学显微术进行了评估。
对于白假丝酵母、近平滑假丝酵母、热带假丝酵母和克鲁斯假丝酵母在pH 7的合成完全(SC)培养基(2％的葡萄糖、0.5％的硫酸铵、0.17％的酵母含氮碱、0.2％的完全合成混合物和10％的1.5M HEPES pH 7.2)中进行稀释，和对于光滑假丝酵母在pH 7.3的RPMI1640溶液(10％的1M HEPES pH 7.2)中进行稀释，从而获得的15ml的具有3×106CFU/ml的接种物，以便减少隔膜和聚簇的形成。
然后，将1ml的接种物添加至2ml的根据真菌物种而在SC或RPMI培养基中制备的抗真菌剂溶液，以便获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和按照表1的所希望的抗真菌剂浓度。
表1：对于酵母物种白假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、光滑假丝酵母和克鲁斯假丝酵母所使用的氟康唑、伏立康唑和米卡芬净的浓度梯度。
Figure BDA0001596091850001261
在均质化后，将培养物置于30℃在200rpm下(除了光滑假丝酵母的培养物外，其被置于35℃在200rpm下)，并且温育6.5小时或24小时的持续时间。
II-用高图像内容自动显微术(HCA)来进行分析
在温育后，将100μl的上面获得的真菌培养物以一式三份转移到96-孔平板中，并且在每个孔中添加2.5μl的钙荧光白(CFW)以便对酵母细胞壁的几丁质进行标记。
通过使用x40物镜和关于CFW的滤镜经由自动荧光显微术(ScanR筛选站,Olympus)来获取图像的步骤使得能够获得30幅图像/孔，以便捕获足够的细胞以提供显著的统计学数据。通过软件(ScanR分析软件,Olympus)来进行这些图像的分析。首先进行背景噪声的处理以便改善酵母荧光与背景噪声之间的对比度。在这种情况下，定义像素阈值。然后，进行在每幅所获取的图像上存在的荧光元素的分割，这借助于使得能够基于每个元素的荧光强度来确定该元素的界限的在软件中预先规定的算法。然后，应用大小参数以选择酵母并且去除聚集体和发荧光的碎片。
在这种情况下，每个元素相应于一个酵母，因此可能的是从这些前面定义的元素开始，确定关于每个酵母的荧光强度，该强度与其壁的几丁质含量直接相关。
从所述所定义的元素开始，还可能的是自动地对酵母进行计数。
然后，通过软件(GraphPad Prism)来处理这些数据，以便对于每个“酵母菌株/抗真菌剂”对，提供依照抗真菌剂浓度的细胞壁几丁质含量的变化和以CFU/ml(菌落形成单位/ml)表示的细胞数目的变化的图示。
当观察到相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌的细胞群的几丁质含量而言小于10％的值的几丁质含量的增加或者小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量时，该菌株具有抗性表型。
当观察到相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌的细胞群的几丁质含量而言从10％的值至小于20％的值的几丁质含量的增加时，该菌株具有中间表型。
当观察到相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加，以及相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌的细胞群中的细胞数目而言小于0.3log的细胞数目的减少或者不变的细胞数目时，该菌株具有中间表型。
当观察到相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加，以及相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的细胞数目的减少时，该菌株具有敏感表型。
应当注意，本申请的所有实施例均包含同时显示几丁质含量变化曲线和细胞数目变化曲线的图，然而在某些情况下细胞数目变化的参数不用于测定真菌菌株的敏感度。
这是因为，这两条曲线的产生对于为了实施目前的实施例而使用的软件来说是固有的。
为了测定真菌菌株的敏感度而考虑除细胞计数之外的其他参数构成了本发明的独创性，相对于基于测量酵母生长的现有测试(其易受阅读者主观性的影响)而言。
因此，本申请的目标是找到用于测定真菌菌株的敏感度的另一个标准，其中在大多数情况下细胞计数作为补充信息而被列入。然而，当几丁质含量的变化大于或等于20％时，该参数对于区分中间表型和敏感表型来说是必需的。
III-通过由Biomérieux商业化的比较的
Figure BDA0001596091850001281
方法来进行分析
Figure BDA0001596091850001282
方法是在真菌学临床实验室中常规地最经常使用的用于测定菌株的敏感度的商业测试。
将通过HCA而获得的结果与用该敏感度测试而获得的结果进行比较。
按照制造商的说明书来进行
Figure BDA0001596091850001283
测试。在将经标准化的Mac Farland 0.5接种物(108CFU/ml的等价物)涂铺在RPMI培养基平皿上之后，将所述平皿在35℃下温育24小时(除了光滑假丝酵母外，在该情况下将温育延长48小时)，以便能够测定最小抑制浓度(MIC)。
将所获得的MIC结果按照CLSI(Clinical and Laboratory StandardsInstitute)和/或EUCAST(European Committee on Antimicrobial SusceptibilityTesting)(Arendrup MC,Cuenca-Estrella M,
Figure BDA0001596091850001291
C,Hope WW(2014)Breakpointsfor antifungal agents:an update from EUCAST focussing on echinocandinsagainst Candida spp and triazoles against Aspergillus spp.Drug Resist Updat16(6):81-95.doi:10.1016/j.drup.2014.01.001)的表格(参见来自Maubon D,Garnaud C,Calandra T等人,(2014)Resistance of Candida spp.to antifungal drugs in theICU:where are we now？Intensive Care Med.doi:10.1007/s00134-014-3404-7的表2)(其列出了依照各种不同抗真菌剂的关于假丝酵母属的最寻常的酵母物种的临床阈值(CBP))，或者按照流行病学阈值(ECV)的表格来进行阐释。
因此，MIC使得能够测定菌株对于抗真菌剂的敏感度。CBP或临床阈值使得能够阐释该MIC，和预测在患者中的治疗失败。CBP使得能够建立下列分类类别：敏感的、中间的和抗性的。
如果MIC的值在敏感分类类别之中，那么治疗失败的概率是低的。该概率在中间分类类别或抗性分类类别中增加。
这些表格使得能够检测获得性抗性，其主要由于在患者中经历了药物压力的突变体的选择而产生。因此，它们是特异于菌株的，并且不应当与特异于物种的内在抗性相混淆。
表2：关于假丝酵母属物种的CLSI(Clinical and Laboratory StandardsInstitute)和/或EUCAST(European Committee on Antimicrobial SusceptibilityTesting)的表格的临床阈值(来源：Maubon D,Garnaud C,Calandra T等人,(2014)Resistance of Candida spp.to antifungal drugs in the ICU:where are we now？Intensive Care Med.doi:10.1007/s00134-014-3404-7)。ND：无数据；IP：准备中的数据；IE：不足的数据。
Figure BDA0001596091850001301
1主要基于药物代谢动力学数据来测定并且不依赖于物种的阈值。它们仅用于不具有特定阈值的生物。
2关于这些物种的阈值通常比关于白假丝酵母的阈值高。
3由于关于卡泊芬净的MIC的重大的实验室间变化，未建立EUCAST阈值。
4关于热带假丝酵母的MIC比关于白假丝酵母和光滑假丝酵母的MIC高1至2个稀释度。在临床研究中，在两种剂量(100和150mg/天)下，关于热带假丝酵母的治疗成功率比关于白假丝酵母的治疗成功率稍微更低。然而，差异不是显著的，并且该差异的临床相关性是未知的。关于克鲁斯假丝酵母的MIC比关于白假丝酵母的MIC高3个稀释度，和同样地，季氏假丝酵母的MIC比白假丝酵母的MIC高8个稀释度。此外，在临床试验中仅少量的病例涉及这些物种。所述数据不足以考虑，这些物种的野生种群可以被认为是对于米卡芬净敏感的。
5具有高于S/I阈值的MIC值的菌株是罕见的或者还未报道。应当重复对于这些分离物的鉴定和敏感度的测试，并且如果结果得到证实，那么应当将该分离物送至参考实验室。直至存在涉及关于以高于目前的抗性临床阈值(斜体的)的MIC而得到证实的分离物的临床应答的证据，应当将它们标示为抗性的。
实施例1：白假丝酵母SC5314菌株对于氟康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养白假丝酵母SC5314菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的氟康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和16μg/ml的最终的氟康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的氟康唑浓度：0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有氟康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种氟康唑浓度条件和没有氟康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图1中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照氟康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在氟康唑存在下在白假丝酵母SC5314菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下白假丝酵母SC5314菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的值的增加。
在这种情况下，对于每种氟康唑浓度条件和没有氟康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测定细胞数目。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图1中所显示的图的形式来呈现，其中虚线曲线表示依照氟康唑浓度的细胞数目的变化。
观察到依照在培养基中的氟康唑浓度的白假丝酵母SC5314菌株的细胞数目相对于在氟康唑不存在下在白假丝酵母SC5314菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的减少。
这些结果证明了白假丝酵母SC5314菌株对于氟康唑的敏感表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了0.125μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于氟康唑的小于2μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是敏感的。
实施例2：白假丝酵母SC5314菌株对于伏立康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养白假丝酵母SC5314菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的伏立康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和5μg/ml的最终的伏立康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的伏立康唑浓度：0.004μg/ml、0.009μg/ml、0.019μg/ml、0.039μg/ml、0.078μg/ml、0.156μg/ml、0.312μg/ml、0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有伏立康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种抗真菌剂浓度条件和没有抗真菌剂的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图2中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照伏立康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在伏立康唑存在下在白假丝酵母SC5314菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下白假丝酵母SC5314菌株的细胞的几丁质含量而言大于或等于20％的值的增加。
在这种情况下，对于每种伏立康唑浓度条件和没有伏立康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测定细胞数目。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图2中所显示的图的形式来呈现，其中虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的细胞数目的变化。
观察到依照在培养基中的伏立康唑浓度的白假丝酵母SC5314菌株的细胞数目相对于在伏立康唑不存在下在白假丝酵母SC5314菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的减少。
这些结果证明了白假丝酵母SC5314菌株对于伏立康唑的敏感表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了0.012μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于伏立康唑的小于0.12μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是敏感的。
实施例3：白假丝酵母DSY296菌株对于氟康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养白假丝酵母DSY296菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的氟康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和16μg/ml的最终的氟康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的氟康唑浓度：0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有氟康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种氟康唑浓度条件和没有氟康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图3中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照氟康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在氟康唑存在下在白假丝酵母DSY296菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下白假丝酵母DSY296菌株的细胞的几丁质含量而言小于20％的减少。
该结果证明了白假丝酵母DSY296菌株对于氟康唑的抗性表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了96μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于氟康唑的大于4μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是抗性的。
实施例4：白假丝酵母DSY296菌株对于伏立康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养白假丝酵母DSY296菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的伏立康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和5μg/ml的最终的伏立康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的伏立康唑浓度：0.004μg/ml、0.009μg/ml、0.019μg/ml、0.039μg/ml、0.078μg/ml、0.156μg/ml、0.312μg/ml、0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有伏立康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种伏立康唑浓度条件和没有伏立康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图4中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照伏立康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在伏立康唑存在下在白假丝酵母DSY296菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下白假丝酵母DSY296菌株的细胞的几丁质含量而言小于20％的减少。
该结果证明了白假丝酵母DSY296菌株对于伏立康唑的抗性表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了1μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于伏立康唑的分别大于0.12μg/ml和大于0.5μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是抗性的。
实施例5：白假丝酵母TOP菌株对于米卡芬净的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养白假丝酵母TOP菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的米卡芬净溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和1μg/ml的最终的米卡芬净浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的米卡芬净浓度：0.0009μg/ml、0.0019μg/ml、0.039μg/ml、0.007μg/ml、0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有米卡芬净的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种米卡芬净浓度条件和没有米卡芬净的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的条件进行平均并且以在图5中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照米卡芬净浓度的几丁质含量的变化。
观察到在米卡芬净存在下在白假丝酵母TOP菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下白假丝酵母TOP菌株的细胞的几丁质含量而言小于10％的增加。
该结果证明了白假丝酵母TOP菌株对于米卡芬净的抗性表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了1μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于米卡芬净的分别大于0.016μg/ml和大于0.5μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是抗性的。
实施例6：光滑假丝酵母Tg5菌株对于氟康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养光滑假丝酵母Tg5菌株，以便获得在15ml的RPMI培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在RPMI培养基中制备的氟康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和128μg/ml的最终的氟康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的氟康唑浓度：0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml、128μg/ml。
还通过添加2ml的RPMI培养基来制备没有氟康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在35℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种氟康唑浓度条件和没有氟康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图6中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照氟康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在氟康唑存在下在光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞的几丁质含量而言小于20％的减少。
该结果证明了光滑假丝酵母Tg5菌株对于氟康唑的抗性表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了大于256μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于氟康唑的大于32μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是抗性的。
实施例7：光滑假丝酵母Tg5菌株对于伏立康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养光滑假丝酵母Tg5菌株，以便获得在15ml的RPMI培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在RPMI培养基中制备的伏立康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和8μg/ml的最终的伏立康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的伏立康唑浓度：0.007μg/ml、0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml。
还通过添加2ml的RPMI培养基来制备没有伏立康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在35℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种伏立康唑浓度条件和没有伏立康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图7中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照伏立康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在伏立康唑存在下在光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下光滑假丝酵母Tg5菌株的细胞的几丁质含量而言小于20％的减少。
该结果证明了光滑假丝酵母Tg5菌株对于伏立康唑的抗性表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了8μg/ml的MIC，并且用EUCAST表格进行的阐释使得能够确定，以关于伏立康唑的大于0.5μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是抗性的。
实施例8：热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001391
7349菌株对于氟康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001392
7349菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的氟康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和16μg/ml的最终的氟康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的氟康唑浓度：0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有氟康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育24小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种氟康唑浓度条件和没有氟康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图8中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照氟康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在氟康唑存在下在热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001401
7349菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001402
7349菌株的细胞的几丁质含量而言大于或等于20％的值的增加。
在这种情况下，对于每种氟康唑浓度条件和没有氟康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测定细胞数目。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图8中所显示的图的形式来呈现，其中虚线曲线表示依照氟康唑浓度的细胞数目的变化。
观察到依照在培养基中的氟康唑浓度的热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001411
7349菌株的细胞数目相对于在氟康唑不存在下在热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001412
7349菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的减少。
这些结果证明了热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001413
7349菌株对于氟康唑的敏感表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了0.38μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于氟康唑的小于2μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是敏感的。
实施例9：热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001414
7349菌株对于伏立康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001415
7349菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的伏立康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和5μg/ml的最终的伏立康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的伏立康唑浓度：0.004μg/ml、0.009μg/ml、0.019μg/ml、0.039μg/ml、0.078μg/ml、0.156μg/ml、0.312μg/ml、0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有伏立康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种伏立康唑浓度条件和没有伏立康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的条件进行平均并且以在图9中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照伏立康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在伏立康唑存在下在热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001421
7349菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001422
7349菌株的细胞的几丁质含量而言大于或等于20％的值的增加。
在这种情况下，对于每种抗真菌剂浓度条件和没有抗真菌剂的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测定细胞数目。
将所获得的数据对于每种所测试的条件进行平均并且以在图9中所显示的图的形式来呈现，其中虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的细胞数目的变化。
观察到依照在培养基中的伏立康唑浓度的热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001423
7349菌株的细胞数目相对于在伏立康唑不存在下在热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001424
7349菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的减少。
这些结果证明了热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001425
7349菌株对于伏立康唑的敏感表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了0.023μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于伏立康唑的小于0.12μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是敏感的。
实施例10：热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001426
7349菌株对于米卡芬净的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001431
7349菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的米卡芬净溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和1μg/ml的最终的米卡芬净浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的米卡芬净浓度：0.0009μg/ml、0.019μg/ml、0.039μg/ml、0.007μg/ml、0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有米卡芬净的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种米卡芬净浓度条件和没有米卡芬净的一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图10中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照米卡芬净浓度的几丁质含量的变化。
观察到在米卡芬净存在下在热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001432
7349菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下细胞的几丁质含量而言大于或等于20％的值的增加。
在这种情况下，对于每种米卡芬净浓度条件和没有米卡芬净的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测定细胞数目。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图10中所显示的图的形式来呈现，其中虚线曲线表示依照米卡芬净浓度的细胞数目的变化。
观察到依照在培养基中的米卡芬净浓度的热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001441
7349菌株的细胞数目相对于在米卡芬净不存在下在细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的减少。
这些结果证明了热带假丝酵母
Figure BDA0001596091850001442
7349菌株对于米卡芬净的敏感表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了0.016μg/ml的MIC，并且用CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于米卡芬净的小于0.25μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是敏感的。
实施例11：热带假丝酵母13/5菌株对于米卡芬净的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养热带假丝酵母13/5菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的米卡芬净溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和1μg/ml的最终的米卡芬净浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的米卡芬净浓度：0.0009μg/ml、0.019μg/ml、0.039μg/ml、0.007μg/ml、0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有米卡芬净的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种米卡芬净浓度条件和没有米卡芬净的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图11中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照米卡芬净浓度的几丁质含量的变化。
观察到在米卡芬净存在下在热带假丝酵母13/5菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下热带假丝酵母13/5菌株的细胞的几丁质含量而言小于10％的增加。
该结果证明了热带假丝酵母13/5菌株对于米卡芬净的抗性表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了1.5μg/ml的MIC，并且用CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于米卡芬净的大于0.5μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是抗性的。
实施例12：近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001451
22019菌株对于氟康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001452
22019菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的氟康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和16μg/ml的最终的氟康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的氟康唑浓度：0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有氟康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种氟康唑浓度条件和没有氟康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图12中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照氟康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在氟康唑存在下在近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001461
22019菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001462
22019菌株的细胞的几丁质含量而言大于或等于20％的值的增加。
在这种情况下，对于每种氟康唑浓度条件和没有氟康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测定细胞数目。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图12中所显示的图的形式来呈现，其中虚线曲线表示依照氟康唑浓度的细胞数目的变化。
观察到依照在培养基中的氟康唑浓度的近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001463
22019菌株的细胞数目相对于在氟康唑不存在下在细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的减少。
这些结果证明了近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001464
22019菌株对于氟康唑的敏感表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了1μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于氟康唑的小于2μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是敏感的。
实施例13：近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001465
22019菌株对于伏立康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001471
22019菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的伏立康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和5μg/ml的最终的伏立康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的伏立康唑浓度：0.004μg/ml、0.009μg/ml、0.019μg/ml、0.039μg/ml、0.078μg/ml、0.156μg/ml、0.312μg/ml、0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有伏立康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种伏立康唑浓度条件和没有伏立康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图13中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照伏立康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在伏立康唑存在下在近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001472
22019菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001473
22019菌株的细胞的几丁质含量而言大于或等于20％的值的增加。
在这种情况下，对于每种伏立康唑浓度条件和没有伏立康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测定细胞数目。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图13中所显示的图的形式来呈现，其中虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的细胞数目的变化。
观察到依照在培养基中的抗真菌剂浓度的近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001481
22019菌株的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001482
22019菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的减少。
这些结果证明了近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001483
22019菌株对于伏立康唑的敏感表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了0.023μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于伏立康唑的小于0.12μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是敏感的。
实施例14：近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001484
22019菌株对于米卡芬净的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001485
22019菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的米卡芬净溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和1μg/ml的最终的米卡芬净浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的米卡芬净浓度：0.0009μg/ml、0.019μg/ml、0.039μg/ml、0.007μg/ml、0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有米卡芬净的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育24小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种米卡芬净浓度条件和没有米卡芬净的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图14中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照米卡芬净浓度的几丁质含量的变化。
观察到在米卡芬净存在下在近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001491
22019菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在米卡芬净不存在下近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001492
22019菌株的细胞的几丁质含量而言大于或等于20％的值的增加。
在这种情况下，对于每种米卡芬净浓度条件和没有米卡芬净的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测定细胞数目。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图14中所显示的图的形式来呈现，其中虚线曲线表示依照米卡芬净浓度的细胞数目的变化。
观察到依照在培养基中的米卡芬净浓度的近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001493
22019菌株的细胞数目相对于在米卡芬净不存在下在近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001494
22019菌株的细胞群中的细胞数目而言至少0.3log的减少。
这些结果证明了近平滑假丝酵母
Figure BDA0001596091850001495
22019菌株对于米卡芬净的敏感表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了0.19μg/ml的MIC，并且用CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于米卡芬净的小于2μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是敏感的。
实施例15：近平滑假丝酵母8/21菌株对于氟康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养近平滑假丝酵母8/21菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的氟康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和16μg/ml的最终的氟康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的氟康唑浓度：0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有氟康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种氟康唑浓度条件和没有氟康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图15中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照氟康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在氟康唑存在下在近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞的几丁质含量而言小于10％的增加。
该结果证明了近平滑假丝酵母8/21菌株对于氟康唑的抗性表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了8μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于氟康唑的大于4μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是抗性的。
实施例16：近平滑假丝酵母8/21菌株对于伏立康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养近平滑假丝酵母8/21菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的伏立康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和5μg/ml的最终的伏立康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的伏立康唑浓度：0.004μg/ml、0.009μg/ml、0.019μg/ml、0.039μg/ml、0.078μg/ml、0.156μg/ml、0.312μg/ml、0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有伏立康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种伏立康唑浓度条件和没有伏立康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图16中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照伏立康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在伏立康唑存在下在近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下近平滑假丝酵母8/21菌株的细胞的几丁质含量而言小于10％的增加。
该结果证明了近平滑假丝酵母8/21菌株对于伏立康唑的抗性表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果和用EUCAST表格进行的阐释(其确定，以关于伏立康唑的4μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是抗性的)而得到证实。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了4μg/ml的MIC，并且用EUCAST和CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于伏立康唑的分别大于0.12μg/ml和大于0.5μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是抗性的。
实施例17：克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001521
6258菌株对于氟康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001522
6258菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的氟康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和128μg/ml的最终的氟康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的氟康唑浓度：0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml、128μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有氟康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种氟康唑浓度条件和没有氟康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图17中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照氟康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在氟康唑存在下在克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001531
6258菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001532
6258菌株的细胞的几丁质含量而言小于10％的增加。
该结果证明了克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001533
6258菌株对于氟康唑的抗性表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了64μg/ml的MIC，并且用EUCAST表格进行的阐释使得能够确定，以关于氟康唑的大于32μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是抗性的。在该情况下，通过光滑假丝酵母的EUCAST和CLSI数据的外推来获得阐释。
实施例18：克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001534
6258菌株对于伏立康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001535
6258菌株，以便获得在15ml的RPMI培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在RPMI培养基中制备的伏立康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和8μg/ml的最终的伏立康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的伏立康唑浓度：0.007μg/ml、0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml。
还通过添加2ml的RPMI培养基来制备没有伏立康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育24小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种伏立康唑浓度条件和没有伏立康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图18中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照伏立康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在伏立康唑存在下在克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001541
6258菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001542
6258菌株的细胞的几丁质含量而言大于或等于20％的值的增加。
在这种情况下，对于每种伏立康唑浓度条件和没有伏立康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测定细胞数目。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图18中所显示的图的形式来呈现，其中虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的细胞数目的变化。
观察到依照在培养基中的抗真菌剂浓度的克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001543
6258菌株的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001544
6258菌株的细胞群中的细胞数目而言小于0.3log的减少。
该结果证明了克鲁斯假丝酵母
Figure BDA0001596091850001545
6258菌株对于伏立康唑的中间表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了1μg/ml的MIC，并且用CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于伏立康唑的等于1μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是中间的。
实施例19：克鲁斯假丝酵母GRE32菌株对于氟康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养克鲁斯假丝酵母GRE32菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在SC培养基中制备的氟康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和128μg/ml的最终的氟康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的氟康唑浓度：0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml、128μg/ml。
还通过添加2ml的SC培养基来制备没有氟康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育6.5小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种氟康唑浓度条件和没有氟康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图19中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照氟康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在氟康唑存在下在克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在氟康唑不存在下克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞的几丁质含量而言小于20％的减少。
该结果证明了克鲁斯假丝酵母GRE32菌株对于氟康唑的抗性表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了64μg/ml的MIC，并且用EUCAST表格进行的阐释使得能够确定，以关于氟康唑的大于32μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是抗性的。通过光滑假丝酵母的EUCAST和CLSI数据的外推来获得阐释。
实施例20：克鲁斯假丝酵母GRE32菌株对于伏立康唑的敏感度的测试
如在实施例部分的第I节中所描述的那样来培养克鲁斯假丝酵母GRE32菌株，以便获得在15ml的SC培养基中的具有3×106CFU/ml的接种物。
然后，将1ml的该接种物添加至2ml的在RPMI培养基中制备的伏立康唑溶液，以获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和8μg/ml的最终的伏立康唑浓度。
从接种物开始，进行相同的操作，以便获得具有106CFU/ml的培养物和下列的伏立康唑浓度：0.007μg/ml、0.015μg/ml、0.031μg/ml、0.062μg/ml、0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml。
还通过添加2ml的RPMI培养基来制备没有伏立康唑的对照。
在以200rpm进行搅动的情况下在30℃下温育24小时后，取100μl的每种培养物并转移到96-孔平板中。该操作以一式三份进行，并且然后向每个孔中添加2.5μl的CFW。
然后，对于每种伏立康唑浓度条件和没有伏立康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测量在酵母细胞壁中的几丁质含量。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图20中所显示的图的形式来呈现，其中实线曲线表示依照伏立康唑浓度的几丁质含量的变化。
观察到在伏立康唑存在下在克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞壁中的几丁质含量相对于在伏立康唑不存在下克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞的几丁质含量而言大于或等于20％的增加。
在这种情况下，对于每种伏立康唑浓度条件和没有伏立康唑的每个一式三份之一，如在实施例部分的第II节中所描述的那样，通过用高图像内容自动显微术(HCA)进行的分析来测定细胞数目。
将所获得的数据对于每种所测试的不同条件进行平均并且以在图20中所显示的图的形式来呈现，其中虚线曲线表示依照伏立康唑浓度的细胞数目的变化。
观察到依照在培养基中的伏立康唑浓度的克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞数目相对于在伏立康唑不存在下在克鲁斯假丝酵母GRE32菌株的细胞群中的细胞数目而言小于0.3log的减少。
这些结果证明了克鲁斯假丝酵母GRE32菌株对于伏立康唑的中间表型。
该结果通过经由Etest方法所获得的结果而得到证实。这是因为，用该方法获得了1μg/ml的MIC，并且用CLSI表格进行的阐释使得能够确定，以关于伏立康唑的等于1μg/ml的MIC，该菌株对于该抗真菌剂是中间的。
B-多细胞真菌的实施例
I-在抗真菌剂存在下的多细胞真菌培养
事先将多细胞真菌菌株在30℃下在酵母提取物-蛋白胨-右旋糖(YPD)培养基(1％的细菌用蛋白胨、0.5％的酵母提取物、2％的葡萄糖、1.5％的琼脂)中温育过夜。
然后，从YPD培养基平皿中取出多细胞真菌的分生孢子并且将其悬浮在具有0.9％NaCl的盐水溶液中，其中细胞浓度通过使用Kova Slide计数玻片经由光学显微术进行了评估。
根据真菌(其选自曲霉属、镰孢属、丝孢菌属、横梗霉属、根霉属、根毛霉属、毛霉属、拟青霉属这些属，和烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、构巢曲霉、土曲霉、腐皮镰孢、尖镰孢、尖端丝孢菌、多育丝孢菌、总状毛霉、伞房横梗霉、米根霉、微小根毛霉这些物种)，在pH 7的合成完全(SC)培养基(2％的葡萄糖、0.5％的硫酸铵、0.17％的酵母含氮碱、0.2％的完全合成混合物和10％的1.5M HEPES pH 7.2)或RPMI培养基中进行稀释，从而获得具有106CFU/ml的最终接种物，以便获得106CFU/ml的最终的酵母浓度和按照表3的所希望的抗真菌剂浓度。
表3：氟康唑、泊沙康唑、伏立康唑、伊曲康唑、艾莎康唑(关于唑类类别)以及米卡芬净、阿尼芬净和卡泊芬净(关于棘白菌素类类别)以及两性霉素B和制霉菌素(关于多烯类类别)的浓度梯度(μg/ml)，对于多细胞真菌物种而言。
Figure BDA0001596091850001581
在均质化后，将培养物置于30℃在200rpm下，并且温育4小时、6小时或24小时的持续时间。
II-用高图像内容自动显微术(HCA)来进行分析
在温育后，将上面获得的真菌培养物以一式三份转移到96-孔平板中，并且在每个孔中添加2.5μl的钙荧光白(CFW)以便对分生孢子和萌发营养菌丝的细胞壁的几丁质进行标记。
通过使用x40物镜和关于CFW的滤镜经由自动荧光显微术(ScanR筛选站,Olympus)来获取图像的步骤使得能够获得30幅图像/孔，以便捕捉足够的分生孢子和萌发营养菌丝以进行萌发菌丝的长度和产生出萌发菌丝的分生孢子的比例的测量。通过ScanR分析软件(Olympus)这一软件来进行这些图像的分析。首先进行背景噪声的处理以便改善分生孢子和萌发菌丝的荧光与背景噪声之间的对比度。在这种情况下，定义像素阈值。然后，进行在每幅所获取的图像上存在的荧光元素的分割，这借助于使得能够基于每个元素的荧光强度来确定该元素的界限的在软件中预先规定的算法。然后，应用大小参数以选择分生孢子以及萌发菌丝并且测量这些萌发菌丝的长度。
由于在这种情况下，每个元素相应于一个分生孢子或萌发菌丝，因此可能的是从这些前面定义的元素开始，确定关于每个这些元素的相关于其面积的荧光强度，该强度与其壁的几丁质含量直接相关。
然后，通过软件(GraphPad Prism)来处理这些数据，以便对于每个“多细胞真菌菌株/抗真菌剂”对，提供依照抗真菌剂浓度的分生孢子和营养菌丝的壁的几丁质含量的变化以及营养菌丝的长度的变化的图示。
当观察到相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌的细胞群的几丁质含量而言小于10％的值的几丁质含量的增加或者小于20％的几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量时，该菌株具有抗性表型。
当观察到相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌的细胞群的几丁质含量而言从10％的值至小于20％的值的几丁质含量的增加时，该菌株具有中间表型。
当观察到相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加，以及相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌的细胞群中的萌发菌丝长度而言小于10％的萌发菌丝长度的减少或者不变的萌发菌丝长度时，该菌株具有中间表型。
当观察到相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20％的几丁质含量的增加，以及相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌的细胞群中的细胞数目而言至少10％的萌发菌丝长度的减少时，该菌株具有敏感表型。
为了测定真菌菌株的敏感度而考虑除细胞计数之外的其他参数构成了本发明的独创性，相对于基于测量真菌生长的现有测试(其易受阅读者主观性的影响)而言。
III-通过由Biomérieux商业化的比较的
Figure BDA0001596091850001601
方法来进行分析
Figure BDA0001596091850001602
方法是在真菌学临床实验室中常规地最经常使用的用于测定菌株的敏感度的商业测试。
将通过HCA而获得的结果与用该敏感度测试而获得的结果进行比较。
按照制造商的说明书来进行
Figure BDA0001596091850001603
测试。在将经标准化的Mac Farland 0.5接种物(108CFU/ml的等价物)涂铺在RPMI培养基平皿上之后，将所述平皿在35℃下温育24小时，以便能够测定最小抑制浓度(MIC)。
将所获得的MIC结果按照EUCAST(European Committee on AntimicrobialSusceptibility Testing http://www.eucast.org/fileadmin/src/media/PDFs/EUCAST_files/AFST/Clinical_breakpoints/Antifungal_breakpoints_v_8.0_November_2015.pdf)的表格(其列出了依照各种不同抗真菌剂的关于曲霉属的最寻常的多细胞真菌物种的临床阈值(CBP))来进行阐释。对于其他多细胞真菌的属(包括镰孢属、丝孢菌属、横梗霉属、根霉属、根毛霉属、毛霉属、拟青霉属)，不存在阐释标准。
因此，MIC使得能够测定菌株对于抗真菌剂的敏感度。CBP或临床阈值使得能够阐释该MIC，和预测在患者中的治疗失败。CBP使得能够建立下列分类类别：敏感的、中间的和抗性的。
如果MIC的值在敏感分类类别之中，那么治疗失败的概率是低的。该概率在中间分类类别或抗性分类类别中增加。
这些表格使得能够检测获得性抗性，其主要由于在患者中经历了药物压力的突变体的选择而产生。因此，它们是特异于菌株的，并且不应当与特异于物种的内在抗性相混淆。

Claims (18)

1.用于测定能够被钙荧光白（Calcofluor White）染色的真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法包括测定在所述抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群的细胞壁的几丁质含量相对于在所述抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的细胞壁的几丁质含量而言的可能变化的步骤，
其中当所述真菌菌株具有针对所述抗真菌剂的敏感表型时，所述抗真菌剂能够引起壁胁迫，所述壁胁迫导致所述细胞群的细胞壁的几丁质的积累，以补偿所述抗真菌剂引起的损害，并且其中所述抗真菌剂选自没有多烯类且没有对于几丁质具有直接作用的抗真菌剂的抗真菌剂的组，
其中所述敏感性程度相应于敏感表型、抗性表型或中间表型，其中所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括下列步骤：
a. 使所述真菌菌株的细胞与从0.0009至130 μg/ml变化的所述抗真菌剂的浓度梯度在30至35℃的温度下相接触少于或等于48小时的持续时间，从而获得所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
b. 向前面获得的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中添加荧光标记物钙荧光白，从而获得经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物的步骤；
c. 通过高图像内容自动荧光显微术来对在前一个步骤中获得的混合物之中的经标记的所述真菌菌株的细胞的几丁质含量进行定量的步骤；
d. 测定在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中，依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤；
并且在所述几丁质含量的可能变化为大于或等于20%的几丁质含量的增加的情况下，在上述步骤d之后接着为下列步骤
e. 对在经钙荧光白标记的所述真菌菌株的细胞与抗真菌剂的混合物中的细胞进行计数的步骤；然后
f. 测定依照抗真菌剂浓度，在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言的可能变化的步骤；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为小于10%的几丁质含量的增加或者小于20%的几丁质含量的减少时，推断所述真菌菌株具有抗性表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为10%至小于20%的值的增加时，推断所述真菌菌株具有中间表型；
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20%的值的增加并且上述步骤f的所述细胞数目的变化为小于0.3 log的减少时，推断所述真菌菌株具有中间表型；和
当上述步骤d的所述几丁质含量的变化为大于或等于20%的值的增加并且所述细胞数目的变化为至少0.3 log的减少时，推断所述真菌菌株具有敏感表型。
2.根据权利要求1的方法，其中所述抗真菌剂选自包括下列各项或由下列各项组成的组：唑类抗真菌剂或其他抑制麦角固醇合成的分子。
3.根据权利要求1或2的方法，其中在步骤a中，所述接触步骤是6.5小时至24小时的持续时间。
4.根据权利要求1或2的用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述真菌为单细胞真菌，所述方法包括测定在抗真菌剂存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化的步骤，和测定在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的所述细胞群中的细胞数目的可能变化的步骤，所述细胞数目的变化相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的细胞数目而言来进行测定。
5. 根据权利要求1或2的用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法：
- 其中所述敏感性程度相应于抗性表型，并且所述方法包括测定在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的可能变化的步骤，所述可能变化为相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言小于10%的几丁质含量的增加或者几丁质含量的减少或者不变的几丁质含量，并且其中在所述真菌菌株的所述细胞群中表现出几丁质含量增加的细胞的最小阈值为至少10%；或者
- 其中所述敏感性程度相应于中间表型，并且所述方法包括：
要么测定在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的变化的步骤，所述变化为（1）相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言10%至小于20%的值的几丁质含量的增加，
要么测定在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的变化的步骤，所述变化为（2）相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20%的几丁质含量的增加，和测定在抗真菌剂存在下所述真菌菌株的细胞数目的可能变化的步骤，所述变化为相对于在抗真菌剂不存在下在所述真菌菌株的细胞群中的细胞数目而言小于0.3 log的细胞数目的减少或者不变的细胞数目，并且对于（1）和（2）二者，其中在所述真菌菌株的所述细胞群中表现出几丁质含量增加的细胞的最小阈值为至少10%，和任选地，其中在所述真菌菌株的所述细胞群中细胞数目减少的最小阈值为至少0.3 log；或者
- 其中所述敏感性程度相应于敏感表型，并且所述方法包括测定在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量的变化的步骤，所述变化为相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言大于或等于20%的几丁质含量的增加，和测定在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的所述细胞群中的细胞数目的变化的步骤，所述变化为相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的细胞数目而言至少0.3 log的细胞数目的减少，并且其中在所述真菌菌株的所述细胞群中表现出几丁质含量增加的细胞的最小阈值为至少10%，和其中在所述真菌菌株的所述细胞群中细胞数目减少的最小阈值为至少0.3 log。
6. 根据权利要求5的方法，其中在所述真菌菌株的所述细胞群中细胞数目减少的最小阈值为0.4 log、0.5 log、0.6 log、0.7 log、0.8 log、0.9 log、1 log、1.1 log、1.2 log、1.3 log、1.4 log、1.5 log、1.6 log、1.7 log、1.8 log、1.9 log、2 log、2.1 log、2.2log、2.3 log、2.4 log、2.5 log、2.6 log、2.7 log、2.8 log、2.9 log、3 log。
7.根据权利要求1或2的用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中在抗真菌剂存在下在所述真菌菌株的细胞群中的几丁质含量相对于在抗真菌剂不存在下所述真菌菌株的细胞群的几丁质含量而言的可能变化通过荧光方法来进行测定，并且所述方法包括对所述真菌菌株的细胞进行荧光标记的步骤，其使得能够测定几丁质含量的可能变化，所述对所述真菌菌株的细胞进行荧光标记的步骤借助于钙荧光白来进行。
8.根据权利要求7的方法，其中荧光方法是荧光显微术方法。
9.根据权利要求7的方法，其中荧光方法是高图像内容自动显微术。
10.根据权利要求1的方法，其中所述多烯类是两性霉素B或制霉菌素。
11.根据权利要求2的方法，其中所述唑类抗真菌剂是氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑或艾莎康唑。
12.根据权利要求2的方法，其中所述其他抑制麦角固醇合成的分子是烯丙胺类。
13.根据权利要求12的方法，其中所述烯丙胺类是特比萘芬。
14.根据权利要求2的方法，其中所述其他抑制麦角固醇合成的分子是吗啉类。
15.根据权利要求1或2的用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，其中所述单细胞真菌为酵母，并且其中酵母的细胞群选自包括下列属或由下列属组成的组：假丝酵母属（Candida）、隐球酵母属（Cryptococcus）、糖酵母属（Saccharomyces）、丝孢酵母属（Trichosporon）、红酵母属（Rhodotorula）、鳞斑霉属（Malassezia）。
16. 根据权利要求15的方法，其中假丝酵母属的酵母的细胞群选自包括下列物种或由下列物种组成的组：白假丝酵母（Candida albicans）、光滑假丝酵母（C. glabrata）、热带假丝酵母（C. tropicalis）、近平滑假丝酵母（C. parapsilosis）、克鲁斯假丝酵母（C. krusei）、都柏林假丝酵母（C. dubliniensis）、乳酒假丝酵母（C. kefyr）、葡萄牙假丝酵母（C. lusitaniae）、涎沫假丝酵母（C. zeylanoides）、皱落假丝酵母（C. rugosa）、平常假丝酵母（C. inconspicua）、挪威假丝酵母（C. norvegensis）、季氏假丝酵母（C. guilliermondii）、产朊假丝酵母（C. utilis）。
17.根据权利要求1或2的用于测定真菌菌株的细胞群对于抗真菌剂的敏感性程度的方法，所述方法在测定几丁质含量的可能变化的步骤之前包括使所述抗真菌剂与所述真菌菌株的细胞相接触的步骤，所述接触步骤少于或等于48小时，并且其中所述接触步骤在30至35℃的温度下进行。
18.根据权利要求17的方法，其中所述接触步骤是6.5小时至24小时的持续时间。
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