CN107966427A - 一种土壤中Cu2+含量的检测方法 - Google Patents

一种土壤中Cu2+含量的检测方法 Download PDF

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王泽�
朱柏
李群辉
程浩
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Abstract

本发明提供了一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：取无水甲醇，加入2,5‑二甲氧基对苯二甲醛和4‑氨基‑2,6‑二‑叔丁基苯酚，在氮气保护下回流直到大量的黄色固体析出；趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系中，加入黄色产物A和氰化钾后，加入Cu2+，测荧光强度；同时作出荧光强度和Cu2+浓度的关系图；在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系中，加入黄色产物A和氰化钾后，加入土壤，测荧光强度；根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。本方法能够较为精确地测出土壤中Cu2+的含量，灵敏度高，针对性强，方法简单。

Description

一种土壤中Cu2+含量的检测方法
技术领域
本发明具体涉及一种土壤中Cu2+含量的检测方法。
背景技术
随着工业化进程的不断加快，矿产资源的不合理开采及其冶炼排放、长期对土壤进行污水灌溉和污泥施用、人为活动引起的大气沉降、化肥和农药的施用等原因，造成了土壤污染严重。尤其是土壤中的重金属离子，非常容易在动植物体内富集。最后进入到人体内，对人体造成极大的伤害，因此，对于土壤中重金属离子的检测，继而对其进行修复，是一项重大的责任，对于人类的可持续发展具有重要的意义。
发明内容
要解决的技术问题：本申请的目的是提供一种土壤中Cu2+含量的检测方法，能够较为精确地测出土壤中Cu2+的含量，灵敏度高，针对性强，方法简单。
技术方案：为了解决上述技术问题，本发明提供了一种土壤中Cu2+含量的检测方法，本发明的技术方案为：
一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol 2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol 4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，分别加入不同浓度的Cu2+，在0～15min内，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。
进一步的，步骤(3)中Cu2+浓度分别为1eq、2eq、3eq、4eq、5eq、6eq、7eq、8eq、9eq和10eq。
进一步的，步骤(4)中Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM。
有益效果：本发明的一种土壤中Cu2+含量的检测方法能够较为精确地测出土壤中Cu2+的含量，灵敏度高，针对性强，方法简单。
附图说明
图1为磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系中黄色产物A(1μM)在不同浓度Cu2+存在下其最大发射波长439nm处荧光强度随时间的变化图。
图2为黄色产物A在439nm处的荧光强度与铜离子浓度的线性关系。
具体实施方式
实施例1
一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol 2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol 4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1eq的Cu2+，在4min下，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。
荧光强度和Cu2+浓度的关系为Y＝60.74+72.83X，R＝0.9973(如图2)
实施例2
一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol 2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol 4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入2eq的Cu2+，在8min下，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。
实施例3
一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol 2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol 4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入3eq的Cu2+，在4min下，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。
实施例4
一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol 2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol 4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入4eq的Cu2+，在8min下，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。
实施例5
一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol 2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol 4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入5eq的Cu2+，在12min下，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。
实施例6
一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol 2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol 4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入6eq的Cu2+，在16min下，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。
实施例7
一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol 2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol 4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入7eq的Cu2+，在4min下，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。
实施例8
一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol 2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol 4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入8eq的Cu2+，在8min下，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。
实施例9
一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol 2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol 4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入9eq的Cu2+，在12min下，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。
实施例10
一种土壤中Cu2+含量的检测方法，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol 2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol 4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入10eq的Cu2+，在16min下，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。

Claims (3)

1.一种土壤中Cu2+含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取无水甲醇400ml，加入50mmol2,5-二甲氧基对苯二甲醛和125mmol4-氨基-2,6-二-叔丁基苯酚，在氮气保护下回流2～3h直到大量的黄色固体析出；
(2)趁热过滤掉溶液，得到的粗产品用无水甲醇重结晶，得黄色产物A；
(3)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，分别加入不同浓度的Cu2+，在0～15min内，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(4)同时作出荧光强度和Cu2+浓度的关系图；
(5)在磷酸盐缓冲液/乙腈混合体系(pH＝7.4，v/v,1:2)中，加入1μM黄色产物A和10μM氰化钾后，以375nm为激发光，加入1g土壤，在最大发射波长439nm处测荧光强度；
(6)根据荧光强度和Cu2+浓度的关系计算出土壤中Cu2+的含量。
2.如权利要求1所述的一种土壤中Cu2+含量的检测方法，其特征在于：所述步骤(3)中Cu2+浓度分别为1eq、2eq、3eq、4eq、5eq、6eq、7eq、8eq、9eq和10eq。
3.如权利要求1所述的一种土壤中Cu2+含量的检测方法，其特征在于：所述步骤(4)中Cu2+浓度为3μM、4μM、5μM和6μM。
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