CN107721614A - 一种桃树专用有机肥及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种桃树专用有机肥的制备方法，包括将瞿麦和桃树枝叶分别粉碎；将培养植物病原真菌；离心分离得到植物病原真菌沉淀和植物病原真菌发酵液；将植物病原真菌沉淀、瞿麦、桃树枝叶和EM菌进行混合，然后加水使含水量达到50‑65％，室外堆肥30‑45天，期间每7‑10天翻动一次，得到有机固体肥料；将植物病原真菌发酵液减压浓缩至原体积的1/3，加1％体积的枯草芽孢杆菌发酵30‑45天，得到有机叶面肥。使用时，桃树花前地下树盘施用有机固体肥料，地上叶面喷施有机叶面肥，可增加大桃可溶性固形物含量，同时能明显提高桃储藏期。本产品无毒害，无残留，解决废弃物污染问题，使用方便，用量小，持效期长。

Description

一种桃树专用有机肥及其制备方法
技术领域
本发明属于农业技术领域，涉及一种果树专用肥料，具体涉及一种桃树专用有机肥及其制备方法。
背景技术
桃树根系浅，要求土壤有较好的通气性，桃树在生长过程中遭受多种病虫害侵袭，一方面与桃园管理和当地自然环境有关，另一方面与树势弱有关。有机果品在世界范围迅速发展，有机桃发展迅速，但有机桃生产中协调营养生长与生殖生长过程中不使用化肥而达到桃树对营养需求方面的产品少。有机肥可以使桃树树势健壮，产量增加，但有机肥的分解和养分释放受多种环境因子制约，有效性难以预测和控制，一般不能与桃树的需肥规律相吻合。高品质桃生产需要各种营养的协调及大量蛋白质供应。
真菌发酵菌丝含有大量蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、氨基酸和各种微量元素，高者蛋白质含量可达40％以上，含有天门冬氨酸、谷氨酸和赖氨酸等氨基酸，并含有Zn、Fe、Mg、K、Ca等多种矿质元素。植物病原真菌核盘菌属(Sclerotinia)、链核盘菌属(Monilinia)、葡萄座腔菌属(Botryosphaeria)、丝核属(Rhizoctonia)和小菌核属(Sclerotium)为桃树栽培过程中易发生的病害。用上述病原真菌发酵产物用于桃树生产可以使桃树产生免疫作用。
植物免疫诱抗剂(或植物疫苗)是继人用疫苗、动物疫苗后的植物免疫。本发明以植物病原真菌核盘菌属(Sclerotinia)、链核盘菌属(Monilinia)、葡萄座腔菌属(Botryosphaeria)、丝核属(Rhizoctonia)和小菌核属(Sclerotium)中的真菌发酵，产生大量菌丝蛋白，蛋白直接再发酵生产桃树专用有机肥，发酵液作为叶面喷肥，在桃树花前直接在桃树喷洒，能达到提高桃树可溶性固形物含量，提高桃品质。
根据申请人所作的资料检索发现，目前在桃树专用肥的研发过程中主要有以下研究和应用。公开号CN106045784A发明一种桃树专用肥，由尿素磷酸氢二铵，硫酸钾，硫酸锌，硼砂，鸡粪，猪粪，牛粪，EM菌剂组成，施用该肥料后，桃的产量得到了提高，甜度、口感也得到了提升。公开号CN104446841A、CN103664273A、CN104355753A、CN105418214A、CN102267827A、CN105924305A等是由以下元素中的几种成分混合或发酵，包括：尿素、蚕粪、小麦麸、废糖蜜、硫酸锰、硫酸铜、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯苯胍、钼盐、黄腐酸钾、土壤营养剂、五风草、烟杆粉、棕树根、刺梨根、藕节、芽孢杆菌、尿素、残羹剩饭、沼泽污泥、白菜烂根、玉米粉、蚕豆壳、风化煤、矿物磷肥、肿柄菊、小麦秸、生石灰、鸡粪、牛粪、碳酰胺、猪粪、羊粪、鸭粪、茅草粉、花生饼粉、果树复合肥、干大粪、苦草粉、杀菌剂、增产素、乐果、酒槽、食用菌渣、棉籽饼、发酵菌、三元复合肥、硼砂、磷灰石、食用菌菌糠、长石、改性植物秸秆、添加剂、吸肥基质、豆籽饼、菜籽饼、棉籽、木质素、生物质炭、山核桃蒲壳发酵粉、黄腐酸钾、腐殖酸铵等。公开号CN105272499A发明的一种桃树专用有机无机复混肥，由预备吸释肥基质料、预备保肥基质料、预备亲肥基质料、预备亲根有机肥料、混料、检验、配方、预备大量元素无机肥料、复混、造粒共十大步骤完成。
纵观上述专利，大都是以各种成分进行混配，而将植物病原真菌发酵产物作为基本成分，与中药瞿麦和桃树(修剪)残枝落叶二次发酵制备高蛋白有机肥用于桃树提高可溶性固形物含量和提高贮藏期的专利和产品未见公开报道。
发明内容
针对上述问题，本发明的目的在于提供了一种桃树专用有机肥的制备方法，该制备方法利用植物病原真菌发酵物作为主要原料，通过添加瞿麦、桃树枝叶和EM菌制成高蛋白有机肥。
本发明的另一目的在于提供了上述制备方法制备的桃树专用有机肥。
为了实现上述目的，本发明提供一种桃树专用有机肥，包括如下步骤：
1)将瞿麦和桃树枝叶分别粉碎至2cm以下，备用；
2)将物病原真菌种到PD培养基中，25-28℃，150-180r/min，培养72-84h，得培养液；
3)将培养液2000-2500r/min离心10-15min，分离得到植物病原真菌沉淀和植物病原真菌发酵液；
4)将植物病原真菌沉淀、瞿麦、桃树枝叶和EM菌按照体积百分比为：植物病原真菌沉淀：瞿麦：桃树枝叶：EM菌＝20-100：20-100：20-100：1-4进行混合，然后加水使含水量达到50-65％，室外堆肥30-45天，期间每7-10天翻动一次，得到有机固体肥料；
5)将植物病原真菌发酵液减压浓缩至原体积的1/3，加1％体积的枯草芽孢杆菌，28-35℃，发酵30-45天，得到有机叶面肥。
其中，所述桃树枝叶为桃树修剪后的残枝落叶。
使用桃树自身修剪的残枝落叶可使经植物病原真菌发酵后产生的免疫抗性物质更容易使桃树本身发生免疫作用。
其中，所述植物病原真菌为核盘菌属(Sclerotinia)、链核盘菌属(Monilinia)、葡萄座腔菌属(Botryosphaeria)、丝核属(Rhizoctonia)或小菌核属(Sclerotium)真菌中的任一种。
上述植物病原真菌包括但不限于：大蒜菌核病菌(Sclerotinia allii Saw.)、桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)、苹果轮纹病(Botryosphaeria dothidea)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、油莱菌核病菌(Sclerotinia clerotiorum(Lib)deBary)。上述真菌都可以自相应病害植物中分离得到。
其中，所述PD培养基制备方法为：取300g去皮土豆加1000mL蒸馏水煮烂至成泥，四层纱布过滤，蒸馏水补足至1000mL，然后加入20g葡萄糖，115℃灭菌20min。
其中，所述植物病原真菌为植物病原真菌菌丝块或植物病原真菌孢子悬浮液。
优选地，所述植物病原真菌菌丝块的制备方法为：将植物病原真菌接种到PDA平板培养基中，25-28℃，培养72-84h。
优选地，所述植物病原真菌孢子悬浮液的制备方法为：将植物病原真菌接种到PDA平板培养基中，25-28℃，培养72-84h，然后用5mL无菌水冲洗菌落表面，用涂布棒轻刮菌落表面以刮取剩余孢子，将剩余孢子加入到冲洗液中，用双层无菌擦镜纸过滤，滤液即为植物病原真菌孢子悬浮液。
其中，所述PDA平板培养基的制备方法为：取300g去皮土豆加1000mL蒸馏水煮烂至成泥，四层纱布过滤，蒸馏水补足至1000mL，然后加入20g葡萄糖，15g琼脂，115℃灭菌20min，倒平板，冷却至室温。
本发明还提供一种上述的制备方法制备的桃树专用有机肥。
该桃树专用有机肥由有机固体肥料和有机叶面肥两部分组成，并配合使用。
本发明还提供上述桃树专用有机肥的施用方法，使用时，所述桃树专用有机肥中的有机固体肥料在桃花前树盘穴施50-100斤/棵桃树，有机叶面肥稀释100-500倍，每间隔2个月叶面喷施一次，即可。
植物病原真菌核盘菌属(Sclerotinia)、链核盘菌属(Monilinia)、葡萄座腔菌属(Botryosphaeria)、丝核属(Rhizoctonia)和小菌核属(Sclerotium)为桃树栽培过程中易发生的病害，使用上述病原真菌发酵桃树枝叶，发酵产物中可以产生植物免疫诱抗物质，当桃树接触到上述发酵产物，能够通过调节自身防卫和代谢系统产生免疫反应，这种防御反应或免疫抗性反应，可使植物延迟或减轻病害的发生和发展，减少化学农药与化学肥料的使用量，具有提高农作物抗性和有效防控农作物病害的能力，同时延长果实储藏期。
反应中添加EM菌，发酵后期EM菌作为优势菌继续发酵，植物病原真菌则被EM菌作为原料使得病原微生物死亡从而不会危害桃树的健康。
中药瞿麦具有清热解毒的作用，其中的粗蛋白质量高，还含磷酸、维生素A类物质，此外含大黄素甲醚、大黄素、3,4-二羟基苯甲酸甲酯、3-(3,4-二羟基苯基)丙酸甲酯、谷甾醇苷和大黄素-8-O-葡萄糖苷，兼有防治作物病虫害的作用。瞿麦生长迅速，可通过桃树间作获得。
本发明提供的桃树专用有机肥通过固、液肥料配合使用，具有防病虫、增产和增加桃可溶性固形物含量作用，增加80％以上，同时微生物真菌特种发酵物能通过与桃树表面蛋白受体的互作，诱导植物信息传导，启动植物体内一系列代谢反应，诱导和激活植物自身防卫系统和生长系统，从而产生对病虫害的抗性，促进植物生长，同时，桃的可溶性固形物明显提高，延长储藏期15-20天。
本发明生产工艺简单，成本较低，持效期长，可广泛用于桃树高效、优质、果品生产。同时对白粉病、灰霉病、炭疽病、霜霉病、疫霉病、褐腐病、软腐病等经济作物病害具有良好的防治效果，不引起病虫害的抗药性，在植物体内和土壤中易分解，无残留，使用该有机肥可取得良好的经济、社会和生态效益。
附图说明
图1为桃褐腐病菌的液体发酵示意图。
图2为苹果轮纹病菌的液体发酵示意图。
具体实施方式
为了充分了解本发明，在下文将举例较佳实施例并配合所附附图作详细说明，且其并非用以限定本发明。
实施例所用桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)菌株采集自北京市平谷区刘家店镇桃产区。
苹果轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)菌株采集自陕西礼泉县苹果产区。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)购买自上海北诺生物科技有限公司。
EM菌购买自徐州森田生物科技有限公司。
桃树枝叶为桃产区桃树修剪后的残枝落叶。
瞿麦为在北京市平谷区刘家店镇桃产区间作获得。
配制PDA平板培养基：称取300g去皮土豆加1000mL蒸馏水煮烂至成泥，四层纱布过滤，蒸馏水补足至1000mL，然后加入20g葡萄糖，15g琼脂，115℃灭菌20min，16-20mL倒一平板，冷却至室温，得PDA培养基平板。
配制PD培养基：称取300g去皮土豆加1000mL蒸馏水煮烂至成泥，四层纱布过滤，蒸馏水补足至1000mL，然后加入20g葡萄糖，115℃灭菌20min，冷却至室温，得PD培养基。
枯草芽孢杆菌(菌液)的制备方法为：将枯草芽孢杆菌接种到LB培养基中，37℃培养24h，摇床200rpm，即可。
实施例1：
将桃褐腐病菌接种至PDA培养基平板，28℃培养72h。取生长旺盛的桃褐腐病菌，用无菌水5ml冲洗菌落表面，收集冲洗液，用涂布棒轻刮菌落表面，用涂布棒轻刮菌落表面以刮取剩余孢子，将剩余孢子加入到冲洗液中，双层无菌擦镜纸过滤，滤液即为桃褐腐病菌孢子悬浮液。接种5mL桃褐腐病菌到PD培养基中，28℃，180r/min摇床培养72h，得桃褐腐病菌发酵物，如图1所示，2000r/min离心10min，分别得沉淀和发酵液。按沉淀：瞿麦：桃树(修剪)残枝落叶：EM菌(体积百分比)＝30：40：65：2混合均匀，以手攥成团，落地散开(加水至原料含水60％左右)，室外堆肥35天，期间每8天翻动一次，得微生物真菌高蛋白有机固体肥料。发酵液减压浓缩至原体积的1/3，按1％加入枯草芽孢杆菌，自然发酵36天，包装，即为桃树叶面喷肥用。
实施例2：
无菌操作苹果轮纹病菌接种至PDA培养基平板，28℃培养84h。切取生长旺盛的苹果轮纹病菌菌饼(菌丝块直径5mm)接种到PD培养基中，28℃，180r/min，培养84h，得苹果轮纹病菌发酵物，如图2所示。2200r/min离心15min，分别得沉淀和发酵液。按体积百分比，将沉淀：瞿麦：桃树(修剪)残枝落叶：EM菌＝25：100：25：3混合，以手攥成团，落地散开为标准加水至含水量63％。室外堆肥32天，期间每7天翻动一次，得微生物真菌高蛋白有机固体肥料。滤液减压浓缩至原体积的1/3，按1％加入枯草芽孢杆菌，自然发酵30天，包装，即为桃树有机叶面肥。
实施例3：
试验于2016年3月～2016年10月在北京市平谷区刘家店镇进行，桃品种为“久保”，树龄为8a，株行距3m×4m，试验设3个处理，5次重复。处理1为本实施例1制备的有机肥，即花前树盘施入固体基肥60斤/棵，同时发酵液稀释200倍叶面喷肥，喷洒量为200kg/亩，每2个月喷洒一次，处理2为对照，即花前树盘施入普通有机肥60斤/棵，同时叶面喷商品叶面肥(含多种氨基酸、多种微量元素、大量元素、腐植酸、稀土元素、抗病毒剂、核苷酸、甲壳胺、渗透剂、表面活性剂)，喷洒量为200kg/亩，每2个月喷洒一次。处理组的其它各项田间管理措施均一致。2016年7月25日果实成熟时统一采收，选取每株树的东西南北中各部位共5个方向上具有代表性的无病虫害的果实供测定，可溶性固形物含量采用GX-1测糖仪测定，果实贮藏性：将100个果实放于冰箱冷藏室(温度保持在3℃)进行定期观察，8.15日计算烂果率，见表1。
表1实施例1对桃可溶性固形物和贮藏的影响
实施例4：
试验于2017年2月～2017年10月在北京市平谷区刘家店镇进行，桃品种为“京玉”，树龄为6a，株行距3m×4m，试验设3个处理，5次重复。处理1为实施例2制备的有机肥，即花前树盘施入固体基肥70斤/棵，同时发酵液稀释300倍叶面喷肥，喷洒量为200kg/亩，每2个月喷洒一次；处理2为花前树盘施入普通有机肥70斤/棵，同时叶面喷商品叶面肥(含多种氨基酸、多种微量元素、大量元素、腐植酸、稀土元素、抗病毒剂、核苷酸、甲壳胺、渗透剂、表面活性剂)喷洒量为200kg/亩，每2个月喷洒一次。处理组的其它各项田间管理措施均一致。2017年8月9日果实成熟时统一采收，选取每株树的东西南北中各部位共5个方向上具有代表性的无病虫害的果实供测定，可溶性固形物含量采用GX-1测糖仪测定，果实贮藏性：将100个果实放于冰箱冷藏室(温度保持在2℃)进行定期观察，9.9日计算烂果率，见表2。
表2实施例2对桃可溶性固形物和贮藏的影响
从上述实施例可以看出，本发明提供的桃树专用有机肥及其制备方法，固、液肥料配合使用，具有防病虫、增产和增加桃可溶性固形物含量作用，同时微生物真菌特种发酵物能通过与桃树表面蛋白受体的互作，诱导植物信息传导，启动植物体内一系列代谢反应，诱导和激活植物自身防卫系统和生长系统，从而产生对病虫害的抗性，促进植物生长，同时，桃的可溶性固形物明显提高，延长储藏期。

Claims (10)

1.一种桃树专用有机肥的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)将瞿麦和桃树枝叶分别粉碎至2cm以下，备用；
2)将物病原真菌种到PD培养基中，25-28℃，150-180r/min，培养72-84h，得培养液；
3)将培养液2000-2500r/min离心10-15min，分离得到植物病原真菌沉淀和植物病原真菌发酵液；
4)将植物病原真菌沉淀、瞿麦、桃树枝叶和EM菌按照体积百分比为：植物病原真菌沉淀：瞿麦：桃树枝叶：EM菌＝20-100：20-100：20-100：1-4进行混合，然后加水使含水量达到50-65％，室外堆肥30-45天，期间每7-10天翻动一次，得到有机固体肥料；
5)将植物病原真菌发酵液减压浓缩至原体积的1/3，加1％体积的枯草芽孢杆菌，28-35℃，发酵30-45天，得到有机叶面肥。
2.如权利要求1所述的桃树专用有机肥的制备方法，其特征在于，所述桃树枝叶为桃树修剪后的残枝落叶。
3.如权利要求1所述的桃树专用有机肥的制备方法，其特征在于，所述植物病原真菌为核盘菌属、链核盘菌属、葡萄座腔菌属、丝核属或小菌核属真菌中的任一种。
4.如权利要求1所述的桃树专用有机肥的制备方法，其特征在于，所述PD培养基制备方法为：取300g去皮土豆加1000mL蒸馏水煮烂至成泥，四层纱布过滤，蒸馏水补足至1000mL，然后加入20g葡萄糖，115℃灭菌20min。
5.如权利要求1所述的桃树专用有机肥的制备方法，其特征在于，所述植物病原真菌为植物病原真菌菌丝块或植物病原真菌孢子悬浮液。
6.如权利要求5所述的桃树专用有机肥的制备方法，其特征在于，所述植物病原真菌菌丝块的制备方法为：将植物病原真菌接种到PDA培养基中，25-28℃，培养72-84h。
7.如权利要求5所述的桃树专用有机肥的制备方法，其特征在于，所述植物病原真菌孢子悬浮液的制备方法为：将植物病原真菌接种到PDA平板培养基中，25-28℃，培养72-84h，然后用5mL无菌水冲洗菌落表面，用涂布棒轻刮菌落表面以刮取剩余孢子，将剩余孢子加入到冲洗液中，用双层无菌擦镜纸过滤，滤液即为植物病原真菌孢子悬浮液。
8.如权利要求6或7所述的桃树专用有机肥的制备方法，其特征在于，所述PDA平板培养基的制备方法为：取300g去皮土豆加1000mL蒸馏水煮烂至成泥，四层纱布过滤，蒸馏水补足至1000mL，然后加入20g葡萄糖，15g琼脂，115℃灭菌20min，倒平板，冷却至室温。
9.一种如权利要求1-8任一项所述的制备方法制备的桃树专用有机肥。
10.如权利要求9所述桃树专用有机肥的施用方法，其特征在于：所述桃树专用有机肥中的有机固体肥料在桃花前树盘穴施50-100斤/棵桃树，有机叶面肥稀释100-500倍，每间隔2个月叶面喷施一次。
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