CN107548728A - 一种巫山淫羊藿种子的贮藏方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种巫山淫羊藿种子的贮藏方法。本发明提供了一种巫山淫羊藿种子贮藏方法，包括如下步骤：调整巫山淫羊藿种子的含水量到6.5％，再将含水量6.5％的巫山淫羊藿种子在4℃条件下贮藏。本发明的试验依据不同含水量的种子在不同条件下贮藏而产生的种子活力的差异，在生活力、电导率，酶活力等测定中表现出来，经处理分析得出种子的贮藏特性。将淫羊藿种子干燥至目标含水量，分别为12％，7.5％，6.5％，5％，4％，选定冷藏温度4℃，冷冻温度‑18℃以及室温三个条件进行贮藏，最终确定最佳贮藏温度为4℃6.5％含水量种子，该贮藏条件的摸索对中草药的保存及利用有很大意义。

Description

一种巫山淫羊藿种子的贮藏方法

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种巫山淫羊藿种子的贮藏方法。

背景技术

现阶段对淫羊藿种子的研究大部分局限于探究淫羊藿种子的休眠特性或种子后熟等，如2010年，樊家乙对巫山淫羊藿种子休眠特性的研究，主要探索巫山淫羊藿种子休眠特性并筛选有效的打破休眠方法。其认为5℃低温层积效果最为显著，90d后种子胚率由处理前15.39％增至86.21％；低温层积后种子的发芽率与发芽势显著高于其他处理。最后做出的结论是巫山淫羊藿种皮无明显吸水障碍，种子休眠的主要原因为胚形态后熟及发芽抑制物；低温层积较其他方法可显著促进种胚形态发育，提高发芽率,是最佳的破眠方法。另外，2011年权秋梅对巫山淫羊蕾的传粉生态学进行研究，巫山淫羊蕾在有性繁殖期间克隆片段密度对其各个形态特征的影响显著；培养基内蔗糖、硝酸钙和硼酸在一定浓度范围内对巫山淫羊蕾的花粉萌发和花粉管生长起促进的作用，但超过一定浓度时会有不同程度的抑制作用镁和钾对花粉萌发及花粉管生长影响不均显著等。

现阶段我国对巫山淫羊藿种质资源的保护力度不足，主要致力于对淫羊藿植株的应用而忽略了对淫羊藿种子的保存和研究。对于淫羊藿种子的贮藏特性，种子劣变机理等种子寿命，种子衰老方面的研究很少，并无报告成果发表。对于淫羊藿种子贮藏机理的探究对淫羊藿这一有价值的中药材的生产有很大指导作用，是淫羊藿种子贮存的亟需技术。

种子寿命因植物种类不同有很大差异，短则数小时，长则可达千、万年。种子寿命不仅与其遗传特性有关，还受环境因素，特别是贮藏因素的影响，所以在不同地区和不同条件下观察的结果差异很大，因而对种子寿命长短的划分也难有一个统一的标准。到目前为止，较有代表性的种子寿命划分方法主要有依据种子寿命长短划分，依据种子贮藏的难易程度划分，还有依据种子贮藏特性划分。根据种子贮藏特性划分可以将种子分为三大类，正常型或称为传统型种子，中间型种子和顽拗型种子。正常型种子耐干燥，在含水量降到较低水平时不会受到伤害。种子寿命一般随含水量和温度的下降而延长，能在干燥、低温条件下长期贮藏。大多数作物种子属正常型。顽拗型种子对脱水和低温高度敏感，在干燥时会受到损伤。新鲜顽拗型种子的生活力会随种子干燥而降低，当种子水分降低至某一临界水分或称最低安全水分以下时，种子生活力全部丧失。中间型种子对脱水和低温的敏感介于正常型和顽拗型之间，在风干贮藏时，种子寿命与种子含水量的负相关关系在种子含水量降低到一定程度(7％-12％)时会逆转，亦即此时种子生活力会发生损伤。因此这些植物的种子都有一个最佳风干贮藏条件。

除顽拗型种子之外，正常型和中间型的种子寿命都较长，劣变速度较慢，需要加速老化试验对种子进行处理，以确定其劣变机理。

发明内容

本发明一个目的是提供一种巫山淫羊藿种子贮藏方法。

本发明提供的方法，包括如下步骤：调整巫山淫羊藿种子的含水量到6.5％，再4℃贮藏。

上述方法中，所述调整为降低；所述降低的方式为干燥。

本发明另一个目的是提供一种巫山淫羊藿种子贮藏方法。

本发明提供的方法，包括如下步骤：选取含水量为6.5％的巫山淫羊藿种子在4℃贮藏。

上述方法中，所述贮藏时间为大于等于9个月。

本发明的实验证明，本次试验依据不同含水量的种子在不同条件下贮藏而产生的种子活力的差异，在生活力和电导率测定中表现出来，经处理分析得出种子的贮藏特性。将淫羊藿种子干燥至目标含水量，分别为12％，7.5％，6.5％，5％，4％，选定冷藏温度4℃，冷冻温度-18℃以及室温三个条件进行贮藏，最终确定最佳贮藏温度为4℃6.5％含水量种子，该贮藏条件的摸索对中草药的保存及利用有很大意义。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1、巫山淫羊藿种子贮藏条件摸索

1、贮藏方法

利用硅胶吸水将淫羊藿种子干燥至含水量分别为12％，7.5％，6.5％，5％，4％，分装放入密封铝箔袋中，在不同条件下分组贮藏。

五种含水量的种子分别在三种温度条件下贮藏，-18℃、4℃和室温(25℃)。在30天、60天、90天、180天、270天分五次取样，测定种子活力及种子相对电导率。

2)TTC种子生活力测定

种子生活力测定需要以下步骤：

(1)种子回湿将种子至于湿沙中打开包装回湿24h。

(2)种子吸胀加入适量去离子水使种子吸胀24h。

(3)露出种胚将淫羊藿种子沿中线切开，使种胚暴露，取一半种子用凡士林粘在载玻片上，按组排列，每个处理三个重复。

(4)染色将载玻片至于培养皿中，加入0.5％TTC溶液进行染色，至于40℃水浴锅中染色三个小时，三小时后取出，镜检拍照。

种子生活力％计算公式种子生活力＝(TTC染色种子数/种子总数)*100％

不同贮存条件对淫羊藿种子生活力的影响结果如下：

表1为-18℃贮存条件下对淫羊藿种子生活力影响(单位：％)

表2为4℃贮存条件下对淫羊藿种子生活力影响(单位：％)

表3为室温贮存条件下对淫羊藿种子生活力影响(单位：％)

从上述可以看出，

室温贮藏的淫羊藿种子生活力下降最快，在贮藏三个月时生活力降低到50％左右，可以判定此贮藏条件不适宜淫羊藿种子的贮藏。贮藏一个月时，-18℃条件下贮藏的淫羊藿种子生活力大于4℃条件下贮藏的，但贮藏两个月之后4℃条件下贮藏的淫羊藿种子生活力整体大于-18℃的。

推测4℃更适宜淫羊藿种子的贮藏，能更大限度保持种子活力。淫羊藿种子表现出低温干燥情况下生活力受到损伤。

从数据趋势上看，4℃贮藏条件下，含水量为6.5％的淫羊藿种子生活力保持得最为稳定，同时保持在较高水平，故推测6.5％含水量的淫羊藿种子在4℃条件下贮藏能够最大限度保持活力，在此条件下贮藏的淫羊藿种子能够维持更长的寿命，9个月活力仍能达到76.67％。

3)电导率测定

(1)在计划取样时间取样，每种处理设置三个重复，每个重复15粒种子，在设置一组空白对照，同样三个重复。

(2)将15粒种子置于锥形瓶中，加入50毫升去离子水，将温度控制在20℃左右，测量初始电导率，记录数据。

(3)用封口膜将锥形瓶密封，置于20℃培养箱中培养24小时，24小时后测量电导率，为24h电导率，记录数据。

(4)再次将锥形瓶密封，置于100℃恒温水浴锅中煮沸一小时，取出测量电导率，为煮后电导率，记录数据。

(5)计算相对电导率＝(24h电导率-初始电导率)/煮后电导率*100％，分析数据。

不同贮存条件对淫羊藿种子相对电导率的影响结果如下表4。

表4为-18℃贮存条件下对淫羊藿种子相对电导率影响(％)

表5 4℃贮存条件下对淫羊藿种子相对电导率影响(％)

表6室温贮存条件下对淫羊藿种子相对电导率影响(％)

种子发生劣变时，细胞膜结构受到破坏，影响膜功能正常的发挥。在种子吸胀初期，细胞膜重建和损伤修复的能力影响电解质和可溶物质外渗的程度，种子重建膜完整性的速度越快，则外渗物越少。高活力种子能够更加快速地重建膜，且最大限度地修复损伤，因而细胞膜完整性好，浸入水中后渗出的可溶性物质和电解质少，浸出液的电导率低，而低活力种子则相反。因此，高活力种子的相对电导率低，电导率与种子活力呈负相关。

由上述数据可知，室温条件下贮藏的巫山淫羊藿种子电导率明显高于其他条件下贮藏的种子电导率，说明淫羊藿种子不适宜在室温下贮藏。

将-18℃与4℃条件下贮藏的种子电导率进行对比，，可发现4℃下贮藏的种子电导率略低于-18℃贮藏的种子电导率，可推测4℃更适宜淫羊藿种子贮藏。

电导率与生活力测定所得结论都表明4℃条件更适宜种子贮藏，在4℃条件下，长时间贮藏后，相比其他温度种子生活力表现最高，相对电导率表现最低，表明4℃是种子贮藏的最佳温度。而含水量对种子活力、电导率的影响也十分明显，两指标相对而言前者对于种子活性的描述更为准确，所以种子活力在6.5％含水量维持在最高水平可以确定此含水量适宜种子贮藏。

因此，淫羊藿种子最佳贮藏条件为4℃淫羊藿种子初始含水量为6.5％。

Claims (5)

1.一种巫山淫羊藿种子贮藏方法，包括如下步骤：调整巫山淫羊藿种子的含水量到6.5％，再4℃贮藏。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述调整为降低。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述降低的方式为干燥。

4.一种巫山淫羊藿种子贮藏方法，包括如下步骤：选取含水量为6.5％的巫山淫羊藿种子在4℃贮藏。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：

所述贮藏时间为大于等于9个月。