CN107540476A - 一种全水溶性生物有机肥料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种全水溶性生物有机肥料及其制备方法，它由黄腐酸钾、氨基酸粉、腐植酸钾、黄腐酸、淡紫拟青霉菌粉、绿色木霉菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉与农用硝酸稀土组成。它兼有改良土壤和刺激农作物生长作用，具有肥效快、营养均衡、施用简便等优点，同时，它能够使农作物具有强抗逆抗病性能，改善农作物品质，改善土壤理化性状，提高土壤肥力，促进土壤微生物的活动，降低肥料成本、维持和促进土壤养分平衡。
Description
【技术领域】
本发明属于农用肥料技术领域。更具体地，本发明涉及一种全水溶性生物有机肥料，还涉及所述全水溶性生物有机肥料的制备方法。
【背景技术】
国家近年来大力提倡“水肥一体化”、大力发展“设施”栽培，水溶肥料市场兴起。水溶肥料与传统肥料相比，水溶肥料不但配方多样，施用方法也非常灵活，可以土壤浇灌，让植物根部全面接触到肥料，尽情地吸收各种营养元素；可以叶面喷施，通过叶面气孔进入植物内部，提高肥料吸收利用率；也可以滴灌和无土栽培，节约灌溉水并提高劳动生产效率。
但目前农业用的水溶肥料主要有以含氮、磷、钾为主的大量元素肥料和单一或多种微量元素混合叶面肥料，作物使用后仅起到补充相应元素的作用，对作物有一定的增产效果，但少有营养和调节于一体的肥料，更没有解决土壤环保问题的肥料。且设施栽培的高温高湿环境特别适合有害病菌的生长，使得设施栽培需要提高农药用量，影响了食品和环境安全。
微生物在生长过程中产生的代谢产物在修复和改良土壤环境、促进作物根系生长、减少土传性病害的危害、降低化学农药的使用量等方面起着重要的作用。随着人们对食品安全越来越重视，因此，大力发展高效低毒、功能性强的微生物相关产品研发，达到以菌防病的效果，减少生产中化学农药的投入使用，实现农产品质量安全提升、农业生态环境保护相协调的可持续发展，同时降低农业生产成本，促进农民节本增效。
氨基酸、腐植酸与黄腐酸含有碳、氢、氧、氮等元素以及芳香核、羟基、羧基、羰基、醌基、甲氧基等活性基因，这些活性基团决定了氨基酸、腐植酸、黄腐酸具有亲水性、离子交换性、络合性、氧化还原性及生理活性等，兼有改良土壤和刺激农作物生长双重作用。
目前，我国有现行标准的水溶性肥料为植物提供的可吸收有机质数量较少，达不到提高产品品质、增加土壤肥力的作用。
为此，针对现有技术存在的一些技术缺陷，本发明人通过大量实验研究与分析总结，研制出一种全水溶性生物有机肥料及其生产方法。
【发明内容】
[要解决的技术问题]
本发明的目的是提供一种全水溶性生物有机肥料。
本发明的另一个目的是提供所述全水溶性生物有机肥料的制备方法。
[技术方案]
本发明是通过下述技术方案实现的。
本发明涉及一种全水溶性生物有机肥料。
所述全水溶性生物有机肥料的组成如下：以重量份计，
所述淡紫拟青霉菌菌粉的有效菌含量为100亿/g以上；
所述绿色木霉菌粉的有效菌含量为200亿/g以上；
所述地衣芽孢杆菌菌粉的有效菌含量为500亿/g以上。
根据本发明的一种优选实施方式，所述全水溶性生物有机肥料的组成如下：以重量份计，
本发明还涉及所述的生物有机肥料的制备方法。
该制备方法步骤如下：
A、制备淡紫拟青霉菌粉
用接种环挑取一环斜面淡紫拟青霉菌种接种到PDA培养基平板上，在培养箱中在温度26～28℃下活化培养3～5天；活化培养菌种再转接到100ml PDA液体培养基中，在恒温摇床中在温度26～28℃与转速200～250rpm的条件下进行液体培养24～48h，液体培养种子液的温度降至30～35℃时，按照以固体培养基重量计4％的接种量，将培养液体种子液和固体培养基混合均匀，然后在发酵盘中在温度26～28℃与相对湿度70～80％的条件下进行发酵，发酵至第4天，将相对湿度调整为环境的正常湿度，发酵至第5～7天在固体培养基表面长满淡紫色孢子，于是发酵结束，检测孢子量，然后低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到100亿/g以上淡紫拟青霉菌菌粉；
B、制备绿色木霉菌粉
用接种环挑取一环绿色木霉菌种接种到PDA培养基平板上，在PDA培养基平板上划线，在生化培养箱中在温度28～32℃下培养48～72h，待平板长满菌丝，然后转接于150ml察氏液体培养基中，在恒温摇床中，在温度28～32℃与转速200～220r/min的条件下振荡培养48～72h，使培养液长满绿色木霉菌菌丝；
固体培养种子液的温度降至30～35℃后，按照以固体培养基重量计3％的接种量，将察氏培养物与固体培养基混合均匀，再在发酵盘中，第1～3天在温度28～32℃与相对湿度70％～80％的条件下进行发酵，第4天将相对湿度调整为环境正常湿度，第5～6天在固体培养基表面长满孢子发酵结束，检测孢子量，然后低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到200亿/g以上绿色木霉菌粉；
C、制备地衣芽孢杆菌菌粉
用接种环挑取一环地衣芽孢杆菌菌种接种到种子培养基斜面试管中，在温度37℃下活化18h；用接种环挑取两环活化地衣芽孢杆菌菌种接种到150ml摇瓶培养基中，在恒温摇床中在温度37℃与转速120r/min的条件下培养24h；待培养液温度降至35～40℃时，按照以发酵培养基重量计5％的接种量，把摇瓶培养物接种到发酵培养基中，在温度35～37℃、通气量1:1、罐压0.05MPa与转速120r/min的条件下进行发酵；发酵第12h开始取样检测，每两小时取样一次，显微镜镜检，待芽孢形成率达到90％以上时，发酵结束，发酵培养液喷雾干燥，得到500亿/g以上地衣芽孢杆菌菌粉；
D、制备含硝酸稀土混合物
将45～55重量份黄腐酸钾、15～25重量份氨基酸粉、40～50重量份腐植酸钾、10～20重量份黄腐酸与0.2～0.4重量份农用硝酸稀土加入混合搅拌机中搅拌混合，得到含硝酸稀土混合物；
E、合成
往步骤D得到的含硝酸稀土混合物中加入1～2重量份步骤A得到的淡紫拟青霉菌粉、1～2重量份步骤B得到的绿色木霉菌粉与0.2～0.6重量份步骤C得到的地衣芽孢杆菌菌粉，在搅拌机中搅拌混合，静置，得到所述的全水溶性生物有机肥料。
根据本发明的一种优选实施方式，在步骤A中，PDA培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1:2～4，将160～240重量份削皮土豆块在水中煮沸28～32min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加18～22重量份蔗糖与15～20重量份琼脂，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用无机碱或无机酸水溶液将其pH值调节至7.0～7.5，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA培养基；
PDA液体培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1:2～4，将160～240重量份削皮土豆块在水中煮沸28～32min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加18～22重量份蔗糖，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用无机碱或无机酸水溶液将其pH值调节至7.0～7.5，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA液体培养基；
固体培养基是按照下述制备方法制备的：
将玉米秸秆粉、米糠、玉米粉与硫酸铵按照重量比200～280：140～180：500～700：0.8～1.2进行混合均匀，然后往这种混合物喷洒水，使它的含水量达到以重量计45～55％，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的固体培养基。
根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤B中，察氏液体培养基是按照下述制备方法制备的：
将3重量份硝酸钠、1重量份磷酸氢二钾、0.5重量份七水合硫酸镁、0.5重量份氯化钾、0.01重量份硫酸亚铁与30重量份蔗糖溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的察氏液体培养基；
固体培养基是按照下述制备方法制备的：
将56.7重量份麸皮、37.9重量份米糠、1重量份葡萄糖、2重量份磷酸二氢钾、1.5重量份硫酸铵、0.4重量份硫酸镁与0.5重量份碳酸钙混合均匀，往这种混合物中喷洒水，使它的含水量达到以重量计45～55％，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的固体培养基；。
根据本发明的另一种优选实施方式，步骤A的淡紫拟青霉菌固体发酵物与步骤B的绿色木霉菌固体发酵物是在温度30～35℃的条件下进行低温干燥粉碎的。
根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤C中，种子培养基是按照下述制备方法制备的：
将5重量份牛肉膏、10重量份蛋白胨、5重量份氯化钠与18重量份琼脂粉溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的种子培养基；
摇瓶培养基是按照下述制备方法制备的：
将5重量份牛肉膏、10重量份蛋白胨与5重量份氯化钠溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的摇瓶培养基；
发酵培养基是按照下述制备方法制备的：
3.2重量份豆粕粉、1.5重量份玉米浆、0.5重量份葡萄糖、0.05重量份硫酸镁与0.2重量份磷酸氢二钾溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的发酵培养基。
根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤D中，在混合搅拌机中在转速50～100r/min下搅拌18～22min得到所述的含硝酸稀土混合物。
根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤E中，在混合搅拌机中在转速50～100r/min下搅拌混合18～22min，再静置8～12min，得到所述的全水溶生物有机肥料。
根据本发明的另一种优选实施方式，它的总有效活菌数≥5亿/g；它的有机质含量为以重量计≥65％、氮磷钾含量≥12％、腐植酸含量≥30％与黄腐酸含量≥40％。
下面将更详细地描述本发明。
本发明涉及一种全水溶性生物有机肥料。
所述全水溶性生物有机肥料的组成如下：以重量份计，
所述淡紫拟青霉菌菌粉的有效菌含量为100亿/g以上；
所述绿色木霉菌粉的有效菌含量为200亿/g以上；
所述地衣芽孢杆菌菌粉的有效菌含量为500亿/g以上。
在本发明中，黄腐酸钾、氨基酸粉、腐植酸钾与黄腐酸含量超过上述含量范围，即它们的含量低于所述的含量下限或者高于它们的上限都是不可取的。
其它组分的含量在所述的范围内时，如果所述黄腐酸钾量小于45重量份，则无法提供足够有机质和养分，不利于土壤中微生物生长繁殖；如果黄腐酸钾量大于55重量份，则会造成单位质量菌剂中有益微生物比例减少；因此，所述黄腐酸钾量量为45-55重量份是可行的，优选地是48-52重量份。
其它组分的含量在所述的范围内时，如果所述氨基酸粉量小于15重量份，则不能满足农作物在生长过程中对游离氨基酸需求；如果所述氨基酸粉量大于25重量份，则会造成其它物料比例失衡；因此，所述氨基酸粉量为15-25重量份是可行的，优选地是18-22重量份。
其它组分的含量在所述的范围内时，如果所述腐植酸钾量小于40重量份，则不能有效调节产品酸性，对农作物生长过程不利；如果所述腐植酸钾量大于50重量份，则会造成产品偏碱性，影响土壤环境；因此，所述腐植酸钾量为40-50重量份是可行的，优选地是42-48重量份。
其它组分的含量在所述的范围内时，如果所述黄腐酸量小于10重量份，则不能有效的促进作物碳氮代谢和干物质的积累，如果黄腐酸量大于20重量份，则会降低产品pH值，对作物生长有害，因此，所述黄腐酸量为10-20重量份是可行的，优选地是12-16重量份。
其它组分的含量在所述的范围内时，如果所述农用硝酸稀土量小于0.2重量份，则不能有效的促进作物生长发育，如果农用硝酸稀土量大于0.4重量份，则会产生药害，因此，所述农用硝酸稀土量为0.2-0.4重量份是可行的，优选地是0.2-0.3重量份。
本发明使用的黄腐酸钾、氨基酸粉、腐植酸钾与黄腐酸都是目前市场上销售的产品，例如由广西南宁合润发科技有限公司以商品名黄腐酸钾销售的黄腐酸钾、由成都螯合生物技术有限公司以商品名氨基酸粉销售的氨基酸粉、由山西灵石县叶森农业科技有限公司以商品名腐植酸钾销售的腐植酸钾、由山东泉林嘉有肥料有限责任公司以商品名黄腐酸原粉销售的黄腐酸。
本发明使用的农用硝酸稀土是符合中华人民共和国国家标准GB9958－2008《硝酸稀土植物生长调节剂》的，是由包头万得福多元稀土复合肥厂以商品名硝酸稀土销售的产品。
本发明使用的淡紫拟青霉菌(Paecilomyces lilacinus)是中国农业微生物菌种保藏管理中心保藏的编号为ACCC 30630的淡紫拟青霉菌株；
本发明使用的绿色木霉菌(Trichoderma viride)是中国农业微生物菌种保藏管理中心保藏的编号为ACCC 31911绿色木霉菌株；
本发明使用的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)是中国农业微生物菌种保藏管理中心保藏的编号为ACCC02975地衣芽孢杆菌菌株。
当然，本发明也可以使用能够从市场上获得的其它淡紫拟青霉菌、绿色木霉菌、地衣芽孢杆菌菌株，但它们必须不会对本发明产品、土壤环境、作物及其生长等产生不良的影响。
优选地，所述全水溶生物有机肥料的组成如下：以重量份计，
本发明涉及所述全水溶性生物有机肥料的制备方法。
该制备方法步骤如下：
A、制备淡紫拟青霉菌粉
PDA培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1:2～4，将160～240重量份削皮土豆块在水中煮沸28～32min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加18～22重量份蔗糖与15～20重量份琼脂，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用无机碱或无机酸水溶液将其pH值调节至7.0～7.5，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA培养基；
在本发明中，所述的无机碱水溶液是氢氧化钠、氢氧化钾或碳酸钠等稀水溶液；所述的无机酸水溶液是硫酸、盐酸或磷酸等稀水溶液。下面也使用这些无机碱或无机酸水溶液，因此后面将不再赘述。
在本发明中使用的灭菌设备是由上海博讯实业有限公司以商品名立式压力蒸汽灭菌器销售的产品，下面灭菌时也使用这种灭菌设备，因此不再赘述。
PDA液体培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1:2～4，将160～240重量份削皮土豆块在水中煮沸28～32min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加18～22重量份蔗糖，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用无机碱或无机酸水溶液将其pH值调节至7.0～7.5，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA液体培养基；
固体培养基是按照下述制备方法制备的：
将玉米秸秆粉、米糠、玉米粉与硫酸铵按照重量比200～280：140～180：500～700：0.8～1.2进行混合均匀，然后往这种混合物喷洒水，使它的含水量达到以重量计45～55％，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的固体培养基。
用接种环挑取一环斜面淡紫拟青霉菌种接种到PDA培养基平板上，在培养箱中在温度26～28℃下活化培养3～5天；活化培养菌种再转接到100ml PDA液体培养基中，在恒温摇床中在温度26～28℃与转速200～250rpm的条件下进行液体培养24～48h，液体培养种子液的温度降至30～35℃时，按照以固体培养基重量计4％的接种量，将培养液体种子液和固体培养基混合均匀，然后在发酵盘中在温度26～28℃与相对湿度70～80％的条件下进行发酵，发酵至第4天，将相对湿度调整为环境的正常湿度，发酵至第5～7天在固体培养基表面长满淡紫色孢子，于是发酵结束，检测孢子量，然后低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到100亿/g以上淡紫拟青霉菌菌粉。
这个步骤淡紫拟青霉菌固体发酵物是在温度30～35℃的条件下进行低温干燥粉碎的。
本发明使用的培养箱、恒温摇床、发酵盘、干燥设备都是本技术领域里通常使用的常规设备。
在本发明中，检测孢子量的方法是平板计数法，下同。
B、制备绿色木霉菌粉
察氏液体培养基是按照下述制备方法制备的：
将3重量份硝酸钠、1重量份磷酸氢二钾、0.5重量份七水合硫酸镁、0.5重量份氯化钾、0.01重量份硫酸亚铁与30重量份蔗糖溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的察氏液体培养基；
固体培养基是按照下述制备方法制备的：
将56.7重量份麸皮、37.9重量份米糠、1重量份葡萄糖、2重量份磷酸二氢钾、1.5重量份硫酸铵、0.4重量份硫酸镁与0.5重量份碳酸钙混合均匀，往这种混合物中喷洒水，使它的含水量达到以重量计45～55％，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的固体培养基；
用接种环挑取一环绿色木霉菌种接种到步骤A制备的PDA培养基平板上，在PDA培养基平板上划线，在生化培养箱中在温度28～32℃下培养48～72h，待平板长满菌丝，然后转接于150ml察氏液体培养基中，在恒温摇床中，在温度28～32℃与转速200～220r/min的条件下振荡培养48～72h，使培养液长满绿色木霉菌菌丝；
固体培养种子液的温度降至30～35℃后，按照以固体培养基重量计3％的接种量，将察氏培养物与固体培养基混合均匀，再在发酵盘中，第1～3天在温度28～32℃与相对湿度70％～80％的条件下进行发酵，第4天将相对湿度调整为环境正常湿度，第5～6天在固体培养基表面长满孢子发酵结束，检测孢子量，然后低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到200亿/g以上绿色木霉菌粉；
这个步骤的绿色木霉菌固体发酵物是在温度30～35℃的条件下进行低温干燥粉碎的。
C、制备地衣芽孢杆菌菌粉
在步骤C中，种子培养基是按照下述制备方法制备的：
将5重量份牛肉膏、10重量份蛋白胨、5重量份氯化钠与18重量份琼脂粉溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的种子培养基；
摇瓶培养基是按照下述制备方法制备的：
将5重量份牛肉膏、10重量份蛋白胨与5重量份氯化钠溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的摇瓶培养基；
发酵培养基是按照下述制备方法制备的：
3.2重量份豆粕粉、1.5重量份玉米浆、0.5重量份葡萄糖、0.05重量份硫酸镁与0.2重量份磷酸氢二钾溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的发酵培养基。
在本发明中，制备上述各种培养基使用的原料都是目前市场上销售的产品，例如由北京奥博星生物技术有限公司以商品名牛肉膏销售的牛肉膏、由北京奥博星生物技术有限公司以商品名蛋白胨销售的蛋白胨、由河南振新生物技术股份有限公司以商品名豆粕粉销售的豆粕粉。
用接种环挑取一环地衣芽孢杆菌菌种接种到种子培养基斜面试管中，在温度37℃下活化18h；用接种环挑取两环活化地衣芽孢杆菌菌种接种到150ml摇瓶培养基中，在恒温摇床中在温度37℃与转速120r/min的条件下培养24h；待培养液温度降至35～40℃时，按照以发酵培养基重量计5％的接种量，把摇瓶培养物接种到发酵培养基中，在温度35～37℃、通气量1:1、罐压0.05MPa与转速120r/min的条件下进行发酵；发酵第12h开始取样检测，每两小时取样一次，显微镜镜检，待芽孢形成率达到90％以上时，发酵结束，发酵培养液喷雾干燥，得到500亿/g以上地衣芽孢杆菌菌粉；
D、制备含硝酸稀土混合物
将45～55重量份黄腐酸钾、15～25重量份氨基酸粉、40～50重量份腐植酸钾、10～20重量份黄腐酸与0.2～0.4重量份农用硝酸稀土加入混合搅拌机中搅拌混合，得到含硝酸稀土混合物；
优选地，在混合搅拌机中在转速50～100r/min下搅拌18～22min得到所述的含硝酸稀土混合物。
E、合成
往步骤D得到的含硝酸稀土混合物中加入1～2重量份步骤A得到的淡紫拟青霉菌粉、1～2重量份步骤B得到的绿色木霉菌粉与0.2～0.6重量份步骤C得到的地衣芽孢杆菌菌粉，在搅拌机中搅拌混合，静置，得到所述的全水溶性生物有机肥料。
优选地，在混合搅拌机中在转速50～100r/min下搅拌混合18～22min，再静置8～12min，得到所述的全水溶生物有机肥料。
在这个步骤中，静置的基本作用是因原料均为粉剂物料，搅拌混合后，静置降低菌剂损失。
制备得到的全水溶性生物有机肥料根据NY 884-2012《生物有机肥》标准分析方法进行了分析测定，其结果表明，它的总有效活菌数≥5亿/g；有机质含量为以重量计≥65％；根据NY525-2012《有机肥料》标准分析方法进行了分析测定，氮磷钾含量≥12％；根据HG/T3278-2011《农业用腐殖酸钠》标准分析方法进行了分析测定，腐植酸含量≥30％；容量法测定黄腐酸含量≥40％。
[有益效果]
本发明的有益效果是：本发明制备的全水溶生物有机肥料兼有改良土壤和刺激农作物生长作用，具有肥效快、营养均衡、施用简便等优点；同时能够使农作物具有较强的抗逆抗病性能，改善农作物品质；改善土壤理化性状，提高土壤肥力；促进土壤微生物的活动；降低肥料成本、维持和促进土壤养分平衡。本发明全水溶生物有机肥料制备方法简单，工艺稳定，具有非常广泛的应用前景。
【具体实施方式】
通过下述实施例将能够更好地理解本发明。
实施例1：制备本发明全水溶性生物有机肥料
该实施例的实施步骤如下：
A、制备淡紫拟青霉菌粉
PDA培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1：2，将190重量份削皮土豆块在水中煮沸30min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加18重量份蔗糖与20重量份琼脂，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用氢氧化钠或硫酸水溶液将其pH值调节至7.0，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA培养基；
PDA液体培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1:2，将210重量份削皮土豆块在水中煮沸30min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加18重量份蔗糖，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用上述无机碱或无机酸水溶液将其pH值调节至7.0，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA液体培养基；
固体培养基是按照下述制备方法制备的：
将玉米秸秆粉、米糠、玉米粉与硫酸铵按照重量比280：140：580：0.8进行混合均匀，然后往这种混合物喷洒水，使它的含水量达到以重量计52％，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的固体培养基。
用接种环挑取一环斜面淡紫拟青霉菌种接种到PDA培养基平板上，在培养箱中在温度26℃下活化培养4天；活化培养菌种再转接到100ml PDA液体培养基中，在恒温摇床中在温度27℃与转速200rpm的条件下进行液体培养48h，液体培养种子液的温度降至30℃时，按照以固体培养基重量计4％的接种量，将培养液体种子液和固体培养基混合均匀，然后在发酵盘中在温度26℃与相对湿度70％的条件下进行发酵，发酵至第4天，将相对湿度调整为环境的正常湿度，发酵至第5～7天在固体培养基表面长满淡紫色孢子，于是发酵结束，检测孢子量，然后在温度30℃的条件下进行低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到108亿/g淡紫拟青霉菌菌粉。
B、制备绿色木霉菌粉
察氏液体培养基是按照下述制备方法制备的：
将3重量份硝酸钠、1重量份磷酸氢二钾、0.5重量份七水合硫酸镁、0.5重量份氯化钾、0.01重量份硫酸亚铁与30重量份蔗糖溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的察氏液体培养基；
固体培养基是按照下述制备方法制备的：
将56.7重量份麸皮、37.9重量份米糠、1重量份葡萄糖、2重量份磷酸二氢钾、1.5重量份硫酸铵、0.4重量份硫酸镁与0.5重量份碳酸钙混合均匀，往这种混合物中喷洒水，使它的含水量达到以重量计44％，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的固体培养基；
用接种环挑取一环绿色木霉菌种接种到步骤A制备的PDA培养基平板上，在PDA培养基平板上划线，在生化培养箱中在温度28℃下培养66h，待平板长满菌丝，然后转接于150ml察氏液体培养基中，在恒温摇床中，在温度28℃与转速200r/min的条件下振荡培养72h，使培养液长满绿色木霉菌菌丝；
固体培养种子液的温度降至30℃后，按照以固体培养基重量计3％的接种量，将察氏培养物与固体培养基混合均匀，再在发酵盘中，第1～3天在温度28℃与相对湿度70％的条件下进行发酵，第4天将相对湿度调整为环境正常湿度，第5～6天在固体培养基表面长满孢子发酵结束，检测孢子量，然后在温度30℃的条件下进行低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到220亿/g绿色木霉菌粉；
C、制备地衣芽孢杆菌菌粉
在步骤C中，种子培养基是按照下述制备方法制备的：
将5重量份牛肉膏、10重量份蛋白胨、5重量份氯化钠与18重量份琼脂粉溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的种子培养基；
摇瓶培养基是按照下述制备方法制备的：
将5重量份牛肉膏、10重量份蛋白胨与5重量份氯化钠溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的摇瓶培养基；
发酵培养基是按照下述制备方法制备的：
3.2重量份豆粕粉、1.5重量份玉米浆、0.5重量份葡萄糖、0.05重量份硫酸镁与0.2重量份磷酸氢二钾溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的发酵培养基。
用接种环挑取一环地衣芽孢杆菌菌种接种到种子培养基斜面试管中，在温度37℃下活化18h；用接种环挑取两环活化地衣芽孢杆菌菌种接种到150ml摇瓶培养基中，在恒温摇床中在温度37℃与转速120r/min的条件下培养24h；待培养液温度降至35℃时，按照以发酵培养基重量计5％的接种量，把摇瓶培养物接种到发酵培养基中，在温度35℃、通气量1:1、罐压0.05MPa与转速120r/min的条件下进行发酵；发酵第12h开始取样检测，每两小时取样一次，显微镜镜检，待芽孢形成率达到90.8％时，发酵结束，发酵培养液喷雾干燥，得到532亿/g地衣芽孢杆菌菌粉；
D、制备含硝酸稀土混合物
将45重量份黄腐酸钾、25重量份氨基酸粉、50重量份腐植酸钾、10重量份黄腐酸与0.2重量份农用硝酸稀土加入混合搅拌机中在转速50r/min下搅拌混合20min，得到含硝酸稀土混合物；
E、合成
往步骤D得到的含硝酸稀土混合物中加入1.0重量份步骤A得到的淡紫拟青霉菌粉、2.0重量份步骤B得到的绿色木霉菌粉与0.2重量份步骤C得到的地衣芽孢杆菌菌粉，在搅拌机中在转速50r/min下搅拌混合18min，静置10min，得到所述的全水溶性生物有机肥料。
制备得到的全水溶性生物有机肥料根据NY884-2012《生物有机肥》标准分析方法进行了分析测定，其结果表明，它的总有效活菌数5.2亿/g；有机质含量为以重量计65.5％；根据NY525-2012《有机肥料》标准分析方法进行了分析测定，氮磷钾含量12.1％；根据HG/T3278-2011《农业用腐殖酸钠》标准分析方法进行了分析测定，腐植酸含量30.8％；容量法测定黄腐酸含量40.4％。
实施例2：制备本发明全水溶性生物有机肥料
该实施例的实施步骤如下：
A、制备淡紫拟青霉菌粉
PDA培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1：3，将160重量份削皮土豆块在水中煮沸28min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加22重量份蔗糖与15重量份琼脂，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用氢氧化钾或盐酸水溶液将其pH值调节至7.2，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA培养基；
PDA液体培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1:3，将160重量份削皮土豆块在水中煮沸28min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加19重量份蔗糖，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用上述无机碱或无机酸水溶液将其pH值调节至7.5，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA液体培养基；
固体培养基是按照下述制备方法制备的：
将玉米秸秆粉、米糠、玉米粉与硫酸铵按照重量比200：180：500：1.2进行混合均匀，然后往这种混合物喷洒水，使它的含水量达到以重量计45％，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的固体培养基。
用接种环挑取一环斜面淡紫拟青霉菌种接种到PDA培养基平板上，在培养箱中在温度28℃下活化培养3天；活化培养菌种再转接到100ml PDA液体培养基中，在恒温摇床中在温度26℃与转速220rpm的条件下进行液体培养24h，液体培养种子液的温度降至32℃时，按照以固体培养基重量计4％的接种量，将培养液体种子液和固体培养基混合均匀，然后在发酵盘中在温度28℃与相对湿度74％的条件下进行发酵，发酵至第4天，将相对湿度调整为环境的正常湿度，发酵至第5～7天在固体培养基表面长满淡紫色孢子，于是发酵结束，检测孢子量，然后在温度32℃的条件下进行低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到102亿/g淡紫拟青霉菌菌粉。
B、制备绿色木霉菌粉
察氏液体培养基和固体培养基的制备方法与实施例1描述的相同。
用接种环挑取一环绿色木霉菌种接种到步骤A制备的PDA培养基平板上，在PDA培养基平板上划线，在生化培养箱中在温度32℃下培养48h，待平板长满菌丝，然后转接于150ml察氏液体培养基中，在恒温摇床中，在温度32℃与转速220r/min的条件下振荡培养48h，使培养液长满绿色木霉菌菌丝；
固体培养种子液的温度降至35℃后，按照以固体培养基重量计3％的接种量，将察氏培养物与固体培养基混合均匀，再在发酵盘中，第1～3天在温度32℃与相对湿度74％的条件下进行发酵，第4天将相对湿度调整为环境正常湿度，第5～6天在固体培养基表面长满孢子发酵结束，检测孢子量，然后在温度35℃的条件下进行低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到208亿/g绿色木霉菌粉；
C、制备地衣芽孢杆菌菌粉
种子培养基、摇瓶培养基和发酵培养基与实施例1描述的相同。
用接种环挑取一环地衣芽孢杆菌菌种接种到种子培养基斜面试管中，在温度37℃下活化18h；用接种环挑取两环活化地衣芽孢杆菌菌种接种到150ml摇瓶培养基中，在恒温摇床中在温度37℃与转速120r/min的条件下培养24h；待培养液温度降至38℃时，按照以发酵培养基重量计5％的接种量，把摇瓶培养物接种到发酵培养基中，在温度37℃、通气量1:1、罐压0.05MPa与转速120r/min的条件下进行发酵；发酵第12h开始取样检测，每两小时取样一次，显微镜镜检，待芽孢形成率达到91.2％时，发酵结束，发酵培养液喷雾干燥，得到510亿/g地衣芽孢杆菌菌粉；
D、制备含硝酸稀土混合物
将55重量份黄腐酸钾、15重量份氨基酸粉、40重量份腐植酸钾、20重量份黄腐酸与0.4重量份农用硝酸稀土加入混合搅拌机中在转速100r/min下搅拌混合18min，得到含硝酸稀土混合物；
E、合成
往步骤D得到的含硝酸稀土混合物中加入2.0重量份步骤A得到的淡紫拟青霉菌粉、1.0重量份步骤B得到的绿色木霉菌粉与0.5重量份步骤C得到的地衣芽孢杆菌菌粉，在搅拌机中在转速100r/min下搅拌混合20min，静置8min，得到所述的全水溶性生物有机肥料。
制备得到的全水溶性生物有机肥料根据NY884-2012《生物有机肥》标准分析方法进行了分析测定，其结果表明，它的总有效活菌数5.8亿/g；有机质含量为以重量计65.8％；根据NY525-2012《有机肥料》标准分析方法进行了分析测定，氮磷钾含量12.9％；根据HG/T3278-2011《农业用腐殖酸钠》标准分析方法进行了分析测定，腐植酸含量30.5％；容量法测定黄腐酸含量41.2％。
实施例3：制备本发明全水溶性生物有机肥料
该实施例的实施步骤如下：
A、制备淡紫拟青霉菌粉
PDA培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1：4，将240重量份削皮土豆块在水中煮沸32min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加20重量份蔗糖与16重量份琼脂，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用碳酸钠或磷酸水溶液将其pH值调节至7.5，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA培养基；
PDA液体培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1:4，将240重量份削皮土豆块在水中煮沸30min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加22重量份蔗糖，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用上述无机碱或无机酸水溶液将其pH值调节至7.2，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA液体培养基；
固体培养基是按照下述制备方法制备的：
将玉米秸秆粉、米糠、玉米粉与硫酸铵按照重量比260：150：700：1.0进行混合均匀，然后往这种混合物喷洒水，使它的含水量达到以重量计48％，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的固体培养基。
用接种环挑取一环斜面淡紫拟青霉菌种接种到PDA培养基平板上，在培养箱中在温度27℃下活化培养5天；活化培养菌种再转接到100ml PDA液体培养基中，在恒温摇床中在温度28℃与转速250rpm的条件下进行液体培养32h，液体培养种子液的温度降至34℃时，按照以固体培养基重量计4％的接种量，将培养液体种子液和固体培养基混合均匀，然后在发酵盘中在温度26℃与相对湿度80％的条件下进行发酵，发酵至第4天，将相对湿度调整为环境的正常湿度，发酵至第5～7天在固体培养基表面长满淡紫色孢子，于是发酵结束，检测孢子量，然后在温度34℃的条件下进行低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到110亿/g淡紫拟青霉菌菌粉。
B、制备绿色木霉菌粉
察氏液体培养基和固体培养基的制备方法与实施例1描述的相同。
用接种环挑取一环绿色木霉菌种接种到步骤A制备的PDA培养基平板上，在PDA培养基平板上划线，在生化培养箱中在温度32℃下培养72h，待平板长满菌丝，然后转接于150ml察氏液体培养基中，在恒温摇床中，在温度28℃与转速200r/min的条件下振荡培养55h，使培养液长满绿色木霉菌菌丝；
固体培养种子液的温度降至32℃后，按照以固体培养基重量计3％的接种量，将察氏培养物与固体培养基混合均匀，再在发酵盘中，第1～3天在温度28℃与相对湿度76％的条件下进行发酵，第4天将相对湿度调整为环境正常湿度，第5～6天在固体培养基表面长满孢子发酵结束，检测孢子量，然后在温度32℃的条件下进行低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到212亿/g绿色木霉菌粉；
C、制备地衣芽孢杆菌菌粉
种子培养基、摇瓶培养基和发酵培养基与实施例1描述的相同。
用接种环挑取一环地衣芽孢杆菌菌种接种到种子培养基斜面试管中，在温度37℃下活化18h；用接种环挑取两环活化地衣芽孢杆菌菌种接种到150ml摇瓶培养基中，在恒温摇床中在温度37℃与转速120r/min的条件下培养24h；待培养液温度降至40℃时，按照以发酵培养基重量计5％的接种量，把摇瓶培养物接种到发酵培养基中，在温度36℃、通气量1:1、罐压0.05MPa与转速120r/min的条件下进行发酵；发酵第12h开始取样检测，每两小时取样一次，显微镜镜检，待芽孢形成率达到94％时，发酵结束，发酵培养液喷雾干燥，得到524亿/g地衣芽孢杆菌菌粉；
D、制备含硝酸稀土混合物
将48重量份黄腐酸钾、22重量份氨基酸粉、48重量份腐植酸钾、12重量份黄腐酸与0.4重量份农用硝酸稀土加入混合搅拌机中在转速80r/min下搅拌混合22min，得到含硝酸稀土混合物；
E、合成
往步骤D得到的含硝酸稀土混合物中加入1.2重量份步骤A得到的淡紫拟青霉菌粉、1.2重量份步骤B得到的绿色木霉菌粉与0.6重量份步骤C得到的地衣芽孢杆菌菌粉，在搅拌机中在转速80r/min下搅拌混合22min，静置12min，得到所述的全水溶性生物有机肥料。
制备得到的全水溶性生物有机肥料根据NY884-2012《生物有机肥》标准分析方法进行了分析测定，其结果表明，它的总有效活菌数5.9亿/g；有机质含量为以重量计66.4％；根据NY525-2012《有机肥料》标准分析方法进行了分析测定，氮磷钾含量13.8％；根据HG/T3278-2011《农业用腐殖酸钠》标准分析方法进行了分析测定，腐植酸含量30.2％；容量法测定黄腐酸含量42.8％。
实施例4：制备本发明全水溶性生物有机肥料
该实施例的实施步骤如下：
A、制备淡紫拟青霉菌粉
PDA培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1：3，将210重量份削皮土豆块在水中煮沸30min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加20重量份蔗糖与18重量份琼脂，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用氢氧化钠或盐酸水溶液将其pH值调节至7.4，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA培养基；
PDA液体培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1:3，将190重量份削皮土豆块在水中煮沸32min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加20重量份蔗糖，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用上述无机碱或无机酸水溶液将其pH值调节至7.4，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA液体培养基；
固体培养基是按照下述制备方法制备的：
将玉米秸秆粉、米糠、玉米粉与硫酸铵按照重量比240：160：650：1.0进行混合均匀，然后往这种混合物喷洒水，使它的含水量达到以重量计55％，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的固体培养基。
用接种环挑取一环斜面淡紫拟青霉菌种接种到PDA培养基平板上，在培养箱中在温度27℃下活化培养4天；活化培养菌种再转接到100ml PDA液体培养基中，在恒温摇床中在温度27℃与转速220rpm的条件下进行液体培养40h，液体培养种子液的温度降至35℃时，按照以固体培养基重量计4％的接种量，将培养液体种子液和固体培养基混合均匀，然后在发酵盘中在温度28℃与相对湿度76％的条件下进行发酵，发酵至第4天，将相对湿度调整为环境的正常湿度，发酵至第5～7天在固体培养基表面长满淡紫色孢子，于是发酵结束，检测孢子量，然后在温度35℃的条件下进行低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到112亿/g淡紫拟青霉菌菌粉。
B、制备绿色木霉菌粉
察氏液体培养基和固体培养基的制备方法与实施例1描述的相同。
用接种环挑取一环绿色木霉菌种接种到步骤A制备的PDA培养基平板上，在PDA培养基平板上划线，在生化培养箱中在温度28℃下培养56h，待平板长满菌丝，然后转接于150ml察氏液体培养基中，在恒温摇床中，在温度32℃与转速220r/min的条件下振荡培养65h，使培养液长满绿色木霉菌菌丝；
固体培养种子液的温度降至34℃后，按照以固体培养基重量计3％的接种量，将察氏培养物与固体培养基混合均匀，再在发酵盘中，第1～3天在温度32℃与相对湿度80％的条件下进行发酵，第4天将相对湿度调整为环境正常湿度，第5～6天在固体培养基表面长满孢子发酵结束，检测孢子量，然后在温度34℃的条件下进行低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到232亿/g绿色木霉菌粉；
C、制备地衣芽孢杆菌菌粉
种子培养基、摇瓶培养基和发酵培养基与实施例1描述的相同。
用接种环挑取一环地衣芽孢杆菌菌种接种到种子培养基斜面试管中，在温度37℃下活化18h；用接种环挑取两环活化地衣芽孢杆菌菌种接种到150ml摇瓶培养基中，在恒温摇床中在温度37℃与转速120r/min的条件下培养24h；待培养液温度降至36℃时，按照以发酵培养基重量计5％的接种量，把摇瓶培养物接种到发酵培养基中，在温度36℃、通气量1:1、罐压0.05MPa与转速120r/min的条件下进行发酵；发酵第12h开始取样检测，每两小时取样一次，显微镜镜检，待芽孢形成率达到90.6％时，发酵结束，发酵培养液喷雾干燥，得到540亿/g地衣芽孢杆菌菌粉；
D、制备含硝酸稀土混合物
将52重量份黄腐酸钾、20重量份氨基酸粉、42重量份腐植酸钾、16重量份黄腐酸与0.3重量份农用硝酸稀土加入混合搅拌机中在转速60r/min下搅拌混合20min，得到含硝酸稀土混合物；
E、合成
往步骤D得到的含硝酸稀土混合物中加入1.8重量份步骤A得到的淡紫拟青霉菌粉、1.6重量份步骤B得到的绿色木霉菌粉与0.3重量份步骤C得到的地衣芽孢杆菌菌粉，在搅拌机中在转速60r/min下搅拌混合20min，静置10min，得到所述的全水溶性生物有机肥料。
制备得到的全水溶性生物有机肥料根据NY884-2012《生物有机肥》标准分析方法进行了分析测定，其结果表明，它的总有效活菌数5.5亿/g；有机质含量为以重量计65.6％；根据NY525-2012《有机肥料》标准分析方法进行了分析测定，氮磷钾含量12.9％；根据HG/T3278-2011《农业用腐殖酸钠》标准分析方法进行了分析测定，腐植酸含量30.7％；容量法测定黄腐酸含量40.6％。
试验实施例1：本发明全水溶性生物有机肥料的番茄应用试验
该试验实施例的实施方式如下：
试验品种：番茄，冠晨601。
试验时间：2017年4月25日移栽；始采时间2017年6月11日。
试验地点：河南省三门峡市陕州区。
试验方法：试验用大棚长70m、跨度8m，每隔5m耕作层用棚膜隔开，小区面积为5×6＝30m2，共设9个小区。试验追肥及其它管理措施相同。
试验设3个处理，每个处理重复3次：
处理1：常规施肥+冲施本发明生物有机全水溶肥料，番茄苗期施肥量为5kg/亩、幼果期5kg/亩、膨果期10kg/亩、采果期10kg/亩，共冲施4次；
处理2：常规施肥+与处理1同期冲施等量清水；
处理3：常规施肥。
该试验在常规施肥基础上进行。常规施肥为：基肥为25磷酸一铵kg/亩、15kg硫酸钾/亩、20kg尿素/亩。膨果期追肥为10kg尿素/亩、15kg硫酸钾/亩。严格按照本试验方案要求分别于2017年5月1日、5月21日、6月1日、6月10日进行冲施肥液或清水。收获时各小区单收单称计产，并同时进行田间调查与考种。除按照本方案要求冲施肥液或清水外，该试验其它管理措施与一般田间生产管理相同。
根据NY/T 497-2002《肥料效应鉴定田间试验技术规程》调查试验番茄株高、叶色、单株果数与单果重，其调查结果列于下表1中。
表1：田间调查与考种统计结果
| 处理 | 株高(cm) | 叶色 | 单株果数(个) | 单果重(g) |
| 1 | 75.2 | 深绿 | 12.8 | 145.4 |
| 2 | 72.6 | 绿色 | 12.1 | 142.4 |
| 3 | 70.5 | 绿色 | 11.8 | 142.1 |
注：表中数据为三个处理三次重复的平均值。
从表1可以看出：处理1与处理2、处理3相比，单株成果数分别平均增加0.7个、1.0个，单果重分别增加3.0g、3.3g，说明在常规施肥的基础上，番茄冲施本发明全水溶性生物有机肥料能够提高单株果数和单果重，并且冲施本发明全水溶性生物有机肥料能够显著改善番茄生物学性状。
根据NY/T 497-2002《肥料效应鉴定田间试验技术规程》标准方法调查试验番茄的枯萎病与青枯病，并且根据该标准方法中规定的计算方法计算出发病率与病情指数，其结果列于下表2中。
表2：番茄病害影响试验结果
表2列出的结果表明，处理1的番茄枯萎病、青枯病发病率及病情指数明显低于处理2与处理3。由此说明，冲施本发明全水溶性生物有机肥料能增强番茄抗病能力，降低发病率。
根据NY/T 497-2002《肥料效应鉴定田间试验技术规程》调查试验番茄产量，其结果列于下表3中。
表3：番茄产量试验结果
表3列出的结果表明，与处理2相比，处理1的平均亩增产408.3kg，增产率为8.1％，增产效果明显。
该试验实施例结果充分说明，本发明全水溶性生物有机肥料能够有效提高番茄产量，提高番茄品质，同时对于降低番茄枯萎病、青枯病的发生具有突出的效果。
试验实施例2：本发明全水溶性生物有机肥料的烟叶应用试验
试验品种：烟叶，云烟87。
试验时间：2016年5月5日移栽；采收时间2016年9月10日。
试验地点：河南省三门峡市陕州区西李村烟叶烘烤工场试验田。
试验方法：试验设3个处理：
处理1：常规施肥+冲施本发明生物有机全水溶肥料。在烟叶移栽后冲施5kg全水溶性生物有机肥料/亩；在团棵期冲施10kg全水溶性生物有机肥料/亩；在现蕾期冲施10kg全水溶性生物有机肥料/亩。
处理2：常规施肥+与处理1同期冲施等量清水；
处理3：常规施肥。
该试验在常规施肥基础上进行。常规施肥为：底肥为40kg复混肥(15：15：15)/亩、30kg饼肥/亩与10kg硫酸钾/亩，底肥一次性施入。在团棵期追施10kg尿素/亩；在现蕾期追施7kg尿素/亩与10㎏硫酸钾/亩。严格按照试验方案要求分别于2016年5月25日、6月30日、7月16日进行冲施肥液或清水。除按照该方案要求的冲施肥液或清水外，其它管理措施与一般田间生产管理相同。
根据NY/T 497-2002《肥料效应鉴定田间试验技术规程》调查烟叶株高、茎围、叶片数、最大叶长、最大叶宽与叶面积农艺性状，其结果列于下表4中。
表4：烟叶农艺性状影响试验结果
由表4的烟株农艺性状调查结果知道：在移栽后45天、封顶期及采烤期，株高增加、茎围增粗、叶片数略有增加、最大叶长、最大叶宽及叶面积增加趋势大致为处理1>处理2>处理3。说明冲施本发明全水溶性生物有机肥料能够增加烟株株高、茎围、叶片数、最大叶长和叶宽及叶面积，对烟株农艺性状有明显的促进作用。
根据NY/T 497-2002《肥料效应鉴定田间试验技术规程》调查在烟叶封顶期各处理田间烟叶黑胫病、根黑腐病与根结线虫病发病情况调查结果，并且根据该标准方法中规定的计算方法计算出发病率与病情指数，这些结果列于表5中。
表5：烟叶抗病性影响试验结果
由表5列出的结果知道，处理1的发病率及病情指数低于处理2、处理3。由此说明，冲施本发明全水溶性生物有机肥料能增强烤烟抵抗黑胫病、根黑腐病、根结线虫病的能力，降低发病率，能提高烤烟抗病性。
根据NY/T 497-2002《肥料效应鉴定田间试验技术规程》调查不同处理的烟叶经济学性状，这些结果列于表6中。
表6：不同处理的烟叶经济学性状
由表6可以看出，处理1与处理2相比，其上等烟比例为高出14.2％、增产率为10.3％。由此说明增产效果明显，有显著的经济效益。
本发明全水溶性生物有机肥料使烟株的株高、茎围、叶片数、最大叶长和叶宽及叶面积明显增大，有效降低烟草各种病虫害的发病率和病情指数，明显改善烟叶外观质量，上等烟叶比例高，提高质量、增加产量。
试验实施例3：全水溶性生物有机肥料的苹果应用试验
试验品种：苹果，红富士。
试验时间：2016年4月22日至2016年10月15日。
试验地点：河南省三门峡市灵宝函谷镇。
试验方法：试验设3个处理，随机区组排列，重复三次，每个小区10株。
处理1：常规施肥+冲施本发明实施例1全水溶性生物有机肥料。在苹果花期冲施5kg全水溶性生物有机肥料/亩；在幼果期冲施10kg全水溶性生物有机肥料/亩；在膨果期冲施10kg全水溶性生物有机肥料/亩。
处理2：常规施肥+与处理1同期冲施等量清水；
处理3：常规施肥。
该试验在当地常规施肥基础上进行。常规施肥为：3月10日追施75㎏复合肥(15-15-15)/亩与100kg果树专用肥(12-10-18)/亩；4-8月份防治病虫害4次，中耕除草4次，浇水2次。严格按照试验方案要求分别于4月22日、5月28日、7月25日进行冲施肥液或清水，10月24日一次性收获。收获时各小区单收单称计产，并同时进行田间调查。试验除按照该方案要求的冲施肥液或清水外，其它管理措施与一般苹果田生产管理相同。
根据NY/T 497-2002《肥料效应鉴定田间试验技术规程》调查苹果树密度、单株成果数与单果重，其结果列于下表7中。
表7：考种统计结果
| 处理 | 密度(株/亩) | 单株成果数(个/株) | 单果重(g) |
| 1 | 56 | 263.2 | 234.7 |
| 2 | 56 | 257.6 | 224.9 |
| 3 | 56 | 256.3 | 222.3 |
注：表7数据为三个处理三次重复的平均值。
由表7列出的结果可以看出：与处理2、处理3相比，处理1的单株成果数分别平均增加5.6个、6.9个，单果重分别增加9.8g、12.4g，这些结果说明，在常规施肥的基础上，冲施本发明全水溶性生物有机肥料能够提高单株苹果成果数和单果重，本发明冲施全水溶性生物有机肥料显著改善苹果的生物学性状。
根据NY/T 497-2002《肥料效应鉴定田间试验技术规程》调查苹果色度、硬度、含糖量与果形指数，其结果列于下表8中。
表8：田间调查与考种统计结果
| 处理 | 色度(％) | 硬度(kg/cm2) | 含糖量(％) | 果形指数 |
| 1 | 84.2 | 7.5 | 14.4 | 0.87 |
| 2 | 81.3 | 6.9 | 13.5 | 0.72 |
| 3 | 78.4 | 6.7 | 13.3 | 0.70 |
注：表中数据为三个处理三次重复的平均值
由表8列出的结果可以看出：与处理2、处理3相比，处理1的色度分别平均提高2.9％与5.8％，硬度分别增加0.6kg/cm2与0.8kg/cm2，含糖量分别提高0.9％与1.1％，果形指数分别增加0.15与0.17。这些结果充分说明在常规施肥的基础上，冲施本发明全水溶性生物有机肥料可提高苹果色度、硬度、含糖量和果形指数。
根据NY/T 497-2002《肥料效应鉴定田间试验技术规程》调查苹果产量及其统计分析结果，这些结果列于下表9中。
表9：产量结果统计结果
根据NY/T 497-2002《肥料效应鉴定田间试验技术规程》标准方法进行方差分析，这些分析结果列于下表10中。
表10：方差分析表
根据NY/T 497-2002《肥料效应鉴定田间试验技术规程》标准方法进行分析，这些分析结果列于下表11中。
表11：多重比较表
冲施本发明全水溶性生物有机肥料提高了苹果产量。由表9列出的结果可以看出：与处理2相比，处理1的平均亩增产215kg，增产率为6.6％；与处理3相比，处理2亩增产53.7kg，增产率为1.7％。对各处理产量结果进行方差分析(见表10)，处理间产量差异达极显著水平。采用PLSD法进行多重比较(见表11)，处理1与处理2和处理3之间产量差异均达极显著水平，处理2与处理3之间产量差异不显著。
本发明全水溶性生物有机肥料提高了苹果的色度、硬度、含糖量和果形指数、单株成果数和单果重,平均亩增产215kg，增产率为6.6％，且产量差异达极显著水平。
Claims (10)
1.一种全水溶性生物有机肥料，其特征在于它的组成如下：以重量份计，
所述淡紫拟青霉菌菌粉的有效菌含量为100亿/g以上；
所述绿色木霉菌粉的有效菌含量为200亿/g以上；
所述地衣芽孢杆菌菌粉的有效菌含量为500亿/g以上。
2.根据权利要求1所述的全水溶性生物有机肥料，其特征在于它的组成如下：以重量份计，
3.根据权利要求1或2所述的生物有机肥料的制备方法，其特征在于该制备方法步骤如下：
A、制备淡紫拟青霉菌粉
用接种环挑取一环斜面淡紫拟青霉菌种接种到PDA培养基平板上，在培养箱中在温度26～28℃下活化培养3～5天；活化培养菌种再转接到100ml PDA液体培养基中，在恒温摇床中在温度26～28℃与转速200～250rpm的条件下进行液体培养24～48h，液体培养种子液的温度降至30～35℃时，按照以固体培养基重量计4％的接种量，将培养液体种子液和固体培养基混合均匀，然后在发酵盘中在温度26～28℃与相对湿度70～80％的条件下进行发酵，发酵至第4天，将相对湿度调整为环境的正常湿度，发酵至第5～7天在固体培养基表面长满淡紫色孢子，于是发酵结束，检测孢子量，然后低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到100亿/g淡紫拟青霉菌菌粉；
B、制备绿色木霉菌粉
用接种环挑取一环绿色木霉菌种接种到PDA培养基平板上，在PDA培养基平板上划线，在生化培养箱中在温度28～32℃下培养48～72h，待平板长满菌丝，然后转接于150ml察氏液体培养基中，在恒温摇床中，在温度28～32℃与转速200～220r/min的条件下振荡培养48～72h，使培养液长满绿色木霉菌菌丝；
固体培养种子液的温度降至30～35℃后，按照以固体培养基重量计3％的接种量，将察氏培养物与固体培养基混合均匀，再在发酵盘中，第1～3天在温度28～32℃与相对湿度70％～80％的条件下进行发酵，第4天将相对湿度调整为环境正常湿度，第5～6天在固体培养基表面长满孢子发酵结束，检测孢子量，然后低温干燥粉碎，提取孢子粉，得到200亿/g绿色木霉菌粉；
C、制备地衣芽孢杆菌菌粉
用接种环挑取一环地衣芽孢杆菌菌种接种到种子培养基斜面试管中，在温度37℃下活化18h；用接种环挑取两环活化地衣芽孢杆菌菌种接种到150ml摇瓶培养基中，在恒温摇床中在温度37℃与转速120r/min的条件下培养24h；待培养液温度降至35～40℃时，按照以发酵培养基重量计5％的接种量，把摇瓶培养物接种到发酵培养基中，在温度35～37℃、通气量1:1、罐压0.05MPa与转速120r/min的条件下进行发酵；发酵第12h开始取样检测，每两小时取样一次，显微镜镜检，待芽孢形成率达到90％以上时，发酵结束，发酵培养液喷雾干燥，得到500亿/g地衣芽孢杆菌菌粉。
D、制备含硝酸稀土混合物
将45～55重量份黄腐酸钾、15～25重量份氨基酸粉、40～50重量份腐植酸钾、10～20重量份黄腐酸与0.2～0.4重量份农用硝酸稀土加入混合搅拌机中搅拌混合，得到含硝酸稀土混合物；
E、合成
往步骤D得到的含硝酸稀土混合物中加入1～2重量份步骤A得到的淡紫拟青霉菌粉、1～2重量份步骤B得到的绿色木霉菌粉与0.2～0.6重量份步骤C得到的地衣芽孢杆菌菌粉，在搅拌机中搅拌混合，静置，得到所述的全水溶性生物有机肥料。
4.根据权利要求3所述的生物有机肥料制备方法，其特征在于在步骤A中，PDA培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1:2～4，将160～240重量份削皮土豆块在水中煮沸28～32min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加18～22重量份蔗糖与15～20重量份琼脂，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用无机碱或无机酸水溶液将其pH值调节至7.0～7.5，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA培养基；
PDA液体培养基是按照下述制备方法制备的：
按照土豆与水的重量比1:2～4，将160～240重量份削皮土豆块在水中煮沸28～32min，再用双层纱布过滤，得到的滤液添加18～22重量份蔗糖，混合均匀，加水定容至1000重量份，得到的混合物溶液再使用无机碱或无机酸水溶液将其pH值调节至7.0～7.5，接着在温度121℃下灭菌20min，得到所述的PDA液体培养基；
固体培养基是按照下述制备方法制备的：
将玉米秸秆粉、米糠、玉米粉与硫酸铵按照重量比200～280：140～180：500～700：0.8～1.2进行混合均匀，然后往这种混合物喷洒水，使它的含水量达到以重量计45～55％，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的固体培养基。
5.根据权利要求4所述的生物有机肥料制备方法，其特征在于在步骤B中，察氏液体培养基是按照下述制备方法制备的：
将3重量份硝酸钠、1重量份磷酸氢二钾、0.5重量份七水合硫酸镁、0.5重量份氯化钾、0.01重量份硫酸亚铁与30重量份蔗糖溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的察氏液体培养基；
固体培养基是按照下述制备方法制备的：
将56.7重量份麸皮、37.9重量份米糠、1重量份葡萄糖、2重量份磷酸二氢钾、1.5重量份硫酸铵、0.4重量份硫酸镁与0.5重量份碳酸钙混合均匀，往这种混合物中喷洒水，使它的含水量达到以重量计45～55％，接着在温度121℃下灭菌60min，得到所述的固体培养基。
6.根据权利要求3所述的生物有机肥料制备方法，其特征在于步骤A的淡紫拟青霉菌固体发酵物与步骤B的绿色木霉菌固体发酵物是在温度30～35℃的条件下进行低温干燥粉碎的。
7.根据权利要求3所述的生物有机肥料制备方法，其特征在于在步骤C中，种子培养基是按照下述制备方法制备的：
将5重量份牛肉膏、10重量份蛋白胨、5重量份氯化钠与18重量份琼脂粉溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的种子培养基；
摇瓶培养基是按照下述制备方法制备的：
将5重量份牛肉膏、10重量份蛋白胨与5重量份氯化钠溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的摇瓶培养基；
发酵培养基是按照下述制备方法制备的：
3.2重量份豆粕粉、1.5重量份玉米浆、0.5重量份葡萄糖、0.05重量份硫酸镁与0.2重量份磷酸氢二钾溶于1000重量份蒸馏水中，混合均匀，接着在温度121℃下灭菌30min，得到所述的发酵培养基。
8.根据权利要求3所述的生物有机肥料制备方法，其特征在于在步骤D中，在混合搅拌机中在转速50～100r/min下搅拌18～22min得到所述的含硝酸稀土混合物。
9.根据权利要求3所述的生物有机肥料制备方法，其特征在于在步骤E中，在混合搅拌机中在转速50～100r/min下搅拌混合18～22min，再静置8～12min，得到所述的全水溶生物有机肥料。
10.根据权利要求3所述的生物有机肥料制备方法，其特征在于它的总有效活菌数≥5亿/g；它的有机质含量为以重量计≥65％、氮磷钾含量≥12％、腐植酸含量≥30％与黄腐酸含量≥40％。
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