CN107540460A

CN107540460A - 一种用于土壤治理的复合生物肥的制备方法

Info

Publication number: CN107540460A
Application number: CN201710977586.0A
Authority: CN
Inventors: 张永华; 李璐; 尹凯欣
Original assignee: Individual
Current assignee: Huang Xudong
Priority date: 2017-10-19
Filing date: 2017-10-19
Publication date: 2018-01-05

Abstract

本发明涉及土壤改良剂领域，具体涉及一种用于土壤治理的复合生物肥的制备方法。本发明利用废弃生物质制成生物炭并改性，其表面富含羧基等官能团，具有较强的离子交换能力，可以吸附土壤中的污染物；从果园土壤中分离固氮、解磷及解钾菌株，固氮菌固氮并分泌生长素，解磷解钾菌可转化土壤中的无效钾和无效磷为速效钾和速效磷，释效土壤中硅、锰、锌、钼等多种元素，提高营养水平；解钾、解磷细菌在生命活动中产生赤霉素、细胞分裂素、吲哚乙酸等物质，促进植物生长；将有机无机肥料混合，提高肥料养分的有效性，改善土质，通过添加粘结剂实现了对混合肥料的包裹，形成了一种缓释性的肥料，易分解，延长了肥效时间，提高了肥料的利用率。

Description

一种用于土壤治理的复合生物肥的制备方法

技术领域

本发明涉及土壤改良剂领域，具体涉及一种用于土壤治理的复合生物肥的制备方法。

背景技术

生物炭是由生物质在完全或部分缺氧的条件下经过热裂解、炭化产生的一类高度芳香化、难溶性的固态物质。生物炭多拥有疏松微孔的结构，基于此，近年来，生物炭作为土壤改良剂、肥料缓释载体在农业上的应用吸引了越来越广泛的关注。常见的生物炭包括秸秆炭、椰壳炭、木炭、竹炭等。生物炭虽可作为肥料，但其微孔结构较少、比表面积较低，且保留的营养元素包括微量元素较少，因此使用时一般需要添加其他肥料。

生物炭属于黑炭范畴的一种，具有农用意义、能源生产、环境效益等多方面重要性，通过一定技术手段制备的生物炭在改良土壤肥力、碳库中的“增汇减排”作用、环境污染修复手段等方面已经显示出其突出的功效，并且可用于制备生物炭的原材料来源广泛，使得其在农业和环境中具有广阔的应用前景，近年来成为土壤学和环境科学领域的研究热点。从微观结构上看，生物炭表面具有疏松多孔特征，故有着比表面积大、表面能高的特点。生物炭表面官能团主要包括羧基、酚羟基、羰基、酸酐、内酯等多种基团，并具有很大的阳离子交换量（CEC），这些特征使得生物炭具有良好的吸附特性，能够对环境介质中的各种污染物进行吸附、消除，从而减少潜在的环境风险。生物炭影响农业土壤环境中持久性有机物污染物、重金属、农药、氮磷等的形态、迁移转化、生物有效性及生态效应等均已被广泛的研究人员所报道。来源于植物的农林废弃物主要是由C、H、O、N、S等元素组成，富含多种可利用生物质，其中纤维素和半纤维素是重要的两种。作为传统的农业大国，中国生物质种类多样、分布广泛，资源丰富，每年产生的农林废弃物达到7亿多吨，利用炭化技术制成生物炭是一种变废为宝的新途径，同时有助于解决农业环境问题，发展潜力巨大，在农业领域和环境学科中被认为是具有广阔发展空间的理想工具。

而现有的生物炭肥的生产方法大多将粉碎后的人畜粪便以及农林废弃物残渣以及活化剂按照一定比例进行充分混匀，干燥，高温厌氧炭化，制成生物炭肥或生物炭基肥。但由于生物炭本身呈碱性，表面含氧官能团和负电荷数量不高，对土壤中的阳离子吸附能力较小，对土壤和水体中的铵态氮和其他阳离子固持能力相对有限。在盐碱化土壤中使用会受到限制。此外目前的生物炭制备技术的生物炭产率仍然较低，且制备过程中产生的烟气等易造成二次污染，无法彻底达到节能环保的目的。

因此发明一种高效且环保的生物肥的制备方法，以此来适应于社会的需求，是一件十分有必要的事情。

发明内容

本发明所要解决的技术问题：针对目前土壤中污染物多不易被吸附，土壤的固氮、缺磷、少钾问题严重，肥料发挥肥效时间短，营养不全面的问题，提供了一种用于土壤治理的复合生物肥的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：

一种用于土壤治理的复合生物肥的制备方法，该制备方法包括如下步骤：

（1）将在猪粪、花生壳烘干，放入真空管式炉中，热解，在热解管中持续通入N₂，冷却到室温，粉碎，过筛，得生物炭，取生物炭加入生物炭改性液中浸泡，取出浸泡后生物炭，用去离子水洗涤至pH值恒定，干燥，得改性后生物炭粉末；

（2）按质量取相等的新鲜果园土壤样品3份，分别加入至固氮、解磷、解钾菌株富集培养基，富集培养，得三种富集培养液，用质量分数为0.9%的生理盐水将富集培养液稀释至10^-5的稀释级，得稀释后富集培养液，将三种稀释后富集培养液涂布各相应分离平板，恒温培养，挑选直径最大菌落，分离纯化得三类菌种的单菌落；分别将三类菌种的单菌落进一步连续3次传代，选取菌落长势良好、形态稳定菌株，将三类菌株分别接入相应固氮、解磷、解钾液体培养基扩大培养，培养，得筛选后固氮菌株培养液、解磷菌株培养液、解钾菌株培养液，离心，取沉淀，干燥，得固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末；

（3）取生物炭粉末、固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末混合均匀，得混合粉末，向混合粉末中加入磷酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾，得混合肥料，将混合肥料倒入转动的转鼓式糖衣包膜机中，加热，按照每千克肥料用50 mL粘结剂的用量，向混合肥料上喷洒粘结剂，滚动成粒，反复几次，进行包裹，即得用于土壤治理的复合生物肥。

所述步骤（1）中猪粪与花生壳的质量比为3:5，热解条件为300~400℃条件下热解2~3 h。

所述步骤（1）中生物炭改性液是将10mol/LHN0₃溶液、1mol/LHN0₃溶液、1mol/LNaOH溶液、蒸馏水按体积比10:18:15:100混合均匀，生物炭与生物炭改性液的质量比为1:10。

所述步骤（2）中固氮菌分离及筛选培养基的配方为：按质量份数计，取甘露醇8~10份，KH₂P0₄ 0.1~0.3份，MgSO₄·7H₂0 0.02~0.05份，NaCl 0.1~0.2份，CaS0₄·2H₂0 0.06~0.1份，CaC0₃ 3~5份，水l000份，琼脂15~20份，pH值7.2±0.2，121℃灭菌15min；解磷菌分离及筛选培养基的配方为：按质量份数计，取葡萄糖12~15份，(NH₄)₂SO₄0.3~0.5份，KCl 0.1~0.3份，MgS0₄·7H₂0 0.3~0.5份，Ca₃(P0₄)₂ 12~15份，FeS0₄·7H₂0 0.02~0.07份，MnS0₄·4H₂00.02~0.08份，水1000份，琼脂15~20份，pH值7.0±0.2，121℃灭菌15min；解钾菌分离及筛选培养基的配方为：按质量份数计，取蔗糖12~15份，Na₂HPO₄3~5份，MgSO₄·7H₂00.02~0.07份，FeCl₃ 0.04~0.08份，CaC0₃ 1~3份，钾长石粉12~14份，水1000份，琼脂15~20份，pH值7.0±0.5，121℃灭菌15min；固氮、解磷、解钾菌株富集、培养培养基：上述配方去掉琼脂,，其他组分不变，即得。

所述步骤（2）中新鲜果园土壤与培养基的质量比为1:8.

所述步骤（3）中生物炭粉末、固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末的质量比为25:12:8:15，混合粉末、磷酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾的质量比为9:2:3:2，粘结剂为质量分数5%的聚乙烯醇水溶液。

本发明与其他方法相比，有益技术效果是：

（1）本发明利用废弃生物质制成生物炭并对其进行改性，其表面富含羧基、酚羟基、羰基等官能团，具有较大的比表面积以及较强的离子交换能力，可以吸附土壤中的污染物，改善土壤环境；

（2）本发明从果园土壤中分离筛选出高效固氮、解磷及解钾菌株，固氮菌具有较强的固氮能力，并且能够分泌生长素，促进植株的生长和果实的发育，解磷解钾菌可将土壤中不被农作物吸收的无效钾和无效磷，转化为可被农作物吸收利用的速效钾和速效磷，同时释效土壤中硅、锰、锌、钼等多种元素，提高营养水平；解钾、解磷细菌在生命活动中产生赤霉素、细胞分裂素、吲哚乙酸等生物活性物质，可有效地刺激农作物生长发育；

（3）本发明通过有机肥料和无机肥料的混合，提高了肥料中养分的有效性，改善肥料的理化性状，改善土质，实现作物的高产高效，通过添加粘结剂实现了对混合肥料的包裹，形成了一种缓释性的肥料，易分解，延长了肥效时间，提高了肥料的利用率。

具体实施方式

土壤样品：果园土壤

生物炭改性液：10mol/LHN0₃溶液、1mol/LHN0₃溶液、1mol/L NaOH溶液、蒸馏水按体积比10:18:15:100混合均匀。

固氮菌分离及筛选培养基（无氮培养基）：按质量份数计，取甘露醇8~10份，KH₂P0₄0.1~0.3份，MgSO₄·7H₂0 0.02~0.05份，NaCl 0.1~0.2份，CaS0₄·2H₂0 0.06~0.1份，CaC0₃ 3~5份，水l000份，琼脂15~20份，pH值7.2±0.2，121℃灭菌15min。

解磷菌分离及筛选培养基：按质量份数计，取葡萄糖12~15份，(NH₄)₂SO₄0.3~0.5份，KCl 0.1~0.3份，MgS0₄·7H₂0 0.3~0.5份，Ca₃(P0₄)₂ 12~15份，FeS0₄·7H₂0 0.02~0.07份，MnS0₄·4H₂0 0.02~0.08份，水1000份，琼脂15~20份，pH值7.0±0.2，121℃灭菌15min。

解钾菌分离及筛选培养基：按质量份数计，取蔗糖12~15份，Na₂HPO₄3~5份，MgSO₄·7H₂00.02~0.07 份，FeCl₃ 0.04~0.08份，CaC0₃ 1~3份，钾长石粉12~14份，水1000份，琼脂15~20份，pH值7.0±0.5，121℃灭菌15min。

固氮、解磷、解钾菌株富集、培养培养基：上述配方去掉琼脂，其他组分不变，即得。

粘结剂：质量分数为5%的聚乙烯醇水溶液。

（1）将在猪粪、花生壳按质量比3:5置于50~60℃烘箱烘干，放入真空管式炉中，在300~400℃条件下热解2 ~3h，以500 ml/min的速率在热解管中持续通入N₂，冷却到室温，粉碎，过2mm筛，得生物炭，取生物炭按质量比1:10加入生物炭改性液中浸泡24h，取出浸泡后生物炭，用去离子水洗涤至pH值恒定，105℃烘箱内烘干，得改性后生物炭粉末；

（2）按质量取相等的新鲜土壤样品3份，分别加入至固氮、解磷、解钾菌株富集培养基，土壤与培养基的质量比为1:8，25~28℃、150 r/min震荡富集培养36~48 h，得三种富集培养液，用质量分数为0.9%的生理盐水将富集培养液稀释至10^-5的稀释级，得稀释后富集培养液，将三种稀释后富集培养液涂布各相应分离平板，28℃恒温培养4 d，挑选直径较大菌落，分离纯化获得三类菌种的单菌落；分别将三类菌种的单菌落进一步连续3次传代，选取菌落长势良好、形态稳定菌株，将三类菌株分别接入相应固氮、解磷、解钾液体培养基扩大培养，25~28℃、200 r/min震荡培养3~4d，得筛选后固氮菌株培养液、解磷菌株培养液、解钾菌株培养液，离心，取沉淀，干燥，得固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末；

（3）取生物炭粉末、固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末按质量比25:12:8:15混合均匀，得混合粉末，向混合粉末中按质量比9:2:3:2加入磷酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾，得混合肥料，将混合肥料倒入转动的转鼓式糖衣包膜机中，加热到35~40℃左右，按照每千克肥料用50 mL粘结剂的用量，向混合肥料上喷洒粘结剂，滚动成粒，反复几次，进行包裹，即得用于土壤治理的复合生物肥。

实施例1

土壤样品：果园土壤

固氮菌分离及筛选培养基（无氮培养基）：按质量份数计，取甘露醇8份，KH₂P0₄ 0.1份，MgSO₄·7H₂0 0.02份，NaCl 0.1份，CaS0₄·2H₂0 0.06份，CaC0₃ 3份，水l000份，琼脂15份，pH值7.2±0.2，121℃灭菌15min。

解磷菌分离及筛选培养基：按质量份数计，取葡萄糖12份，(NH₄)₂SO₄0.3份，KCl0.1份，MgS0₄·7H₂0 0.3份，Ca₃(P0₄)₂ 12份，FeS0₄·7H₂0 0.02份，MnS0₄·4H₂0 0.02份，水1000份，琼脂15份，pH值7.0±0.2，121℃灭菌15min。

解钾菌分离及筛选培养基：按质量份数计，取蔗糖12份，Na₂HPO₄3份，MgSO₄·7H₂00.02 份，FeCl₃ 0.04份，CaC0₃ 1份，钾长石粉12份，水1000份，琼脂15份，pH值7.0±0.5，121℃灭菌15min。

粘结剂：质量分数为5%的聚乙烯醇水溶液。

（1）将在猪粪、花生壳按质量比3:5置于50℃烘箱烘干，放入真空管式炉中，在300℃条件下热解2 h，以500 ml/min的速率在热解管中持续通入N₂，冷却到室温，粉碎，过2mm筛，得生物炭，取生物炭按质量比1:10加入生物炭改性液中浸泡24h，取出浸泡后生物炭，用去离子水洗涤至pH值恒定，105℃烘箱内烘干，得改性后生物炭粉末；

（2）按质量取相等的新鲜土壤样品3份，分别加入至固氮、解磷、解钾菌株富集培养基，土壤与培养基的质量比为1:8，25℃、150 r/min震荡富集培养36 h，得三种富集培养液，用质量分数为0.9%的生理盐水将富集培养液稀释至10^-5的稀释级，得稀释后富集培养液，将三种稀释后富集培养液涂布各相应分离平板，28℃恒温培养4 d，挑选直径较大菌落，分离纯化获得三类菌种的单菌落；分别将三类菌种的单菌落进一步连续3次传代，选取菌落长势良好、形态稳定菌株，将三类菌株分别接入相应固氮、解磷、解钾液体培养基扩大培养，25℃、200 r/min震荡培养3d，得筛选后固氮菌株培养液、解磷菌株培养液、解钾菌株培养液，离心，取沉淀，干燥，得固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末；

（3）取生物炭粉末、固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末按质量比25:12:8:15混合均匀，得混合粉末，向混合粉末中按质量比9:2:3:2加入磷酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾，得混合肥料，将混合肥料倒入转动的转鼓式糖衣包膜机中，加热到35℃左右，按照每千克肥料用50mL粘结剂的用量，向混合肥料上喷洒粘结剂，滚动成粒，反复几次，进行包裹，即得用于土壤治理的复合生物肥。

实施例2

土壤样品：果园土壤

固氮菌分离及筛选培养基（无氮培养基）：按质量份数计，取甘露醇9份，KH₂P0₄ 0.2份，MgSO₄·7H₂0 0.04份，NaCl 0.1份，CaS0₄·2H₂0 0.08份，CaC0₃ 4份，水l000份，琼脂17份，pH值7.2±0.2，121℃灭菌15min。

解磷菌分离及筛选培养基：按质量份数计，取葡萄糖13份，(NH₄)₂SO₄0.4份，KCl0.2份，MgS0₄·7H₂0 0.4份，Ca₃(P0₄)₂ 14份，FeS0₄·7H₂0 0.06份，MnS0₄·4H₂0 0.04份，水1000份，琼脂17份，pH值7.0±0.2，121℃灭菌15min。

解钾菌分离及筛选培养基：按质量份数计，取蔗糖13份，Na₂HPO₄4份，MgSO₄·7H₂00.05 份，FeCl₃ 0.06份，CaC0₃ 2份，钾长石粉13份，水1000份，琼脂17份，pH值7.0±0.5，121℃灭菌15min。

粘结剂：质量分数为5%的聚乙烯醇水溶液。

（1）将在猪粪、花生壳按质量比3:5置于55℃烘箱烘干，放入真空管式炉中，在350℃条件下热解2.5h，以500 ml/min的速率在热解管中持续通入N₂，冷却到室温，粉碎，过2mm筛，得生物炭，取生物炭按质量比1:10加入生物炭改性液中浸泡24h，取出浸泡后生物炭，用去离子水洗涤至pH值恒定，105℃烘箱内烘干，得改性后生物炭粉末；

（2）按质量取相等的新鲜土壤样品3份，分别加入至固氮、解磷、解钾菌株富集培养基，土壤与培养基的质量比为1:8，27℃、150 r/min震荡富集培养42 h，得三种富集培养液，用质量分数为0.9%的生理盐水将富集培养液稀释至10^-5的稀释级，得稀释后富集培养液，将三种稀释后富集培养液涂布各相应分离平板，28℃恒温培养4 d，挑选直径较大菌落，分离纯化获得三类菌种的单菌落；分别将三类菌种的单菌落进一步连续3次传代，选取菌落长势良好、形态稳定菌株，将三类菌株分别接入相应固氮、解磷、解钾液体培养基扩大培养，26℃、200 r/min震荡培养3d，得筛选后固氮菌株培养液、解磷菌株培养液、解钾菌株培养液，离心，取沉淀，干燥，得固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末；

（3）取生物炭粉末、固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末按质量比25:12:8:15混合均匀，得混合粉末，向混合粉末中按质量比9:2:3:2加入磷酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾，得混合肥料，将混合肥料倒入转动的转鼓式糖衣包膜机中，加热到37℃左右，按照每千克肥料用50mL粘结剂的用量，向混合肥料上喷洒粘结剂，滚动成粒，反复几次，进行包裹，即得用于土壤治理的复合生物肥。

实施例3

土壤样品：果园土壤

固氮菌分离及筛选培养基（无氮培养基）：按质量份数计，取甘露醇10份，KH₂P0₄0.3份，MgSO₄·7H₂0 0.05份，NaCl 0.2份，CaS0₄·2H₂0 0.1份，CaC0₃ 5份，水l000份，琼脂20份，pH值7.2±0.2，121℃灭菌15min。

解磷菌分离及筛选培养基：按质量份数计，取葡萄糖15份，(NH₄)₂SO₄0.5份，KCl0.3份，MgS0₄·7H₂0 0.5份，Ca₃(P0₄)₂ 15份，FeS0₄·7H₂0 0.07份，MnS0₄·4H₂0 0.08份，水1000份，琼脂20份，pH值7.0±0.2，121℃灭菌15min。

解钾菌分离及筛选培养基：按质量份数计，取蔗糖15份，Na₂HPO₄5份，MgSO₄·7H₂00.07 份，FeCl₃ 0.08份，CaC0₃ 3份，钾长石粉14份，水1000份，琼脂20份，pH值7.0±0.5，121℃灭菌15min。

粘结剂：质量分数为5%的聚乙烯醇水溶液。

（1）将在猪粪、花生壳按质量比3:5置于60℃烘箱烘干，放入真空管式炉中，在400℃条件下热解3h，以500 ml/min的速率在热解管中持续通入N₂，冷却到室温，粉碎，过2mm筛，得生物炭，取生物炭按质量比1:10加入生物炭改性液中浸泡24h，取出浸泡后生物炭，用去离子水洗涤至pH值恒定，105℃烘箱内烘干，得改性后生物炭粉末；

（2）按质量取相等的新鲜土壤样品3份，分别加入至固氮、解磷、解钾菌株富集培养基，土壤与培养基的质量比为1:8，28℃、150 r/min震荡富集培养48 h，得三种富集培养液，用质量分数为0.9%的生理盐水将富集培养液稀释至10^-5的稀释级，得稀释后富集培养液，将三种稀释后富集培养液涂布各相应分离平板，28℃恒温培养4 d，挑选直径较大菌落，分离纯化获得三类菌种的单菌落；分别将三类菌种的单菌落进一步连续3次传代，选取菌落长势良好、形态稳定菌株，将三类菌株分别接入相应固氮、解磷、解钾液体培养基扩大培养，28℃、200 r/min震荡培养4d，得筛选后固氮菌株培养液、解磷菌株培养液、解钾菌株培养液，离心，取沉淀，干燥，得固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末；

（3）取生物炭粉末、固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末按质量比25:12:8:15混合均匀，得混合粉末，向混合粉末中按质量比9:2:3:2加入磷酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾，得混合肥料，将混合肥料倒入转动的转鼓式糖衣包膜机中，加热到40℃左右，按照每千克肥料用50mL粘结剂的用量，向混合肥料上喷洒粘结剂，滚动成粒，反复几次，进行包裹，即得用于土壤治理的复合生物肥。

对比例：河北某生物科技有限公司生产的生物肥料

方法：选取一块4亩大小的农田，将其分为4份作为试验场所，分别使用实施例与对比例所制备的生物肥料，测定其营养元素的含量变化值与肥料发挥效果的时间的长短。

根据NY/T 798-2004检测使用肥料后土壤中的固氮、磷和钾的含量的变化值，以此来表征生物肥料的性能的好坏。

生物肥料的具体检测情况如表1

表1

注：实验前检测土壤中的固氮含量102.32mg/kg，磷含量47.28mg/kg，钾含量74.25mg/kg。

由上可知，本发明所制备的复合肥料可以有效的增加土壤中的固氮、磷、钾的含量，且肥效的有效时间长，是一种安全且高效的复合生物肥料，值得推广和使用。

Claims

1.一种用于土壤治理的复合生物肥的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：

将在猪粪、花生壳烘干，放入真空管式炉中，热解，在热解管中持续通入N₂，冷却到室温，粉碎，过筛，得生物炭，取生物炭加入生物炭改性液中浸泡，取出浸泡后生物炭，用去离子水洗涤至pH值恒定，干燥，得改性后生物炭粉末；

2.根据权利要求1所述的用于土壤治理的复合生物肥的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中猪粪与花生壳的质量比为3:5，热解条件为300~400℃条件下热解2~3 h。

3.根据权利要求1所述的用于土壤治理的复合生物肥的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中生物炭改性液是将10mol/LHN0₃溶液、1mol/LHN0₃溶液、1mol/L NaOH溶液、蒸馏水按体积比10:18:15:100混合均匀，生物炭与生物炭改性液的质量比为1:10。

4.根据权利要求1所述的用于土壤治理的复合生物肥的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中固氮菌分离及筛选培养基的配方为：按质量份数计，取甘露醇8~10份，KH₂P0₄ 0.1~0.3份，MgSO₄·7H₂0 0.02~0.05份，NaCl 0.1~0.2份，CaS0₄·2H₂0 0.06~0.1份，CaC0₃ 3~5份，水l000份，琼脂15~20份，pH值7.2±0.2，121℃灭菌15min；解磷菌分离及筛选培养基的配方为：按质量份数计，取葡萄糖12~15份，(NH₄)₂SO₄0.3~0.5份，KCl 0.1~0.3份，MgS0₄·7H₂0 0.3~0.5份，Ca₃(P0₄)₂ 12~15份，FeS0₄·7H₂0 0.02~0.07份，MnS0₄·4H₂0 0.02~0.08份，水1000份，琼脂15~20份，pH值7.0±0.2，121℃灭菌15min；解钾菌分离及筛选培养基的配方为：按质量份数计，取蔗糖12~15份，Na₂HPO₄3~5份，MgSO₄·7H₂00.02~0.07 份，FeCl₃0.04~0.08份，CaC0₃ 1~3份，钾长石粉12~14份，水1000份，琼脂15~20份，pH值7.0±0.5，121℃灭菌15min；固氮、解磷、解钾菌株富集、培养培养基：上述配方去掉琼脂，其他组分不变，即得。

5.根据权利要求1所述的用于土壤治理的复合生物肥的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中新鲜果园土壤与培养基的质量比为1:8.

根据权利要求1所述的用于土壤治理的复合生物肥的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中生物炭粉末、固氮菌粉末、解磷菌粉末、解钾菌粉末的质量比为25:12:8:15，混合粉末、磷酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾的质量比为9:2:3:2，粘结剂为质量分数5%的聚乙烯醇水溶液。