CN107484719A - 加州新小绥螨剖腹卵的一种获得方法 - Google Patents
加州新小绥螨剖腹卵的一种获得方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及加州新小绥螨剖腹卵的一种获得方法,其特征是采用剖腹的形式人为从加州新小绥螨雌成螨体内获取尚未产出卵的方法,包含待剖腹加州新小绥螨雌成螨的获得与其在载玻片上的放置、加州新小绥螨剖腹卵的获取与其存放4个步骤。本发明可以十分巧妙的获得加州新小绥螨剖腹卵,剖腹卵的成功获取能够为进一步研究加州新小绥螨生殖机理提供更多基础材料,弄清加州新小绥螨的生殖机理又有利于人为诱导改变加州新小绥螨雌雄比。
Description
技术领域
本发明涉及加州新小绥螨剖腹卵的一种获得方法,属于加州新小绥螨基础生物学研究领域。
背景技术
加州新小绥螨是重要的小型有害生物天敌,其生殖具有特殊性,即雌雄后代均从受精卵发育而来,但雄性后代因父系基因异染色质化后消失而发育成类单倍体。这被认为是由植绥螨科捕食螨特殊的生殖方式决定,即假产雄孤雌生殖(Pseudoarrhenotoky)(Hoy, 1985; Nagalkerke & Sabelis 1998; Sabelis et al. 2002)。近年来,加州新小绥螨除了作为生物防治用天敌外,其生物学习性研究也受到关注,尤其是假产雄孤雌生殖这一特殊的生殖现象。
Nelson-Rees et al.(1980)观察了西方静走螨卵发育过程中的核型变化认为:在卵产出后0-24小时内,部分卵的胚胎细胞一半染色质(3/6)开始固缩为异染色质;产出后24-48小时内,这部分胚胎中大部分细胞出现异染色质化现象,随后异染色质被排出细胞,胚胎发育为单倍体雄性。这一研究结果目前仍是已发表的对植绥螨科性别决定理论最详细的描述,其认为植绥螨性别决定发生在卵产出后的初期。
事实是否如此呢,为了探索加州新小绥螨的卵在产出前是否已经存在单倍体核型,即卵产出前发育为雄螨的卵中的一半染色体是否已经发生异质化或丢失。需要对剖腹卵染色体进行研究,观察染色体是单倍体或二倍体。
但是由于加州新小绥螨个体微小,只有几百个微米,且身体比较脆弱操作过程中很容易对其产生损伤导致体液外流,体驱干瘪无法开展任何试验,进行显微操作难度相当大、难以从单一个体获得完整的组织样本,因此无论是从形态结构到细胞水平,研究起来都十分困难。现有资料中也没有如何获取剖腹卵、如何取出完整的剖腹卵、卵取出后如何保存等方法的报道。
为解决这一系列问题,本发明提供一种获得加州新小绥螨剖腹卵的方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种获得加州新小绥螨剖腹卵的方法,能够为加州新小绥螨剖腹卵的获得提供获取方法,并为剖腹卵染色体的研究提供试验材料。
本发明是采用剖腹的形式人为从加州新小绥螨雌成螨体内获取尚未产出卵的方法,包含待剖腹加州新小绥螨雌成螨的获得与其在载玻片上的放置、加州新小绥螨剖腹卵的获取与其存放4个步骤,所有操作均在体式显微镜下进行,具体操作方法为:
(1)待剖腹加州新小绥螨雌成螨的获得:从加州新小绥螨的饲养群体中挑取加州新小绥螨的卵单独饲养至成螨,然后将一雌一雄放在饲养小室内进行配对,初羽化的雌雄加州新小绥螨会很快进行交配,待交配完成后,继续给雌成螨提供充足的猎物,12-15小时雌成螨腹部膨大有卵后即获得待剖腹加州新小绥螨雌成螨;
(2)待剖腹加州新小绥螨雌成螨在载玻片上的放置:滴一滴清水到载玻片上,挑取待解剖的雌成螨放在载玻片上的清水中,并用昆虫针和细毛笔保持雌成螨背面朝上,清水滴入量不要过多,避免雌成螨漂浮在水层上,确保雌成螨仍然能够接触到载玻片;
(3)加州新小绥螨剖腹卵的获取:先用3号粗昆虫针按住加州新小绥螨雌成螨的鄂体部分,再用0号细昆虫针从加州新小绥螨头部开始向腹部轻轻挤压至腹部破裂,即可看见加州新小绥螨剖腹卵,随后用0号细毛笔尖部将卵周围的组织轻轻拨开,此步骤一定要在清水中进行,防止卵失水干瘪;
(4)加州新小绥螨剖腹卵的存放:加州新小绥螨剖腹卵处于水中时间过长容易破裂,需要快速用0号细毛笔将剖腹卵从水中小心挑出后放置于100%的酒精中存放备用,即获得加州新小绥螨剖腹卵。
本发明可以十分巧妙的获得加州新小绥螨剖腹卵,剖腹卵的成功获取能够为进一步研究加州新小绥螨生殖机理提供更多基础材料,弄清加州新小绥螨的生殖机理又有利于人为诱导改变加州新小绥螨雌雄比。
具体实施方式
实施例 加州新小绥螨剖腹卵的获得方法
具体操作方法包括以下4部分,所有操作均在体式显微镜下进行:
(1)待剖腹加州新小绥螨雌成螨的获得:从加州新小绥螨的饲养群体中挑取加州新小绥螨的卵单独饲养至成螨,然后将一雌一雄放在饲养小室内进行配对,初羽化的雌雄加州新小绥螨会很快进行交配,待交配完成后,继续给雌成螨提供充足的猎物,12-15小时雌成螨腹部膨大有卵后即获得待剖腹加州新小绥螨雌成螨;
(2)待剖腹加州新小绥螨雌成螨在载玻片上的放置:滴一滴清水到载玻片上,挑取待解剖的雌成螨放在载玻片上的清水中,并用昆虫针和细毛笔保持雌成螨背面朝上,清水滴入量不要过多,避免雌成螨漂浮在水层上,确保雌成螨仍然能够接触到载玻片;
(3)加州新小绥螨剖腹卵的获取:先用3号粗昆虫针按住加州新小绥螨雌成螨的鄂体部分,再用0号细昆虫针从加州新小绥螨头部开始向腹部轻轻挤压至腹部破裂,即可看见加州新小绥螨剖腹卵,随后用0号细毛笔尖部将卵周围的组织轻轻拨开,此步骤一定要在清水中进行,防止卵失水干瘪;
(4)加州新小绥螨剖腹卵的存放:加州新小绥螨剖腹卵处于水中时间过长容易破裂,需要快速用0号细毛笔将剖腹卵从水中小心挑出后放置于100%的酒精中存放备用,即获得加州新小绥螨剖腹卵。
Claims (1)
1.加州新小绥螨剖腹卵的一种获得方法,其特征是采用剖腹的形式人为从加州新小绥螨雌成螨体内获取尚未产出卵的方法,包含待剖腹加州新小绥螨雌成螨的获得与其在载玻片上的放置、加州新小绥螨剖腹卵的获取与其存放4个步骤,所有操作均在体式显微镜下进行,具体操作方法为:
(1)待剖腹加州新小绥螨雌成螨的获得:从加州新小绥螨的饲养群体中挑取加州新小绥螨的卵单独饲养至成螨,然后将一雌一雄放在饲养小室内进行配对,初羽化的雌雄加州新小绥螨会很快进行交配,待交配完成后,继续给雌成螨提供充足的猎物,12-15小时雌成螨腹部膨大有卵后即获得待剖腹加州新小绥螨雌成螨;
(2)待剖腹加州新小绥螨雌成螨在载玻片上的放置:滴一滴清水到载玻片上,挑取待解剖的雌成螨放在载玻片上的清水中,并用昆虫针和细毛笔保持雌成螨背面朝上,清水滴入量不要过多,避免雌成螨漂浮在水层上,确保雌成螨仍然能够接触到载玻片;
(3)加州新小绥螨剖腹卵的获取:先用3号粗昆虫针按住加州新小绥螨雌成螨的鄂体部分,再用0号细昆虫针从加州新小绥螨头部开始向腹部轻轻挤压至腹部破裂,即可看见加州新小绥螨剖腹卵,随后用0号细毛笔尖部将卵周围的组织轻轻拨开,此步骤一定要在清水中进行,防止卵失水干瘪;
(4)加州新小绥螨剖腹卵的存放:加州新小绥螨剖腹卵处于水中时间过长容易破裂,需要快速用0号细毛笔将剖腹卵从水中小心挑出后放置于100%的酒精中存放备用,即获得加州新小绥螨剖腹卵。
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李隆术等: "《蜱螨学》", 30 November 1988 * |
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