CN107384953B - 拟南芥糖基转移酶ugt84a2在调节植物开花时间中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了拟南芥糖基转移酶UGT84A2在调节植物开花时间中的应用。本发明通过拟南芥的糖基转移酶UGT84A2过表达,调节植物生长发育,产生开花延迟、开花时莲座叶数增加和/营养生长阶段的叶柄变长的农艺性状。开花时间是作物生产中的重要农艺性状,本发明实施后将为农业生产带来重大经济效益。
Description
技术领域
本发明属于植物生长发育调控和农作物遗传改良技术领域,具体涉及一种糖基转移酶调控植物生长发育的应用,尤其涉及一种拟南芥糖基转移酶UGT84A2在调节植物开花时间中的应用。
背景技术
花发育是高等植物从营养生长向生殖生长转换、实现世代交替的关键环节。植物开花是一个综合发育过程,包括开花诱导、信号传递、属性决定、器官发生,涉及不同发育方式的转换。高等植物的开花诱导过程受自身遗传因子和外界环境因素两方面决定,是开花基因在时间和空间上顺序表达的结果。植物接受环境因子(如光周期、温度、水分、营养等)的诱导和自身发育的调节,植物叶片产生成花物质或信号,成花物质或信号通过输导组织被运输到茎尖,经过一系列信号转导过程,启动成花决定过程中的控制基因,在复杂的基因互作网络调控下,营养型的顶端分生组织属性逐渐改变,成为花序分生组织,随后在花序分生组织侧翼形成花分生组织,进而导致花器官发生。
开花时间调节被广泛应用在科研和农业生产中,目前,利用模式植物拟南芥做了大量遗传学研究,鉴定出了一些参与调控植物开花的重要基因,其中关键基因包括CONSTANS(CO),FLOWERING LOCUS C(FLC),FLOWERING LOCUS T(FT),SUPPRESSOR OFOVEREXPRESSION OF CONSTANS(SOC1)以及LEAFY(LFY)等(Michaels and Amasino,1999;Lee et al.,2000;Samach et al.,2000),并确定存在至少4条调控开花的信号途径,即光周期途径、春化途径、自主途径、赤霉素途径。由于开花诱导过程是一个复杂的网络状信号传导途径,是多个基因共同作用的结果,不是由某个单一基因所能控制的,而目前的研究仅限于主干途径中的几个关键基因对开花诱导的影响,整个信号传导通路并不明朗。
植物体内有一类酶,被称为糖基转移酶,它们专门负责植物体众多化合物的糖基化修饰,即催化某些化合物形成相应的糖酯(或糖苷)。糖基化是一种普遍的生理现象,是植物细胞维持代谢平衡的主要机制之一,在维持植物正常生长发育、应对环境压力等方面具有重要的作用(Lim et al,2004;王军等,2009)。到目前为止,生物界存在的糖基转移酶按照催化的底物性质和序列相关性可以分为97个家族。
针对开花时间调节,目前已经从拟南芥发现了一个糖基转移酶,即UGT87A2(Wanget al.2012),该基因突变导致拟南芥晚花。然而,目前尚未发现其他的拟南芥糖基转移酶在调控开花时间中的作用。
发明内容
目前,国际上对于植物开花与分子糖基化修饰之间的关系研究非常缺乏,针对这一现状,本发明从糖基化修饰的角度研究植物开花诱导过程,以便指导科研及农业生产。针对现有技术存在的问题,本发明的目的之一是提供一种拟南芥糖基转移酶蛋白UGT84A2在调控植物生长发育中的应用。
本发明的目的之二是提供一种拟南芥糖基转移酶UGT84A2的编码基因在调控植物生长发育中的应用。
调控植物生长发育包括调控植物的开花起始时间、开花时莲座叶数和/营养生长阶段的叶柄长度。
本发明的目的之三在于提供选育植物品种的方法,包括将拟南芥糖基转移酶UGT84A2表达量较高的植株作为亲本进行杂交的步骤,选育的植物品种具有如下农艺性状:开花起始时间延迟、开花时莲座叶数增加和/营养生长阶段的叶柄变长。
本发明的目的还包括提供一种培育转基因植物的方法,包括向受体植物中导入拟南芥糖基转移酶UGT84A2的编码基因得到转基因植物的步骤,筛选的转基因植物品种具有如下农艺性状:开花起始时间延迟、开花时莲座叶数增加和/营养生长阶段的叶柄变长。
本发明实施后可带来如下有益效果:
本发明证明了拟南芥的糖基转移酶UGT84A2可以参与调节拟南芥开花时间,其过表达导致拟南芥开花延迟、开花时莲座叶数增加和/营养生长阶段的叶柄变长。开花时间是作物生产中的重要农艺性状,本发明实施后将为农业生产带来重大经济效益。本发明提供新的糖基转移酶UGT84A2过表达体能够导致拟南芥开花时间延迟约1周。与已经报道的UGT87A2不同的是,本发明所述糖基转移酶UGT84A2的过表达导致拟南芥开花延迟。
附图说明
图1 UGT84A2基因的表达特异性观察。a:1天苗;b:2天苗;c:3天苗;d:5天苗;e、f:7天苗;g:10天苗;h、i:12天苗;j:14天苗;k、l:花序和幼嫩角果。第12天开始,UGT84A2在茎尖分生组织中强烈表达,并且在叶柄、叶片、表皮毛中有较强的表达。
图2转基因得到的植株UGT84A2表达水平通过琼脂糖凝胶电泳检测。其中,TUBULIN为内参标记;UGT84A2为通过RT-PCR的得到的目的条带,代表基因的表达量;UGT84A2OE2-2和UGT84A2OE8-4为通过转基因得到的两个高表达株系。
图3 UGT84A2过表达株系生殖生长阶段晚花表型。其中WT为对照组;UGT84A2OE2-2和UGT84A2OE8-4为实验组;图示为生长28天后,对照组野生型拟南芥开花,但实验组UGT84A2高表达株系不开花,且开花时间较野生型晚约1周。
图4开花时莲座叶叶片数统计。其中WT为对照组;UGT84A2OE2-2和UGT84A2OE8-4为实验组;统计对照组和实验组各20个独立株系抽薹0.5cm时莲座叶叶片数;*代表与对照组有显著性差异。
图5 UGT84A2过表达株系幼苗叶卷曲表型。其中WT为对照组;UGT84A2OE2-2和UGT84A2OE8-4为实验组;箭头所指为取第7、8片真叶叶卷曲部位截取横向面。
图6 UGT84A2过表达株系叶柄长度(Leaf petiole length)统计。其中WT为对照组;UGT84A2OE2-2和UGT84A2OE8-4为实验组。叶柄长度为统计幼苗期各20个独立植株第7、8片真叶叶柄长度的平均数;*代表与对照组有显著性差异。
具体实施方式
应该指出,以下详细说明都是示例性的,旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明,本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是,这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式,而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的,除非上下文另外明确指出,否则单数形式也意图包括复数形式,此外,还应当理解的是,当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时,其指明存在特征、步骤、操作和/或它们的组合。
本发明的一个实施方案中,提供了拟南芥糖基转移酶蛋白UGT84A2在调控植物生长发育中的应用。
所述拟南芥糖基转移酶蛋白UGT84A2的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
本发明所述“调控植物生长发育”主要包括调控植物的开花起始时间、开花时莲座叶数和/营养生长阶段的叶柄长度。通过调节蛋白和/编码蛋白的基因的表达量,使开花起始时间延迟、开花时莲座叶数增加和/营养生长阶段的叶柄变长。
本发明的另一实施方案中,提供了拟南芥糖基转移酶蛋白UGT84A2的编码基因在调控植物生长发育中的应用。
本发明通过在植物体中过表达拟南芥糖基转移酶UGT84A2的编码基因,来调控植物生长发育,具体表现为植物体中过表达拟南芥糖基转移酶UGT84A2的编码基因后,开花起始时间延迟、开花时莲座叶数增加和/营养生长阶段的叶柄变长。
本发明的另一实施方案中,提供了一种选育植物品种的方法,包括将拟南芥糖基转移酶UGT84A2表达量较高的植株作为亲本进行杂交的步骤,选育的植物品种具有如下农艺性状:开花起始时间延迟、开花时莲座叶数增加和/营养生长阶段的叶柄变长。
本发明所述开花起始时间即为营养生长向生殖生长转换的过渡时间,因此,开花起始时间延迟即营养生长时间延长,生殖生长滞后。
本发明的实施方案中还包括提供一种培育转基因植物的方法,包括向受体植物中导入拟南芥糖基转移酶UGT84A2的编码基因得到转基因植物的步骤,筛选的转基因植物品种具有如下农艺性状:开花起始时间延迟、开花时莲座叶数增加和/营养生长阶段的叶柄变长。
本发明在上述应用或方法中,所述拟南芥糖基转移酶蛋白UGT84A2的编码基因是如下1)至4)中任一所述的DNA分子:
1)编码序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的DNA分子;
2)序列表中SEQ ID NO:1所示的DNA分子;
3)在严格条件下与1)-2)任一所限定的DNA分子杂交且编码由序列表中SEQ IDNO:2所示氨基酸序列组成的蛋白质的DNA分子;
4)与1)-3)任一限定的DNA分子具有90%以上同源性且编码由序列表中SEQ IDNO:2所示氨基酸序列组成的蛋白质的DNA分子。
上述严格条件可为用6×SSC,0.5%SDS的溶液,在65℃下杂交,然后用2×SSC,0.1%SDS和1×SSC,0.1%SDS各洗膜一次。
在培育转基因植物的方法中,所述由序列表中SEQ ID NO:2所示氨基酸序列组成的蛋白质的编码基因是通过含有所述蛋白质的编码基因的重组表达载体导入所述受体植物中的。
所述重组表达载体可用现有的植物表达载体构建。所述植物表达载体包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等,如pCAMBIA-1300-221、pGreen0029、pCAMBIA3301、pBI121、pBin19、pCAMBIA2301、pCAMBIA1301-UbiN或其它衍生植物表达载体。
所述植物表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域,即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3’端。使用所述基因构建重组表达载体时,在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子,例如花椰菜花叶病毒(CAMV)35S启动子、泛素基因Ubiquitin启动子(pUbi)、胁迫诱导型启动子rd29A等,它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用;此外,使用本发明的基因构建重组表达载体时,还可使用增强子,包括翻译增强子或转录增强子,这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等,但必需与编码序列的阅读框相同,以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的,可以是天然的,也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选,可对所用重组表达载体进行加工,如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因、具有抗性的抗生素标记物或是抗化学试剂标记基因等,也可不加任何选择性标记基因,直接以逆境筛选转化植株。
在本发明中,所述重组表达载体中启动所述蛋白质的编码基因转录的启动子为35S启动子。
更为具体的,所述重组表达载体为将SEQ ID NO:1所示基因插入pBI121载体的多克隆位点BamHI和SalI之间后得到的重组质粒。
在上述方法中,将携带有SEQ ID NO:1所示基因的所述重组表达载体导入所述受体植物,具体可为:通过使用Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化植物细胞或组织,并将转化的植物组织培育成植株。
在上述应用或方法中,所述植物即可为双子叶植物,也可为单子叶植物。
进一步,所述双子叶植物可为十字花科植物。在本发明的一个实施例中,所述植物具体为拟南芥,更加具体为拟南芥野生型(Col-0生态型)。
在本发明中,以上所有所述由序列表中SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的蛋白质均可替换为SEQ ID NO:2所示蛋白质与标签蛋白所形成的融合蛋白,以其不影响拟南芥糖基转移酶蛋白UGT84A2表达为准。
实施例1拟南芥UGT84A2组织特异性表达分析
1、UGT84A2P::GUS重组质粒构建及其转基因纯合株系获得
从野生型拟南芥Col-0基因组中扩增了UGT84A2基因的启动子序列(启动子序列如SEQ ID NO:5所示,扩增引物分别如SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7所示),命名为UGT84A2P。克隆UGT84A2P启动子序列并连接到中间载体PBSK上,经过PCR验证和酶切验证后送测序。将UGT84A2启动子测序结果与TAIR数据库中发表序列进行对比,结果为100%一致,证明克隆到的启动子序列完全正确,可用于构建GUS报告基因的植物表达载体。将克隆载体酶切后进行琼脂糖凝胶电泳,并回收UGT84A2启动子,替换pBI121载体的CaMV35S启动子,构成UGT84A2P与GUS基因的融合植物表达载体。将构建好的GUS报告基因植物表达载体转化拟南芥,经过卡那霉素三代筛选,最终分别筛选到单拷贝插入的纯合体。
2、GUS染色分析基因表达的组织特异性
将前述UGT84A2P::GUS转基因纯合体株系各个阶段材料加入90%丙酮固定,清洗后加入2mM的X-Gluc染色液,室温或37℃保温过夜。去除材料上的染色液,75%乙醇清洗材料。无水乙醇浸泡材料至脱色完全,置于实体解剖显微镜下观察。
GUS组织化学染色实验表明,在1-3天之内的萌发期,UGT84A2在萌发的种子、子叶、下胚轴中都有较强表达。在随后的生长发育阶段的第7天,UGT84A2在新生的真叶、表皮毛有强烈表达,在主根以及侧根中有不连续表达,但在根尖中不表达。而以前报道的IBA糖基转移酶基因UGT74D1、UGT74E2主要在根尖和侧根有较强表达,在表皮毛不表达(Tognetti etal.,2010)。说明本发明涉及的UGT84A2在表达上具有区别于其他IBA糖基转移酶基因的特异性。到第10天,GUS染色主要集中在叶柄和叶脉中。值得注意的是,第12天开始,UGT84A2在茎尖分生组织中强烈表达,并且在叶柄、叶片、表皮毛中有较强的表达。生殖发育期35天时,在雌蕊、柱头、胚胎中有较强表达(见图1)。
实施例2拟南芥糖基转移酶基因UGT84A2的克隆、过表达体及转基因株系构建
1、拟南芥糖基转移酶基因UGT84A2的克隆
本发明涉及的糖基转移酶基因UGT84A2是通过RT-PCR扩增技术从拟南芥中克隆的。扩增时用的引物是:UGT84A2-a:5’-TCGGATCCATGGAGCTAGAAT-3’(SEQ ID NO:3);UGT84A2-b:5’-CAGTCGACTTAAAAGCTTT-3’(SEQ ID NO:4)。
RT-PCR扩增程序为:94℃(预变性),5min;94℃(变性),10s;55℃(退火),15s;72℃(延伸),1.5min;35cycle;72℃(终延伸),10min。回收并纯化扩增产物。将扩增获得的目的基因UGT84A2与EcoRV单酶切的中间载体pBluescript SK连接,获得载体pB84A2,对克隆到的基因进行测序。
2、UGT84A2的序列信息与特性
对克隆的糖基转移酶基因UGT84A2测序后发现,该基因的cDNA编码区长度为1491bp,编码496个氨基酸,编码的蛋白质分子量为55.8KD,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。经过序列比对,目的基因测序序列与TAIR网站公布的序列一致,说明克隆到的基因即为UGT84A2。
3、拟南芥糖基转移酶基因UGT84A2的过表达载体构建
用BamHI和SalI双酶切前述pB84A2中间载体,获得UGT84A2目的基因片段,并回收。同时用BamHI和SalI双酶切过表达载体pBI121,回收得到载体片段。将UGT84A2片段与载体pBI121通过T4连接酶在体外进行连接,即得到拟南芥糖基转移酶基因UGT84A2的过表达载体pBI121-84A2。
4、转化农杆菌、获得转基因株系及高表达株系筛选
将上述过表达载体pBI121-84A2转化农杆菌GV3101,经PCR和酶切验证正确后,保存菌种,此菌种用于浸染拟南芥获得转基因株系。通过卡那霉素三代筛选后,获得纯合的转基因株系,以TUBULING为内参基因,通过RT-PCR检测UGT84A2基因的表达量(见图2)。最终确定UGT84A2OE2-2和UGT84A2OE8-4为高表达转基因株系。
实施例3拟南芥UGT84A2高表达株系表型分析
1、拟南芥UGT84A2高表达株系晚花表型分析
到了生殖生长阶段,统计野生型和过表达体开花时间(以抽薹0.5cm为标准),发现UGT84A2的高表达导致花期推迟4-7天的表型(见图3)。统计上述二系抽薹时莲座叶叶片数发现,WT抽薹时的莲座叶数为12.29±0.49,突变体brt1-1为11.67±0.50,突变体84a2 3-13为11.84±0.78,过表达体84A2OE 2-2为13.67±0.58,过表达体84A2OE 8-4为15.33±0.71(见图4),过表达体的叶片数较野生型增多。
2、拟南芥UGT84A2高表达株系叶表型分析
在营养生长阶段,长日照下生长2-4周,过表达体株系UGT84A2OE 2-2和UGT84A2OE8-4叶柄较野生型向内侧卷曲,且高表达株系叶柄较WT明显变长(见附图5、6)。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 临沂大学
<120> 拟南芥糖基转移酶UGT84A2在调节植物开花时间中的应用
<130>
<160> 5
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1491
<212> DNA
<213> 糖基转移酶基因UGT84A2
<400> 1
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<212> PRT
<213> 糖基转移酶UGT84A2
<400> 2
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1 5 10 15
Ser Phe Pro Gly Gln Gly His Val Asn Pro Leu Leu Arg Leu Gly Lys
20 25 30
Leu Leu Ala Ser Lys Gly Leu Leu Ile Thr Phe Val Thr Thr Glu Ser
35 40 45
Trp Gly Lys Lys Met Arg Ile Ser Asn Lys Ile Gln Asp Arg Val Leu
50 55 60
Lys Pro Val Gly Lys Gly Tyr Leu Arg Tyr Asp Phe Phe Asp Asp Gly
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Asp Glu Ala Ser Arg Thr Asn Leu Thr Ile Leu Arg
85 90 95
Pro His Leu Glu Leu Val Gly Lys Arg Glu Ile Lys Asn Leu Val Lys
100 105 110
Arg Tyr Lys Glu Val Thr Lys Gln Pro Val Thr Cys Leu Ile Asn Asn
115 120 125
Pro Phe Val Ser Trp Val Cys Asp Val Ala Glu Asp Leu Gln Ile Pro
130 135 140
Cys Ala Val Leu Trp Val Gln Ser Cys Ala Cys Leu Ala Ala Tyr Tyr
145 150 155 160
Tyr Tyr His His Asn Leu Val Asp Phe Pro Thr Lys Thr Glu Pro Glu
165 170 175
Ile Asp Val Gln Ile Ser Gly Met Pro Leu Leu Lys His Asp Glu Ile
180 185 190
Pro Ser Phe Ile His Pro Ser Ser Pro His Ser Ala Leu Arg Glu Val
195 200 205
Ile Ile Asp Gln Ile Lys Arg Leu His Lys Thr Phe Ser Ile Phe Ile
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Leu Ser Leu Pro Gly Val Ile Arg Pro Leu Gly Pro Leu Tyr Lys Met
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Ala Lys Thr Val Ala Tyr Asp Val Val Lys Val Asn Ile Ser Glu Pro
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Thr Asp Pro Cys Met Glu Trp Leu Asp Ser Gln Pro Val Ser Ser Val
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Asp Glu Ile Ala Tyr Gly Val Leu Asn Ala Asp Val Thr Phe Leu Trp
305 310 315 320
Val Ile Arg Gln Gln Glu Leu Gly Phe Asn Lys Glu Lys His Val Leu
325 330 335
Pro Glu Glu Val Lys Gly Lys Gly Lys Ile Val Glu Trp Cys Ser Gln
340 345 350
Glu Lys Val Leu Ser His Pro Ser Val Ala Cys Phe Val Thr His Cys
355 360 365
Gly Trp Asn Ser Thr Met Glu Ala Val Ser Ser Gly Val Pro Thr Val
370 375 380
Cys Phe Pro Gln Trp Gly Asp Gln Val Thr Asp Ala Val Tyr Met Ile
385 390 395 400
Asp Val Trp Lys Thr Gly Val Arg Leu Ser Arg Gly Glu Ala Glu Glu
405 410 415
Arg Leu Val Pro Arg Glu Glu Val Ala Glu Arg Leu Arg Glu Val Thr
420 425 430
Lys Gly Glu Lys Ala Ile Glu Leu Lys Lys Asn Ala Leu Lys Trp Lys
435 440 445
Glu Glu Ala Glu Ala Ala Val Ala Arg Gly Gly Ser Ser Asp Arg Asn
450 455 460
Leu Glu Lys Phe Val Glu Lys Leu Gly Ala Lys Pro Val Gly Lys Val
465 470 475 480
Gln Asn Gly Ser His Asn His Val Leu Ala Gly Ser Ile Lys Ser Phe
485 490 495
<210> 3
<211> 21
<212> DNA
<213> UGT84A2-a
<400> 3
tcggatccat ggagctagaa t 21
<210> 4
<211> 19
<212> DNA
<213> UGT84A2-b
<400> 4
cagtcgactt aaaagcttt 19
<210> 5
<211> 1507
<212> DNA
<213> UGT84A2启动子
<400> 5
taatattgtt tcaataattt aaagtagtta attatattca atagtattta ttatcactta 60
gtttttttta tttataaatt ttatcgatta atctggttag ttttagtaga aacgtatcaa 120
aatgttttac agtggatttt tccccgaaaa accatcacaa tgtcggtcct aaatttaaaa 180
tgttttctga ctaatgtaaa gattacatgt tactgactac catatgaact gttttggccc 240
aaacccaaac tttccacaca tgtaattttt gtttttaaga tagattacac ttgagttagt 300
ttctttgaag ctttccccaa ttctcattta ccactaaacc acaactatgt gggcaaaata 360
ggatttgctt tttgtgtcgg atgttttaca caatttatta cagctctcat gcattaacac 420
tattttgatt tttgaataac aatttgtaga agaaaactaa attcacaata aaaagctgtc 480
cggtggcaaa aacaaaactc atttatggtt cgtagcacat caacgagttg gaactactcg 540
aacgaaactg ggtggaattg aaactagtcc tctaaattag ttaaccaaca gaattataac 600
acgtcacctt tttaattttg tggaattaat ggtactaatc tccaagattt tttaatttct 660
acgactctac caacaaaaac aaaaacttaa gtaagaggtt ttaaaactcg ccacgccgtt 720
tctaactttt ttgtaacgtt aacagaatta catatcttcg tccaaaaata tctcacagca 780
atagtcaacg acgatcagtt tcactttcac cggttaggat tgaggtagat ataatttggg 840
acgttgctgg actaaattat gaatacggta tacattttgg tgaatggtcg ttgaatgtgt 900
atctttgacg attgtatctc aaatataaaa agccaactat cttggtacta aattgaagag 960
caatgaaatt atttctataa ttttccattc cgttaatttt ctatctcgtt ctatcggtat 1020
gatccctttt attcattttg cattttacaa gttagagcta catgcatcta acctacgttg 1080
aatattgcaa ttttttttat tgcgatacct agtattgttt ttgggttgtt tctgagatga 1140
aatttcaatc ttttggacca atcatcgaat attcctcaaa accacatgga atttagagag 1200
gtgacgttat atttctctat gatcttttct ctttttggtt tataaaagtg tatataataa 1260
gggaaacaaa tgagtgaaaa tttctgtatc cacgtcacct actgacccga agtattaact 1320
atcgtgcatt atatgaaatc cagatattga agatagtaac aaattttaca ataatttcaa 1380
tagagaaaat caacaagtat taaataacgc aatgggccaa tatgcgacgg taataattaa 1440
gagctcctta attattcacc ttgcttgtct ctcctattta agacgtattt cttctcttct 1500
accatcc 1507
<210> 6
<211> 29
<212> DNA
<213> UGT84A2启动子引物P1
<400> 1
acatgcatgc taatattgtt tcaataatt 29
<210> 7
<211> 29
<212> DNA
<213> UGT84A2启动子引物P2
<400> 2
cgggatccgg atggtagaag agaagaaat 29
Claims (4)
1.拟南芥糖基转移酶蛋白UGT84A2或其编码基因在调控拟南芥的开花起始时间、开花时莲座叶数和/或营养生长阶段的叶柄长度中的应用;
其中,拟南芥糖基转移酶蛋白UGT84A2的编码基因是如下1)或2)中的DNA分子:
1)编码序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的DNA分子;
2)序列表中SEQ ID NO:1所示的DNA分子。
2.一种培育转基因植物的方法,其特征在于,包括向受体植物中导入拟南芥糖基转移酶UGT84A2的编码基因得到转基因植物的步骤,筛选的转基因植物品种具有如下农艺性状:开花起始时间延迟、开花时莲座叶数增加和/或营养生长阶段的叶柄变长;
其中,受体植物为拟南芥;
拟南芥糖基转移酶蛋白UGT84A2的编码基因是如下1)或2)中的DNA分子:
1)编码序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的DNA分子;
2)序列表中SEQ ID NO:1所示的DNA分子。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,拟南芥糖基转移酶UGT84A2的编码基因是通过含有编码基因的重组表达载体导入所述受体植物中的。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,重组表达载体中启动编码基因转录的启动子为35S启动子。
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