CN107349214A - 一种药物组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及生物医药领域，特别涉及一种药物组合物及其应用。本发明提供的药物组合物是将柚皮苷(Naringin)和阿托伐他汀(Atorvastatin)联合使用。经试验测定本发明提供的药物组合物及含有该药物组合物的药物可明显抑制前列腺癌细胞生长，具有较佳的抗肿瘤功效。本发明提供的两药联合中，使用量少，价格低，在降低患者经济压力的同时，减少副作用。

Description

一种药物组合物及其应用
技术领域
本发明涉及生物医药领域，特别涉及一种药物组合物及其应用。
背景技术
目前，全球癌症负担不断加重,未来20年每年新发癌症病例将达到2200万，同期癌症死亡数将上升到1300万例。受人口增长和老龄化影响，发展中国家的癌症数量不断攀升，全球60％的病例发生在非洲、亚洲和中美洲及南美洲地区，并且占全世界癌症死亡数的70％。2014年，世界卫生组织(WHO)报告预测癌症病例由2012年的1400万人逐渐递增至2025年的1900万，到2035年，将有可能达到2400万人。在我国，卫生部不久前召开的肿瘤防治宣传通报会上，来自卫生部、医学科学院的专家披露：目前我国年均癌症发病人数约180万-200万，死亡人数约150万，如不加强环境保护和防控,今后20年内，我国癌症患病和死亡人数将翻一番。
前列腺癌是男性患癌风险较高的癌症之一，2008年全球前列腺癌标化发病率28.5/10万，标化死亡率为7.5/10万，居男性常见肿瘤第二位，1998—2008年我国前列腺癌粗发病率为2.98/10万—7.69/10万；1998—2008年我国前列腺癌病死率为0.7/10万—4.9/10万。
未经治疗的前列腺癌为雄激素依赖性，通过内分泌治疗或去势治疗阻断雄激素促使雄激素依赖性癌细胞凋亡，从而达到治疗目的，药物治疗目前是控制前列腺癌的主要治疗手段，在治疗期间大部分患者出现副作用，且受到副作用的折磨，给患者的身体和心理带来极大的痛苦，不仅如此，药物治疗需要较高的费用，大部分患者难以承担，给患者家庭带来伤害。目前采用的联合用药抗前列腺癌的药物如多西紫杉醇、吉西他滨等具有很强的副作用，且价格昂贵。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种药物组合物及其应用。本发明旨在提供具有较好的抗癌的效果，特别是前列腺癌，低毒、低副作用的联合药物，且价格较低，能够被广大患者接受。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种药物组合物，包含他汀类药物和双氢黄酮类化合物。
在本发明的一些具体实施方案中，所述他汀类药物和双氢黄酮类化合物的摩尔比为(1～15)：(1～100)。
在本发明的一些具体实施方案中，所述他汀类药物和双氢黄酮类化合物的摩尔比为(1～2)：(2.5～5)。
在本发明的一些具体实施方案中，所述他汀类药物和双氢黄酮类化合物的摩尔比为2：5。
在本发明的一些具体实施方案中，所述他汀类药物的使用浓度为1μM～2μM；所述双氢黄酮类化合物的使用浓度为2.5μM～5μM。
在本发明的一些具体实施方案中，所述他汀类药物选自阿托伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀或罗伐他汀。
在本发明的一些具体实施方案中，所述双氢黄酮类化合物为柚皮苷。
本发明还提供了所述的药物组合物在制备治疗癌症的药物中的应用。
在本发明的一些具体实施方案中，所述癌症为前列腺癌。
在本发明的一些具体实施方案中，所述前列腺癌细胞为PC-3细胞和LNcap细胞。
本发明还提供了一种药物，包括所述的药物组合物。本发明对药物的剂型不作限定，凡是药物领域接受的剂型均在本发明的保护范围之内。
本发明提供的药物组合物是将柚皮苷(Naringin)和阿托伐他汀(Atorvastatin)联合使用，其联合使用的药效大于单独药效，对前列腺癌及前列腺癌的发展具有明显的抑制效果。本发明提供的药物组合物中，阿托伐他汀是临床降脂药，柚皮苷是天然产物。旨在一方面通过与天然产物的联合增加抗前列腺癌的效果，同时减少降脂药的使用量；另一方面引入另一种物质为天然产物，毒性低，副作用小。本发明提供的药物组合物的给药量低，大大降低药物副作用。此外，本发明提供的抗癌药物与现有抗癌药物相比价格相对较低，极大的降低了患者的经济压力。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1示采用MTT实验测定药物对前列腺癌细胞的存活率；
图2示采用CCK-8实验测定药物对前列腺癌细胞的存活率；
图3示采用CCK-8试剂检测两药联合及相应单药对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用；其中，由左至右依次为5μM柚皮苷(Naringin)组、1μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组、2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组、5μM柚皮苷(Naringin)+1μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组和5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组；
图4示采用CCK-8试剂检测两药联合及相应单药对前列腺癌LNcap细胞的抑制作用；其中，由左至右依次为2.5μM柚皮苷(Naringin)组、5μM柚皮苷(Naringin)组、2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组、2.5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组和5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组；
图5示台盼蓝实验检测两药联合及相应单药对前列腺癌PC-3细胞的作用；其中，由左至右依次为5μM柚皮苷(Naringin)组、1μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组、2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组、5μM柚皮苷(Naringin)+1μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组和5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组；
图6示盼蓝实验检测两药联合及相应单药对前列腺癌LNcap细胞的作用；其中，由左至右依次为2.5μM柚皮苷(Naringin)组、5μM柚皮苷(Naringin)组、2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组、2.5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组和5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)组。
具体实施方式
本发明公开了一种药物组合物及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明提供的药物组合物中，阿托伐他汀是临床降脂药，柚皮苷是天然产物。旨在一方面通过与天然产物的联合增加抗前列腺癌的效果，同时减少降脂药的使用量；另一方面引入另一种物质为天然产物，毒性低，副作用小。
本发明提供了一种组合物，此组合物包含他汀类药物和双氢黄酮类化合物。
优选地，所述他汀类药物选自：阿托伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀和罗伐他汀中的任意一种。
优选地，以摩尔比计，组合物包括他汀类药物1～15份，双氢黄酮类化合物1～100份。
优选地，以摩尔比计，组合物包括他汀类药物2份，双氢黄酮类化合物5份。
本方案提供的组合物是通过两个化合物摩尔比例组合实现的，他汀类药物、双氢黄酮类化合物的摩尔比为2:5，他汀类药物为阿托伐他汀，双氢黄酮类化合物为柚皮苷。
上述天然产物为柚皮苷(Naringin)，结构如式Ⅱ所示，又名柑橘甙，是一种黄酮苷。临床降脂药为阿托伐他汀(Atorvastatin)，结构如式Ⅰ所示，又名立普妥(Lipitor)。柚皮苷相对分子质量：阿托伐他汀相对分子质量＝580.53：1155.34。
1.本发明提供的方案是将柚皮苷(Naringin)和阿托伐他汀(Atorvastatin)联合使用，其联合使用的药效大于单独药效，对前列腺癌及前列腺癌的发展具有明显的抑制效果。
2.本发明提供的技术方案给药量低，大大降低药物副作用。
3.本方案提供的抗癌技术方案价格相对较低，极大的降低了患者的经济压力。
4.本发明提供的技术方案含有柚皮苷—黄酮类化合物。
经试验测定本发明提供的技术方案可明显抑制前列腺癌细胞生长，具有较佳的抗肿瘤功效，本技术方案提供的两药联合中，使用量少，价格低，在降低患者经济压力的同时，减少副作用。
本发明提供的药物组合物及其应用中所用原料及试剂均可由市场购得。
以下实施案例中，抑制率+存活率＝1。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1
本实施例将采用MTT实验测定药物对前列腺癌细胞的存活率。单独使用阿托伐他汀(Atorvastatin)和柚皮苷(Naringin)作用于前列腺癌PC-3细胞和LNcap细胞，使用MTT方法检测药物对前列腺细胞的抑制作用。
方法如下：
前列腺癌PC-3细胞和LNcap细胞以密度为1.5×104cells/ml接200μL于96孔板中，放置于37℃、5％的培养箱中培养24h，然后将不同浓度的阿托伐他汀(Atorvastatin)和柚皮苷(Naringin)处理48h，加入200μL0.5mg/ml的MTT放入培养箱孵育2h，倒出MTT后再加入100μLDMSO孵育10min，在560nm波长下测定吸光值。
阿托伐他汀(Atorvastatin)对PC-3细胞使用的浓度为0μM、2μM、4μM、8μM、10μM、20μM。
阿托伐他汀(Atorvastatin)对LNcap细胞使用的浓度0μM、2μM、4μM、8μM、10μM、20μM、25μM。
柚皮苷(Naringin)对PC-3细胞使用的浓度为0μM、10μM、40μM、90μM、120μM、250μM。
柚皮苷(Naringin)对LNcap细胞使用的浓度为0μM、10μM、40μM、50μM、120μM、150μM、200μM。
结果见表1～表4、图1。
表1MTT单药
表2MTT单药
表3MTT单药
表4MTT单药
实施例2
本实施例将采用CCK-8实验测定药物对前列腺癌细胞的存活率。单独使用阿托伐他汀(Atorvastatin)和柚皮苷(Naringin)作用于前列腺癌PC-3细胞和LNcap细胞，使用CCK-8试剂检测药物对前列腺细胞的抑制作用。
方法如下：
前列腺癌PC-3细胞和LNcap细胞以密度为,1.5×104cells/ml接200μL于96孔板中，放置于37℃、5％的培养箱中培养24h，然后将不同浓度的阿托伐他汀(Atorvastatin)和柚皮苷(Naringin)处理48h，将无血清基础培养基与CCK-8试剂按照10:1混合，每孔加入100μL的已稀释的CCK-8，放入培养箱孵育1h，在450nm的波长测定其吸光度。
阿托伐他汀(Atorvastatin)对PC-3细胞使用的浓度为0μM、1μM、2μM、4μM、10μM、20μM。
阿托伐他汀(Atorvastatin)对LNcap细胞使用的浓度为0μM、2μM、4μM、8μM、10μM、20μM、25μM。
柚皮苷(Naringin)对PC-3细胞使用的浓度为0μM、10μM、40μM、90μM、120μM、250μM。
柚皮苷(Naringin)对LNcap细胞使用的浓度为0μM、10μM、40μM、50μM、120μM、150μM、200μM。
结果见表5～表10、图2、图3～图4。
表5
表6
表7
表8
表9
注：根据软件分析，表格有数据列开始依次标号a、b、c、d、e。a与d相比较，###P<0.001；c与d相比较，#P<0.05；b与e相比较，***P<0.001；c与e相比较，***P<0.001。d与e两联合组无显著性差异。
表10
注：根据软件分析，表格有数据列开始依次标号a、b、c、d、e。a与d相比较，###P<0.001；b与d相比较，###P<0.001；a与e相比较，***P<0.001；c与e相比较，***P<0.001。d与e两联合组无显著性差异。
表5～表8、图2与实施例1中的两单药对前列腺癌细胞作用的趋势是相符合的。
表10、图3为使用CCK-8试剂检测两药联合及相应单药对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。联合的组合为5μM柚皮苷(Naringin)+1μM阿托伐他汀(Atorvastatin)和5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)。在图3中，5μM柚皮苷(Naringin)+1μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率极显著(P＜0.01)大于两单药抑制率，5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率极显著(P＜0.01)大于两单药的抑制率，5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率大于5μM柚皮苷(Naringin)+1μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率。
表9、图4为使用CCK-8试剂检测两药联合及相应单药对前列腺癌LNcap细胞的抑制作用。联合的组合为2.5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)和5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)。
在图4中，2.5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率极显著(P＜0.01)大于两单药的抑制率，5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率极显著(P＜0.01)大于两单药对LNcap的抑制率，5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率大于2.5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率。
实施例3
本实施例将采用台盼蓝实验测定联合用药对前列腺癌细胞的抑制作用。
方法如下：
将前列腺癌细胞以1.5×104cells/ml的密度接2ml种于35mm培养皿，培养24小时。然后用不同浓度组合的阿托伐他汀和柚皮苷处理48小时。处理48小时之后，收集细胞，用台盼蓝染液染色，在倒置显微镜下计台盼蓝不染色的细胞数，并计算存活率。
结果见表11～表12、图5～图6。
表11
注：根据软件分析，表格有数据列开始依次标号a、b、c、d、e。a与d相比较，###P<0.001；c与d相比较，###P<0.001；b与e相比较，***P<0.001；c与e相比较，***P<0.001。d与e两联合组无显著性差异。
表12
注：根据软件分析，表格有数据列开始依次标号a、b、c、d、e。a与d相比较，###P<0.001；b与d相比较，###P<0.001；a与e相比较，***P<0.001；c与e相比较，***P<0.001。d与e两联合组无显著性差异。
表12、图5为台盼蓝实验检测两药联合及相应单药对前列腺癌PC-3细胞的作用。
联合的组合为5μM柚皮苷(Naringin)+1μM阿托伐他汀(Atorvastatin)和5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)。
图5中，5μM柚皮苷(Naringin)+1μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率极显著(P＜0.01)大于两单药抑制率，5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率极显著(P＜0.01)大于两单药的抑制率，5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率大于5μM柚皮苷(Naringin)+1μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率。
表11、图6台盼蓝实验检测两药联合及相应单药对前列腺癌LNcap细胞的作用。
联合的组合为2.5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)和5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)。
图6中，2.5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率极显著(P＜0.01)大于两单药抑制率，5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率极显著(P＜0.01)大于两单药的抑制率，5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率大于2.5μM柚皮苷(Naringin)+2μM阿托伐他汀(Atorvastatin)联合抑制率。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种药物组合物，其特征在于，包含他汀类药物和双氢黄酮类化合物。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述他汀类药物和双氢黄酮类化合物的摩尔比为(1～15)：(1～100)。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，所述他汀类药物和双氢黄酮类化合物的摩尔比为(1～2)：(2.5～5)。
4.根据权利要求1至3任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述他汀类药物和双氢黄酮类化合物的摩尔比为2：5。
5.根据权利要求1至4任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述他汀类药物的使用浓度为1μM～2μM；所述双氢黄酮类化合物的使用浓度为2.5μM～5μM。
6.根据权利要求1至5任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述他汀类药物选自阿托伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀或罗伐他汀。
7.根据权利要求1至6任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述双氢黄酮类化合物为柚皮苷。
8.根据权利要求1至7任一项所述的药物组合物在制备治疗癌症的药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述癌症为前列腺癌。
10.一种药物，其特征在于，包括如权利要求1至7任一项所述的药物组合物。
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